Ov ěřování ú činku vakcinace Ověřování účinku p ři ozdravov ání chov ů prasat při ozdravování chovů od PRRS MVDr. Ivan Pšikal, CSc.
Charakteristika viru PRRS RNA virus specifický pro daný druh hostitele =>
infikuje pouze prasata; PRRS není zoonóza, nemá žádný vliv na onemocnění ostatních druhů hospodářských zvířat => nejsou rezervoárem viru; Mimo prase virus přežívá až 6 dní při teplotě 20°C
a 1 měsíc při 4°C, více m ěsíců při -20°C; Slabá rezistence k desinfekci;
Genetick á diverzita PRRSV Genetická Různá klinická prezentace nemoci; Experimentálně potvrzené rozdíly v biologických
vlastnostech PRRSV: pneumovirulentní nebo reprodukčně virulentní; Antigenní rozdíly podle reakce s polyklonálními
a monoklonálními protilátkami; Rozdíly v sekvencích RNA => genoskupiny;
02 20 a hLit
06 20 l Be 4o Sn
1 VD-A
C Z(V - 50 3)
2 11 -9 D K1
05 7 -2 0 H u1
100
er sb
01 el20 2 0-B 00 AV3 R2 1 E GE gD-
n Ar
100
95 92
V
92
06
III.
Por 4 67-D cilis K20 0 F-1 995 1 2 H2-UK200
98 19 an
L1-7
-2 00 u1 4
aiw -T 01 -0
l20
4 00 d2 an
9Be
MD
6 00 l2 06 Be l2 0 1Be bu d1O Za
00 4
VO S4
91 -e xp IAF 04 h ina 20 FJ 1- C F5 ) 32 (OR 3 2 R V R es p PRR S VR 23 8 5 NT 6- T a iw Pr a n2 im 006 e pa G c u9 92 m -J ap 20 05
il ha
Be Soz l4 2 6- B - 20 el2 06 006
05 20 8Hu
8 -2 H u1
96 -1 9 SP 2 ol2 00 Le k- P AMERVAC Py r s va c
0.05
T 6UD O1
LV (ORF5)
H
HEB1 -C hin a2 006 H B1( sh )/ 20 02 HB 2 ( sh JK )/ 2 J2 00 62 Ko re a H 03 U2 120 06
20 06
Okt 35-Bel2006
VDA1/VR2332: 89,6% VDA1/LV: 60,4% VDA1/JX: 92,3%
VD-E2
I.
95 It- 19
Bor 54 -Bel2 00
6
VD-E1/LV: 97,5% VD-E2/LV: 90,5%
NA(type II),GP5
II.
Lit h- b -
IV.
Sid- Lit h- a- 20 Sid 06 - Li t hb- 2 00 2
EU(type I), GP5
Modulace imunity Prezentace antigenů: “Down-regulates“ expresi (MHC)-I v dendritických buňkách a modifikuje produkci cytokinů;
Interferony: Inhibice sekrece IFN-α (narušení vývoje Th1 imunitní odpovědi);
Cytokiny: Silná indukce IL-10 v PBMC => snižuje frekvenci buněk sekretujících IFN-gama;
Humorální imunita: Opožděný vývoj VNT protilátek (mutace, glykosylace);
PRRSV/Ag a RNA v plicích, M.U. PRRSV v semeni Masivní apoptóza Vylučování PRRSV/kontaktní infekce virémie
IFNγ ELISA/IPMA-PL VNPL
Inf . P RR SV ve tká níc h
1m
2m
4m
1r
Odběr směsných vzorků orální tekutiny k virologickému vyšetření
Prickett JR, Kim W, Simer R, et al. J Swine Health Prod. 2008;16(2):86–91.
Průkaz PRRSV v orální tekutině prasat
Dal ší viry prasat Další PCV2a (%)
PCV2b (%)
g1-TTV (%)
g2-TTV (%)
pBo-likeV (%)
g1-TTV/g1-TTV/ pBo-likeV (%)
PMWS +
6
100
77
94
88
71
PMWS -
12
50
79
83
46
33
Prasečí bokavirus parvovirus skotu (bovine parvovirus) a canine minute virus (CMV).
Pro č eliminovat PRRSV z chov ů Proč chovů Důvod ekonomický (v USA 560 milionů $ ročně) Pozitivní dopad na snížení rizika přenosu dalších infekčních onemocnění Actinobacillus pleuropneumoniae Mycoplasma hyopneumoniae Prasečí cirkovirus typu 2 Streptokoky, Stafylokoky
Snižování spotřeby antibiotik
Rizikov é faktory pro vznik a ší ření infekc Rizikové šíření infekcíí PRRSV Vnější - rizika zavlečení infekce PRRSV do chovu
z vnějšího zdroje:
Přísun prasat Transport zvířat Vzduch * Lidé Sperma (< 2x 102 TKID50 = 0) a injekční aplikace (i.m. = 102,2 TKID50 = 100% !!!) Pasivní vektory: hmyz, ptáci, hlodavci / škůdci * Hnůj (kejda)
Rizikov é faktory pro vznik a ší ření infekc Rizikové šíření infekcíí PRRSV Vnitřní – rizika šíření PRRSV v chovu - udržování
endemické infekce PRRSV: Systém a uspořádání chovu / konstrukce stájí, zamezení kontaktních inf. (ID50 i.n. = 103 až 105 ; ID50 p.o. = 104,6 – 105,9) Hygienické podmínky chovu Lidé Přítomnost několika kategorií prasat ** Velikost farmy Vakcinace
Rizikový faktor-vakcinace proti PRRS Živé, oslabené (MLV): indukují imunitní odezvu, která může ochránit prasata před PRRSV infekcí , ale pouze když cirkulující virus není příliš vzdálen od vakcinačního kmene Ref. 11 ; některé oslabené vakcinační kmeny živých vakcín : působí virémii a mohou být šířeny horizontálně i transplacentálně Ref.2 ; mohou snižovat kvalitu semene a mohou být semenem vylučovány Ref. 47 ; mohou reverzí získat zpět virulentní faktory Ref.18; Inaktivované, umrtvené vakcíny (KV): jsou bezpečné a experimentální imunizace inaktiv. PRRSV indukuje VN protilátky Ref. 16 ; komerční KV neindukují VN protilátky a nedostatečně nebo jen částečně ochraňují prasata proti virémii po čelenžní infekci Ref.68 ;
Vnější RF VYSOKÝ
Vnitřní RF VYSOKÝ
Vnitřní RF NÍZKÝ
Cíl: Stabilizace; Krátkodobý výhled dosažení: NÍZKÝ
Cíl: Stabilizace; Krátkodobý výhled dosažení: STŘEDNÍ až VYSOKÝ Dlouhodobý výhled dosažení: NÍZKÝ
Dlouhodobý výhled dosažení: NÍZKÝ
Vnější RF NÍZKÝ
Cíl: Stabilizace nebo eradikace; Krátkodobý výhled dosažení: STŘEDNÍ až VYSOKÝ Dlouhodobý výhled dosažení: NÍZKÝ
Cíl: Eradikace; Krátkodobý výhled dosažení: VYSOKÝ Dlouhodobý výhled dosažení: VYSOKÝ
Související literatura 1. Metoda testace a eliminace (ISK): (koordiance postupů - Chovservis, SCHPČM….);
3. Metoda depopulace / repopulace (dotace na dochov selat - SCHPČM )
3. Metoda produkce PRRS negativních selat od sérologicky pozitivních prasnic (NCH): (Ověřování ve 2 NCH – Chovservis ;
Strategie k p řerušení cirkulace viru PRRS přerušení v nukleov ém chovu nukleovém Stabilizace imunity prasnic (vakcinace); Uzavřený systém chovu a přerušení přísunu prasniček do základního stáda minimálně po dobu 120 až160 dnů; Přísně dodržovaný jednosměrný pohyb prasat bez přerušení produkce; Virolog. a sérolog. testování;
Profil IgGprotilátek proti PRRSV - fa. V před vakcinací SuivacPRRSINe.
PRRSIgG ELISA (S/ P)
2,500 2,000 1,500 1,000 1,367 0,500
1,806
1,635 0,968 0,288
0,121
0,094
4T
8T
12T
0,000 kanci
prasničky prasnice
věková kategorie (týdny)
20T
Profil IgGprotilátek proti PRRSV - fa. V po vakvinaci Suivac PRRSINe. 1,600
PRRSIgG ELISA (S/ P)
1,400 1,200 1,000 0,800 0,600
1,091
1,234
0,400 0,200
0,105
0,241
0,165
0,188
8T
12T
20T
0,000 prasničky
prasnice
4T
věková kategorie (týdny)
Profil IgGprotilátek proti PRRSV-fa. D 1,000 0,900
PRRSIgG ELISA (S/ P)
0,800 0,700 0,600 0,500 0,400 0,300 0,200
0,507
0,100
0,084
0,058
0,117
0,125
8T
12T
16T
P+K24T
0,000 4T
věková kategorie (týdny)
Rozsah homologie nt mezi 35 PRRSV kmeny, identifikovanými v České Republice v létech 1995 – 2010. 12
10
Porcilis
6
Amervac
VR2332
Suivac/E2
8
4
EU
US
Suivac/A1
Number of PRRSV strains
Suivac/E1
2
0 56 57 58 59 60 70 80 85 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100
% homology with LV strain
Inovace inaktivované vakcíny proti PRRS Multivalence: vakcinační antigeny širokého spektra dominantních a imunogenních variant viru PRRS kombinace EUa x EUb, EU x US;
Indukce VNT protilátek: šetrný způsob inaktivace k uchování antigenních domén viru PRRS , které se připojují k membránám permisivních buněk a umožňují internalizaci virových antigenů; rozšířit metody pro kontrolu kvality (QCA) vakcín;
Van Gorp H., a kol., J.Gen.Virol. (2008) 89: 2943-2953
1,400
ELISA IgG(Index S/P)
1,200 1,000 0,800 0,600 0,400 0,200 0,000
Suivac PRRS InE 3K Slepá kontrola
4
Suivac PRRS InE 3K
VNT (log 2)
3
2
1
0
Slepá kontrola