LAMPIRAN
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 1. Alat dan Bahan Penelitian
Mesin Thermal Cycler
Centrifuge
Mini Horizontal Elektroforesis
UV Transluminator
Micropipette
Microtips
Vortex
Hot Plate
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 1. Alat dan Bahan Penelitian (Lanjutan)
Inkubator
Cuvette
Komputer
Timbangan
Sample Freezer
Reagent Freezer
Chiller
Gunting Bedah
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 1. Alat dan Bahan Penelitian (Lanjutan)
Kolam Terpal
Akuarium
Water Quality Checker
Seser
Timer
Hand Counter
Waterpass dan Gel Tray
Erlenmeyer
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 1. Alat dan Bahan Penelitian (Lanjutan)
Alat Tulis
Parafilm
Tubes rack
Tisu
Genom
Alkohol
Kit Ekstraksi DNA
Sodium Hipoklorit
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 1. Alat dan Bahan Penelitian (Lanjutan)
GelRed Nucleic Acid Strain
Marker
Loading Dye
Agarose
Larva Ikan
Pelet
Tubifex
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 1. Kegiatan Penelitian Ekstraksi DNA
Collecting Sample
Penggerusan Sampel
Pencampuran Kit Ekstraksi
Mixing dengan Vortex
Pencampuran Kit Ekstraksi DNA
Inkubasi Sample
Mixing dengan Vortex
Proses Centrifuge Sampel
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 1. Lanjutan
Pembuangan Endapan (Supernatan)
Penggantian Collection Tube
Amplifikasi PCR (Polymerase Chain Reaction)
Genom Hasil Ekstraksi
Susunan Genom dalam Tubes rack
Penyusunan Tube dalam Chamber
Proses PCR Berjalan
Elektroforesis
Pembagian Loading Dye
Pencampuran Kit dengan Amplikon
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 1. Lanjutan
Pemasukan Amplikon dalam Sumur
Pengaturan Suhu dan Voltase
Performa Pertumbuhan
Panen Larva
Perhitungan Larva
Pemberian Pakan Larva
Penyiponan Air
Pengamatan Ikan dengan Mikroskop
Pengukuran Bobot Larva
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 1. Lanjutan
Panen benih
Perhitungan Jumlah Benih
Pengecekan Kualitas Air dengan WQC
Pengecekan Parasit pada Air
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Metode Fenat Spektrofotometri (SNI 66-6989.30-2005) INSTRUKSI KERJA PENGUJIAN AMONIA METODE FENAT SPEKTROFOTOMETRI 1. Acuan : SNI 06-6989-30-2005, Air dan Air Limbah-Bagian 30: Cara Uji Kadar Amonia (NH3 -N) dengan Spektrofotometer Secara Fenat. 2. Persiapan Pengujian 2.1 Pembuatan larutan induk Amonia NH 3-N 1000 mg/l Larutkan 3,819 grm amonium klorida (NH 4 Cl) yang telah dikeringkan pada suhu 100°C selama 2 jam dengan 100 ml air suling dalam labu ukur 1000 ml Tambahkan air suling sampai tepat tanda tera. 2.2 Pembuatan larutan induk Amonia 100 mg/l Pipet 10 ml larutan standar amonium 1000 ppm ke dalam labu ukur 100 ml Tambahkan air suling sampai tepat tanda tera dan homogenkan. 2.3 Pembuatan larutan induk Amonia 10 mg/l Pipet 10 ml larutan baku amonium 100 mg/l dan masukkan ke dalam labu ukur 100 ml Tambahkan air suling sampai tepat tanda tera dan homogenkan. 2.4 Pembuatan larutan deret standar: Konsentrasi standar NH3 Volume yang diambil dari Volume labu ukur (ppm) standar NH3 10 ppm (ml) (ml) 0.0 0 100 0.1 1.0 100 0.2 2.0 100 0.3 3.0 100 0.5 5.0 100 3. Prosedur Pengujian : 3.1 Pereaksi : Larutan fenol, larutan natrium nitroprusid, dan larutan oksidan Pembuatan larutan pereaksi a. Larutan Phenol-alkohol Larutan 10 grm phenol dalam 100 ml alkohol 95% sampai tepat pada tanda tera. Larutan ini stabil selama 1 minggu. b. Larutan Natrium Nitropruside 0,5% Larutkan 0,5 grm natrium notropruside dalam 100 ml aquades sampai tepat pada tanda tera. Simpan dalam botol gelap. Larutan ini stabil selama 1 bulan.
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Lanjutan c. Larutan Oksidan Campurkan 100 ml larutan natrium sitrat dan 25 ml larutan hipoklorit. Dibuat pada saat akan digunakan. Larutan Natrium sitrat Larutkan 20 grm natrium sitrat dan 1 grm NaOH dalam 100 ml aquades sampai tepat pada tanda tera. 3.2 Deret Standar a. Pipet 25 ml standar amonia dengan menggunakan pipet volumetrik, masukkan ke dalam erlenmeyer b. Tambahkan 1 ml larutan fenol, 1 ml larutan dinatrium nitroprusid dihidrat kemudian kocok, dan tambahkan 2,5 ml larutan oksidan, lalu tutup erlenmeyer dan simpan diruang gelap pada temperatur 22 °C – 27 °C selama 1 jam; warna larutan akan stabil selama 24 jam. c. Masukkan ke dalam kuvet pada alat spektrofotometer dan ukur pada panjang gelombang 640 nm 3.3 Sampel a. Ukur 25 ml benda uji dan masukkan ke dalam tabung reaksi b. Tambahkan 1 ml larutan fenol, 1 ml larutan natrium nitroprusid, dan 2,5 ml larutan oksidan, kocok dan biarkan proses reaksi berlangsung selama 1 jam c. Masukkan ke dalam kuvet pada alat spektrofotometer pada panjang gelombang 640 nm, baca dan catat serapannya.
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Metode Sulfalinamid Spektrofotometri (SNI 06-6989.9-2004) INSTRUKSI KERJA PENGUJIAN NITRIT METODE SULFILAMID SPEKTROFOTOMETRI 1. Acuan : SNI 06-6989-9-2004: Air dan Air Limbah-Bagian 9: Cara Uji Nitrit (NO2-N) Secara Spektrofotometri. 2. Pembuatn Deret Standar NO2 2.1 Standar N-NO2 250 mg/l (1.232 grm NaNO2 / 1 liter akuades), awetkan dengan 1 ml CHCl3 2.2 Standar N-NO 3 50 mg/l (20 ml standar NO2 250 mg/l / 100 ml akuades) 2.3 Standar N-NO 2 0,5 mg/l (2,5 ml standar NO2 50 mg/l / 250 ml akuades) Konsentrasi standar NO2 Volume yang diambil Volume labu ukur (ppm) dari standar 0,5 ppm (ml) (ml) 0.00 0 50 0.01 1.0 50 0.02 5.0 50 0.10 10.0 50 0.15 15.0 50 3. Prosedur Pengujian : 3.1 Pereaksi Sulfanilamid : 5 grm sulfanilamid dalam 300 ml akuades, tambahkan 50 ml HCL pekat/500ml akuades. NED : 0,5 grmm NED dalam 500 ml akuades, simpan dalam botol gelap dalam refrigerator. Ganti setiap bulan (maksimal penyimpanan 1 bulan) atau bila berwarna coklat. Larutan natrium oksalat Na2C2O4 0,05 N : Larutkan 3,350 grm Na2C2O4 dalam air suling dan tepatkan sampai 1000 ml. Larutan KMnO4 0,05 N : 1,69 grm KMnO4/1 liter akuades, diamkan ± 1 minggu kemudian saring dengan gelas wool, simpan dalam botol coklat/gelap. Larutan FAS 0,05 N : 19,607 grm Fe(NH 4) 2SO46H2O tambahkan 20 ml H2SO4 pekat/1 liter akuades bebas nitrit. 3.2 Deret Standar Pipet 50 ml standar NO2 (dengan pipet volumetrik) Tambahkan 1 ml sulfanilamid, kocok berkali-kali selama 2-8 menit Tambahkan 1 ml NED lalu kocok dan diamkan ± 10 menit Ukur absorban pada panjang gelombang 543 nm, lakukan segera, maksimum 2 jam
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Lanjutan 3.3 Sampel Ambil 50 ml sampel, masukkan ke dalam tabung rekasi/erlenmeyer Tambahkan 1 ml sulfanilamid, kocok dan diamkan ± 10 menit Ukur absorban pada panjang gelombang 543 nm, lakukan segera, maksimum 2 jam
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4. F-Test Two-Sample for Variances dan t-Test Laju Pertumbuhan Bobot F-Test Two-Sample for Variances
Mean Variance Observations df SF P(F<=f) one-tail F Critical one-tail
transgenik 1,775982 8,263336 120 119 3,039455 1,76E-09 1,35361
non-transgenik 0,968065 2,718689752 120 119
t-Test: Two-Sample Assuming Unequal Variances
Mean Variance Observations Hypothesized Mean Difference df t Stat P(T<=t) one-tail t Critical one-tail P(T<=t) two-tail t Critical two-tail Nb: (p<0,05)
transgenik 1,775982 8,263336 120
non-transgenik 0,968065 2,71869 120
0 190 2,670644 0,004113 1,652913 0,008227 1,972528
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. F-Test Two-Sample for Variances dan t-Test Rasio Konversi Pakan F-Test Two-Sample for Variances
Mean Variance Observations df F P(F<=f) one-tail F Critical one-tail
transgenik 0,689824 0,00569 2 1 0,45535 0,377904 0,006194
non-transgenik 1,41565 0,012497 2 1
t-Test: Two-Sample Assuming Unequal Variances
Mean Variance Observations Hypothesized Mean Difference df t Stat P(T<=t) one-tail t Critical one-tail P(T<=t) two-tail t Critical two-tail Nb: (p<0,05)
transgenik 0,689824 0,00569 2
non-transgenik 1,41565 0,012497 2
0 2 -7,61141 0,008413 2,919986 0,016827 4,302653
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Data Pengamatan Botot Ikan Lele (C. gariepinus) Transgenik Selama Masa Pemeliharaan Lele Transgenik F3 Lele Non-transgenik Bobot (g) Bobot (g) h0 h10 h20 h35 h50 h0 h10 h20 h35 h50 0,0074 0,1010 0,3038 1,2646 10,2991 0,0020 0,0613 0,0582 0,7800 5,7632 0,0087 0,0652 0,1132 0,4838 7,3967 0,0022 0,0340 0,0859 0,6154 4,6510 0,0089 0,0995 0,2814 1,0789 8,3366 0,0025 0,0292 0,0690 0,4540 3,7980 0,0039 0,1094 0,2169 2,0041 9,2459 0,0016 0,0294 0,0921 0,8755 4,4138 0,0032 0,0837 0,2092 1,7766 7,9195 0,0021 0,0423 0,0553 0,7395 6,0045 0,0041 0,1279 0,2463 1,3572 7,1033 0,0018 0,0606 0,0967 0,6104 4,8407 0,0038 0,0553 0,2066 1,8909 4,7133 0,0016 0,0395 0,0438 0,7908 4,3727 0,0025 0,0713 0,1795 1,2810 5,7977 0,0020 0,0328 0,1247 1,2333 3,4441 0,0029 0,0572 0,2776 1,5625 5,6756 0,0020 0,0516 0,0892 0,9234 4,0414 0,0030 0,0859 0,1633 1,0785 6,1128 0,0019 0,0415 0,1487 0,4005 3,9834 0,0045 0,0413 0,2422 1,3205 5,6385 0,0026 0,0223 0,0672 0,4712 3,1558 0,0041 0,0463 0,1923 1,2700 6,0245 0,0027 0,0325 0,0500 0,4658 3,5927 0,0028 0,1067 0,2153 2,3341 11,6894 0,0026 0,0225 0,1193 0,7272 3,9750 0,0035 0,1052 0,2239 0,7064 7,8240 0,0023 0,0289 0,0688 0,7236 3,4237 0,0029 0,0901 0,2068 1,3997 8,6350 0,0024 0,0344 0,0601 0,4049 4,7635 0,0029 0,0554 0,2528 1,0220 7,1004 0,0026 0,0424 0,0862 0,6159 5,9204 0,0031 0,0906 0,1490 2,5971 7,9608 0,0028 0,0611 0,0549 0,5329 3,1297 0,0031 0,0555 0,1469 0,9931 6,9040 0,0024 0,0290 0,0972 0,4604 2,7424 0,0033 0,0515 0,1628 1,0842 7,1216 0,0017 0,0395 0,0496 0,3523 4,1127 0,0024 0,0502 0,2100 1,2886 6,7816 0,0020 0,0320 0,0899 0,3548 3,5638 0,0027 0,0637 0,1651 1,2227 7,2998 0,0022 0,0518 0,0441 0,3090 3,5495 0,0028 0,0398 0,1748 1,1782 6,2645 0,0025 0,0416 0,1478 0,2681 3,7266 0,0031 0,0421 0,2256 1,6115 5,9948 0,0016 0,0330 0,0711 0,5123 3,7616 0,0035 0,2179 0,1921 1,1678 5,3412 0,0021 0,0599 0,0894 0,4714 4,3781
Universitas Sumatera Utara
59
Lampiran 7. Hasil Pengukuran Kualitas Air Pengukuran: Senin, 16 Maret 2015 pagi Suhu pH DO (mg/L) Turbidity (NTV)
26,8 8,33 7,2 8
26,7 8,31 7,7 5
26,8 8,15 7,9 8
rata-rata 26,77 8,26 7,60 7,00
Pengukuran: 23 Maret 2015 pagi rata-rata 26,7 26,9 26,8 26,80 8,27 8,39 8,3 8,32 7,8 7,5 7,7 7,67 3 3 3 3,00
28,2 8 7,5 4
rata-rata 28,80 8,13 7,50 4,00
sore rata-rata 29,2 29,4 29,4 29,33 8,03 8,15 8,04 8,07 7,1 6,9 7,4 7,13 5 4 2 3,67
sore Suhu pH DO (mg/L) Turbidity (NTV)
29,7 8,2 7 3
28,5 8,18 8 5
Pengukuran: 30 Maret 2015 pagi rata-rata 26,5 26,8 26,5 26,60 8,29 8,27 8,2 8,25 7,7 7,5 7,2 7,47 5 5 8 6,00 sore 28,3 8,2 7,7 5
28,1 7,9 7,3 3
28,1 8,07 7,8 3
rata-rata 28,17 8,06 7,60 3,67
Universitas Sumatera Utara
59
Lampiran 7. Lanjutan Pengukuran: Senin, 7 April 2015 pagi Suhu pH DO (mg/L) Turbidity (NTV)
27,2 9,02 10,6 106
rata-rata 26,97 8,87 9,80 112,00
30,2 28,3 29,8 9,8 10,06 10,04 19 17,1 19,1 108 97 96
rata-rata 29,43 9,97 18,4 100,33
26,7 8,8 8,3 116
27 8,8 10,5 114
sore Suhu pH DO (mg/L) Turbidity (NTV)
Pengukuran: 14 April 2015 pagi rata-rata 29,5 29,8 29,6 29,63 8,53 8,6 8,78 8,64 7,47 8,47 9,57 8,50 66 82 72 73,33 sore 30 29,2 28,4 9,2 9,8 9,3 15,2 16,8 18,9 101 91 89
rata-rata 29,20 9,43 16,97 93,67
Pengukuran: 21 April 2015 pagi rata-rata 28,2 28,1 29,6 28,63 8,45 7,56 8,79 8,27 9,85 8,65 10,13 9,54 69 70 69 69,33 sore rata-rata 28,7 29,8 29,8 29,43 10,02 9,20 9,30 9,51 17,00 17,30 18,30 17,53 102,00 100,00 94,00 98,67
Universitas Sumatera Utara
Universitas Sumatera Utara
59
Lampiran 7. Hasil Pengukuran Kualitas Air Pengukuran: Senin, 16 Maret 2015 pagi Suhu pH DO (mg/L) Turbidity (NTV)
26,8 8,33 7,2 8
26,7 8,31 7,7 5
26,8 8,15 7,9 8
rata-rata 26,77 8,26 7,60 7,00
Pengukuran: 23 Maret 2015 pagi rata-rata 26,7 26,9 26,8 26,80 8,27 8,39 8,3 8,32 7,8 7,5 7,7 7,67 3 3 3 3,00
28,2 8 7,5 4
rata-rata 28,80 8,13 7,50 4,00
sore rata-rata 29,2 29,4 29,4 29,33 8,03 8,15 8,04 8,07 7,1 6,9 7,4 7,13 5 4 2 3,67
sore Suhu pH DO (mg/L) Turbidity (NTV)
29,7 8,2 7 3
28,5 8,18 8 5
Pengukuran: 30 Maret 2015 pagi rata-rata 26,5 26,8 26,5 26,60 8,29 8,27 8,2 8,25 7,7 7,5 7,2 7,47 5 5 8 6,00 sore 28,3 8,2 7,7 5
28,1 7,9 7,3 3
28,1 8,07 7,8 3
rata-rata 28,17 8,06 7,60 3,67
Universitas Sumatera Utara
59
Lampiran 7. Lanjutan Pengukuran: Senin, 7 April 2015 pagi Suhu pH DO (mg/L) Turbidity (NTV)
27,2 9,02 10,6 106
rata-rata 26,97 8,87 9,80 112,00
30,2 28,3 29,8 9,8 10,06 10,04 19 17,1 19,1 108 97 96
rata-rata 29,43 9,97 18,4 100,33
26,7 8,8 8,3 116
27 8,8 10,5 114
sore Suhu pH DO (mg/L) Turbidity (NTV)
Pengukuran: 14 April 2015 pagi rata-rata 29,5 29,8 29,6 29,63 8,53 8,6 8,78 8,64 7,47 8,47 9,57 8,50 66 82 72 73,33 sore 30 29,2 28,4 9,2 9,8 9,3 15,2 16,8 18,9 101 91 89
rata-rata 29,20 9,43 16,97 93,67
Pengukuran: 21 April 2015 pagi rata-rata 28,2 28,1 29,6 28,63 8,45 7,56 8,79 8,27 9,85 8,65 10,13 9,54 69 70 69 69,33 sore rata-rata 28,7 29,8 29,8 29,43 10,02 9,20 9,30 9,51 17,00 17,30 18,30 17,53 102,00 100,00 94,00 98,67
Universitas Sumatera Utara
BALAI PENELITIAN PEMULIAAN IKAN LABORATORIUM PENGUJI BADAN PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN KELAUTAN DAN PERIKANAN KEMENTERIAN KELAUTAN DAN PERIKANAN Jl. Raya 2 Sukamandi, Subang, Jawa Barat, 41263 Telp. (0260) 520500 Fax: (0260) 520662 Email:
[email protected]
LAPORAN HASIL UJI Report of Analysis No: 8.A/LHU/BPPI/IV/2015
Nama Customer
: Huria Marnis
Customer Name Petugas yang dihubungi
: Huria Marnis
Tanggal
: 9 April 2015
Date
Contact Person Alamat
: Sukamandi
Jenis Sampel Address
: Air tawar
Type of sample (s) No. Sampel
: 8.A
No.FPPS
: 8.A/FPPS/BPPI/IV/2015
No. Sample
Universitas Sumatera Utara
Tanggal Penerimaan
: 7 April 2015
Tanggal Pengujian : 7 s.d 8 April 2015
Received Date
Date of Analysis
Parameter
Satuan
Parameters
Unit
NO 1 Amonia Total 2 Nitrit
1 Amonia Total 2 Nitrit
Hasil Uji Test Result
Spes ifikas i Metoda Method Specification
mg/L mg/L
T. Kecil+NT. besar 0,4246 0,0177
NT. kecil tanpa predator 0,0845 0,0265
mg/L mg/L
NT. kecil+T. besar 0,2580 0,0210
NT. kecil+NT. besar 0,0543 0,0265
T. kecil tanpa predator 0,2986 0,0265
T. kecil+T. bes ar 0,0910 0,0222
SNI 06-6989-30-2005 Spektrofotometri SNI 06-6989-9-2004 Spektrofotometri
Bak pendederan Bak pendederan 0,1492 0,1557 0,0186 0,0074
SNI 06-6989-30-2005 Spektrofotometri SNI 06-6989-9-2004 Spektrofotometri
Manajer Teknis
Huria Marnis, S.Pi. M.Si. NIP. 19830614 200901 2 002
Universitas Sumatera Utara
Catatan
: 1. Hasil uji ini hanya berlaku untuk sampel yang diuji. Note
These analytical results are only valid for the tested sample. 2. Laporan Hasil Uji ini terdiri dari 1 halaman.
This Report of Analysis consists of 1(one) page 3. Laporan Hasil Uji ini tidak boleh digandakan, kecuali secara lengkap dan seizin tertulis Manajer Puncak laboratorium penguji BPPI. The Report of Analysis shall not be reproduced (copied) except for the completed one and with the written permission Of the Top Manager BPPI Lembar putih untuk Costumer, lembar merah untuk Manajer Teknis, lembar biru untuk Administrasi
DP/5.10.3/BPPI; 1 Juli 2012
Hal 1 dari 1
Lampiran 9. Data Pakan Ikan Lele (C. gariepinus) Transgenik Selama Masa Pemeliharaan Populasi Ulangan B0 BT PB IA IH SR JHP KP RKP KPH EP Transgenik 1 24,129417 255,40 231,27 110 66 60,0 30 147,2 0,64 4,91 1,57 2 21,313417 221,00 199,69 110 38 34,5 30 148,4 0,74 4,95 1,35 Non-transgenik 1 8,9906667 114,63 105,64 110 40 36,4 30 141,2 1,34 4,71 0,75 2 8,9686667 103,17 94,20 110 36 32,7 30 140,8 1,49 4,69 0,67 Keterangan: B0 = Bobot awal BT = Bobot akhir PB = Penambahan bobot IA = Ikan awal
Universitas Sumatera Utara
IH SR JHP KP RKP KPH EP
= Ikan hidup = Survival rate = Jumlah hari pemberian pakan = Kosumsi pakan = Rasio konversi pakan = Konsumsi pakan harian = Efisiensi pakan
Universitas Sumatera Utara