35
LAMPIRAN
36
Lampiran 1. Data dan perhitungan analisis proksimat Padina australis a. Kadar air Ulangan A (gram) B (gram) C (gram) 5,03 27,09 27,57 1 2 5,37 24,69 25,19 Keterangan : A = bobot sampel awal (gram) B = bobot cawan kosong (gram) C = bobot cawan + sampel setelah dioven (gram)
Kadar air (%) 90,46 90,69
Rata-rata 90,57
% kadar air ulangan 1 = 100 - (C-B) x 100 % A = 100 - (20,36 - 19,95) 5,03
x 100 %
= 90,46 % % kadar air ulangan 2 = 100 - (C-B) x 100 % A = 100 - (25,19 – 24,69) 5,37
x 100 %
= 90,69 % % kadar air rata-rata = 90,46 % + 90,69 % 2 = 90,57 %
b. Kadar abu Ulangan
A (gram)
B (gram)
C (gram)
5,03 27,09 27,19 1 2 5,37 24,69 24,81 Keterangan : A = bobot sampel (gram) B = bobot cawan kosong (gram) C = bobot sampel + cawan setelah ditanur (gram) % kadar abu ulangan 1 =
C-B A
Kadar abu (%) 1,99 2,23
x 100 %
= 27,19 – 27,09 5,03 = 1,99 %
x 100 %
Rata-rata 2,11
37
% kadar abu ulangan 2 =
C-B x 100 % A = 24,81 - 24,69 5,37
x 100 %
= 2,23 % % kadar abu rata-rata = 1,99 % + 2,23 % 2 = 2,11 % c. Kadar protein Bobot sampel (g) 1,15 1 2 1,17 Keterangan : V blanko = 0 mL N HCl = 0.1002 Ulangan
% N ulangan 1
V HCl (mL)
%N
0,13 0,14
0,16 0,17
FP = 10 FK = 6.25
Kadar protein (%) 0,99 1,05
ratarata 1,02
Mr HCl = 14.007
= (V HCl - V blanko) x N HCl x FP x Mr HCl x 100% mg contoh = (0,13 - 0) x 0,1002 x 100 x 14,007 x 100% 1,15 x 103 = 0,16 %
% Kadar protein
= % N x FK = 0,99 %
% N ulangan 2
= (V HCl - V blanko) x N HCl x FP x Mr HCl x 100% mg contoh = (0,14 - 0) x 0,1002 x 100 x 14,007 x 100% 1,17 x 103 = 0,17 %
% Kadar protein
= % N x FK = 1,05 %
% kadar abu rata-rata = 0,99 % + 1,05 % 2 = 1,02 %
38
d. Kadar lemak Ulangan
Wo (g)
W 1 (g)
W 2 (g)
5,03 110,48 110,46 1 2 5,21 74,55 74,53 Keterangan : Wo = bobot sampel (gram) W 1 = bobot sampel + labu setelah dioven (gram) W 2 = bobot labu lemak kosong (gram)
Kadar lemak (%) 0,40 0,38
Rata-rata 0,39
% Kadar lemak ulangan 1 = W 1 - W 2 x 100% W0 = 110,4 8- 110,46 x 100% 5,03 = 0,40 % % Kadar lemak ulangan 2 = W 1 - W 2 x 100% W0 = 74,55 - 74,53 x 100% 5,21 = 0,38 % % kadar abu rata-rata
= 0,40 % + 0,38 % 2 = 0,39 %
e. Kadar karbohidrat (by difference) % Kadar karbohidrat = 100 % - (kadar air + kadar abu + protein + lemak) = 100 % - (90,57 % + 2,11 % + 1,02 % + 0,39 %) = 5,91 % f. Kadar abu tidak larut asam Ulangan A (g) B (g) C (g) Kadar abu TLA (%) 5,03 19,87 19,88 0,20 1 2 5,37 23,74 23,75 0,19 Keterangan : A = bobot sampel (gram) B = bobot cawan kosong (gram) C = bobot sampel + cawan setelah ditanur (gram)
Rata-rata 0,20
39
% kadar abu tidak larut asam (TLA) = C-B x 100 % A % kadar abu TLA ulangan 1 = 19,88 – 19,87 x 100 % 5,03 = 0,20 % % kadar abu TLA ulangan 2 = 23,75 - 23,74 x 100 % 5,37 = 0,19 % % kadar abu TLA rata-rata
= 0,20 % + 0,19 % 2 = 0,20 %
Lampiran 2. Perhitungan kadar serat pangan P. australis a. Kadar serat pangan tak larut A
B
C
D
E
IDF (%)
0,3627 0,3221
0,8012 0,7914 0,6954 0,7236
0,8455 0,8324 0,7021 0,7301
16,1252 18,8891 15,2121 16,9415
16,1466 18,9089 15,2153 16,9443
5,3212 5,4641 0,0035 0,0037
Blanko
Rata-rata (%) 5,3927 0,0036
Keterangan : A = Berat sampel (gram) B = Berat kertas saring kosong (gram) C = Berat kertas saring + residu setelah dioven (gram) D = Berat cawan porselen kosong (gram) E = Berat cawan porselen + abu setelah ditanur (gram) Kadar IDF 1 (%)
= ( (C - B ) - (E - D)) - Blanko x 100% A = ((0,8455 - 0,8012)- (16,1466 - 16,1252)) - 0,0036 x 100% 0,3627 = 5,3212 %
Kadar IDF 2 (%)
= ( (C - B ) - (E - D)) - Blanko x 100% A = ((0,8324-0,7914) - (18,9089- 18,8891)) - 0,0036 x 100% 0,3221 = 5,4641%
40
Rata-rata IDF (%)
= 5,3212% + 5,4641 % 2 = 5,3927 %
b. Kadar serat pangan larut A
F
G
H
I
0,7689 0,8127 15,9851 15,9956 0,7812 0,8213 18,3415 18,3513 0,6968 0,7011 16,9565 16,9581 Blanko 0,7012 0,7066 18,1144 18,1163 Keterangan : A = Berat sampel (gram) F = Berat kertas saring kosong (gram) G = Berat kertas saring + residu setelah dioven (gram) H = Berat cawan porselen kosong (gram) I = Berat cawan porselen + abu setelah ditanur (gram) 0,3627 0,3221
Kadar SDF 1 (%
SDF (%) 8,3264 8,4446 0,0027 0,0035
Rata-rata (%) 8,3855 0,0031
= (G - F) - (I - H) - Blanko x 100% A = (0,8127 - 0,7689) - (15,9956 – 15,9851) - 0,0031 x 100% 0,3627 = 8,3264 %
Kadar SDF 2 (%)
= (G - F) - (I - H) - Blanko x 100% A = (0,8213- 0,7812) - (18,3513 – 18,3415) - 0,0031x 100% 0,3221 = 8,4446 %
Rata-rata SDF (%)
= 8,3264% + 8,4446% 2 = 8,3855 %
c. Kadar serat makanan total Kadar serat makanan total
= kadar IDF rata-rata + kadar SDF rata-rata = 5,3927 % + 8,3855 % = 13,7782 %
41
Lampiran 3. Data dan perhitungan rendemen ekstrak kasar Padina australis Pelarut Metanol Etil Asetat n-heksana
Ulangan
A (g)
B (g)
C (g)
Rendemen (%)
1 2 1 2 1 2
10 10 10 10 10 10
37,96 38,40 37,64 37,87 39,79 119,37
38,48 38,82 37,71 37,94 39,82 119,40
5,20 4,20 0,70 0,70 0,30 0,30
Keterangan : A = bobot awal sampel (gram) B = bobot botol kosong (gram) C = bobot sampel+botol setelah ekstraksi (gram) a.
Metanol % rendemen ekstrak kasar = C-B (ulangan 1) A
x 100 %
= 38,48 - 37,96 x 100 % 10 = 5,20 % % rendemen ekstrak kasar = C-B (ulangan 2) A
x 100 %
= 38,82- 38,40 x 100 % 10 = 4,20 % % rendemen rata-rata
= 5,20 % + 4,20 % 2 = 4,70%
b. Etil Asetat % rendemen ekstrak kasar = C-B (ulangan 1) A
x 100 %
= 37,71-37,64 x 100 % 10 = 0,70 %
Rata-rata 4,66 0,70 0,30
42
% rendemen ekstrak kasar = C-B (ulangan 2) A
x 100 %
= 37,94 - 37,87x 100 % 10 = 0,70 % % rendemen rata-rata
= 0,70 % + 0,70 % 2 = 0,70 %
c. N-heksana % rendemen ekstrak kasar = C-B (ulangan 1) A
x 100 %
= 39,82- 39,79 x 100 % 10 = 0,30 % % rendemen ekstrak kasar = C-B (ulangan 2) A
x 100 %
= 119,40-119,37 x 100 % 10 = 0,30 % % rendemen rata-rata = 0,30 % + 0,30 % 2 = 0,30% Lampiran 4. Data dan contoh perhitungan total fenol P. australis a. Data standar asam galat konsentrasi (ppm)
Absorban
0 10 20 30 40 50 60 70
0,000 0,083 0,185 0,287 0,402 0,498 0,584 0,686
43
b. Kurva standar asam galat
c. Data hasil analisis total fenol Pelarut
Ulangan
A
B
C
Absorban
Methanol
1 2 1 2 1 2
10
0,5138 0,5138 0,0758 0,0758 0,0314 0,0314
0,0110 0,0136 0,0053 0,0051 0,0031 0,0030
0,2710 0,2960 0,3050 0,3000 0,0800 0,0720
etil asetat nheksana
10 10
x(ppm)
Perhitungan mencari x (ppm) ekstrak metanol ulangan 1 y
= a + bx
0,271 = - 0,0078 + 0,01 x x x -
= -0,0078 - 0,271 0,01 = 28,0038 ppm
Perhitungan total fenol ekstrak metanol ulangan 1 Total fenol
= 28,0038 mg x 2 ml x 0,5138 g x 1 1000 ml x 0,0110 mg x 10 g = 0,2616 mg/g = 261,6066 mg/kg = 261,61 ppm
Ratarata (ppm)
28,0038 261,61 246,09 30,5154 230,57 31,4195 89,87 90,89 30,9172 91,90 8,8156 17,86 17,32 8,0119 16,77
Keterangan : A = bobot awal sebelum ekstrak (g) B = bobot setelah ekstraksi (g) C = bobot ekstrak yang digunakan (g) -
total fenol (ppm)
44
-
Perhitungan total fenol ekstrak metanol ulangan 2 Total fenol
= 30,5154 mg x 2 ml x 0,5138 g x 1 1000 ml x 0.0136 mg x 10 g = 0,2306 mg/g = 230,5710 mg/kg = 230,57 ppm
-
Rata-rata total fenol ekstrak metanol Rata-rata
= 261,61+ 230,5710 2 = 246,09 ppm
Lampiran 5. Perhitungan Pengenceran DPPH, BHT dan Ekstrak P. australis a) DPPH 0,00013 M sebanyak 25 ml (Mr = 394 g/mol) Konsentrasi 0.00013 M = M
= m x 1000 Mr V m x 1000 394 g/mol 25 ml
= 1,3 gram
DPPH sebanyak 1, 3 gram ditambahkan etanol sampai 25 ml b) BHT 1000 ppm sebanyak 1 ml 1000 ppm = m . 1 ml M = 1 mg BHT sebanyak 1 mg ditambahkan etanol sampai 1 ml c) Larutan ekstrak 1000 ppm = m . 1 ml m = 1 mg Ekstrak sebanyak 1 mg ditambahkan etanol sampai 1 ml Pelarut
Metanol
Jumlah Ditambahkan 1 µl ekstrak 1000 ppm 1 µl ekstrak 1000 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 500 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 250 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 125 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 62,5 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 31,25 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 15,625 ppm 1 µl etanol
Konsentrasi 1000 ppm 500 ppm 250 ppm 125 ppm 62,5 ppm 31,25 ppm 15,625 ppm 7,8125 ppm
45
Pelarut
Etil Asetat
Pelarut
n-heksana
Jumlah Ditambahkan 1 µl ekstrak 1000 ppm 1 µl ekstrak 1000 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 500 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 250 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 125 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 62,5 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 31,25 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 15,625 ppm 1 µl etanol
Konsentrasi 1000 ppm 500 ppm 250 ppm 125 ppm 62,5 ppm 31,25 ppm 15,625 ppm 7,8125 ppm
Jumlah Ditambahkan 1 µl ekstrak 1000 ppm 1 µl ekstrak 1000 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 500 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 250 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 125 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 62,5 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 31,25 ppm 1 µl etanol 1 µl ekstrak 15,625 ppm 1 µl etanol
Konsentrasi 1000 ppm 500 ppm 250 ppm 125 ppm 62,5 ppm 31,25 ppm 15,625 ppm 7,8125 ppm
Lampiran 6. Data dan contoh perhitungan IC 50 Persen inhibisi BHT 15,6250 ppm a. BHT Konsentrasi (ppm) 15,6250 7,8125 3,9062 1,9531 0,9765 0,4883 0,2441 IC 50 y 50 37,08 ln (x) x
abs BHT 0,208 0,260 0,329 0,371 0,403 0,424 0,433
= 0,441 - 0,208 x 100% 0,441 abs blanko
0,441
= 12,583 ln(x) + 12,924 = 12,583 ln(x) + 12,924 = 12,583 ln(x) = 2,9465 =19,0395 ppm
Inhibisi (%) 52,8344 41,0430 25,3968 15,8730 8,6167 3,8548 1,8141
= 52,8344 %
Persamaan garis
IC 50 (ppm) 19,0395
y = 12,583 ln(x) + 12,924
46
b. Ekstrak metanol P. australis (Ulangan 1) Persen inhibisi 1000 ppm
= 0,441 - 0,003 x 100% 0,441
Konsentrasi (ppm) 1000 500 250 125 62,5 31,25 15,625 7,8125
abs sampel 0,003 0,149 0,220 0,275 0,321 0,343 0,37 0,339
abs blanko
0,441
= 99,3197 %
Inhibisi (%) 99,3197 66,2132 50,1134 37,6417 27,2109 22,2222 16,0998 23,1292
Persamaan garis y = 10,9590 ln(x) – 10,6570
IC 50 (ppm)
253,382
IC 50 y 50 ln (x) x
= 10,9590 ln(x) – 10,6570 = 10,9590 ln(x) – 10,6570 = 5,5349 = 253,382 ppm
Lampiran 7. Analisa ragam dan uji lanjut Duncan ekstrak P. australis a. Analisis ragam rendemen ekstrak Sumber keragaman Pelarut
Jumlah kuadrat 23,3063 0,46952 23,77582
Galat Total
Derajat bebas 2a 3b 5c
Keterangan: a b c
n t
= = = = =
n-1 n (t-1) nt-1 perlakuan ulangan
b. Uji Duncan Pelarut Metanol Etil Asetat N-Heksana
Nilai tengah 4,66 0,69 0,29
Nilai Subset A B B
KT 11,65 0,16
F hitung
P-value
74,46
0,003
47
Lampiran 8. Analisa ragam dan uji lanjut Duncan kandungan total fenol P. australis a. Analisis ragam kandungan total fenol Sumber keragaman Pelarut Galat Total
Jumlah kuadrat 54558,44 484,27 55042,71
Derajat bebas 2a 3b 5c
KT
F hitung
P-value
27279,22 161,42
168,99
0,0008
Keterangan: a b c
n t
= = = = =
n-1 n (t-1) nt-1 perlakuan ulangan
b. Uji Duncan Pelarut Metanol Etil Asetat N-Heksana
Nilai tengah 246,09 90,89 17,32
Nilai Subset A B C
Lampiran 9. Analisa ragam dan uji lanjut Duncan aktivitas antioksidan P. australis a. Analisis ragam aktivitas antioksidan Sumber Keragaman Pelarut Galat Total
Jumlah kuadrat 54558,44 484,27 55042,71
Derajat bebas 2a 3b 5c
Keterangan: a b c
n t
= = = = =
n-1 n (t-1) nt-1 perlakuan ulangan
b.Uji Duncan Pelarut Metanol Etil Asetat N-Heksana
Nilai tengah 267,05 1160,21 1829,47
Nilai Subset C B A
KT
F hitung
P-value
27279,22 161,42
168,99
0,0008
