LAMPIRAN
74
Lampiran 1 Pohon mangrove Api-api (Avicennia marina)
Lampiran 2 Perhitungan analisis proksimat daun Api-api (Avicennia marina) a. Kadar air
% Kadar air U1
=
% Kadar air U2
=
Kadar air rata-rata
=
b. Kadar lemak % Kadar lemak U1
=
% Kadar lemak U2
=
Kadar lemak rata-rata = c. Kadar protein % Kadar protein U1 = % Kadar protein U2
=
Kadar protein rata-rata =
75
d. Kadar abu % Kadar abu U1
=
% Kadar abu U2
=
Kadar abu rata-rata = e. Kadar serat kasar % Kadar serat kasar U1
=
% Kadar serat kasar U2
=
Kadar serat kasar rata-rata = Lampiran 3 Data rendemen ekstrak kasar daun Api-api (Avicennia marina) Jenis pelarut Metanol Etil asetat Heksan
Ulangan 1 2 1 2 1 2
Berat Sampel Berat Ekstrak Rendemen Kering (g) (g) (%) 25,01 2,7108 10,8389 25,02 2,0978 8,3845 25,01 0,3466 1,3858 25,01 0,2914 1,1651 25,02 0,1335 0,5336 25,02 0,1759 0,7030
a. Ekstrak Metanol % Rendemen ekstrak U1
=
% Rendemen ekstrak U2
=
Rendemen rata-rata
=
b. Ekstrak Etil asetat % Rendemen ekstrak U1
=
% Rendemen ekstrak U2
=
Rendemen rata-rata
=
Rata-rata (%) 9,6116 1,2755 0,6183
76
c. Ekstrak Heksan % Rendemen ekstrak U1
=
% Rendemen ekstrak U2
=
Rendemen rata-rata
=
Lampiran 4 Perhitungan pembuatan larutan DPPH, BHT, stok ekstrak dan pengencerannya a. DPPH 0,001 M sebanyak 50 ml (Mr = 394 g/mol) Konsentrasi
=
0,001 M
=
berat DPPH
=
DPPH sebanyak 0,0197 g dilarutkan dalam metanol p.a. hingga 50 ml. b. Standar BHT 250 ppm sebanyak 50 ml Stok BHT 250 ppm
= = 12,5 mg = 0,0125 g
BHT sebanyak 0,0125 g dilarutkan dalam metanol p.a. hingga 50 ml.
BHT 2 ppm
= = =
0,08 ml BHT 250 ppm ditambah metanol p.a. hingga 10 ml.
BHT 4 ppm
= = =
0,16 ml BHT 250 ppm ditambah metanol p.a. hingga 10 ml.
77
BHT 6 ppm
= = =
0,24 ml BHT 250 ppm ditambah metanol p.a. hingga 10 ml.
BHT 8 ppm
= = =
0,32 ml BHT 250 ppm ditambah metanol p.a. hingga 10 ml. c. Larutan ekstrak 1000 ppm sebanyak 50 ml Stok ekstrak 1000 ppm
= = 50 mg = 0,05 g
Ekstrak sebanyak 0,05 g dilarutkan dalam metanol p.a. hingga 50 ml.
Ekstrak 50 ppm
= = =
0,5 ml ekstrak 1000 ppm ditambah metanol p.a. hingga 10 ml.
Ekstrak 100 ppm
= = =
1 ml ekstrak 1000 ppm ditambah metanol p.a. hingga 10 ml.
Ekstrak 150 ppm
= = =
1,5 ml ekstrak 1000 ppm ditambah metanol p.a. hingga 10 ml.
Ekstrak 200 ppm
=
78
= = 2 ml ekstrak 1000 ppm ditambah metanol p.a. hingga 10 ml
Ekstrak 300 ppm
= = =
3 ml ekstrak 1000 ppm ditambah metanol p.a. hingga 10 ml.
Lampiran 5 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 a. Persen inhibisi dan IC50 pada BHT Sampel Blanko1 Blanko2 BHT
Konsentrasi (ppm)
Abs 1
0 0 2 4 6 8
0,905 0,917 0,709 0,551 0,425 0,397
Abs 2
0,819 0,531 0,431 0,323
2 ppm = 4 ppm = 6 ppm = 8 ppm = Persamaan regresi linear : y = 8,839x - 1,755
y = 8,839x - 1,755 50 = 8,839x - 1,755 51,755 = 8,839x x = 5,8553 ppm IC50 untuk BHT adalah 5,8553 ppm.
% inhibisi
0, 911
Persen inhibisi
IC50
Rata- rata absorbansi
0,814 0,541 0,419 0,315
10,65 40,61 54,06 65,42
79
b. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak daun Api-api (Avicennia marina)
Sampel
Konsentrasi (ppm)
Abs 1
0 0 50 100 150 200 300
0,905 0,917 0,760 0,668 0,591 0,515 0,410
Blanko1 Blanko2 Metanol
Abs 2
Rataan absorbansi 0,911
0,761 0,661 0,596 0,543 0,397
0,761 0,664 0,594 0,529 0,400
Persen inhibisi
50 ppm
=
200 ppm
=
150 ppm
=
200 ppm
=
300 ppm
=
Persamaan regresi linear : y = 0,153x + 10,59 IC50 y 50 39,41 x
% inhibisi
= 0,153x + 10,59 = 0,153x + 10,59 = 0,153x = 257,5817 ppm
IC50 untuk ekstrak metanol daun Api-api adalah 257,5817 ppm
16,47 27,10 37,48 41,93 56,09
80
c. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak daun Api-api (Avicennia marina) Sampel
Konsentrasi (ppm)
Abs 1
0 0 50 100 150 200 300
0,905 0,917 0,741 0,602 0,491 0,398 0,257
Blanko1 Blanko2 Etil asetat
Abs 2
Rataan absorbansi 0,911
0,728 0,600 0,497 0,385 0,264
0,734 0,601 0,494 0,392 0,261
Persen inhibisi
50 ppm
=
200 ppm
=
150 ppm
=
200 ppm
=
300 ppm
=
Persamaan regresi linear : y = 0,206x + 12,44 IC50 y 50 37,56 x
% inhibisi
= 0,206x + 12,44 = 0,206x + 12,44 = 0,206x = 182,3301 ppm
IC50 untuk ekstrak etil asetat daun Api-api adalah 182,3301 ppm
19,43 34,03 45,77 56,97 71,35
81
d Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak daun Api-api (Avicennia marina)
Sampel
Konsentrasi (ppm)
Abs 1
0 0 50 100 150 200 300
0,968 0,962 0,942 0,910 0,904 0,860 0,808
Blanko1 Blanko2 Heksan
Abs 2
Rataan absorbansi 0,965
0,928 0,923 0,907 0,874 0,827
0,935 0,917 0,911 0,867 0,818
Persen inhibisi
50 ppm
=
200 ppm
=
150 ppm
=
200 ppm
=
300 ppm
=
% inhibisi
Persamaan regresi linear : y = 0,050x - 0,183 IC50 y = 0,050x - 0,183 50 = 0,050x - 0,183 50,183 = 0,050x x = 1003,6600 ppm IC50 untuk ekstrak heksan daun Api-api adalah 1003,6600 ppm
3,1088 4,8186 5,8549 10,1554 15,2849
82
Lampiran 6 Perhitungan bilangan peroksida ekstrak terpilih Sampel
kons
Blanko Emulsi minyak
Ulanga n
Berat bahan (gram)
Vol tio (ml)
Bil perox
Rata-rata
0,20 0
1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3
50
100
200
300
5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00
1,40 1,63 1,65 0,85 1,00 0,75 0,63 0,63 0,60 0,53 0,50 0,53 0,40 0,43 0,40
2,40 2,86 2,90 1,30 1,60 1,10 0,86 0,86 0,80 0,66 0,60 0,66 0,4 0,46 0,4
2,72
1.33
0,84
0,64
0,42
Contoh perhitungan: Emulsi minyak Konsentrasi ekstrak
= 0 ppm
Ulangan
=1
Bilangan peoksida
=
Rata-rata pada tabel merupakan rata-rata dari masing-masing bilangan peroksida Contoh: Konsentrasi ekstrak
= 0 ppm
Ulangan
= 1, 2 dan 3
Rata-rata =
83
Lampiran 7 Analisis ragam pengujian bilangan peroksida emulsi minyak
Bilangan peroksida
Jumlah kuadrat Perlakuan 10,138
Derajat bebas 4
Kuadrat F hitung rata - rata 2,535 87,922
Galat
,288
10
,029
Total
10,426
14
signifikan ,000
Lampiran 8 Uji Lanjut Duncan A 300 ppm
,4200
200 ppm
,6400
100 ppm
B
C
D
,6400 ,8400
50 ppm
1,3333
0 ppm
2,7200
Lampiran 9 Analisa struktur anatomi daun
Pemotretan preparat awetan
84
Lampiran 10 Gambar-gambar selama proses ekstraksi
Daun Api-api (Avicennia marina)
Bubuk daun Api-api
Hasil maserasi 24 jam
Preparasi sampel
Maserasi sampel dengan orbital shaker
Hasil Filtrasi
85
Lampiran 11 Uji antioksidan
Larutan DPPH + Ekstrak Lampiran 12 Uji fitokimia
Hasil uji fitokimia (kiri-kanan: uji Dragendorf, uji Meyer, uji Wagner, uji steroid, uji flavonoid, uji fenol hidrokuinon)
Hasil uji fitokimia (kiri-kanan: uji Molisch, uji Benedict, uji saponin, uji ninhidrin, uji Biuret)
86
Lampiran 13 Uji bilangan peroksida
Emulsi minyak kelapa dan ekstrak daun Api-api dengan berbagai konsentrasi
