Kortizol, ACTH Olga Bálková Roche s.r.o., Diagnostics Division
ACTH: biochemie a fyziologie •
Hormon peptidové povahy, 39 AMK
•
Produkován předním lalokem hypofýzy
•
Cirkadiánní rytmus nejvyšší koncentrace v 8:00 hod., nejnižší kolem půlnoci
•
Přímý vliv na produkci hormonů kůry nadledvin
•
Sekrece ACTH řízena CRH hypothalamu
Zdroj: Atlas fyziologie člověka, Grada, 2001
Řízení produkce hormonů kůry nadledvin
Zdroj: Atlas fyziologie člověka, Grada, 2001
Důsledky a příznaky nadbytku kortikosteroidů Cushingův syndrom Cushingova choroba
Zdroj: Atlas patofyziologie člověka, Grada, 2001
Důsledky a příznaky nedostatku kortikosteroidů
Zdroj: Atlas patofyziologie člověka, Grada, 2001
Klinické využití stanovení kortizolu a ACTH Nemoc
Kortizol ACTH
Cushingova choroba (nádor hypofýzy produkující ACTH)
vysoký
vysoký
Tumor nadledvin
vysoký
nízký
Ektopická produkce ACTH vysoký (ACTH produkovaný tumorem mimo hypofýzu, obv. v plicích)
vysoký
Addisonova choroba (poškození nadledvin)
nízký
vysoký
Hypopituitarizmy
nízký
nízký
Funkční testy osy hypothalamus – hypofýza - nadledviny Funkční testy
Testovaný parametr
Cirkadiánní rytmus
Cirkadiánní rytmus sekrece kortizolu.
ACTH stimulační test
Reakce kůry nadledvin na sekreční podnět.
Dexamethasonový supresivní test
Normální potlačení sekrece ACTH hypofýzou cestou negativní zpětné vazby při použití dexamenthasonu (2 nebo 8 mg /den).
CRH test
Zvýšení sekrece ACTH hypofýzou při stimulaci odpovídajícím releasing hormonem hypothalamu.
Test inzulínem navozené hypoglykémie
Stimulace osy hypothalamus-hypofýza-nadledviny stresem; normální reakce je dosaženo za podmínky, že všechny složky systému fungují fyziologicky.
Metyraponový stimulační test
Zvýšení sekrece ACTH hypofýzou snížením negativní zpětnovazebné kontroly kortizolu.
Elecsys®ACTH • ECLIA • Krevní vzorek: 50 µl, K3-EDTA-plazma, předchlazené zkumavky TAT: 18 min. • Funkční senzitivita: < 2,0 pg/ml (< 0,440 pmol/l) • Analytická senzitivita: 1,0 pg/ml (0,220 pmol/) • Rozmezí: 1,0-2000 pg/ml (0,220-440 pmol/l) ð nižší výskyt nutnosti ředění, rerunů, vysoká přesnost výsledků • Reprodukovatelnost (CV): E2010: 1,8-5,4 %; E170 1,8-5,4 % • Očekávané hodnoty: ranní koncentrace: 7,18-63,3 pg/ml odběr krve 7-10 hod.
Opakovatelnost a reprodukovatelnost aAutomatizovaný test, SWA platforma ð optimalizace nákladů laboratoře aCV < 5 % ð spolehlivost výsledků Intra-Assay Precision
Inter-Assay Precision
(PreciControls + Plasma-Pools; n=21)
(Controls + HS; n=10)
7
14
6
12 10
4
[CV%]
[CV%]
5
3 2
8 6 4
1
2
0 0
200
400
600
800
1000
1200
0,0
ACTH [pg/mL] PreciControl ACTH
Zdroj:
Přístroj:
EDTA-Plasma Pool
Spec 100 - 1000 pg/mL
0 200,0
400,0
600,0
800,0
1000,0
ACTH [pg/mL] Spec > 1000 pg/mL
Multicentrické hodnocení Elecsys®ACTH MODULAR ANALYTICS <E>
Control
EDTA-Plasma
Specification
1200,0
Funkční senzitivita Elecsys®ACTH < 2 pg/ml Lower concentration range 25
[CV%]
20
15
10
5
0 0
2
4
6
8
ACTH [pg/mL] ACTH
Zdroj:
Přístroj:
Multicentrické hodnocení Elecsys®ACTH MODULAR ANALYTICS <E>
Spec
Potenziell (ACTH)
10
Elecsys®ACTH / E170: shodné výsledky měření Plot_MC
250
150 [pg/mL]
Elecsys® ACTH _ Elecsys 2010
200
100
50
0 0
50
100
150
Elecsys® ACTH _ E170 [pg/mL]
Zdroj: Multicentrické hodnocení Elecsys®ACTH
200
250
Elecsys®ACTH: Nabídka a výhody Nabídka
Benefit zákazníka
Automatizovaná metoda (pouze ROCHE a DPC)
Efektivita nákladů není třeba provádět RIA, MTP
Plná konsolidace na vlastní platformě SWA pouze ROCHE!
Efektivní chod laboratoře, úspora nákladů
Vysoká přesnost metody
Spolehlivost výsledků
Nejširší rozmezí měření
Nižší náklady na ředění vzorků a reruny, vysoká přesnost výsledků
ROCHE: Kompletní endokrinologické menu
Efektivní chod laboratoře, úspora nákladů
ACTH a kortizol dostupné na jedné platformě
Spolehlivé a rychlé výsledky pro dif. dg. hypo/hyperkortizolismu z jedné zkumavky, bez potřeby dělení vzorků nebo tvorby aliquotů
Kortizol: biochemie a fyziologie • Hormon kůry nadledvin (glukokortikoid), sekrece řízena CRH ® ACTH • Transport v krvi ve vazbě na transkortin (cortisol-binding-globulin, CBG), receptory pro kortizol – prakticky ve všech tkáních • Cirkadiánní rytmus, max. v ranních hodinách • Účinky: - ↑ glykémie, katabolismus bílkovin - vazokonstrikce, pozitivně inotropní efekt, zesílení účinku katecholaminů - potlačení zánětlivé a alergické reakce - zpomalení vylučování vody v ledvinách - ↓ ochrany žaludeční sliznice • Klinické využití: dg. poruch funkce kůry nadledvin, poruch osy hypothalamus – hypofýzy – kůra nadledvin, dif. dg. hypo/hyperkortizolismu Biologický materiál: sérum, plazma, moč, sliny • Stanovení volného kortizolu v séru/plazmě – nákladné a náročné ® výhodnější stanovení v moči nebo slinách • V moči: 24 hod. sběr, nutná extrakce kortizolu (přítomny i metabolity)
Kortizol ve slinách
• aNeinvazivní a rychlý odběr biologického materiálu (výhodné u dětí) aSpolehlivé výsledky měření (bez ohledu na slinotok, bez ohledu na koncentraci CBG)
• Možné opakované vyšetření pro dynamické sledování hladiny během dne, využitelné i pro funkční dg. testy • Není nutná předúprava vzorku • Metody měření volného kortizolu ve slinách: imunochemické metody • Prokázána silná korelace výsledků mezi hladinou volného kortizolu ve slinách a v plazmě, bez ohledu na koncentrace CBG • Požadované množství slin: 0,025 - 2 ml
Elecsys®Kortizol ve slinách •
ECLIA
•
Kortizol uvolněn z vazby na bílkoviny danazolem
•
Opakovaně bylo prokázáno, že samostatné stanovení kortizolu ve slinách v nočních hodinách je v dg. Cushingova sy nadřazeno stanovení volného kortizolu v moči. Stanovení kortizolu ve slinách v nočních hodinách je zvl. přínosné pro děti, psychiatrické pacienty a osoby, u kterých rozličné stresové faktory mohou ovlivnit kůru nadledvin a způsobit nárůst koncentrací adrenálních steroidů. (Zdroj: van Aken, 2003, Raff H, 2003, Groeschl M, 2003)
Elecsys®Kortizol ve slinách • Klinická studie: 27 zdravých dobrovolníků (11 mužů, 16 žen, 10-65 let, prům. věk 23 let), měření volného kortizolu ve slinách na přístroji Elecsys. 5 odběrů ranních vzorků během 2 týdnů, vzorky zmražena na -20°C, po 2 týdnech vzorky donešeny do laboratoře. • Naměřené rozmezí: 6,4 - 39,1 nmol/ střední koncentrace: 12,7 - 28,8 nmol/l střední hodnota: 20,4 nmol/l, bez rozdílu pohlaví • Analytická variabilita: 3,8 % intraindividuální variabilita: 6,3 % interindividuální variabilita: 20,5 % (sérový kortizol 20,9 %, resp. 45,6 %)
Zdroj: Roche Data
Výsledky
