IBV HOGYAN VÉDEKEZZÜNK A JELENLEGI FERTŐZŐ BRONCHITIS (IB) HELYZETBEN AZ EUAFME REGIÓBAN?
2
IB VARIÁNSOK TÖRTÉNETE EUAFME • 1930’s: Massachussetts (mortalitás 40-90%) • 1951: Első variáns törzs az USA-ban: Connecticut • 1980’s: Holland variáns D274, D1466, Belga variáns B1648 • 1990’s: 793B variáns • 2000: Italy-02 • 2004: QX IBV • Xindadi, Variáns 2, Q1 • 2010: több, mint 65 variáns leírása világszerte
3
ZOETIS DIAGNOSZTIKA • 2002-ben kezdődött az együttműködés a Liverpooli Egyetemmel, Professor R.C. Jones, kezdetben NyugatEurópára fókuszálva • Több mint 8000 állomány vizsgálata Liverpoolban 2008-ig (nested RT-PCR) • 2010-ben, Weesp-ben, Hollandiában folytatódott a felmérés (RTq-PCR), EUAfME régióra kiterjesztve • 2012 közepétől – 2014 áprilisig Anicon, Németország • 2014 áprilistól, új építésű Diagnosztikai Centrum Torcéban, Franciaország (Centre of Excellence)
IB TÖRZSEK NYUGAT-EURÓPÁBAN LIVERPOOLI ADATOK 100% 80%
4 10
7
7 44 40
60% 40%
24
39
20% 0%
143 64
2OO2
2OO3 QX
Ital02
2OO4 793B
16 37 18 78
18 38 6 22
3 50 12 24
84
102
72
2OO5
2OO6
2OO7
FR-94
D1466
Other
Fort Dodge IB PCR Telepi felmérések adatai 2002-2008
1 3 10
18
2OO8
5
VIZSGÁLATI MÓDSZER : RT-qPCR
• Légcső és/vagy cloaca tamponminták (a legérintettebb állományok) • Sejtlízis • RNS szűrés centrifugálással • 2 RT-qPCR tesztek – Első PCR (N protein) • +/– Második PCR (S protein) • Minden törzsre külön primerek és próbák • Ismeretlen törzs esetén: szekvenálás
AZ EREDMÉNYEK ÉRTELMEZÉSE
• Amiket figyelembe vettünk – A terület „madársűrűsége” – Vakcinázási szokások – Rutin monitoring eredmények vagy klinikai tünetek megléte – Telepi történet • RT-qPCR-al nem különíthető el a telepi és a vakcina vírus • Szekvenálás után: vakcinatörzs vagy vadvírus?
7
ÁTTEKINTÉS 2011 ÖSSZESÍTETT EREDMÉNYEI Hollandia
Belgium
Németország
UK
Franciaország
Spanyolország
Portugália
Törökország
n=212
n=72
n=64
n=174
n=9
n=62
n=32
n=40
IBQX
81%
58%
80%
31%
22%
42%
53%
0%
Mass
25%
31%
39%
39%
44%
31%
41%
53%
IB793b
17%
42%
17%
15%
67%
10%
19%
8%
D274
5%
10%
9%
13%
0%
18%
0%
0%
ARK
0%
3%
0%
51%
0%
2%
0%
0%
Italy 02
0%
0%
0%
1%
0%
45%
6%
0%
Variant 2
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
60%
D1466
0%
1%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
IB
n=1322 (17 ország)
8
ÁTTEKINTÉS 2012 ÖSSZESÍTETT EREDMÉNYEI IB
Hollandia
Belgium
Németország
UK
Franciaország
IBQX Mass IB793b D274 ARK Italy 02 Variant 2 D1466
n=280 80% 21% 18% 9% 1% 0% 0% 1%
n=86 58% 47% 30% 14% 2% 0% 0% 3%
n=50 84% 36% 6% 14% 0% 0% 0% 0%
n=234 22% 46% 50% 12% 35% 0% 0% 0%
n=46 24% 63% 37% 4% 0% 2% 0% 0%
SpanyolPortugália ország
n=126 54% 19% 23% 4% 0% 19% 0% 1%
n=26 46% 15% 8% 4% 0% 27% 0% 0%
Törökország
Lengyelország
Baltikum
n=9 11% 22% 0% 0% 0% 0% 56% 0%
n=32 31% 63% 56% 6% 0% 0% 0% 0%
n=19 11% 32% 37% 21% 0% 0% 0% 0%
n= 1385 (16 ország) QX törzset még izoláltak: Görögország, Magyarország, Cseh Köztársaság, Dél-Afrika, Közel-Kelet
9
ÁTTEKINTÉS 2013 ÖSSZESÍTETT EREDMÉNYEI IB
Belgium
Németország
n=592 n=133
n=79
NL
UK
Fancia- Spanyolo Portuország rszág gália
n=197 n=92
Török- LengyelBaltikum ország ország
Románia
RSA
Zimbab.
n=71
n=55
n=9
n=55
n=47
n=14
n=23
n=14
IBQX
64%
54%
71%
6%
24%
17%
31%
11%
53%
11%
50%
74%
50%
Mass
35%
34%
44%
62%
62%
49%
38%
67%
49%
62%
43%
65%
71%
IB793b 36%
42%
35%
69%
38%
62%
25%
0%
40%
74%
29%
22%
14%
D274
16%
24%
22%
29%
0%
4%
5%
0%
20%
19%
7%
4%
0%
ARK
0%
1%
0%
31%
1%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
Italy 02
0%
0%
0%
0%
0%
24%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
Variant 2
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
33%
0%
0%
0%
0%
0%
D1466
1%
5%
3%
1%
0%
0%
0%
0%
2%
0%
0%
0%
0%
2013 n= 1879 (21 ország) QX törzset még izoláltak: Ciprus, Belorusszia és Dánia
10
ÁTTEKINTÉS 2014 ÖSSZESÍTETT EREDMÉNYEK IB
NL
Belgium
n=562 n=56
Németország
n=91
UK
Francia- Spanyolország ország
n=250 n=178 n=26
Portugália
n=47
Ukrajna
n=47
Litvánia
n=35
Lengyelország
n=95
Dánia
n=19
Románia Zimbabwe
n=74
n=4
IBQX
74%
68%
53%
16%
20%
23%
30%
43%
23%
38%
32%
34%
50%
Mass
41%
27%
43%
43%
78%
15%
49%
49%
57%
42%
100%
45%
75%
IB793b 36%
41%
42%
60%
46%
54%
49%
62%
69%
45%
0%
39%
0%
D274
18%
20%
20%
33%
0%
4%
21%
13%
20%
27%
0%
16%
0%
ARK
0%
0%
0%
16%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
Italy 02 0%
0%
0%
0%
0%
31%
4%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
Variant 2
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
D1466
1%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
2014 n= 1931 (23 ország) QX törzset még izoláltak: Bulgária
11
2011-2014 IB PCR POZITÍV MINTÁK IBVIBV törzsek százalékos aránya az összes pozitív mintaof arányában strain isolations percentage positives total positives 100 90 80 70 60 50
2011
54 52 46
40
47 47
43
46
2012
44
2013
35 35
2014
30 30
19
20
17 18 8 9
10
3
1 0 0
4 4
1 1
0 1 1 0
0
IBQX
Mass
IB793b
D274
variant 2
Italy 02
D1466
12
A KIVÁLASZTÁS KRITÉRIUMAI • A kiválasztás a nem homológ vakcinázási programok alapján történt. A teljes mintaszámból a következők lettek levéve: • Homológ vakcinával vakcinázott madarak • Nem ismert vakcinázási protokol • Tojó és szülőpár állományok (a vakcinázási program sokszor nem ismert) • Olyan törzsek a telepen, melyek ellen nincs homológ vakcina • Nem homológ törzzsel vakcinázott telepek • Nem vettük figyelembe: • Baromfi telepek sűrűsége • A szomszédos telepek vakcinázási programja • Vakcinázási történet • Az adott törzs a teljes izolátumok százalékos arányában történő újraszámolása
13
2011-2014 VADVÍRUS TÖRZSEK EUAFME 100 90
IBV törzsek százalékos arányanon (nemhomologous homológ vakcinás állományok) IBV strain isolations vaccinated
80 70 60
65 2011
54
2012
50
2013
42 42 40
2014
33 28
30
17
20
11 6
10
21
21
20
13 8
9
6
0
IBQX
Mass
IB793b
D274
KERESZTVÉDELMI VIZSGÁLATOK
15
HÁTTÉR • IBV: mozgó célpont • Nincs mindig elérhető homológ vakcina, de nincs is mindig rá szükség • Az elérhető vakcinák és kombinációik által kínált keresztvédelem ismerete értékes információ • IB793b vadvírus néha még felbukkan különböző országokban • Italy O2 a leginkább Spanyolországban van még mindig jelen • Patogén IBV variáns 2 előfordulása Törökországban és a Közel-Keleti régióban jelentős
D274: KERESZTVÉDELEM
Ciláris védelem %
A vakcinázás utáni ciliáris védelem (TOC) 80
70
78 53
60 40
71
25
28
28
32 20
D274 vaccine
9
20 0 H120
D274
M41
G
IBV törzs (ráfertőzés)
G. Dhinakar Raj, R.C. Jones 1996
793/B like
H120 vaccine
793B: KERESZTVÉDELEM Ciliáris védelem 793 /B vakcinázás után (TOC) 60 Ciliáris védelem %
60 40 20
23 9
8
13
0 H120
D274 M41 G IBV törzs (ráfertőzés)
G. Dhinakar Raj, R.C. Jones 1996
793/B like
18
1KERESZTVÉDELEM
ITALY 02 TÖRZZSEL SZEMBEN
Csoport
Alkalmazott vakcina
Vakcinázás időpontja
Ráfertőzés D21 4.2log10
1
IB Primer
Napos
Italy O2
2
Egyik sem
-
Italy O2
3
Egyik sem
-
Egyik sem
Study conducted at the University of Liverpool, Department of Veterinary Pathology 93%
89%
Százalék
Eredmények: Ciliáris aktivitás mértéke a légcsőben öt nappal az Italy 02 törzs ráfertőzését követően
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
0%
IB Primer NV Chall Jones, KJ Worthington, I Capua, CJ Naylor Efficacy of live infectious bronchitis vaccines against a novel European genotype, Italy 02 Vet. Rec. 2005 Vol. 156 No. 20 pp. 646-647 1RC
NV NC
2KERESZTVÉDELEM
IB793B TÖRZZSEL SZEMBEN
Csoport
Alkalmazott vakcina
Vakcinázás időpontja
Ráfertőzés D21 105.0 EID50
1
IB Primer + IB QX
Napos
IB 793b
2
IB Ma5 + IB 4/91
Napos
IB 793b
3
Egyik sem
-
IB 793b
4
Egyik sem
-
Egyik sem 100%
Eredmények: Ciliáris aktivitás mértéke a légcsőben öt nappal az IB 793b törzs ráfertőzését követően
Százalék
Study conducted at Zoetis VMRD, Olot
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
84%a
88%a
4%b IB Primer + IB QX
IB Ma5 + IB 4/91
NV Chall
NV NC
a,b szignifikáns
2Data
on file, Study Report No. 3H16C-08-10-362 (Olot code 120-A2-E-02-10)
különbség a csoportok között (P<0,0001)
19
3KERESZTVÉDELEM
IB793B TÖRZZSEL SZEMBEN
Csoport
20
Alkalmazott vakcina
Vakcinázás időpontja
Ráfertőzés D35 105.0 EID50
1
IB MM + IB QX
Napos 14 napos kor
IB 793b
2
IB Primer + IB QX
Napos 14 napos kor
IB 793b
3
IB Ma5 + IB 4/91
Napos 14 napos kor
IB 793b
4
Egyik sem
-
IB 793b
5
Egyik sem
-
Egyik sem
Eredmények: Ciliáris aktivitás mértéke a légcsőben öt nappal az IB 793b törzs ráfertőzését követően 3Data
Százalék
Study conducted at Zoetis VMRD, Olot
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
85%a
85%a
100%
90%a
42%b
IB MM + IB QX IB Primer + IB QX
on file, Study Report No. 3911 C-08-1 0-392 (Olot code 120-A2-E-03-1 0)
IB Ma5 + IB 4/91
NV Chall a,b szignifikáns
NV NC
különbség a csoportok között (P<0,01)
4KERESZTVÉDELEM
VARIANT 2 TÖRZZSEL SZEMBEN
Csoport
Alkalmazott vakcina
Vakcinánázás időpontja Ráfertőzés D35 104.0 EID50
1
IB MM + IB QX
Napos 14 napos kor
Variant 2
2
IB Primer + IB QX
Napos 14 napos kor
Variant 2
3
Egyik sem
-
Variant 2
Eredmények: Ciliáris aktivitás mértéke 5 nappal a légcsőben a variant 2 törzs ráfertőzését követően
Százalék
Study conducted at the GD Animal Health Centre, Deventer
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
70%a 50%a
0%b IB MM + IB IB Primer + IB QX QX
NV Chall a,bszignifikáns
4Data
on file, Study Report No Zoetis B815R-NL-13-216
különbség a csoportok között (P<0,05)
21
KÖVETKEZTETÉS •
A 2011-2014 IB PCR eredmények mélyebb kiértékelésére alapozva úgy tűnik, hogy az IBQX még mindig messze a leggyakrabban izolált vadvírus törzs, ezért törekedni kell az ellene való védekezésre – Az IBQX előfordulása országonként és időben változó, ami érthető egy új vírustörzs „betörése” során a Régióba, néhány országban az előfordulása a 80%ot is eléri – Az IBQX folyamatosan terjed el új országokban, ahol ugyanaz várható, mint Hollandiában és Németországban 5 évvel ezelőtt
•
A variant 2 törzs egyelőre nem terjedt el Európában, de állandó monitorozása fontos a lehetséges terjedését illetően
•
Célszerű kockázatelemzésen alapuló oltási programokat alkalmazni, figyelembe véve a környezetben előforduló IB törzseket és nem megvárni a kitöréseket
•
A Poulvac IB Primer és a Poulvac IB QX kombinációja a homológ törzsek (Mass, D274 and IB QX) elleni teljes védelem mellett erős illetve nagyon erős keresztvédelmet ad a 793b, ItalyO2, és Variant 2 törzsekkel szemben
