VYUŽITÍ LYOFILIZACE VE FARMACII A LÉKOVÝCH FORMÁCH doc. PharmDr. Zdenka Šklubalová, Ph.D. Farmaceutická fakulta UK 15.10.2015
Lyofilizace (freeze drying) • proces odstranění vody • zmražený produkt • vakuum • sublimace ledu (s→g) bez přechodu do kapalné fáze • 3 separátní etapy • mražení • primární sušení (sublimace) • sekundární sušení (desorpce)
zvýšení stability hydrolyticky degradovatelných látek
význam stoupá
Výhody FD
Nevýhody FD
• snadná manipulace s
• • • • • •
tekutinou • zvýšená stabilita produktu (nepřítomnost vody) • šetrné odstranění vody (bez potřeby zahřátí produktu) • rychlé rozpuštění (rekonstituce) produktu • snazší transport • snazší skladování
čas cena složité zařízení pozorná formulace aseptické procesy sterilní rozpouštědlo pro rekonstituci
Proces lyofilizace zahrnuje • rozpuštění API + PL ve vodě • rozplnění do obalů • částečné uzavření obalu • umístění do komory lyofilizátoru • zmrazení přípravku • předmražení nebo umístění na vychlazené desky • evakuace komory • sušení sublimací • přívod tepla kontaktem • dosušení • uzavření obalu
Mražení • pomalé • velké krystaly • určují rozměr pórů • výhoda pro rychlost odvodu par
• výhoda pro rychlost rekonstituce
• čistý led+ postupně se koncentrující roztok vzorku (vliv na
makromolekuly, buňky) – osmotické děje poškození buněk, denaturace • rychlé – malé krystaly • nižší vliv na biologické materiály
• možnost využití cyklování (annealing) • pomalé chlazení do zmražení • následované rychlým
Další parametry FD • složení vzorku • eutonická teplota (koexistence pevné a tekuté fáze) – krystalické l. • teplota skelného přechodu - amorfní l. • rychlost sublimace • teplota desek • energie pro fázovou změnu (skupenská tepla)
• rychlost odvodu par (vakuum) • hnací silou je rozdíl v tlacích par v sušící a kondenzační části
• tloušťka vrstvy materiálu • teplota kolapsu
• teplota sekundárního sušení
Sublimační teplo • součet čtyř dílčích hodnot • Tepelná kapacita ledu 1,88 kJ/kgK • Měrné teplo tání ledu 334 kJ/kg • Tepelná kapacita vody 4,18 kJ/kgK • Měrné teplo vypařování vody 2260 kJ/kg
Přeměna 1 kg ledu (-20°C) na vodní páru ( 1650 litrů, 100°C) vyžaduje sublimační teplo
• (201,88) + 334 + (4,18100) + 2260 =
3050 kJ
Rizika procesu kvalita produktu • rychlost mražení • teplota během sublimace • nutno udržovat pod eutonickou Te (Tg)
vliv na polymorfii
• vakuum během sublimace • odvod vodních par • !riziko kontaminace olejem z vývěvy • délka celého procesu • zvyšuje rizika poruch zařízení a selhání kvality kontrolovaného prostředí (těsnost zařízení)
Kontrola procesu • DSC, TGA • porézní struktura koláče kopíruje krystalickou strukturu
ledu • specifický povrch SSA (m2/g) • korelace s podchlazením (rozdíl mezi rovnovážnou Tt a T, při které
první led vypadne z roztoku)
• částicová kontaminace – krystalizační jádro
• větší podchlazení vede k • SSA = vyšší porozita (menší krystaly) • prodlužuje se primární sušení • produkt je kompaktnější • zkracuje se sekundární sušení
Patel, SM, Pikal, MJ: AAPS PharmSciTech, 12 (1), 2011, 372-378
LYOFILIZACE PARENTERÁLIÍ
Parenterální přípravky • přípravky k aplikaci injekční jehlou (injekce), příp. kanylou
(infuze) • Lyofilizované produkty • Prášky pro injekce (infuze) • pevné sterilní produkty v konečných obalech • po rozpuštění nebo dispegraci vyhovují požadavkům
• biologická čistota
základní požadavek sterilita, nepyrogenita
• vícedávkové • jednodávkové bez terminální sterilizace
přídavek PML
Požadavky na parenterální přípravky • čirost • Hodnocení kontaminace viditelnými částicemi (2.9.20) • Hodnocení kontaminace částicemi pod hranicí viditelnosti (2.9.19) • využitelný objem (2.9.17) • aktuální acidita • i.v. aplikace - euacidní pH v rozmezí 3 – 10 • i.m., s.c. - izoacidní pH
• osmotický tlak • i.v. – izotonické nebo přiměřeně hypertonické • s.c., i.m. – izotonické
Požadavky na výrobu • požadavek sterility a nepyrogenity produktu vysoké
nároky na výrobní proces • nízká kontaminace (bioburden) před plněním
• filtrace (bakteriální) před plněním, vč. předfiltrace • snižuje množství pyrogenů (vázaných!) • testování kontaminace MIO • testování endotoxinů (G-) - LAL Pseudomonas • čisté prostředí (kontrolované - GMP) • sterilizace lyofilizátoru (CIP/SIP) • aseptická manipulace během procesu • vyrovnání vakua sterilním plynem • aseptické uzavírání obalů
• vhodná jsou prokládací zařízení se zajištěním
aseptického vstupu a výstupu
sp.
Míra rizika • zdrojové suroviny + jejich kvalita rozhodují o kvalitě
(sterilitě, apyrogenitě) produktu • potenciál ke kontaminaci - MIO, spóry, endotoxiny • fyzikální a chemická povaha (cizí příměsi, částicová kontaminace)
• postup přípravy (výroby)
Guidelines pro FD produkty • zahrnují procesní a kontrolní mechanismy pro zajištění • účinku přípravku • sterility přípravku • stability přípravku • důležité aspekty • formulace roztoku (přípravku) • plnění a validace plnícího procesu • sterilizace • parametry lyofilizace (scale up, validace) • zkoušky jakosti finálního produktu
Čisté prostory • aktuální legislativa • ISO 14644 • USP Chapter 797 • FS 209E • GMP Annex 1 (1.3.2009) • VYR 36 (SUKL) (1.3.2009) • klasifikace čistých prostor podle • částicových limitů • MIO kontaminace
ISO 14646, FS Maximální počet částic/m3
ISO 14644 0,1 μm
0,3 μm
0,5 μm
1,0 μm
5,0 μm
5
100 000
10 200
3520
832
29
6
1 000 000
102 000
35 200
8320
290
7
-
-
352 000
83 200
2930
8
-
-
3 520 000
832 000
29 300
FS 209E
0,5m/m3
0,5m/ft3
5
100
3520
100
7
10 000
352 000
10 000
8
100 000
3 520 000
100 000
ISO Class
1 m3 = 35.2 ft3 počet částic 5m se nesleduje
GMP ANNEX 1 VYR 36 Maximální počet částic/m3 Třída
za klidu
za provozu
0,5 μm
5,0 μm
0,5 μm
5,0 μm
A, laminární
3 520
20
3 520
20
B
3 520
29
352 000
2 900
C
352 000
2 900
3 520 000
29 000
D
3 520 000
29 000
nedefinován
nedefinován
Zajištění čistých prostor • znalost potenciálních zdrojů kontaminace • vzduch (HEPA, HVAC) • povrchy, zařízení • personál, oděvy • suroviny • návaznosti a uspořádání prostor • propusti • tlakový gradient • aseptické prostory • konvenční LAC • RABS (restrictive access barrier system)
RABS • redukce počtu MIO až o 6 řádů • možnost sterilizovat prostory pro rozplňování a uzavírání produktů (páry
H2O2, ClO2) • možnost využití CIP/SIP • separace personálu
• kontrolovaná fyzikální a aerodynamická bariéra ISO 5 • critical zone • přetlak (pozitivní) + filtrace HEPA + HVAC = kontrola čistoty ovzduší
(vlastní monitoring)
Sterilizace lyofilizátoru • WFI pro finální mytí a oplachy • ošetření chemickým činidlem (dezinfekce) nepostačuje • ethylen oxid • nezbytná je přítomnost vodní páry (WFI) • biologický indikátor Bacillus atrophaeus (D ≥ 2,5 min) • směs s inertním plynem (CO2, N2) • problémem je vysoká toxicita a rezidua
• sterilizace stlačenou parou (autoklavování) • nejvhodnější
Sterilizace stlačenou parou (SIP) • evakuace komory • přítomnost vzduchu snižuje účinnost páry • průnik páry komorou • validace • využití bioindikátorů (Geobacillus stearothermophillus, D ≥ 1,5 min) • nutné nezávisle registrovat teplotu páry a teplotu uvnitř komory • sterilizace kondenzátoru • rozdíly v hodnotě vakua v komoře a kondenzátoru mohou vyvolat migraci kontaminace • sterilizace mezi šaržemi
Sterilizace produktu • rozpuštění API + PL ve WFI • sterilizace filtrací • membránový filtr s nominální velikostí pórů 0,22 μm • problém u makromolekul, biologického materiálu • zpracování za aseptických podmínek • transport do lyofilizátoru • sušení
• uzavření obalu v atmosféře filtrovaného (sterilního) plynu • HEPA
Kontrola endotoxinů • pyrogeny – bakterie, části nebo produkty metabolismu • nejvyšší potenciál - endotoxiny • jsou produkty metabolismu G- MIO (Psedomonas, Salmonella, E.coli) • lipopolysacharidy – obv. agregáty • monomery velikost cca 10 tis Da – procházejí filtrem 0,22 μm • odstranění obtížné • teplota nad 250°C • nelze aplikovat na pryžové uzávěry
prevence
• ultrafiltrace (separace látek s Mh 6000 – 60000 Da) • lze využít příp. v biotechnologických procesech pro výrobu suroviny
Limitní koncentrace endotoxinu • Limitní koncentrace endotoxinu pro
parenterální podání
• K – prahová pyrogenní dávka
endotoxinu/kg • M – nejvyšší doporučená celková dávka přípravku/kg Způsob podání
Hodnota K (EIU/kg)
intravenózně
5,0
intravenózně - radiofarmaka
2,5
intrathekálně
0,2
K/M
Kontrola konečného produktu • objem a vzhled „koláče“ – objem srovnatelný s
původním přípravkem • struktura a porozita • kolaps struktury (cake collaps) • vyvolaný změnou s → l během sublimace • nekompletní sublimace • změna fyzikálního stavu substance • amorfní vs. krystalický
• rychlost rekonstituce (kompletní) • změna rozpustnosti • ztráta účinnosti LČ
• nekompletní rozpuštění
Př. cefalosporiny nestabilita, degradace
Kontrola konečného produktu • přípravek musí vyhovovat požadavkům na parenterální
injekce nebo infuze • dávková stejnoměrnost - UDU (2.9.40) • hmotnostní
• obsahová (do 25 mg/ 25%)
• stabilita • obsah vlhkosti • doba uchovávání a použitelnosti
• po rekonstituci WFI • test sterility (2.6.1) • test na endotoxiny • LAL test - lyzát amoebocytů ostrorepa Limulus polyphemus nebo
Tachypleus tridentatus
Částicová kontaminace • Přítomnost částic pod hranicí viditelnosti (2.9.19) Léková forma Injekce 100ml Infuze 100ml
Maximální počet nečistot Metoda
10 m
25 m
Rozptyl světla
6000
600
Mikroskopie
3000
300
Rozptyl světla
25
3
Mikroskopie
12
2
objem obal
ml
• Flow imaging particle count test (extrinsic, intrinsic, or
inherent particles)
Příklady parenterálních FD přípravků • léčiva • biotechnologické produkty • diagnostika • antibiotika (peniciliny, cefalosporiny, soli erythromycinu, doxycyklin, chloramfenikol) • hormony • kortikoidy (hydrokortizon succinát, methylprednisolon succinát) • růstový hormon
• krevní deriváty (antihemorr. faktory, aj) • proteiny • enzymy (proteináza, urokináza) • insulin • vakciny
POMOCNÉ LÁTKY
Základní požadavky na přípravky • obsah účinných látek velmi nízký (5-30%) • přípravek musí mít vhodný objem • zpracovatelnost • přípravek musí mít vhodnou strukturu • kompaktní porézní stuktura rozpuštění • přípravek musí mít vhodné vlastnosti • aplikační (podle místa aplikace) • izotonizace • pH
• procesní • ochrana před vlivem mrazu • modifikace Te, Tg
Základní požadavky na PL • kvalita • požadavky PhEur, USP • bezpečnost - deklarace • virová bezpečnost • přenosné choroby (spongiformní encefalopatie TSE, např. BSE) • endotoxiny, pyrogeny (pro parenterália) • vhodné fyz-chem vlastnosti • Te, Tg • krystalická/amorfní struktura • chuť (pro p.o.)
www.ema.europa.eu • výroba a kontrola výchozích surovin • pro humánní a veterinární přípravky • přenosná spongiformní encefalopatie (TSE) • největší rizika přenosu ze skotu, ovcí, koz, jelení zvěře • šíření z krmiva vyrobeného z infikovaných jedinců • pro LP ze surovin získaných z živočichů • mozek, mícha, hypofýza, ... • slezina, brzlík, GIT, mléčné žlázy,... kolagen,
• málo vnímavá jsou • prasata, ptáci • ryby, psi, králíci
• nesnadná diagnostika • in vitro, in vivo • intenzivní výzkum detekčních metod
želatina, albumin, enzymy, AMK, (laktosa, glycerol) známo za měsíce až roky!!
Přehled pomocných látek • závisí na lékové formě (parenterália vs. tablety) • rozpouštědla na povaze API • strukturotvorné látky (plniva, bulking) • mannitol, laktosa, glycin
• stabilizátory • kryoprotektiva (cukry, PEG) • lyoprotektiva (sukrosa, trehalosa) • modifikátory Tc - prevence kolapsu (mannitol, glycin)
• antiagregancia (PS 20, PS 80, poloxamer 188) • minimalizace povrchové adsorpce (albumin, PS)
• modulátory pH • izotonizační látky • protimikrobní látky
Koncentrace aditiv • Ochrana proteinů • nabité nebo obecně polární proteiny • molární poměr s ochranným sacharidem • cukr amorfní podobě, nebo snižovat tendenci ke krystalizaci • sacharosy + mannitol • vhodné také proteiny – želatina, albumin
• Stabilizace struktury – obvykle se doporučuje poměr 1:1 • Vazba molekul vody • Př: rekombinantní monoklonální protilátka • v molekule 500 vazebných míst pro vodu • nejlepší stabilizační efekt zjištěn s koncentrací 20 mM sacharosy, 20 mM trehalosy nebo 40 mM mannitolu
Teploty eutonické (krystalické) Fosforečnan sodný
- 0,5C
Mannitol
- 1,5C
Chlorid draselný
-10,7C
Chlorid sodný
-21,2C
Chlorid hořečnatý
-33,6C
Chlorid vápenatý
-51,0C
Teploty kolapsu (amorfní) Dextran
- 9C
Povidon
- 23C
Laktosa
- 32C
Sacharosa
- 33C
Glukosa
- 41C
Sorbitol
- 45C
KAŽDÝ PŘÍPRAVEK JE UNIKÁTNÍ svým složením svými vlastnostmi lyofilizace makromolekul je vždy výzva!
Rozpouštědla • voda je vhodná pro růst MIO • voda na injekci (WFI) • sterilita, nepyrogenita (limit obsahu max.0,25 EIU/ml) • obsah iontů (konduktivita – T, pH) • nejen vehikulum, ale také veškeré mytí a oplachy zařízení a pomůcek
Strukturotvorné látky • množství účinné látky - plniva (bulking) • objem a pevnost produktu zajistí PL • snadná krystalizace • mannitol (současně sladidlo + izotonizace) • glycin (současně pufruje, antioxidant) • snadno rozpustný ve vodě • polymorfní
• laktosa – nízká teplota kolapsu • redukující disacharid – může reagovat s aminy • stabilita stoupá při vyšší krystalinitě
Kyoprotektiva • chrání před vedlejším účinkem mrazu • kryoprotektiva • PL chrání protein mechanismem zvýšení termodynamické stability hydratovaného proteinu
• cukry -sacharosa, laktosa, trehalosa • polyoly – glycerol, mannitol, sorbitol • AMK – Gly, Ala, Lys
• polymery – PEG, dextran, PVP
Lyoprotektiva • chrání proteiny před vedlejším účinkem sušení • stabilizují při uchovávání • mechanismus • amorfní struktura během mrazové sublimace i po ní
jakákoliv krystalizace vede ke ztrátě efektu
• sklovitá matrice • redukce pohybu molekul proteinu • redukce interací molekul proteinu (zábrana agregace)
• cukry -sacharosa, laktosa, trehalosa
Tg
• proteiny - želatina přídavek polymeru (Dextran, PVP) může modifikovat krystalizaci
Tg • tvoří rozhraní mezi sklovitým a kaučukovitým stavem
materiálu • pod Tg se stává křehký • nad Tg se stává měkký až tekutý
• při Tg – změny mechanických (např. modul pružnosti) i
elektrických vlastností • není to stálá charakteristika • závisí na Mh • flexibilitě řetězce (větvené mají Tg) • tepelné historii polymeru a stáří • rychlosti ohřevu (chlazení)
Vliv molární hmotnosti na Tg • Tg je úměrná Mn polymeru (číselně-střední) • závislost popisuje empirická rovnice Flory-Fox • nižšší Mn více FV nižší Tg • platí nejlépe při úzké distribuci Mn • teorie „free volume“ • FV klesá při ochlazování • při Tg dojde ke změně konformace
• modifikace rovnice – čtverec násobku MnMw • v reálu má Mw a Mn menší vliv – se změnou se více
projevují fyzikální změny chování polymeru
Modifikace Tg • využití plastifikace polymeru • plastifikátor – nízkomolekulární látka • snižuje se Tg – redukují křehkost • vhodnou směs lze stanovit výpočtem z hmotnostní frakce
složek (w) a jejich Tg
1 w1 w 2 Tg Tg1 Tg 2
Foxova rovnice
• řeší poměrně přesně situace s ovlivněním Tg
Modifikátory Tc • teplotu Tg a Tc ovlivňuje • složení (podíl složek) • obsah vody (plastifikátor) – snižuje Tg • koloidy Tc snižují – možnost sušit při vyšší T (rychleji) • dextran (Tc -10°C) • hydroxyethylškrob (Tc -10°C) • želatina (Tc -8°C)
• krystalické látky Tc zvyšují
Sacharosa (sacharidy) • disacharid, β-D-fruktofuranosyl α-D-glukopyranosid • bílý, krystalický prášek (monoklonální) • velmi snadno rozpustná ve vodě • netaje, ale podléhá degradaci - karamelizace • neredukující cukr • pro parenterália max. 2,5 EIU/g (nad 10%) • metabolismus - v duodenu působením enzymů
(sacharáza, hydrolázy) • kariogenní • riziko obezity při nadužívání • diabetes mellitus
Sacharosa (sacharidy) • snižování obsahu vody (sušení, mražení) amorfní
sklovitá (gelovitá) struktura • vysoká viskozita • nízká pohyblivost molekul
• sklovitá struktura • hygroskopická lepivá • tendence krystalizovat (nejstabilnější forma) • voda (plastifikátor) snižuje stabilitu sklovité struktury a
produktu • tendence k hnědnutí (karamelizaci) • podpora chemických degradačních procesů
D-Mannitol • cukerný alkohol, izomer sorbitolu na C2 • rozpustný ve vodě (22 g/100 ml) – odnímá teplo (chladivý efekt) • nehygroskopický! • řada polymorfů, nejstabilnější β-forma • při nižší koncentraci se tvoří přednostně δ-polymorf, zatímco při vyšší β • Vyšší rychlost mražení podporuje pak vznik polymorfu α. , pomalé mražení polymorf δ
• Tt 165-170°C • pro parenterália max. 4 EIU/g (do 10%), 2,5 EIU/g (nad 10%) • sladivost 0,5 • nekariogenní – zubní přípravky, pediatrie
• využití v LF • osmotický efekt – osmoterapie (infuze), laxativní (GIT) • plnivo tablet • prášek – pro vlhkou granulaci • granulát – pro přímé lisování • stabilní, nereaktivní • neredukující (Maillardova reakce) – nezpůsobuje změny barvy
bezpečný - denní dávka není stanovena
D-Mannitol • v lyofilizátech je obsažen ve většině komerčních přípravků • 20-90% • dostupný v nepyrogenní verzi • mechanicky odolný, homogenní produkt • limit redukujících látek (≤ 0,2%) – mohou způsobit oxidaci peptidů • riziko vysolení chloridem sodným (např. při mražení)
D-Mannitol • Krystalizuje jako anhydrát • při nevhodných podmínkách se tvoří hydrát mannitolu • nestabilní a má tendenci ke konverzi na anhydrát při zvýšení teploty a stabilitním problémům • Krystalizace je závislá na • Rychlosti mražení • obsahu vlhkosti • koncentraci ostatních aditiv (pufry – fosforečnany, citráty, tenzidy,
sacharosa, trehalosa, příp. polymery) • sacharosy a mannitolu 1:4 - prevence
• tvorbu anhydrátu podporuje • nejlepší cestou je cyklované mražení • sekundární sušení při 40°C nebo vyšší • mannitol + amorfní substance, např. glycin. • glycin má nižšší potenciální energii potřebnou pro krystalizaci. tuto
krystalizaci mohou inhibovat soli, např. fosfát sodný
Laktosa • β-D-galaktopyranosyl-(1→4)-D-glukosa • bezvodá forma (hygroskopická) - α nebo β-forma, směs • monohydrát - α-forma • krystalická (forma závisí na izomeru a metodě přípravy, prejově sušená
též amorfní) • snadno rozpustná (pomalu)
• bezpečná (laktosová intolerance) • plnivo • zlepšuje kohezi materiálu
α,α -Trehalosa • disacharid • (α-D-glukopyranosyl α-D-glukopyranosid) • existují i formy α,β nebo β,β
• výskyt v těle bakterií, kvasinek, hub, prvoků, hmyzu, hlístic • pomáhá přečkat nepříznivá období (mráz, sucho)
• enzymatická produkce ze škrobu nebo maltosy
• vlastnosti • krystalická látka (orthorhombická struktura krystalu), dihydrát • Tt 203°C (anhydrát), 97°C (dihydrát) • bílá, rozpustná ve vodě (za tepla), stabilní (pH, teplota), cca 90% sladkosti sacharosy, barevně stálá • neredukující (neúčastní se Maillardovy reakce) • nízká hygroskopičnost • pro parenterália max. 4 EIU/g (do 10%), 2,5 EIU/g (nad 10%) • 10% roztok cca izotonický
α,α -Trehalosa • metabolizována v tenkém střevě trehalázou na glukosu • popsány příhody malabsorpce, intolerance (individuální) • kariogenní aktivita – nižší než sacharosa • akutní toxicita – 16 g/kg pro myši • nemá teratogenní ani mutagenní aktivitu
α,α -Trehalosa • povolena od 1991 v UK jako kryoprotektivum • 5% /přípravek • 2000 - charakterizována jako „safe“ (GRAS) • pro potravinářské účely • denní dávka není specifikována • akceptována po celém světě • sladidlo obvykle do cca 20% • ochrana před hnědnutím bonbony až 80% • ochrana před ztrátou vůně a chuti • ochrana před degradací škrobu v potravinách
α,α -Trehalosa • tepelně stabilní sklovitá struktura • schopna kontrolovat aktivitu vody • netvoří anhydrát, ale dihydrát (přednostně) • stabilizuje proteiny proti denaturaci • chrání proteiny před degradačními reakcemi • mechanismy (hydrofilní matrice) • redukce mobility molekul (viskozita matrice) • kinetiku reakcí • prevence destruktivních reakcí
• redukce aktivity vody • váže vodu v dihydrátu snížení degradačních reakcí
• imobilizuje aktivní koncové skupiny • snižuje vznik vazeb mezi biologicky aktivními molekulami (bílkoviny, FL) • vzniklé vazby (vodíkové můstky) vedou ke ztrátě bioaktivity
• je nehygroskopická (uchovávání)
Modulátory pH • pufry – obvykle fyziologické • acetáty (sodný) • citráty (sodný) • fosfáty – fosforečnan sodný, K2HPO4 • kyselina fosforečná • aminokyseliny – L-His, Gly, L-Ala • glutamáty
• TRIS (trometamin)
Izotonizační přísady • srovnatelné osmotické vlastnosti jako fyziologické tekutiny
izotonizace • chlorid sodný
• nízká Te (-21,2°C) • elektrolyt – vysolení makromolekul
• mannitol • glycerol • současně může modifikovat rozpustnost • hygroskopický
Protimikrobní látky Lyofilizované parenterální přípravky neprocházejí terminální sterilizací požadavek přídavku PLM • zabraňují sekundární
kontaminaci • limit koncentrace • • • • • • •
benzylalkohol do 3% fenol 0,002 – 0,5% m-kresol 0,25 - 0,3% fenoxyethanol 0,5 – 1,0% chlorbutanol 0,25 - 0,5% m-paraben 0,02 – 0,2% BAC 0,01%
• kombinace • snižuje rizika dráždivosti a toxicity • zvyšuje protiMIO aktivitu
• riziko interakce s proteiny • růstový hormon • vakcíny
LYOFILIZACE TABLET
Perorální lyofilizáty (Lyophilisata peroralia) • tablety určené k podání do úst nebo dispergaci
(rozpuštění) ve vodě před podáním • oblíbená LF • stabilita
• dávka
rozpouštění v ústech nebo kapalině
• základní požadavky • MIO nezávadnost – max. 103 TAMC, 102 TYMC, nepřítomnost EC • palatabilita • manipulovatelnost • pevnost, vyjmutelnost z blistrů • lyofilizát nesmí ulpívat na stěnách blistru
• disoluční profil
ODT
Výhody lyofilizovaných tablet • rychlý rozpad • možnost dosáhnout tzv. „fast dissolving“ efektu • rychlý nástup účinku (analgetika, antipyretika, schizofrenie) • obchvat jaterního metabolismu • není třeba zapíjet (cestování) • zvýšení compliance
■ nákladný postup ■ není vhodné pro vysoké dávky API ■ mechanické vlastnosti ■ chuť ■ prevence vlhkosti (skladování)
Požadavky na perorální lyofilizáty • doba rozpadu tablet • oděr • friabilátor – obtížné (vlhkost), měkké tbl. • dávková stejnoměrnost • hmotnostní stejnoměrnost
+ zkoušky neobalených tablet
• 20 jednotek, stanoví se odchylky od průměrné hmotnosti • obsahová stejnoměrnost • stanovení obsahové látky
• obsah vlhkosti (nejvýše 5%) • ztráta sušením; vakuové sušení nad oxidem fosforečným; semimikrostanovení vody
Výsledky experimentálního výzkumu • TAČR (Vývoj lyofilizovaných tablet pro alergenové
vakcíny) • testována řada pomocných látek
• Carrageenan GP-379NF Gelcarin, der. celulosy, maltodextrin, PVP,
mannitol, sacharosa, želatina, maltodextrin
vzhled tbl, kompaktnost, vyjmutelnost z blistru • želatina + sacharosa • lepivost tbl ovlivněna koncentrací sacharosy • želatina + mannitol • obsah želatiny ovlivňuje pevnost a rozpad tbl. • nejlépe poměr 3/6
Výsledky experimentálního výzkumu • rozpadavost • rozpadavost lyofilizovaných tablet • 6 tbl., do 3 min, 15ºC až 25ºC
• rozpadavost neobalených tablet • 6 tbl., do 3 min, 37ºC • rozpadavost rektálních a vaginálních
přípravků • 37ºC
• obsah vlhkosti • ztráta sušením, sušení nad oxidem fosforečným • účinná látka • ELISA
• ostatní zkoušky • hmotnostní proměnlivost. DSC, TGA, SSA
Závěr • incidence využití FD neustále stoupá • parenterália • FD proteinů může vést k denaturaci a agregaci ztrátě aktivity • formulace přípravku vyžaduje pečlivou volbu PL • tablety • modifikace uvolňování • pohodlná aplikace
• nastavení podmínek výroby vyžaduje pečlivé
vyhodnocení všech procesních proměnných a rizik
DĚKUJI ZA POZORNOST
[email protected]
