2011. 01. 27.
Interferáló tényezők hatása a laboratóriumi eredmények értelmezésére Valczer Erzsébet Szegedi Tudományegyetem Szent--Györgyi Albert Klinikai Központ Szent Laboratóriumi Medicina Intézet
2011. január 27.
Interferáló tényezők
A laboratórium feladata Analitikai interferencia: a vizsgálandó mintában olyan
A diagnosztikai megbízhatóság érdekében a laboratórium megbízható
anyag van jelen, amely a meghatározandó komponens mérésére zavaró hatással van, a meghatározás (általában koncentráció vagy aktivitás mérés) során az eredmény értékét pozitív vagy negatív irányban változtatja meg.
leleteket adjon ki, megbízható (pontos,
Exogén interferáló tényezők
torzítatlan) eredményeket szolgáltasson
pl. gyógyszerek, adalékanyagok, mátrix hatás
a gyógyító orvos számára.
Endogén interferáló tényezők pl. lipidek, hemolízis, bilirubin, paraproteinek
Észlelés a laboratóriumi preanalitikai fázisban a minta színe alapján a beküldőtől származó információ alapján
az analitikai fázisban
Teendők a laboratóriumi preanalitikai fázisban ●
a mérőműszer jelzi az interferenciát a mérőműszer méri az interferáló tényező szintjét a mérési eredmény interferáló tényező jelenlétére utal
a laboratóriumi posztanalitikai fázisban a LIR jelzi az interferenciát az eredmények validálásakor klinikai képbe nem illő eredmény esetén a beküldőtől származó információ alapján
●
●
minden mintát érkezés után vizuálisan ellenőrizzünk a minta állapotát dokumentáljuk az informatikai rendszerben új mintát kérünk, nem végezzük el a vizsgálatot, ha a zavaró hatás miatt klinikailag releváns eltérés várható az eredményekben
1
2011. 01. 27.
Teendők
Teendők
a laboratóriumi analitikai fázisban
a laboratóriumi posztanalitikai fázisban
●
az interferáló tényező által nem érintett vizsgálatokat végezzük el
●
● ●
az interferáló tényező által érintett vizsgálatokat előkezelés után vagy más vizsgálati módszer alkalmazásával végezzük el ●
●
●
a vizsgálatkéréseket elvégezzük, a mérőműszer jelzi az interferenciát
●
a vizsgálatkéréseket elvégezzük, a mérőműszer minden mintában méri az interferáló tényező szintjét
Exogén interferáló tényezők
●
a minta állapotát tüntessük fel a leleten ha az interferenciát nem tudjuk kiküszöbölni, eredményt nem tudunk kiadni, ennek ténye megjegyzésként kerüljön rá a leletre az előkezelés ténye a leleten jelenjen meg más vizsgálati módszer alkalmazását tüntessük fel a leleten az interferencia által érintett vizsgálatokat jelezzük a leleten
Antikoaguláns terápia monitorizálása
Gyógyszerek APTI megnyúlást okoz:
I10H0: Magasvérnyomás-betegség (elsődleges)
Intrinsic faktorok hiánya, csökkent vagy kóros volta
Syncumar
Prothrombin (sec)
INR
APTI (sec)
33,7
3,26
89,7
I8020: Az alsó végtagok mélyvénáinak gyulladása és…
Alvadási faktorok ellen termelődött inhibítorok
Clexan
Lupus anticoaguláns vagy foszfolipid ellenes antitestek
Prothrombin (sec)
INR
APTI (sec)
18,1
1,47
47,6
I21000: Heveny elülső fali transmuralis szívizom elhalás
Súlyos K-vitamin hiány
Prothrombin (sec)
INR
APTI (sec)
Heparin
16,7
1,42
> 180
LMWH
14,3
1,16
38,2
Syncumar terápia K9220: Gastrointestinális vérzés k.m.n.
Heparin hatás Aspirin
Rossz vér : citrát arány
Prothrombin (sec)
INR
APTI (sec)
17,9
1,55
70,7
Hemolízis
Heparin terápia vagy heparin kontamináció?
Exogén interferáló tényezők Adalékanyagok
Hematológia: az automatizált mérés korlátai PREANALITIKAI HIBA KIZÁRÁSA
Kálium-EDTA alvadásgátló anyagot tartalmazó mintából végezzük a méréseket
TROMBIN IDŐ MÉRÉSE
Az adalékanyag hatására thrombocyta aggregátumok alakulnak ki a mintában a vizsgált személyek kb. 0,1%-nál
A hematológiai automata által kiadott, Coulter-elven mért POLYBRÉNES TROMBIN IDŐ MÉRÉSE
thrombocyta szám a valódi értékhez képest kisebb lesz
Az EDTA hatásának igazolása vagy kizárása: vérkenet mikroszkópos vizsgálata, thrombocyta szám meghatározása nátrium-citrát alvadásgátló anyagot tartalmazó mintából is
2
2011. 01. 27.
EDTA-indukált pseudothrombocytopenia
Thrombocyta szám: 49 Giga/L Előző thrombocyta szám: 114 Giga/L
Probléma van a laborban az ion méréssel? V iz s g á la t
L IR elő zm én y 2 0 0 8 .0 8 . 0 1 .
E lfo g a d h a tó k a z ered m ények?
V a l id á l t eredm ények
Ö s s zb i lir u b in (µ m o l/ l)
1 1 ,2
1 4 ,0
1 7 ,2
G O T (U /l)
29
28
36
G P T (U /l)
29
29
31
G G T (U /l)
30
21
27
K a rb a m id (m m o l /l )
8 ,3
7 ,2
7 ,1
K r e a t in in ( µ m o l/ l )
89
78
83
A lb u m i n (g /l )
49
39
45
-
0 ,5
2 ,2 2
K á lc iu m
(m m o l/l)
G l ü k ó z ( m m o l / l)
N á tr iu m K á l iu m
(m m o l/l) (m m o l/l)
6 ,6
5 ,8
5 ,7
144
217
141
4 ,1
3 7 ,5
4 ,2
Sz. J. 74 éves férfi
Lehetséges magyarázatok
Vizsgálat
Glükóz
LIR előzmény 2008.08.01.
Elfogadhatók az eredmények?
Validált eredmények
6,6
5,8
5,7
Nátrium
(mmol/l)
144
217
141
Kálium
(mmol/l)
4,1
37,5
4,2
Kálcium
(mmol/l)
-
0,5
2,22
(mmol/l)
Nátrium-fluorid Kálium-oxalát
Nátrium-fluorid / kálium-oxalát adalékanyagot tartalmazó csőből mintát töltöttek át a szérumos csőbe (szürke kupakosból a sárga/piros kupakosba)
Nátrium-heparin
Készülékre lehívott on-line munkalista esetén rossz pozícióba tették be a nátrium-fluorid / kálium-oxalát adalékanyagot tartalmazó szürke kupakos csövet
Kálium-EDTA
Nátrium-citrát
Mintaátvételekor a fluoridos és a szérum mintának megfelelő bárkódos cimkéket egymással felcserélve ragasztották fel a mintavételi csövekre
Syncumart szed, háziorvosa rendszeresen küldi ellenőrzésre, jól beállított a terápia. Kémiai, hematológiai, vizelet eredményei korábban nem voltak, kezelőorvosa ezért megkéri ezeket a vizsgálatokat is a laboratóriumtól. Jelenlegi eredményei többnyire referencia tartományon belüliek, triglicerid kissé emelkedett.
Klinikai képbe nem illő eredmények Kálium: 31,6 mmol/l Kálcium: < 0,05 mmol/l Alkalikus foszfatáz: < 1 U/l
Mi történt? K 2-EDTA-s csőből mintát töltöttek át a szérumos csőbe. A labor ismétlést javasol.
Endogén interferáló tényezők Lipémia ♦ Detektálás: Vizuális megfigyelés: a szérumban, plazmában szabad szemmel látható, ha a triglicerid koncentráció > 3,4 mmol/l Műszer: abszorbancia mérés a turbiditás mértékének megítélésére λ>600 nm-nél
♦ Mechanizmus: Spektrofotometriás vizsgálatok: fényszórás, abszorpció; lángfotometria, indirekt meghatározások: térfogat-kihasználás hatás; inhomogenitás; fizikai-kémiai mechanizmus: lipofil összetevők kivonása a reakcióból
♦ A lipémia okozta interferencia kiküszöbölése: Vérvétel előtti étrendi előírások betartása Lipoproteinek kivonása a szérumból, plazmából előkezeléssel (centrifugálás, extrakció, precipitáció)
3
2011. 01. 27.
Hemolízis ♦ Detektálás: Vizuális megfigyelés: a szérumban, plazmában szabad szemmel látható, ha a szabad hemoglobin koncentráció > 300 mg/l Műszer: spektrofotometriás, bikromatikus mérés
♦ Mechanizmus: Az extracelluláris térben megemelkedik pl. a kálium, LDH koncentrációja az intracelluláris térből kiáramló komponensek miatt; interferencia az alkalmazott analitikai módszerrel
♦ A hemolízis okozta interferencia kiküszöbölése: Mintavételi eljárás standardizálása Mintavételt végzők rendszeres képzése Alkalmazott vizsgálati módszer módosítása Más vizsgálati módszer alkalmazása Vizsgálatok elvégzése a minta előkezelése után
Icterus ♦ Detektálás: Vizuális megfigyelés: nem elég érzékeny módszer a bilirubinémia felismerésére Műszer: abszorbancia mérés 450-505 nm között ♦ Mechanizmus: Spektrális interferencia 400-540 nm között Kémiai interferencia pl. peroxidáz katalizált reakciókban ♦ Az icterus okozta interferencia kiküszöbölése: Spektrális interferencia kiküszöbölése vak méréssel Kémiai interferencia kiküszöbölhető néhány metodika esetén Vizsgálatok elvégzése a minta előkezelése után
Hemoglobin mérés Módszer: SLS – hemoglobin komplex formájában fotometriásan Mérési hullámhossz: 555 nm Mért paraméter: Hemoglobin
Hemoglobin mérést zavaró tényezők miatt a hemoglobin, MCH és MCHC eredmény nem adható ki.
Számított paraméterek: MCH átlagos vörösvérsejt hemoglobin tartalon
MCHC átlagos vörösvérsejt hemoglobin koncentráció
Szérum index táblázat
4
2011. 01. 27.
A Sürgősségi Betegállátó Osztályról érkezett szérum minta centrifugálás után szemmel láthatóan erősen hemolizált. Az automata által mért szérum indexek: I index: 13 H index: 205 L index: 10
Szérum indexek alkalmazása
Kiadjuk az eredményeket? Új mintát kérjünk? Automatikusan mérhető minden szérum minta esetén Minimális minta és reagens igény A szérum index táblázat alkalmazásával lehetővé válik az interferáló tényezők objektív megítélése Az eredményeket validáló diplomások egységesen dönthetnek arról, hogy kiadható-e az eredmény vagy sem Az eredmények megbízhatóak a gyógyító orvos számára az interferáló tényezők esetén is
Köszönöm a figyelmet!
5
