ADLN PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA SKRIPSI

ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA SKRIPSI MORFOLOGI, ANATOMI, DAN SKRINING FITOKIMIA DAUN SEMANGGI (Marsilea crenata Presl.) HASIL BUDIDAYA DI DAERAH RUNGKUT SURABAYA

MA’RIFATUS SHOLECHA

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS AIRLANGGA DEPARTEMEN FARMAKOGNOSI DAN FITOKIMIA SURABAYA 2012

i SKRIPSI

MORFOLOGI, ANATOMI, DAN ... MA’RIFATUS SHOLECHA

ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH

Demi

perkembangan

ilmu

pengetahuan,

saya

menyetujui

skripsi/karya ilmiah saya, dengan judul : “MORFOLOGI, ANATOMI, DAN SKRINING FITOKIMIA DAUN SEMANGGI (Marsilea crenata Presl.) HASIL BUDIDAYA DI DAERAH RUNGKUT SURABAYA” untuk dipublikasikan atau ditampilkan di internet, digital library Perpustakaan Universitas Airlangga atau media lain untuk kepentingan akademik sebatas sesuai dengan Undang-Undang Hak Cipta. Demikian pernyataan persetujuan publikasi skripsi/karya ilmiah ini saya buat dengan sebenarnya.

Surabaya, 12 Oktober 2012

Ma’rifatus Sholecha NIM: 050810199

ii SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA LEMBAR PERNYATAAN

Saya yang bertanda tangan di bawah ini, Nama

: Ma’rifatus Sholecha

NIM

: 050810199

Fakultas

: Farmasi

menyatakan dengan sesungguhnya bahwa hasil skripsi/tugas akhir ini dengan judul: MORFOLOGI, ANATOMI, DAN SKRINING FITOKIMIA DAUN SEMANGGI (Marsilea crenata Presl.) HASIL BUDIDAYA DI DAERAH RUNGKUT SURABAYA adalah benar-benar merupakan hasil karya saya sendiri. Apabila di kemudian hari diketahui bahwa skripsi ini menggunakan data fiktif atau merupakan hasil dari plagiarisme, maka saya bersedia menerima sanksi berupa pembatalan kelulusan dan atau pencabutan gelar yang saya peroleh.


Ma’rifatus Sholecha NIM: 050810199

iii SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA Lembar Pengesahan

MORFOLOGI, ANATOMI, DAN SKRINING FITOKIMIA DAUN SEMANGGI (Marsilea crenata Presl.) HASIL BUDIDAYA DI DAERAH RUNGKUT SURABAYA SKRIPSI Dibuat Untuk Memenuhi Syarat Mencapai Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Airlangga Surabaya 2012 Oleh : MA’RIFATUS SHOLECHA 050810199 Disetujui oleh :

Pembimbing Utama,

Pembimbing Serta,

Prof. Dr. Mangestuti Agil, Apt. M.S. NIP. 195004221980022001

Dr. Wiwied Ekasari, Apt. M.Si. NIP. 196901221994032001

iv SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA KATA PENGANTAR Puji syukur ke hadirat Allah SWT, karena berkat rahmat dan ridloNya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “MORFOLOGI, ANATOMI,

DAN

SKRINING

FITOKIMIA

DAUN

SEMANGGI

(Marsilea crenata Presl.) HASIL BUDIDAYA DI DAERAH RUNGKUT SURABAYA”, untuk memenuhi syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Airlangga. Dalam penyusunan skripsi ini penulis telah memperoleh banyak bantuan dari berbagai pihak. Oleh sebab itu, pada kesempatan ini penulis menyampaikan rasa terima kasih yang tak terhingga atas kesempatan, bimbingan, arahan, doa, dukungan, kerjasama, bantuan, dan ilmu yang dibagikan kepada: 1.

Prof. Dr. Mangestuti Agil, Apt., M.S selaku pembimbing utama

2.

Dr. Wiwied Ekasari, Apt., M.Si selaku pembimbing serta

3.

Tri Widiandani, SSi., Apt., Sp. FRS., selaku dosen wali

4.

Dekan Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

5.

Ketua Departemen Farmakognosi dan Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

6.

Seluruh staf laboratorium di Departemen Farmakognosi dan Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

7.

Staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

8.

Bapak Imam Prayitno, Ibu Sumarmi, adikku Hadi, dan keluarga besar.

9.

Seluruh mahasiswa angkatan 2008

10. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu.

v SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pengembangan ilmu pengetahuan khususnya dalam bidang kefarmasian.


Penulis

vi SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA RINGKASAN MORFOLOGI, ANATOMI, DAN SKRINING FITOKIMIA DAUN SEMANGGI (Maresilea crenata Presl.) HASIL BUDIDAYA DI DAERAH RUNGKUT SURABAYA Ma’rifatus Sholecha Marsilea crenata Presl. atau yang umum dikenal dengan nama semanggi adalah salah satu tumbuhan dari suku Marsileaceae yang hidup secara liar di lingkungan perairan seperti kolam, sawah, danau, dan rawarawa. Daun dari semanggi sering dimanfaatkan oleh masyarakat Surabaya sebagai bahan makanan yang dikenal sebagai pecel semanggi, khas dari Surabaya Dari penelitian yang dilakukan oleh Laswati (2007) diketahui bahwa ekstrak etanol daun semanggi terbukti dapat mencegah osteoporosis dengan mekanisme penghambatan ketidakseimbangan remodeling tulang pada hewan coba betina dan perempuan pasca menopause. Hal ini menunjukkan bahwa semanggi mempunyai khasiat sebagai pencegah osteoporosis. Sebagai makanan yang dikonsumsi oleh masyarakat, kualitas dari semanggi harus diperhatikan agar kandungan yang terdapat didalamnya tetap dapat memberikan manfaat. Semanggi merupakan tanaman liar yang belum dibudidayakan. Bahan baku semanggi yang selama ini digunakan oleh masyarakat sebagai makanan dan digunakan sebagai bahan penelitian merupakan bahan baku yang didapatkan dari tumbuhan liar sehingga keseragaman mutu kandungan semanggi tersebut tidak dapat dijamin. Berdasarkan hal tersebut, maka perlu dilakukan usaha budidaya semanggi untuk mendapatkan kualitas semanggi yang baik yang dapat dimanfaatkan baik sebagai bahan makanan maupun bahan baku obat tradisional. Sebelum dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai potensi yang dapat dikembangkan dari manfaat semanggi, perlu dilakukan penelitian untuk mendapatkan data ciri anatomi, morfologi, dan kandungan golongan senyawa untuk menjamin keaslian sampel tanaman dan mengidentifikasi kebenaran dari serbuk simplisia agar terhindar dari pemalsuan. Oleh karena itu, perlu dilakukan penelitian berupa studi mikroskopis, studi makroskopis, dan skrining fitokimia semanggi. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui ciri morfologi dan anatomi dari M. crenata Presl. (semanggi) hasil budidaya sehingga terjamin kualitas dan keasliannya, mengetahui golongan senyawa yang terkandung dalam tanaman M. crenata Presl. (semanggi) hasil budidaya

vii SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA dengan metode skrining fitokimia, dan mengetahui perbedaan antara M. crenata Presl. (semanggi) hasil budidaya dengan M. crenata Presl. (semanggi) liar dengan metode analisis KLT-densitometri. Pemeriksaan makroskopis yang meliputi habitus, jenis daun, filotaksis daun, bentuk daun, pangkal dan ujung daun, permukaan daun, ukuran daun, tepi daun, susunan tulang daun, bentuk batang, warna batang, kulit batang, arah tumbuh batang, dan bentuk akar diamati secara visual dan didokumentasikan dengan menggunakan kamera digital Olympus VG-110 dengan perbesaran 2x. Sedangkan untuk pemeriksaan mikroskopis yang meliputi pengamatan melintang dan membujur daun, tangkai daun, stolon, dan akar serta pengamatan fragmen-fragmen pengenal yang spesifik dalam serbuk simplisia menggunakan mikroskop trinokuler Olympus BXA41TF dengan perbesaran 100x dan 400x. Untuk pemeriksaan golongan senyawa yang terkandung dalam semanggi dapat diketahui melalui skrining fitokimia yang terdiri dari reaksi warna dan kromatografi lapis tipis. Ciri morfologi yang diperoleh dari penelitian ini adalah berupa herba yang tumbuh di lingkungan air tawar seperti persawahan, daun merupakan daun majemuk dengan empat helai anak daun yang saling berhadapan berbentuk segitiga terbalik, tepi daun rata atau bergelombang, susunan tulang daun berbentuk seperti kipas, terdapat bulu halus pada permukaannya. Daun yang masih muda menggulung seperti ganggang biola yang merupakan ciri dari tumbuhan paku, serta daun akan menutup pada saat matahari tenggelam dan membuka kembali pada pagi hari. Batang berupa stolon berwarna coklat, berbentuk bulat, tidak berkayu, berbulu halus, dan pada setiap nodusnya keluar akar serabut berwarna coklat dan tangkai daun yang berwarna hijau dan berbulu halus. Dari pengamatan secara mikroskopis didapatkan ciri anatomi yang khas dari semanggi yaitu stomata tipe anisositik pada epidermis atas dan bawah daun dengan bentuk sel tetangga bergelombang, trikoma multiseluler berbintik-bintik pada permukaan daun dan tangkai daun, stomata tipe parasitik pada tangkai daun. Pada pengamatan sayatan melintang daun tampak adanya penonjolan epidermis yang disebut papila. Terdapat rongga udara pada sayatan melintang tangkai daun dan stolon, berkas pengangkutan dengan tipe amfikribal, penebalan xylem bentuk spiral, dan minyak atsiri pada daun, tangkai daun, maupun stolon. Berdasarkan hasil skrining fitokimia diketahui bahwa semanggi mengandung golongan senyawa polifenol, steroid bebas, saponin, dan minyak atsiri. Dari hasil analisis semi-kuantitatif KLT-densitometri diketahui bahwa terdapat perbedaan luas area yang menunjukkan perbedaan konsentrasi antara semanggi budidaya dan semanggi liar.

viii SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA ABSTRACT MORPHOLOGICAL, ANATOMICAL, AND PHYTOCHEMICAL SCREENING OF SEMANGGI (Marsilea crenata Presl.) LEAF CULTIVATED IN AREA RUNGKUT SURABAYA Ma’rifatus Sholecha Marsilea crenata Presl. is one of the plants in Indonesia that commonly used as food. M. crenata Presl. is potential to prevent osteoporosis. Before further investigation of the potential benefits that can be developed from M. crenata Presl., research needs to be done to get data of the anatomy, morphology, and contents of the chemical compounds. This examination is needed to avoid possible mistakes in taking the plant and to avoid possible false crude drug. The result showed that M. crenata Presl. is a herb that grows in freshwater environments such as ricefield, has compound leaves that consists of four leaves, green, smooth feathers on the surface. The leaves will close in the evening and open again in the morning. M. crenata Presl. has brown stolon and brown hairy roots. Result from microscopical anatomy found anisocytic stomata with three or more neighbouring cells in different size on the upper and lower epidermis, multicelluler trichomes, volatile oil drops, xylem with spiral-form thickening. The stem and stolon have paracytic stomata, volatile oil drops, and multicelluler thrichomes on the epidermis cell, xylem with spiral-form thickening, and amphicribal vascular bundle. Phytochemical screening showed that M. crenata Presl. contains polyphenol, free steroids, saponins, and volatile oils compounds. Keyword (s) : Marsilea phytochemical screening

crenata

Presl.,

anatomy,

morphology,

ix SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA DAFTAR ISI halaman HALAMAN JUDUL .............................................................................

i

LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI ILMIAH………………..... ii LEMBAR PERNYATAAN…………………………………………... iii LEMBAR PENGESAHAN ................................................................... iv KATA PENGANTAR…………………………………………………. v RINGKASAN…………………………………………………………. vii ABSTRACT…………………………………………………………… ix DAFTAR ISI .......................................................................................... x DAFTAR TABEL .................................................................................. xiv DAFTAR GAMBAR………………………………………………….. xv DAFTAR LAMPIRAN………………………………………………... xix BAB I PENDAHULUAN ..................................................................... 1 1.1 Latar Belakang ................................................................................ 1 1.2 Rumusan Masalah ........................................................................... 3 1.3 Tujuan Penelitian ............................................................................ 3 1.4 Manfaat Penelitian .......................................................................... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................... 5 2.1 Tinjauan Tentang Tanaman Suku Marsileaceae ………………..

5

2.2 Tinjauan Tentang Taksonomi Marsilea crenata Presl. ………….

5

2.2.1 Klasifikasi ………………………………………………............. 5 2.2.2 Habitus-Morfologi………………………………………............. 5 2.2.3 Kandungan……………………………………………………… 6 2.2.4 Kegunaan………………………………………………………..

6

2.3 Tinjauan Tentang Simplisia ……………………………………...

6

2.4 Tinjauan Tentang Pengamatan Makroskopik……………………

7

x SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 2.5 Tinjauan Tentang Pengamatan Mikroskopik…………………….

7

2.6 Tinjauan Tentang Ekstrak………………………………………...

8

2.6.1 Definisi Ekstrak…………………………………………………

8

2.6.2 Proses Pembuatan Ekstrak……………………………………..

8

2.6.3 Cara Pembuatan Ekstrak………………………………………

9

2.7 Tinjauan Tentang Skrining Fitokimia…………………………….

12

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL……………………………..

13

BAB IV METODOLOGI PENELITIAN…………………………….

16

4.1 Bahan………………………………………………………..........

16

4.1.1 Bahan Penelitian………………………………………………..

16

4.1.2 Bahan Kimia dan Pereaksi ……………………………….. …..

16

4.2 Alat-alat yang digunakan ………………………………...............

17

4.3 Pengamatan Morfologi……………………..………….................

18

4.4 Pengamatan Anatomi……………………………………………

18

4.5 Skrining fitokimia dalam ekstrak ……………………………….

19

4.5.1 Pemeriksaan Alkaloid ……………………………….………..

20

4.5.2 Pemeriksaan Glikosida Saponin……………………………….

21

4.5.3 Pemeriksaan Glikosida Jantung………………………………..

23

4.5.4 Pemeriksaan Flavonoid………………………………………...

23

4.5.5 Pemeriksaan Tanin dan Senyawa Fenol………………………

24

4.5.6 Pemeriksaan Glikosida Antrakuinon…………………………..

26

4.5.7 Pemeriksaan Glikosida Sianohidrin……………………………

27

4.5.8 Pemeriksaan Minyak Atsiri…………………………………….

27

4.5.9 Pemeriksaan Kumarin………………………………………….

28

4.5.10 Pemeriksaan Iridoid…………………………………………..

28

4.6 Analisis Semi-Kuantitatif KLT-Densitometri Ekstrak Metanol Semanggi Budidaya dan Semanggi Liar……………..

28

xi SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 4.7 Rancangan Penelitian…………………………………………….

29

BAB V HASIL PENELITIAN 5.1 Hasil Pengamatan Morfologi …………………….………………

31

5.1.1 Habitus………………………………………………………….. 31 5.1.2 Daun…………………………………………………………….

32

5.1.3 Tangkai Daun…………………………………………………… 35 5.1.4 Batang…………………………………………………………… 35 5.1.5 Akar……………………………………………………………..

36

5.2 Hasil Pengamatan Anatomi ……………………………………...

39

5.2.1 Sayatan Melintang Daun……………………………………….

39

5.2.2 Sayatan Melintang Tangkai Daun……………………………...

41

5.2.3 Sayatan Melintang Stolon………………………………………

42

5.2.4 Sayatan Epidermis Atas Daun …………………………………

42

5.2.5 Sayatan Epidermis Bawah Daun…………………… …………

46

5.2.6 Sayatan Membujur Tangensial dan Radial Tangkai Daun…..

48

5.2.7 Sayatan Membujur Tangensial dan Radial Stolon……………

50

5.2.8 Sayatan Membujur Akar……………………………………….

52

5.2.9 Sayatan Melintang Akar……………………………………….

52

5.2.10 Serbuk Daun…………………………………………………..

56

5.3 Hasil Skrining Fitokimia………………………………………….

58

5.3.1 Pemeriksaan Alkaloid…………………………………………..

59

5.3.2 Pemeriksaan Glikosida Saponin………………………………..

59

5.3.3 Pemeriksaan Glikosida Jantung………………………………… 60 5.3.4 Pemeriksaan Flavonoid…………………………………………

60

5.3.5 Pemeriksaan Tanin dan Polifenol………………………………

61

5.3.6 Pemeriksaan Glikosida Antrakuinon……………………………

61

5.3.7 Pemeriksaan Sianohidrin………………………………………... 61

xii SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 5.3.8 Pemeriksaan Minyak Atsiri……………………………………..

62

5.3.9 Pemeriksaan Kumarin…………………………………………..

62

5.3.10 Pemeriksaan Iridoid……………………………………………

63

5.3.11 Analisis Semi-Kuantitatif KLT-Densitometri Ekstrak Metanol Semanggi Budidaya dan Semanggi Liar……………………..

64

BAB VI PEMBAHASAN…………………………………………….

71

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN…………………………….

78

DAFTAR PUSTAKA………………………………………………… 80 LAMPIRAN…………………………………………………………... 82

xiii SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA DAFTAR TABEL halaman

Tabel 4.1 Reaksi Warna Untuk Tannin dan Senyawa Polifenol……….

25

5.1 Hasil pengamatan morfologi secara makroskopik dari M. crenata Presl…………………………………………

37

5.2 Hasil pengamatan anatomi secara mikroskopik berupa sayatan melintang dan membujur daun, tangkai daun, stolon, dan akar M. crenata Presl…………………………………………….

54

5.3 Hasil pengamatan organoleptik dan mikroskopik serbuk daun M. crenata Presl………………………………………

58

5.4 Hasil Skrining fitokimia ekstrak etanol 80% daun M. crenata Presl……………………………………………

63

5.5 Hasil perbandingan area profil kromatogram semanggi budidaya dengan semanggi liar……………………………

66

5.6 Rf dan area kromatogram ekstrak metanol semanggi budidaya replikasi 1 (B1)………………………………….

67

5.7 Rf dan area kromatogram ekstrak metanol semanggi budidaya replikasi 2 (B2)………………………………….

68

5.8 Rf dan area kromatogram ekstrak metanol semanggi liar replikasi 1 (L1)………………………………………..

69

5.9 Rf dan area kromatogram ekstrak metanol semanggi liar replikasi 2 (L2)………………………………………..

70

xiv SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA DAFTAR GAMBAR Gambar

halaman

2.1 Marsilea crenata Presl…………………………………………….. 5 3.1 Skema Kerangka Konseptual……………………………………..... 15 4.1 Skema Skrining fitokimia ekstrak……..…………………………… 20 4.2 Skema Rancangan Penelitian……………………………………..... 30 5.1 M. crenata Presl. budidaya dalam pot……………………………… 32 5.2 Daun M. crenata Presl. tampak atas……………………………….. 33 5.3 Daun M. crenata Presl. tampak bawah…………………………….. 33 5.4 Daun M. crenata Presl. yang masih muda menggulung……….…… 34 5.5 Susunan tulang daun M. crenata Presl. yang menyerupai kipas…… 34 5.6 Daun M. crenata Presl. menutup saat matahari tenggelam………… 35 5.7 Tangkai daun dan stolon M. crenata Presl…………………………. 36 5.8 Akar M. crenata Presl. yang berupa akar serabut berwarna coklat… 37 5.9 Penampang melintang daun M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x……………………………………………………. 40 5.10 Penampang melintang daun M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x…………………………………………………… 40 5.11 Penampang melintang tangkai M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 100x…………………………………………………… 41 5.12 Penampang melintang stolon M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 100x…………………………………………………… 43

xv SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 5.13 Sel epidermis atas daun M. crenata Presl. dengan stomata tipe anisositik dan diasitik dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x………………. 44 5.14 Berkas pengangkutan dengan penebalan spiral yang terdapat di dalam tulang daun pada jaringan parenkim daun M. crenata Presl. disertai dengan tetes minyak atsiri dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x……… 45 5.15 Trikoma multiseluler berbintik-bintik pada permukaan daun bagian atas M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x……………….. 45 5.16 Sel epidermis bawah daun M. crenata Presl. dengan stomata tipe anisositik dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x……………… 46 5.17 Berkas pengangkutan dengan penebalan spiral yang terdapat di dalam tulang daun pada jaringan parenkim daun M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x…………………………………………… 47 5.18 Trikoma multiseluler berbinti-bintik pada permukaan daun bagian bawah M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x………. 47 5.19 Sayatan membujur tangensial tangkai daun M. crenata Presl. dalam media klorlhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x…………………………………………… 48 5.20 Berkas pengangkutan dengan penebalan spiral sayatan membujur radial tangkai daun M. crenata Presl. dalam media klorlhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran400x……… 49 5.21 Trikoma multiseluler berbintik-bintik pada sayatan membujur

xvi SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA tangkai daun M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x………. 49 5.22 Sayatan membujur tangensial stolon M. crenata Presl. dalam media klorlhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x………………………………………………… 50 5.23 Berkas pengangkutan dengan penebalan spiral pada sayatan membujur radial stolon M. crenata Presl. dalam media klorlhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x….51 5.24 Trikoma multiseluler pada sayatan membujur stolon M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 100x……………… 51 5.25 Berkas pengangkutan dengan penebalan spiral pada sayatan membujur akar M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 1000x…………………………………………………. 52 5.26 Sayatan melintang akar M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 100x………………………………………………….. 53 5.27 Sayatan melintang akar M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x…………………………………………………… 54 5.28 Sel epidermis dengan stomata tipe anisositik yang diamati dengan menggunakan mikroskop pada perbesaran 400x……………… 56 5.29 Berkas pengangkutan dengan penebalan spiral yang diamati dengan menggunakan mikroskop pada perbesaran 400x………………. 57 5.30 Trikoma berbintik-bintik yang diamati dengan menggunakan mikroskop pada perbesaran 400x………………………………

57

xvii SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 5.31 Kromatogram golongan senyawa steroid atau triterpenoid bebas ekstrak etanol 80% menggunakan fase gerak n-heksana: etil asetat (4:1) dan penampak noda anisaldehid asam sulfat……………….. 60 5.32 Kromatogram minyak atsiri dengan eluen toluen : etil asetat (97:3) dan penampak noda anisaldehid asam sulfat…………….

62

5.33 Kromatogram ekstrak metanol dengan eluen n-heksana : etil asetat (4:1) dan penampak noda anisaldehid asam sulfat……………..

65

5.34 Profil kromatogram hasil deteksi densitometer ekstrak metanol semanggi budidaya replikasi 1 (B1)……………………………

67

5.35 Profil kromatogram hasil deteksi densitometer ekstrak metanol semanggi budidaya replikasi 2 (B2)……………………………

68

5.36 Profil kromatogram hasil deteksi densitometer ekstrak metanol semanggi liar replikasi 1 (L1)………………………………….

69

5.37 Profil kromatogram hasil deteksi densitometer ekstrak metanol semanggi liar replikasi 2 (L2)………………………………….

70

xviii SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA DAFTAR LAMPIRAN Lampiran

Halaman

Hasil Perhitungan Statistik…………………………………… 82

xix SKRIPSI


ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Masalah Bangsa Indonesia telah lama menggunakan tanaman berkhasiat obat sebagai salah satu alternatif pengobatan. Penggunaan tanaman berkhasiat obat untuk kesehatan oleh masyarakat Indonesia digunakan berdasarkan pengalaman yang diwariskan secara turun-menurun. Secara luas obat herbal telah lama diterima di seluruh negara dunia.

WHO merekomendasikan

penggunaan

obat

tradisional

termasuk obat herbal dalam pemeliharaan kesehatan masyarakat, pencegahan dan pengobatan penyakit, terutama untuk penyakit kronis, penyakit degeneratif, dan kanker. WHO juga mendukung upaya dalam peningkatan keamanan dan khasiat dari obat herbal (WHO, 2003). Penggunaan obat tradisional secara umum dinilai lebih aman daripada obat modern karena efek samping yang relatif lebih sedikit. Marsilea crenata Presl. atau yang umum dikenal dengan nama semanggi adalah salah satu tumbuhan dari suku Marsileaceae yang hidup secara liar di lingkungan perairan seperti kolam, sawah, danau, dan rawa-rawa. Daun dari semanggi sering dimanfaatkan oleh masyarakat Surabaya sebagai bahan makanan yang dikenal sebagai pecel semanggi, khas dari Surabaya. M. crenata Presl. mempunyai khasiat tertentu yang belum banyak diteliti. Secara empiris semanggi belum dikenal sebagai tanaman obat. Namun dalam sebuah buku dikatakan bahwa daun dan batang semanggi mempunyai khasiat sebagai peluruh air seni (Hutapea,1994).

1 SKRIPSI



2

Dari penelitian yang dilakukan oleh Laswati (2007) melalui teknik radio immuno assay (RIA) diketahui bahwa ekstrak etanol daun semanggi terdeteksi mengandung senyawa serupa estradiol. Senyawa estradiol merupakan senyawa sintetis yang digunakan dalam terapi sulih hormon pada perempuan yang kadar estrogen dalam tubuhnya menurun karena menopause dan digunakan pula dalam pil kontrasepsi hormonal. Dari penelitian tersebut ternyata terbukti bahwa kombinasi latihan fisik pembebanan aksial dan pemberian ekstrak etanol daun semanggi dapat mencegah terjadinya osteoporosis dengan mekanisme penghambatan ketidakseimbangan remodeling tulang pada hewan coba betina dan perempuan pasca menopause (Laswati, 2007). Hal ini menunjukkan semanggi mempunyai potensi untuk dikembangkan menjadi obat herbal terstandar atau fitofarmaka. Dalam pengembangan obat tradisional / obat dari bahan alam menjadi obat herbal atau fitofarmaka harus memenuhi persyaratan yang ketat. Salah satu persyaratan yang harus dipenuhi adalah kualitas dari bahan baku. Untuk memenuhi salah satu persyaratan kualitas bahan baku semanggi diperlukan data ciri morfologi dan anatomi yang khas untuk menjamin keaslian sampel tanaman dan untuk mengidentifikasi kebenaran dari serbuk

simplisia

sehingga

terhindar

dari

pemalsuan.

Untuk

mendapatakn data morfologi dan anatomi dilakukan penelitian berupa studi mikroskopik dan makroskopik. Selain itu juga perlu dilakukan skrining fitokimia untuk mengetahui golongan senyawa yang terkandung dalam semanggi. Semanggi merupakan tanaman liar yang tumbuh di lingkungan perairan seperti sawah. Kondisi lingkungan tempat tumbuh semanggi mempunyai pengaruh terhadap kandungan tanaman tersebut. Bila tanaman tersebut tumbuh di daerah persawahan yang berada dekat SKRIPSI



3

dengan kawasan industri seperti daerah Benowo-Surabaya dimana banyak semanggi yang tumbuh secara liar, mutu kandungan dari semanggi tersebut tidak dapat dijamin. Bahan baku semanggi yang selama ini digunakan oleh masyarakat sebagai makanan dan digunakan sebagai bahan penelitian merupakan bahan baku yang didapatkan dari tumbuhan liar sehingga keseragaman mutu kandungan semanggi tersebut tidak dapat dijamin. Berdasarkan hal tersebut, maka dilakukan usaha budidaya semanggi untuk mendapatkan kualitas semanggi yang baik yang dapat dimanfaatkan baik sebagai bahan makanan maupun bahan baku obat tradisional. 1.2 Rumusan Masalah 1.

Bagaimana morfologi dan anatomi dari M. crenata Presl. (semanggi) hasil budidaya?

2.

Golongan senyawa apa saja yang terdapat dalam M. crenata Presl. (semanggi) hasil budidaya?

3.

Apakah ada perbedaan antara M. crenata Presl. (semanggi) hasil budidaya dengan M. crenata Presl. (semanggi) liar?

1.3 Tujuan Penelitian 1.

Untuk mengetahui ciri morfologi dan anatomi dari M. crenata Presl. (semanggi) hasil budidaya.

2.

Untuk mengetahui golongan senyawa yang terkandung dalam tanaman M. crenata Presl. (semanggi) hasil budidaya dengan metode skrining fitokimia.

SKRIPSI



3.

4

Untuk mengetahui perbedaan antara M. crenata Presl. (semanggi) hasil budidaya dan M. crenata Presl. (semanggi) liar dengan metode analisis semi-kuantitatif KLT-densitometri.

1.4 Manfaat Penelitian Penelitian

ini

diharapkan

dapat

memberikan

informasi

mengenai ciri morfologi, anatomi, dan golongan senyawa kimia yang terkandung dalam tanaman semanggi sebagai langkah awal penelitian dalam pemanfaatannya di bidang farmasi. Selain itu juga dapat digunakan untuk melengkapi data yang belum ada dalam buku Materia Medika Indonesia.

SKRIPSI



BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Tinjauan tentang tanaman suku Marsileaceae Merupakan paku air atau paku rawa. Akar rimpang merayap. Daun menjari berbilang empat, daun yang masih muda menggulung. Sporocarpia (buah spora) terletak pada tangkai daun, terdiri dari beberapa sori dan sebuah sorus dengan beberapa mega dan mikosporongia. Megasporongia terdiri dari satu spora betina yang besar (megaspora), sedangkan mikrosporongia terdiri dari beberapa spora jantan yang kecil (mikrospora). (Steenis, 1975) 2.2 Tinjauan tentang taksonomi M. crenata Presl. 2.2.1 Klasifikasi Divisi

: Pteridophyta

Kelas

: Filicianae

Bangsa

: Salviniales

Suku

: Marsileaceae

Marga

: Marsilea

Jenis

: Marsilea crenata Presl.

Nama daerah Jawa

: Semanggi

(Steenis, 1975)

Gambar 2.1 Marsilea crenata Presl. (www.akvarijum.org/)

2.2.2 Habitus – Morfologi Herba, yang tumbuh di tempat berair seperti sawah dan pematang sawah. Pada air yang dangkal terlihat daun beserta tangkainya sedangkan pada air yang dalam hanya terlihat daunnya

SKRIPSI

5 MORFOLOGI, ANATOMI, DAN ... MA’RIFATUS SHOLECHA


6

saja (Steenis, 1975). Susunan daunnya terdiri dari empat anak daun yang saling berhadapan, berbentuk segitiga terbalik, susunan tulang daun menyerupai seperti bentuk kipas, dan pada permukaannya terdapat bulu yang halus. Batang berupa stolon, pada setiap nodus keluar akar serabut dan tangkai daun. (Tiyaningsih, 2007) 2.2.3 Kandungan Daun dan batang M. crenata Presl mengandung minyak atsiri, saponin, triterpenoid bebas, steroid, dan polifenol. (Tiyaningsih, 2007) 2.2.4 Kegunaan Daun dan batang semanggi mempunyai khasiat sebagai peluruh air seni (Hutapea, 1994) namun oleh masyarakat daun semanggi dimanfaatkan sebagai bahan makanan yang dikonsumsi sehari-hari. 2.3 Tinjauan Tentang Simplisia Simplisia adalah bahan alamiah yang digunakan sebagai obat yang belum mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dinyatakan lain simplisia merupakan bahan yang dikeringkan. Simplisia dapat berupa simplisia nabati, simplisia hewani, dan simplisia pelikan (mineral). (Depkes RI, 2000) Simplisia nabati adalah simplisia yang berupa tanaman utuh, bagian tanaman atau eksudat tanaman. Yang dimaksud dengan eksudat tanaman adalah isi sel yang secara spontan keluar dari tanaman atau yang dengan cara tertentu dikeluarkan dari selnya, atau zat-zat nabati lainnya yang dengan cara tertentu dipisahkan dari tanamannya. (Depkes RI, 2000)

SKRIPSI



7

Kadar senyawa aktif dalam suatu simplisia berbeda-beda antara lain tergantung pada: 1. Bagian tanaman yang digunakan 2. Umur tanaman atau bagian tanaman pada saat panen 3. Waktu panen 4. Lingkungan tempat tumbuh Waktu panen sangat erat hubungannya dengan pembentukan senyawa aktif dalam tanaman. Senyawa aktif terbentuk secara maksimal di dalam bagian tanaman pada umur tertentu. Sering kali mutu simplisia yang dihasilkan tidak sama karena umur tanaman saat dipanen tidak sama. Selain itu, kadar kandungan senyawa aktif juga dipengaruhi lingkungan tempat tumbuh. Pertumbuhan tanaman dipengaruhi tinggi tempat, keadaan tanah, dan cuaca. (Depkes RI, 1985) 2.4 Tinjauan tentang pengamatan makroskopik Pemeriksaan makroskopik adalah pemeriksaan yang dilakukan dengan menggunakan kaca pembesar atau mikroskop binokuler. Cara ini digunakan untuk mencari kekhususan morfologi, ukuran, dan warna simplisia yang akan diperiksa. (Depkes RI, 1987) 2.5 Tinjauan tentang pengamatan mikroskopik Pemeriksaan mikroskopik adalah pemeriksaan yang dilakukan dengan menggunakan mikroskop yang derajat pembesarannya diatur sesuai keperluan dan dilengkapi dengan kamera. Simplisia yang diperiksa berupa sayatan melintang, maupun membujur atau berupa serbuk. Pada pemeriksaan mikroskopik dicari unsur-unsur anatomi yang khas. Dari pemeriksaan ini akan diketahui jenis simplisia

SKRIPSI



8

berdasarkan fragmen pengenal yang spesifik bagi masing-masing simplisia. (Depkes RI, 1987) 2.6 Tinjauan Tentang Ekstrak 2.6.1 Definisi Ekstrak Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia nabati atau hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan. Ekstrak cair adalah sediaan dari simplisia nabati yang mengandung etanol sebagai pelarut atau sebagai pengawet. Jika tidak dinyatakan lain pada masing-masing monografi tiap ml ekstrak mengandung senyawa aktif dari 1g simplisia yang memenuhi syarat. (Depkes RI, 2000) 2.6.2 Proses pembuatan ekstrak Tahapan pembuatan ekstrak adalah : 1.Pembuatan serbuk simplisia Proses awal pembuatan ekstrak adalah pembentukan serbuk simplisia kering dengan alat penggiling sampai derajat kehalusan tertentu. Proses ini dapat mempengaruhi mutu ekstrak, karena semakin halus serbuk simplisia proses ekstraksi akan semakin efektif dan efisien. (Depkes RI, 2000) 2.Cairan pelarut Cairan pelarut dalam pembuatan ekstrak adalah pelarut yang sesuai untuk senyawa kandungan berkhasiat, dengan

SKRIPSI



9

demikian senyawa tersebut dapat dipisahkan dari bahan dan senyawa kandungan lainnya serta ekstrak hanya mengandung sebagian besar senyawa kandungan yang diinginkan. Faktor utama untuk pertimbangan pada pemilihan cairan penyari adalah: selektivitas, kemudahan bekerja dan proses dengan cairan tersebut, ekonomis, ramah lingkungan dan keamanan. (Depkes RI, 2000) 3.Separasi dan pemurnian Tahapan ini bertujuan untuk menghilangkan (memisahkan) senyawa yang tidak dikehendaki semaksimal mungkin tanpa mempengaruhi senyawa kandungan yang dikehendaki, sehingga diperoleh ekstrak yang lebih murni. Dalam hal ini termasuk juga pemisahan dari sisa pelarut yang tidak dikehendaki. (Depkes RI, 2000) 4.Pemekatan atau penguapan Pemekatan berarti peningkatan jumlah atau konsentrasi senyawa terlarut dengan cara menguapkan pelarut sampai menjadi kandungan kering sehingga ekstrak menjadi kental atau pekat. (Depkes RI, 2000) 5.Pengeringan ekstrak Pengeringan berarti menghilangkan pelarut dari bahan sehingga menghasilkan serbuk. Massa kering dan rapuh tergantung proses dan peralatan yang digunakan. (Depkes RI, 2000) 2.6.3 Cara pembuatan ekstrak 1.Ekstraksi dengan menggunakan pelarut 1.1 Cara dingin - Maserasi

SKRIPSI



10

Maserasi adalah suatu proses penyarian simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan (kamar). Maserasi kinetik berarti dilakukan pengadukan yang

kontinu

(terus-menerus).

Remaserasi

berarti

dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan penyarian maserat pertama, dan seterusnya (Depkes RI, 2000). - Perkolasi Perkolasi adalah ekstraksi dengan menggunakan pelarut yang selalu baru sampai sempurna (exhaustive extraction) yang umumnya dilakukan pada temperatur ruangan. Prosesnya terdiri dari tahap pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetesan atau penampungan ekstrak), terus-menerus sampai diperoleh ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan. (Depkes RI, 2000) 1.2 Cara panas - Refluks Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik. (Depkes RI, 2000) - Dengan menggunakan ekstraktor soxhlet Ekstraksi yang dilakukan dengan alat khusus seperti ekstraktor soxhlet sehingga terjadi ekstraksi kontinyu dengan jumlah pelarut relative konstan dengan adanya pendingin balik. (Depkes RI, 2000)

SKRIPSI



11

- Digesti Digesti

adalah

maserasi

kinetik

(dengan

pengadukan kontinyu) pada temperature yang lebih tinggi daripada temperatur ruangan yaitu pada 40-50º C. (Depkes RI, 2000) - Infus Proses

penyarian

dengan

pelarut

air

pada

temperatur penangas air (90º C) selama waktu 15-20 menit, menghasilkan ekstrak yang disebut infus. (Depkes RI, 2000) - Dekok Proses penyarian dengan pelarut air pada waktu yang lebih lama dari 20 menit dan temperatur sampai titik didih air (100º C) menghasilkan ekstrak yang disebut dekok. (Depkes RI, 2000) 2.Destilasi uap Destilasi uap adalah ekstraksi kandungan senyawa yang mudah menguap (minyak atsiri) dari bahan (segar atau simplisia) dengan uap air berdasarkan peristiwa tekanan parsial senyawa kandungan menguap dengan fase uap air dari ketel secara kontinu sampai sempurna dan diakhiri dengan kondensasi fase uap campuran (senyawa kandungan menguap ikut terdestilasi) menjadi destilat yang memisah sempurna atau memisah sebagian. (Depkes RI, 2000) 3.Cara ekstraksi lain 3.1 Ekstraksi berkesinambungan Proses ekstraksi yang dilakukan berulangkali dengan pelarut yang berbeda atau resirkulasi cairan

SKRIPSI



12

pelarut dan prosesnya tersusun berurutan beberapa kali. (Depkes RI, 2000) 3.2 Superkritikal karbondioksida Penggunaan prinsip superkritik untuk ekstraksi serbuk

simplisia

dan

umumnya

digunakan

gas

karbondioksida. (Depkes RI, 2000) 3.3 Ekstraksi ultrasonik Getaran ultrasonik (> 20.000 Hz) memberikan efek pada proses ekstraksi dengan prinsip meningkatkan permeabilitas dinding sel, menimbulkan gelembung spontan

(cavitation)

sebagai

stress

dinamik

serta

menimbulkan fraksi interfase. Hasil ekstraksi tergantung pada frekuensi getaran, kapasitas alat, dan lama proses ultrasonik. (Depkes RI, 2000) 3.4 Ekstraksi energi listrik Energi listrik digunakan dalam bentuk medan listrik, medan magnet serta electric-discharges yang dapat mempercepat proses dan meningkatkan hasil dengan prinsip

menimbulkan

gelembung

spontan

dan

menyebarkan gelombang tekanan berkecepatan ultrasonik. (Depkes RI, 2000) 2.7 Tinjauan tentang skrining fitokimia Skrining fitokimia merupakan penelitian pendahuluan yang bertujuan untuk mengetahui golongan senyawa kimia yang terkandung dalam tanaman, yang biasanya punya aktivitas biologis, secara tepat dan teliti. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978)

SKRIPSI



BAB III KERANGKA KONSEPTUAL Semanggi adalah salah satu tanaman yang sering dimanfaatkan oleh masyarakat di Indonesia pada umumnya sebagai makanan. Dari hasil penelitian diketahui bahwa ekstrak etanol daun semanggi terbukti dapat mencegah

osteoporosis

dengan

mekanisme

penghambatan

ketidakseimbangan remodeling tulang pada hewan coba betina dan perempuan pasca menopause (Laswati, 2007). Berdasarkan hal

tersebut

dapat diketahui

bahwa

semanggi

mempunyai potensi untuk dikembangkan menjadi obat herbal terstandar atau fitofarmaka. Untuk dapat mengembangkan semanggi menjadi obat herbal terstandar atau fitofarmaka harus memenuhi persyaratan yang ketat. Salah satu persyaratan yang harus dipenuhi adalah kualitas dari bahan baku. Untuk memenuhi salah satu persyaratan kualitas bahan baku semanggi diperlukan data ciri morfologi dan anatomi yang khas untuk menjamin keaslian sampel tanaman dan untuk mengidentifikasi kebenaran dari serbuk simplisia sehingga terhindar dari pemalsuan. Selain itu juga perlu dilakukan skrining fitokimia untuk mengetahui golongan senyawa yang terkandung dalam semanggi. Semanggi merupakan tanaman liar yang biasanya tumbuh di sawah. Bahan baku semanggi yang selama ini digunakan oleh masyarakat sebagai bahan makanan dan digunakan sebagai bahan penelitian merupakan bahan baku yang didapatkan dari tumbuhan liar sehingga keseragaman mutu kandungan semanggi tersebut tidak dapat dijamin. Berdasarkan hal tersebut, maka dilakukan usaha budidaya semanggi untuk mendapatkan kualitas semanggi yang baik yang dapat dimanfaatkan baik sebagai bahan makanan maupun bahan baku obat tradisional.

SKRIPSI

13 MORFOLOGI, ANATOMI, DAN ... MA’RIFATUS SHOLECHA


14

Dari penelitian yang dilakukan diharapkan dapat memberikan data anatomi, morfologi, dan golongan senyawa yang terkandung dalam tanaman semanggi yang selanjutnya dapat digunakan sebagai acuan untuk melakukan standarisasi simplisia dan ekstrak semanggi.

SKRIPSI



15

M. crenata Presl. (Semanggi) terbukti dapat mencegah osteoporosis (Laswati, 2007) Secara umum digunakan oleh masyarakat sebagai bahan makanan

Dapat dikembangkan menjadi obat tradisional

Diperlukan bahan baku yang berkualitas dan terstandar Selama ini bahan baku diambil dari semanggi yang tumbuh liar Budidaya untuk mendapatkan kualitas yang baik

Morfologi

Anatomi

Didapatkan ciri semanggi secara mikroskopis dan makroskopis

Skrining fitokimia Didapatkan golongan senyawa yang terkandung dari reaksi warna dan kromatografi lapis tipis

Digunakan sebagai acuan standarisasi simplisia dan ekstrak semanggi Gambar 3.1 Skema kerangka konseptual

SKRIPSI



BAB IV METODOLOGI PENELITIAN 4.1 Bahan 4.1.1 Bahan Penelitian Bahan penelitian yang digunakan adalah seluruh bagian tanaman M. crenata Presl. (semanggi) segar yang meliputi daun, batang, dan akar yang diperoleh dari hasil budidaya di daerah Rungkut Surabaya dengan menggunakan media air minum PDAM (Perusahaan Daerah Air Minum) dan semanggi dari daerah Kelurahan Kendung Benowo Surabaya. Semanggi ini telah dideterminasi di kebun raya Purwodadi pada bulan Juli 2012. Bagian tanaman yang masih segar digunakan untuk pemeriksaan morfologi secara makroskopik dan anatomi secara mikroskopik

berupa

pengamatan

penampang melintang dan

membujur. Sedangkan serbuk kering digunakan untuk pemeriksaan mikroskopik yaitu berupa pengamatan fragmen pengenal yang spesifik dan digunakan pula pada skrining fitokimia. 4.1.2 Bahan Kimia dan Pereaksi Bahan kimia yang diperlukan adalah : - n-heksan teknis - Metanol teknis - Etanol 96% - Etil asetat - Kloroform Pereaksi yang diperlukan adalah sebagai berikut :

16 SKRIPSI



17

- Ammonia - Anisaldehid H2SO4 - Asam asetat anhidrat - Asam asetat glasial - Dragendorf - Eter - Ferriklorida - Gelatin - H2SO4 pekat - HCl 2N - HCl pekat - Kloralhidrat - Pereaksi Meyer - NaCl 10% - NaOH - n-butanol - Serbuk Mg - Sitrat borat - Pereaksi Wagner - Florogusin - HCl pekat 4.2 Alat-alat yang digunakan Dalam pemeriksaan morfologi, anatomi, dan skrining fitokimia digunakan alat-alat: - Kamera digital Olympus VG-110 - Mikroskop trinokuler BXA41TF Olympus - Ultrasonic bath Branson 3510 - Mikrotom Ogawa Seiki SKRIPSI



18

- Corong Buchner - Buchi rotavapor R-114 - Labu alas bulat dan pendingin balik - Oven kapasitas suhu 40-50º C - Scanner - Alat-alat gelas - Lempeng silica GF254 - Bejana kromatografi Cammag - Lampu UV Cammag 4.3 Pengamatan morfologi Diambil semanggi segar yang diperoleh untuk dilakukan pemeriksaan secara makroskopik yang meliputi habitus, daun (jenis daun, filotaksis daun, bentuk daun, pangkal dan ujung daun, permukaan daun, ukuran daun, tepi daun, susunan tulang daun), batang (bentuk batang, warna batang, kulit batang, arah tumbuh batang), dan bentuk akar. 4.4 Pengamatan anatomi Pemeriksaan anatomi dilakukan secara mikroskopik meliputi pengamatan melintang dan membujur tanaman segar serta pengamatan fragmen spesifik pada serbuk simplisia dalam media air dan kloralhidrat. Sedangkan untuk pemeriksaan organoleptis meliputi warna, bau, dan rasa dari serbuk simplisia semanggi. Pengamatan terhadap fragmen tertentu dapat dilakukan penambahan pereaksi warna, antara lain : 1. Florogusin-HCl

pekat

untuk pengamatan dinding sel

yang

mengandung lignin seperti sel-sel batu, serabut sklerenkim dan xylem SKRIPSI



19

2. Pereaksi Sudan III untuk pengamatan minyak atsiri dn minyak lemak 3. Metilen biru dan Anilin biru untuk pengamatan jaringan dasar 4. Pereaksi Millon untuk pengamatan butir-butir aleuron 5. Safranin untuk pengamatan xylem 4.5 Skrining fitokimia dalam ekstrak Untuk mengetahui zat yang terkandung dalam semanggi dilakukan skrining fitokimia. Daun semanggi segar yang telah dikeringkan diperkecil ukurannya untuk memperoleh serbuk yang halus. Sebagian dari serbuk tersebut digunakan untuk pemeriksaan kandungan senyawa golongan glikosida sianohidrin, minyak atsiri, dan iridoid, dan sebagian lagi dibuat dalam bentuk ekstrak. Selanjutnya dilakukan skrining fitokimia dengan reaksi warna, reaksi pengendapan, dan kromatografi lapis tipis (KLT). Golongan senyawa yang akan diperiksa adalah : alkaloid, glikosida saponin, senyawa flavonoid, tanin dan polifenol, glikosida antrakuinon, dan kumarin. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) Dalam pembuatan simplisia dilakukan dengan cara disiapkan daun semanggi segar yang telah dicuci bersih, kemudian dikeringkan dengan cara diangin-anginkan di tempat terbuka sehingga diperoleh simplisia kering. Setelah itu, simplisia kering diserbuk dengan alat penggiling. Serbuk simplisia yang telah halus selanjutnya diekstraksi. (Depkes RI, 1985) Ditimbang bahan yang berupa serbuk kering daun semanggi sebanyak 50 gram kemudian diekstraksi menggunakan pelarut etanol 80% dengan metode ultrasonik. Serbuk semanggi diekstraksi dalam alat ultrasonic bath selama 10 menit sambil diaduk. Ekstrak etanol yang

SKRIPSI



20

didapat dikumpulkan dan diuapkan dengan penurunan tekanan menggunakan rotavapor sampai didapatkan ekstrak yang kering. Semua penjelasan diatas dapat disederhanakan dalam gambar 4.1 :

Simplisia semanggi

Serbuk simplisia semanggi Ekstraksi menggunakan Pelarut etanol 80% dengan metode ultrasonik

Pemeriksaan glikosida sianohidrin, minyak atsiri, dan iridoid

Ampas

Ekstrak semanggi dalam etanol Dikumpulkan dan diuapkan dengan rotavapor Ekstrak kering

Dengan reaksi warna dan kromatografi lapis tipis dilakukan pemeriksaan alkaloid, glikosida saponin, senyawa flavonoid, tanin dan polifenol, glikosida antrakuinon, dan kumarin

Gambar 4.1 Skema Skrining fitokimia ekstrak 4.5.1 Pemeriksaan Alkaloid 1. Reaksi Pengendapan Ekstrak yang setara dengan 20 gram bahan dipanaskan di atas penangas air sampai seperti sirup. Setelah dingin ditambahkan 10 ml HCl 2N kemudian dipanaskan di atas SKRIPSI



21

penangas air selama 2-3 menit. Setelah dingin ditambahkan NaCl untuk mengendapkan protein yang dapat memberikan reaksi positif palsu, lalu filtrat disaring, kemudian ditambahkan HCl 2N sampai 10 ml. Filtrat digunakan untuk petunjuk adanya alkaloid dengan penambahan pereaksi pengandapan. Pereaksi yang digunakan antara lain Wagner, Meyer, dan Bouchardat. Ekstrak mengandung alkaloid bila timbul endapan setelah ditambah dengan pereaksi tersebut. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) 2. Kromatografi Lapis Tipis Filtrat ditambah NH4OH 28% sampai alkalis, diekstraksi dengan 10 ml CHCl3. Fase CHCl3 ditambah dengan NaSO4 eksikatus, disaring, kemudian diuapkan sampai kering. Ekstrak CHCl3 dilarutkan dalam metanol untuk uji KLT. Fase gerak

: aseton : air : ammonia (40: 7: 3)

Penampak noda

: pereaksi dragendorf

Positif jika terjadi noda merah jingga. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) 4.5.2 Pemeriksaan Glikosida Saponin 1. Uji Buih Tes buih saponin Ekstrak setara 2 gram bahan dimasukkan ke dalam tabung reaksi kemudian dikocok kuat-kuat dengan air suling 10 ml. Buih yang timbul diukur. Percobaan positif dengan daging buah Sapindus rarak yang dikocok dengan 10 ml air suling. Positif bila terjadi buih setinggi 3 cm di atas permukaan cairan, stabil selama 30 menit. Sebagai pembanding digunakan SKRIPSI



22

daging buah Sapindus rarak. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) 2. Reaksi Warna Ekstrak yang setara 10 gram bahan, diuapkan di atas penangas air sampai kering. Setelah dingin dikocok dengan 10 ml n-heksan atau petroleum eter. Kemudian didekantir dan filtrat dibuang. Diulang sampai n-heksan atau petroleum eter tidak berwarna. Residu ditambah 10 ml CHCl3, kemudian digojok selama 5 menit, didekantir dalam tabung reaksi yang berisi 100 mg NaSO4 anhidrat, saring. Filtrat dibagi 3 (A, B, C). (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) Tes Liebermann-Burchard A sebagai blanko, B ditambah 3 tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes asam sulfat pekat, kemudian dikocok pelan. Hasil positif bila terjadi perubahan warna hijau-biru untuk saponin steroid, merah-violet untuk saponin triterpenoid dan kuning muda untuk saponin jenuh. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) Tes Salkowski A sebagai blanko, C ditambah 1-2 ml H2SO4 pekat melalui dinding tabung reaksi. Hasil positif mengandung sterol tak jenuh bila terdapat cincin merah pada fase asam. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) 3. Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak yang mengandung 10 gram bahan ditambah dengan pelarut yang sesuai, ditotolkan pada fase diam kemudian di eluasi dengan fase gerak. Langkah ini untuk identifikasi adanya steroid atau triterpenoid bebas. Positif bila terjadi noda

SKRIPSI



23

warna merah-ungu setelah plat KLT dipanaskan di atas hot plate. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) 4.5.3 Pemeriksaan Glikosida Jantung Reaksi Warna Tes Keller-Killiani Ekstrak yang setara dengan 10 gram bahan, diuapkan di atas penangas air sampai kering. Diekstraksi berulang-ulang dengan nheksan sampai n-heksan tidak berwarna. Residu diuapkan untuk menghilangkan n-heksan, ditambah 3 ml FeCl3, diaduk-aduk, dimasukkan dalam tabung reaksi. Kemudian ditambahkan H2SO4 pekat melalui dinding tabung reaksi. Adanya cincin ungu menunjukkan adanya gula 2-deoxy. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) Tes Liebermann-Burchard seperti pada saponin Positif untuk steroid jika terbentuk warna hijau- biru. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) 4.5.4 Pemeriksaan Flavonoid 1. Reaksi Warna Ekstrak yang setara dengan 10 gram bahan, dipanaskan di atas penangas air sampai kering. Diekstraksi berulang-ulang dengan petroleum eter atau n-heksan sampai cairan tidak berwarna. Residu ditambah 2 ml etanol 80%, disaring, filtrat dibagi 4 (A, B, C, D). Tes Bate-Smith & Metcalf A sebagai blanko, B ditambah 0,5 ml HCl pekat, kemudian dipanaskan selama 15 menit di atas penangas air. SKRIPSI



Positif

bila

terjadi

warna

merah

terang

atau

24 ungu

(leukoantosianin). (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) Tes Wilstater A sebagai blanko, C ditambah 0,5 ml HCl pekat dan 4 potong magnesium. Diamati warna yang terjadi, diencerkan dengan air suling, kemudian ditambah 1 ml butanol. Diamati warna yang terjadi pada setiap lapisan. Perubahan warna merah jingga menunjukkan adanya flavon, merah pucat menunjukkan adanya flavonol, merah tua menunjukkan adanya flavonon. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) 2. Kromatografi Lapis Tipis Bahan

: 0,1-0,2 ml ekstrak

Fase diam

: silica gel GF 254 tebal 0,25 mm

Fase gerak

: butanol : asam asetat glasial : aquades (4: 1: 5)

Penampak noda : sitrat borat atau CeSO4 atau uap ammonia Ekstrak dieluasi kemudian dikeringkan dengan hair dryer. Noda yang terjadi diamati dengan pereaksi sitrat borat dan dengan sinar UV pada λ 254 nm kemudian dibandingkan dengan warna noda dari rutin. Adanya flavonoid ditunjukkan dengan adanya noda kuning terang, coklat lemah, kuning hijau, merah jingga. Bila disemprot dengan CeSO4 akan timbul warna oranye sampai coklat atau bila dialiri uap ammonia akan timbul warna kuning tidak permanen. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) 4.5.5 Pemeriksaan Tanin dan Senyawa Polifenol Ekstrak yang setara dengan 10 gram bahan, diuapkan di atas penangas air sampai kering. Setelah dingin, ditambah 20 ml air SKRIPSI



25

suling panas, dikocok sampai homogen kemudian ditambah 5 tetes NaCl 10% untuk mengendapkan zat-zat lain, kemudian disaring. Filtrat dibagi menjadi 4 bagian (A, B, C, D). Tes Gelatin Filtrat A sebagai blanko, B ditambah larutan gelatin 1% lalu diamati terjadinya endapan. Tes Gelatin- NaCl Filtrat A sebagai blanko, filtrat C ditambah larutan 1% gelatin, lalu ditambah NaCl 10%. Diamati terjadinya endapan. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) Tes Ferri klorida Filtrat D ditambah pereksi ferri klorida. Diamati terjadinya warna. Bila tidak timbul warna menunjukkan tannin dan polifenol negatif. Bila timbul warna biru-hitam, hijau-biru, hijau-hitam menunjukkan adanya polifenol. Penafsiran hasil berdasarkan reaksi warna menggunakan tes ferri klorida dapat dilihat pada tabel 4.1 Tabel 4.1 Reaksi warna untuk Tanin dan Senyawa Polifenol No 1

2

3

Reagen

Pengamatan

Keterangan

Gelatin

Tidak timbul endapan

Tannin negatif

Gelatin- NaCl

Tidak timbul endapan

Polifenol negatif

FeCl3

Tidak timbul warna

Gelatin

Timbul endapan

Tannin

Gelatin- NaCl

Timbul endapan

Tipe katekol

FeCl3

Hijau- biru, hijau- hitam

Gelatin

Timbul endapan

Tannin

Gelatin- NaCl

Timbul endapan

Tipe pirogallol

SKRIPSI



4

FeCl3

Biru- hitam

Gelatin- NaCl

Endapan negatif, tetapi

Tannin negatif

timbul warna hijau-biru-

Polifenol positif

26

hitam setelah ditambah FeCl3 4.5.6 Pemeriksaan Glikosida Antrakuinon 1. Reaksi Warna Tes Borntrager Ekstrak yang setara dengan 10 gram bahan, diuapkan sampai kering. Setelah dingin, ditambahkan 10 ml air suling, kemudian disaring, filtrat diekstraksi dengan toluena 5 ml dalam corong pisah 2 kali. Fase toluena diambil kemudian dibagi dua (A, B). A sebagai blanko, B ditambah 5 ml amonia, kemudian dikocok. Positif bila terjadi warna merah pada lapisan alkali. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) Modifikasi Borntrager Test Ekstrak yang setara dengan 1 gram bahan, diuapkan di atas penangas air sampai kering. Setelah dingin ditambah 10 ml KOH 0,5 N dan 1 ml H2O2 encer, dipanaskan di atas penangas air selama 10 menit keumdian disaring. Filtrat ditambah asam asetat glacial sampai reaksi asam. Diekstraksi dengan toluen 2 kali masing-masing 5 ml. fase toluen diambil, dibagi dua (A, B). A sebagai blanko, B ditambah 2-5 ml larutan amonia. Positif jika terjadi warna merah pada lapisan alkali. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978)

SKRIPSI



27

2. Kromatografi Lapis Tipis Bahan

: 0,1-0,2 ml ekstrak

Fase diam

: silika gel GF 254 tebal 0,25 mm yang telah diimpregnasi dengan NaOH 0,01M

Fase gerak

: kloroform : etil asetat : asam asetat (75: 24: 1)

Penampak noda : larutan KOH 10% metanol Positif jika noda kuning, kuning- coklat, merah, violet, hijau (Harborne, 1987) 4.5.7 Pemeriksaan Glikosida Sianohidrin Reaksi Warna Tes Grignard 2-5 gram serbuk ditambah air secukupnya, kemudian ditambahkan 1 ml CHCl3, kemudian ditutupi gabus dengan diselipi kertas pikrat. Kertas pikrat tidak boleh menyentuh cairan kemudian dipanaskan pada suhu 35-40º C atau didiamkan selama 3 jam kemudian diamati perubahan warna pada kertas pikrat. Positif bila terjadi bayangan merah pada kertas pikrat. (Fong, 1990; Zaini dan Indrayanto, 1978) 4.5.8 Pemeriksaan Minyak Atsiri Kromatografi Lapis Tipis Bahan

: serbuk semanggi 50 mg dimikrodestilasi pada suhu 240º

C selama 90 detik menggunakan tanur TAS Fase diam : silika gel GF 254 Fase gerak : toluena : etil asetat (97: 3) Penampak noda

: Anisaldehid- asam sulfat atau fosfomolibdat

kemudian dipanaskan pada suhu 105-110º C selama 5 menit

SKRIPSI



28

Positif bila terjadi noda warna merah- ungu, ungu atau biruungu dengan anisaldehid asam sulfat dan noda biru dengan fosfomolibdat. (Wagner, 1984; Zaini dan Indrayanto, 1978) 4.5.9 Pemeriksaan Kumarin Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak ditotolkan pada lempeng silika gel GF 254 Fase gerak : eter : toluen (1 : 1) Noda diamati pada sinar uv, positif jika terjadi noda violet, biru, coklat, hijau, atau kuning dan warna akan lebih intensif jika disemprot dengan larutan 10% KOH metanol, 20% antimon klorida dalam CHCl3 atau CHCl3 murni. (Wagner, 1984) 4.5.10 Pemeriksaan Iridoid Sebanyak 5 gram serbuk direndam dalam 5 ml HCl 1% selama 6 jam, disaring, kemudian ekstrak HCl tersebut ditambah 1 ml pereaksi Trim Hill. Tabung dipanaskan di atas api bebas selama 1-2 menit kemudian diamati perubahan warna yang terjadi. Adanya iridoid ditunjukkan dengan warna merah ungu, biru, atau hijau biru. (Harborne, 1987) 4.6 Analisis Semi-Kuantitatif KLT-Densitomeri Ekstrak Metanol Daun Semanggi Budidaya dengan Semanggi Liar Masing-masing menggunakan pelarut

sebanyak

1

gram

serbuk

diekstraksi

metanol 30 ml dengan metode sonikasi.

Sonikasi dilakukan 3x10 menit. Hasil ekstraksi kemudian disaring dan ekstrak cair yang didapatkan ditotolkan pada plat KLT dan dieluasi. Fase gerak : n-heksan : etil asetat (4: 1) SKRIPSI



29

Noda dideteksi dengan menggunakan densitometer pada λ 254 nm. Data yang diperoleh kemudian diolah dengan menggunakan SPSS (Statistical Package for The Social Science). Setelah didapatkan data profil kromatogram, plat disemprot dengan anisaldehid asam sulfat dan dipanaskan. Intensitas warna noda yang terjadi diamati dan dibandingkan. 4.7 Rancangan Penelitian Semanggi segar dicuci dengan air mengalir. Sebagian dari semanggi yang telah dicuci digunakan untuk pengamatan ciri morfologi dan anatomi secara makroskopik dan mikroskopik. Sebagian lagi dikeringkan kemudian disortasi dan diperkecil ukurannya hingga didapatkan serbuk simplisia. Serbuk simplisia tersebut digunakan untuk pemeriksaan fragmen serbuk semanggi secara mikroskopik dan untuk skrining fitokimia golongan senyawa yang terkandung.

SKRIPSI



30

Semanggi segar Pencucian Pengeringan, sortasi, pengecilan ukuran partikel

Pemeriksaan secara makroskopik dan mikroskopik

Serbuk simplisia

Ciri morfologi dan anatomi semanggi

Skrining fitokimia

Pemeriksaan mikroskopik Fragmen serbuk semanggi

Golongan senyawa yang terkandung

Gambar 4.2 Skema Rancangan Penelitian

SKRIPSI



BAB V HASIL PENELITIAN 5.1 Hasil Pengamatan Morfologi Pengamatan morfologi secara makroskopik yang dilakukan meliputi habitus, daun, batang, dan akar. 5.1.1 Habitus M. crenata Presl merupakan herba yang tumbuh di lingkungan air tawar seperti persawahan. Tanaman semanggi air dapat dibudidayakan dalam pot. Lingkungan tempat budidaya semanggi dapat disesuaikan dengan habitat aslinya di daerah persawahan, seperti pengisian air dalam pot hingga tanah tergenang. Untuk mengurangi pencemaran logam berat akibat penggunaan air tanah, dapat digunakan air PAM. Pemberian pupuk juga dapat dilakukan untuk tambahan nutrisi bagi pertumbuhan semanggi air. Alat perkembangbiakan dari M. crenata Presl. berupa spora yang keluar dari kotak spora dan tertiup angin kemudian akan jatuh pada tanah. Bila spora jatuh pada tanah yang cocok maka akan tumbuh menjadi tumbuhan baru. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.1

31 SKRIPSI



32

Gambar 5.1 M. crenata Presl. budidaya dalam pot (Dokumentasi pribadi) 5.1.2 Daun Daun M. crenata merupakan daun majemuk yang tersusun dari empat helai anak daun yang saling berhadapan, mengumpul pada ujung tangkai daun. Daun yang masih muda menggulung. Pada saat matahari tenggelam daun akan menutup dan membuka kembali saat matahari terbit. Pada pangkal daun bagian bawah terdapat spora. Helai daun berbentuk segitiga terbalik (cuneatus), pangkal daun runcing (acutus) berwarna kuning, ujung daun tumpul (obtusus), permukaan daun berbulu (pilosus) halus dan jarang, tepi daun rata (integer)

tetapi

sedikit

bergelombang,

tulang

daun

tersusun

menyerupai bentuk kipas, panjang dan lebar daun bervariasi, yaitu berturut-turut 1.5–2.4 cm dan 1.1–2.1 cm, warna daun hijau muda sampai hijau tua dengan warna daun bagian atas cerah sedangkan warna daun bagian bawah pucat. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, dan tabel 5.1 SKRIPSI



Gambar 5.2 Daun M. crenata Presl. tampak atas

Gambar 5.3 Daun M. crenata Presl. tampak bawah

SKRIPSI


33


34

Gambar 5.4 Daun M. crenata Presl. yang masih muda menggulung

Gambar 5.5 Susunan tulang daun M. crenata Presl. yang menyerupai kipas

SKRIPSI



35

Gambar 5.6 Daun M. crenata Presl. menutup saat matahari tenggelam 5.1.3 Tangkai Daun Tangkai daun M. crenata Presl. tumbuh tegak ke atas, muncul pada setiap nodus batang yang tumbuh menjalar di atas permukaan tanah. Tangkai daun berbentuk bulat, tidak berkayu, permukaannya berbulu halus, dan berwarna hijau. Tinggi tangkai daun berkisar antara 1-19 cm. Pada ujung tangkai daun terdapat spora. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.7 dan tabel 5.1 5.1.4 Batang Batang M. crenata Presl. tumbuh mendatar di atas permukaan tanah dan memiliki nodus dimana pada setiap nodus keluar akar dan tangkai daun sehingga disebut stolon. Stolon adalah batang yang tumbuh horizontal di atas atau di bawah permukaan tanah dimana pada setiap nodus dari stolon muncul akar atau tunas yang dapat tumbuh menjadi tumbuhan baru (Tjitrosoepomo, 2003). Stolon M.

SKRIPSI



36

crenata Presl. berbentuk bulat, tidak berkayu, berbulu halus, dan berwarna coklat. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.7 dan tabel 5.1

Tangkai daun

Stolon

Gambar 5.7 Tangkai daun dan stolon M. crenata Presl. 5.1.5 Akar Akar M. crenata Presl. merupakan akar serabut berwarna coklat yang muncul pada setiap nodus dari stolon. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.8 dan tabel 5.1

SKRIPSI



37

Gambar 5.8 Akar M. crenata Presl. yang berupa akar serabut berwarna coklat

SKRIPSI



38

Tabel 5.1 Hasil pengamatan morfologi secara makroskopik dari M. crenata Presl. No.

Pengamatan

1.

Habitus

2.

Daun a. jenis

3.

4.

5.

Herba, menjalar, tumbuh di persawahan, dapat dibudidayakan dalam pot.

b. bentuk helaian daun c. susunan tulang daun d. pangkal daun e. ujung daun f. tepi daun g. permukaan daun h. ukuran  Panjang  Lebar i. warna Tangkai daun a. Bentuk b. Ukuran c. Permukaan d. Warna Stolon a. Bentuk b. Permukaan c. Warna d. Arah tumbuh Akar a. Jenis b. Warna

SKRIPSI

Keterangan

Majemuk, tersusun dari empat helai anak daun yang saling berhadapan, daun yang masih muda menggulung, saat matahari akan tenggelam daun menutup Segitiga terbalik (cuneatus) Menyerupai kipas Runcing (acutus) Tumpul (obtusus) Rata (integer), kadang sedikit bergelombang Berbulu halus tetapi jarang 1.5-2.4 cm 1.1-2.1 cm Hijau muda sampai hijau tua Bulat 1-19 cm Berbulu halus Hijau muda Bulat Berbulu halus Coklat Mendatar Serabut, muncul pada setiap nodus Coklat



39

5.2 Hasil Pengamatan Anatomi Pengamatan anatomi secara mikroskopik meliputi pengamatan melintang dan membujur tanaman segar serta pengamatan fragmen spesifik pada serbuk simplisia dalam media air dan kloralhidrat. Sayatan melintang dilakukan terhadap daun, tangkai, dan stolon. Sedangkan sayatan membujur dilakukan terhadap epidermis atas dan bawah daun, tangkai daun, stolon, dan akar. 5.2.1 Sayatan melintang daun Dari hasil pengamatan sayatan melintang daun M. crenata Presl. tampak jaringan epidermis atas dan bawah, jaringan palisade, jaringan bunga karang, jaringan pengangkut dan stomata. Jaringan epidermis terdiri dari satu lapis dimana terdapat penonjolan dari epidermis yang disebut dengan papila. Jaringan palisade terletak di bawah jaringan epidermis atas saja yang berbentuk memanjang dari atas ke bawah. Pada jaringan pengangkut tampak adanya floem dan xylem yang tersusun secara konsentris dengan tipe amfikribal. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.9, 5.10 dan tabel 5.2

SKRIPSI



c

40

d

a b

Gambar 5.9 Penampang melintang daun M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x; a= epidermis atas, b= parenkim palisade, c= sel bunga karang, d= epidermis bawah

b a

c

Gambar 5.10 Penampang melintang daun M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x; a= stomata, b= xilem, c= floem

SKRIPSI



41

5.2.2 Sayatan melintang tangkai daun Tangkai semanggi tersusun atas jaringan-jaringan epidermis, parenkim korteks, rongga udara, dan jaringan pengangkut. Sel epidermis berbentuk bulat dengan dinding sel yang tipis. Terdapat aerenkim yang merupakan jaringan parenkim dengan rongga udara yang didapati pada tumbuhan yang hidup di tanah jenuh air, dan yang berhabitat akuatik, penting untuk aerasi tumbuhan (Fahn, 1995). Sel parenkim korteks berbentuk bulat. Pada berkas pengangkutan tampak adanya floem dan xylem yang tersusun secara konsentris dengan tipe amfikribal. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.11 dan tabel 5.2

a b

f

c

d

e

Gambar 5.11 Penampang melintang tangkai M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 100x; a= sel epidermis, b= floem, c= sel parenkim korteks, d= rongga udara, e= parenkim dari jaringan aerenkim, f= xylem

SKRIPSI



42

5.2.3 Sayatan melintang stolon Batang semanggi berupa stolon yang menjalar di atas tanah. Pada sayatan melintang stolon terdapat jaringan-jaringan epidermis, parenkim korteks, rongga udara, empulur, dan jaringan pengangkut. Sel epidermis berupa selapis sel berbentuk bulat dengan dinding sel yang tipis. Bentuk sel parenkim korteks bulat. Berkas pengangkutan terdiri dari xylem dan floem yang tersusun secara konsentris dimana floem mengelilingi xylem. Tipe berkas pengangkutan yang demikian disebut dengan tipe amfikribal. Terdapat empulur yang berwarna coklat. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.12 dan tabel 5.2

SKRIPSI



43

a b c d f g

Gambar 5.12 Penampang melintang stolon M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran 100x; a= sel epidermis, b= parenkim dari jaringan aerenkim, c= rongga udara, d= sel parenkim korteks, e= floem, f = xylem, g = empulur 5.2.4 Sayatan epidermis atas daun Pada sayatan membujur epidermis atas daun didapatkan data sebagai berikut: Sel epidermis atas daun berbentuk poligonal, berdinding tipis dan bergelombang. Terdapat dua tipe stomata yaitu stomata tipe anisositik dan diasitik. Stomata tipe anisositik yaitu stomata yang dikelilingi tiga sampai empat buah sel tetangga dengan ukuran yang tidak sama besar. Stomata tipe diasitik yaitu setiap stomata dikelilingi oleh dua sel tetangga (Fahn, 1995). Selain itu juga terdapat tetes

SKRIPSI


e


44

minyak atsiri, trikoma multiseluler berbintik-bintik, dan berkas pengangkutan dengan penebalan spiral. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.13, 5.14, 5.15 dan tabel 5.2

a

b

c

Gambar 5.13 Sel epidermis atas daun M. crenata Presl. dengan stomata tipe anisositik dan diasitik dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x; a= Stomata tipe anisositik, b= Stomata tipe diasitik, c= Dinding sel epidermis bergelombang

SKRIPSI



45

Gambar 5.14 Berkas pengangkutan dengan penebalan spiral yang terdapat di dalam tulang daun pada jaringan parenkim daun M. crenata Presl. disertai dengan tetes minyak atsiri dalam media kloralhidrat. Pengamatan dengan menggunakan mikroskop dengan 400x

Gambar 5.15 Trikoma multiseluler berbintik-bintik pada permukaan atas daun M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat. Pengamatan dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x

SKRIPSI



46

5.2.5 Sayatan epidermis bawah daun Pada sayatan membujur epidermis bawah daun didapatkan data sebagai berikut: Sel epidermis daun bagian atas berbentuk poligonal, berdinding tipis dan bergelombang. Terdapat stomata tipe anisositik. Selain itu juga terdapat

trikoma

multiseluler

berbintik-bintik

dan

berkas

pengangkutan dengan penebalan spiral. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.16, 5.17, 5.18, dan tabel 5.2

Gambar 5.16 Sel epidermis bawah daun M. crenata Presl. dengan stomata tipe anisositik dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x

SKRIPSI



47

Gambar 5.17 Berkas pengangkutan dengan penebalan spiral yang terdapat di dalam tulang daun pada jaringan parenkim daun M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat. Pengamatan dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x.

Gambar 5.18 Trikoma multiseluler berbintik-bintik pada permukaan daun bagian bawah M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat. Pengamatan dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x

SKRIPSI



48

5.2.6 Sayatan membujur tangensial dan radial tangkai daun Pada pengamatan sediaan sayatan membujur tangensial tangkai daun didapatkan bentuk sel epidermis berupa persegi panjang dengan ujung lancip. Terdapat tetes minyak atsiri dan stomata tipe parasitik. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.19 dan tabel 5.2

a

c

b Gambar 5.19 Sayatan membujur tangensial tangkai daun M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x; a= stomata tipe parasitik, b= tetes minyak atsiri, c= sel epidermis Sedangkan pada pengamatan sediaan sayatan membujur radial tangkai daun didapatkan bentuk berkas pengangkutan dengan tipe penebalan spiral dan trikoma multiseluler berbintik-bintik. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.20, 5.21 dan tabel 5.2

SKRIPSI



49

Gambar 5.20 Berkas pengangkutan dengan penebalan spiral pada sayatan membujur radial tangkai daun M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x

Gambar 5.21 Trikoma multiseluler berbintik-bintik pada sayatan membujur tangkai daun M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat. Pengamatan dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x

SKRIPSI



50

5.2.7 Sayatan membujur tangensial dan radial stolon Pada pengamatan sediaan sayatan membujur tangensial stolon didapatkan bentuk sel epidermis berupa persegi panjang dengan ujung lancip dan terdapat tetes minyak atsiri. Sedangkan pada pengamatan sediaan sayatan membujur radial stolon didapatkan berkas pengangkutan dengan penebalan spiral. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.22, 5.23, dan tabel 5.2

a

b

Gambar 5.22 Sayatan membujur tangensial stolon M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x; a= minyak atsiri, b= sel epidermis

SKRIPSI



51

Gambar 5.23 Berkas pengangkutan dengan penebalan spiral pada sayatan membujur radial stolon M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat. Pengamatan dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x

Gambar 5.24 Trikoma multiseluler pada sayatan membujur stolon M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat. Pengamatan dengan menggunakan mikroskop perbesaran 100x

SKRIPSI



52

5.2.8 Sayatan membujur akar Pada pengamatan sayatan membujur akar didapatkan berkas pengangkutan dengan penebalan spiral. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.25 dan tabel 5.2

Gambar 5.25 Berkas pengangkutan dengan penebalan spiral pada sayatan membujur akar M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat. Pengamatan dengan menggunakan mikroskop perbesaran 1000x 5.2.9 Sayatan melintang akar Pada sayatan melintang akar terdapat eksodermis, korteks, dan berkas pengangkutan. Berkas pengangkutan terdiri dari xylem dan floem tersusun secara konsentris dengan tipe amfikribal. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.26, 5.27, dan tabel 5.2

SKRIPSI



a

b

Gambar 5.26 Sayatan melintang akar M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 100x; a= rongga udara, b= eksodermis

SKRIPSI


53


54

c

d e

Gambar 5.27 Sayatan melintang akar M. crenata Presl. dalam media kloralhidrat yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x; c= korteks, d= xylem, e= floem Tabel 5.2 Hasil pengamatan anatomi secara mikroskopik berupa sayatan melintang dan membujur daun, tangkai daun, stolon, dan akar M. crenata Presl. No. 1.

2.

Nama preparat yang diamati Sayatan melintang daun a. Bentuk sel epidermis b. Parenkim palisade c. Parenkim bunga karang d. Stomata e. Tipe berkas pengangkutan Sayatan melintang tangkai a. Bentuk sel epidermis b. Dinding sel

SKRIPSI

Keterangan Selapis sel berbentuk bulat dan menonjol yang disebut papila Ada, bentuk memanjang Ada, bentuk bulat Ada Amfikribal Selapis sel berbentuk bulat Tipis



3.

4.

5.

c. Rongga interseluler d. Bentuk sel parenkim e. Aerenkim f. Tipe berkas pengangkutan Sayatan melintang stolon a. Bentuk sel epidermis b. Dinding sel c. Rongga interseluler d. Bentuk sel parenkim e. Aerenkim f. Tipe berkas pengangkutan Sayatan membujur epidermis atas dan bawah daun a. Bentuk sel epidermis b. Stomata c. Berkas pengangkutan d. Trikoma f. Minyak atsiri Sayatan membujur tangkai daun a. Bentuk sel epidermis b. Stomata c. Berkas pengangkutan d. Trikoma e. Minyak atsiri

6.

Sayatan membujur stolon a. Bentuk sel epidermis b. Stomata c. Berkas pengangkutan d. Trikoma e. Minyak atsiri

7.

Sayatan membujur akar

8.

Sayatan melintang akar

SKRIPSI

55

Ada Bulat Ada Amfikribal Selapis sel berbentuk bulat Tipis Ada Bulat Ada Amfikribal Poligonal, berdinding sel tipis dan bergelombang Ada Dengan penebalan spiral Multiseluler berbinti-bintik Ada Persegi panjang dengan ujung lancip Ada Dengan penebalan spiral Multiseluler berbintik-bintik Ada Persegi panjang dengan ujung lancip Tidak ada Dengan penebalan spiral Multiseluler Ada Terdapat berkas pengangkutan dengan penebalan spiral Terdapat rongga udara, eksodermis, korteks, dan berkas pengangkutan tipe amfikribal



56

5.2.10 Serbuk daun Dari hasil pengamatan serbuk daun M. crenata Presl. didapatkan data sebagai berikut: Secara organoleptik serbuk daun M. crenata Presl. berwarna hijau, berbau aromatik, dan tidak berasa. Dalam pengamatan secara mikroskopik ditemukan fragmen sel epidermis berbentuk poligonal dengan dinding sel tipis dan bergelombang, stomata tipe anisositik, fragmen berkas pengangkutan dengan penebalan spiral, jaringan parenkim dengan tetes minyak atsiri, dan trikoma multiseluler berbintik-bintik. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.28, 5.29, 5.30, dan tabel 5.3

Gambar 5.28 Sel epidermis dengan stomata tipe anisositik yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x

SKRIPSI



57

Gambar 5.29 Berkas pengangkutan dengan penebalan spiral yang diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran 400x

Gambar 5.30 Trikoma berbintik-bintik yang diamati dengan menggunakan mikroskop pada perbesaran 400x SKRIPSI



58

Tabel 5.3 Hasil pengamatan organoleptik dan mikroskopik serbuk daun M. crenata Presl. Organoleptik

Fragmen

Warna : hijau

Epidermis

: bergelombang

Bau

: aromatik

Dinding sel

: tipis

Rasa

: tidak berasa

Tipe stomata

: anisositik

Berkas pengangkutan : dengan penebalan spiral Trikoma

: multiseluler berbintik-bintik

Minyak atsiri

: ada

5.3 Hasil Skrining Fitokimia Pada skrining fitokimia dalam M. crenata Presl., diperlukan bahan dalam bentuk serbuk simplisia dan ekstrak. Daun M. crenata Presl. yang digunakan dalam penelitian ini merupakan hasil budidaya di daerah Rungkut Surabaya. Daun semanggi segar yang telah dipanen,

dikeringkan dengan cara diangin-anginkan di tempat

terbuka. Setelah kering, simplisia diserbuk dengan alat penggiling. Serbuk daun yang dihasilkan sebesar 122 g. Ditimbang serbuk daun sebanyak 50 gram kemudian diekstraksi dengan metode ultrasonik menggunakan pelarut etanol 80% sebanyak 500 ml. Serbuk diekstraksi dalam alat ultrasonic bath selama 10 menit sambil diaduk. Ekstrak daun yang diperoleh sebanyak 3,7110 gram. Setelah didapatkan serbuk dan ekstrak daun, dilakukan skrining fitokimia. Dari hasil skrining fitokimia ekstrak etanol 80% daun M. crenata Presl. diperoleh hasil sebagai berikut:

SKRIPSI



59

5.3.1 Pemeriksaan Alkaloid a. Reaksi Pengendapan Pada reaksi pengendapan didapatkan hasil negatif. Tidak terjadi endapan setelah penambahan pereaksi Meyer, Wagner, dan Bouchardat. b. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Dari KLT didapatkan hasil negatif. Setelah plat KLT disemprot dengan pereaksi Dragendorf tidak tampak noda merah jingga 5.3.2 Pemeriksaan Glikosida Saponin a. Uji buih Pada uji buih didapatkan hasil positif. Buih terjadi setinggi 1,6 cm dan stabil selama 30 menit. b. Reaksi warna Pada tes Liebermann-Burchard didapatkan hasil positif. Setelah penambahan asam asetat anhidrat dan asam sulfat pekat terjadi warna hijau yang menunjukkan adanya saponin steroid. Sedangkan pada tes Salkowski didapatkan hasil negatif karena tidak terjadi cincin merah pada lapisan asam. c. Kromatografi Lapis Tipis Identifikasi steroid atau triterpenoid bebas dengan KLT didapatkan hasil positif. Setelah disemprot dengan anisaldehid asam sulfat terjadi warna noda merah ungu. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.31.

SKRIPSI



60

Rf = 0.89 Rf = 0.76

Rf = 0.41 Rf = 0.29

Gambar 5.31 Kromatogram golongan senyawa steroid atau triterpenoid ekstrak etanol 80% Fase gerak : n-heksana: etil asetat (4:1) Penampak noda : anisaldehid asam sulfat 5.3.3 Pemeriksaan Glikosida Jantung Hasil tes Killer-Killiani menunjukkan hasil negatif dengan tidak terjadi cincin ungu. Sedangkan untuk tes Liebermann-Burchard didapatkan hasil positif mengandung inti steroid pada ekstrak dengan timbulnya warna hijau. 5.3.4 Pemeriksaan Flavonoid a. Reaksi warna

SKRIPSI



61

Hasil tes Bate Smith & Metcalf menunjukkan hasil negatif. Dengan tes Wilstater tidak terjadi warna merah pucat sampai merah tua melainkan terjadi warna kuning jernih. b. Kromatografi Lapis Tipis Setelah plat KLT dieluasi terjadi noda berwarna kuning namun setelah diberi uap ammonia tidak terjadi perubahan dan bila disempot dengan CeSO4 tidak terjadi warna coklat atau oranye. 5.3.5 Pemeriksaan Tanin dan Polifenol Hasil positif polifenol karena pada penambahan FeCl3 terjadi warna hijau kehitaman, namun pada penambahan gelatin dan gelatin-NaCl tidak terjadi endapan. 5.3.6 Pemeriksaan Glikosida Antrakuinon a. Reaksi warna Hasil

uji

Borntrager

dan

Modifikasi

Borntrager

menunjukkan hasil negatif, tidak terjadi warna merah pada lapisan alkali. b. Kromatografi Lapis Tipis setelah plat disemprot dengan KOH 10% metanol tidak terjadi noda warna kuning, kuning coklat, merah ungu, atau hijau ungu. 5.3.7 Pemeriksaan Glikosida Sianohidrin Dengan tes Grignard tidak terjadi bayangan warna merah pada kertas pikrat yang menunjukkan hasil negatif.

SKRIPSI



62

5.3.8 Pemeriksaan Minyak Atsiri Pada pemeriksaan minyak atsiri, serbuk sebanyak 49.2 mg didestilasi dengan Tanur TAS. Destilat hasil destilasi ditotolkan pada plat KLT, kemudian dieluasi. Plat disemprot dengan penampak noda anisaldehid asam sulfat kemudian plat dipanaskan dan terjadi warna noda merah ungu. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.32

Rf = 0,75 Rf = 0,60

Rf = 0,25 Rf = 0,19

Gambar 5.32 Kromatogram minyak atsiri dengan fase gerak toluen : etil asetat (97:3) dan penampak noda anisaldehid asam sulfat 5.3.9 Pemeriksaan Kumarin Dari KLT didapatkan hasil negatif. Setelah plat dieluasi dan diamati di bawah sinar UV λ 254 nm dan 366 nm tidak terjadi noda berwarna violet, biru, coklat, hijau, atau kuning.

SKRIPSI



63

5.3.10 Pemeriksaan Iridoid Dari reaksi warna didapatkan hasil negatif. Tidak terjadi perubahan warna ungu, biru, atau hijau biru setelah dipanaskan. Tabel 5.4 Hasil Skrining fitokimia ekstrak etanol 80% daun M. crenata Presl. Golongan

Metode

senyawa

pengujian

Alkaloid

Saponin

Hasil

Keterangan

Bouchardat

Tidak terjadi endapan

(-) alkaloid

Meyer


(-) alkaloid

Wagner


(-) alkaloid

Uji Buih

Terjadi buih setinggi 1.6

(+) saponin

cm yang stabil selama 30 menit Liebermann-

Terjadi warna hijau

Burchard Salkowski

(+) saponin steroid atau triterpenoid

Tidak

terjadi

cincin

(-) sterol tak jenuh

terjadi

warna

(-) leukoantosianin

merah Flavonoid

Bate-Smith &

Tidak

Metcalf

merah terang

Wilstater

Tidak

terjadi

warna

(-)

merah

pucat,

merah

flavonol, flavanon

flavon,

jingga, atau merah tua Glikosida

Keller-Killiani

Tidak

jantung

Liebermann-

ungu

Burchard

Terjadi warna hijau

SKRIPSI

terjadi

cincin

(-) gula-2-deoxy (+) inti steroid



64

Tannin dan

Gelatin


(-) tannin

Polifenol

Gelatin-NaCl


(-) tannin

FeCl3

Terjadi

(+) polifenol

warna

hijau

kehitaman Glikosida

Borntrager

Antrakinon

Tidak

terjadi

warna

merah

muda

pada

Modifikasi

lapisan alkali

Borntrager

Tidak

terjadi

warna

merah

muda

pada

lapisan alkali

(-)

antrakinon

bebas (-)

antrakinon

bebas

dan

glikosida antrakinon

Glikosida

Grignard

Sianohidrin

Tidak terjadi bayangan

(-)

glikosida

warna merah pada kertas

sianohidrin

pikrat Iridoid

Trim-Hill

Tidak

terjadi

warna

(-) iridoid

merah ungu, biru, atau biru

hijau

setelah

dipanaskan 5.3.11 Analisis Semi-Kuantitatif KLT-Densitometri Ekstrak Metanol Daun Semanggi Budidaya dan Semanggi Liar Dari hasil pengamatan profil kromatogram menggunakan KLT-densitometri didapatkan hasil yaitu terdapat 10 peak pada masing-masing sampel. Plat KLT yang telah didensitometri kemudian disemprot dengan penampak noda anisaldehid asam sulfat untuk melihat kromatogram senawa golongan terpenoid yang terkandung dalam daun semanggi. Pada plat KLT yang telah di semprot dengan anisaldehid asam sulfat dan dipanaskan tampak SKRIPSI



65

adanya 4 noda berwarna merah ungu pada masing-masing sampel dengan intensitas warna yang berbeda. Intensitas warna noda sampel semanggi liar lebih pekat dari semanggi budidaya. Jumlah noda yang tampak pada plat KLT sama pada masing-masing sampel. Hasil dapat dilihat pada gambar 5.33.

B1 B2 L1 L2

Gambar 5.33 Kromatogram ekstrak metanol dengan eluen n-heksana : etil asetat (4:1) dan penamapak noda anisaldehid asam sulfat Keterangan : B1 = ekstrak metanol semanggi budidaya replikasi 1 B2 = ekstrak metanol semanggi budidaya replikasi 2 L1 = ekstrak metanol semanggi liar replikasi 1 L2 = ekstrak metanol semanggi liar replikasi 2 Luas area dari masing-masing peak yang terdeteksi dihitung dengan cara membandingkan luas area tiap peak dengan luas area peak yang SKRIPSI



66

mempunyai harga Rf sama. Hasil perbandingan luas area dapat dilihat pada tabel 5.5. Tabel 5.5 Hasil perbandingan area profil kromatogram semanggi budidaya dengan semanggi liar Column1

B1

B2

L1

L2

1

0.2534

0.2310

0.3373

0.3068

2

0.1628

0.1469

0.3542

0.3910

3

0.0276

0.0203

0.0180

0.0211

4

0.2597

0.2413

0.0743

0.0759

5

1.0000

1.0000

1.0000

1.0000

6

0.0709

0.0858

0.0639

0.0986

7

0.1155

0.0936

0.1626

0.2658

8

0.2038

0.2007

0.3011

0.2907

9

0.2434

0.2334

0.4191

0.4000

10

0.1196

0.0295

0.0384

0.0621

Keterangan :

B1 = ekstrak metanol semanggi budidaya replikasi 1 B2 = ekstrak metanol semanggi budidaya replikasi 2 L1 = ekstrak metanol semanggi liar replikasi 1 L2 = ekstrak metanol semanggi liar replikasi 2

Dari hasil pengamatan profil kromatogram hasil deteksi densitomter serta Rf dan area ekstrak metanol semanggi budidaya dengan semanggi liar dapat dilihat bahwa terdapat 10 peak yang terdeteksi pada masing-masing sampel dengan harga Rf yang sama dan luas area yang berbeda. Harga Rf yang sama menunjukkan bahwa senyawa yang terdeteksi adalah senyawa yang sama pada masing-masing sampel. Sedangkan luas area yang berbeda menunjukkan konsentrasi senyawa pada masing-masing peak berbeda. Hasil kromatogram dapat dilihat pada gambar 5.34, 5.35, 5.36, 5.37 serta Rf dan area kromatogram pada tabel 5.6, 5.7, 5.8, 5.9.

SKRIPSI



67

Gambar 5.34 Profil kromatogram hasil deteksi densitometer ekstrak metanol semanggi budidaya replikasi 1 (B1) Tabel 5.6 Rf dan area kromatogram ekstrak metanol semanggi budidaya replikasi 1 (B1)

SKRIPSI



68

Gambar 5.35 Profil kromatogram hasil deteksi densitometer ekstrak metanol semanggi budidaya replikasi 2 (B2) Tabel 5.7 Rf dan area kromatogram ekstrak metanol semanggi budidaya replikasi 2 (B2)

SKRIPSI



69

Gambar 5.36 Profil kromatogram hasil deteksi densitometer ekstrak metanol semanggi liar replikasi 1 (L1) Tabel 5.8 Rf dan area kromatogram ekstrak metanol semanggi liar replikasi 1 (L1)

SKRIPSI



70

Gambar 5.37 Profil kromatogram hasil deteksi densitometer ekstrak metanol semanggi liar replikasi 2 (L2) Tabel 5.9 Rf dan area kromatogram ekstrak metanol semanggi liar replikasi 2 (L2)

SKRIPSI



BAB VI PEMBAHASAN Marsilea crenata Presl. atau yang biasa disebut semanggi merupakan salah satu tanaman dari divisi Pteridophyta (tumbuhan paku). Semanggi termasuk ke dalam divisi Pteridophyta karena mempunyai ciriciri terdapat kormus, yang artinya tubuhnya dengan nyata dapat dibedakan dalam tiga

bagian pokok,

yaitu akar,

batang,

dan daun.

Alat

perkembangbiakan utama dari tumbuhan paku adalah spora. Namun pada tumbuhan paku belum dihasilkan biji. Spora pada semanggi terletak pada tangkai daun. Berdasarkan hasil penelitian didapatkan ciri morfologi semanggi yang spesifik, yaitu berupa herba yang tumbuh di lingkungan air tawar, daun yang masih muda menggulung yang merupakan ciri dari tumbuhan paku, daun merupakan daun majemuk dengan empat helai anak daun yang saling berhadapan. Daun majemuk adalah daun dimana pada satu tangkai terdapat beberapa helai anak daun. Daun majemuk semanggi terdiri atas bagian ibu tangkai daun (petiolus comunis), tangkai anak daun (petiololus), dan anak daun. Daun semanggi akan menutup pada saat matahari tenggelam dan membuka kembali pada pagi hari. Fenomena menutupnya daun tersebut berkaitan dengan sifat iritabilitas tanaman, yaitu kemampuan untuk menerima dan menanggapi rangsangan. Rangsangan yang mempengaruhi terjadinya suatu gerak tumbuhan antara lain cahaya, air, sentuhan, suhu, gravitasi, dan zat kimia (Depdiknas, 2008). Peristiwa menutupnya daun semanggi saat matahari tenggelam berkaitan dengan gerak niktinasi, yaitu gerak tanaman yang disebabkan oleh keadaan gelap. (Depdiknas, 2008) Setelah dilakukan pengamatan morfologi, selanjutnya daun semanggi segar diambil, kemudian dikeringkan dengan cara diangin71 SKRIPSI



72

anginkan, dan diserbuk. Simplisia yang telah diserbuk digunakan untuk identifikasi ciri anatomi yang khas serta organoleptik dari serbuk simplisia. Dari hasil pengamatan secara mikroskopik didapatkan ciri anatomi yang khas dari serbuk simplisia semanggi, yaitu adanya stomata tipe anisositik, trikoma berbintik-bintik, dan berkas pengangkutan dengan penebalan spiral. Secara organoleptik, serbuk simplisia berwarna hijau, berbau aromatik, dan tidak berasa. Selain pengamatan mikroskopik dari serbuk simplisia semanggi, dilakukan pengamatan mikroskopik terhadap sayatan melintang dan membujur daun, tangkai daun, stolon, dan akar untuk mendapatkan data ciri anatomi. Pada sayatan melintang daun tampak jaringan epidermis atas dan bawah, jaringan palisade, jaringan bunga karang, jaringan pengangkut, dan stomata. Jaringan epidermis terdiri dari selapis sel dimana terdapat penonjolan dari epidermis yang disebut dengan papila. Papila ini merupakan alat tambahan (organa accesoria) yang menyebabkan tumbuhan tersebut terasa halus seperti beludru bila diraba (Tjitrosoepomo, 1995). Dari hasil pengamatan membujur epidermis atas daun didapatkan ciri anatomi, yaitu stomata tipe anisositik dan diasitik, trikoma multiseluler berbintik-bintik, dan berkas pengangkutan dengan penebalan spiral pada tulang daun. Sedangkan pada pengamatan membujur epidermis bawah daun didapatkan ciri anatomi yang spesifik yaitu, stomata tipe anisositik, trikoma multiseluler berbintik-bintik, dan berkas pengangkutan dengan penebalan spiral pada tulang daun. Pengamatan terhadap trikoma multiseluler berbintik-bintik yang terdapat pada epidermis daun dan tangkai daun dilakukan dengan cara menggoreskan cover glass pada permukaan daun maupun tangkai daun, kemudian diletakkan pada objek glass yang telah ditetesi air dan ditambah

SKRIPSI



73

kloralhidrat lalu dipanaskan di atas api bebas. Hal ini dilakukan karena trikoma pada semanggi sangat halus dan mudah terlepas saat disentuh. Dari hasil pengamatan sayatan melintang akar tampak adanya eksodermis, korteks, rongga udara, dan berkas pengangkutan. Berkas pengangkutan yang terdapat pada akar merupakan berkas pengangkutan dengan tipe amfikribal. Pada pengamatan melintang tangkai daun dan stolon terdapat rongga udara yang penting untuk aerasi yang dapat meningkatkan kandungan oksigen. Rongga udara ini sering didapati pada tumbuhan yang berhabitat akuatik (Fahn, 1995). Selain itu, juga didapatkan ciri spesifik dari penampang melintang tangkai stolon, dan akar yaitu adanya berkas pengangkutan dengan tipe amfikribal dimana floem mengelilingi xylem. Berkas pengangkutan dengan tipe amfikribal ini umum terdapat pada Pteridophyta. (Fahn, 1995) Dari data pengamatan penampang melintang dan membujur daun, tangkai daun, stolon, dan akar sudah cukup mewakili ciri anatomi tanaman semanggi sehingga dapat digunakan sebagai acuan dalam standarisasi simplisia. Ciri anatomi yang spesifik dari semanggi yaitu tipe stomata anisositik dan trikoma multiseluler berbintik-bintik pada epidermis atas dan bawah daun serta berkas pengangkutan dengan penebalan spiral yang tampak pada penampang membujur tangkai daun, stolon, dan akar. Untuk mengetahui golongan senyawa apa saja yang terdapat dalam semanggi dilakukan skrining fitokimia. Untuk ekstraksi awal digunakan pelarut yang dapat melarutkan senyawa yang bersifat polar, semi polar, maupun non polar. Dalam penelitian ini digunakan pelarut etanol 80% untuk proses ekstraksi. Hal ini dikarenakan sifat dari etanol 80% yang bersifat polar sehingga dapat melarutkan senyawa baik yang bersifat polar, semi polar, dan non polar.

SKRIPSI



74

Pada proses ekstraksi dilakukan dengan menggunakan metode sonikasi. Sonikasi merupakan metode yang biasanya digunakan untuk mengekstraksi senyawa-senyawa berbobot molekul rendah dan bersifat atsiri. Metode ini juga digunakan untuk mengekstraksi senyawa-senyawa yang bersifat volatil dan semi volatil (USEPA, 1984). Sonikasi mengandalkan energi gelombang yang menyebabkan proses kavitasi, yaitu suatu proses pembentukan gelembung-gelembung kecil akibat adanya transmisi gelombang ultrasonik, untuk membantu difusi pelarut ke dalam dinding sel tanaman. Dinding sel tanaman akan pecah dan senyawasenyawa yang terkandung dalam sel tanaman akan keluar. Metode ini dipilih, selain karena jumlah serbuk yang diekstraksi tidak banyak tetapi juga karena semanggi mengandung minyak atsiri dan golongan senyawa terpenoid. Metode ini memiliki keuntungan yaitu efisiensi waktu dan jumlah pelarut yang digunakan. Berdasarkan skrining fitokimia didapatkan hasil bahwa dalam daun semanggi terdapat golongan senyawa polifenol, steroid bebas, saponin, dan minyak atsiri. Pada uji buih untuk skrining saponin didapatkan hasil positif, yaitu timbul buih yang stabil selama lebih dari 30 menit. Dengan reaksi warna didapatkan hasil positif saponin steroid pada uji LiebermannBurchard dimana terjadi warna hijau setelah penambahan asam asetat anhidrat dan asam sulfat pekat. Pada uji salkowski didapatkan hasil negatif sterol tak jenuh. Untuk skrining terpenoid/ steroid bebas dengan metode KLT menunjukkan hasil positif, yaitu muncul noda berwarna merah ungu setelah disemprot dengan anisaldehid asam sulfat. Dalam pemeriksaan minyak atsiri terjadi sedikit kendala dimana Tanur TAS yang digunakan tidak dapat mencapai suhu yang diinginkan, yaitu 240º C. Hal ini dikarenakan alat yang sudah dalam kondisi kurang baik. Suhu yang digunakan untuk destilasi minyak atsiri dengan alat Tanur

SKRIPSI



75

TAS ini hanya bisa mencapai suhu 180º. Namun dari hasil pemeriksaan didapatkan hasil positif mengandung minyak atsiri. Minyak atsiri merupakan golongan senyawa terpenoid yang secara kimia dapat berupa monoterpen dan seskuiterpen yang mempunyai titik didih berbeda (titik didih monoterpen 140º - 180ºC, titik didih seskuiterpen >200ºC) (Harborne, 1996). Hasil positif pada pemeriksaan minyak astiri ini didapat karena titik didih dari monoterpen yang berkisar 140º - 180ºC sehingga dapat terdeteksi dengan penggunaan Tanur TAS pada suhu 180ºC. Sampel semanggi yang digunakan dalam penelitian ini merupakan tanaman hasil budidaya. Budidaya dilakukan karena selama ini semanggi yang digunakan oleh masyarakat sebagai bahan makanan diperoleh dari habitat aslinya di alam yang tumbuh secara liar. Dengan dilakukannya budidaya

diharapkan

dapat

meningkatkan

kualitas

tanaman

dan

mengendalikan faktor-faktor yang berpengaruh pada kandungan senyawa kimia yang dihasilkan tanaman serta mengurangi pencemaran-pencemaran yang dapat terjadi. Secara anatomi dan morfologi dari hasil perbandingan dengan penelitian yang dilakukan Tiyaningsih (2007) tidak ada perbedaan antara semanggi liar dan budidaya. Untuk mengetahui perbedaan semanggi liar dan budidaya dilakukan uji kualitatif dengan menggunakan KLT. Ekstrak metanol dari serbuk semanggi liar dan budidaya yang dihasilkan kemudian ditotolkan pada plat KLT dengan jumlah totolan yang sama (16µL) dan dieluasi. Setelah itu, plat didensitometri untuk melihat profil kromatogram. Dari hasil profil kromatogram tersebut, dibandingkan luas area senyawasenyawa yang terdeteksi dengan luas area senyawa yang mempunyai Rf sama (peak 5 dalam tabel Rf dan area kromatogram) pada setiap sampel. Hasil perhitungan kemudian dianalisis dengan SPSS (Statistical Package for The Social Science) dan dilihat harga “Sig. (2 tailed)”. Dikatakan

SKRIPSI



76

terdapat perbedaan yang signifikan pada dua sampel bila harga “Sig.” < 0,05. Dari hasil analisis 10 peak yang dibandingkan tidak semua peak dari sampel L (semanggi liar) lebih tinggi dari sampel B (semanggi budidaya). Hanya beberapa peak saja yang menunjukkan hasil adanya perbedaan yang signifikan dari kedua sampel. Pada lampiran hasil perhitungan statistik diketahui harga “Sig. (2 tailed)” pada area 2, 4, 8, dan 9 yaitu 0,08; 0,003; 0,03; dan 0,04 saja yang menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan antara sampel L dengan sampel B. Perbedaan yang signifikan tersebut menjukkan adanya perbedaan konsentrasi yang terdeteksi dari masing-masing senyawa dalam sampel. Selain dari rasio area dilihat juga intensitas warna noda yang terjadi setelah disemprot dengan anisaldehid asam sulfat dan dipanaskan. Kepekatan intensitas warna menunjukkan banyaknya jumlah senyawa yang terjerap dalam plat silika setelah dieluasi. Dari intensitas warnanya terlihat bahwa intensitas warna pada semanggi liar lebih pekat daripada semanggi budidaya. Produksi, mutu, dan kandungan zat aktif tanaman ditentukan oleh varietas yang digunakan, cara budidaya, dan lingkungan tempat tumbuhnya. Perbedaan antara semanggi budidaya dan semanggi liar dapat disebabkan karena lingkungan tempat tumbuhnya yang berbeda sehingga menyebabkan perbedaan pada mutu dan kandungan metabolit sekundernya. Meskipun terdapat perbedaan yang signifikan antara semanggi budidaya dan semanggi liar namun tidak dapat disimpulkan bahwa semanggi liar lebih baik daripada semanggi budidaya. Kualitas mutu dari semanggi tetap menjadi pertimbangan dan persyaratan yang harus dipenuhi karena pemanfaatannya oleh masyarakat sebagai bahan pangan yang dikonsumsi sehari-hari. Untuk mendapatkan semanggi dengan kualitas mutu yang dapat dijamin perlu

SKRIPSI



77

dilakukan cara budidaya yang tepat dan kontrol lingkungan tempat tumbuh semanggi. Selain itu perlu dilakukan penelitian lebih lanjut secara kuantitatif untuk mengetahui pengaruh kondisi lingkungan terhadap mutu dan kandungan metabolit sekunder dari semanggi budidaya dan semanggi liar.

SKRIPSI



DAFTAR PUSTAKA Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1985. Cara Pembuatan Simplisia. Jakarta, hal. 1-22 Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1987. Tradisional. Jilid I, Jakarta, hal. 2

Analisis Obat

Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Cetakan Pertama, Jakarta, hal. 3-12 Fahn, A., 1992. Anatomi Tumbuhan. Yogyakarta: Gajah Mada University Press, hal. 30-92 Fong, H. H. S., Tin-Wa, Maung and Fransworth, N. R., 1990. Phytochemical Screening. Chicago: Department of Pharmacognosy of Illions Ascriptove Medical Center, page 32-69 Harborne, B. J., 1996. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Diterjemahkan oleh Kosasi dan Soediro, I., Bandung: ITB, hal. 113-114, 123-137, 147-156 Hutapea, J. R., 1994. Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Jilid III, Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia, hal. 141-142 Laswati, H., 2007. Kombinasi Latihan Fisik dan Pemberian Daun Semanggi Menghambat Peningkatan Ketidakseimbangan Proses Remodeling Tulang Perempuan Pascamenopause Melalui Peran Reseptor Estrogen dan Sel Osteoblas. Disertasi. Surabaya: Program Pasca Sarjana Universitas Airlangga Tiyaningsih, D. W., 2007. Studi Makroskopis, Mikroskopis, dan Skrining Fitokimia Marsilea crenata Presl. Skripsi. Surabaya: Fakultas Farmasi Universitas Airlangga 80

SKRIPSI



81

Tjitrosoepomo, G. 1985. Morfologi Tumbuhan. Yogyakarta: Gajahmada University Press, hal. 11-118 USEPA, 2007. Methods for Volatile and Semivolatile Compounds. Las Vegas: Enviromental Monitoring System Laboratory, Office of Research and Development Van Steenis C. G. G. J., 2006. Flora Untuk Sekolah di Indonesia. Jakarta Pusat: PT Pradnya Pramita, hal. 70-71 Wagner, H. S., Bladt, and Zgainski, E. M., 1984. Plant Drug Analysis (A thin Layer Chromatography Atlas). Springer-Verlag. Berlin: Heidelberg, page 3-8, 52-58, 126, 162-168 WHO, 2003. Traditional Medicine. Diakses dari www.who.int/mediacenter/factsheets/fls34/en, pada tanggal 25 Januari 2012 Zaini, N. C. dan Indrayanto, G., 1978. Cara-cara Skrining Fitokimia. Surabaya: Fakultas Farmasi Universitas Airlangga, hal 1-14 http://belajar.kemdiknas.go.id/file_storage/materi_pokok/MP_243/zip/MP_ 243.html, diakses pada tanggal 1 Agustus 2012 http://www.akvarijum.org/baza_biljaka/big/Marsilea_crenata.jpg, pada tanggal 11 September 2012

SKRIPSI

diakses



Lampiran HASIL PERHITUNGAN STATISTIK T-Test [DataSet1] Group Statistics Kelompok Area1

N

Mean

Std. Deviation

Std. Error Mean

Sampel B

2

.242200

.0158392

.0112000

Sampel L

2

.322050

.0215668

.0152500

SKRIPSI

MORFOLOGI, ANATOMI, DAN ...


82


Independent Samples Test Levene's Test for Equality of Variances

t-test for Equality of Means 95% Confidence Interval of the Sig. (2-

F

Sig.

t

df

Mean

Std. Error

tailed) Difference Difference

Difference Lower

Upper

Area1 Equal variances

1.724E15

.000 -4.220

2

.052 -.0798500

.0189210 -.1612603

.0015603

-4.220 1.836

.060 -.0798500

.0189210 -.1686602

.0089602

assumed Equal variances not assumed

SKRIPSI



83


T-Test [DataSet1] Group Statistics Kelompok Area2

N

Mean

Std. Deviation

Std. Error Mean

Sampel B

2

.154850

.0112430

.0079500

Sampel L

2

.372600

.0260215

.0184000

SKRIPSI



84




F

Sig.

t

df

Mean

Std. Error


Difference Lower

Upper


4.842E15

.000 -10.864

2

.008 -.2177500

.0200440 -.3039924 -.1315076

-10.864 1.361

.027 -.2177500

.0200440 -.3572376 -.0782624




SKRIPSI

85



N

Mean

Std. Deviation

Std. Error Mean

Sampel B

2

.023950

.0051619

.0036500

Sampel L

2

.019550

.0021920

.0015500

SKRIPSI



86



t-test for Equality of Means 95% Confidence Interval Sig. (2-

F

Sig.

t

df

Mean

Std. Error


of the Difference Lower

Upper


6.946E16

.000 1.110

2

.383

.0044000

.0039655 -.0126621

.0214621

1.110 1.349

.427

.0044000

.0039655 -.0235726

.0323726


SKRIPSI



87



N

Mean

Std. Deviation

Std. Error Mean

Sampel B

2

.250500

.0130108

.0092000

Sampel L

2

.075100

.0011314

.0008000



F

SKRIPSI

Sig.

t

df

tailed)

Mean

Std. Error

Difference Difference


Difference Lower

Upper


88



1.245E16

.000 18.994

2

.003

.1754000

.0092347 .1356662 .2151338

18.994 1.015

.032

.1754000

.0092347 .0621129 .2886871


SKRIPSI



89



N

Mean

Std. Deviation

Std. Error Mean

Sampel B

2

1.000000

.0000000a

.0000000

Sampel L

2

1.000000

.0000000a

.0000000

a. t cannot be computed because the standard deviations of both groups are 0.

SKRIPSI



90



N

Mean

Std. Deviation

Std. Error Mean

Sampel B

2

.078350

.0105359

.0074500

Sampel L

2

.081250

.0245366

.0173500

SKRIPSI



91




F

Sig.

t

df

tailed)

Mean

Std. Error



Upper


9.874E15

.000 -.154

2

.892 -.0029000

.0188819

-.0841421

.0783421

-.154 1.357

.898 -.0029000

.0188819

-.1349419

.1291419


SKRIPSI



92



N

Mean

Std. Deviation

Std. Error Mean

Sampel B

2

.104550

.0154856

.0109500

Sampel L

2

.214200

.0729734

.0516000

SKRIPSI



93




F

Sig.

t

df

tailed)

Mean

Std. Error



Upper


.

. -2.079

2

.173 -.1096500

.0527491 -.3366109

.1173109

-2.079 1.090

.269 -.1096500

.0527491 -.6623977

.4430977


SKRIPSI



94



N

Mean

Std. Deviation

Std. Error Mean

Sampel B

2

.202250

.0021920

.0015500

Sampel L

2

.295900

.0073539

.0052000

SKRIPSI



95




F

Sig.

t

df

tailed)

Mean

Std. Error


Difference Lower

Upper


.

. -17.259

2

.003 -.0936500

.0054261 -.1169966 -.0703034

-17.259

1.176

.023 -.0936500

.0054261 -.1423892 -.0449108




SKRIPSI

96



N

Mean

Std. Deviation

Std. Error Mean

Sampel B

2

.238400

.0070711

.0050000

Sampel L

2

.409550

.0135057

.0095500



F

SKRIPSI

Sig.

t

df

Mean

Std. Error




Upper


97



2.923E15

.000 -15.877

2

.004 -.1711500

.0107797 -.2175314

-.1247686

-15.877 1.510

.012 -.1711500

.0107797 -.2354148

-.1068852


SKRIPSI



98


T-Test [DataSet1]

Group Statistics Kelompok Area10

N

Mean

Std. Deviation

Std. Error Mean

Sampel B

2

.074550

.0637103

.0450500

Sampel L

2

.050250

.0167584

.0118500

SKRIPSI



99


Independent Samples Test Levene's Test for Equality of

t-test for Equality of Means

Variances 95% Confidence Interval of the Sig. (2F

Sig.

t

df

Mean

Std. Error


Difference Lower

Upper


1.525E16

.000

.522

2

.654

.0243000

.0465825 -.1761281

.2247281

.522 1.138

.685

.0243000

.0465825 -.4224456

.4710456


SKRIPSI



100

ADLN PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA SKRIPSI

Recommend Documents