Verslag Restrictie-analyse van DNA en bloed van A tot Z 20-01-2012
Tessa Van Riet 1
Met een groep van tien stapten we op de trein we wisten niet precies waar we moesten zijn uiteindelijk waren we op bestemming St.-Lieven aangekomen van zo'n labo's kon onze school enkel dromen met vele motivatie stapten we het gebouw binnen en eindelijk kon onze dag beginnen...
Eerst werd het onderwerp ingeleid, alleen hadden wij ons al goed voorbereid
2
We zaten in een lokaal en kregen eerst uitleg over het DNA, wat het is, hoe het is opgebouwd,... Verder kregen we uitleg over RNA en uiteindelijk ging het snel over eiwitsynthese en de restrictie. Onze groep had zich goed voorbereid met een zelfstudie waardoor alles snel begrepen was.
zo hadden we alles snel verstaan en konden we eindelijk aan de slag gaan, nog even snel micropipetten leren kennen daar had ik nog nooit met gewerkt, dat moet ik bekennen.
Labojassen aan, brillen op en we konden beginnen want we moesten wel wat tijd winnen
3
(3) (4)
(1) (2)
(3)
Dit lag voor iedereen apart klaar, na wat uitleg konden we aan de slag gaan. 1) Afvalbakje met ontsmettingsmiddel 2) Bakje met naalden voor op pipet 3) Stoffen in epjes 4) Micropipet
we werden verdeeld in kleine groepen en voor proef 3 en 4 voelde ik me geroepen
Buisje 3 6,5 µl H2O 1 µl buffer H 2 µl pBR322 (DNA) 0,5 µl Sall
Buisje 4 6 µl H2O 1 µl buffer H* 2 µl pBR322 (DNA) 0.5 µl EcoRI 0,5 µl Sall
Buisje 3: Bevat alle componenten om pBR322 te knippen met Sall.
4
Buisje4: Stellen we een mengsel samen waaraan zowel EoRI als Sall toegevoegd wordt, dit noemen we een dubbel digest. * Buffer H is een buffer die optimaal is voor de enzymen EcoRI en Sall.
Oeps! ik had een foutje met de pipet toch niet zo goed opgelet?
5
Hier waren we begonnen met het samen te stellen van de stoffen.
Na de uitvoering gingen we alweer iets nieuws leren namelijk, hoe je iets moet centrifugeren
De epjes symmetrisch in het centrifugeerapparaat
6
Het centrifugeerapparaat Het getal 14000 staat voor het aantal toeren/minuut. Het deksel wordt aan het apparaat gehangen om te voorkomen dat je het vergeet af te sluiten.
Nadien gingen de epjes in een oven 37°C en geen graad daarboven!
7
De epjes gaan ongeveer 1uur in een incubatie oven van 37°C
Nadien leerden we hoe je een gel bekomt en daar stond ik verstomd
We konden zelf onze wetenschappelijke aanleg uiten en proberen een stof perfect erin te spuiten
8
Er was heel wat oefening nodig vooraleer de stof goed terecht kwam. Uiteindelijk slaagde iedereen erin het tot een goed einde te brengen!
9
Dan, knippen van restrictie-enzymen, de theorie ook dat hadden we snel onder de knie maar dan, tot grote spijt was het alweer tijd! Dan gingen we een nieuw labo verkennen en moesten achter onze tram rennen We sprongen op de tram en aten daar allen een boterham De lucht was zeer grauw en toen kwamen we aan aan een oud gebouw
10
Niemand stond daar voor ons klaar even wachten dan maar!
11
Uiteindelijk gingen we beginnen een half uur te laat, dus wat tijd winnen! We kregen de basis van bloed te horen en hoe je bepaalde zaken kon opsporen
Eerst gingen we ons glucosegehalte meten want dat wou iedereen wel weten!
12
1. Je vinger verwarmen en ontsmetten.
2. Met een naaldje in je vinger prikken. De naaldjes zijn slechts eenmaal bruikbaar.
13
3. Het bloed werd aangebracht op het apparaat.
Even wachten en mijn resultaat was...
Een goed resultaat! Na het drinken van water was deze gedaald. Bij andere, die cola dronken, gestegen! 14
Ook mijn cholesterolgehalte heb ik ontdekt en die was bij mij toch perfect
Met dit apparaat kon je je cholesterol meten en nadien je resultaat vermelden op je formuliertje.
Toen gingen we naar de verschillende bloedgroepen en dan voelde ik me geroepen
15
Blauw: Werd bij een druppel bloed toegevoegd om bloedgroep A aan te tonen. Geel: Werd bij een druppel bloed toegevoegd om bloedgroep B aan te tonen. Rood: Werd bij een druppel bloed toegevoegd om aan te tonen of je bloedgroep positief of negatief is.
Mijn O-positief werd bewezen aan de klontering, na toevoeging van bepaalde stoffen, kon je dat aflezen
16
Het eerste plaatje is bloedgroep A, je ziet duidelijk de klontering. Het tweede plaatje is bloedgroep O, deze herken je doordat het bloed niet klontert. In het laatste plaatje zie je duidelijk dat de bloedgroep positief is, door de klontering.
Toevoegen van stoffen, mengen met houten stokje en afwachten voor eventuele klontering.
Na heel wat geduld werd ons papiertje snel ingevuld
Cholesterolbepaling: Bekomen waarde: 178 mg/dl Referentiewaarden: 120 - 200 mg/dl Glucosebepaling: Bekomen waarde: 96 mg/dl Referentiewaarden: 60 - 110 mg/dl ABO bloedgroep en rhesusbepaling: Bloedgroep: O - positief
17
Dan zat de dag erop we trokken terug naar het station, een beetje verderop Die dag hadden we veel bijgeleerd en al snel waren we terug in Dendermonde gearriveerd
18
19
