UJI MIKROBIOLOGIS PADA BERBAGAI JENIS AIR MINUM Laporan Penelitian ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar SARJANA KEDOKTERAN
OLEH : Dimas Nugroho NIM : 1112103000044
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA 2015
KATA PENGANTAR
Segala puji bagi Allah SWT atas nikmat yang telah diberikan, baik nikmat iman, Islam, dan nikmat sehat, penulis mampu menyelesaikan laporan penelitian ini dengan baik. Shalawat serta salam penulis ucapkan kepada Baginda Rasulullah SAW yang selalu menjadi tauladan bagi umat-Nya. Penulis menyadari bahwa tanpa bimbingan dan bantuan dari berbagai pihak, maka penelitian ini tidak akan pernah selesai. Oleh sebab itu, penulis mengucapkan terima kasih kepada: 1.
Prof Dr. H. Arif Sumantri,, M. Kes selaku Dekan FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
2.
dr. Achmad Zaki, M. Epid, Sp. OT selaku Ketua Program Studi Pendidikan Dokter FKIK UIN Jakarta.
3.
dr. Erike Anggraini, M.Pd selaku pembimbing 1. Terima kasih atas waktu, tenaga, pikiran, dan semangatnya untuk membimbing penulis dari nol hingga akhirnya penelitian ini dapat diselesaikan.
4.
dr. Pras, Sp.KJ selaku pembimbing 2. Terima kasih sudah bersedia meluangkan waktu dan membimbing penulis sehingga dapat menyelesaikan penelitian ini.
5.
dr. Nouval Shahab, Sp.U, Ph.D, FICS, FACS selaku penanggung jawab modul riset PSPD angkatan 2012, terima kasih atas bimbingannya pada kami semua dalam menjalani penelitian ini.
6.
Bu Yuliati,SSi, M. Biomed dan Mba Novi yang telah membimbing penulis selama penelitian di laboratorium. Terima kasih telah sabar dan penuh semangat membimbing penulis dari awal hingga selesai.
7.
Rasa sayang dan terima kasih yang tak terhingga kepada kedua orangtua penulis dan keluarga, Bambang Sudjanadi dan drg.Asniati yang selalu memberikan semangat, nasihat, dan doa restu selama penulis menjalankan pendidikan.
8.
Teman-teman sejawat seperjuangan yang selalu memberi semangat untuk terus berkomitmen pada penelitian ini. v
9.
Teman-teman sejawat PSPD 2012, khususnya para penghuni Wisma Safira , terima kasih kebersamaan, semangat, dan motivasinya selama ini.
10.
Teman-teman “MIRROR” ROHIS 48 2012 yang selalu memberi semangat,inspirasi,penghibur serta pengingat akan jalan-Nya yang lurus.
11.
Christopher Nolan, David Fincher, Steven Spielberg, Quentin Tarantino, Robert Zemeckis, dan Martin Scorcese atas karya mereka yang luar biasa dan inspirasional.
12.
Terima kasih kepada Liverpool Football Club dan seluruh kopites yang memberikan hiburan dan kebahagiaan setiap minggunya.
Penulis menyadari laporan penelitian ini masih jauh dari bentuk yang sempurna. Segala kritik dan saran yang membangun dari berbagai pihak sangat penulis harapkan. Demikian laporan ini penulis susun, semoga bermanfaat untuk ilmu pengetahuan, agama, dunia, dan setelahnya nanti. Aamiin.
Ciputat, 6 Oktober 2015
vi
ABSTRACT Dimas Nugroho. Medical Education Study Program. Microbiology Test (terhadap) Different Kind of Drinking Water. 2015 Water is very essensial for human. Human must re-intake water in order to prolong their lifespan. There are some different technique to get a proper water to drink. Meanwhile, not all of them passed the standard that WHO and Ministry Of Health In Indonesia has made,especially in microbiological aspect. The most common bacteria that can polute water are E.coli and coliform. Both of them are also the most common etiology to cause gastroenteritis and become a standard in microbiological aspect. This study use MPN (most probable number) in order to check the quality of drinking water in microbiological aspect and to identify the bacteria.The result shows that boiling water and branded drinking water passed the microbiological test (no coliform and no E.coli), but filtration water and reverse osmosis water is not qualified (contain coliform and E.coli). Keywords: coliform, E.coli, MPN ABSTRAK Dimas Nugroho. Program Studi Pendidikan Dokter. Uji Mikrobiologis Pada Berbagai Jenis Air Minum. 2015 Air sangatlah esensial bagi manusia. Manusia harus meminum air untuk memperpanjang dan mempertahankan kehidupan. Tedapat banyak cara untuk mendapatkan air minum. Namun tidak semua memenuhi standar yang ditetapkan WHO dan KEMENKES,terutama dari aspek mikrobiologi. Bakteri tersering yang dapat mencemari air minum adalah E.coli dan coliform. Keduanya merupakan penyebab tersering dari gastroenteritis dan juga menjadi standar untuk menilai kualitas air minum dari aspek mikrobiologi. Peneliti menggunakan metode MPN (most probable number) untuk mengidentifikasi bakteri tersebut. Hasil yang didapatkan adalah air minum kemasan bermerk dan air minum rebusan memenuhi standar kualitas air minum (tidak mengandung coliform dan E.coli),sedangkan air minum yang didapat dengan filtrasi dan proses reverse osmosis tidak memenuhi standar (mengandung coliform dan E.coli) Kata kunci: coliform, E.coli dan MPN
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 2.5 Parameter mikrobiologi hasil ketetapan KEMENKES ........................ 9 Tabel 4.1 Hasil uji air minum tahap Presumptive .............................................. 16
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1
Morfologi bakteri E.coli .................................................................. 6
Gambar 4.1
Hasil uji presumptive bermakna positif ..........................................17
Gambar 4.2
Hasil pewarnaan Gram air minum filtrasi ..................................... 18
Gambar 4.3
Hasil pewarnaan Gram air minum reverse osmosis ...................... 18
Gambar 4.2.1.1Hasil penanaman pada media agar McConkey ............................. 20 Gambar 4.2.1.2Hasil pewarnaan Gram pada agar McConkey .............................. 21 Gambar 4.2.2.1Hasil penanaman bakteri pada media agar EMB ......................... 21 Gambar 4.2.2.2Hasil pewarnaan Gram pada agar EMB ....................................... 22
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1
Media penanaman selektif ..............................................................29
Lampiran 2
Tabel MPN .....................................................................................30
x
DAFTAR SINGKATAN
EMB
Eosine methylene blue
MPN
Most Probable Number
ETEC
Entero Toxigenic Escherichia coli
EIEC
Entero Invasive Escherichia coli
EHEC
Entero Hemorhhagic Escherichia coli
EPEC
Entero Pathogenic Escherichia coli
EAEC
Entero Aggregative Escherichia coli
WHO
World Health Organization\
KEMENKES
Kementerian Kesehatan
xi
DAFTAR ISI LEMBAR JUDUL .................................................................................................. i LEMBAR PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ............................................ ii LEMBAR PERSETUJUAN .............................................................................. iii LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................ iv KATA PENGANTAR ........................................................................................... v ABSTRAK .......................................................................................................... vii DAFTAR ISI ..................................................................................................... viii DAFTAR TABEL ............................................................................................... ix DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ x DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xi DAFTAR SINGKATAN .................................................................................... xii BAB 1 PENDAHULUAN .................................................................................... 1 1.1 Latar Belakang ..................................................................................... 1 1.2 Rumusan Masalah ................................................................................ 3 1.3 Tujuan .................................................................................................. 3 1.3.1
Tujuan Umum .................................................................... 3
1.3.2
Tujuan Khusus ................................................................... 3
1.4 Manfaat ................................................................................................ 3 1.4.1
Bagi Peneliti ....................................................................... 3
1.4.2
Bagi Institusi ...................................................................... 3
1.4.3
Bagi Masyarakat ................................................................ 3
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ........................................................................... 4 2.1 Landasan Teori ..................................................................................... 4 2.1.1
Kualitas air minum secara mikrobiologis ........................... 4
2.2 Bakteri yang menjadi parameter pemeriksaan .................................... 4 2.2.1
Bakteri coliform ................................................................... 4
2.2.2
Bakteri E.coli ....................................................................... 5
2.3 Pemeriksaan air minum ....................................................................... 7 2.3.1
Pengaruh bakteri pada saluran gastrointestinal ................... 8
2.4 Kerangka teori ..................................................................................... 8 2.5 Interpretasi hasil uji ............................................................................. 9 2.6 Kerangka konsep ................................................................................ 10 2.7 Definisi operasional .......................................................................... 11 BAB 3 METODE PENELITIAN....................................................................... 12 3.1 Desain Penelitian ............................................................................... 12 3.2 Waktu dan Tempat Penelitian ........................................................... 12 3.3 Sampel ............................................................................................... 12 3.4 Alat dan bahan .................................................................................. 12 3.5 Cara kerja penelitian ......................................................................... 13 3.5.1
Pengambilan sampel ......................................................... 13
3.5.1.1 Untuk air minum dalam kemasan .................................. 13 3.5.1.2 Untuk air minum rebusan ............................................... 13 3.5.1.3 Untuk air minum hasil reverse osmosis ......................... 14 3.5.1.4 Untuk air minum hasil filtrasi ........................................ 14 3.5.2
Langkah kerja penelitian ................................................... 14
3.5.2.1 Langkah kerja tahap presumptive ................................. 14 3.5.2.2 Langkah kerja tahap konfirmasi .................................... 15 BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................... 16 4.1 Hasil uji presumptive ......................................................................... 16 4.2 Hasil uji konfirmasi ........................................................................... 19 4.2.1
Penanaman pada agar McConkey ................................... 20
4.2.2
Penanaman pada agar EMB ............................................ 21
4.3 Hasil dan pembahasan ....................................................................... 23 BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 25 5.1 Kesimpulan ........................................................................................ 25 5.2 Keterbatasan penelitian ....................................................................... 25
5.3 Saran dan kesimpulan ......................................................................... 25 Daftar pustaka..................................................................................................... 26 Lampiran ............................................................................................................. 29
DAFTAR TABEL
Tabel 2.5 Parameter mikrobiologi hasil ketetapan KEMENKES ........................ 9 Tabel 4.1 Hasil uji air minum tahap Presumptive .............................................. 16
ix
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1
Morfologi bakteri E.coli .................................................................. 6
Gambar 4.1
Hasil uji presumptive bermakna positif ..........................................17
Gambar 4.2
Hasil pewarnaan Gram air minum filtrasi ..................................... 18
Gambar 4.3
Hasil pewarnaan Gram air minum reverse osmosis ...................... 18
Gambar 4.2.1.1Hasil penanaman pada media agar McConkey ............................. 20 Gambar 4.2.1.2Hasil pewarnaan Gram pada agar McConkey .............................. 21 Gambar 4.2.2.1Hasil penanaman bakteri pada media agar EMB ......................... 21 Gambar 4.2.2.2Hasil pewarnaan Gram pada agar EMB ....................................... 22
x
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1
Media penanaman selektif ..............................................................29
Lampiran 2
Tabel MPN .....................................................................................30
xi
DAFTAR SINGKATAN
EMB
Eosine methylene blue
MPN
Most Probable Number
ETEC
Entero Toxigenic Escherichia coli
EIEC
Entero Invasive Escherichia coli
EHEC
Entero Hemorhhagic Escherichia coli
EPEC
Entero Pathogenic Escherichia coli
EAEC
Entero Aggregative Escherichia coli
WHO
World Health Organization\
KEMENKES
Kementerian Kesehatan
xii
1
BAB 1 PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang Air merupakan kebutuhan yang esensial bagi manusia, membentuk tidak kurang dari 70% komponen tubuh manusia, yang menunjukan signifikannya peran air bagi manusia. Kekurangan cairan bisa berdampak buruk bagi manusia, mulai dari kehilangan fungsi kognitif secara sementara hingga secara permanen, bahkan kematian.1,2 Manusia memiliki sebuah mekanisme untuk melepaskan cairan dalam tubuhnya melalui fungsi ekskresi. Untuk mengimbanginya, dibutuhkan intake cairan yang memadai untuk menyeimbangkan cairan yang dikeluarkan tubuh.1,2 Mengingat betapa esensialnya air bagi manusia, air minum yang dikonsumsi harus memiliki standar yang ditentukan. Sehingga air minum yang dikonsumsi tidak menjadi sarana penyebaran penyakit infeksi. Air minum yang sehat memiliki beberapa kriteria, secara makroskopis antara lain tidak berbau, tidak berwarna, tidak berasa. Serta dalam aspek yang lebih rinci, kriteria air minum dinilai dari aspek fisika, kimiawi ,radioaktif, dan mikrobiologis. Untuk mendapatkan air yang bisa untuk diminum adalah hal yang berbeda. Di Indonesia, air yang didapat lewat air sumur atau PAM masih harus diproses terlebih dahulu sebelum bisa diminum, seperti direbus terlebih dahulu . Tidak sedikit pula yang berinovasi untuk mempersingkat langkah untuk memproses air minum yang berasal dari sumur atau PAM tersebut. Air minum dalam kemasan juga dapat menjadi pilihan bagi masyarakat, teknik lain untuk mendapatkan air minum seperti teknik filtrasi dan teknik reverse osmosis. Hubungan antara kandungan mikrobiologi dalam air minum terhadap insidensi diare akut akibat infeksi cukup tinggi, karena, air minum yang
2
dikonsumsi akan melewati sistem pencernaan yang bisa menyebabkan seseorang terjangkit diare akut maupun kronis. Merujuk pada Liebelt, 5% kunjungan pasien ke bagian pediatri diakibatkan oleh diare akut akibat infeksi.3,4 Tidak semua diare selalu berhubungan dengan infeksi, namun kita tidak bisa mengesampingkan kemungkinan adanya bakteri patogen yang masuk melalui saluran pencernaan yang diakibatkan dari air minum yang terkontaminasi bakteri. Air yang diminum dapat tercemar oleh bakteri patogen bagi manusia. Rata-rata 5% dari pasien anak-anak yang mengunjungi rumah sakit datang dengan diagnosis gastroenteritis akut,dan 10% pasien pediatri yang dirawat diakibatkan oleh hal yang sama.4 Oleh karena itu, uji mikrobiologi mampu menjadi
sebuah
solusi
untuk
tindakan
preventif
terhadap
kejadian
gastroenteritis akut. Air minum yang akan diteliti adalah air minum dalam kemasan (Merek X),air minum yang direbus, air minum yang melalui proses filtrasi (Merek Z),dan air minum yang melalui proses reverse osmosis. Air minum dalam kemasan diteliti karena mudah didapatkan dan merupakan opsi utama masyarakat dalam memilih air minum. Sedangkan pada air minum yang direbus, diteliti karena metode ini mudah dilakukan dan sudah diterapkan masyarakat sejak lama, dan jika mengacu pada teori, maka proses ini dapat membunuh bakteri yang terdapat di dalam air minum. Pada air minum hasil filtrasi (Merek Z) diteliti karena maraknya penjualan air minum tersebut namun belum mendapat sertifikasi dari BPOM. Sedangkan air minum hasil revese osmosis diteliti karena maraknya berbagai alat reverse osmosis yang dijual guna mendapatkan air minum yang dapat diminum. Uji mikrobiologis
dapat mengidentifikasikan bakteri yang mampu
mencemari dan bersifat patogen pada manusia. Hal tersebut menjadi esensial, hal ini disebabkan penyebab diare akut yang memiliki onset tercepat disebabkan oleh infeksi bakteri, oleh karena itu, pada titik inilah penulis memilih untuk melakukan penelitian dengan uji mikrobiologis.
3
Data dari UNICEF menyatakan bahwa pada pada tahun 2012, dari 130.000 kematian BALITA di Indonesia, 25% dari jumlah tersebut disebabkan oleh diare yang tidak ditangani dengan baik4. Menghindari minuman yang kurang higienis bisa menjadi sebuah langkah preventif yang efektif untuk menghindari penyakit diare. Bakteri yang diutamakan dalam setiap guideline dan KEMENKES sendiri adalah bakteri Eschericia coli dan coliform, karena bakteri ini mampu menginvasi usus manusia dan menyebabkan malabsorpsi, diare dan disentri. Sesuai dengan standar yang diterapkan oleh WHO dan KEMENKES, setiap 100 ml sampel air minum yang diperiksa, kadar maksimal bakteri total coliform dan Eschericia coli dalam sampel tersebut adalah nol.5 Peneliti akan melakukan pemeriksaan uji mikrobiologis pada air minum dengan teknik MPN (most probable number). Uji ini dilakukan untuk mengidentifikasi bakteri coliform dan Eschericia coli. Dilakukan dengan melalui dua tahap, tahap praduga dan konfrimasi. Hal ini dilakukan untuk bisa menentukan jenis air minum yang layak dikonsumsi. Alasan peneliti menggunakan metode MPN adalah dikarenakan tahapannya yang sederhana dan tidak membutuhkan biaya banyak. Selain itu, metode MPN dapat mendeteksi coliform yang merupakan penyebab utama dari insiden gastroenteritis akut. 1.2. Rumusan masalah Bagaimana kualitas air minum yang berada di masyarakat dari aspek mikrobiologis? 1.3. Tujuan penelitian 1.3.1. Tujuan umum
Tujuan
dari
penelitian
ini
adalah
untuk
menilai
mikrobiologis dari berbagai jenis air minum 1.3.2. Tujuan khusus
Mengetahui perbedaan kualitas mikrobiologis
Mengidentifikasi bakteri pencemar air minum yang diuji
1.4. Manfaat penelitian 1.4.1. Bagi Peneliti
kualitas
4
Menjadi pengalaman bagi peneliti dan sarana menuntut ilmu
Bermanfaat untuk memilih air minum yang akan dikonsumsi
1.4.2. Bagi masyarakat
Masyarakat mampu memilih air minum yang sesuai dengan standar WHO dan KEMENKES
1.4.3. Bagi Institusi
Menjadi sumber referensi bagi peneliti lain di bidang yang sama
Meningkatkan karya tulis ilmiah institusi UIN Syarif Hidayatullah
5
BAB 2 Tinjauan Pustaka 2.1. Landasan teori 2.1.1. Kualitas air minum secara mikrobiologis Uji mikrobiologis adalah salah satu kriteria untuk menentukan kualitas air minum. Jika merujuk pada standar uji mikrobiologis pada air minum, maka setiap air minum tidak diperkenankan mengandung bakteri apapun. Menurut WHO maupun KEMENKES, bakteri coliform dan Eschericia coli merupakan standar utama untuk uji mikrobiologi terhadap air minum sekaligus menjadi penyebab tersering infeksi saluran gastrointestinal. 2.2. Bakteri yang menjadi parameter pemeriksaan 2.2.1. Bakteri coliform Coliform merupakan golongan bakteri yang digunakan sebagai indikator polusi pada saluran pencernaan. Pada awalnya, coliform digunakan sebagai indikator terhadap bakteri Eschericia coli. Oleh karena itu, hingga terdapat pemeriksaan serologis spesifik terhadap bakteri Eschericia coli, bakteri coliform dapat dianggap sebanding dengan Eschericia coli.6 Penyebab tingginya angka insidensi penyakit diare bisa disebabkan oleh infeksi pada sistem pencernaan. Penyebab tersering infeksi pada saluran pencernaan disebabkan oleh bakteri Eschericia coli dan juga coliform,yang merupakan salah satu indikator mikroorganisme dalam menentukan kualitas air minum.5,6,7 Eschericia Coli merupakan salah satu penyebab tersering dari penyakit diare yang disebabkan oleh infeksi patogen, begitu pula dengan bakteri coliform.5,6,7 Pada sebuah penelitian di Iran, menunjukan bahwa insiden tertinggi penyebab terjadinya diare pada anak usia di bawah satu tahun adalah Shigella.spp(26.7%), diikuti oleh ETEC (18.9%) dan EAEC (16.6%). Sedangkan peringkat selanjutnya diisi oleh bakteri EPEC (12.6%), Campylobacter (10.8%),Salmonella (7.6%), dan terakhir adalah ETEC (6.8%)8. Akibat diare yang berkepanjangan,
penderita bisa mengalami
dehidrasi berat yang menimbulkan kematian bila tidak segera ditangani.2,9,10 Pencegahan merupakan salah satu langkah terbaik yang bisa dilakukan salah
6
satunya dengan menjauhi faktor risiko seperti menjauhi makanan/minuman yang mengandung mikroorganisme patogen.9,10,11 Bakteri coliform merupakan flora normal pada saluran pencernaan manusia, bakteri ini muncul sejak mulai dimasukkannya makanan ke dalam saluran pencernaan. Pada dewasa, flora normal pada usus manusia, 96% dihuni
oleh
bakteri
anaerob,
seperti
spesies
Bacteriodes,
spesies
Fusobacterium, serta lactobacilli anaerob.9,10,11 Sisa 1-4% dihuni oleh bakteri fakultatif aerob, seperti coliform Gram negatif, enterococcus, pseudomonas dan organisme anaerob lainnya. Coliform sendiri sering digunakan sebagai indikator untuk menentukan homeothermic fecal contamination, yang diukur lewat total coliform pada sampel.10 Hal ini disebabkan hasil penelitian yang telah menunjukkan bahwa terdapat korelasi kuat antara meningkatnya kadar coliform pada kontaminasi feses pada hewan. Bakteri coliform bersifat Gram negatif, sehingga jika dilihat dengan pewarnaan Gram akan berwarna merah. Sedangkan sifat lainnya yang khas adalah kemampuan bakteri tersebut untuk memfermentasi laktosa pada suhu 35-37° C.12 2.2.2. Bakteri Eschericia coli Seperti halnya coliform,Eschericia coli juga termasuk flora normal dalam usus. Sehingga akan ditemukan apabila dilakukan pemeriksaan pada feses. Eschericia coli yang berada di dalam usus tidak akan menimbulkan gangguan kesehatan pada manusia, namun pada situasi tertentu, bakteri ini akan bersifat patogen. Contohnya pada kasus immunodeficiency, atau jika terdapat ledakan populasi bakteri Eschericia coli di dalam saluran pencernaan. Bakteri Eschericia coli sendiri terdiri dari beberapa jenis, antara lain 1. ETEC (Entero Toxigenic Escherichia coli) 2. EHEC (Entero Hemorhhagic Escherichia coli) 3. EIEC (Entero Invasive Escherichia coli) 4. EPEC (Entero Pathogenic Escherichia coli) 5. EAEC (Entero Aggregative Escherichia coli)
7
Gambar 2.1 Morfologi bakteri Eschericia coli Sumber: Geo FB, Karen CC,Janet SB,Stepehen AM,Timothy AM,2011 Gambar di atas menunjukkan komponen dari bakteri Eschericia coli, terdapat cell envelope dan lipopolisakarida yang menghasilkan endotoksin yang mampu memberikan manifestasi klinis yang jelas pada manusia. Endotoksin tersebut berikatan pada protein plasma yang nantinya akan mengaktifkan sistem imun untuk mengeluarkan sitokin pro inflamasi dan menimbulkan manifestasi infeksi sistemik berupa demam, malaise, hipotensi, serta leukopenia.9,10,11 Jika bakteri tersebut masuk ke dalam usus manusia, maka endotoksin yang dihasilkan akan membuat aktivitas nikotinamid adenin dinukleotid pada usus sehingga meningkatkan kadar siklik AMP yang menyebabkan sekresi berlebih anion klorida ke dalam lumen usus disertai air, sehingga kepadatan feses akan menurun dan terjadilah diare.10,11,12 Sedangkan pada bakteri invasif seperti EHEC dan EIEC, mampu berkoloni dan menginvasi usus manusia, sehingga menyebabkan nekrosis hingga ulkus pada mukosa usus. Kerusakan yang menembus hingga pembuluh darah menyebabkan feses yang keluar tidak hanya berupa cairan, namun juga darah. Selain itu, disebabkan adanya invasi pada mukosa usus menyebabkan rasa nyeri pada bagian abdomen penderita, dan dengan banyaknya darah yang keluar, bisa berkomplikasi pada anemia, bahkan kematian.10,11,12,14
8
Bakteri Eschericia coli dan coliform lainnya yang menjadi standar dari kualitas air minum yang berasal dari KEMENKES, merupakan flora normal yang berada di usus manusia. Di dalam usus, bakteri tersebut akan bersimbiosis mutualisme dengan manusia, dan bakteri Eschericia coli akan juga dikeluarkan oleh manusia berbarengan dengan feses, sehingga tidak akan terjadi populasi berlebih Eschericia coli pada usus. Sebab, populasi yang berlebih menjadi salah satu syarat suatu mikroorganisme bisa menginfeksi manusia, bahkan mikroorganisme yang bersifat flora normal.12-15 2.3. Pemeriksaan air minum Pemeriksaan uji air minum cukup bervariasi. Terdapat Uji MPN (most probable number), uji biokimia air, dan uji serologis PCR. Uji MPN (Most Probable Number), metode yang akan digunakan untuk proses penelitian ini merupakan metode standar yang biasa digunakan untuk menguji kualitas air. Metode ini menggunakan media kultur spesifik dan teknik isolasi dengan peningkatan suhu untuk mendeteksi coliform serta Eschericia coli . Metode ini juga akan menggunakan dua tahap, tahap praduga dan tahap konfirmasi, dimana tahap praduga untuk mendeteksi coliform dengan menggunakan media Lactose broth yang diinkubasi dengan suhu 37° C selama 48 jam. Sedangkan tahap konfirmasi untuk memastikan kondisi air minum tersebut serta mendeteksi secara spesifik bakteri Eschericia coli, dengan menanam sampel yang positif pada agar EMB dan agar McConkey. Uji mikrobiologis dengan metode MPN merupakan pemeriksaan sederhana yang dapat mengidentifikasi bakteri pencemar terhadap air minum. Penelitian ini tidak membutuhkan teknik yang sulit dan cenderung mudah untuk dilakukan, metode ini juga dapat dijadikan percobaan yang memenuhi kualifikasi dari WHO maupun KEMENKES. Kelemahan metode ini adalah tidak dapatnya mengidentifikasi secara spesifik bakteri yang mencemari sampel. Hal ini dikarenakan Lactose broth yang digunakan juga mampu menjadi media untuk fermentasi bakteri Gram negatif lainnya. Sehingga, tingkat spesifitasnya tidak maksimal. Uji lainnya yang bisa digunakan adalah uji biokimia, dengan menilai kemmapuan bakteri dalam memfermentasi berbagai jenis gula, baik itu
9
fruktosa,laktosa dan sukrosa. Uji ini bisa mempertegas bakteri yang teridentifikasi, seperti pada bakteri coliform yang mampu memfermentasikan laktosa. Uji lainnya adalah menggunakan uji serologis seperti PCR. Uji ini sangatlah spesifik dan sensitif untuk menentukan bakteri yang teridentifikasi. Sehingga, risiko bias yang dapat terjadi pada penelitian ini dapat diatasi. 2.3.1. Pengaruh bakteri pada saluran gastrointestinal Menurut Marcellus, diare adalah suatu kondisi dimana saat melakukan proses defekasi, feses yang dihasilkan berbentuk cair atau setengah cair, dan kandungan air di dalam feses tersebut >200ml/24 jam dan disertai frekuensi yang lebih dari 3 kali/24 jam7. Dari segi onsetnya, diare dibagi menjadi diare akut dan kronik, diare akut sendiri jika terjadinya diare dengan rentang waktu <3 hari. Sedangkan diare kronik jika terjadinya dalam rentang waktu >14 hari.10 Diare yang menjadi masalah terbanyak yang disebabkan bakteri Eschericia coli dan coliform sendiri sesungguhnya tidak hanya disebabkan oleh infeksi saja. Pada banyak kasus, diare
disebabkan karena ketidak
mampuan usus untuk menyerap suatu jenis makanan,sehingga nantinya usus akan menyerap air, sehingga akan terjadi diare. Mikroorganisme yang menyerang usus juga bisa menyebabkan diare, baik lewat proses inflamasi maunpun tidak, ada beberapa mikroorganisme yang mengeluarkan toksin namun tidak menginflamasi usus seperti jenis cholera 2.4. Interpretasi hasil uji Tabel 2.5. Parameter mikrobiologi hasil ketetapan KEMENKES Jenis Parameter Parameter Mikrobiologi 1. Eschericia coli 2.Total Coliform
Satuan
Jumlah sampel Jumlah sampel
Kadar maksimum yang diperbolehkan per
100
ml
0
per
100
ml
0
10
2.5. Kerangka teori
Air minum yang tercemar terkonsumsi
Bakteri bersifat patogen pada GI tract manusia
Penyebab tersering
Eschericia coli
Coliform
Merusak epitel mukosa usus Mengaktifkan proses inflamasi
Produksi mukus dan ,eksudasi air ke lumen berlebih
Mengeluarkan sitokin pro inflamasi
Sitokin pro inflamasi mengatur set point hipotalamus
Feses menjadi encer Muncul demam
Diare
11
2.6
Kerangka konsep Mengambil sampel dari setiap jenis air minum yang akan diperiksa
Air minum akan dilakukan uji praduga
Jika hasil dari uji praduga positif
Diukur kadar bakteri di dalamnya dengan tabel MPN
Lakukan uji konfirmasi
Menanam pada EMB dan McConkey agar
Jika tidak ada
Uji konfirmasi negatif (-)
Memeriksa apakah ada koloni bakteri yang tumbuh
Jika ada
Lakukan pewarnaan Gram
Identifikasi morfologi, dan sifat dari bakteri tersebut
12
2.7
Definisi operasional
No
Variabel Peneltitian
Definisi
Cara pengukuran
1
Air minum
Menggunakan
4
jenis air minum: Air
minum
kemasan 600 ml (Merek X) Air minum hasil perebusan Air minum hasil filtrasi dari galon 1,5 L (Merek Z) Air minum hasil reverse
osmosis
(Merek Y) 2
Uji
mikrobiologis Menggunakan
(presumptive test)
Mengukur
Lactose Broth
coliform
dari
gelembung yang terdapat pada tabung Durham
3
Pewarnaan Gram
Melakukan
Melihat morfologi bakteri dan
pewarnaan Gram sifat bakteri pada setiap tabung pada tabung yang yang bernilai positif bernilai positif 4
Uji
mikrobiologis
konfirmasi)
5
Pewarnaan Gram
(uji Menanam
pada Melihat adanya koloni bakteri
EMB
dan yang tumbuh pada media agar
McConkey agar
EMB dan McConkey
Melakukan
Melihat morfologi bakteri yang
pewarnaan Gram tumbuh pada bakteri tumbuh
pada
EMB
dan
koloni McConkeymelihat sifat bakteri yang tersebut
13
BAB 3 Metode Penelitian 3.1. Desain penelitian Desain yang akan digunakan adalah desain deskriptif dengan menggunakan multiple tube method. 3.2. Waktu dan tempat penelitian Laboratorium mikrobiologi UIN Syarif Hidayatulah Jakarta selama masa pre-klinik 3.3. Sampel
Air minum kemasan “Merek X” 2 botol 600 ml
Air minum yang berasal dari hasil rebusan yang berasal dari air PAM
Air minum yang berasal dari hasil filtrasi reverse osmosis “Merek Y” 700ml
Air minum yang di alkalinisasi dan proses filtrasi “Merek Z” galon 1,5 L
3.4. Alat dan bahan Alat 1. Tabung Durham 30 buah 2. Tabung reaksi 30 buah 3. Pipet tetes 2 buah 4. Inkubator 1 buah 5. Bunsen 2 buah 6. Autoklaf 1 buah 7. Rak tabung 2 buah 8. Jarum ose 2 buah 9. Thermometer 2 buah 10. Gelas steril 10 buah Bahan 1. Larutan Lactose Broth 2. McConkey agar 3. EMB agar 4. Spiritus
14
3.5.
Cara kerja penelitian
3.5.1.
Pengambilan sampel
3.5.1.1. Untuk air minum dalam kemasan 1. Mempersiapkan gelas steril atau botol polypropylene 2. Membuka tutup botol yang tersegel 3. Menuangkan sampel ke dalam gelas steril (yang diambil adalah air minum porsi tengah, bagian atasnya dibuang dengan cara penuangan diteruskan hingga pengambilan sampel selesai) 4. Simpan di tempat yang steril (sampel tidak boleh didiamkan >24 jam setelah pengambilan) 3.5.1.2 . Untuk air minum hasil rebusan 1. Mempersiapkan gelas steril atau botol polypropylene 2. Mempersiapkan ceret yang telah disterilisasi, yang akan digunakan untuk merebus air 3. Mensterilkan ujung keran tempat air akan diambil 4. Memasukkan air yang berasal dari keran yang telah disterilkan ke dalam ceret 5. Merebus air hingga matang pada suhu 100° C selama 5 menit 6. Mensterilkan tempat keluarnya air dari ceret 7. Menuangkan sampel dengan porsi tengah (yang diambil adalah air minum porsi tengah, bagian atasnya dibuang dengan cara penuangan dteruskan hingga pengambilan sampel selesai) ke gelas steril 8. Simpan di tempat yang steril (sampel tidak boleh didiamkan >24 jam setelah pengambilan) 3.5.1.3. Untuk air minum hasil reverse osmosis 1. Mempersiapkan gelas steril atau botol polypropylene 2. Mensterilkan ujung keran tempat air akan diambil 3. Mensterilkan muara tempat keluarnya air dari alat reverse osmosis 4. Memasukkan air yang berasal dari keran yang telah disterilkan ke dalam alat 5. Menunggu hingga proses reverse osmosis telah selesai
15
6. Mensterilkan muara keluarnya air dari alat reverse osmosis 7. Menuangkan sampel dengan porsi tengah (yang diambil adalah air minum porsi tengah, bagian atasnya dibuang dengan cara penuangan dteruskan hingga pengambilan sampel selesai) ke gelas steril 8. Simpan di tempat yang steril (sampel tidak boleh didiamkan >24 jam setelah pengambilan) 3.5.1.4 . Untuk air minum hasil filtrasi 1. Mempersiapkan gelas steril atau botol polypropylene 2. Memasukkan air PAM kedalam mesin filtrasi 3. Menunggu hingga proses filtrasi selesai 4. Mensterilkan muara tempat keluarnya air dari alat filtrasi 5. Menuangkan sampel dengan porsi tengah (yang diambil adalah air minum porsi tengah, bagian atasnya dibuang dengan cara penuangan dteruskan hingga pengambilan sampel selesai) ke gelas steril 6. Simpan di tempat yang steril (sampel tidak boleh didiamkan >24 jam setelah pengambilan) 3.5.2. Langkah kerja penelitian 3.5.2.1. Langkah kerja tahap praduga 1. Melepaskan tutup segel pada air minum kemasan 2. Mengaduk air minum hingga mencapai kadar bakteri yang homogen 3. Menggunakan gelas ukur steril 10 ml, mengambil Lactose broth (presumptive broth) sebanyak 10 ml ke masing-masing tabung yang berisi (rak satu) 4. Menggunakan mikropipet, mengambil Lactose Broth sebanyak 0,1 ml dan 1 ml ke dalam kelompok rak dua dan tiga 5. Menggunakan gelas ukur steril, dan mengambil sampel dan memasukkan sampel sebanyak 10 ml ke dalam tabung yang berisi Lactose broth (presumptive broth)yang terisi 10 ml, 1 ml dan 0,1 ml 6. Melakukan proses inkubasi pada suhu 37° C selama 48 jam 7. Mengidentifikasi adanyagelembung pada tabung Durham 8. Jika hasilnya negatif, maka mengaduk tabung kembali untuk memastikan hasilnya
16
9. Jika setelah diaduk, terdapat gelembung, maka hasil positif untuk presumptive test coliform, kemudian mencatat hasil pada tabel 10. Mencatat pada tabel dan membandingkan dengan tabel MPN, hasil MPN akan menunjukan kadar bakteri coliform 11. Hasil presumptive test yang bernilai positif dilanjutkan ke uji konfirmasi 3.5.2.2. Langkah kerja tahap konfirmasi 1. Menyiapkan agar McConkey dan EMB masing-masing satu setiap sampel 2. Menggunakan ose jarum yang dipanaskan, mengambil sampel pada tabung yang positif pada dan menanamnya pada masing-masing agar 3. Menginkubasi pada inkubator selama 1 x 24 jam. 4. Setelah 24 jam,mengeluarkan agar dari inkubator dan mengamati hasilnya 5. Jika hasilnya terdapat bakteri yang tumbuh dalam media agar tersebut, maka melakukan pewarnaan Gram pada bakteri yang tumbuh 6. Mengamati hasil pewarnaan Gram pada mikroskop 7. Jika pada pengamatan mikroskop terdapat hasil Gram negatif batang pendek, maka bisa dikonfirmasi bahwa bakteri yang tumbuh merupakan Eschericia Coli
BAB 4
17
Hasil dan Pembahasan 4.1. Hasil Uji Praduga (Presumptive test) Hasil Uji Praduga yang tercantum berikut berasal dari empat jenis air minum yang berbeda sumbernya. Sampel didapatkan dari air minum kemasan, air minum hasil rebusan, air minum reverse osmosis, serta air minum dari hasil filtrasi. Penelitian menggunakan metode MPN dan dilakukan secara duplo untuk mengurangi potensi bias. Berikut ini merupakan hasil uji air minum: Tabel 4.1 Hasil Uji air minum tahap praduga Sampel
0,1 ml 1 ml
10 ml
Air Minum kemasan
0
0
0
Air minum filtrasi
4
0
0
Air minum Rebusan
0
0
0
Air minum reverse
5
1
0
osmosis
Keterangan : angka di dalam tabel menunjukan jumlah tabung yang positif dalam uji praduga (mengandung bakteri coliform). Dari tabel 4.1 yang disesuasikan dengan tabel MPN. Dapat ditarik kesimpulan bahwa hasil MPN yang didapat untuk air minum dalam kemasan adalah 0 (nol), yang menandakan bahwa tidak terdapat bakteri coliform dan Eschericia coli dalam air minum tersebut. Hal yang sama pada air minum hasil rebusan yang pada pemeriksaan MPN juga menunjukan hasil serupa dengan air minum kemasan “Merek X”. Pada air minum reverse osmosis “Merek Y”, didapatkan hasil tabung yang positif pada tabung dengan konsentrasi LB 1 ml dan 0,1 ml sebanyak masing-masing satu tabung dan 5 tabung. Jika dicocokan dengan tabel MPN akan didapatkan 11 bakteri/100 ml sampel air. Sedangkan pada air minum filtrasi “Merek Z” didapatkan tabung yang bernilai positif pada tabung yang
18
berkonsentrasi 0,1 ml sebanyak empat buah. Yang jika dicocokan dengan tabel MPN menandakan bahwa terdapat 7,2 bakteri/100 ml air sampel. Dari hasil penelitian dan pencocokan tabel MPN. Disimpulkan bahwa pada air minum yang berasal dari reverse osmosis dan air minum hasil filtrasi, terdapat bakteri coliform yang masing-masing sebanyak 11 bakteri/100 ml sampel dan 7,2 bakteri/100 ml sampel. Hal ini sudah menunjukan bahwa kedua jenis air minum tersebut sudah tidak sesuai dengan standar yang ditetapkan WHO dan KEMENKES. Karena jika merujuk dari kedua sumber tersebut, maka dalam 100 ml sampel air, tidak diperbolehkan adanya bakteri apapun. Disimpulkan bahwa air minum hasil filtrasi dan air minum hasil reverse osmosis “Merek Y” tidak layak konsumsi.
Gelembung udara di dalam tabung durham
Gambar 4.1 Contoh uji praduga yang positif Hasil uji praduga bermakna positif Untuk menghindari hasil positif palsu, pada tabung yang telah dinyatakan positif, sebelum dilakukan uji konfirmasi, dilakukan pewarnaan Gram terlebih dahulu guna memastikan bahwa hasil yang didapat bukan positif palsu.
19
Gambar 4.2. Hasil pewarnaan Gram air minum filtrasi menunjukan gambaran batang Gram negatif
Gambar 4.3. Hasil pewarnaan Gram air minum filtrasi reverse osmosis menunjukan gambaran batang Gram negatif Dari kedua hasil pewarnaan Gram tersebut, bisa disimpulkan bahwa dari kedua sampel tersebut mengandung bakteri Gram negatif, yang menunjukan
bahwa
uji
praduga
valid.
Bakteri
yang teridentifikasi
menandakan bakteri coliform yang teridentifikasi dengan bentuk batang Gram negatif dan terdapat dalam air minum. Diperlukan uji konfirmasi untuk memberikan hasil yang lebih spesifik terhadap bakteri yang teridentifikasi.
20
4.2. Hasil Uji Konfirmasi Tabung yang bernilai positif pada Uji praduga akan dilanjutkan pada uji konfirmasi. Uji konfirmasi yang dilakukan adalah dengan penanaman bakteri pada media agar EMB serta agar McConkey. Kedua agar ini adalah media pembiakan spesifik untuk bakteri Eschericia coli. EMB agar bisa digunakan sebagai media spesifik karena terdapat Eosin dan Methylene blue sebagai indikator yang mampu bersifat spesifik pada fermentasi yang dihasilkan oleh bakteri Escehricia coli15.
Setelah dilakukan penanaman
bakteri pada media agar tersebut. Sedangkan McConkey agar digunakan karena mampu menyediakan media yang tepat untuk bakteri yang memfermentasi laktosa. Bakteri yang tumbuh akan dilakukan pewarnaan Gram untuk menkonfirmasi bakteri tersebut. 4.2.1. Penanaman pada media McConkey agar
Gambar 4.2.1.1. Hasil penanaman pada media agar McConkey Keterangan: K: Air minum yang di filtrasi “Merek Z” A: Air minum yang berasal dari filtrasi reverse osmosis “Merek Y”
Bisa disimpulkan dari hasil penanaman pada agar McConkey, bahwa koloni yang tumbuh berasal dari sampel air minum yang dilakukan secara reverse osmosis.McConkey agar dapat digunakan untuk mengembangkan bakteri Eschericia coli. McConkey merupakan salah satu media selektif untuk bakteri Eschericia coli.Sedangkan pada air minum yang di alkalinisasi tidak didapatkan bakteri yang tumbuh. Jika menilik pada hasil uji praduga sebelumnya yang bernilai positif. Maka bisa disimpulkan bahwa bakteri yang
21
berada pada air minum yang dialkalinisasi adalah bakteri coliform selain Eschericia coli.Untuk memastikannya, akan dilakukan kembali pewarnaan Gram pada koloni bakteri yang tumbuh pada agar McConkey
Gambar 4.2.1.2Hasil pewarnaan Gram pada agar McConkey yang menunjukan Gram negatif berbentuk batang
Hasil pewarnaan Gram menggambarkan bakteri dengan bentuk batang pendek yang berwarna merah. Hasil ini menggambarkan morfologi dari Eschericia coli, yang menunjukan terdapat bakteri Eschericia coli pada air minum hasil air minum hasil reverse osmosis “Merek Y”. 4.2.2. Penanaman pada agar EMB
Gambar 4.2.2.1 Hasil penanaman bakteri pada media agar EMB
22
Keterangan: K: Air minum yang melalui proses filtrasi “Merek Z” A: Air minum yang berasal dari filtrasi reverse osmosis “Merek Y”
Dari hasil penanaman dari pada agar EMB tersebut, dapat disimpulkan bahwa bakteri Eschericia coli hanya tumbuh dari sampel yang berasal dari air minum hasil filtrasi reverse osmosis “Merek Y” dan berwarna kilat logam. Sedangkan pada air minum yang di alkalinisasi tidak didapatkan bakteri yang tumbuh. Jika menilik pada hasil uji praduga sebelumnya yang bernilai positif. Maka bisa disimpulkan bahwa bakteri yang berada pada air minum yang dialkalinisasi adalah bakteri coliform selain Eschericia coli. Setelah dilakukan penanaman pada jenis agar tersebut. Dilakukan pewarnaan Gram kembali untuk memastikan bakteri tersebut. Maka dilakukan pewarnaan Gram pada koloni bakteri yang tumbuh pada kedua jenis agar tersebut. Hasil pewarnaan gram pada agar EMB
Gambar 4.2.2.2. Pewarnaan Gram pada koloni bakteri agar EMB menunjukan bakteri Gram negatif dengan bentuk batang
Pada
pewarnaan Gram tersebut. Didapatkan bakteri Gram negatif
yang berbentuk seperti batang pendek yang berwarna merah. Dengan hasil pewarnaan serta tumbuhnya koloni bakteri tersebut pada jenis agar tersebut. Bisa disimpulkan bahwa koloni bakteri yang terbentuk kemungkinan besar
23
adalah bakteri Eschericia coli.Untuk memastikan bakteri tersebut, diperlukan uji lainnya seperti uji biokimia atau VITEX. 4.3
Pembahasan Pada penelitian ini, bisa disimpulkan bahwa air minum yang didapatkan dengan cara filtrasi dan air minum berasal dari PAM yang diproses dengan reverse osmosis mengandung bakteri coliform dan Eschericia coli. Sedangkan pada air minum yang berasal dari dalam kemasan “Merek X” dan air minum yang direbus dengan suhu 100°C tidak mengandung bakteri coliform maupun Eschericia coli. Hasil penelitian ini selaras dengan penelitian yang dilakukan oleh Maya Sofa dari Universitas Kristen Maranatha yang juga menguji kadar mikrobiologis pada air minum kemasan (©AC).16 Pada penelitian tersebut, air minum (©AC) melewati tahap presumptive test tanpa menunjukan adanya bakteri coliform. Pada air minum yang didapat lewat proses reverse osmosis, didapatkan pula hasil yang serupa dengan yang dilakukan oleh Yuli Pratiwi yang meneliti enam depot air minum isi ulang yang menggunakan teknologi reverse osmosis. Namun terdapat perbedaan dari segi pemilihan sampel dan metodologi pada uji konfirmasi. Di mana pada penelitian yang dilakukan Yuli Pratiwi menggunakan larutan BGLB (brilliant green lactose broth) untuk tahap konfirmasi dan sampel yang diambil menggunakan galon yang diisi ulang.17 Peneliti sendiri melakukan pengambilan sampel yang berbeda, dengan alat reverse osmosis “Merk Y”, peneliti menggunakan air yang berasal dari PAM dan dilanjutkan dengan proses reverse osmosis. Oleh karena itu, teridentifikasinya bakteri coliform dan Eschericia coli bisa disebabkan oleh tercemarnya air dari PAM. Pada air minum yang dilakukan proses perebusan hingga 100° C, didapatkan hasil dimana air minum tersebut mampu memenuhi syarat air minum sehat dari WHO maupun KEMENKES dari aspek mikrobiologis. Hasil ini selaras dengan penelitian oleh Laura Miller dkk di Guatemala,Clasen TF dkk di India dan Vietnam yang menyatakan bahwa dengan melakukan teknik perebusan air sebelum diminum mampu meningkatkan kualitas air minum. Walaupun pada penelitian mereka tidak menyatakan keberhasilan sempurna.
24
Namun diduga, didapatkannya bakteri pada penelitian mereka dikarenakan wadah yang tidak steril dalam menyimpan air yang telah direbus.18,19,20 Pada air minum yang dilakukan proses filtrasi, didapatkan hasil coliform yang positif pada presumptive test, namun tidak didapatkan bakteri Eschericia coli karena tidak tumbuh pada media selektif seperti EMB dan McConkey. Hasil ini sedikit berbeda dengan penelitian yang dilakukan oleh Sukmayanti yang menyatakan bahwa air minum hasil filtrasi memenuhi standar kualitas air minum yang baik. Namun ditambahkan pula oleh Sukmayanti bahwa kualitas air minum hasil filtrasi akan menurun jika kecepatan filtrasinya lebih dari 2 L/menit.21 Selain itu, peneliti juga tidak mendapatkan informasi tentang pengelolaan air minum hasil proses filtrasi. Tata pengelolaan air minum yang tidak sesuai standar dapat membiaskan penelitian ini. Pada air minum yang didapat dari proses filtrasi, tidak didapatkan koloni bakteri yang tumbuh pada EMB agar maupun McConkey agar. Hal ini disebabkan EMB adalah media selektif yang memiliki unsur eosin Y yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif dan membiakan bakteri Gram negatif. Akan teridentifikasi merupakan bakteri Eschericia coli adalah dengan warna koloni yang menjadi kilat logam. Sedangkan pada McConkey agar, tidak tumbuhnya koloni bakteri disebabkan kandungan garam empedu dan kristal violet, ditambah dengan sifat agar tersebut yang mampu membedakan coliform dengan kemampuan meragi laktosa dengan coliform yang tidak mampu meragi laktosa, hal ini menjadikan McConkey agar selektif. Masih ada kemungkinan bahwa bakteri yang tumbuh bukanlah bakteri coliform dan Eschericia coli. Pada EMB, bakteri Gram negatif dengan bentuk batang masih dapat tumbuh. Sedangkan pada agar McConkey, berbagai bakteri Gram negatif yang berbentuk batang dan mampu meragi lakotsa seperti pseudomonas aeruginosa,klebsiella spp dapat tumbuh dan bersifat patogen. Dibutuhkan pemeriksaan yang lebih spesifik untuk menentukan bakteri Eschericia coli sepertiuji biokimia peragian gula atau uji mikrobiologis seperti PCR, dan VITEX.
25
BAB 5 Kesimpulan dan saran 5.1. Kesimpulan
Air minum dalam kemasan dan air minum hasil rebusan memenuhi standar kualitas air minum dari aspek mikrobiologis
Air minum hasil reverse osmosis dan filtrasi mengandung bakteri coliform dan Eschericia coli sehingga disarankan untuk melakukan proses perebusan sebelum dikonsumsi
Terdapat perbedaan kualitas mikrobiologis antara ke empat jenis air minum yang diteliti
5.2. Keterbatasan penelitian Keterbatasan lainnya adalah peneliti tidak mendapatkan informasi tentang pengelolaan air minum pada sampel air minum dengan proses filtrasi. Diharapkan, pada penelitian selanjutnya dapat menggali informasi tentang pengelolaan air minum tersebut 5.3. Saran Diharapkan bagi peneliti selanjutnya yang berminat dengan topik serupa, mempersiapkan dana dan menggunakan metode yang dianjurkan oleh WHO. Dengan metode yang digunakan oleh peneliti sekarang, rentan mendapatkan hasil positif palsu pada tabung yang berisi Lactose broth 0,1 ml dan 1 ml. Hal ini disebabkan oleh mudahnya udara masuk ke dalam tabung dan sulit untuk dikeluarkan saat proses penelitian. Selain itu, peneliti juga menyarankan untuk mengambil sampel yang lebih banyak dari jenis air minum yang lebih bervariasi. Serta melakukan uji yang dilakukan ditambahkan seperti uji biokimia maupun serologi seperti PCR, maka hasil yang didapat akan lebih spesifik
26
Daftar Pustaka 1. Gerard J Tortora,Bryan Derrickson. Principles of Anatomy and Physiology 12th edition. Phoenix:John Wiley&Sons, Inc:2009 2. Barry M.P, Kristen E.D, Irwin H.R, Water,Hydration, and health, August 2010,available from NIH public access 3. Liebelt EL. Clinical and laboratory evaluation and management of children with vomiting,diarrhea,and dehydration. Curr Opin Pediatr. Oct 1998 4. Danzhen You,Phillip Bastian,Jingxian Wu,Tessa Wardlaw.Level&trends in
child
mortality.
UNICEF.2013.
Available
from:http://www.unicef.org/publications/index_70354.html 5. WHO [Internet]. [place unknown],WHO,[cited 22 September 2014], availablefrom:http://www.who.int/water_sanitation_health/dwq/2edvol3i.p df 6. Melita Stevens, Nicholas Ashbolt, David Cunliffe, Australia, Australia Government of National Health And Medical Research Council 7. KEMENKES [Internet], Indonesia, [cited 20 August 2014], 2010, from: http://pppl.depkes.go.id/_asset/_regulasi/53_Permenkes%20492.pdf 8. Jafari F, Garcia Gil LJ, Salmanzadeh-Ahrabi, Shokrzadeh L, Aslani MM, Pourhoseingholi MA, Derakhsan F, Zali MR. Diagnosis and prevalence of enteropathogenic bacteria in children less than 5 years of age with acute diarrhea in Tehran children’s hospital. 2009. 9. Ikatan Dokter Anak Indonesia, Buku ajar Gastroenterogi-hepatologi, Jakarta,IDAI,2012 10. Perhimpunan Dokter Spesialis Penyakit Dalam Indonesia, Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam, Jakarta, PDSPDI, 2009 11. Fauci AS, Braunwald E,Kasper DL, Hauser SL,Longo DL,Jameson JL,et.al Harrison’s principle of internal medicine. 18th edition, New York:McGraw Hill; 2012
27
12. Geo FB, Karen CC,Janet SB,Stepehen AM,Timothy AM, Medical Microbiology 25th edition, New York: McGraw Hill;2011 13. Doyle MP, Erickson MC. 2006. Closing the door on the fecal coliform assay. Microbe 1:162-163 14. Stefan
Sibernagl,Florian
Lang.
Color
Atlas
of
Patophysiology.Stuttgart:Staudigl Druck:2000 15. Murray, P. R., E. J. Baron, M. A. Pfaller, F. C. Tenover, and R. H. Yolken (eds.). 1995. Manual of clinical microbiology, 6th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 16. Maya Sofa, Widura. Kualitas Bakteriologis Air Minum dalam Kemasan “AC” yang tidak terdaftar di Bandung.2010 17. Yuli Pratiwi. Pemeriksaan Bakteriologi Air Minum Dari Depot Air Minum Isi Ulang. 2014 Nov. 18. Clasen TF, Thao do H, Boisson S, Shipin O. Microbiological effectiveness and cost of boiling to disinfect drinking water in rural Vietnam. 2008 June. Environ Sci Technol 19. Thomas
Clasen,
Laura
Miller,
Ghislain
Rosa.
Microbiological
effectiveness of disinfecting water by boiling in Rural Guatemala. 2010. The American Sosciety of Tropical Medicine and Hygiene 20. Clasen T1, McLaughlin C, Nayaar N, Boisson S, Gupta R, Desai D, Shah N. Microbiological effectiveness and cost of disinfecting water by boiling in semu-urban India. 2008 Sep. American journal of tropical medicine and hygiene. 21. Sukmayati Alegantina, Ani Iswanati, Mariana Raini. Pengembangan Model Proses Filtrasi dan Disinfeksi yang Mempengaruhi Kualitas Air Minum Isi Ulang. 2008
29 Lampiran Lampiran 1 Media penanaman bakteri
Gambar 6.1.1 Agar EMB
Gambar 6.1.2 Agar McConkey
30 Lampiran 2 Tabel MPN
Gambar 6.2 Tabel MPN
