SKRIPSI EVA ANGGREANI
UJI AKTIVITAS ANTIJAMUR FRAKSI N-HEKSANA, ETIL ASETAT DAN METANOL RIMPANG LENGKUAS (Alpinia galangaL.) TERHADAP PERTUMBUHAN Trichophyton rubrum SECARA IN VITRO
PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG MALANG 2012
Lembar Pengesahan
UJI AKTIVITAS ANTIJAMUR FRAKSI N-HEKSANA, ETIL ASETAT DAN METANOL RIMPANG LENGKUAS (Alpinia galanga L.) TERHADAP PERTUMBUHAN Trichophyton rubrum SECARA IN VITRO
SKRIPSI Dibuat untuk memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang 2012
Oleh: EVA ANGGREANI NIM : 08040001
Disetujui Oleh :
Pembimbing I
Pembimbing II
Drs. Herra Studiawan, Apt., M. S.
Ahmad Shobrun Jamil, S. Si, M. P.
NIP: 195703101986011001
NIP: 11309070469
ii
KATA PENGANTAR
Bismillarhirrahmanirrahim.
Alhamdulillahirrobbilalamin.
Puji syukur
penulit panjatkan kehadirat Allat SWT. atas segala rahmat, hidayah dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Uji Aktivitas Antijamur Fraksi N-Heksana, Etil Asetat, dan Metanol Rimpang Lengkuas (Alpinia galanga L.) Terhadap Pertumbuhan Trichophyton rubrum Secara In Vitro”. Pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terima kasih sedalamdalamnya kepada: 1.
Tri Lestari H., M. Kep., Sp. Mat. selaku Dekan Fakultas Ilmu Kesehatan.
2.
Dra. Uswatun Chasanah, Apt., M. Kes. selaku Ketua Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.
3.
Drs. Herra Studiawan, Apt., M. S. selaku dosen pembimbing I atas dukungan, bimbingan, arahan dan bantuan yang telah diberikan.
4.
Ahmad Shobrun Jamil, S. Si., M. P. selaku dosen pembimbing II atas dukungan, bimbingan, arahan dan bantuan yang telah diberikan.
5.
Siti Rofida, S. Si., Apt. selaku dosen penguji atas semua saran dan kritik yang diberikan agar skripsi ini menjadi lebih baik.
6.
Engrid Juni A., S. Farm., Apt. selaku dosen penguji atas semua saran dan kritik yang diberikan agar skripsi ini menjadi lebih baik.
7.
Dra. Lilik Yusetyani, Apt., SpFRS selaku kepala laboratorium farmasi.
8.
dr. Hawin Nurdiana, M. Kes. selaku kepala laboratium Biomedik PPD UMM yang telah memberikan izin untuk menggunakan lab Biomedik.
9.
Bapak H. Sudarmin dan Ibu Hj. Hariani, orang tua penulis yang tercinta, atas doa, motivasi, dukungan baik moril maupun materil, serta kasih sayang yang berlimpah yang selama ini telah diberikan kepada penulis. Juga tidak lupa kepada adinda tersayang Felisha Qanitah Salsabila, yang memberikan angin segar akan keceriaannya walaupun hanya melalui media komunikasi bagi penulis selama pengerjaan skripsi ini.
iii
10. Uni, Prisca, Kipli, Bayu, Wawan, dan Astri, teman-teman senasib dan seperjuangan, atas kerja sama dan pengertian selama penyusunan dan penyelesaian skripsi ini. 11. Nopi, Uli, Ardi, Imam, teman-teman seperjuangan dimasa penulis harus mengulangi penelitian, atas kerja samanya selama penelitian terutama karena meminjamkan alat steril yang penulis belum sempat sterilkan. 12. Catur Hermawanto, atas dukungan kepada penulis selama pengerjaan skripsi. 13. Mbak Susi, Mas Sigit, Mas Fendy, Mbak Fat, Pak Joko atas segala bentuk bantuan dan kerja samanya selama penelitian. 14. Mbak Halinah dari Lab Bioteknologi kampus 3 UMM, yang rela dan bersedia
meminjamkan
alat-alat
bagi
penulis
dan
teman-teman
seperjuangan dalam menyelesaikan skripsi ini. 15. Teman-teman farmasi angkatan ’08 atas motivasi dan semangatnya yang tidak bisa penulis tulis satu per satu. 16. Serta pihak-pihak yang telah membantu yang tidak bisa penulis sebutkan satu persatu.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa tidak ada sesuatu yang sempurna di dunia ini sehingga penulis mengharapkan masukan dari berbagai pihak. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca sekalian.
Malang, 10 Juli 2012
Penulis
iv
DAFTAR ISI
Halaman HALAMAN JUDUL ..................................................................................... i LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................... ii LEMBAR PENGUJIAN ............................................................................... iii KATA PENGANTAR ................................................................................... iv RINGKASAN ................................................................................................ vi ABSTRAK..................................................................................................... vii ABSTRACT .................................................................................................. viii DAFTAR ISI ................................................................................................. ix DAFTAR TABEL ......................................................................................... xiii DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xv
BAB 1 PENDAHULUAN ............................................................................ 1 1.1. Latar Belakang Masalah ........................................................... 1 1.2. Rumusan Masalah .................................................................... 5 1.3. Tujuan Penelitian ..................................................................... 5 1.4. Hipotesis .................................................................................. 5 1.5. Manfaat Penelitian ................................................................... 5
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA .................................................................. 7 2.1. Tinjauan Tentang Trichophyton rubrum ................................... 7 2.1.1. Taksonomi Trichophyton rubrum .................................. 7 2.1.2. Morfologi Trichophyton rubrum ................................... 7 2.1.3. Penyakit yang Disebabkan Trichophyton rubrum .......... 8 2.2. Tinjauan Tentang Lengkuas ..................................................... 10 2.2.1. Taksonomi Lengkuas .................................................... 10 2.2.2. Nama Daerah ................................................................ 10 2.2.3. Nama Asing .................................................................. 11 2.2.4. Morfologi Tanaman Lengkuas ...................................... 11
v
2.2.5. Unsur-unsur Dalam Lengkuas ....................................... 12 2.2.6. Efek Farmakologi Lengkuas ......................................... 14 2.3. Tinjauan Tentang Pelarut ......................................................... 15 2.3.1. Etil Asetat ..................................................................... 15 2.3.2. Metanol ........................................................................ 16 2.3.3. N-Heksana .................................................................... 16 2.4. Tinjauan Tentang Ekstraksi ...................................................... 16 2.5. Tinjauan Tentang Jamur ........................................................... 18 2.6. Tinjauan Tentang Antijamur..................................................... 20 2.6.1. Amfoterisin B ............................................................... 20 2.6.2. Derivat Azol ................................................................. 21 2.6.3. Griseofulvin .................................................................. 23 2.7. Medium Mediakan Mikroba ..................................................... 23 2.8. Tinjauan Tentang Metode Penentuan Aktivitas Antimikroba .... 24 2.8.1. Metode Difusi ............................................................... 24 2.8.2. Metode Dilusi ............................................................... 25 2.8.3. Metode Bioautografi ..................................................... 26 2.9. Kromatografi Lapis Tipis ......................................................... 26
BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL........................................................ 29 3.1. Uraian Kerangka Konseptual.................................................... 29 3.2. Bagan Kerangka Konseptual .................................................... 31
BAB 4 METODE PENELITIAN ................................................................ 32 4.1. Rancangan Penelitian ............................................................... 32 4.2. Tempat dan Waktu Penelitian ................................................... 32 4.3. Instrumen Penelitian ................................................................. 32 4.3.1. Sampel.......................................................................... 32 4.3.2. Alat dan Bahan ............................................................. 32 4.4. Variabel Penelitian ................................................................... 33 4.4.1. Varibel Bebas ............................................................... 33 4.4.2. Variabel Tergantung ..................................................... 33
vi
4.5. Sterilisasi Alat .......................................................................... 34 4.5.1. Sterilisasi Kering .......................................................... 34 4.5.2. Sterilisasi Basah............................................................ 34 4.6. Definisi Operasional ................................................................. 34 4.7. Prosedur Kerja Penelitian ......................................................... 35 4.7.1. Fraksinasi Serbuk Rimpang Lengkuas........................... 35 4.7.2. Penyiapan Media dan Larutan Tween 1 % .................... 36 4.7.3. Penyiapan Mikroba Uji ................................................. 36 4.7.4. Prosedur Uji Antimikroba ............................................. 37 4.8. Skrining Fitokimia ................................................................... 38 4.8.1. Skrining Alkaloid ......................................................... 38 4.8.2. Skrining Polifenol ......................................................... 39 4.8.3. Skrining Flavonoid ....................................................... 39 4.8.4. Skrining Glikosida Saponin .......................................... 39 4.8.5. Skrining Antrakinon ..................................................... 40 4.8.6. Skrining Terpenoid ....................................................... 41 4.9. Alur Penelitian ......................................................................... 42 4.9.1. Fraksinasi Rimpang Lengkuas ...................................... 42 4.9.2. Persiapan Mikroba Uji .................................................. 43 4.9.3. Uji Aktivitas Antijamur ................................................ 44 4.10. Analisis Data ............................................................................ 45
BAB 5 HASIL PENELITIAN ..................................................................... 46 5.1. Hasil Ekstraksi Rimpang Lengkuas .......................................... 46 5.2. Hasil Pengamatan Metode Dilusi .............................................. 47 5.2.1. KHM Fraksi N-Heksana Rimpang Lengkuas ................ 47 5.2.2. KHM Fraksi Etil Asetat Rimpang Lengkuas ................. 48 5.2.3. KHM Fraksi Metanol Rimpang Lengkuas ..................... 49 5.2.4. KBM Fraksi N-Heksana Rimpang Lengkuas ................. 50 5.2.5. KBM Fraksi Etil Asetat Rimpang Lengkuas.................. 51 5.2.6. KBM Fraksi Metanol Rimpang Lengkuas ..................... 52 5.3. Skrining Fitokimia ................................................................... 53
vii
5.4. Analisa Data............................................................................. 56
BAB 6 PEMBAHASAN .............................................................................. 58
BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 64 7.1. Kesimpulan .............................................................................. 64 7.2. Saran ........................................................................................ 64
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 65
LAMPIRAN .................................................................................................. 69
viii
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
V.1. Karakteristik Fisik Fraksi N-Heksana, Etil Asetat dan Metanol .............. 46 V.2. Skor kekeruhan fraksi n-heksana rimpang lengkuas ............................... 47 V.3. Skor kekeruhan fraksi etil asetat rimpang lengkuas ................................ 48 V.4. Skor kekeruhan fraksi metanol rimpang lengkuas .................................. 49 V.5. Hasil skrining fitokimia ......................................................................... 52 V.6. Harga Rf fraksi n-heksana, etil asetat dan metanol ................................. 56
ix
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1. Trichophyton rubrum ............................................................................. 8 2.2. Tanaman Lengkuas ................................................................................ 12 3.1. Bagan Kerangka Konseptual .................................................................. 31 4.1. Proses Fraksinasi Rimpang Lengkuas .................................................... 42 4.2. Preparasi Mikroba Uji ............................................................................ 43 4.3. Proses Uji Aktivitas Antijamur Metode Dilusi ....................................... 44 5.1. Hasil pengenceran tabung fraksi n-heksana rimpang lengkuas................ 48 5.2. Hasil pengenceran tabung fraksi etil asetat rimpang lengkuas................. 49 5.3. Hasil pengenceran tabung fraksi metanol rimpang lengkuas ................... 50 5.4. Diagram batang fraksi n-heksana rimpang lengkuas ............................... 51 5.5. Diagram batang fraksi etil asetat rimpang lengkuas ................................ 51 5.6. Diagram batang fraksi metanol rimpang lengkuas .................................. 52 5.7. Hasil uji KLT senyawa flavonoid ........................................................... 54 5.8. Hasil uji KLT senyawa polifenol............................................................ 54 5.9. Hasil uji KLT senyawa terpenoid ........................................................... 55 5.10. Grafik batang fraksi n-heksana, etil asetat dan metanol rimpang lengkuas ................................................................................................ 56
x
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1
Daftar Riwayat Hidup ............................................................................ 69
2
Surat Pernyataan .................................................................................... 70
3
Determinasi Tumbuhan .......................................................................... 71
4
Hasil Data Statistik ................................................................................ 72
5
Data Pertumbuhan Koloni pada Uji KBM .............................................. 73
6
Hasil Pembuatan Fraksi N-Heksana, Etil Asetat dan Metanol................. 75
7
Hasil Maserasi Serbuk Rimpang Lengkuas ............................................ 76
8
Hasil KHM Fraksi N-Heksana, Etil Asetat dan Metanol ......................... 77
9
Hasil KBM Fraksi N-Heksana, Etil Asetat dan Metanol ......................... 78
10
Hasil Skrining Fitokimia ........................................................................ 81
11
Gambar alat dan bahan penelitian .......................................................... 84
xi
DAFTAR PUSTAKA Agoes, A. 2010. Tanaman Obat Indonesia. Jakarta: Salemba Medika, hal: 63. Anonim. 2008. Agro-techniques of Selected Medicinal Plants, Vol. 1. India: National Medicinal Plants Board. Hal: 17. Anonim. 1995. Farmakope Indonesia, ed IV. Jakarta: Departemen Kesehatan Indonesia. Hal: 7. Anonim. 2006. Trichophyton rubrum. Clinical Microbiology Proficiency Testing. September 2006. URL: www.cmpt.ca/pdf_mycology/0609_4_tri_rub.pdf. Diakses tanggal: 30 Januari 2012. Anonim. N-Hexane. Office of Environmental Health Hazzard Assessment. URL: oehha.ca.gov/air/chronic_rels/pdf/110543.pdf. Diakses tanggal: 20 Desember 2011. Anonim. Trichophyton rubrum. The University of Adelaide, Mycology Online. URL:http://www.mycology.adelaide.edu.au/Fungal_Descriptions/Dermatop hytes/Trichophyton/rubrum.html. Diakses tanggal: 24 Januari 2012. Anonim. Trichophyton rubrum. Wikipedia, the Free Encyclopedia. URL: http://en.wikipedia.org/wiki/Trichophyton_rubrum. Diakses tanggal: 20 Desember 2011. Attokaran, M. 2011. Natural Food Flavors and Colorants. USA: Blackwell Publishing Ltd. and Institute of Food Technologists. Hal: 203-205. Bramono, K. 2001. Onikomikosis. In: Budimulja, U., Kuswadji, Bramono, K., Menaldi, S. L., Dwihastuti, P., dan Widaty, S. Dermatomikosis Superfisialis. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Hal: 46. Budimulja, U. 1999. Mikosis. In: Djuanda, A., Hamzah, M., dan Aisah, S. Ilmu Penyakit Kulit dan Kelamin ed 3. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Hal 90-97. Chudiwal, A. K., Jain, D. P., dan Somani, R. S. Alpinia galanga Willd. – An overview on phyto-pharmacological properties. Indian Journal of Natural Products and Resources. Vol. 1(2), June 2010, pp. 143-149. Depkes RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Cetakan pertama. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan. Duke, J. A., Bogenschutz-Godwin, M. J., duCellier, J., dan Duke, Peggy-Ann K. 2002. Handbook of Medicinal Herbs, 2nd ed. USA: CRC Press. Hal: 351. Fitriati. 2007. Aplikasi Ekstrak Lengkuas (Alpinia galanga L. Swartz) Dalam Sabun Transparan Anti Jamur. Bogor: Skripsi Fakultas Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor. Gholib, D. dan Darmono. Pengaruh Ekstrak Lengkuas Putih [Alpinia galanga (L.) Willd] terhadap Infeksi Trichophyton mentagrophytes pada Kelinci. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia.Vol. 6, No. 2. September 2008, hal. 57-62. Goedadi H., M. dan Suwito P. S., H. 2001. Tinea Korporis dan Tinea Kruris. In: Budimulja, U., Kuswadji, Bramono, K., Menaldi, S. L., Dwihastuti, P., dan Widaty, S. Dermatomikosis Superfisialis. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Hal: 31. Handog, E. B. dan Dayrit, J. F. Mycology in Phillipines, Revisited. Jpn. J. Med. Mycol. Vol. 46, 71-76, 2005. 12
Harborne, J. B. 1987. Metode Fitokimia – Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Bandung: Penerbit ITB. Hal. 13. Hernani, Bunasor, T. K., dan Fitriati. Formula Sabun Transparan Antijamur dengan Bahan Aktif Ekstrak Lengkuas. Bul. Littro, Vol. 21 No 2, 2010, 192-205. Hidayati, A. N., Suyoso, S., Hinda P, Desy dan Sandra, Emilian. Mikosis Superfisialis di Divisi Mikologi Unit Rawat Jalan Penyakit Kulit dan Kelamin RSUD Dr. Soetomo Surabaya Tahun 2003-2005. Berkala Ilmu Kesehatan Kulit & Kelamin. Vol. 21, No. 1, April 2009. Jaju, S. B., Indurwade, N. H., Sakarkar, D.M., Fuloria, N.K., Ali, M.D., Das, S., dan Basu, S. P. Galangoflavonoid Isolated from Rhizome of Alpinia galanga (L) Sw (Zingiberaceae). Tropical Journal of Pharmaceutical Research. December 2009; 8 (6): 545-550. Jawetz et al. 2005. Mikrobiologi Kedokteran Buku 2. Jakarta: Salemba Medika. Hal 322-323, 355. Kaushik, D., Yadav, J., Kaushik, P., Sacher, D., dan Rani, R. Current pharmacological and phytochemical studies of the plant Alpinia galanga. Journal of Chinese Integrative Medicine, October 2011, Vol. 9, No.10, pp. 1061-1065. Kays, S. J. 2011. Cultivated vegetables of the world: a multilingual onomasticon. Netherlands: Wageningen Academic Publishers. Hal: 60. Kusumawardani, N. F. 2009. Formulasi Salep Minyak Atsiri Rimpang Lengkuas [Alpinia galanga (L.) Swartz] Basis Lemak dan PEG 4000 Dengan Uji Sifat Fisik dan Uji Aktivitas Antijamur Candida albicans. Surakarta: Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Maharti, I. D. 2007. Efek Antibakteri Ekstrak Daging Buah Avokad (Persea americana) Terhadap Streptococcus mutans. Jakarta: Skripsi Departemen Biologi Mulut, Fakultas Kedoteran Gigi Universitas Indonesia. Nasution, M. A., Muis, K., dan Rusmawardiana. 2001. Tinea Kapitis. In: Budimulja, U., Kuswadji, Bramono, K., Menaldi, S. L., Dwihastuti, P., dan Widaty, S. Dermatomikosis Superfisialis. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Hal: 22. Nugroho, I. A. Lokakarya Nasional Tanaman Obat Tradisional. Koordinator Nasional Asia Pasific Forest Genetic Resources Programme Newsletter. Edisi 2 Tahun 2010. Patnaik, P. 2004. Dean’s Analytical Chemistry Handbook, 2nd Edition. New York: McGraw-Hill Handbooks. Pratiwi, S. T. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Erlangga Medical Series. Hal: 38-40, 42-43, 162, 188-191. Rahayu, W. P. 1999. Kajian Aktivitas Antimikroba Ekstrak dan Fraksi Rimpang Lengkuas (Alpinia galanga L. Swartz) Terhadap Mikroba Patogen dan Perusak Pangan. Bogor: Disertasi Program Pasca Sarjana Institut Pertanian Bogor. Redjeki S., T. M. S., Subakir, dan Buditjahjono, S. 2001. Tinea Pedis et Manum. In: Budimulja, U., Kuswadji, Bramono, K., Menaldi, S. L., Dwihastuti, P., dan Widaty, S. Dermatomikosis Superfisialis. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Hal: 38, 43.
13
Rios, J. J., Recio, M. C. dan Villae, A. 1998. Screening Method for Natural Products with Antimicrobial Activity: A Review of The Literature. Journal of Etnopharmacology. Vol. 23, Elsivier Scientific Publisher Ireland Ltd. Rowe, R. C., Sheskey, P. J., dan Quinn, M. E. 2009. Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th edition. USA: Pharmaceutical Press and American Pharmacists Association. Hal: 253-254. Sastrohamidjojo, H. 2007. Kromatografi. Yogyakarta: Liberty Yogyakarta. Setiabudy, R. dan Bahry, B. 2007. Obat Jamur. In: Gunawan, S. G., Setiabudy, R., Nafrialdi, dan Elysabeth. Farmakologi dan Terapi ed 5. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Hal. 571-572, 574-576, 580. Sinaga, E. Alpinia galanga (L.) Willd. Pusat Penelitian dan Pengembangan Tumbuhan Obat UNAS. URL: http://kambing.ui.ac.id/bebas/v12/artikel/ttg_tanaman_obat/unas/Lengkuas. pdf. Diakses tanggal: 2 Nopember 2011. Sudjadi. 1988. Metode Pemisahan. Yogyakarta: Penerbit Kanisius. Hal: 73, 76, 167-171. Sukarsono, Rahardjanto, A., Suprapto, W., Purwanti, E., Nurwidodo, Nurhayati, U., dan Utami, E. S. 2003. Tumbuhan untuk Pengobatan. Malang: UMM Press. Hal: 32. Sundari, D dan Winarno, M. W. Informasi Tumbuhan Obat sebagai Anti Jamur. Cermin Dunia Kedokteran. No. 130, 2001, pp. 28-31. Sweetman, S. C. 2009. Martindale, The Complete Drug Refference, Edisi ke36. USA: Pharmaceutical Press. Hal: 521, 530, 532, 536, 539, 2024. Venkatesan, G., Singh, A. J. A. R., Murugesan, A. G., Janaki, C., dan Shankar, S. G. Trichophyton rubrum – the predominant etiological agent in human dermathophytoses in Chennai, India. African Journal of Microbiology Research, May 2007, pp. 009-012. Verma, R. K., Mishra, G., Singh, P., Jha, K. K., dan Khosa, R. L. Alpinia galanga – An Important Medicine Plant: A Review. Der Pharmacia Sinica, 2011, 2 (1): 142-154. Voigt, R. 1995. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Penerjemah: Soendani, Noerono S. Edisi kelima. Yogyakarta: Gajah Mada University Press. Waluyo, L. 2010. Teknik Metode Dasar dalam Mikrobiologi. Malang: UMM Press. Hal: 128-129. Weinstein, A., dan Berman, B. Topical Treatment of Common Superficial Tinea Infections Journal. American Family Physician. Vol. 65, No. 10, 15 Mei 2002, pp. 2095-2102. Yuharmen, Eryanti, Y., dan Nurbalatif. 2002. Uji Aktivitas Antimikroba Minyak Atsiri dan Ekstrak Metanol Lengkuas (Alpinia galanga). Jurnal Nature Indonesia, 4 (2): 178-183.
14
