Point of care a haemostasis diagnosztikában I. ACT, INR, APTI, Multiplate

„Point of care” a haemostasis diagnosztikában I. ACT, INR, APTI, Multiplate

POCT          

Point of care testing Decentralized laboratory testing Emergency testing Critical care testing Patient focused testing Medical office testing Immediate care diagnostics Near patient testing Bedside testing Patientennahe Laboratoriumsdiagnostik

POCT       

intenzív osztály kórházi osztály sürgősségi osztály, betegfelvétel műtő háziorvos, szakrendelés otthon, önvizsgálat speciális pl. rendőrségi

POCT múlt

POCT múlt  XVII. század vér elemzése J. Locke, R. Boyle  laboratórium

Laboratórium Koncentrálódás Automatizálás Mintaazonosítás Mintaelőkészítés: centrifugálás Széles vizsgálatspektrum Sok minta Nagy teljesítményű rendszer Háttér készülékek Sürgős vizsgálatkérés lehetőség Minőségirányítás Karbantartás Informatika TAT Szakértők, konzultációs lehetőség

Fényposta

csőposta

Trombocitaaggregációs vizsgálatokhoz nem alkalmas!!

1853

POCT

• • • • • • •

Kis számú minta Kevés analit Nagyon sürgős Minta nem szállítható Nem érdemes szállítani Teljes vér felhasználása TAT

POCT -Készülék  Kicsi (kézi, asztali)  Egyszerű  Elronthatatlan  Karbantartás nélkül  Felhasználóbarát szoftver, hardver Kevés gomb  Informatikához kapcsolódjon

POCT módszer  Egyszerű  Centrifugálás, pipettázás nélkül  Szobahőmérsékleten tárolható, használatra kész reagensek  Eredmény a labormódszerrel összevethető  Minőség-ellenőrzés  Segítség a laboratóriumtól

Laboratórium-POCT Labor  Koncentrálódás  Minőség  Automatizálás

 Mintaelőkészítés  Analízis: egy mintából sokféle analit  Leletközlés

   

 Minőség-ellenőrzésminőségirányítás  Szakértelem

Mennyiség Ár/vizsgálat TAT Informatika

POCT  Helyszínen  Minőség  Egyszerű, robosztus készülék, mintaelőkészítés nélkül, kevés folyamat  Minőség-ellenőrzés (segítség a laboratóriumtól)

 Kis számú mérés  Ár: vizsgálat, mintavételi eszközök, cső, szállítás, IDŐ  IDŐ  Informatika

POCT fő területei  Haemostasis  Vizelet analitika  Vérgáz analízis + Oximetria  Vércsoport szerológia  Glükóz  Kardiológia  Terhességi gyorstesztek  Toxikológiai gyorstesztek  Egyéb

Hemosztázis-POCT  Véralvadási problémák életet veszélyeztetőek-műtét → nagyon sürgős vizsgálatok  Minta stabilitása :  ACT: 0 perc  INR: 4óra  Trombocita aggregáció: 2 óra Csőpostán nem szállítható!!



Gyógyszerhatás monitorozás → Rendszeres kontrollt igényel (INR)

ACT= Aktivált alvadási idő

ACT= Activated Clotting Time     

Teljes vér Intrinsic rendszer monitorozása Heparin hatás monitorozása Koagulációs státusz Activátor: kaolin

ACT • ACT “golden standard” szívműtétek • Manual ACT: Hattersley, 1966 • Hemochron:1970’s • HemoTec:1985 • Normal range 81 - 133 seconds • Intraoperative range: >400 seconds

Heparin kontrol Idő(sec) 350

aPTI

300

ACT

250 200 150 100 50 0 0

0,2 0,4

0,6 0,8

1

1,2 1,4

Heparin koncentráció (u/ml)

1,6 1,8

2

ACT= activated Clotting Time • • • • • • • •

Cardiovascularis sebészet Érsebészet Cardiális katéter labor Intenzív osztály Gyermekintenzív osztály ECMO Hemodialízis osztály Intervenciós radiológia

ACT • HR-ACT High Range (magas heparin szint) • LR-ACT Low range (terápiás heparin szint) • RACT Recalcified (citrátos minta) • HTC Heparináz test cartridge

ACT-HTC 1. Csatorna Heparinázzal

2. Csatorna Heparináz nélkül

120

120

120

260

260

260

260

360

Magyarázat Alapérték Nincs heparin Heparin tartalmú minta Coagulopátia heparin nélkül Coagulopátia és heparin

ACT  Mágneses keverés

INR K-vitamin antagonisták: Warfarin Syncumar Terápia: élelmiszer K-vitamin egyéb fehérjéhez kötődő gyógyszerek felszívódás, metabolizmus Mérgezés: kumarinszármazékok (rodenticid)

INR

Módszerek összehasonlítása

CoaguChek Termékcsalád XS, XS Plus, XS Pro

Beteg önellenőrzésére

Háziorvosi rendelő részére

Kórházi felhasználásra

CoaguChek Termékcsalád XS, XS Plus, XS Pro  Megbízható, gyors eredmények és kényelmes használat.

 Kisméretű, kézben is tartható készülék  A készülékek egy csepp kapilláris (vagy natív vénás) vérből határozzák meg a protrombin időt.  A tesztcsík mintafelviteli zónája a készüléken kívül esik, könnyebb a felcseppentés akár felülről, vagy oldalról is.  Eredményt egy perc alatt adnak, és a mérési eredményeket tárolják a memóriában dátummal és időponttal együtt.

CoaguChek Termékcsalád  A méréshez nincsen szükség kalibrációra, azt a tesztcsíkok mellé adott kalibrációs kód segítségével a készülékek automatikusan elvégzik.  Minden egyes tesztcsík használatakor „On board quality control”. Hibás tesztcsíkkal nem lehet mérni.  Szobahőmérsékleten tárolható tesztcsíkok  Humán rekombináns szöveti tromboplasztin Dade Behring (ISI 1 körüli)

CoaguChek Termékcsalád Mérési elv  a kialakuló trombin proteáz aktivitása kerül kimutatásra.  humán rekombináns tromboplasztint és egy Electrozyme TH peptid szubsztrátot tartalmaz. (beszárított)  Az Electrozyme TH, a szerin proteázok (mint a trombin is) kimutatására alkalmas.  A tromboplasztin beindítja az alvadási folyamatot és trombin keletkezik.  A trombin hasítja az Electrozyme TH szubsztrátot, egy peptiddé és egy elektrokémiailag aktív phenylenediaminra, mely elektromos jelet generál.

Coagucheck módszer elve

CoaguChek XS Pro Tulajdonságai  Megbízható, gyors eredmények és kényelmes használat.  Egy csepp kapilláris vér (8 µl) szükséges a gyors, és pontos INR eredményhez.  Könnyű felcseppentés akár felülről vagy oldalról is.  Szobahőmérsékleten tárolható tesztcsík.  „On-board” minőség-ellenőrzés.

 A labor eredményekkel egyező eredmények.  Beépített vonalkódolvasó: minta és kezelőazonosítás

CoaguChek XS Pro dokkoló egység funkciója A dokkoló egységnek 3 funkciója van 1. Feltöltse az akkumulátor csomagot 2. Támogassa a kommunikációt egy adatkezelő rendszerrel 3. Összekapcsolható egy számítógéppel

CoaguChek XS Pro Tesztcsík  Minden tesztcsík dobozhoz tartozik egy kódcsip.  A kódcsip tartalmazza a tesztspecifikus információkat (lejárat, lotszám stb.).  A tesztcsíkot szobahőmérsékleten kell tárolni.  Minden új doboz megnyitásánál helyezze be a dobozban található kódcsipet a készülékbe.

CoaguChek XS Pro Egy mérés elvégzése

CoaguChek XS Pro Egy mérés elvégzése

CoaguChek XS Pro Egy mérés elvégzése

CoaguChek XS Pro Egy mérés elvégzése

CoaguChek XS Pro Egy mérés elvégzése

CoaguChek XS Pro Egy mérés elvégzése

CoaguChek XS Pro Egy mérés elvégzése

CoaguChek XS Pro Minőségellenőrzés A CoaguChek XS Pro készülék több, független módszerrel végez minőségellenőrző teszteket:  A készülék minden bekapcsolásánál ellenőrzi az elektronikus alkatrészeket és funkciójukat.  A tesztcsík lejárati idejének és gyártási sorozat információjának ellenőrzése.  Minőségellenőrzési funkció működik a tesztcsíkba építve.  Meghatározott, előírt minőségellenőrző mérés a CoaguChek XS PT kontroll.  Külső minőség-ellenőrzés? Összemérés a laboratóriummal?

Módszer összehasonlítás CoaguChek XS és Innovin reagenssel működő laboratóriumi automata között, illetve kalibrációs adatok a WHO standard preparátumhoz

Normál kontrol

INR 3,4 5,0

1,3

1,2

4,5

18

1,1 4,0

1,0 3,5

,9 5

3,0

8

,8

2,5

,7 N=

16

16

16

ELITE

POCT

ACL_TOP

N=

18

18

18

ACL Elite Pro

POCT

ACL_TOP

Coagucheck XS Plus

ACT, INR, APTI

Hemochron  15µl teljes vér (csepp)  Reagenssel keveredik  Csatornában halad  Optikai detektálás  LED-detektor sor  Áramlási sebesség mérés

ACT, INR, APTI Helena Cascade POC  Fotomechanikus módszer  Tesztkártyák  APTI: citrátos minta  ACT, INR teljes vér

Trombocita aggregáció Multiplate (Roche)

Multiplate rendszer  A thrombocyta funkciók közvetlenül teljes vérben végzett szenzitív vizsgálata  Mérési elv: impedancia  300 µl teljes vénás vér  Nincs szükség a minta előkészítésére  5 csatornás, párhuzamos mérésekhez  Egyszerű számítógép-vezérelte pipettázás  Elektronikus és folyadékos minőségellenőrzés  10 percen belül eredmény, 25 teszt/óra

Multiplate készülék Felhasználási hely

Egyaránt használható laboratóriumban és betegágy mellett (POC)

Multiplate rendszer Teszt cella (küvetta) technológia

• Eldobható vizsgálati cella beépített érzékelővel és PTFEbevonatú keverővel. • A kettős érzékelő elektródák : QC • optikai változók nem befolyásolják a thrombocyta funckió elektronikus észlelését.

Multiplate rendszer

Teszt cella (küvetta) technológia • Impedancia-aggregométer, amely két, a mintába merülő elektródapár közötti elektromos ellenállás változását méri az idő függvényében. • Teljes vér használata • POCT • Standardizált reagensek • Specifikus és átfogó thrombocyta diagnózishoz • Erősen szenzitív az Aszpirin, clopidogrel, prasurgrel és IIbIIIa antagonisták hatására

Hirudin  Direkt trombin inhibitor  Polipeptid  Citrátos minta + Ca  nem a valóságos képet adja

Multiplate rendszer

Reagensek ADPtest

Clopidogrel

ASPItest

Aspirin

TRAPtest

COLtest

RISTOtest

ADPtest HS

monitoring

• Standardizált reagensek • Specifikus és átfogó thrombocyta diagnózishoz • Erősen szenzitív az Aszpirin, clopidogrel, prasurgrel és IIbIIIa antagonisták hatásására

Multiplate rendszer Reagensek

19 March 2014 page 66 © 2009 Roche

Multiple Electrode Aggregometry – Multiplate® TRAPtest TRAP

activation inhibition

TXA2

ADP

COLtest Collagen

1

release of arachidonic acid

TXA2

ADPtest

Clopidogrel Prasugrel Cangrelor

PGE1 ADPtest HS (ADP + PGE1) ArA1

GpIIb/IIIa antagonists:

ASPItest

COX

Reopro ® (abciximab) Aggrastat ® (Tirofiban) Integrillin ® (Eptifibatid)

Arachidonic Acid Aspirin ® NSAID GpIb-R

RISTOtest Ristocetin (vWF dependent)

Multiplate rendszer

Egy mérés elvégzése Helyezze a teszt cellát a mérési pozícióba

Csatlakoztassa az érzékelő kábeleket Pipettázzon: 300 µl sóoldat+ 300 µl Hirudinos vér

AUC: 345 AU*min

Mérési idő 6 perc Eredmény

3 perc inkubálás

Pipettázza az aktivátort

Multiplate rendszer

Paraméterek

 Folyamatosan rögzíti a vérlemezkék összetapadását.  A vérlemezkék az érzékelőkre tapadnak → nő az impedancia → időgrafikon  aggregációs görbe alatti terület (AUC).  függ az aggregációs görbe magasságától és meredekségétől.  a legalkalmassabb a vérlemezke aktivitás kifejezésére.  Két görbe képződik a cella két független érzékelője segítségével.  A szoftver által számított értékek az egyes görbék adatainak középértékei.

Multiplate rendszer Paraméterek

 A képernyőn a görbétől balra látható fekete sáv mutatja az AUC-t.  Az erős zöld rész mutatja a referencia tartományt.

19 March 2014 page 70 © 2009 Roche

Multiplate rendszer

Paraméterek

no platelet inhibition

ADPtest

ASPItest

102 U 89 U 17 U

100 mg aspirin qd

75 mg clopidogrel qd

100 mg aspirin + 75 mg clopidogrel qd

134 U

89 U

8U

31 U

17 U

Köszönöm a figyelmet!