Přístroje na doúpravu pitné vody z hlediska mikrobiologie MUDr. Markéta Chlupáčová Státní zdravotní ústav, Praha Konzultační den SZÚ Problematika „vodních filtrů“ a úpravy pitné vody v místě spotřeby 15.11.2005
mikrobiologické posouzení požadavek zdravotní nezávadnosti nesmí obsahovat bakterie, které indikují nedostatečné hygienické zabezpečení
mikrobiologické posouzení kritéria zajišťující bezpečnou a kvalitní vodu
musí být dosažitelná SVP jsou definována v zákonných ustanoveních
mikrobiologické posouzení • Vyhl. MZ 252/2004 Sb., kterou se stanoví hygienické požadavky na pitnou a teplou vodu a četnost a rozsah kontroly pitné vody • Vyhl. MZ 187/ 2005 Sb., kterou se mění Vyhl. MZ 252/2004 Sb., (květen 2005)
mikrobiologické posouzení Z M Ě N A
• Vyhl. MZ 37/2001 Sb.
• Vyhl. MZ 409/ 2005 Sb. o hygienických požadavcích na výrobky přicházející do přímého styku s vodou a na úpravu vody mikrobiologické posouzení
mikrobiologické posouzení způsob zajišťování zdravotní nezávadnosti u všech vod určených k pitným účelům je
nepřímý pomocí indikátorových mikroorganismů
indikátorové mikroorganismy indikátory obecného znečištění organotrofní bakterie počet kolonií při 22 st. C počet kolonií při 36 st. C indikátory fekálního znečištění E.coli, koliformní bakterie, enterokoky Cl. perfringens indikátor virologické a parazitologické kvality pitné vody
indikátory obecného znečištění organotrofní bakterie počet kolonií při 36 st. C počet kolonií při 22 st. C celkové bakteriální znečištění
indikátory fekálního znečištění •
určité, vybrané skupiny mikroorganismů, jejichž přítomnost ve vodě může signalizovat znečištění fekálního původu • cílem je zjištění, zda pitná voda neobsahuje podmíněně patogenní nebo patogenní mikroorganismy, které by u člověka mohly vyvolat onemocnění • E.coli, enterokoky, koliformní bakterie
indikátorové mikroorganismy význam jednotlivých ukazatelů z hlediska možnosti zdravotnho rizika je dán i přiřazením typu limitu • mezní hodnota - MH • nejvyšší mezní hodnota - NMH
Vyhl. MZ 252/2004 Sb. ukazatel
jednotka
limit
typ lim.
Clostridium perfringens
KTJ/100 ml
0
MH
enterokoky
KTJ/100 ml KTJ/250 ml
0 0
NMH NMH
E.coli
KTJ/100 ml KTJ/250 ml
0 0
NMH NMH
koliformní bakterie
KTJ/100 ml
0
MH
počet kolonií 22 st. C
KTJ/ml
200 (500) 100
MH NMH
počet kolonií 36 st. C
KTJ/ml
20 (100) 20
MH NMH
MH
mezní hodnota
hodnota organoleptického ukazatele jakosti pitné vody, jejích přirozených součástí nebo provozních parametrů, jejíž překročení obvykle nepředstavuje akutní zdravotní riziko není-li uvedeno u ukazatele jinak, jedná se o horní hranici rozmezí přípustných hodnot
NMH
nejvyšší mezní hodnota
hodnota zdravotně závažného ukazatele pitné vody v důsledku jejíhož překročení je vyloučeno použití vody jako pitné, neurčí-li orgán ochrany veřejného zdraví na základě zákona jinak
indikátorové mikroorganismy kvalita výrobního procesu čistota a integrita distribučního systému potencionální přítomnost biofilmu v rozvodech či akumulacích
Vyhl. MZ 409/ 2005 Sb. mikrobiologické posouzení §3 Obecné hygienické požadavky na výrobky přicházející do přímého styku s vodou (1) ……nesmějí obsahovat patogenní mikroorganismy, být zdrojem mikrobiálního znečištění……………..
Vyhl. MZ 409/ 2005 Sb. mikrobiologické posouzení Příloha č. 1 k vyhlášce č. 409/2005 Sb. Bod 14. Zařízení na úpravu pitné vody v místě spotřeby se zkouší a posuzují následujícím způsobem
Vyhl. MZ 409/ 2005 Sb. mikrobiologické posouzení 14 b) zařízení se zkouší jako celek při provozu aby se ověřilo, zda ba) zařízení nezhoršuje kvalitu vstupní vody v mikrobiologických ukazatelích bb) zařízení má požadovaný 99,99% účinek (ověřuje se pouze v případě, že je výrobcem deklarován)
Vyhl. MZ 409/ 2005 Sb. mikrobiologické posouzení ba) zařízení nezhoršuje kvalitu vstupní vody v mikrobiologických ukazatelích • porovnává se kvalita vstupní a výstupní vody • zkouška musí být provedena u zařízení po nejméně dvoutýdenním provozu
Vyhl. MZ 409/ 2005 Sb. mikrobiologické posouzení porovnání kvality vstupní a výstupní vody počet kolonií při 22 st. C počet kolonií při 36 st. C hodnotí se zda ve výstupní vodě nejsou hodnoty ukazatelů více než o 1 řád vyšší oproti vstupní vodě
Vyhl. MZ 409/ 2005 Sb. mikrobiologické posouzení akumulační nádrž
ANO zařízení s akumulační nádrží, kde se upravená voda akumuluje a odtud se podle potřeby odebírá
NE průtočné
Vyhl. MZ 409/ 2005 Sb. mikrobiologické posouzení průtočné
zař. s akumulační nádrží
první podíl upravené vody po 16 hod. odstavení zařízení mimo provoz + ihned odtočení vody po dobu 1 minuty + 2 hodinové odstavení mimo provoz + odběr prvního podílu upravené vody
zařízení s akumulační nádrží v prvním podílu výstupní vody po 16 hodinovém odstavení mimo provoz nesmí být • počet kolonií při 22 st. C • počet kolonií při 36 st. C více než o 1 řád vyšší oproti vstupní vodě
zařízení bez akumulační nádrže - průtočné v prvním podílu výstupní vody odebraném po 16 hodinovém odstavení mimo provoz může být počet kolonií při 22 st. C počet kolonií při 36 st. C více než o 1 řád vyšší oproti vstupní vodě za podmínky, že:
zařízení bez akumulační nádrže - průtočné v prvním podílu výstupní vody po 1min.odtočení a 2 h odstavení mimo provoz nebude o 1 řád vyšší oproti vstupní vodě počet kolonií při 22 st. C počet kolonií při 36 st. C v návodu k použití bude výrazně vloženo ustanovení: po osmihodinové a delší stagnaci je nutné vodu před použitím odtáčet po dobu nejméně jedné minuty
RIZIKO
nelze se 100% spoléhat, že spotřebitel bude odpouštět vodu podle návodu
návod k použití jasná a přesná informace, k čemu zařízení slouží
výrazně
vyznačena
nutnost odpouštění prvních podílů vody ze zařízení a jejich nepoužitelnost k pití
mikrobiologické posouzení způsob zajišťování zdravotní nezávadnosti u všech vod určených k pitným účelům je
nepřímý pomocí indikátorových mikroorganismů
organotrofní bakterie počet kolonií při 36 a 22 st.C definice dle ČSN EN ISO 6222 všechny aerobní bakterie, kvasinky a plísně, schopné tvořit kolonie v kultivačním mediu za popsaných podmínek zkoušky spektrum: pseudomonády, serratie, bacily, achromobaktery,….
organotrofní bakterie počet kolonií při 36 a 22 st.C vysoké počty nejsou žádoucí stanoveny zákonné limity • ovlivňují organoleptické vlastnosti vody zákal, chuť, pach, barvu (lipolytická a proteolytická aktivita) • tvorba biofilmů (dlouhé přívodné, hadičky, nevhodné konstrukční prvky,plasty)
počet kolonií při 22 st. C
počet kolonií při 36 st. C
Ps. aeruginosa
počet kolonií při 36 st. C
Ps. aeruginosa indikátor přítomnosti pro pitnou vodu nevyhovujících organických substrátů plasty, nevhodné konstrukční prvky • schopnost utilizovat i těžko rozlož. organické látky • produkuje látky antibiotické povahy a proto při zvýšeném počtu bakterií v pitné vodě může být mikrobiologický rozbor značně zkreslen (částečné nebo úplné potlačení koliformních bakterií)
Počet kolonií při 22 st. C
Pseudomonas aeruginosa
Pseudomonas aeruginosa
organotrofní bakterie počet kolonií při 36 a 22 st.C metoda stanovení ČSN EN ISO 6222 Jakost vod- Stanovení kultivovatelných mikroorganismů- Stanovení počtu kolonií očkováním do živného agarového kultivačního media
SOP- postup zkoušky • odměřený objem vzorku se naočkuje metodou přímého výsevu do kultivačního media - agar s kvasničným extraktem • v Petriho misce se vzorek dokonale krouživým pohybem promíchá s roztopeným a na teplotu 45 st. C zchlazeným mediem • doba mezi naočkováním vzorku a přidáním roztopeného media nesmí překročit 15 minut
SOP- postup zkoušky • misky se obrátí dnem vzhůru a inkubuje se v termostatu • jedna sada misek se inkubuje při 36 st. C po dobu 48 hodin • druhá sada misek se inkubuje při 22 st. C po dobu 72 hodin • ihned po vyjmutí z inkubátoru se misky vyhodnotí a stanoví se počet kolonií v 1 ml
SOP- postup zkoušky • odečet se provádí na tmavé podložce při bočním osvětlení • spočítají se jednotlivé kolonie na plotně počet kolonií přítomný v 1 ml vzorku • hodnotí se, je-li počet bakterií ve sledovaném ukazateli ve vodě výstupní zvýšen více než o 1 řád oproti vstupní vodě
počet kolonií při 36 st. C
počet kolonií při 22 st. C
počet kolonií při 36 st. C
Počet kolonií při 36 st. C
Počet kolonií při 22 st. C
zařízení s deklarovaným dezinfekčním účinkem metodika Hygienické posuzování materiálů, chemikálií a zařízení určených pro úpravu nebo kontakt s pitnou a teplou užitkovou vodou a vodou ke koupání. zpracovalo Národní referenční centrum pro pitnou vodu Státního zdravotního ústavu
zařízení s deklarovaným dezinfekčním účinkem míra dezinfekčního efektu možnost pomnožení mikrobů na filtrační náplni při dlouhodobější přestávce mezi filtracemi
zařízení s deklarovaným dezinfekčním účinkem pitná voda studničního charakteru nesmí obsahovat rezidua dezinfekčního agens nejméně 3 litry této vody se uměle kontaminují
zařízení s deklarovaným dezinfekčním účinkem E.coli CCM 3954 (24 h kultura) Enterococcus faecalis CCM 4224 (48 h) výchozí denzita každého agens byla na spodní hranici 1000 KTJ/ml po každém profiltrovaném litru se odebírá vzorek filtrátu
zařízení s deklarovaným dezinfekčním účinkem po 1. litru po 2. litru po 3. litru
1. podíl 1. podíl 1. podíl 1ml přímo a 10 ml MF Endův agar
Slanetz Bartley agar
zařízení s deklarovaným dezinfekčním účinkem Endův agar 24 hod. při 37 st. C Slanetz-Bartley agar 48 hod. při 37 st. C Hodnocení: % vzhledem k výchozí denzitě Požadovaný dezinfekční efekt: 99,99 %
možnost pomnožení mikroflory na filtrační náplni při dlouhodobější přestávce mezi filtracemi zařízení 24 h v klidu při pokoj. teplotě profiltruje se takový objem pokusné, avšak již nekontaminované vody, aby byl zachycen nutný objem vzorku filtrátu pro rozbor
možnost pomnožení mikroflory na filtrační náplni při dlouhodobější přestávce mezi filtracemi je třeba zachytit již první podíl 1ml přímo 10 ml MF Endův agar Slanetz Bartley agar
Děkuji za pozornost
