PENGUJIAN EFEKTIVITAS DOSIS VAKSIN DNA DAN KORELASINYA TERHADAP PARAMETER HEMATOLOGI SECARA KUANTITATIF
NUR AKBAR MASWAN
SKRIPSI
PROGRAM STUDI TEKNOLOGI DAN MANAJEMEN AKUAKULTUR FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2009
PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN SUMBER INFORMASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi yang berjudul :
PENGUJIAN EFEKTIVITAS DOSIS VAKSIN DNA DAN KORELASINYA TERHADAP PARAMETER HEMATOLOGI SECARA KUANTITATIF adalah benar merupakan karya sendiri dan belum digunakan dalam bentuk apapun kepada perguruan tinggi manapun. Semua sumber data dan informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir skripsi ini.
Bogor, Agustus 2009
NUR AKBAR MASWAN C14104036
RINGKASAN NUR AKBAR MASWAN. Pengujian Efektivitas Dosis Vaksin DNA Dan Korelasinya Terhadap Parameter Hematologi Secara Kuantitatif. Dibimbing oleh SRI NURYATI dan AYI SANTIKA. Ikan mas adalah ikan konsumsi air tawar yang banyak digemari oleh masyarakat Indonesia, sedangkan ikan koi adalah jenis ikan hias yang memiliki nilai ekonomis penting yang dibudidayakan di Indonesia karena banyak menarik perhatian para peminat ikan hias. Namun sejak Maret 2002, pembudidaya ikan mas dan koi di Indonesia menghadapi wabah penyakit yang serius akibat koi herpesvirus (KHV) Upaya penanggulangan wabah KHV telah dilakukan salah satu cara efektif adalah membuat kekebalan spesifik pada ikan dengan pemberian vaksin. Hal ini karena vaksin dapat merangsang kekebalan spesifik dan kekebalan yang timbul relatif tinggi. Vaksin DNA menawarkan suatu metoda imunisasi yang menanggulangi beberapa kelemahan vaksin tradisional (vaksin hidup dan vaksin mati) seperti resiko infeksi dan biaya yang mahal. Penelitian ini bertujuan untuk menguji pengaruh dosis vaksin DNA 2.5, 7.5 dan 12.5 µg/100µl terhadap parameter gambaran darah ikan mas pada saat vaksinasi maupun ketika diuji tantang dengan virus KHV. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Januari hingga Maret 2009, bertempat di Laboratorium Kesehatan Ikan, Balai Besar Pengembangan Budidaya Air Tawar (BBPBAT) Sukabumi, Jawa Barat dan Laboratorium Kesehatan Ikan, Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor. Ikan mas yang digunakan berasal dari Cianjur, prosedur penelitian ini dilakukan melalui beberapa tahap yaitu: 1) persiapan wadah dan ikan uji; 2) vaksinasi melalui penyuntikan vaksin DNA secara intramuskular dengan tiga tingkatan dosis yaitu 2.5 µg/100µl, 7.5 µg/100µl dan 12.5 µg/100µl; 3) uji tantang dilakukan pada hari ke-43 dengan menginjeksi virus aktif dosis pengenceran 10-3, sebanyak 0,1 ml melalui intramuskular (otot punggung) ke semua ikan uji. Paramater yang diamati adalah gambaran darah ikan meliputi jumlah eritrosit, kadar hemoglobin, hematokrit, leukosit total, hitung jenis (diferensial) leukosit, aktivitas fagositik dan identifikasi bakteri. Pengamatan dilakukan selama masa vaksinasi (hari ke-7 – 42) dan masa setelah uji tantang (hari ke-49 – 70). Hasil penelitian menunjukan bahwa vaksin DNA dengan dosis 2.5, 7.5 dan 12.5 µg/100µl selama masa vaksinasi memberikan pengaruh terhadap beberapa parameter gambaran darah ikan mas yaitu total leukosit, persentase limfosit dalam darah dan indeks fagositik. Sedangkan pada masa uji tantang dengan virus KHV pengenceran 10-3 parameter darah yang terlihat berpengaruh nyata adalah limfosit, monosit dan indeks fagositik. Pada akhir pengamatan, perlakuan C (dosis12.5 µg/100µl) menunjukan persentase limfosit tertinggi, total rataan eritrosit tertinggi dan persentase monosit yang lebih cepat turun dari kedua perlakuan dosis lainnya, sehingga dapat disimpulkan bahwa vaksin DNA dengan dosis 12.5 µg/100µl memberikan efektifitas (respon tanggap kebal) terbaik dibandingkan dengan kedua dosis yang lain.
PENGUJIAN EFEKTIVITAS DOSIS VAKSIN DNA DAN KORELASINYA TERHADAP PARAMETER HEMATOLOGI SECARA KUANTITATIF
NUR AKBAR MASWAN
SKRIPSI Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Perikanan Pada Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Institut Pertanian Bogor
PROGRAM STUDI TEKNOLOGI DAN MANAJEMEN AKUAKULTUR FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2009
Judul
: PENGUJIAN EFEKTIVITAS DOSIS VAKSIN DNA DAN KORELASINYA TERHADAP PARAMETER HEMATOLOGI SECARA KUANTITATIF Nama : Nur Akbar Maswan Nomor Pokok : C14104036
Menyetujui, Pembimbing I
Pembimbing II
Sri Nuryati, M.Si NIP :197106061995122001
Ayi Santika, M.Si NIP : 196903131998031003
Mengetahui, Dekan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan
Prof. Dr. Ir. Indra Jaya, M.Sc. NIP. 196104101986011002
Tanggal Lulus :
KATA PENGANTAR Alhamdulillaahirabbil’aalamin, puji syukur Penulis panjatkan kehadirat Allah Swt karena atas rahmat, hidayah dan karunia-Nya Skripsi yang berjudul “Pengujian Efektivitas Dosis Vaksin DNA Dan Korelasinya Terhadap Parameter Hematologi Secara Kuantitatif” ini dapat diselesaikan. Penulisan Skripsi ini merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana pada Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor. Dalam kesempatan ini Penulis mengucapkan terima kasih yang setulustulusnya kepada : 1. Ibu Sri Nuryati, M.Si selaku Pembimbing I serta Bapak Ayi Santika, M.Si selaku pembimbing II yang telah banyak memberikan bimbingan dan masukan dalam menyelesaikan skripsi ini. 2. Ibu Dr. Dinar Tri Soelistyowati selaku Dosen Penguji Tamu yang telah memberikan banyak masukan dalam menyelesaikan skripsi ini. 3. Ayahanda Bakarrudin Maswan, Ibunda Nuri Soraya, kakakku Fitria Fithona, Farida Fatmah dan adikku Fathi Muhammad, atas kasih sayang, doa, dukungan semangat baik moril dan materi. 4. Pak Ranta, Kang udin, mba Ana, bu Ayu atas bantuan yang diberikan. 5. Iswi Hayati, Dwi, Riki, Mauluddin, Rahman Saleh, Dani, dan Yudha atas kebersamaan, kerjasama dan dukungannya. 6. Teman-teman BDP 41, kakak kelas BDP’40, BDP’39 dan BDP’38 adik kelas BDP 42 atas persahabatan dan bantuan yang diberikan. Akhir kata semoga skripsi ini bermanfaat khususnya bagi Penulis dan juga bagi semua pihak yang memerlukan informasi yang berhubungan dengan tulisan ini. Amin. Bogor, Agustus 2009
Nur Akbar Maswan
DAFTAR RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Jakarta, 14 Agustus 1986, adalah anak ketiga dari empat bersaudara dari ayah bernama Bakarrudin Maswan dan ibu Nuri Soraya. Pendidikan formal yang dilalui penulis yaitu SD Angkasa I Bogor, SLTPN 7 Bogor, SMUN 5 Bogor. Pada tahun 2004, Penulis mendapat kesempatan untuk melanjutkan pendidikan tinggi ke Intitut Pertanian Bogor di Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan pada Program Studi Teknologi dan Manajemen Akuakultur melalui Jalur USMI (Undangan Seleksi Masuk IPB). Selama kuliah, Penulis pernah aktif dalam organisasi kemahasiswaan yaitu Himpunan Mahasiswa Akuakultur (HIMAKUA) sebagai staf Departemen Kewirausahawan (2005-2006). Selain itu, Penulis juga pernah menjadi Asisten Mata Kuliah Dasar-Dasar mikrobiologi (2008/2009), Penyakit dan Parasit Ikan (2008/2009). Dalam usaha menambah wawasan di bidang akuakultur, penulis melakukan Praktek Pembenihan ikan patin dan Pembesaran udang galah di Loka Riset Pemuliaan Teknologi dan Pengembangan Budidaya Air Tawar, SukamandiSubang, Jawa Barat pada bulan Juli - Agustus 2007. Tugas akhir di perguruan tinggi Penulis selesaikan dengan menulis Skripsi yang berjudul “Pengujian Efektivitas Dosis Vaksin DNA Dan Korelasinya Terhadap Parameter Hematologi Secara Kuantitatif”.
DAFTAR ISI Halaman DAFTAR TABEL ...................................................................................... iii DAFTAR GAMBAR .................................................................................. iv DAFTAR LAMPIRAN .............................................................................. v I. PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ................................................................................. 1 1.2 Tujuan .............................................................................................. 2 II. TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Koi Herpesvirus (KHV) .................................................................... 2.2 Hematologi........................................................................................ 2.3 Sistem Pertahanan Ikan .................................................................... 2.4 Vaksin DNA .....................................................................................
3 6 8 14
III. METODOLOGI 3.1 Waktu dan Tempat ........................................................................... 3.2 Alat dan Bahan ................................................................................. 3.3 Prosedur Penelitian ........................................................................... 3.3.1 Persiapan Wadah ..................................................................... 3.3.2 Persiapan Ikan Uji ................................................................... 3.3.3 Penyuntikan Vaksin DNA ......................................................... 3.3.4 Penyediaan Suspensi KHV........................................................ 3.3.5 Uji Tantang ............................................................................... 3.4 Metode Pengukuran Hematologi ....................................................... 3.4.1 Pengambilan Darah.................................................................. 3.4.2 Perhitungan Kadar Hemoglobin ............................................... 3.4.3 Perhitungan Kadar Hematokrit ................................................. 3.4.4 Penghitungan Total Eritrosit .................................................... 3.4.5 Penghitungan Total Leukosit ................................................... 3.4.6 Pembuatan Preparat Ulas Darah ............................................... 3.4.7 Indeks Fagositik....................................................................... 3.5 Analisa Data .....................................................................................
18 18 18 18 18 19 19 19 19 19 20 20 20 21 21 22 22
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil ................................................................................................ 4.1.1 Total Leukosit .......................................................................... 4.1.2 Differensial Leukosit ................................................................ 4.1.3 Total Eritrosit............................................................................ 4.1.4 Kadar Hemoglobin .................................................................... 4.1.5 Kadar Hematokrit .................................................................... 4.1.6 Indeks Fagositik ........................................................................ 4.2 Pembahasan ....................................................................................
23 23 24 28 29 30 31 32
V. KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan ..................................................................................... 39 5.2 Saran ............................................................................................... 39 DAFTAR PUSTAKA ................................................................................. 40 LAMPIRAN ............................................................................................... 43
DAFTAR TABEL Halaman 1. Keuntungan dan Kekurangan Vaksin DNA ...............................................
15
2. Jumlah Rataan Leukosit Pada Setiap Perlakuan Selama Vaksinasi ............
23
3. Jumlah Rataan Leukosit Pada Setiap Perlakuan Selama Uji Tantang .........
23
4. Persentase Rataan Limfosit Pada Setiap Perlakuan Selama Vaksinasi ........
25
5. Persentase Rataan Limfosit Pada Setiap Perlakuan Selama Uji Tantang ....
25
6. Persentase Rataan Monosit Pada Setiap Perlakuan Selama Vaksinasi .......
26
7. Persentase Rataan Monosit Pada Setiap Perlakuan Selama Uji Tantang ....
26
8. Persentase Rataan Neutrofil Pada Setiap Perlakuan Selama Vaksinasi .......
27
9. Persentase Rataan Neutrofil Pada Setiap Perlakuan Selama Uji Tantang ...
27
10. Jumlah Rataan Eritrosit Pada Setiap Perlakuan Selama Vaksinasi ...........
28
11. Jumlah Rataan Eritrosit Pada Setiap Perlakuan Selama Uji Tantang ........
29
12. Nilai Rataan Hemoglobin Pada Setiap Perlakuan Selama Vaksinasi ........
30
13. Nilai Rataan Hemoglobin Pada Setiap Perlakuan Selama Uji Tantang ....
30
14. Nilai Rataan Hematokrit Pada Setiap Perlakuan Selama Vaksinasi ..........
30
15. Nilai Rataan Hematokrit Pada Setiap Perlakuan Selama Uji Tantang .......
31
16. Nilai Indeks Fagositik Pada Setiap Perlakuan Selama Vaksinasi.............
31
17. Nilai Indeks Fagositik Pada Setiap Perlakuan Selama Uji Tantang ..........
31
