Molekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén

Molekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén Dr. Dallmann Klára

GMO szimpózium 2008, Gödöllő

A molekuláris biológia célja az élőlények és sejtek működésének molekuláris szintű tanulmányozása. Ezt segíti a genetika sejtbiológia biokémia

módszerei és eredményei. GMO szimpózium 2008, Gödöllő

Számos módszert fejlesztettek ki, ezek közé tartozik: • a fehérjék kimutatására és mérésére szolgáló

ELISA

technika

• sejt örökítő anyagának, a DNS-nek a vizsgálatára alkalmas PCR technika


Molekuláris biológiai eljárás a fehérjék kimutatására ELISA teszt DNS

fehérje Kimutatás alapja: a sejtekben lévő DNS által kódolt genetikai információ alapján képződött fehérje és specifikus antitest reakciója (ELISA teszt) GMO szimpózium 2008, Gödöllő

sejt

ELISA ( Enzyme- Linked ImmunoSorbent Assay ) teszt Enzim-immun analitikai eljárás másodlagos antitest+enzim

+ szubsztrát Antitest

Izolált fehérje

minta

szinreakció (látható, vagy műszeresen mérhető) GMO szimpózium 2008, Gödöllő

ELISA teszt Előny: gyors egyszerű, nem igényel komoly laboratóriumi hátteret

DE (Reveal)

Hátrány! A fehérje hőérzékeny, ez befolyásolja kimutatás érzékenységét és megbízhatóságát


Molekuláris biológiai eljárás specifikus DNS szekvenciák kimutatására DNS

PCR reakció fehérje

sejt

Lehetővé teszi a DNS különböző szakaszainak felsokszorozását


Molekuláris biológiai eljárás a DNS kimutatására

PCR reakció

ciklikusan ismételt enzimreakció, specifikus primerek jelenlétében

Fluoreszcens próba

Real-Time PCR


PCR reakció termékének kimutatása Agaróz gélen

Fluoreszcens jel megjelenése alapján

Real Time PCR


PCR reakció előnye • rendkívül érzékeny •alkalmas mennyiségi meghatározásra is

•DNS stabil, a fehérjénél kevésbé hőérzékeny


Mikor szükséges molekuláris módszerek alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén?

A fogyasztó alapvető joga, hogy tudja a megvásárolt termék miből készült, illetve milyen tulajdonságokkal rendelkezik. Választás lehetősége.

• Törvényi szabályozás - jelölési kötelezettség

• Más ( vizuális, fizikai, kémiai, biológiai) vizsgálati módszerek nem alkalmasak


§

GMO – törvényi szabályozás

EU és hazai törvényhozás szabályozta a GMO- k kereskedelmi forgalomba kerülését és jelölését

EU rendelet 1829/2003 1830/2003

Magyarország XXVII.1998. Géntechnológiai tevékenységet szabályozó törvény


Genetikailag módosított szervezet (GMO): olyan szervezet, amelyben a génállományt molekuláris genetikai eszközökkel változtatták meg pl. idegen DNS-t építettek be a növény eredeti DNS-ébe

Növényi DNS


GM növény felépítésének vázlata Növényi DNS

Beépített DNS

promóter

Növényvédőszer / rovarrezisztencia

terminátor

növényi DNS


GMO tartalom laboratóriumi vizsgálatának általános menete Laboratóriumi minta Fehérje izolálás

DNS izolálás

Kvalitativ PCR

ELISA test

Real-time PCR


GMO vizsgálat menete •Minta homogenizálása •Kvalitatív GMO teszt

negatív

pozitív GM növény azonosítása

nem engedélyezett

engedélyezett

mennyiségi meghatározás


>0.9%

<0.9%

§ Élelmiszerek jelölése - Törvényi szabályozás

Törvények az élelmiszerlánc szabályozásában A fogyasztót segíti a

jelölés, amely tájékoztat

az élelmiszer

fajtájáról, azonosságáról, jellemzőiről,

összetételéről, mennyiségéről, eltarthatóságáról, származásáról vagy eredetéről előállítási vagy termelési módjáról


Élelmiszerhamisítás Amennyiben nem azok az összetevők szerepelnek a termékben, melyeket a vásárló a feltüntetett adatok alapján elvár, ekkor beszélhetünk élelmiszerhamisításról.

Élelmiszerhamisítás kimutatása


?

Élelmiszerek összetételének kimutatása

PCR módszerrel különböző állat és növényfajok azonosítása lehetséges specifikus DNS szekvencia alapján, feldolgozott élelmiszerekből is.

Pl.szarvasmarha, sertés, strucc, birka Pl. kukorica, szója, burgonya, cukorrépa, sárgabarack GMO szimpózium 2008, Gödöllő

Jövő molekuláris biológiai eljárása: chip technológia •chip technológia- technikai miniatürizálás eredménye,

Előny: egyszerre több DNS szekvencia azonosítása lehetséges egyetlen mintából


Összefoglalás A molekuláris biológiai eljárások felhasználhatók: •Beszállítók ellenőrzésében •Keresztszennyeződések kimutatására •Etikus piaci magatartás betartására


Köszönöm a megtisztelő figyelmet

Molekuláris biológiai eljárások alkalmazása a GMO analitikában és az élelmiszerbiztonság területén

Recommend Documents