38
LAMPIRAN
1.
Skema Prosedur Pengujian Escherichia coli dari Produk Perikanan (SNI 01-2332.1-2006)
Preparasi contoh
Homogenisasi (25 gr sampel + 225 mL BFP) (selama 2 menit-3 menit)
Pengencerandan Pendugaan Coliform
Inokulasi dari 1 mL dari BFP ke 9 mL LTB (inkubasi pada inkubator 35 °C selama 48 jam)
Pendugaan E. coli Penegasan Coliform
Inokulasi dari 1 mL dari LTB positif ke 9 mL EC Broth (inkubasi pada waterbath 45 °C selama 48 jam)
Tabung EC Broth Positif inokulasi menggunakan jarum ose ke media LEMB agar Hitung faecal coliform MPN/ gr
Media LEMB agar yang memiliki koloni hijau metalik diinokulasi ke PCA miring
Penegasan E. coli
Uji Biokimia Reaksi (IMViC) & Pewarnaan Gram (-) Indol, MR, VP, Sitrat
39
2. Skema Prosedur Pengujian Vibrio choleraedari Produk Perikanan (SNI 01.2332.4-2006) Preparasi contoh
Homogenisasi (25 gr sampel + 225 mL APW) (selama 2 menit-3 menit)
Pengencerandan Pengkayaan
Inkubasi pada suhu 36 °C selama 6 jam – 8 jam
Selektif agar
Inokulasi ke media TCBS agar (inkubasi pada suhu 36 °C selama 18 jam-24 jam)
Pemurnian
Inokulasi koloni tersangka dari TCBS ke TSA 1,5% (inkubasi pada suhu 36 °C selama 18 jam – 24 jam)
Uji Biokimia Pendahuluan
Inokulasi ke media uji biokimia (inkubasi pada suhu 36 °C selama 18 jam – 24 jam
TSI & KIA Serologi
Sensitifitas
OF
Polyvalent 01, Inaba, Ogawa
Urease Uji Biokimia Lanjutan
Oksidase
Pertumbuhan 42 °C
Arginin, Lysine Ornithin
Fermentasi Karbohidrat
40
4. 3. Uji Kualitas Sampel Air Tambak Ikan Nila 5. (BAM 2002, Chapter 4) 100 mL air tambak Diambil sebanyak 1 mL air. Dimasukkan masing-masing ke dalam media LST Dilakukan pengenceran 5 seri hingga 10-3 Diinkubasi selama 48 jam pada inkubator E. coli Disinari dengan UV-Lamp 366 nm (jika berpendar, maka air positif tercemar coliform) Ditetesi dengan reagent Kovacs (jika tebentuk cincin merah, maka air positif tercemar E. coli) Hasil
41
4.LembarPenilaianOrganoleptikIkanSegar (SNI 01-2346-2006) Nama Panelis : …………………………….. Tanggal: ……………………. • Cantumkan kode contoh pada kolom yang tersediasebelum melakukan pengujian. • Berilah tanda √pada nilaiyang dipilih sesuai kode contoh yang diuji. Kode contoh Spesifikasi A Kenampakan 1 Mata • Cerah, bolamata menonjol, korneajernih. • Cerah, bolamata rata, kornea jernih. • Agakcerah,bolamatarata,pupilagakkeabuabuan,kornea • Bolamataagakcekung,pupilberubahkeabuabuan,kornea • Bolamataagakcekung,pupilkeabuabuan,korneaagak keruh. • Bolamatacekung,pupilmulaiberubahmenjadiputihsus u korneakeruh • Bola mata sangat cekung, kornea agak kuning. 2 Insang • Warna merahcemerlang, tanpa lendir. • Warna merahkurang cemerlang, tanpa lendir. • Warna merahagakkusam,tanpa lendir. • Merah agak kusam,sedikit lendir. • Mulai ada perubahan warna, merah kecoklatan, sedikit lendir, tanpa lendir. • Warna merahcoklat, lendir tebal. • Warna merahcoklat ada sedikit putih, lendir tebal 3 Lendir Permukaan Badan • Lapisan lendir jernih, transparan, mengkilat cerah. • Lapisan lendir jernih, transparan, cerah, belum ada • Lapisanlendirmulaiagakkeruh,warnaagakputih,kuran • Lapisanlendirmulaikeruh,warnaputihagakkusam,kura ngtransparan • Lendir tebalmenggumpal, mulai berubah warna • Lendir tebalmenggumpal, berwarna putih kuning.
Nilai
9 8 7 6 5 3 1 9 8 7 6 5 3 1 9 8 7 6 5 3
1
2
3
4
5
42
• Lendir tebalmenggumpal, warna kuning kecoklatan 2 Daging (warna dan kenampakan). • Sayatandagingsangatcemerlang,spesifikjenis,tidakad apemerahansepanjangtulangbelakang,dindingperutda • i Sayatan daging cemerlang spesifik jenis, tidak adapemerahan sepanjang tulang belakang, dinding perut utuh. • Sayatandagingsedikitkurangcemerlang,spesifikjenis,t idaada pemerahan sepanjang tulang belakang, dinding perut daging utuh • Sayatandagingmulaipudar,banyakpemerahansepanja ngtulang belakang dinding perut agak lunak •
1
9
8
7
5
Sayatandagingkusam,warnamerahjelassekalisepanjan gtulang belakang dinding perut lunak • Sayatan daging kusam sekali, warna merah jelas sekali, sepanjang tulang belakang, dinding perut sangat lunak. 3 Bau • Bau sangat segar, spesifik jenis. • Segar, spesifik jenis. • Netral. • Bau amoniakmulai tercium,sedikit bau asam. • Bau amoniakkuat, ada bauH2S,bau asam jelas • Bau busuk jelas. 4 Tekstur • Padat,elastisbiladitekandenganjari,sulitmenyobekdag ingdari t lang belakang •
3
Agakpadat,elastisbiladitekandenganjari,sulitmenyobe kdaging dari tulang belakang • Agak padat, agak elastis bila ditekan dengan jari, sulitmenyobek daging dari tulang belakang. • Agak lunak, kurang elastis bila ditekan dengan jari, agakmudah menyobek dagingdari tulang • Lunak, bekas jari terlihat bila ditekan, mudah menyobekdaging dari tulang belakang. • Sangat lunak, bekas jari tidak hilang bila ditekan, mudahsekali menyobek daging dari tulang belakang.
8
1
9 8 7 5 3 1
9
7 5 3 1
43
5. Foto Hasil
A. Bawang Lokio/ bawang Batak
B. Umbi bawang lokio
D. Ekstrak etanol, etil DMSO
E. Pemurnian E. coli
G. Uji KHM ekstrak Tengah : DMSO (K-)
H. Ikan Nila segar
C. Simplisia
F. Uji Antimikroba Tengah: Chloramphenicol Atas bawah : ekstrak etil Kiri kanan : ekstrak etanol
I. Ikan sudah disisik dan disiangi
J. Penyimpanan ikan K. Penyimpanan ikan L. Ikan jam ke-0 Suhu 27 °C suhu 4 °C
44
M. Ikan jam ke-6
N. Ikan jam ke-12
O. Ikan jam ke-18
P. Ikan jam ke-24
Q. ALT jam ke-6 (K+, P, K-)
R. ALT jam ke-12 (K+, P, K-)
S. ALT jam ke-18 (K+, P, K-)
T. ALT jam ke-24 (P, K-, K+)
6. Foto Kerja
A. Pengujian E. coli
B. Pengujian V. cholerae
C. Uji antimikroba