Lampiran 1
Prosedur pengukuran osmolaritas media dan osmolaritas cairan tubuh(hemolim) juvenil udang galah
1. Kabel disambungkan ke sumber listrik kemudian menekan tombol main power yang terletak di bagian depan). Alat akan melakukan pemanasan selama 15-30 menit hingga suhu dingin. 2. Kalibrasi : a. Siapkan cairan standar kalibrasi dan masukkan ± 50 μl akuades dalam tabung microtube 1,5 ml b. Pasangkan microtube berisi larutan standar ke alat osmometer, tekan dan biarkan c. Setelah display memperlihatkan angka 300 mOsm, tekan CAL dan keluarkan microtube d. Bilas kembali sensor dengan tissu yang dibasahi dengan akuades kemudian dikeringkan. 3. Sampel : a. Siapkan cairan sampel dan masukkan ± 50 μl dalam microtube, masukkan ke sensor. b. Tekan Tombol Sampel. c. Turunkan handle sample, tunggu sampai pengukuran selesai dan lampu resultnya menyala. d. Angkat handle. e. Bilas sensor menggunakan akuades, bersihkan dengan tissu. 4. Setelah selesai melakukan pengukuran : a. Bersihkan sensor menggunakan tissu yang dibasahi akuades. b. Pada saat tidak digunakan, sensor harus ditutup dengan tabung kosong (Handle dalam posisi turun). c. Matikan main power : Off. d. Cabut aliran listrik dari pusat listrik.
Lampiran 2 Prosedur pengambilan hemolim juvenil udang galah 1. Udang yang akan diambil plasmanya dimasukkan ke dalam wadah penggerus lalu tambahkan larutan antikoagulan 3,8% dengan perbandingan 1 : 3 (1 gram udang : 3 ml antikoagulan). 2. Hasil gerusan dimasukkan ke dalam tabung eppendorf kemudian disentrifuse dengan kecepatan 3000 rpm dan lama waktu 5 menit. 3. Dengan menggunakan jarum spoite 1 ml diambil cairan plasma (terletak pada bagian atas) lalu masukan ke tabung eppendorf yang lain untuk dianalisis lebih lanjut. Lampiran 3 Prosedur kerja tingkat konsumsi oksigen udang galah 1. Menyiapkan toples sebanyak 12 buah yang telah dibersihkan, diisi air sebanyak 3 liter pada masing-masing toples tersebut dan diaerasi. 2. Udang uji yang telah dipuasakan selama 1 hari ditimbang dan dimasukkan ke dalam masing-masing wadah sebanyak 3 ekor. 3. Mengukur DO awal dan tiap 1 jam diukur lagi DO akhirnya. Lampiran 4 Prosedur preparasi sampel dan pengukuran kandungan mineral udang dengan metode spktrofotometer serapan atom (AAS) (SOP Shimadzu AA-680) 1. Menimbang ± 10 gram sampel daging udang dan memasukkan ke dalam erlenmeyer ukuran 125 ml/100 ml. 2. Menambahkan 5 ml HNO3 dan didiamkan selama 1 jam pada suhu ruang asam 3. Dipanaskan di atas hot plate dengan temperatur rendah selama 4-6 jam (dalam ruang asam). 4. Dibiarkan selama 1 malam (sampel dalam keadaan tertutup). 5. Sebanyak 0,4 ml H2SO4 ditambahkan ke dalam sampel, kemudian dipanaskan di atas hot plate sampai larutan lebih pekat (berkurang) ± 1 jam. 6. 2-3 tetes larutan campuran HCl4 : HNO3 (2:1) ditambahkan ke sampel yang masih di atas hot plate. Pemanasan terus dilanjutkan hingga ada perubahan warna dari coklat
kuning tua
kuning muda (biasanya 1 jam).
7. Setelah ada perubahan warna, pemanasan dilanjutkan selama 10-15 menit. 8. Sampel dipindahkan, didinginkan, ditambahkan 2 ml aquades dan 0,6 HCL.
9. Dipanaskan lagi agar sampel larut (15 menit) kemudian dimasukkan ke dalam labu takar 100 ml. Apabila ada endapan disaring dengan glas wool, hasil pengabuan dianalisa AAS. 10. Sebelumnya dipreparasi dulu dengan faktor pengenceran yang dibutuhkan dan penambahan bahan kimia untuk menghilangkan ion-ion pengganggu. Lampiran 5 Bobot juvenil udang galah pada penelitian tahap I Perlakuan
A (salinitas 4 ppt + 0 mg/L Ca(OH)2
Ulangan
Awal
1
2
1
0,15
0,18
0,20
2
0,16
0,19
0,21
3
0,15
0,18
0,20
0,15
0,18
0,20
1
0,15
0,20
0,22
2
0,15
0,19
0,22
3
0,15
0,21
0,23
0,15
0,21
0,22
1
0,15
0,22
0,24
2
0,16
0,22
0,25
3
0,15
0,23
0,24
0,15
0,22
0,24
1
0,15
0,24
0,26
2
0,15
0,23
0,25
3
0,16
0,25
0,27
0,15
0,24
0,26
1
0,15
0,18
0,21
2
0,15
0,19
0,22
3
0,15
0,19
0,22
0,15
0,19
0,22
Rata-rata
B (salinitas 4 ppt + 20 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
C (salinitas 4 ppt + 40 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
D (salinitas 4 ppt + 60 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
E (salinitas 4 ppt + 80 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
Sampling
Lampiran 6 Panjang juvenil udang galah pada penelitian tahap I Perlakuan
A (salinitas 4 ppt + 0 mg/L Ca(OH)2
Ulangan
Awal
Akhir
1
2,40
3,00
2
2,30
3,00
3
2,40
3,10
2,40
3,0
1
2,40
3,20
2
2,50
3,20
3
2,50
3,30
2,50
3,20
1
2,40
3,70
2
2,50
3,80
3
2,40
3,70
2,40
3,70
1
2,40
4,00
2
2,40
3,90
3
2,40
3,90
2,40
3,90
1
2,40
3,10
2
2,40
3,10
3
2,30
3,20
2,40
3,10
Rata-rata
B (salinitas 4 ppt + 20 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
C (salinitas 4 ppt + 40 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
D (salinitas 4 ppt + 60 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
E (salinitas 4 ppt + 80 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
Panjang total
Lampiran 7
Frekuensi molting juvenil udang galah selama 30 hari (mulai 29 April sampai 28 Mei 2011)
Perlakuan
Tanggal Molting
Jumlah Molting
A ( salinitas 4 ppt
12-Mei
20-Mei
2
+ 0 mg/L Ca(OH)2
08-Mei
12-Mei
2
12-Mei
20-Mei
2
B ( salinitas 4 ppt
08-Mei
15-Mei
2
+ 25 mg/L Ca(OH)2
10-Mei
15-Mei
10-Mei
16-Mei
C ( salinitas 4 ppt
05-Mei
10-Mei
16-Mei
3
+ 50 mg/L Ca(OH)2
06-Mei
12-Mei
19-Mei
3
08-Mei
12-Mei
19-Mei
3
D ( salinitas 4 ppt
08-Mei
12-Mei
2
+ 75 mg/L Ca(OH)2
10-Mei
16-Mei
2
10-Mei
16-Mei
2
21-Mei
Rata-rata molting 2,00
2,33
3 2 3,00
2,00
Lampiran 8 Tingkat kerja osmotik juvenil udang galah pada penelitian tahap II Perlakuan
Ulangan
A ( salinitas 4 ppt + 0 mg/L Ca(OH)2
Osmolaritas (mOsm / L H2O) Hemolim
Media
TKO
1
0,387
0,108
0,279
2
0,385
0,108
0,277
3
0,383
0,110
0,273
0,385
0,108
0,276
Rata-rata B ( salinitas 4 ppt
1
0,318
0,117
0,201
+ 25 mg/L Ca(OH)2
2
0,312
0,114
0,195
3
0,315
0,116
0,199
0,315
0,115
0,198
Rata-rata C ( salinitas 4 ppt
1
0,309
0,114
0,191
+ 50 mg/L Ca(OH)2
2
0,306
0,117
0,191
3
0,306
0,110
0,189
0,307
0,113
0,190
Rata-rata D ( salinitas 4 ppt
1
0,330
0,114
0,210
+ 75 mg/L Ca(OH)2
2
0,333
0,117
0,213
3
0,331
0,120
0,211
0,311
0,117
0,211
Rata-rata
Lampiran 9 Tingkat konsumsi oksigen juvenil udang galah pada penelitian tahap II Perlakuan
A (salinitas 4 ppt + 0 mg/L (Ca(OH)2
Ulangan
TKO (mg O2/g/jam
1
1,718
2
1,677
3
1,740
Rata-rata
B (salinitas 4 ppt + 25 mg/L (Ca(OH)2
1,711 1
0,908
2
1,205
3
0,908
Rtaa-rata
C (salinitas 4 ppt + 50 mg/L (Ca(OH)2
1,007 1
0,600
2
0,680
3
0,630
Rata-rata
D (salinitas 4 ppt + 75 mg/L (Ca(OH)2
Rata-rata
0,636 1
1,034
2
1,000
3
1,034 1,008
Lampiran 10 Bobot juvenil udang galah pada penelitian tahap II
Perlakuan
Sampling
Ulangan
α (%)
Awal
1
2
3
4
1
0,15
0,18
0,20
0,23
0,31
2
0,15
0,19
0,23
0,29
0,32
3
0,15
0,18
0,21
0,29
0,33
2,60
0,15
0,18
0,21
0,27
0,32
2,51
1
0,15
0,22
0,27
0,33
0,41
3,36
2
0,15
0,23
0,28
0,35
0,42
3,49
3
0,15
0,22
0,27
0,35
0,42
3,49
0,15
0,22
0,27
0,34
0,41
3,44
1
0,15
0,26
0,35
0,43
0,53
4,26
2
0,15
0,27
0,38
0,46
0,54
4,35
3
0,16
0,27
0,40
0,49
0,58
4,36
0,15
0,26
0,37
0,46
0,55
4,32
1
0,15
0,17
0,23
0,3
0,39
3,23
2
0,15
0,17
0,24
0,31
0,40
3,33
3
0,15
0,18
0,25
0,32
0,39
3,23
0,15
0,17
0,24
0,31
0,39
3,26
A (4 ppt + 0 mg/L) Ca(OH)2
Rata-rata
B (4 ppt + 25 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
C (4 ppt + 50 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
D (4 ppt + 75 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
2,43 2,50
Lampiran 11 Panjang total juvenil udang galah pada penelitian tahap II Panjang total awal
Panjang total akhir
(cm)
(cm)
1
2,53
3,30
0,87
A (4ppt + 0 mg/L)
2
2,53
3,32
0,90
Ca(OH)2
3
2,53
3,38
0,95
2,53
3,33
0,90
1
2,56
3,60
1,12
2
2,55
3,74
1,12
3
2,53
3,67
1,12
2,47
3,67
1,12
1
2,55
4,04
1,53
2
2,55
4,08
1,57
3
2,58
4,10
1,53
2,56
4,07
1,54
1
2,53
3,49
0,87
2
2,52
3,47
0,87
3
2,59
3,59
1,00
2,50
3,51
0,91
Perlakuan
Ulangan
Rata-rata
B (4 ppt + 25 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
C (4 ppt + 50 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
D (4 ppt + 75 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
α (%)
Lampiran 12 Kelangsungan hidup juvenil udang galah/minggu pada penelitian tahap II Perlakuan
Ulangan
Awal
1
2
3
4
A (salinitas 4 ppt +
1
100
100
96
96
96
0 mg/L Ca(OH)2
2
100
100
95
91
91
3
100
100
95
90
90
100
100
95
92
92
1
100
100
96
91
91
2
100
100
95
91
91
3
100
100
100
100
100
100
100
97
94
94
1
100
100
100
100
100
2
100
100
95
98
98
3
100
100
100
98
98
100
100
98
99
99
1
100
100
93
91
91
2
100
100
95
95
95
3
100
100
100
83
83
100
100
96
90
90
Rata-rata B (salinitas 4 ppt + 25 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata C (salinitas 4 ppt + 50 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata D (salinitas 4 ppt + 75 mg/L Ca(OH)2
Rata-rata
Lampiran 13 Efisiensi pakan pada penelitian tahap II Perlakuan
Konsumsi pakan
wo
wt
wd
EP (%)
A (salinitas 4 ppt + 0 mg/L (Ca(OH)2
100,00
9,18
15,72
0,64
7,18
95,00
9,22
14,00
1,60
6,71
100,00
9,18
14,06
1,98
6,80
150,00
9,34
19,82
2,05
8,30
175,00
9,30
20,08
2,10
7,36
190,00
9,26
25,08
0,00
8,30
225,00
9,20
31,60
0,00
10,00
220,00
9,58
31,42
0,54
10,17
240,00
9,46
33,54
0,58
10,27
150,00
9,06
18,66
1,95
7,67
180,00
9,16
21,18
1,20
7,34
150,00
9,14
19,50
1,95
8,20
B (salinitas 4 ppt + 25 mg/L (Ca(OH)2
C (salinitas 4 ppt + 50 mg/L (Ca(OH)2
D (salinitas 4 ppt + 75 mg/L (Ca(OH)2
Lampiran 14 Analisis ragam dan uji Tukey terhadap kadar kalsium dalam tubuh juvenil udang galah pada penelitian tahap II Uji Homogenitas Statistik Levene db1 db2 2,509 3 8
P 0,133
ANOVA Antar Kelompok Dalam Kelompok Total
Jumlah Kuadrat db Kuadrat Tengah 3046395,429 3 1015465,143 248990,413 8 31123,802 3295385,842 11
Fhit 32,627
P 0,000
Uji Tukey Variabel tak bebas : kadar kalsium juvenil udang Rata2 perbedaan (I) (J) Tingkat I-J kalsium kalsium kesalahan 0,00 25,00 914,966* 144,045 * 50,00 1377,933 144,045 * 75,00 557,533 144,045 * 25,00 50,00 462,966 144,045 * 50,00 75,00 820,400 144,045 75,00 25,00 357,433 144,045 *. Rata-rata adalah berbeda nyata pada taraf 0,05%
P 0,001 0,000 0,020 0,049 0,002 0,138
Tukey HSDa Kalsium 0,00 75,00 25,00 50,00 P
N 3 3 3 3
1 3990,066
α= 0,05 2
3
4547,600 4905,033 1,000
0,138
5368,000 1,000
Selang kepercayaan 95% Batas bawah Batas atas -1376,252 -453,681 -1839,218 -916,647 -1018,818 -96,247 -924,252 -1,681 359,114 1281,685 -818,718 103,852
Lampiran 15 Analisis ragam dan uji Tukey terhadap frekuensi moulting juvenil udang galah Uji Homogenitas Statistik Levene db1 db2 16,000 3 8
P 0,001
ANOVA Antar Kelompok Dalam Kelompok Total
Jumlah Kuadrat db 2,000 3 0,667 8 2,667 11
Kuadrat Tengah Fhit 0,667 8,000 0,083
P 0,009
Uji Tukey Variabel tak bebas : frekuensi moulting (I) (J) Rata2 perbedaan Tingkat kalsium kalsium ׀I-J׀ kesalahan 0,00 25,00 0,333 0,235 * 50,00 1,000 0,235 75,00 0,000 0,235 25,00 50,00 0,666 0,235 * 50,00 75,00 1,000 0,235 75,00 25,00 0,333 0,235 *. Rata-rata adalah berbeda nyata pada taraf 0,05% Tukey HSDa α= 0,05 Kalsium 0,00 75,00 25,00 50,00 P
N 3 3 3 3
1 2,000 2,000 2,333 0,525
2
2,333 3,000 0,085
P 0,525 0,012 1,000 0,085 0,012 0,525
Selang kepercayaan 95% Batas bawah Batas atas -1,088 0,421 -1,754 -0,245 -0,754 0,754 -1,421 0,088 0,245 1,754 -1,088 0,421
Lampiran 16 Analisis ragam dan uji Tukey terhadap tingkat kerja osmotik Uji Homogenitas Statistik Levene 10,667
db1 3
db2 8
P 0,004 ANOVA
Jumlah kuadrat Antar Kelompok 0,013 Dalam Kelompok 0,000 Total 0,013
db
Kuadrat Tengah 3 0,004 8 0,000 11
Fhit 259,333
P 0,000
Uji Tukey Variabel tak bebas : tingkat kerja osmotik (I) (J) Rata2 perbedaan Tingkat kalsium kalsium ׀I-J׀ kesalahan 0,00 25,00 0,076* 0,003 * 50,00 0,083 0,003 * 75,00 0,060 0,003 25,00 50,00 0,006 0,003 * 50,00 75,00 0,023 0,003 * 75,00 25,00 0,016 0,003 *. Rata-rata adalah berbeda nyata pada taraf 0,05 %
P 0,000 0,000 0,000 0,264 0,001 0,005
Tukey HSDa Kalsium 50,00 25,00 75,00 0,00 P
N 3 3 3 3
1 0,186 0,193
α= 0,05 2
3
0,210 0,264
1,000
0,270 1,000
Selang kepercayaan 95% Batas bawah Batas atas 0,066 0,087 0,072 0,094 0,049 0,070 -0,004 0,017 -0,034 -0,012 0,006 0,027
Lampiran 17 Analisis ragam dan uji Tukey terhadap tingkat konsumsi oksigen Uji Homogenitas Statistik Levene db1 db2 9,028 3 8
Jumlah kuadrat Antar Kelompok 1,788 Dalam Kelompok 0,074 Total 1,862
P 0,006 ANOVA db Kuadrat Tengah 3 0,596 8 0,009 11
Fhit P 64,375
0,000
Uji Tukey Variabel tak bebas : tingkat konsumsi oksigen (I) (J) Rata2 perbedaan kalsium kalsium ׀I-J׀ 0,00 25,00 0,670* 50,00 1,070* 75,00 0,703* 25,00 50,00 0,400* 50,00 75.00 0,366* 75,00 25.00 0,033
Tingkat kesalahan 0,078 0,078 0,078 0,078 0,078 0,078
P 0,000 0,000 0,000 0,004 0,007 0,973
*. Rata-rata adalah berbeda nyata pada taraf 0,05%. Tukey HSDa Kalsium 50,00 75,00 25,00 0,00 P
N 3 3 3 3
1 0,600
α= 0,05 2
3
0,966 1,000 1,000
0,973
1,670 1,000
Selang kepercayaan 95% Batas bawah Batas atas 0,418 0,921 0,818 1,321 0,451 0,954 0,148 0,651 -0,618 -0,115 -0,28 0,218
Lampiran 18 Analisis ragam dan uji Tukey terhadap laju pertumbuhan bobot harian juvenil udang pada tahap II Uji Homogenitas Statistik Levene db1 db2 0,597 3 8
Antar Kelompok Dalam kelompok Total
P 0,635
ANOVA Jumlah Kuadrat db Kuadrat Tengah 4,626 3 1,542 0,164 8 0,021 4,791 11
Fhit 75,044
P 0,000
Uji Tukey Variabel tak bebas : laju pertumbuhan bobot (I) (J) Rata2 perbedaan Tingkat kalsium kalsium ׀I-J׀ kesalahan * 0,00 25,00 0,950 0,117 * 50,00 1,726 0,117 * 75,00 0,643 0,117 * 25,00 50,00 0,776 0,117 * 50,00 75,00 1,083 0,117 75,00 25,00 0,306 0,117
P 0,000 0,000 0,003 0,001 0,000 0,114
Selang kepercayaan 95% Batas bawah Batas atas -1,324 -0,575 -2,101 -1,351 -1,018 -0,268 -1,151 -0,401 0,708 1,458 -0,681 0,068
*. Rata-rata adalah berbeda nyata pada taraf 0,05% Tukey HSDa α= 0,05 Kalsium 0,00 75,00 25,00 50,00 P
N 3 3 3 3
1 2,510
2
3
4
3,263 3,446 1,000
1,000
1,000
4,326 1,000
Lampiran 19 Analisis ragam dan uji Tukey terhadap laju pertumbuhan panjang juvenil udang galah pada penelitian tahap II Uji Homogenitas Statistik Levene db1 db2 9,178 3 8
P 0,006 ANOVA
Antar kelompok Dalam Kelompok Total
Jumlah Kuadrat db Kuadrat Tengah 0,486 3 0,162 0,052 8 0,006 0,537 11
Fhit 25.106
P 0,000
Uji Tukey Variabel tak bebas : laju pertumbuhan panjang (I) kalsium 0,00
25,00 50,00 75,00
(J) Rata2 perbedaan Tingkat kalsium ׀I-J׀ kesalahan * 25,00 0,273 0,065 * 50,00 0,523 0,065 75,00 0,083 0,065 * 50,00 0,250 0,065 * 75,00 0,440 0,065 25,00 0,190 0,065
*. Rata-rata adalah berbeda nyata pada taraf 0,05% Tukey HSDa Kalsium 0,00 75,00 25,00 50,00 P
N 3 3 3 3
1 0,906 0,913
α= 0,05 2
3
1,120 0,998
1,000
1,543 1,000
P 0,013 0,000 0,604 0,021 0,001 0,077
Selang kepercayaan 95% Batas bawah Batas atas -0,483 -0,063 -0,733 -0,313 -0,293 0,126 -0,460 -0,040 0,230 0,650 -0,400 0,020
Lampiran 20 Analisis ragam dan uji Tukey terhadap kelangsungan hidup juvenil udang galah pada penelitian tahap II Uji Homogenitas Statistik Levene db1 db2 2,566 3 8
Antar Kelompok Dalam kelompok Total
P 0,127
ANOVA Jumlah Kuadrat db Kuadrat Tengah 128,667 3 42,889 152,000 8 19,000 280,667 11
Fhit 2,257
P 0,159
Uji Tukey Variabel tak bebas : Kelangsungan hidup (I) (J) Rata2 perbedaan kalsium kalsium ׀I-J׀ 0,00 25,00 1,666 50,00 6,333 75,00 2,666 25,00 50.00 4,666 50,00 75.00 9,000 75,00 25.00 4,333
Tukey HSDa Kalsium 75,00 0,00 25,00 50,00 P
N 3 3 3 3
α= 0,05 1 89,666 92,333 94,000 98,666 0,129
Tingkat kesalahan 3,559 3,559 3,559 3,559 3,559 3,559
P 0,964 0,348 0,875 0,582 0,129 0,634
Selang kepercayaan 95% Batas bawah Batas atas -13,0639 9,7306 -17,7306 5,0639 -8,7306 14,0639 -16,0639 6,7306 -2,3973 20,3973 -15,7306 7,0639
Lampiran 21 Analisis ragam dan uji Tukey terhadap efisiensi pakan pada penelitian tahap II Uji Homogenitas Statistik Levene db1 db2 2,575 3 8
Antar kelompok Dalam Kelompok Total
P 0,127
ANOVA Jumlah Kuadrat db Kuadrat Tengah Fhit 17,244 3 5,748 40,793 1,127 8 0,141 18,372 11
P 0,000
Uji Tukey Variabel tak bebas : efisensi pakan (I) (J) Rata2 perbedaan kalsium kalsium ׀I-J׀ 0,00 25,00 1,090* 50,00 3,250* 75,00 0,840 25,00 50,00 2,160* 50,00 75,00 2,410* 75,00 25,00 0,250
Tingkat kesalahan 0,306 0,306 0,306 0,306 0,306 0,306
*. Rata-rata adalah berbeda nyata pada taraf 0,05 % Tukey HSDa Kalsium 0,00 75,00 25,00 50,00 P
N 3 3 3 3
1 6,896 7,736
0,096
α= 0,05 2
3
7,736 7,986 0,846
10,146 1,000
P 0,030 0,000 0,096 0,000 0,000 0,846
Selang kepercayaan 95% Batas bawah Batas atas -2,071 -0,108 -4,231 -2,268 -1,821 0,141 -3,141 -1,178 1,428 3,391 -1,231 0,731
