Lampiran 1. Identifikasi tumbuhan
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Gambar Talus Rumput Laut Sargassum ilicifolim (Turner) C. Agardh
1
2
3
Makroskopik Tumbuhan Segar Rumput Laut Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agardh Keterangan: 1. “batang” 2. “daun” 3. holdfast
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. (Sambungan)
Makroskopik Simplisia Rumput Laut Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agardh
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. (Sambungan)
Serbuk Ampas Simplisia Rumput Laut Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agardh
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. (Sambungan)
1
2 3 4 5
Mikroskopik Serbuk Simplisia Rumput Laut Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agardh pada pembesaran 10 x 40 Keterangan: 1. Sel parenkim 2. Sel parenkim berisi pigmen coklat 3. Sel propagule bersel satu 4. Sel propagule bersel dua 5. Sel propagule bersel tiga
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Perhitungan Penetapan Karakteristik Simplisia
Perhitungan Penetapan Kadar Air Simplisia Sampel I
:
Berat sampel = 5,017 g Volume air
% kadar air
= =
=
Sampel II
:
volume air x 100% berat sampel 0,7 x 10 x 100% 5,017 g 13,95% (v/b)
Berat sampel = 5,014 g Volume air
% kadar air
= =
=
Sampel III :
= 3,2 - 2,6 ml = 0,6 ml
volume air x 100% berat sampel 0,6 x 100% 5,014 g 11,97% (v/b)
Berat sampel = 5,027 g Volume air
% kadar air
= 2,6 - 1,9 ml = 0,7 ml
= =
=
= 3,8 – 3,2 ml = 0,6 ml
volume air x 100% berat sampel 0,6 x x 100% 5,014 g 11,94% (v/b)
% kadar air rata-rata =
%kadar air I + %kadar air II + %kadar air III 3
= 13,95% + 11,97% + 11,94% 3 =
12,62% (v/b)
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. (Sambungan)
Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air Sampel I
: Berat sampel = 5,013 g Berat Sari
% kadar sari =
Sampel II
:
= 0,053 g
berat sari 100 x x 100% berat sampel 20
=
0,053 g 5,013 g
=
5,29% (b/b)
100 x 100% 20
x
Berat sampel = 5,002 g Berat sari
% kadar sari =
Sampel III :
= 0,053 g
berat sari 100 x x 100% berat sampel 20
=
0,053 g 5,002 g
=
5,30% (b/b)
100 x 100% 20
x
Berat sampel = 5,010 g Berat sari
% kadar sari = =
= 0,057 g
berat sari 100 x x 100% berat sampel 20 0,057 g 5,010 g
x
100 x 100% 20
= 5,69% (b/b) % kadar sari rata-rata =
%kadar sari I + %kadar sari II + %kadar sari III 3
= 5,29% + 5,30% + 5,69% 3 = 5,43% (b/b)
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. (Sambungan)
Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol Sampel I
:
Berat sampel = 5,012 g Berat Sari
% kadar sari =
Sampel II
berat sari 100 x x 100% berat sampel 20
=
0,000 gx 5,012 g
=
0%
:
= 0,000 g
x
Berat sampel = 5,004 g Berat sari
% kadar sari =
Sampel III :
100 x 100% 20
= 0,000 g
berat sari 100 x x 100% berat sampel 20
=
0,000 gx 5,010 g
=
0% (
x
100 x 100% 20
Berat sampel = 5,010 g Berat sari
% kadar sari =
= 0,000 g
berat sari 100 x x 100% berat sampel 20
=
0,000 gx 5,010 g
=
0%
x
100 x 100% 20
%kadar sari I + %kadar sari II + %kadar sari III 3 = 0% + 0% + 0% 3
% kadar sari rata-rata =
= 0%
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. (Sambungan)
Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total Sampel I
:
Berat abu
= 0,1842 g
Berat sampel = 2,0003 g Kadar abu total = berat abu (g) x 100 % berat sampel (g) = 0,1842 g x 100% 2,0003 g = 9,21% (b/b) Sampel II
:
Berat abu
= 0,1878 g
Berat sampel = 2,0003 g Kadar abu total = berat abu (g) x 100 % berat sampel (g) = 0,1878 g x 100% 2,0003 g = 9,39% (b/b) Sampel III
:
Berat abu
= 0,1863 g
Berat sampel = 2,0002 g Kadar abu total = berat abu (g) x 100 % berat sampel (g) = 0,1863 g x 100% 2,0002 g = 9,31% (b/b)
Kadar abu total rata-rata = kadar abu total (sampel I + sampel II + sampel III) % 3 = ( 9,21 + 9,39 + 9,31 ) % 3 = 9, 30% (b/b)
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. (Sambungan)
Perhitungan Penetapan Kadar Abu Yang Tidak Larut Dalam Asam Sampel I
:
Berat abu
= 0,0074 g
Berat sampel = 2,0003 g Kadar abu yang tidak larut dalam asam = berat abu (g) x 100 % berat sampel (g) = 0,0074 g x 100% 2,0003 g = 0,37% (b/b) Sampel II
:
Berat abu
= 0,0087 g
Berat sampel = 2,0003 g Kadar abu yang tidak larut dalam asam = berat abu (g) x 100 % berat sampel (g) = 0,0087 g x 100% 2,0003 g = 0,44% (b/b) Sampel III
:
Berat abu
= 0,0075g
Berat sampel = 2,0002 g Kadar abu yang tidak larut dalam asam = berat abu (g) x 100 % berat sampel (g) = 0,0075 g x 100% 2,0002 g = 0,38% (b/b) Kadar abu yang tidak larut dalam asam rata-rata
= kadar abu (sampel I + sampel II + sampel III) % 3 = ( 0,37 + 0,44 + 0,38 ) % 3 = 0,39% (b/b)
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4. Penetapan Kadar Abu Simplisia
LLLampiran 6. Spektrum Identifikasi Natrium Alginat
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Bagan Pembuatan Natrium Alginat serbuk ampas simplisia Ditimbang 210,064 g serbuk simplisia Direndam dengan CaCl2 1% pada suhu 40°C - 50°C 2jam, disaring Dicuci dengan air suling sampai netral Direndam dengan HCl 5% 2 jam, disaring Dicuci dengan air suling Diputihkan dengan Ca(OCl)2 1% 2,5 jam, disaring Dicuci dengan air suling sampai netral Dimaserasi dengan Na2CO3 5% pada suhu 50° - 60°C 2jam, disaring Ampas
Filtrat Ditambah HCl 5% (pH 3), disaring Gel Asam Alginat
Dicuci dengan air suling Diputihkan dengan H2O2 1,5% 6 jam, disaring Dicuci dengan air suling Ditambah Na2CO3 5% ( pH 9 ) Larutan Gel Natrium Alginat
Dikeringkan serbuk Natrium Alginat
( 34,434 g )
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Spektrum Identifikasi Natrium Alginat Tabel data spektrum inframerah natrium alginat hasil isolasi dan natrium alginat baku pembanding (Yulianto, 2007) Bilangan gelombang (cm-1-) Natrium Alginat Hasil Isolasi
Natrium Alginat Baku Pembanding
Tipe Vibrasi
3495
3500 – 3200
Gugus hidroksil (O-H)
1629
1600 – 1680
Gugus karbonil (C=O)
1060
1000 – 1300
1423
1614 dan 1431
Gugus karboksil (C-O) Natrium dalam isomer alginat
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. (sambungan)
bilangan gelombang (cm-1) Spektrum inframerah natrium alginat hasil isolasi
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. Bagan Alur Pengujian Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah
Tikus Dikondisikan selama 2 minggu 1. Diukur kadar glukosa darah
2. Diberikan suntikan aloksan 130mg/Kg BB
Kadar glukosa darah puasa
Ditunggu kenaikan kadar gula darah selama 3 hari Diukur kadar glukosa darah Kadar Hiperglikemia 3. Diberikan perlakuan dengan dan tanpa pemberian suspensi Natrium Alginat dan pemberian suspensi metformin selama 6 hari Diukur kadar glukosa darah pada hari ke-6 dan ke-9 Kadar Glukosa Darah
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. Bagan Alur Pengukuran Kadar Glukosa Darah Tikus
Tikus Dipuasakan selama 18 jam Dipangkas dan dicukur bulu ekornya Ekor yang bersih Dibilas dengan alkohol Ditusuk dengan jarum spuit pada vena ekor tikus hingga berdarah
Darah Tikus Darah yang keluar disentuhkan pada test strip yang telah terpasang pada alat glucometer Darah siap diukur
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. Data Kadar Glukosa Darah Tikus Selama Penelitian (mg/dl)
1.
Kontrol negatif ( CMC Na 0,5%)
Kelompok
Berat (g)
154,3 178,4 235,4 A 154,5 184,5 155,5 Rata – rata SD
Normal (hari ke-0) 100 110 98 85 88 94 95,8 8,998
Kadar Gula Darah (mg/dl) Induksi Pemberian Obat Aloksan Hari ke-6 Hari ke-9 (hari ke-3) 349 517 569 242 313 507 295 252 496 277 301 475 231 411 576 222 289 515 269,3 347,2 523 48,003 98,648 40,689
2. Kontrol Positif ( Metformin 50mg/Kg BB )
Kelompok
Berat (g)
150,9 160,1 160,6 B 161,8 186,1 173,0 Rata – rata SD
Normal (hari ke-0) 94 95 88 87 108 98 95 7,642
Kadar Gula Darah (mg/dl) Induksi Pemberian Obat Aloksan Hari ke-6 Hari ke-9 (hari ke-3) 506 295 131 433 206 93 448 241 95 391 174 80 365 133 71 428 210 89 428,5 209,8 93,2 48,673 55,546 20,573
3. Pemberian Natrium Alginat 200mg/Kb BB
Kelompok
Berat (g)
Normal (hari ke-0)
C
152,3 151,3 159,6 169,9 176,2 188,8
87 104 94 95 102 90 95,3 6,623
Rata – rata SD
Kadar Gula Darah (mg/dl) Induksi Pemberian Obat Aloksan Hari ke-6 Hari ke-9 (hari ke-3) 288 175 99 357 264 175 344 250 152 379 263 182 308 192 129 356 241 161 338,7 230,8 144,7 34,057 38,028 31,033
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. (Sambungan) 4. Pemberian Natrium Alginat 400mg/Kg BB
Kelompok
Berat (g)
154,9 146,6 150,3 D 162,8 159,3 170,1 Rata – rata SD
Kadar Gula Darah (mg/dl) Induksi Pemberian Obat Normal Aloksan (hari ke-0) Hari ke-6 Hari ke-9 (hari ke-3) 90 322 177 101 98 401 240 175 110 386 239 159 94 342 191 121 95 348 221 131 106 375 232 150 98,8 362,33 218 139,5 7,653 29,871 27,026 27,009
5. Pemberian Natrium Alginat 800mg/Kg BB
Kelompok
Berat (g)
155,5 176,4 146,5 E 150,2 184,3 155,5 Rata – rata SD
Kadar Gula Darah (mg/dl) Induksi Pemberian Obat Normal Aloksan (hari ke-0) Hari ke-6 Hari ke-9 (hari ke-3) 108 446 243 152 95 395 192 100 87 380 199 99 90 406 211 111 103 417 241 108 90 343 150 82 95,5 397,8 206 108,7 8,312 34,891 34,641 23,508
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 10. Hasil SPSS Descriptives 95% Confidence N
Mean
Std. Deviation
Interval for Mean Std. Error Lower
Upper
Bound
Bound
Minimu Maximu m
m
hari_ CMC Na 0,5%
6
95.8333
8.99815
3.67348
86.3904 105.2763 85.00
110.00
ke_0 Metformin 50 mg/Kg BB
6
95.0000
7.64199
3.11983
86.9802 103.0198 87.00
108.00
Na Alginat 200 mg/Kg BB 6
95.3333
6.62319
2.70391
88.3827 102.2839 87.00
104.00
Na Alginat 400 mg/Kg BB 6
98.8333
7.65289
3.12428
90.8021 106.8645 90.00
110.00
Na Alginat 800 mg/Kg BB 6
95.5000
8.31264
3.39362
86.7764 104.2236 87.00
108.00
Total
30
96.1000
7.45723
1.36150
93.3154 98.8846 85.00
110.00
hari_ CMC Na 0,5%
6
269.3333 48.00278
19.59705 218.9575 319.7092 222.00
349.00
ke_3 Metformin 50 mg/Kg BB
6
428.5000 48.67340
19.87083 377.4204 479.5796 365.00
506.00
Na Alginat 200 mg/Kg BB 6
338.6667 34.05682
13.90364 302.9262 374.4071 288.00
379.00
Na Alginat 400 mg/Kg BB 6
362.3333 29.87083
12.19472 330.9858 393.6809 322.00
401.00
Na Alginat 800 mg/Kg BB 6
397.8333 34.89078
14.24410 361.2177 434.4490 343.00
446.00
Total
30
359.3333 66.57344
12.15459 334.4744 384.1923 222.00
506.00
hari_ CMC Na 0,5%
6
347.1667 98.64769
40.27275 243.6423 450.6911 252.00
517.00
ke_6 Metformin 50 mg/Kg BB
6
209.8333 55.54608
22.67659 151.5413 268.1254 133.00
295.00
Na Alginat 200 mg/Kg BB 6
230.8333 38.02850
15.52507 190.9249 270.7418 175.00
264.00
Na Alginat 400 mg/Kg BB 6
216.6667 26.56815
10.84640 188.7851 244.5482 177.00
240.00
Na Alginat 800 mg/Kg BB 6
206.0000 34.64102
14.14214 169.6465 242.3535 150.00
243.00
Total
30
242.1000 75.60941
13.80433 213.8670 270.3330 133.00
517.00
hari_ CMC Na 0,5%
6
523.0000 40.68906
16.61124 480.2994 565.7006 475.00
576.00
ke_9 Metformin 50 mg/Kg BB
6
93.1667
8.40007
71.5736 114.7597 71.00
131.00
20.57588
Na Alginat 200 mg/Kg BB 6
149.6667 31.03332
12.66930 117.0992 182.2341 99.00
182.00
Na Alginat 400 mg/Kg BB 6
139.5000 27.00926
11.02648 111.1555 167.8445 101.00
175.00
Na Alginat 800 mg/Kg BB 6
108.6667 23.50886
9.59745
83.9956 133.3377 82.00
152.00
Total
202.8000 166.40756 30.38172 140.6624 264.9376 71.00
576.00
30
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 10. (Sambungan) ANOVA Sum of Squares hari_ke_0
Between
df
Mean Square
58.200
4
14.550
Within Groups
1554.500
25
62.180
Total
1612.700
29
88814.333
4
22203.583
39714.333
25
1588.573
128528.667
29
84942.867
4
21235.717
80843.833
25
3233.753
Total
165786.700
29
Between
781431.800
4
21621.000
25
803052.800
29
F
Sig.
.234
.917
13.977
.000
6.567
.001
195357.950 225.889
.000
Groups
hari_ke_3
Between Groups Within Groups Total
hari_ke_6
Between Groups Within Groups
hari_ke_9
Groups Within Groups Total
864.840
Homogeneous Subsets
hari_ke_0 α = 0.05 perlakuan Duncana
N
1
Metformin 50 mg/Kg BB
6
95.0000
Na Alginat 200 mg/Kg BB
6
95.3333
Na Alginat 800 mg/Kg BB
6
95.5000
CMC Na 0,5%
6
95.8333
Na Alginat 400 mg/Kg BB
6
98.8333
Sig.
.460
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.
Universitas Sumatera Utara
hari_ke_3 Subset for alpha = 0.05 Perlakuan Duncana
N
1
2
3
CMC Na 0,5%
6
Na Alginat 200 mg/Kg
6
338.6667
6
362.3333
4
269.3333
BB Na Alginat 400 mg/Kg
362.3333
BB Na Alginat 800 mg/Kg
6
397.8333
397.8333
BB Metformin 50 mg/Kg BB
6
428.5000
Sig.
1.000
.314
.135
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.
hari_ke_6 Subset for alpha = 0.05 Perlakuan Duncana
N
1
2
Na Alginat 800 mg/Kg BB
6
206.0000
Metformin 50 mg/Kg BB
6
209.8333
Na Alginat 400 mg/Kg BB
6
216.6667
Na Alginat 200 mg/Kg BB
6
230.8333
CMC Na 0,5%
6
Sig.
347.1667 .497
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.
Universitas Sumatera Utara
.195
hari_ke_9 Subset for alpha = 0.05 Perlakuan Duncana
N
1
2
Metformin 50 mg/Kg BB
6
93.1667
Na Alginat 800 mg/Kg
6
108.6667
3
4
108.6667
BB Na Alginat 400 mg/Kg
6
139.5000
139.5000
BB Na Alginat 200 mg/Kg
6
149.6667
BB CMC Na 0,5%
6
Sig.
523.0000 .370
.081
.555
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. Contoh Perhitungan Dosis Konversi perhitungan dosis antar jenis hewan
Mencit 20 g Tikus 200 g Marmot 400 g Kelinci 1,5 kg Kera 4 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg
Mencit 20 g 1,0
Tikus Marmot 200 g 400 g 7,0 12,25
Kelinci Kera Anjing Manusia 1,5 kg 4 kg 12 kg 70 kg 27,8 64,1 124,3 387,9
0,14
1,0
1,74
3,0
9,2
17,8
56,0
0,008
0,57
1,0
2,25
5,2
10,2
31,5
0,04
0,25
0,44
1,0
2,4
4,5
14,2
0,016
0,11
0,19
0,42
1,0
1,9
6,1
0,008
0,06
0,10
0,22
0,52
1,0
3,1
0,0026
0,018
0,031
0,07
0,16
0,32
1,0
Contoh perhitungan dosis suspensi metformin 0,5% Dosis manusia (berat 70 kg) = 500 mg Dosis tikus (berat 200 g) = 0,018 x 500 mg = 9 mg = 1000/200 x 9 mg = 45 mg/ Kg BB = 50 mg/ Kg BB Suspensi metformin sebanyak 50 mg/Kg BB dibuat dalam sediaan 10 ml.
Dosis untuk tikus (Berat 180 g) = 180 g x (50 mg/1000 g) = 9 mg Sediaan yang dibuat = 5 mg/ 1 ml Jadi volume suspensi simvastin yang diberikan 9 mg
= 1,8 ml
5 mg/ml
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. (Sambungan) Contoh perhitungan dosis Natrium Alginat untuk tikus dengan berat badan 200 g dengan dosis Natrium Alginat 400 mg/Kg BB . Dosis Natrium Alginat 400 mg/kg BB dibuat dalam labu tentukur 10 ml, maka di dalam 10 ml mengandung Natrium Alginat 400 mg untuk 1 kg berat badan. Dosis obat yang diberikan = 200 g x 400 mg = 80 mg 1000 g
Sediaan yang dibuat = 400 mg/10 ml = 40 mg/ml Larutan Natrium Alginat yang diberikan untuk tikus BB 200 g =
80 mg = 2 ml 40 mg/ml
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. (Sambungan)
Contoh perhitungan dosis aloksan Dosis pemberian secara intravena : 70 mg/kg BB Dosis pemberian secara intraperitoneal : 120 – 150 mg/kg BB Dalam penelitian ini dosis yang digunakan adalah 130 mg/kg BB Konsentrasi aloksan yang dibuat adalah 5% ( 5 g dalam 100 ml Infus NaCl 0,9%) = 50 mg/ml Contoh perhitungan dosis untuk tikus berat 200 g dengan dosis 130 mg/kg BB =
13 0mg x 200 g 1000 g
= 26 mg Volume aloksan yang diberikan
=
26 mg 50 mg / ml
= 0,46 ml
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 12. Alat Pengukuran Kadar Glukosa Darah
A
B
C Keterangan: A = Glukometer ( Gluko DrTM ) B = Wadah Penyimpanan Test Strip C = Test Strip
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. Alat Spektrofotometri FTIR
Spektrofotometri FTIR
Universitas Sumatera Utara