Lampiran 1. Hasil Identifikasi Tumbuhan

Lampiran 1. Hasil Identifikasi Tumbuhan

53 Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2

Gambar 3.1. Tumbuhan kemuning

Gambar 3.2. Simplisia Daun Kemuning


Lampiran 3

Daun Kemuning

Dicuci dari pengotor sampai bersih

Ditiriskan dan ditimbang

Daun Kemuning

Dikeringkan dilemari pengering

Simplisia Dihaluskan Serbuk simplisia

Karakterisasi Simplisia

1. Makroskopik 2. Mikroskopik 3. Penetapan Kadar Air 4. Penetapan Kadar Sari yang larut Air 5. Penetapan Kadar Sari yang larut Etanol 6. Penetapan Kadar Abu total 7. Penetapan Kadar Abu yang tidak larut Asam

Pembuatan Ekstrak Diperkolasi dengan etanol 96%

Perkolat

Diuapkan dengan alat penguap vakum putar Dikeringkan dengan freez dryer

Ekstrak kental

Uji aktivitas penurunan kadar kolesterol darah marmot

Gambar 3.3. Bagan Penelitian Uji Efek Ekstrak Daun Kemuning sebagai penurun kadar kolesterol darah marmot.


Lampiran 4

Gambar 3.4.. Mikroskopik dari serbuk daun kemuning Perbesaran 10 x 40 Keterangan : 1 = rambut penutup 2 = kutikula 3 = jaringan epidermis 4 = jaringan palisade 5 = jaringan bunga karang 6 = celah stomata 7 = berkas pembuluh 8 = kristal Ca-oksalat bentuk prisma 9 = kelenjar minyak atsiri


Lampiran 5. Perhitungan Hasil Pemeriksaan Karakteristik Simplisia a. Perhitungan hasil penetapan kadar air Kadar air =

Volume air ( ml ) x 100 % Berat sampel ( g )

1. Sampel I Berat sampel = 5,003 g Volume air

= 0,30 ml

Kadar air

= 0,30 x 100 % 5,003 = 5,99 %

2. Sampel II Berat sampel = 5,003 g Volume air

= 0,30 ml

Kadar air

= 0,30 x 100 % 5,003 = 5,99 %

3. Sampel III Berat sampel = 5,090 g Volume air

= 0,25 ml

Kadar air

= 0,25 x 100 % 5,004 = 4,99 %

Kadar air rata-rata

= 5,99 + 5,99+ 4,99 3 = 5,65 %


b. Perhitungan hasil penetapan kadar sari larut dalam air Kadar sari larut dalam air =

Berat Sari x 100 x 100 % Berat sampel 20

1. Sampel I Berat sampel

= 5,003 g

Berat sari

= 0,273 g

Kadar sari larut dalam air

=

0,273 5,003

x 100 x 100 % 20

= 27,28% 2. Sampel II Berat sampel

= 5,004 g

Berat sari

= 0,262 g


=

0,262 5,004

x 100 x 100 % 20

= 26,17 % 3. Sampel III Berat sampel

= 5,006 g

Berat sari

= 0,278 g


=

0,278 5,006

x 100 x 100 % 20

= 27,76 % Kadar sari larut dalam air rata-rata = 27,28 % + 26,17 % + 27,76 % 3 = 27,07 %


c. Perhitungan hasil penetapan kadar sari larut dalam etanol Kadar sari larut dalam etanol =

Berat Sari x Berat sampel

100 x 100 % 20

1. Kadar sari larut dalam etanol I Berat sampel

= 5,003 g

Berat sari

= 0,188 g

Kadar sari larut dalam etanol

= 0,188 x 100 x 100 % 5,003 20 = 18,78 %

2. Kadar sari larut dalam etanol II Berat sampel

= 5,004 g

Berat sari

= 0,164g


= 0,164 5,004

x 100 x 100 % 20

= 16,38 % 3. Kadar sari larut dalam etanol III Berat sampel

= 5,001 g

Berat sari

= 0,182 g


= 0,182 5,001

x

100 x 100 % 20

= 18,19 % Kadar sari larut dalam etanol rata-rata = 18,78 % + 16,38 % + 18,19 % 3 = 17,78 %


d. Perhitungan hasil penetapan kadar abu total Kadar abu total =

Berat Abu Berat sampel

x 100 %

1. Sampel I Berat sampel = 2,0005 g Berat abu Kadar abu total

= 0,1188 g =

0,1188 2,0005

=

5,94 %

x 100 %

2. Sampel II Berat sampel

= 2,0004g

Berat abu

= 0,1191 g

Kadar abu total

=

0,1191 2,0004

=

5,96 %

x 100 %

3. Sampel III Berat sampel = 2,0005 g Berat abu Kadar abu total

= 0,1175 g =

0,1175 2,0005

=

5,87 %

Kadar abu total rata-rata

x 100 %

= 5,94 % + 5,96 % + 5,87 % 3 = 5,92 %


e. Perhitungan hasil penetapan kadar abu tidak larut dalam asam Kadar abu tidak larut dalam asam =

Berat Abu Berat sampel

x 100 %

1. Sampel I Berat sampel

= 2,0005g

Berat abu

= 0,0270g

Kadar abu tidak larut dalam asam

= 0,0270 2,0005

x 100 %

= 1,35 % 2. Sampel II Berat sampel = 2,0004 g Berat abu

= 0,0291g


= 0,0291 x 100 % 2,0004 = 1,45 %

3. Sampel III Berat sampel = 2,0005 g Berat abu

= 0,0273g


= 0,0273 2,0005

x 100 %

= 1,36 % Kadar abu tidak larut dalam asam rata-rata = 1,35 % + 1,45 % + 1,36 % 3 = 1,39 %


Lampiran 6. Hasil Penetapan Kadar Abu Serbuk Simplisia


Lampiran 7 Marmot

Diberi pakan yang dicampur dengan lemak kambing 15g/100g jumlah makanan selama 14 hari

Diberi induksi kuning telur 1% berat badan secara oral Diukur kadar kolesterolnya

Marmot Hiperkolesterolemia

Gambar 3.5. Bagan Alur Penyiapan Hewan Uji Hiperkolesterolemia


Lampiran 8 Marmot Dikondisikan selama 2 minggu

1. Diukur kadar kolesterol

Kadar kolesterol normal

2. Diberikan perlakuan hiper kolesterolemia selama 14 hari

Diukur kadar kolesterol

Kadar Hiperkolesterolemia 3. Diberikan perlakuan dengan dan tanpa pemberian suspensi EDK dan pemberian suspensi simvastatin selama 7 hari mulai dari hari ke 15

Diukur kadar kolesterol pada hari ke-19 dan ke-23

Kadar kolesterol

Gambar 3.6. Bagan Alur Pengujian Efek Penurun Kolesterol


Lampiran 9 Marmot Dipuasakan selama 10 – 14 jam di cukur bulu telinganya

Telinga yang bersih

Ditusuk dengan jarum spuit pada vena tepi telinga marmot hingga berdarah

Darah Marmot Ditampung dalam tabung yang bersih

Darah siap diukur

Gambar 3.7. Bagan Alur Pengambilan Darah Marmut


Lampiran 10

Darah Marmot Disentrifugasi selama 10 menit dengan kecepatan 1000 rpm Terbentuk 2 lapisan

Serum

Padatan Dipipet sebanyak 10 μl Dimasukkan dalam tabung reaksi yang berisi larutan reagensia kolesterol 1000 μl Dihomogenkan Diinkubasi pada suhu 370C Dibiarkan selama 10 menit Diukur pada alat microlab 300 dengan panjang gelombang 546 nm Dicatat hasilnya

Hasil

Gambar 3.8. Bagan alur pengukuran kadar kolesterol darah marmot


Lampiran 11. Contoh perhitungan dosis Tabel 3.3 Konversi perhitungan dosis antar jenis hewan

Mencit 20 g Tikus 200 g Marmot 400 g Kelinci 1,5 kg Kera 4 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg

Mencit 20 g 1,0

Tikus 200 g 7,0

Marmot Kelinci Kera Anjing Manusia 1,5 kg 4 kg 12 kg 70 kg 400 g 12,25 27,8 64,1 124,3 387,9

0,14

1,0

1,74

3,0

9,2

17,8

56,0

0,008

0,57

1,0

2,25

5,2

10,2

31,5

0,04

0,25

0,44

1,0

2,4

4,5

14,2

0,016

0,11

0,19

0,42

1,0

1,9

6,1

0,008

0,06

0,10

0,22

0,52

1,0

3,1

0,0026

0,018

0,031

0,07

0,16

0,32

1,0

Contoh perhitungan Dosis suspensi simvastatin 0.01% Dosis manusia(berat 70 kg) = 10 mg Dosis marmot (berat 400 g) = 0,031 x 10 mg = 0,31 mg = 1000/400 x 0,31mg = 0,775 mg/ kg BB = 0,80 mg/kg BB Suspensi simvastatin sebanyak 0,8 mg/kg BB dibuat dalam sediaan 10 ml, dengan penimbangan minimal 50 mg maka dibuat dalam sediaan 50 mg x 10 ml= 625 ml 0,80 mg/kg BB Dosis untuk Marmot (Berat 415 g) = 415 g x 0,8 mg/1000 g = 0,332 mg Sediaan yang dibuat = 50 mg/ 625 ml = 0,08 mg/ml Jadi volume suspensi simvastin yang diberikan: 0,332 mg

= 4,15 ml

0,08 mg/ml


(Sambungan) Contoh perhitungan dosis untuk marmot dengan berat badan 400 g dengan dosis ekstrak daun kemuning 100 mg/Kg BB Dosis ekstrak 100 mg/kg BB dibuat dalam botol yang telah dikalibrasi 10 ml, maka di dalam 10 ml mengandung ekstrak daun kemuning 100 mg untuk 1 kg berat badan. Dosis = 10 ml/kg BB Jumlah obat yang diberikan (ml) = 400 g x 10 ml/kg BB = 4 ml 1000g


Lampiran 12

Gambar 3.9. Alat Microlab 300 (E-Merck)


Lampiran 13. Data Pengukuran kadar kolesterol darah Marmot Setelah Berbagai Perlakuan Kelompo k

A

Rata-rata

B

Rata-rata

C

Rata-rata

D

Rata-rata

E

Rata-rata

Norm al 48 48 39 47 45 30 42,83 47 26 36 32 31 39 35,2 31 40 12 25 21 31 26,7 17 28 22 25 33 25 25 36 28 27 25 34 15 27,5

Kadar kolesterol Pemberian obat Hiperkolesterol Hari ke Hari ke emia 19 23 69 64 64 155 154 148 79 80 80 92 94 92 74 74 73 146 146 140 102,5 102 99,5 103 74 51 88 83 58 63 54 27 138 83 57 70 58 35 99 79 47 93,5 71,8 45,8 64 39 35 99 80 56 66 60 33 92 78 52 77 73 60 76 55 44 79 64,2 46,7 70 63 22 87 44 33 109 83 66 136 87 65 102 56 46 142 83 73 107,7 69,8 50,83 99 45 32 89 45 30 77 50 20 60 39 16 136 34 39 72 24 18 88,8

39,5

Berat hewan 400 450 470 450 430 490 420 400 470 460 490 400 510 530 500 530 540 500 560 570 570 590 600 600 610 610 600 550 590 570

25,83


Lampiran 14 Tabel 3.4. Hasil Perhitungan Deskriptif Kadar Kolesterol dengan SPSS Descriptives 95% Confidence Interval for Mean N

t0

Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum

Na-CMC

6

42.83

7.139

2.915

35.34

50.33

30

48

Simvastatin

6

35.17

7.305

2.982

27.50

42.83

26

47

EDK 100

6

26.67

9.647

3.938

16.54

36.79

12

40

EDK 200

6

25.00

5.404

2.206

19.33

30.67

17

33

EDK 400

6

27.50

7.450

3.041

19.68

35.32

15

36

30

31.43

9.740

1.778

27.80

35.07

12

48

6 102.50

38.067

15.541

62.55

142.45

69

155

Simvastatin

6

93.50

26.883

10.975

65.29

121.71

63

138

EDK 100

6

79.00

13.971

5.704

64.34

93.66

64

99

EDK 200

6 107.67

27.790

11.345

78.50

136.83

70

142

EDK 400

6

88.83

26.769

10.928

60.74

116.93

60

136

30

94.30

27.757

5.068

83.94

104.66

60

155

6 102.33

38.124

15.564

62.32

142.34

66

154

Simvastatin

6

71.83

12.766

5.212

58.44

85.23

54

83

EDK 100

6

64.17

15.842

6.467

47.54

80.79

39

80

EDK 200

6

69.33

17.580

7.177

50.88

87.78

44

87

EDK 400

6

50.67

11.501

4.695

38.60

62.74

39

72

Total

30

71.67

26.394

4.819

61.81

81.52

39

154

t23 Na-CMC

6

99.50

35.753

14.596

61.98

137.02

64

148

Simvastatin

6

45.83

12.432

5.076

32.79

58.88

27

58

EDK 100

6

46.67

11.165

4.558

34.95

58.38

33

60

EDK 200

6

50.83

20.469

8.356

29.35

72.31

22

73

EDK 400

6

25.83

9.174

3.745

16.21

35.46

16

39

30

53.73

31.220

5.700

42.08

65.39

16

148

Total

t15 Na-CMC

Total

t19 Na-CMC

Total


Lampiran 15 Tabel 3.5. Hasil perhitungan ANOVA kadar kolesterol dengan SPSS

ANOVA Sum of Squares t0

t15

t19

t23

df

Mean Square

Between Groups

1340.867

4

335.217

Within Groups

1410.500

25

56.420

Total

2751.367

29

Between Groups

3063.133

4

765.783

Within Groups

19279.167

25

771.167

Total

22342.300

29

8659.000

4

2164.750

Within Groups

11543.667

25

461.747

Total

20202.667

29

Between Groups

17962.533

4

4490.633

Within Groups

10303.333

25

412.133

Total

28265.867

29

Between Groups

F

Sig.

5.941

.002

.993

.430

4.688

.006

10.896

.000

Tabel 5. Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic

df1

df2

Sig.

t0

.533

4

25

.713

t15

1.652

4

25

.193

t19

6.319

4

25

.001

t23

6.946

4

25

.001


Lampiran 16 Tabel 3.6. Hasil Uji Duncan Post Hoc Test Homogeneus Subsets t-0 t0 Duncan Subset for alpha = 0.05 Perlakuan

N

1

2

3

EDK 200

6

25.00

EDK 100

6

26.67

26.67

EDK 400

6

27.50

27.50

Simvastatin

6

Na-CMC

6

35.17

35.17 42.83

Sig.

.592

.074

.089

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. t-15 t15 Duncan Subset for alpha = 0.05 Perlakuan

N

1

EDK 100

6

79.00

EDK 400

6

88.83

Simvastatin

6

93.50

Na-CMC

6

102.50

EDK 200

6

107.67

Sig.

.121

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.


t-19 t19 Duncan Subset for alpha = 0.05 Perlakuan

N

1

2

EDK 400

6

50.67

EDK 100

6

64.17

EDK 200

6

69.33

Simvastatin

6

71.83

Na-CMC

6

102.33

Sig.

.130

1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. t-23 t23 Duncan Subset for alpha = 0.05 Perlakuan

N

1

2

EDK 400

6

25.83

Simvastatin

6

45.83

EDK 100

6

46.67

EDK 200

6

50.83

Na-CMC

6

Sig.

99.50 .060

1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.


Lampiran 17. Spesifikasi Alat Microlab 300 (E-Merk) MICROLAB 300 (MERCK)

Light Source  Quartz Halogen Lamp 12V-20W Wavelenght range  Automatic by 12 positions filter-wheel;  6 standar interference filters : 340, 405, 505, 546, 578 dan 620 nm;  6 positions for optional filters Photometric Range  -0.1 to 2.3 Absorbance Detector  Photo diode (320-1000 nm). Blanking  Automatic zero setting Operator interface  Membrame keyboard, for direct function and alpha numeric entry;  Optional external keyboard;  High contrast graphical LCD display  Real time clock, 24 hours system Languages  English;  French;  Spanish;  Portuguese;  German;  Other languages on request Measurements Procedures  Kinetic, with linearity check;  Kinetic, with linearity check and sample slope blank;  Two point kinetic, with or without reagent blank;  End point, with or without reagent blank;  Bichromatic end point; , with or without reagent blank;  End point, with sampl blank and , with or without reagent blank.


Multiple testing  Up to nine replicates;  Means, SD and CV. Measuring time  Programmable, 2 to 998 second for kinetic and two point type of test;  For end point fixed at 2 seconds Delay time  Programmable, 0 to 999 seconds Method Parameter Setting a.o.              

Method name; Measurement mode Wavelength 1 and 2; Aspiration volume; Measurement delay; Measurement time; Factor Concentrations standards; Reagent blank y/n; Sample blank y/n Units for results Level for flagging; Curve fit y/n; Linearity check.

Calibration  Factor, one-point, two point and multiple point;  Automatic on standard (linear mode);  Automatic on up to 10 standard (non linear mode). Quality Control  Two control per test;  QC suvey of last 30 control measurements;  Levey Jenning plot; Flow cell  Metal, with quartz windows;  Measuring volume 25 ml.


Temperature control  By means of peltier elements;  Fixed temperature at 370C Aspiration system  Internal pump of bellows type; driven by stepper motor  Back panel connection for waste;  Aspiration volume programmable. Printer  Matrix printer  Normal paper;  External printer port available. Signal interface  Centronics type parallel port;  RS 232 type serial port;  PS 2 type port for external keyboard Quality  UL  CE  CB cetificate Power Requirements  100-240 VAC nominal, 50/60 Hz;  Battery back-up to retain data. Dimensions  40 x 17 x 36,5 cm (W x H x D) Weight  8,5 kg.


Lampiran 18. Pengoperasian Alat Microlab 300 PENGOPERASIAN ALAT MICROLAB 300 Pengoperasian alat microlab 300 sebagai berikut : 1. Tekan tombol OK/Off 2. Bila alat sudah terhubung/menyala, tunggu selama 15 menit 3. Cari menu yang diinginkan o Tekan skip o Tekan measure o Tekan tombol naik turun o Tekan enter o Tekan tombol penghisap untuk mencuci o Masukkan reagensia yangn diminta ke dalam tombol penghisap, maka hasil akan terlihat pada layar monitor o Bila hasil sudah keluar, tekan skip, begitu seterusnya sampai selesai o Untuk menggantikan pada posisi semula tekan back Catatan : Bila layar tidak terang, tekan tanda (+) Bila layar terlalu terang, tekan tanda (-) Untuk memasukkan program baru ke dalam microlab 300 : 1 Cari program dan tekan enter 2 Buka PIN dengan kata kunci Labkes 3 Tekan new 4 Masukkakn program baru menurut penentuan masing – masing 5 Tekan back untuk kembali ke semula


Lampiran 19. Reagensia Kolesterol



Lampiran 20. Surat Keterangan Pemakaian Laboratorium Kesehatan Dinas Kesehatan Propinsi Sumatera Utara








Lampiran 1. Hasil Identifikasi Tumbuhan

Recommend Documents