Jurnal HPT Volume 2 Nomor 1 Pebruari 2014 ISSN : 2338 - 4336
PENGARUH PEMBERIAN Plant Growth Promoting Rhizobacteria (Bacillus subtilis dan Pseudomonas fluorescens)TERHADAP PENYAKIT BULAI PADA TANAMAN JAGUNG(Zea mays L.) The Effect of Plant Growth Promoting Rhizobacteria Bacillus subtilis and Pseudomonas fluorescenseTo Downy Mildew Of The Maize(Zea mays L.) Zainudin, Abdul Latief Abadi, Luqman Qurata Aini Jurusan Hama dan Penyakit Tumbuhan, Fakultas Pertanian, Universitas Brawijaya, Jl. Veteran, Malang 65145.
ABSTRACT Downy mildew is an important disease in maize caused by the pathogenic fungiPeronosclerospora maydis , with an attack rate of 95%. Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR)has been known as biocontrol againt could produce a variety of biological compounds or metabolites such as siderophore , β - 1 , 3 glucanase , chitinase , antibiotics and cyanide and can improve plant growth by moduling of Acid Indol Acetat (AIA) , gibberellins and cytokinins. The aims of the story to investigate the effect of PGPR to the development of downy mildew as well as the againts of maize. The aims using isolated Bacillus sp . and Pseudomonas sp . and fungicide active ingredient dimetomorf 50 % . Treatment isolates of Bacillus sp . (UB - ABS 4 and 5) can suppress the disease by 50 % , while Pseudomonas sp. (UB – APF2) by 40 % . Highest chlorophyll content of the Pseudomonas sp. UB - APF2 at 32.03. Root fresh weight was not significantly differen but the highest root dry weight in the treatment of Pseudomonas sp. (UB-APF 5) by 2.56 grams and contained the longest roots in Pseudomonas sp. (UB-APF2) of 49.77 cm. Keywords: Maize, PGPR, and Downy mildew. ABSTRAK Bulai merupakan penyakit penting pada tanaman jagung yang disebabkan oleh jamur patogen Peronosclerospora maydis, dengan tingkat serangan mencapai 95%. PGPR diketahui pengendali patogen hayati dengan menghasilkan berbagai senyawa atau metabolit seperti siderophore, β-1,3 glukanase, kitinase, antibiotik dan sianida serta dapat meningkatkan pertumbuhan tanaman dengan meningkatkan konsentrasi AIA, giberelin dan sitokinin.Penelitian bertujuan untuk mengetahui pengaruh PGPR terhadap penyakit bulai pada tanaman jagung. Penelitian menggunakan isolat Bacillus sp.danPseudomonas sp. serta fungisida berbahan aktif dimetomorf 50%. Perlakuan isolat Bacillus sp.(UB-ABS 4 dan 5) dapat menekan penyakit sebesar 50% sedangkan Pseudomonas sp. (UB-APF2) sebesar 40%. Kandungan khlorofil tertinggi pada Pseudomonas sp. UB-APF2 sebesar 32,03. Berat segar akar tidak berbeda nyata tetapi pada berat kering akar tertinggi pada perlakuan Pseudomonas sp. (UB-APF 5) sebesar 2,56 gram dan akar terpanjang terdapat pada Pseudomonas sp. (UB-APF2) sebesar 49,77 cm. Kata kunci: Tanaman jagung, PGPR, dan Penyakit Bulai.
11
Zainudin et al, Pengaruh Pemberian Plant Growth…
PENDAHULUAN Jagung (Zea Mays L.) merupakan bahan pangan sumber karbohidrat kedua setelah beras. Disamping sebagai bahan pangan, komoditi ini juga dikonsumsi sebagai bahan pakan ternak dan bahan baku industri (Najayati dan Danarti, 1999). Namun pada saat ini produksi jagung mengalami penurunan dikarenakan penyakit bulai. Penyakit bulai dapat menyerang tanaman jagung berumur 2-3 minggu, 3-5 minggu dan pada tanaman dewasadan kerusakannya antara 0% hingga 95% (Hamijaya, Asikin dan Thamrin 2001). PGPR merupakan bakteri yang aktif mengkoloni akar tanaman dengan memiliki tiga peran utama bagi tanaman yaitu sebagai biofertilizer, biostimulan dan bioprotektan (Rai, 2006). PGPR dapat mempengaruhi tanaman secara langsung dan tidak langsung. Secara langsung yaitu dengan memfiksasi nitrogen, melarutkan fosfat, produksi siderofor dan hormon pertumbuhan dan tidak langsung yaitu dengan memperbaiki kondisi pertumbuhan dengan beberapa mekanisme (Glick, 1995). Masnilah, Mihardja dan Restuningsih (2006) menyatakan bahwa aplikasi PGPR Bacillus amyloliquefaciens 937a, B. subtilis 937b dan B. pumilis SE34 pada tanaman tomat dapat menekan penyakit TMoV hingga 50% dan meningkatkatn mampu produksi tomat hingga 10-15 %. Berdasarkan latar belakang, penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi Plant growth promoting rhizobacteria dalam mengendalikan penyakit bulai (Peronosclerospora maydis). METODE Penelitian dilaksanakan bulan Januari hingga Mei 2013 di Laboratorium Penyakit Tanaman dan screen house Fakultas Pertanian, Universitas Brawijaya, Malang. Metode penelitian menggunakan 12
RAK dengan 9 perlakuan dan tiap perlakuan diulang sebanyak 3 kali. Penelitian meliputi penekanan penyakit bulai dengan PGPR (Bacillus sp. dan Pseudomonas sp.)juga fungisida berbahan aktif Dimetomorf 50%. Pelaksanaan Penelitian Perbanyakan PGPR Perbanyakan PGPR dilakukan pada media padat NA (B. sutilissp.) dan King’s B (P. flourencensesp.), kemudian diinkubasi pada suhu ruang (27°C - 28°C) selama 48 jam untuk mendapatkan koloni tunggal. Koloni tunggal hasil peremajaan kemudian digores penuh pada cawan petri steril baru yang telah berisi media pada King’s B dan NA, kemudian diinkubasi selama 48 jam pada suhu ruang. Bakteri dipanen dan dilarutkan dengan aquades steril kemudian dihitung pada OD = 1 pada 600 nm dengan spektrofotometer untuk mendapatkan konsentrasi bakteri 109 CFU/ml. Inokulasi Jamur Peronosclerospora sp. pada Jagung Daun jagung yang terserang bulai dikumpulkan pukul 16.00 WIB. Daun jagung yang terkumpul kemudian dibersihkan dengan air dan dipotong 10 cm. Bagian pangkal daun diletakkan pada kapas yang diberi suspesi gula 10% kemudian diletakkan pada tempat yang gelap dan bersuhu 18-23°C. Spora bulai akan muncul pada bagian bawah daun setelah diinkubasi selama 5-7 jam. Spora dipanen dengan suspensi air gula 3%. Konsentrasi jamur yang akan diinokulasi pada tanaman jagung disesuaikan hingga spora/ml dengan menggunakan 103 Henemocytometer. Teknik inokulasi spora dengan teknik spray pada titik tumbuh tanaman. Masing-masing jagung diinokulasi sebanyak 3 ml suspensi Peronoscleorospora sp. pada 10 (HST) sekitar pukul 01.00-03.00 WIB.
Jurnal HPT
Volume 2 Nomor 1
Rancangan percobaan Percobaan ini menggunakan Rancangan Acak Kelompok 3 ulangan seperti berikut : Tabel 1. Perlakuan Penelitian Perlakuan Kontrol Peronoscleoropsorasp. P1 Aquades steril 103 spora/ml Fungisida berbahan P2 103 spora/ml aktif dimetomorf 50% P3 0 103 spora/ml P4 0 103 spora/ml P5 0 103 spora/ml P6 0 103 spora/ml P7 0 103 spora/ml P8 0 103 spora/ml P9 0 103 spora/ml
Pebruari 2014
dengan 9 perlakuan dan
PGPR 0 0 109 cfu/ml UB-ABS 1 109 cfu/ml UB-ABS 2 109 cfu/ml UB-ABS 3 109 cfu/ml UB-ABS 4 109 cfu/ml UB-ABS 5 109 cfu/ml UB-APF 2 109 cfu/ml UB-APF 5
Keterangan : UB-ABS = Strain B. subtilissp. koleksi HPT (FP-UB) UB-APF = Strain P. flourescensesp. koleksi HPT (FP-UB)
P
Pemberian PGPR PGPR diaplikasikan dengan dua kali yaitu perlakuan benih dan pemberian suspensi pada media tanam. Perlakuan pada benih dengan perendaman selama 12 jam sebelum ditanam dengan suspensi PGPR. Perendaman menggunakan masing-masing suspensi PGPR sebanyak 50 ml dengan konsentrasi 109 CFU/ml. Sedangkan pada tanaman jagung, pemberian suspensi masing-masing PGPR dituang pada media tanam dalam pot sebanyak 50 ml/pot sehari sebelum inokulasi (9 HST).
B T
Kandungan Khlorofil Pengamatan khlorofil dilakukan pada 4 MSI dengan menggunakan SPAD-502 Chlorophil meter. Helai daun di ambil sampel pada bagian pangkal, tengah dan ujung daun. Bobot Segar dan Kering Akar Bobot segar dan kering ditimbang pada 4 MSI penyakit bulai. Untuk bobot kering ditimbang setelah di oven pada suhu 80°C selama 48 jam.
Pengamatan Persetase Penyakit Bulai Pengamatan penyakit bulai dilakukan pada tiap perlakuan pada umur tanaman 1, 2, 3 dan 4 MSI (Minggu Setelah Inokulasi). Setiap perlakuan diulang 3 kali dengan masing-masing ulangan terdiri dari 10 tanaman. Persentase penyakit bulai dihitung berdasarkan pada rumus berikut: P=
. :
= Persentase tanaman jagung terserang penyakit bulai = Jumlah tanaman jagung terserang bulai = Jumlah populasi tanaman jagung yang tumbuh
Analisis data menggunakan ANOVA uji BNT (5%). Bila pengujian dihasilkan perbedaan yang nyata maka akan dilanjutkan dengan uji Duncan pada taraf 5% HASIL DAN PEMBAHASAN
× 100 %
Persentase Serangan Penyakit Bulai
Keterangan :
13
Zainudin et al, Pengaruh Pemberian Plant Growth…
Perlakuan PGPR (B.subtilis sp. dan P. flourescense sp.) dapat menekan serangan penyakit bulai pada tanaman jagung. Pada pengamatan presentase serangan bulai mulai 1, 2, dan 3 Minggu Setelah Inokulasi tidak terdapat yang signifikan. Akan tetapi pada pengamatan 4 Minggu Setelah Inokulasi bakteri B. subtilis (UB-ABS 4 dan 5) tingkat serangannya paling rendah bila dibandingkan dengan bakteri yang lainnya. Tingkat serangan pada kedua
bakteri ini saya besar yaitu 16,67%.Hal ini sesuai dengan penilitian (Raj, dkk., 2003) pada tanaman Pennisetum glaucum bahwa dengan penggunaan PGPR dapat menekan intensitas serangan penyakit downy mildew sebesar 78% pada tanaman tersebut. Bahkan dari hasil penelitian (Zhang, 2004) pada tanaman tembakau dapat mengurangi intensitas serangan bercak biru yang disebabkan spora Peronospora tabacina hingga 99,6% pada konsentrasi bakteri 1010 CFU/mL.
Tabel 2. Rerata Presentase Serangan Penyakit Bulai Rata-rata Intensitas Serangan Penyakit Bulai (%) Perlakuan 1 MSI 2 MSI 3 MSI 4 MSI 20.00 23.34 33.33 33.33 c P1 (Kontrol) 3.33 3.33 6.67 6.67 a P2 (Fungisida) 3.33 16.67 20.00 23.33 bc P3 (UB-ABS 1) 10.00 13.33 23.34 30.00 bc P4 (UB-ABS 2) 3.33 6.67 16.67 26.67 bc P5 (UB-ABS 3) 6.67 10.00 13.33 16.67 ab P6 (UB-ABS 4) 13.33 16.67 16.67 16.67 ab P7 (UB-ABS 5) 10.00 13.33 16.67 20.00 abc P8 (UB-APF 2) 6.67 10.00 26.67 26.67 bc P9 (UB-APF 5) Keterangan : seluruh perlakuan diinokulasi spora bulai (Peronosclerospora sp. dengan konsentrasi 103); P=Perlakuan penelitian, angka dibelakang huruf merupakan kode perlakuan; P1= tanaman jagung tanpa diinokulasi PGPR dan fungisida; P2= tanaman jagung dengan perlakuan fungisida berbahan aktif Dimetromorf; P3-P9 diinokulasi dengan PGPR; UB-ABS = B. subtilis, UB-APF= P.flourescens angka dibelakang huruf merupakan kode isolat; MSI=Minggu Setelah Inokulasi. Angka yang diikuti huruf yang berbeda menunjukkan hasil yang berbeda nyata (uji selang ganda Duncan α = 0,05)
A
B
C
Gambar 1. Gejala bulai pada daun jagung; (A). Klorotik memanjang sejajar tulang daun; (B).Gejala sistemik bulai dengan batas warna yang jelas; (C). Embun tepung putih di bawah permukaan daun tanaman jagung.
14
Jurnal HPT
Volume 2 Nomor 1
Kandungan Khlorofil Pemberian PGPR dan fungisida berpengaruh nyata terhadap kandungan khlorofil pada tanaman jagung. Kandungan khlorofil diukur dengan menggunakan alat SPAD-502 chlorophil meter. Dari hasil analisa kandungan khlorofil tertinggi terdapat pada perlakuan P9 dengan penambahan bakteri P.flourescens (UB-APF5)sebesar 32,03. Hal ini sesuai dengan (Stefan, dkk., 2013) penggunaan PGPR dapat meningkatkan kandungan klorofil yang signifakan pada tanaman kacang-kacangan. Penggunaan bakteri Pseudomonas sp. pada tanaman kemangi dapat meningkatkan kandungan klorofil yang signifikan (Heidari, 2011). Mekanisme Pseudomonas sp. dalam memacu pertumbuhan tanaman banyak yang dilaporkan sebagai penghasil fitohormon dalam jumlah besar khususnya IAA untuk merangsang pertumbuhan (Watanabe, dkk., 1987). Didukung dengan penelitian (Piromyou, 2010) penggunaan Pseudomanas sp. pada tanaman pisang dapat meningkatkan hormon IAA. Pseudomonas sp. mampu berkompetisi
Pebruari 2014
nutrisi berupa ion Fe yang terjadi pada kondisi ion Fe dalam jumlah yang terbatas. Bakteri ini mampu membentuk senyawa pengikat/penghelat ion tersebut sehingga menjadi tidak tersedia bagi mikroorganisme lain termasuk patogen. Senyawa tersebut disebut sebagai siderofor (Leog, 1986). Rerata kandungan khlorofil bisa dilihat di tabel 3. BeratSegar dan Berat Kering Akar Pemberian PGPR dan fungisida pada tanaman jagung tidak berpengaruh nyata pada berat segar akar tetapi berpengaruh nyata terhadap berat kering akar. Hasil pengamatan kandungan khlorofil tertinggi pada perlakuan P3 dengan penambahan B. subtilis (UB-ABS 1) sebesar 2,88.Hal ini sesuai dengan (Kardilag, dkk., 2013) pemberian bakteri B. subtilis dapat meningkatkan berat kering akar 11,2 % dibandingkan kontrol. Pernyataan ini juga didukung (Mia, 2009) bakteri B. subtilis tanpa penambahan pupuk N pada sistem hidroponik dapat meningkatkan berat kering akar hingga 22,3% bila dibandingkan dengan kontrol.
Tabel 3. Pengaruh PGPR terhadap Jumlah Klorofil Perlakuan P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9
Rata-rata Kandungan Klorofil 31.40 cd 28.13 a 28.7a ab 30.37 bcd 29.73 abc 29.13 ab 29.20 ab 29.00 ab 32.03 d
(Kontrol) (Fungisida) (UB-ABS 1) (UB-ABS2) (UB-ABS 3) (UB-ABS4) (UB-ABS 5) (UB-APF2) (UB-APF5)
Keterangan : seluruh perlakuan diinokulasi spora bulai (Peronosclerospora sp. dengan konsentrasi 103); P=Perlakuan penelitian, angka dibelakang huruf merupakan kode perlakuan; P1= tanaman jagung tanpa diinokulasi PGPR dan fungisida; P2= tanaman jagung dengan perlakuan fungisida berbahan aktif Dimetromorf; P3-P9 diinokulasi dengan PGPR; UB-ABS = B. subtilis, UB-APF= P.fluorescens angka dibelakang huruf merupakan kode isolat; MSI=Minggu Setelah Inokulasi.Angka yang diikuti huruf yang berbeda menunjukkan hasil yang berbeda nyata (uji selang ganda Duncan α = 0,05)
15
Zainudin et al, Pengaruh Pemberian Plant Growth…
Dengan pemberian PGPR (Pseudomonas sp. dan Bacillus sp) memiliki aktivitas pemacu pertumbuhan tanaman dengan cara menghasilkan hormon IAA dan melarutkan posfat (Astuti 2007). Glick dan Pasternak (1994) melaporkan bahwa Pseudomonas sp. adalah mikroba penghasil fitohormon khususnya IAA dalam jumlah besar dan mampu meningkatkan pertumbuhan tanaman dengan mengatur keseimbangan hormonal di dalam tanaman yang diinfeksi. Hasil pengamatan dapat dilihat di tabel 4.
cm. Hal ini diduga pengaruh dari persaingan nutrisi unsur hara yang berada di media tanam. Nutrisi yang ada tidak mencukupi untuk memenuhi kebutuhan pertumbuhan dari tanaman jagung. Faktor volume media tanam memungkinkan mempengaruhi terbatasnya unsur hara dan ruang gerak dari akar tanaman. Selain itu juga jarak antar tanaman mempengaruhi persaingan nutrisi antar tanaman. Pemakaian bibit per titik tanam berpengaruh terhadap pertumbuhan karena secara langsung berhadapan dengan kompetisi antar tanaman dalam satu rumpun. Jumlah bibit per titik tanam yang lebih sedikit akan memberikan ruang pada tanaman untuk menyebar dan memperdalam perakaran (Berkelaar, 2001).
Panjang akar Panjang akar tanaman jagung dengan pemberian PGPR tidak berbeda nyata. tetapi diperoleh hasil terpanjang pada pengamatan 4 MSI pada perlakuan P.flourescense UB-APF 2 sebesar 49,77
Tabel 4. Pengaruh PGPR terhadap Berat Segar Akar (BBA) dan Berat Kering Akar (BKA) Rata-rata BBA per 10 Rata-rata BKA per 10 Perlakuan tanaman (g) tanaman (g) 31.33 2.51 bc P1 (Kontrol) 26.00 1.76 a P2 (Fungisida) 30.00 2.88 c P3 (UB-ABS 1) 25.67 1.75 a P4 (UB-ABS2) 26.67 2.00 ab P5 (UB-ABS 3) 29.67 2.11 ab P6 (UB-ABS4) 29.00 1.99 ab P7 (UB-ABS 5) 27.67 2.38 abc P8 (UB-APF2) 29.00 2.56 bc P9 (UB-APF5) Keterangan : seluruh perlakuan diinokulasi spora bulai (Peronosclerospora sp. dengan konsentrasi 103); P=Perlakuan penelitian, angka dibelakang huruf merupakan kode perlakuan; P1= tanaman jagung tanpa diinokulasi PGPR dan fungisida; P2= tanaman jagung dengan perlakuan fungisida berbahan aktif Dimetromorf; P3-P9 diinokulasi dengan PGPR; UB-ABS = B. subtilis, UB-APF= P.fluorescens angka dibelakang huruf merupakan kode isolat; MSI=Minggu Setelah Inokulasi.. Angka yang diikuti huruf yang berbeda menunjukkan hasil yang berbeda nyata (uji selang ganda Duncan α = 0,05)
16
Jurnal HPT
Volume 2 Nomor 1
Pebruari 2014
Tabel 5. Pengaruh PGPR terhadap Panjang Akar Perlakuan P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9
Rata-rata Kandungan Klorofil 44.66 47.57 46.13 45.97 46.13 46.13 47.50 49.77 48.20
(Kontrol) (Fungisida) (UB-ABS 1) (UB-ABS2) (UB-ABS 3) (UB-ABS4) (UB-ABS 5) (UB-APF2) (UB-APF5)
Keterangan : seluruh perlakuan diinokulasi spora bulai (Peronosclerospora sp. dengan konsentrasi 103); P=Perlakuan penelitian, angka dibelakang huruf merupakan kode perlakuan; P1= tanaman jagung tanpa diinokulasi PGPR dan fungisida; P2= tanaman jagung dengan perlakuan fungisida berbahan aktif Dimetromorf; P3-P9 diinokulasi dengan PGPR; UB-ABS = B. subtilis, UB-APF= P.fluorescens angka dibelakang huruf merupakan kode isolat; MSI=Minggu Setelah Inokulasi.Analisa data tabel dengan ANOVA taraf 5%.
KESIMPULAN Penggunaan PGPR (B. subtilis dan P. fluorescense) berpotensi mengendalikan penyakit bulai. PGPR dapat menekan serangan penyakit bulai yang diakibatkan spora Peronosclerospora sp. pada tanaman jagung. Pemberian B. subtilis( UB-ABS 4 dan 5) dapat menekan serangan penyakit bulai hingga 50%. Sedangkan P. fluorescense(UB-APF 2 dan 5) masingmasing dapat menekan 40% dan 20% penyakit bulai pada tanaman jagung bila dibandingkan dengan kontrol. Penggunaan fungisida sistemik berbahan aktif dimetromorf dapat menekan hingga 80% bila dibandingkan dengan kontrol.
DAFTAR PUSTAKA Astuti,
RI. 2008. Analisis Karakter Pseudomonas sp. sebagai Agens Pemacu Pertumbuhan Tanaman dan Biokontrol Fungi Patogen. [Tesis]. Sekolah Pascasarjan IPB. Bogor.
Berkelaar, D. 2001. Sistem intensifikasi padi (the system of rice intensification-SRI) : Sedikit dapat memberi lebih banyak. 7 hal terjemahan. ECHO, Inc. 17391 Durrance Rd. North Ft. Myers FL. 33917 USA. Glick BR, Pasternak JJ. 1994. Moleculer Biotechnology, Principles & Applications of Recombinant DNA. Washington, D.C. ASM Pr.
SARAN Penelitian tentang PGPR perlu dilakukan lebih lanjut dengan mengkombinasi bakteri PGPR. Hasil dari kombinasi diharapkan dapat lebih tinggi menekan intensitas serangan bulai pada tanaman jagung. Sehingga hasil dari kombinasi tersebut dapat menjadi referensi bagi petani dan pengusaha.
Glick, B.R. 1995. The Enhancement of Plant Growth by Free-Living Bacteria. Can J Microbiol 41:109117
17
Zainudin et al, Pengaruh Pemberian Plant Growth…
Hamijaya, M. Z. S. Asikin dan M. Thamrin. 2001. Musuh Alami jagung dilahan Kering Beriklim Basah dan Pasang surut Kalimantan Selatan. Simposium Pengendalian Hayati. Sukamandi 14-15 Maret 2001
Najiyati, S dan Danarti. 1999. Palawija Budidaya dan Analisis Usahatani. Penebar swadaya : Jakarta Okon,
Heidari, M., Sayed M. M., Amir G. 2011. Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR) Effect on Physiological Parameters and Mineral Uptake in basil (Ociumum basilicm L.) Under Water Stress. Vol. 6, No. 5, May 2011
Piromyou, Pongdet. 2010. Effects of Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR) Inoculum Indigenous Microbial Community Structure Under Cropping System. Thesis, Suranaree University of Technology, Thailand. 2010
Karlidag, H., Ertam Y., Metin T., Mucahit dan P. Figen D. 2013. Plant Growth-promoting Rhizobacteria Mitigate Deleterious Effects of Salt Stress on Strawberry Plants. Hortscience 48(5):563–567. 2013. Leog,
Y dan Y. Kapulnik. 1986. Development and Function of Azospirillum-Inoculated Roots. Plant and soil 90;3-6
Raj,
J. 1986. Siderophores: Their Biochemistry and Possible Role in the Biocontrol of Pathogen. Annu. Rev. Phytopathol. 24:187-209
S.N., G. Chaluvaraja, K.N. Amruthesh, dan H.S. Shetty. 2003. Introduction of Growth Promoting and Resistance Againts Downy Mildew on Pearl Millet (Pennisetum Glaucum) by Rhizobacteria. Jurnal Plant and Disease; April 2003;87, pg. 380.
Semangun, H. 2004. Penyakit-Penyakit Tanaman Pangan Di Indonesia. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta.
Masnilah, R., P.A Mihardja dan Restuningsih. 2006. Pemanfaatan Bacillus spp. Untuk Mengendalikan Penyakit Busuh Batang Berlubang Erwinia carotovora Pada Tembakau Di Rumah Kaca. Jurnal Mapeta 9 (3): 154-165
Stefan, M., N. Munteanu, V. Stoleru, dan M. Mihasan. 2013. Effects of inoculation with plant growth promoting rhizobacteria on photosynthesis, antioxidant status and yield of runner bean. Jurnal Romanian Biotechonological Letters. Vo. 18, No.2, 2013.
Mia, M. A. Baset, Z. H. Shamsuddin, Z. Wahab, dan M. Marziah. 2009. The Effect of Rhizobacterial Inoculation on Growth and Nutrient Accumulation of TissueCultured Banana Plantlets Under Low N-Fertilizer Regime. African Journal of Biotechnology Vol. 8 (21), pp. 5855-5866, 2 November, 2009
Watanabe I., Yoneyama T., Padre B., Ladha J.K. 1987. Different in Natural Abudance of N Varieties in Several Rice (Oriza Sativa L.) Varieties : Application for Evaluating N-Fixation. Soil Sci.
18