Karyotyp lov ka Karyotyp – soubor chromozom v jád e bu ky
Význam – v genetickém poradenství ke stanovení zm n ve struktu e a po tu chromozom
Karyotyp lov ka
Historie: 20. léta 20. století – p ibližný po et chromozom v bu ce lov ka 1956 – p esný po et chromozom = 46 chromozom 1965 – technika vyšet ení chromozom z periferní krve - klasická technika barvení mitotických chromozom orceinem = období morfometrických metod identifikace chromozom nap . dle polohy centromery – metacentrický, submetacentrický, akrocentrický, telocentrický
Karyotyp lov ka
Historie: 20. léta 20. století – p ibližný po et chromozom v bu ce lov ka 1956 – p esný po et chromozom = 46 chromozom 1965 – technika vyšet ení chromozom z periferní krve - klasická technika barvení mitotických chromozom orceinem = období morfometrických metod identifikace chromozom nap . dle polohy centromery – metacentrický, submetacentrický, akrocentrický, telocentrický 1969 – 1. proužkovací technika – Q-pruhování - po átek proužkovacích technik – identifikace chromozom na základ po tu, tlouš ky a pozice proužk – G-pruhy – p sobení trypsinem na metafázní chromozomy s následným barvením Giemsovým barvivem
Karyotyp lov ka
Chromozomy barvené G-pruhováním.
Karyotyp lov ka
Historie: 20. léta 20. století – p ibližný po et chromozom v bu ce lov ka 1956 – p esný po et chromozom = 46 chromozom 1965 – technika vyšet ení chromozom z periferní krve - klasická technika barvení mitotických chromozom orceinem = období morfometrických metod identifikace chromozom nap . dle polohy centromery – metacentrický, submetacentrický, akrocentrický, telocentrický 1969 – 1. proužkovací technika – Q-pruhování - po átek proužkovacích technik – identifikace chromozom na základ po tu, tlouš ky a pozice proužk – G-pruhy – p sobení trypsinem na metafázní chromozomy s následným barvením Giemsovým barvivem 1976 – HRT – zavedení proužkovacích technik v profázi mitotického d lení – chromozomy jsou mén spiralizované a kondenzované = více pruh + identifikace i malých chromozom Sou asnost – G-pruhy – FISH (Fluorescen ní in situ hybridizace) – fluorescen ní obarvení ásti chromozomu pomocí komplementární sondy
Karyotyp lov ka
Výhody oproti pruhování: - mén pracná - nevyžaduje pro vyhodnocení takovou zkušenost - odhalí i mikrodelece a drobné translokace Nevýhody: - lze sledovat jen oblast, k níž máme sondu - nutný je fluorescen ní mikroskop - preparát není trvalý („zháší“)
Karyotyp lov ka
Hlavní zásady klasifikace lidských chromozom : 1960 - Denverská konference – lov k má 23 pár chromozom . 1 až 22 = autozomy . 23 = gonozomy 1963 - Londýnská konference – rozd lení chromozom do 7 skupin dle morfometriky A – chromozomy B – chromozomy C – chromozomy D – chromozomy E – chromozomy F – chromozomy G – chromozomy
. 1-3 .4a5 . 6-12, X . 13-15 . 16-18 . 19 a 20 . 21, 22 a Y
1967 - konference v Chicagu – rozd lení aberací 1971 - konference v Pa íží – zásady pro identifikaci naproužkovaných chromozom
Karyotyp lov ka
Sestavení karyotypu Princip: na základ morfologie a proužkování chromozomy podle idiogramu uspo ádáme do 7 skupin
Idiogram lidských chromozom
Karyotyp lov ka
Sestavení karyotypu Princip: na základ morfologie a proužkování chromozomy podle idiogramu uspo ádáme do 7 skupin Postup: - odb r periferní krve - kultivace lymfocyt z periferní krve – indukce z G0 do G1 fáze bun ného cyklu pomocí speciálního kultiva ního média - mitóza p i 32 ºC po dobu 72 hodin - p sobení kolchicinem – zastavení mitózy, synchronizace bun k - hypotonizace a fixace chromozom - barvení Význam: - ur ení pohlaví - stanovení zm n ve struktu e a po tu chromozom P .: zdravý muž – zápis: 46, XY Chronická myeloidní leukémie – Ph-chromozom - translokace mezi chr. 9 a 22 – 46, XY t(9;22) Klinefelter v syndrom – 47, XXY Turner v syndrom – 45, X0 Down v syndrom – 47, XY 21+ Pata v syndrom – 47, XX 13+
Karyotyp lov ka
Sestavení karyotypu Doma vyzkoušejte na internetu:
http://learn.genetics.utah.edu/content/begin/traits/karyotype/
Karyotyp lov ka
Sestavení karyotypu
Vyfotografované chromozomy barvené G-pruhováním.
1) Rozst íhejte chromozomy a p i a te je k sesterským homolog m 2) Ur ete – pohlaví jedince – zda-li je jedinec zdravý a nebo zda n který chromozom chybí i p ebývá
