Laporan Teknis Penelitian Tahun Anggaran 2010 Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik
EVALUASI 15 AKSESI TEMULAWAK BERDASARKAN INDIKATOR GEOGRAFIS UNTUK MENINGKATKAN PRODUKSI >20% Natalini Nova Kristina, Nurliani Bermawie, Mono Rahardjo, Ireng Darwati, Susi Purwiyanti, Wawan Lukman, Totong Sugandi, Suryatna, Hendra, Ramdhan ABSTRAK Kegiatan evaluasi 15 aksesi temulawak merupakan kegiatan baru yang dilaksanakan dengan cara mengumpulkan 15 aksesi dari 6 Propinsi yang selanjutnya dievaluasi di Kebun Percobaan Cicurug. Kegiatan meliputi pengumpulan data pertumbuhan tanaman, data kondisi geografis dari lokasi, analisa proximat, analisa GCMS dan analisa DNA serta penanaman koleksi di kebun percobaan. Dari hasil kegiatan sampai dengan bulan Desember dapat disampaikan dari kegiatan temulawak ini adalah telah dikumpulkan 26 aksesi dari 6 Propinsi, tetapi hanya 15 aksesi yang dapat dibudidayakan secara ex situ di kebun percobaan Cicurug, karena bahan tanaman tidak mencukupi untuk dilakukannya serangkaian pengamatan (analisa proximat, GC dan HPLC, warna rimpang, analisa DNA dan penanaman). Di samping itu ada 5 aksesi yang berasal dari NTT diragukan kemurniannya sebagai temulawak, tetapi masyarakat setempat menyakini tanaman tersebut adalah temulawak. Dari hasil analisa proximat diketahui bahwa aksesi yang berasal dari Desa Fatumnutun NTT memiliki kadar minyak atsiri tertinggi (7, 97%), sementara untuk kadar pati tertinggi (53,61%), berasal dari Kp. Sido Makmur Desa Podorejo Jawa Tengah, Untuk kandungan xanthorizol tertinggi (2, 94%) berasal dari Desa Katogan Kabupaten Gunung Kidul Yogyakarta, dan untuk kandungan kurkumin tertinggi (2,24%) berasal dari desa Bajuin Kabupaten Tanah Laut Kalimantan Selatan. Dari hasil analisa GCMS, terlihat beberapa komponen kimia yang sama antar semua aksesi, kecuali aksesi NTT, mengandung satu komponen kimia yang cukup tinggi, yakni 1-H-3a,7-Methanoazulene dengan kadar 19,37% dalam 5 µm ekstrak. Dari hasil analisa DNA, kekerabatan temulawak dari 15 aksesi ini dibagi dalam 3 kelompok. Kelompok 1 terdiri dari satu sampel yaitu sampel Madiun, kelompok 2 terdiri dari 12 sampel dan kelompok 3 terdiri dari dua sampel (sampel Gunungkidul dan Ngaliyah, Semarang). Pada kelompok 2, terlihat similaritas 100% yaitu antara sampel Kalimantan Selatan-Subang, NTT-Jabung Semarang, Gunungkidul 2-Imogiri dan Purworejo-Cileungsi. Pertumbuhan tanaman di lokasi baru (kebun), terlihat aksesi 5 lebih menonjol dibandingkan yang lainnya dan aksesi 9 pertumbuhannya cukup lambat. Kata kunci : Evaluasi, 15 aksesi, temulawak, lingkungan tumbuh, analisa DNA ABSTRACT Evaluation 15 accessions of java turmeric is an activity carried out by means collect 15 accessions of the 6 provinces that subsequently evaluated at the experimental Cicurug. Activities include collecting data of plant growth, geographical conditions of the location data, analysis proximat, GCMS analysis and DNA analysis and then the gingers was collected in the garden KP. Cicurug. The results sawed, from this activities until December, first step, ginger can be delivered from this activity is already collected 26 accessions from six provinces, but only 15 accessions that can be cultivated ex situ in the KP. Cicurug. The rhizome was separated to other experiment to do a series of observations (proximat analysis, GC and HPLC, GCMS, rhizome color, DNA analysis and cultivation). In addition there are 5 accessions originating from NTT questionable purity as wild ginger, but local people believe it is a ginger plant. From the analysis proximat known that accessions originating from NTT Fatumnutun Village has the highest essential oil content (7, 97%), while for the highest starch content (53.61%), derived from Kp. Sido Makmur Village Podorejo Central Java, to the highest xanthorizol content (2, 94%) came from the Village Katogan Gunung Kidul Regency, Yogyakarta and to the highest curcumin
81
Natalini Nova K, dkk.
content (2.24%) came from the village Bajuin Tanah Laut regency of South Kalimantan. From the results of GCMS analysis, seen some of the same chemical components among all accessions, except for accession NTT, containing a chemical component that is high enough, ie, 1-H-3a 0.7-Methanoazulene with levels of 19.37% in 5 μm extract. From the results of DNA analysis, kinship ginger from 15 accessions were divided into 3 groups.Group 1 consisted of single samples such as Madison, group 2 consisted of 12 samples and group 3 consisted of two samples (samples Gunungkidul and Ngaliyah, Semarang). In group 2, ie 100% visible similarity between the samples in South Kalimantan-Subang, NTT-Jabung Semarang, ,Gunungkidul 2-Imogiri and PurworejoCileungsi. Plant growth in the new location (the garden), looks accession 5 more prominent than others and the accession 9 growing quite slowly. Key Word : Evaluation, 15 conditions,
accessions, java turmeric, DNA analysis, geographical
PENDAHULUAN Temulawak tumbuh dan tersebar di seluruh Indonesia, pada lingkungan tumbuh mulai dari dataran rendah, bergelombang, sampai ke dataran tinggi dengan berbeda ragam geologi, tanah dan data iklim, serta perbedaan pola bercocok tanam (Barus et al, 2008). Melihat penyebarannya yang luas, timbul dugaan mengenai kemungkinan adanya variasi geografis (Prana dan Sastrapradja, 1980). Lebih jauh dikatakan bahwa masa dorman pada tumbuhan merupakan suatu usaha penyelamatan atau perlindungan diri terhadap tekanan keadaan lingkungan, misalnya suhu yang ekstrim, kekeringan, dan lain– lain. Di daerah-daerah sub tropik, jenis-jenis Curcuma dilaporkan mengalami masa dorman pada musim dingin, sedangkan di daerah tropika, masa dorman dialami saat musim kemarau. Periode pertumbuhan aktif akan diulang kembali pada awal musim hujan. Dari kenyataan ini dapat disimpulkan bahwa masa dorman tersebut secara langsung atau tidak langsung dipengaruhi oleh kondisi lingkungan yang tidak menguntungkan untuk pertumbuhan (Prana dan Sastrapradja, 1980). Distribusi dan penyebaran C.xanthorriza sangat berkorelasi dengan adanya transmigrasi dari Jawa ke beberapa tempat termasuk ke Bali. Di sisi lain, temulawak merupakan tanaman triploid steril, sehingga sulit bagi pemulia untuk melalukan perbaikan varietas. Ditinjau dari distribusi geografisnya yang luas, maka ada baiknya dilakukan pengumpulan plasma nutfah dari lokasi ekotipe yang berbeda bahkan dari kawasan yang memungkinkan tanaman ini tumbuh dengan baik, sehingga secara tidak langsung akan terungkap apakah faktor ekologi turut berperan bila ditinjau secara genetik (Prana, 2008). Kondisi geografis merupakan salah satu bentuk lingkungan tumbuh setempat yang berpengaruh terhadap produksi dan kandungan dari bahan aktif suatu tanaman. Pada kondisi lahan pasir dengan perlakuan ameliarasi, tanaman empon-empon (kunir putih dan temulawak), dapat tumbuh dengan subur dengan fase vegetatif lebih baik dibandingkan produksinya yang kecil (Martini dan Masyhudi 2007). Menurut Lip Wih et al., (2007), terdapat perbedaan kadar xanthorizol dari bahan baku yang berasal dari daerah yang berbeda (Cilegon, Solo dan Sawangan). Selain lingkungan tumbuh, pada beberapa daerah, penggunaan tanaman temulawak sebagai bahan baku obat juga berbeda, yang mungkin dipengaruhi oleh kondisi lingkungan setempat ataupun karena adanya pembauran antara penduduk asli dengan pendatang. Dari tahun pertama kegiatan ini diharapkan dapat dikumpulkan data-data yang lebih spesifik dari penggunaan temulawak dari 15 lokasi tumbuh. Untuk itu, maka akan dilakukan kegiatan pengumpulan plasma nutfah temulawak, yang pada tahap awal dengan melakukan pengumpulan dari beberapa lokasi di Jawa Barat, Jawa Tengah, Jawa Timur, NTT dan Kalimantan. Sebagai tahap awal evaluasi, akan dianalisa kandungan hara dari lingkungan tumbuh serta mutunya, sehingga didapat data awal kondisi tanaman temulawak dari habitat asli. Untuk melanjutkan proses evaluasi, maka rimpang temulawak ditanam dan diperbanyak untuk dipanen pada dua kali musim tanam, sehingga didapat
82
Evaluasi 15 aksesi temulawak berdasarkan indikator geografis untuk meningkatkan produksi >20%
data kestabilan hasil maupun kandungan bahan aktif (xanthorrizol) dari masing-masing aksesi. Temulawak yang merupakan tanaman dengan istilah wild ginger dan distribusi temulawak yang cukup luas di seluruh Indonesia, maka timbul dugaan mengenai kemungkinan adanya perbedaan produksi dan mutu dari kandungan bahan aktif yang dikaitkan dengan kondisi variasi geografis. Untuk mengetahui adanya perbedaan tersebut, maka dilakukan tahapan kegiatan evaluasi. Di tingkat petani, pada tahun 2007 luas panen temulawak 21.829.256 m2 dengan produksi 40.800.834 kg, menduduki urutan ke-5 setelah jahe, kunyit, kencur, dan lengkuas. Sementara daerah penghasil temulawak terbesar adalah Jawa Timur (27.630.968 kg), diikuti oleh Jawa Tengah (5.747.286 kg), dan DIY (2.389.650 kg). Di luar Jawa, daerah penghasil temulawak terbesar adalah NTT (1.117.789 kg). Walaupun tanaman temulawak sudah tersebar diseluruh kepulauan Indonesia, namun rata-rata produksinya masih rendah 17,3 ton/ha (BPS, 2007; Kemala, et al., 2003). Sebagai pembanding, saat ini Balittro telah memiliki 10 aksesi temulawak yang potensi produksinya 20 – 40 ton/ha, kadar minyak atsiri 6,2 – 10,6%. Dari hasil seleksi didapat 3 nomor yakni Balittro 1, 2 dan 3 dengan kandungan xanthorrizol (dalam ekstrak) masingmasing 2,95%; 2,15%; dan 3,12% dengan kandungan kurkumin 1,72%, 1, 45 dan 1,56% (Rahardjo dan Ajijah, 2003). Evaluasi merupakan kegiatan dalam rangka mengidentifikasi sifat-sifat penting yang bernilai ekonomis atau merupakan penciri dari varietas yang bersangkutan. Karakter yang diamati dapat berupa karakter kualitatif maupun kuantitatif, karakter fisiologis (kandungan kimia tanaman, allelopaty, dll.), marka isoenzim dan Marka molekuler (RAPD, SSR, AFLP, SNP) Keragaman karakter morfologi tanaman mencerminkan perbedaan genetik. Oleh karena itu berdasarkan sifat morfologi dapat digunakan untuk menduga keragaman tanaman. Oleh karena itu, pada tahap awal dari penelitian ini diharapkan didapat informasi dari 15 aksesi temulawak dengan karakter morfologi, dan mutu yang diharapkan menjadi kandidat nomor unggul dengan produksi dan kandungan xanthorrizol tinggi. Tujuan penelitian untuk mendapatkan manfaat tanaman secara etnofarmaka, morfologi di lingkungan tumbuh, analisa tanah dan mutu in situ dari 15 aksesi temulawak. BAHAN DAN METODE Evaluasi 15 aksesi temulawak berdasarkan indikator geografis untuk meningkatkan produktivitas > 20% Waktu dan Bahan Penelitian dilakukan di Kebun Percobaan Cicurug, Sukabumi mulai dari bulan Januari sampai Desember 2010. Bahan tanaman yang digunakan 15 aksesi temulawak, pupuk kandang, Urea, KCl, dan sampel tanah dari 10 lokasi tumbuh temulawak. Metodologi Penelitian dilakukan di kebun Percobaan Cicurug dari bulan Januari sampai dengan Desember 2010. Rimpang temulawak diambil dari 15 lokasi yaitu: Jawa Barat (3 lokasi), Jawa Tengah (2 lokasi), DI Yogyakarta (2 lokasi), Jawa Timur (4 lokasi), Kalimantan Selatan (3 lokasi), Nusa Tenggara Timur ( 2 lokasi). Wawancara dilakukan terhadap penduduk setempat meliputi: cara budidaya dan penggunaannya. Pengamatan dilakukan pada lingkungan tumbuh dan dilakukan pengambilan sampel tanah yang akan dianalisa kandungan unsur hara makro dan mikronya. Rimpang selanjutnya dibawa untuk dianalisa kandungan bahan aktif (xanthorrizol) dan sebagai bahan perbanyakan di Bogor. Rimpang selanjutnya ditanam dan diperbanyak pada plot-plot tanam berukuran 2 x 2,5 m dengan jarak tanam 60 x 50 cm, dengan 20 rumpun per plot tanam dan diulang 3 kali. Sebelum penanaman dilakukan aplikasi pupuk kandang yang diberikan 2 minggu sebelum tanam. Pupuk anorganik diberikan pada saat tanaman, yakni Urea (100 kg/a), SP-36 (200 kg/ha) dan KCl (300 kg/ha). Pengamatan dilakukan meliputi karakter
83
Natalini Nova K, dkk.
morfologi, seperti tinggi tanaman, jumlah anakan, panjang dan lebar daun, ,jumlah daun, warna daun, bobot rimpang. Untuk analisa mutu dilakukan dengan melakukan panen rimpang muda, pada umur 6 bulan. Panen untuk produksi akan dilakukan di tahun 2011. Analisa Sidik Jari berdasar RAPD Bahan yang digunakan adalah 15 aksesi temulawak dari 15 lokasi tumbuh seperti pada kegiatan di atas. Primer RAPD yang akan digunakan sebanyak 15 primer. Bahan tanaman untuk RAPD diisolasi dari daun muda, tunas yang baru tumbuh. Isolasi DNA menggunakan CTAB buffer, sebanyak 0,3 gram dihaluskan dengan mortar pada buffer ekstraksi, kemudian diinkubasi dalam water bath selama 30 menit, dimurnikan dengan chloroform:isoamyl alkohol 24:1, dan diendapkan dalam isopropanol dingin dan dicuci dengan buffer pencuci. Selanjutnya dikeringkan, dan dilarutkan kembali dalam TE buffer dan disimpan pada 4o C sebelum digunakan untuk RAPD. Amplifikasi PCR terdiri dari 20 ul campuran reaksi yang terdiri dari genomic DNA, primer dan taq DNA polimerase kit. Amplifikasi dilakukan pada thermal cycler sebanyak 35 cycle dari (94o C satu menit, 37o C 1 menit dan 72o C 2 menit) selanjutnya diikuti dengan ekstensi pada 72o C selama 4 menit. Hasil amplifikasi dielektroforesis pada 1- 1,5% agarose gel pada TBE buffer. Gel kemudian direndam dalam ethidium bromide dan pita yang terbentuk diamati dibawah UV light. Pita polymorphisme dihitung berdasarkan ada atau tidaknya pita yang terbentuk pada gel hasil elektroforesis. Selanjutnya berdasarkan pola pita yang ada dilakukan analisa gerombol berdasarkan UPGMA menggunakan NTSYSpc, untuk mengetahui kekerabatan antar aksesi plasma nutfah. HASIL DAN PEMBAHASAN Penampilan tanaman di lokasi tumbuh Pertumbuhan tanaman di lokasi cukup bervariatif, pada sebagian lokasi tanaman temulawak daunnya telah luruh, tetapi pada lokasi lain daunnya masih ada, sehingga data ditampilkan berdasarkan kondisi di lingkungan tumbuh (Tabel 1). Performance dari masing-masing rimpang dapat dilihat pada Gambar 1. Tabel 1. Penampilan temulawak di lokasi tumbuh*) No 1
Lokasi Tumbuh Cileungsi-Jabar
TT 181,5
PD 79,2
2
Subang-Jabar
155,7
67,2
3
SumedangJabar Madiun-Jatim
154,1
42,3
115,8
56
4. 5
Trenggalek218,2 Jatim 6 TembalangJateng 7 Suroagung 126,3 Jateng 8 SemanggungJateng 9 NTT 152 Keterangan : *) Hanya beberapa luruh
84
104,8 54,5 -
LD 19, 2 13, 7 14, 4 11, 1 18, 2 -
DB 26,28
JD 8
PR 30,7
LR 15,2
TR 12,5
17,29
7
32,5
17,7
18,2
23,7
4
24,3
12,6
17,4
18,6
6
23,4
7,0
5,7
30,58
4
29,0
5,84
-
-
8,4
15, 7 -
18,45
6
23,1 5 25,5
31,7 7 12,3
10,7
11,4
-
-
28,3
7,5
22,7
71,2 15 27,24 12,4 5,4 9,7 lokasi yang diamati, karena umumnya tanaman sudah
Evaluasi 15 aksesi temulawak berdasarkan indikator geografis untuk meningkatkan produksi >20%
Gambar 1. Penampilan 15 aksesi temulawak yang berhasil dikumpulkan Lingkungan tumbuh Dari hasil survei, diketahui bahwa pada beberapa lokasi tanaman temulawak telah dibudidayakan, seperti di Cileungsi, Subang dan Sumedang (Jawa Barat), Gunung Kidul Jogyakarta, dan di Tembalang-Semarang. Tetapi umumnya ditemukan tumbuh di pekarangan rumah dan tidak terpelihara, seperti yang ditemukan di Jawa Timur dan sebagian daerah Yogyakarta, Kalimantan Selatan dan Nusa Tenggara Timur. Tanaman tumbuh bersama dengan Zingiberaceae lainnya, garut dan tanaman kayu lainnya. Di NTT desa Nunmajo Kecamatan Insana, Timor Timur Utara berada pada ketinggian 441 m dpl, tanaman tumbuh liar di pekarangan rumah dan tercampur dengan kunyit. Saat pengamatan sebagian tanaman daun telah luruh, dan ada beberapa yang masih berdaun dengan kondisi menguning. Di sekitarnya tumbuh tanaman dadap dan jambu. Dari bentuk rimpang, diragukan temulawak, demikian juga saat uji aroma, yang agak menyengat sementara aroma temulawak lebih bersifat langu tanah. Sementara di desa Usapinonot tanaman empon-empon bersama dengan tumbuhan obat lainnya, tumbuh terawat dengan baik. Di desa Fatumnutu Kecamatan Polen Kabupaten Timor Tengah Selatan yang berada pada ketinggian 926m dari permukaan laut, tanaman tumbuh liar. Lokasi ini merupakan dataran tinggi dengan curah hujan yang cukup tinggi sehingga iklimnya
85
Natalini Nova K, dkk.
cenderung basah. Pada saat pengambilan sampel tanah kering, tetapi lubang bekas pengambilan sampel selanjutnya tergenang air. Di desa Naekasa Kecamatan Fasifeto Barat Kabupaten Belu, tanaman tumbuh liar di bawah hutan jati, di sekitar DAS. Di Kelurahan Beirafu Kecamatan Atambua Barat Kabupaten Belu, tanaman tumbuh di pekarangan rumah, di bawah pohon jati, pisang, lamtoro dan dadap. Menurut (Sidik, et al.,1999), temulawak dapat tumbuh di dataran rendah sampai dataran tinggi > 750 m dari permukaan laut, bahkan sampai pada ketinggian 1 800 m dari permukaan laut. Pertumbuhan tanaman juga dipengaruhi oleh faktor lingkungan tumbuh lainnya seperti sinar matahari, besaran serapan sinar matahari oleh tanaman tidak sama setiap saat karena hal ini dipengaruhi oleh curah hujan dan hari hujan setiap tahunnya. Besaran curah hujan dari masing-masing lokasi dapat dilihat pada Tabel Lampiran 2. Mutu tanaman, dipengaruhi oleh lingkungan tumbuh, diantaranya adalah tanah tempat tumbuh. Struktur tanah berbeda pada setiap lokasi, untuk mengetahui jenis dan struktur tanah, maka sampel tanah dibawa untuk dianalisa. Menurut Pusat Penelitian Tanah (1980) klasifikasi pH aktual tanah dari lokasi pengambilan sampel temulawak menunjukkan kondisi yang asam dan netral agak basa (pH > 7). Kandungan bahan organik dalam tanah dan nitrogen merupakan salah satu faktor yang berperan dalam menentukan keberhasilan suatu budidaya pertanian karena bahan organik dan nitrogen dapat meningkatkan kesuburan kimia, fisika maupun biologi tanah. Bahan organik tanah sangat menentukan interaksi antara komponen abiotik dan biotik dalam ekosistem tanah. Sedangkan nitrogen banyak berfungsi untuk memacu pertumbuhan tanaman pada fase vegetatif, serta berperan dalam pembentukan klorofil, asam amino, lemak, enzim, dan persenyawaan lain. Ragam variasi tanah tempat tumbuh temulawak dari beberapa lokasi dapat dilihat pada Tabel Lampiran1. Curah hujan dan hari hujan dapat dilihat pada Tabel Lampiran 2. Analisa Proximat dan kandungan kimia lainnya Hasil analisa proximat yang telah dilakukan untuk mengetahui kadar pati, kandungan minyak atsiri terlihat pada Tabel 2. Temulawak dari Desa Fatumnutun NTT memiliki kadar minyak atsiri yang tinggi, sementara untuk kadar pati tertinggi didapat dari aksesi Kp. Sido Makmur Desa Podorejo Kecamatan Ngaliyan Kabupaten Semarang Jawa Tengah. Tabel 2a. Kandungan minyak atsiri dan pati masing-masing aksesi temulawak. No 1 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10.
86
Keterangan A : Ds Nyamplung Kec. Wanareja Subang-Jabar B : Ds Jungkang Kec Tanjung Medar SumedangJabar C: Kp. Nyunggang Ds. Cipenjo Kec Cileungsi Kab Bogor - Jabar E : Kp. Mojolegi, Ds. Karang Tengah Kec. Imogiri Kab Bantul DI Yogyakarta F : Ds. Katongan Kec. Nglipar. Kab Gunung Kidul, DI Yogyakarta G: Kp. Penggung Ds. Hargorejo Kec Kokap Kab Gn Kidul DI Yogyakarta H : Ds. Prambon Kec Tugu Kab Trenggalek Jatim I : Ds. Kresek Kec . Wungu Kab Madiun Jatim J : Ds. Gemahardjo Kec. Tegalombo, Kab Pacitan, Jatim K : Kp. Margo Utomo, Ds Banyumanik, Kec. Jabungan,
Kadar minyak atsiri (%) 6,09
Kadar pati (%) 45,95 45,02
5,45 45,76 5,09 47,02 5,38 48,64 5,62 48,31 5,03 6,31 5,68 5,50 6,69
42,28 50,31 52,63 51,96
Evaluasi 15 aksesi temulawak berdasarkan indikator geografis untuk meningkatkan produksi >20%
11. 12. 13. 14. 15.
Kab. Semarang Jateng L : Kp. Sido Makmur, Ds Podorejo, Kec. Ngaliyan, Kab. Semarang, Jateng M : Ds. Tembalang, Kec. Bulusan Kab Semarang, Jateng N : Ds. Suko Agung, Kec. Bagelan Kab Purworejo, Jateng U : Ds. Fatumnutu Kec. Polen Kab Timor Tengah Selatan,NTT R : Ds. Bajuin, Kec. Bajuin, Kab Tanah Laut, Kalsel
53,61 5,71 51,16 6,12 49,32 5,62 31,23 7,87 38,56 7,00
Data proximat kadar air, dan lainnya tertera pada Tabel 2b. Tabel 2b. Data kandungan proximat 15 aksesi temulawak No
Aksesi
Kadar air (%)
Kadar abu (%)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
A B C E F G H I J K L M N R U
5,34 8,9 4,8 7,6 5,84 5,09 8,81 7,38 4,78 5,13 5,65 4,8 5,79 6,72 5,69
6,56 4,46 5,59 5,5 6,17 5,78 5,58 5,25 4,34 6,39 6,3 5,96 5,33 4,79 7,68
Kadar abu tak larut asam (%) 0,18 0,58 0,3` 1,14 0 0,14 0,93 0,89 0,65 0,29 0,33 0,2 1 1,18 0,6
Kadar sari Kadar sari dalam air dalam alkohol (%) (%) 12,81 4,17 12,99 5,09 11,35 4,13 11,49 3,32 13,49 3,23 10,11 3,22 12,87 5,77 11,24 4,09 12,43 5,2 10,95 3,23 11,75 2,81 12,75 3,21 14,47 4,81 15,3 7,77 18,24 10,17
Dari hasil analisa GC dan HPLC terlihat bahwa temulawak dari desa Katongan Kec. Nglipar Kab Gunung Kidul Yogyakarta memiliki kadar xanthorrizol tertinggi 2,94 % sementara untuk kadar kurkumin tertinggi didapat pada aksesi Desa Bajuin Kabupaten Tanah Laut Kalimantan Selatan (Tabel 3). Tabel 3. Kandungan xanthorizol dan kurkumin dari masing-masing aksesi temulawak No
Keterangan
1 2.
A : Ds Nyamplung Kec. Wanareja Subang-Jabar B : Ds Jungkang Kec Tanjung Medar SumedangJabar C: Kp. Nyunggang Ds. Cipenjo Kec Cileungsi Kab Bogor - Jabar E : Kp. Mojolegi, Ds. Karang Tengah Kec. Imogiri Kab Bantul DI Yogyakarta F : Ds. Katongan Kec. Nglipar. Kab Gunung Kidul, DI Yogyakarta
3. 4. 5.
Kandungan xanthorrizol (%) 0,86
Kandungan curcumin (%) 1,2 1,65
1,38 1,36 0,76 1,27 0,38 0,95 2,94
87
Natalini Nova K, dkk.
6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14.
G: Kp. Penggung Ds. Hargorejo Kec Kokap Kab Gn Kidul DI Yogyakarta H : Ds. Prambon Kec Tugu Kab Trenggalek Jatim I : Ds. Kresek Kec . Wungu Kab Madiun Jatim J : Ds. Gemahardjo Kec. Tegalombo, Kab Pacitan, Jatim K : Kp. Margo Utomo, Ds Banyumanik, Kec. Jabungan Kab. Semarang Jateng L : Kp. Sido Makmur, Ds Podorejo, Kec. Ngaliyan, Kab. Semarang, Jateng M : Ds. Tembalang, Kec. Bulusan Kab Semarang, Jateng N : Ds. Suko Agung, Kec. Bagelan Kab Purworejo, Jateng R : Ds. Bajuin, Kec. Bajuin, Kab Tanah Laut, Kalsel
1,33 0,78 0,81 0,99
1,54 1,02 0,79
1,31 1,81 0,57 1,32 0,76 1,79 0,83 1,63 1,04 2,24 0,79
15.
U : Ds. FatumnutuKec. Polen Kab Timor Tengah Selatan, NTT
1,91 0,84
Komponen kimia berdasarkan Analisa GCMS Dari hasil analisa GCMS yang dilakukan, terlihat perbedaan kandungan komponen kimianya. Masing-masing aksesi memiliki komponen kimia dengan komposisi yang berbeda. Hal yang menarik, adalah bila dari hasil analisa HPLC, diketahui kandungan xanthorizol tinggi, tetapi dari hasil GCMS, terlihat komposisi xanthorizol justru rendah, demikian sebaliknya. Pada aksesi temulawak dari NTT, ada komponen kimia yang berbeda dengan yang lainnya, yaitu 1-H-3a,7-Methanoazulene dengan kadar 19,37% dalam 5 µm ekstrak (Tabel 4 a - p). Tabel 4a. Komposisi kimia temulawak aksesi A (Subang)*) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 xanthorizol 28,10 2 Unknow from 23,37 3 Ar-curcumene 15,03 4 Germacrone 8,15 Keterangan : Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi Tabel 4b. Komposisi kimia temulawak aksesi B (Sumedang) *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 Unknow from 31,75 2 Ar-curcumene 23,95 3 Phenol, 2,4,5-trimetyl 9,18 4 Germacrone 7,78 5 Germacrone B 4,59 Keterangan : Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi
88
Evaluasi 15 aksesi temulawak berdasarkan indikator geografis untuk meningkatkan produksi >20%
Tabel 4c. Komposisi kimia temulawak aksesi C (Cileungsi) *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 Xanthorizol 25,95 2 Unknow 21,97 3 Ar-curcumene 17,84 4 Germacrone 8,24 5 Epi curzerenone 4,71 6 Germacrone B 3,06 Keterangan : Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi Tabel 4d. Komposisi kimia temulawak aksesi E (Bantul) *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 Xanthorizol 28,34 2 Unknow 21,59 3 Germacrone 8,22 4 Epicurzerenone 4,34 Keterangan : Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang kandungannya tinggi
persentase
Tabel 4e. Komposisi kimia temulawak aksesi F (Nglipar – Gn. Kidul) *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 Phenol 2,4,5,-trimethyl 30,64 2 Unknow from lime oil 22,24 3 Ar-curcumene 15,15 4 Germacrone 8,74 Keterangan : Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi Tabel 4f. Komposisi kimia temulawak aksesi G (Kec Kokap- Gn. Kidul) *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm(%) 1 Xanthorizol 27,60 2 Unknow from lime oil 24,59 3 Ar-curcumene 14,28 4 Germacrone 9,22 Keterangan : Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi Tabel 4g. Komposisi kimia temulawak aksesi H (Trenggalek) *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 Phenol 2,4,5 - trimethyl 28,81 2 Unknow from lime oil 21,03 3 Ar-curmene 15,87 4 Germacrone 9,09 5 Bicyclo (2,2,1) 3,39 Keterangan : Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi
89
Natalini Nova K, dkk.
Tabel 4h. Komposisi kimia temulawak aksesi I (Madiun *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 Unknow from lime oil 21,64 2 Ar-curmene 16,38 3 Germacrone 3,21 Keterangan : Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi Tabel 4i. Komposisi kimia temulawak aksesi J (Pacitan) *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 Phenol, 2,4,5-trymethyl 24,54 2 Unknow from 19,40 3 Germacrone 14,72 4 Ar-curcumene 13,65 5 Epicurzerenone 6,42 Keterangan : Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi Tabel 4j. Komposisi kimia temulawak aksesi K (Banyumanik - Jateng) *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 Phenol 2,4,5 - trymethyl 27,99 2 Unknow from 25,68 3 Ar-curcumene 10,97 4 Germacrone 8,76 5 Bicyclo (2,2,1) 5,11 6 Epicurzerenone 4,17 Keterangan : Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi Tabel 4k. Komposisi kimia temulawak aksesi L (Ngaliyan - Jateng *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm(%) 1 Phenol 2,4,5-trymethyl 32,90 2 Unknow from 23,39 3 Ar-curcumeno 12,87 4 Germacrone 7,55 5 Epicurzerenone 5,86 Keterangan : Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi Tabel 4l. Komposisi kimia temulawak aksesi M (Bulusan - Semarang) *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 Phenol 2,4,5-trimethyl 35,78 2 Alpha cedrene 19,99 3 Ar-curcumene 12,16 4 Germacrone 7,64 5 epicurzerenone 4,55 Keterangan: Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi
90
Evaluasi 15 aksesi temulawak berdasarkan indikator geografis untuk meningkatkan produksi >20%
Tabel 4m. Komposisi kimia temulawak aksesi N (Purworejo) *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 Phenol 2,4,5 trymethyl 32,74 2 Unknow from lime oil 19,30 3 Ar- curcumene 14,03 4 Germacrone 9,43 5 epicurzerenone 4,98 Keterangan: Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi Tabel 4n. Komposisi kimia temulawak aksesi R (Kalimantan Selatan) *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 Unknow from lime oil 21,76 2 Xanthorizol 20,32 3 Germacrone 15,23 4 Ar-curcumene 14,14 5 epicurzerenone 6,40 Keterangan: Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi Tabel 4o. Komposisi kimia temulawak aksesi U (NTT) *) No Komponen kimia Kandungan dalam 5µm (%) 1 Xanthorizol 33,40 2 1H-3a,7-Methanoazulene 19,37 3 Ar-curcumene 15,61 4 Germacrone 8,67 5 Epicurzerenone 4,65 Keterangan: Komponen kimia yang diperlihatkan, hanya yang persentase kandungannya tinggi Kekerabatan tanaman temulawak berdasarkan Analisa DNA Analisa DNA dilakukan dengan menggunakan daun muda dari ke 15 aksesi tanaman setelah ditumbuhkan dahulu di bak semai. Analisa dilakukan menggunakan 5 primer (Tabel 5), dengan pola pita terlihat pada Gambar Lampiran 2.
Tabel 5. Primer yang digunakan untuk dan hasil analisa DNA 15 aksesi temulawak No. 1. 2. 3. 4. 5.
Nama Primer OPC-03 OPB-01 OPD-16 OPE-09 OPF-13
Polimorfisme Polimorfis Monomorfis Polimorfis Polimorfis Polimorfis
Jumlah pita DNA 4-7 2 1-3 2-3 4-6
Dari lima primer RAPD yang digunakan untuk mengamplifikasi 15 sampel Temulawak, terdapat 4 primer (OPC-03, OPD-16, OPE-09 dan OPF-13) menunjukkan adanya polimorfisme dengan jumlah pita DNA antara 1-7 pita. Analisis keragaman genetik di antara 15 sampel Temulawak menggunakan program NTSys 2.1 menunjukkan bahwa terdapat keragaman genetik di antara sampel-sampel tersebut. Pada koefisien 0,93 (93%), 15 sampel Temulawak terbagi menjadi 3 kelompok. Kelompok 1 terdiri dari satu sampel yaitu sampel Madiun, kelompok 2 terdiri dari 12 sampel dan kelompok 3 terdiri dari dua sampel (sampel Gunungkidul dan Ngaliyah, Semarang). Pada kelompok 2, terdapat beberapa sampel yang menunjukkan similaritas 100% yaitu antara sampel
91
Natalini Nova K, dkk.
Kalimantan Selatan-Subang, NTT-Jabung Semarang, Gunungkidul 2-Imogiri dan Purworejo-Cileungsi. Dari hasil analisis juga terlihat bahwa sampel Madiun merupakan temulawak yang mempunyai jarak genetic paling jauh dibandingkan dengan sampelsampel temulawak yang lain. Kluster kekerabatan dapat dilihat pada Gambar 2. tlI tlR tlA tlM tlU tlK tlB tlI
tlH tlG tlE tlN tlC tlJ tlF tlL 0.70
0.77
0.85
0.93
1.00
Coefficient
Gambar 2. Kluster 15 aksesi temulawak menggunakan 5 primer Keterangan: M= 1 Kb ladder A= B= C= D/E= F= G=
Subang Sumedang Cileungsi Imogiri/Bantul Gunungkidul 1 Gunungkidul 2
H =Trenggalek I =Madiun J =Pacitan K=Jabung, Semarang L=Ngaliyah, Semarang M=Bulusan, Semarang N= Purworejo 1
R=Kalimantan Selatan U=NTT
Pertumbuhan tanaman di Kebun Percobaan Rimpang yang dibawa dari lokasi pengamatan, selanjutnya ditanam di kebun percobaan Cicurug. Pertanaman pada bulan pertama memperlihatkan pertumbuhan yang variatif, di mana beberapa aksesi memperlihatkan respon tumbuh yang lambat, tetapi ada juga yang langsung membentuk bunga. Pangkal bunga langsung keluar dari rimpang. Di duga, sumber benih sangat berpengaruh pada pertumbuhan tanaman temulawak,karena sumber bibit menggunakan rimpang induk dan rimpang primer. Bunga muncul dari sumber benih yang berasal dari rimpang induk, sebulan kemudian baru muncul tunas dan pertumbuhan normal (Gambar 3).
92
Evaluasi 15 aksesi temulawak berdasarkan indikator geografis untuk meningkatkan produksi >20%
Gambar 3. Pertumbuhan 15 aksesi temulawak di kebun Cicurug Pertumbuhan ke 15 aksesi tersebut pada umur 3 bulan dapat dilihat pada Tabel 6. Dari data terlihat bahwa dari 15 aksesi, hanya aksesi 9 yang pertumbuhannya masih lambat. Aksesi 9 berasal dari Ngaliyah Jawa Tengah.
93
Natalini Nova K, dkk.
Tabel 6. Pertumbuhan temulawak umur 3 bulan setelah tanaman di kebun Cicurug No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
Nomor aksesi Aksesi 1 Aksesi 2 Aksesi 3 Aksesi 4 Aksesi 5 Aksesi6 Aksesi7 Aksesi8 Aksesi 9 Aksesi 10 Aksesi 11 Aksesi 12 Aksesi 13 Aksesi 14 Aksesi 15
TT 30,62 31,89 37,41 40,37 45,48 27,28 40,50 40,50 37,62 26,68 39,75 36,69 41,30 30,67 23,36
TB 80,16 81,49 96,34 95,03 115,2 60,83 101,76 104,44 26,14 36,60 109,51 94,38 108,06 68,74 50,06
DB 19,78 20,83 23,43 25,63 29,15 18,69 25,03 26,29 20,06 15,59 28,05 25,81 26,86 18,52 14,58
PD1 45,69 44,22 51,55 55,95 67,71 39,64 54,62 54,16 43,47 42,29 57,43 52,61 47,51 43,14 36,10
PD2 42,61 43,75 49,37 50,37 64,41 43,32 51,46 55,75 0 56,60 53,13 49,85 57,11 47,89 29,51
LD1 17,55 19,48 21,04 21,83 20,59 17,78 22,47 23,25 19,40 17,32 21,51 19,62 38,49 18,54 16,20
Tabel 7. Pertumbuhan temulawak umur 4 bulan setelah tanaman di kebun Cicurug No Nomor aksesi TT TB DB PD1 PD2 LD1 1 Aksesi 1 44,64 115,8 25,02 56,46 53,53 19,82 2 Aksesi 2 46,45 120,06 34,99 56,73 52,03 20,22 3 Aksesi 3 49,9 130,53 40,01 64,22 60,32 22,47 4 Aksesi 4 54,27 141,33 39,1 71,17 65,49 22,31 5 Aksesi 5 50,74 139,2 36,02 68,07 64,8 19,94 6 Aksesi6 43,57 112,9 33,37 53,29 44,59 20,06 7 Aksesi7 53,45 138,33 39,58 66,97 61,05 22,12 8 Aksesi8 54,81 140,9 41,97 69,08 65 23,4 9 Aksesi 9 38,95 105,96 29,61 50,42 56,47 20,33 10 Aksesi 10 42,9 112,86 31,46 56,17 56,45 21,20 11 Aksesi 11 53,56 143,36 43,16 67,55 61,2 21,73 12 Aksesi 12 44,45 120,83 37,76 63,80 59,01 20,53 13 Aksesi 13 54,92 141,43 40,53 68,20 61,26 22,04 14 Aksesi 14 45,11 125,7 34,01 55,01 52,57 20,37 15 Aksesi 15 41,34 103,84 31,91 52,57 48,50 19,93
94
LD2 17,69 18,33 20,78 20,65 20,33 17,79 21,85 22,50 0 22,50 20,32 18,94 21,49 19,29 14,80
LD2 19,47 20,10 22,23 22,02 20,23 19,23 22,35 23,46 22,43 21,23 21,89 20,13 22,34 19,55 19,34
TD1 0,280 0,296 0,292 0,287 0,290 0,310 0,330 0,334 0,260 0,900 0,280 0,270 0,250 0,287 0,280
TD1 0,26 0,25 0,23 0,27 0,237 0,26 0,27 0,27 0,24 0,26 0,27 0,24 0,27 0,26 0,27
TD2 0,290 0,310 0,299 0,275 0,290 0,315 0,313 0,331 0 0,240 0,270 0,290 0,290 0,270 0,290
TD2 0,26 0,25 0,227 0,269 0,237 0,26 0,26 0,27 0,25 0,25 0,28 0,24 0,28 0,26 0,26
JD 3,61 2,99 3,16 3,78 6,99 2,29 2,93 2,88 1 1,33 3,08 3,99 3,17 2,47 1,36
JD 6,44 5,99 6,10 6,33 8,77 4,88 5,66 5,77 3,17 3,55 6,66 6,72 6,83 5,2 4,06
JA 1,88 1,33 2 1,71 3,44 1,38 1,71 1,83 1 1,50 1,67 2,16 2,61 1,44 1,25
JA 2,89 2,88 2,88 2,83 4,22 2,44 2,22 2,60 1,87 2,16 2,77 3,11 2,99 2,32 1,87
Evaluasi 15 aksesi temulawak berdasarkan indikator geografis untuk meningkatkan produksi >20%
Selanjutnya pertumbuhan ke 15 aksesi tersebut setelah 4 bulan, dapat dilihat pada Tabel 7. Pada fase ini, aksesi 9 sudah memperlihatkan respon yang cukup baik, dan dapat tumbuh sempurna, tetapi aksesi ini pertumbuhannya tetap lebih lambat dari aksesi lainnya, disusul aksesi 15. Dari 15 aksesi tersebut, aksesi 5 (Trenggalek), memperlihatkan pertumbuhan yang paling menonjol, yang terlihat dari jumlah anakan (4,22) dan jumlah daun (8,77). Data pertanaman hanya dapat diperlihatkan sampai umur 4 bulan, karena masih dalam pertumbuhannya dan diperkirakan panen akan dilakukan tahun depan, tetapi penelitian ini sudah tidak dibiaya. KESIMPULAN Temulawak yang berhasil dikumpulkan ada 26 aksesi dari 6 Propinsi, tetapi hanya 15 aksesi yang dapat dibudidayakan secara ex situ di kebun percobaan Cicurug, karena bahan tanaman tidak mencukupi untuk dilakukannya serangkaian pengamatan (analisa proximat, GC dan HPLC, warna umbi, analisa DNA dan penanaman). Di samping itu ada 5 aksesi yang berasal dari NTT diragukan kemurniannya sebagai temulawak, tetapi masyarakat setempat menyakini tanaman tersebut adalah temulawak. Dari hasil analisa proximat diketahui bahwa aksesi yang berasal dari Desa Fatumnutun NTT memiliki kadar minyak atsiri tertinggi (7, 97%), sementara untuk kadar pati tertinggi (53,61%), berasal dari Kp. Sido Makmur Desa Podorejo Jawa Tengah, Untuk kandungan xanthorizol tertinggi (2, 94%) berasal dari Desa Katogan Kabupaten Gunung Kidul Yogyakarta, dan untuk kandungan kurkumin tertinggi (2,24%) berasal dari desa Bajuin Kabupaten Tanah Laut Kalimantan Selatan. Dari hasil analisa GCMS, terlihat beberapa komponen kimia yang sama antar semua aksesi, kecuali aksesi NTT, mengandung satu komponen kimia yang cukup tinggi, yakni 1-H-3a,7-Methanoazulene dengan kadar 19,37% dalam 5 µm ekstrak. Dari hasil analisa DNA, kekerabatan temulawak dari 15 aksesi ini dibagi dalam 3 kelompok. Kelompok 1 terdiri dari satu sampel yaitu sampel Madiun, kelompok 2 terdiri dari 12 sampel dan kelompok 3 terdiri dari dua sampel (sampel Gunungkidul dan Ngaliyah, Semarang). Pada kelompok 2, terlihat similaritas 100% yaitu antara sampel Kalimantan Selatan-Subang, NTT-Jabung Semarang, Gunungkidul 2-Imogiri dan Purworejo-Cileungsi. Pertumbuhan tanaman di lokasi baru (kebun), terlihat aksesi 5 lebih menonjol dibandingkan yang lainnya dan aksesi 9 pertumbuhannya cukup lambat. Dari hasil yang didapat, dari kegiatan evaluasi sementara telah ada gambar aksesi-aksesi yang akan menjadi kandidat nomor unggulan yang akan diseleksi pada tahap selanjutnya. Disarankan untuk dapat dilanjutkan penelitian pada pemilihan nomor tanaman unggul yang dapat meningkatkan produksi dan pendapatan petani. DAFTAR PUSTAKA Anonymous. 2008. Basis data pertanian, http:www//database deptan go id/bdsp/hasil kom.asp. Downloaded Juli 2008. Badan Pusat Statistik. 2007. “Statistik Tanaman Biofarmaka (Obat-obatan) dan Hias Indonesia”. Badan Pusat Statistik. Jakarta. Hal 1-6. Barus, B. M. Ghumalahadi, A. Sutandi, DI Pradono, ED. Purwakusumah and L.K. Darusman. 2008. Distribution Map of Curcuma xanthorrhiza R. And Its Characteristic in Indonesia. Burkill, I. H. 1935. A Dictionary of the Economic Products of the Malay Peninsula Vol. I. Univ. Press. Oxford – London. Darwati, I. 2010. Seleksi varietas temulawak produksi tinggi (> 25 ton/ha) dan hemat pupuk (20-30%) dan protokol produksi benih dengan kultur jaringan 25% lebih murah dari benih konvensional (Seleksi varietas temulawak produksi tinggi (30 ton/ha) dan hemat pupuk (30%) dan protokol produksi benih dengan kultur
95
Natalini Nova K, dkk.
jaringan murah dengan harga Rp 250,-/benih dengan faktor multiplikasi 625 plantlet per tahun). Proposal Insentif Riset Terapan, 40 hal. (Un-publish). Hanarida, I.S., M hasanah dan H. Kurniawan. Teknik konservasi ex-situ, rejuvenasi, karakterisasi, evaluasi, dokumentasi, dan pemanfaatan plasma nutfah. Makalah disampaikan pada Apresiai Pengelolaan Plasma Nutfah bagi Peneliti di Bogor, 22-24 Sept. 14 hal. Heyne, K.
1987. Tumbuhan Berguna Indonesia jilid III. Jakarta. 1249 – 1852.
Badan Litbang Kehutanan
Lip Wih, W., Anna S. Ranti, H.D. Wardhana, Suryaningsih, D. Gusrizal, R.R. Taryadi, M. A. Iqbal. 2007. Penetapan kadar zat aktif rimpang temulawak (Curcuma xanthorrhiza) dari beberapa daerah di Indonesia. Prosiding Seminar Nasional dan Pameran Pengembangan Teknologi Tanaman Obat dan Aromatik. Bogor, 6 September 2007. Puslitbangbun-Balittro. 266-272. Martín, T., dan M.F. Masyudi. 2007. Potensi pengembangan kunyit putih, temulawak dan melati di lahan pasir pesisir pantai selatan DIY. Prosiding Seminar Nasional dan Pameran Pengembangan Teknologi Tanaman Obat dan Aromatik, 6 September 2007. Buku 1. hal. 169 – 179. Prana, M.S. dan S. Satrapradja. 1980. Temulawak (Curcuma xanthorriza Rox.). Dalam Pengembangan dan Pemanfaatan Obat Bahan Alam. Penyusun Sidik, Moelyono, MW, A. Muhtadi. Penerbit Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phytomedica. 105 h. Prana, M.S. 2008. The biology of Temu Lawak (Curcuma xanthorrhiza Roxb.) Proceedings of The First International Symposium on Temulawak. IPB. P. 151-156. Purnomowati, S dan A. Yoganingrum. 1997. Tinjauan literatur temulawak (Curcuma xanthorriza Roxb.). Pusat Dokumentasi & Informasi Ilmiah LIPI. Dalam Pengembangan dan Pemanfaatan Obat Bahan Alam. Penyusun Sidik, Moelyono, MW, A. Muhtadi. Penerbit Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phytomedica. 44 h. Rahardjo, M dan O.Rostiana. 2004. Standar prosedur operasional budidaya kunyit. Circular no.8. Budidaya jahe, kencur, kunyit dan temulawak. Badan penelitian dan pengembangan pertanian. 47 hal Rahardjo, M. dan N. Ajijah. 2007. Pengaruh pemupukan organik terhadap produksi dan mutu tiga nomor harapan temulawak (Curcuma xanthorriza Roxb.) di Cibinong Bogor. Bul. Litro Vol. XVIII (1): 29-38.
96