1
EKSTRAK FLAVONOID DAUN SALAM (Syzygium polyanthum Wight.) SEBAGAI AGEN PROAPOPTOSIS SEL KHAMIR
AYU ARTHURIA RIZQIYANTI
DEPARTEMEN BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2012
2
ABSTRAK AYU ARTHURIA RIZQIYANTI. Ekstrak Flavonoid Daun Salam (Syzygium polyanthum Wight.) sebagai Agen Proapoptosis Sel Khamir. Dibimbing oleh SULISTIYANI dan SURYANI. Daun salam (Syzygium polyanthum Wight.) mengandung senyawa flavonoid yang memiliki aktivitas antioksidan. Ekstrak flavonoid daun salam diharapkan mampu menginduksi pembentukan koloni petite sel khamir (Saccharomyces cereviceae). Induksi koloni petite merupakan salah satu cara menginduksi apoptosis dalam pengembangan fitofarmaka antikanker. Penelitian bertujuan untuk menguji efektivitas ekstrak flavonoid daun salam dalam menginduksi apoptosis melalui pembentukan koloni petite yang didukung dengan uji fragmentasi DNA. Sel khamir diinkubasi dengan ekstrak flavonoid daun salam, lalu divisualisasi dengan metode cawan sebar. Uji fragmentasi DNA dilakukan dengan metode isolasi DNA dan elektroforesis gel agarosa. Ekstrak kasar flavonoid (F) dan ekstrak flavonoid terfraksinasi (F1) konsentrasi 10 ppm menghasilkan frekuensi petit sebesar 100% dan 98.96%. Fraksi murni flavonoid (F1.5) konsentrasi 0.1 ppm menghasilkan frekuensi petit sebesar 99.125%. Profil elektroforegram pada F dan F1 juga menunjukkan adanya smear tipis sebagai indikasi adanya degradasi DNA. Jumlah koloni petit yang terinduksi oleh F1.5 pada konsentrasi 0.1 ppm (62 koloni) ~43% lebih sedikit daripada jumlah yang diinduksi oleh F(140 koloni) dan F1(146 koloni). Hal tersebut mengindikasikan adanya peningkatan sitotoksisitas dengan bertambahnya kemurnian ekstrak. Kata kunci : apoptosis, fragmentasi DNA, daun salam (Syzygium polyanthum Wight.), kanker, koloni petite.
3
ABSTRACT AYU ARTHURIA RIZQIYANTI. Flavonoid Extract of Salam (Syzygium polyanthum Wight.) Leaves as a Proapoptosis Agent on Yeast Cells. Under the direction of SULISTIYANI and SURYANI Salam (Syzygium polyanthum Wight.) leaves contain flavonoid compounds that have antioxidant activity. Flavonoid extract of salam leaves was expected to induce the formation of petite colony of yeast (Saccharomyces cereviceae) cells. Induction of petite colonies was one of the way to induce apoptosis in the development of anticancer phytopharmaca. This study aimed to test the effectiveness of flavonoid extract of salam leaves in the induction of apoptosis through the formation of petite colonies of yeast cells and DNA fragmentation test. Yeast cells were incubated by flavonoid extract of salam and visualized by spread plate method. DNA fragmentation test was determined through electrophoresis gel agarose method. Crude extract of flavonoid (F) and fractionation flavonoid extract (F1) at concentration of 10 ppm resulted petite frequency of 100% and 98.96%. Pure flavonoid extract (F1.5) at concentration of 0.1 ppm had resulted a petite frequency of 99.125%. Electroforegram profile in F and F1 also showed a thin smear as an indication of DNA degradation. Numbers of petite colonies induced by the concentration of F1.5 at 0.1 ppm (62 colonies) were ~43% less than the amount induced by F (140 colonies) and F1 (146 colonies). This observation indicated an increase cytotoxicity with increasing purity of extract. Keywords : apoptosis, cancer, DNA fragmentation, petite colonies, salam leaves (Syzygium polyanthum Wight.).
4
EKSTRAK FLAVONOID DAUN SALAM (Syzygium polyanthum Wight.) SEBAGAI AGEN PROAPOPTOSIS SEL KHAMIR
AYU ARTHURIA RIZQIYANTI
Skripsi sebagai salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Sains pada Departemen Biokimia
DEPARTEMEN BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2012
5
Judul Skripsi Nama NIM
: Ekstrak Flavonoid Daun Salam (Syzygium polyanthum Wight.) sebagai Agen Proapoptosis Sel Khamir : Ayu Arthuria Rizqiyanti : G84070015
Disetujui Komisi Pembimbing
Dr. Suryani, M. Sc. Anggota
drh. Sulistiyani, M.Sc., PhD. Ketua
Diketahui,
Dr. Ir. I Made Artika, M.App.Sc Ketua Departemen Biokimia
Tanggal Lulus:
6
PRAKATA Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT atas karunia dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian ini dengan baik. Penelitian dengan judul “Ekstrak Flavonoid Daun Salam (Syzygium polyanthum Wight.) sebagai Agen Proapoptosis Sel Khamir”. yang dilaksanakan sejak bulan Mei sampai dengan Januari 2012 di Laboratorium Departemen Biokimia Institut Pertanian Bogor, Bogor. Penulis mengucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu selama kegiatan penelitian ini berlangsung, antara lain drh. Sulistiyani, M.Sc., PhD. selaku pembimbing utama dan Dr. Suryani, M. Sc. selaku pembimbing kedua yang telah memberikan saran, kritik, dan bimbingannya. Penulis juga mengucapkan terima kasih Risqiana Dewi, Ganep Agus Dj., Rezsa Berri, dan Kak Syaefudin sebagai teman satu bimbingan, Muhammad Iqbal, serta segenap staf di Laboratorium Departemen Biokimia Institut Pertanian Bogor atas peran dan kerjasamanya dalam membantu pelaksanaan penelitian ini. Ucapan terima kasih juga penulis tujukan kepada orang tua dan adik atas doa, dukungan, dan bantuan bagi penulis. Penulis berharap penelitian ini bermanfaat baik bagi penulis maupun bagi masyarakat pada umumnya serta semua pihak yang membutuhkan. Bogor, April 2012
Ayu Arthuria R.
x
RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Jakarta, 21 Agustus 1989 dari ayah Nurshokip dan ibu Iftitahul Jannah. Penulis merupakan anak pertama dari dua bersaudara. Pendidikan penulis sejak TK hingga SMA dijalani di Sekolah Mutiara 17 Agustus di Bekasi Utara. Pada tahun 2007, penulis lulus dari SMA Mutiara 17 Agustus dan pada saat yang sama lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI). Penulis memilih mayor Departemen Biokimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Selama mengikuti perkuliahan, penulis aktif dalam beberapa organisasi, diantaranya menjadi Sekretaris Badan Eksekutif Mahasiswa Tingkat Persiapan Bersama pada tahun 2007/2008, Sekretaris Badan Eksekutif Mahasiswa Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam pada tahun 2008/2009, dan Wakil ketua Badan Eksekutif Mahasiswa Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam pada tahun 2009/2010. Penulis juga aktif mengikuti berbagai kompetisi dan mendapatkan penghargaan diantaranya sebagai Juara 3 Lomba Kompetisi Karya Tulis Mahasiswa Nasional INDEX 2010, Juara 2 Lomba Karya Tulis Ilmiah AlQur`an Tingkat Nasional SERUM G IPB (2010), Program Kreativitas Mahasiswa didanai DIKTI bidang Kewirausahaan dengan judul “Martabak Telur Bhineka Tunggal Ika dengan Bahan Dasar Tepung Ubi Jalar (Ipomoea batata L) : Kudapan Sehat, Lezat dan Bergizi (2011), Program Kreativitas Mahasiswa didanai DIKTI bidang Gagasan Tertulis dengan judul, “Optimalisasi peran sel khamir Deinococcus radiodurans sebagai bioremediator pencemaran limbah radioaktif Pembangkit Listrik Tenaga Nuklir” (2011). Selain itu, penulis saat ini juga sedang merintis bisnis dalam bidang kuliner dan konveksi. Tahun 2010 penulis melakukan kegiatan praktik lapang di Laboratorium Teknologi Gen, Balai Pengkajian Bioteknologi, Badan Pengkajian dan Penerapan Teknologi, Komplek PUSPIPTEK, Serpong, Tangerang dengan judul “Isolasi DNA Aglaia”. Penulis juga pernah menjadi asisten praktikum Keteknikan Asam Nukleat pada tahun 2011/2012.
