PERBEDAAN HASIL PEMERIKSAAN JUMLAH RETIKULOSIT METODE MIKROSKOPIS DAN FLOWCYTOMETRI SKRIPSI

1

PERBEDAAN HASIL PEMERIKSAAN JUMLAH RETIKULOSIT METODE MIKROSKOPIS DAN FLOWCYTOMETRI

SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat menyelesaikan Pendidikan Diploma IV Kesehatan Program Studi Analis Kesehatan

Diajukan Oleh : Elisa Liliyani G1C215050

PROGRAM STUDI D IV ANALIS KESEHATAN FAKULTAS ILMU KEPERAWATAN DAN KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SEMARANG 2016

http://lib.unimus.ac.id

2


3


4

PERBEDAAN HASIL PEMERIKSAAN RETIKULOSIT METODE MIKROSKOPIS DAN FLOWCYTOMETRI Elisa Liliyani1, Joko Teguh Isworo2, Tulus Ariyadi3 1 Program Studi D IV Analis Kesehatan Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang, 2 Laboratorium Gizi Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang, 3 Laboratorium Patologi Klinik Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas muhammadiyah Semarang. ABSTRAK Pemeriksaan retikulosit metode mikroskopis dengan pembuatan sediaan basah dan sediaan kering dengan prinsip pewarnaan supravital dan metode flowcytometri dengan prinsip pembacaan ukuran dan flouresen yang dihasilkan dari acridine orange yang mewarnai RNA retikulosit. Tujuan penelitian ini untuk Menganalisis perbedaan jumlah retikulosit dengan metode mikroskopis dan flowcytometri. Desain penelitian yang digunakan penelitian analitik dengan desain cross sectional dimana dilakukan penelitian dengan menghitung jumlah retikulosit dengan metode mikroskopis dan flowcytometri. Analisis data menggunakan uji one-way anova dengan signifikansi 0,05. Hasil penelitian didapatkan rerata hasil pemeriksaan retikulosit metode flowcytometri cenderung lebih tinggi (3.256%) dari pada pemeriksaan metode mikroskopis dengan sediaan basah (2.944 %) dan sediaan kering (2.933%). Simpulan tidak ada perbedaan bermakna antara hasil pemeriksaan jumlah retikulosit metode mikroskopis dan flowcytometri. Kata Kunci : Retikulosit, metode mikroskopis, metode flowcytometri, sediaan basah, sediaan kering.

DIFFERENCE METHOD RETICULOCYTE MICROSCOPIC EXAMINATION RESULTS AND FLOWCYTOMETRI Elisa Liliyani1, JokoTeguh Isworo2, Tulus Ariyadi3 1Program DIV Study Health Analysis of Nursing and Health Sciences Faculty of the University of Muhammadiyah Semarang,


5

2Laboratorium Nutrition and Health Faculty of Nursing, University of Muhammadiyah Semarang,P 3Laboratorium Clinical Pathology, Faculty of Nursing and Health University of Muhammadiyah Semarang. ABSTRACT Microscopic examination of reticulocyte method with the preparation of wet and dry preparation with the principles and methods of coloring Supravital and flowcytometri with the principle of reading the size and fluorescence generated from acridine orange coloring reticulocyte RNA. The purpose of this study to analyze differences in the number of reticulocytes with microscopic methods and flowcytometri. The design study is an analytic study with cross sectional design where research is done by counting the number of reticulocytes with microscopic methods and flowcytometri. Analysis of data using one-way Anova test with 0.05. The results, the mean of the results of reticulocytes flowcytometri methods tend to be higher (3,256%) of the microscopic examination by a wet method (2,944%) and dried preparations (2,933%). Conclusions: No significant difference between the results of the reticulocyte count and flowcytometri microscopic methods. Keywords: Reticulocyte, microscopic methods, methods flowcytometri, wet preparations, dry preparations


6

KATA PENGANTAR


7

Segala puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan segala rahmat, hidayah dan inayah-Nya, Sholawat dan salam kepada junjungan kita Baginda Rasulullah SAW beserta keluarga dan para sahabat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan tugas akhir yang berjudul “Perbedaan Hasil Pemeriksaan Jumlah Retikulosit Metode Mikroskopis dan Flowcytometri”. Penyusunan skripsi ini merupakan salah satu syarat untuk menyelesaikan pendidikan Diploma IV Analis Kesehatan di Universitas Muhammadiyah Semarang 2016. Penulis menyadari bahwa terelesaikannya tugas akhir ini tidak lepas dari bimbingan, dukungan dan bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu pada kesempatan ini, penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih kepada : 1. Joko Teguh Isworo, SKM, M.Kes selaku pembimbing pertama yang telah memberikan

bimbingan,

motivasi,

arahan

dan

dukungan

dalam

penyusunan skripsi ini. 2. Tulus Ariyadi, SKM, MSi selaku pembimbing kedua yang telah memberikan

bimbingan,

motivasi,

arahan

dan

dukungan

dalam

penyusunan skripsi ini. 3. Dra. Sri Sinto Dewi, M.Si. Med selaku ketua program studi DIV Analis Kesehatan Fakultas Ilmu Kesehatan Muhammadiyah Semarang. 4. Seluruh Staf dan Dosen DIV Analis Kesehatan Fakultas Ilmu Kesehatan Muhammadiyah Semarang.


8

5. Kedua Orangtua dan keluarga yang selalu mendukung secara moral, moril dan materi. Terkhusus untuk mama dan papa karena untuk kesekian tahunnya kita selalu LDR hihi… 6. Sahabat seperjuangan “urang ciamis” yaitu Euis Tia Istianah Amd.Ak., Hani Rahayu Amd.Ak., Rinda Nurlela Amd.Ak., Rivana Ariyadi Amd.Ak., dan Yunia Sulistia Amd.Ak. yang selalu ada dalam suka dan duka selama tinggal di Semarang. 7. Tetangga-tetangga terbaik dan terusil “Aspali Group” yang sudah seperti keluarga kedua selama di Semarang. Abdullatif Amd.Ak., Diaman Amd.Ak., Muslimah Syamsyudin Amd.Ak, dan geng tambahan Abdul Wahid Rahman Amd.Ak., Apriyanto Jaya Amd.Ak. yang senantiasa berbagi canda tawa bersama. 8. Muslimah Syamsudin Amd.Ak. sebagai “Sahabat Bulu Hidungku” yang senantiasa menemani “bergosip”. 9. Abdul Wahid Rahman Amd.Ak yang “is the best”. Penulis menyadari masih banyak ketidaksempurnaan dan kekurangan dalam penulisan tugas akhir ini. Kritik dan saran yang membangun. Semoga tugas akhir ini dapat bermanfaat bagi para pembaca.

Semarang,

September 2016 Penyusun

DAFTAR ISI Halaman Halaman Judul................................................................................................ i


9

Halaman Pengesahan..................................................................................... ii Halaman Persetujuan..................................................................................... iii Abstrak............................................................................................................ iv Abstract............................................................................................................. v Surat Pernyataan Originalitas....................................................................... vi Kata Pengantar............................................................................................... vii Daftar Isi.......................................................................................................... ix Daftar Tabel..................................................................................................... xi Daftar Gambar................................................................................................ xii Daftar Lampiran.............................................................................................xiii BAB I PENDAHULUAN............................................................................... 1 1.1 Latar Belakang.................................................................................... 1 1.2 Rumusan Masalah............................................................................... 3 1.3 Tujuan Penelitian................................................................................ 3 1.3.1 Tujuan Umum........................................................................... 3 1.3.2 Tujuan Khusus........................................................................... 3 1.4 Manfaat Penelitian.............................................................................. 4 1.5 Orisinalitas Penelitian......................................................................... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA..................................................................... 6 2.1 Tinjauan Teoritis................................................................................. 6 2.1.1 Pengertian Retikulosit............................................................... 6 2.1.2 Perkembangan dan pemantangan Retikulosit........................... 7 2.1.3 Pewarnaan Retikulosit............................................................... 8 2.1.4 Hitung Retikulosit ....................................................................10 2.1.5 Metode Pemeriksaan.................................................................11 2.1.6 Kelebihan dan Kekurangan Metode Pemeriksaan....................13 2.1.7 Faktor-faktor yang Mempenngaruhi Hitung Retikulosit...........14 2.2 Kerangka Teori...................................................................................15 2.3 Kerangka Konsep...............................................................................16 2.4 Hipotesis.............................................................................................16 BAB III METODE PENELITIAN................................................................17 3.1 Jenis Penelitian...................................................................................17 3.2 Desain Penelitian................................................................................17 3.3 Tempat dan Waktu Penelitian.............................................................17 3.4 Variabel Penelitian..............................................................................17 3.5 Defenisi Operasional..........................................................................18 3.6 Populasi, Sampel, dan Teknik Pengambilan Sampel..........................19 3.7 Alat dan Bahan...................................................................................19 3.8 Prosedur Penelitian.............................................................................20 3.9 Alur Penelitian....................................................................................23 3.10Analisis Data.......................................................................................24 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Penelitian...........................................................................................25 4.2 Pembahasan................................................................................................27 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan...........................................................................................30


10

5.2 Saran.....................................................................................................30 DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN


11

DAFTAR TABEL Halaman 1.

Tabel 1.1 Orisinalitas Penelitian................................................................ 4

2.

Tabel 3.1 Definisi Operasional..................................................................16

3.

Tabel 4.1 Distribusi Hasil Perhitungan Jumlah Retikulosit.......................24


12

DAFTAR GAMBAR Halaman 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

Gambar 2.1. Retikulosit............................................................................. 7 Gambar 2.2. Skema alat Flowcytometer....................................................12 Gambar 2.3. Kerangka Teori......................................................................14 Gambar 2.4. Kerangka Konsep..................................................................14 Gambar 3.1. Alur Penelitian...................................................................... 21 Gambar 4.1. Retikulosit Perbesaran 1000x dalam Sediaan Basah............ 26 Gambar 4.2. Retikulosit Perbesaran 1000x dalam Sediaan Kering........... 26

DAFTAR LAMPIRAN 1. 2. 3. 4. 5.

Data Hasil Penelitian Hasil uji Normalitas Hasil Uji Homogenitas Hasil Uji One-Way Anova Dokumentasi Penelitian


13

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Pemeriksaan laboratorium merupakan salah satu sarana untuk mengetahui serta memonitoring kondisi kesehatan. Salah satu pemeriksaan yang sering dilakukan adalah pemeriksaan hematologi rutin. Pemeriksaan hematologi rutin ini terdiri dari beberapa jenis pemeriksaan, diantaranya sebagai berikut; pemeriksaan hemoglobin, hitung jumlah eritrosit, jumlah trombosit, jumlah lekosit, hitung jenis lekosit, hematokrit, laju endap darah, retikulosit dan pemeriksaan hemostasis (FK UNDIP, 2010).


14

Retikulosit adalah Sel Darah Merah (SDM) yang masih muda yang tidak berinti dan berasal dari proses pematangan normoblas di sumsum tulang. Sel ini mempunyai jaringan organela basofilik yang terdiri dari RNA dan protoforpirin. Jumlah ini penting karena dapat digunakan sebagai indikator produktivitas dan aktivitas eritropoiesis di sumsum tulang dan membantu untuk menentukan klasifikasi

anemia

sebagai

hiperproliferatif,

normoproliferatif,

atau

hipoproliferatif (Ketut Suega, 2011). Pemeriksaan laboratorium untuk memeriksa retikulosit didasarkan pada temuan adanya protein RNA pada sitoplasma dari retikulosit. Sejak tahun 1940 sampai awal 1980 pemeriksaan retikulosit seluruhnya ditentukan dengan pemeriksaan mikroskop pada hapusan darah tepi, dimana retikulosit diwarnai dengan pewarna supravital (Ketut Suega, 2011). Pemeriksaan retikulosit dapat menggunakan dua cara yaitu dengan sediaan basah dan sediaan kering. Untuk sediaan dengan cara basah biasa dipakai dalam pemeriksaan laboratorium rutin karena memiliki keuntungan, yaitu tidak memerlukan waktu yang lama. Sedangkan sediaan kering memiliki keuntungan, yaitu pada proses pembacaan dan perhitungan yang mudah namun memerlukan waktu pemeriksaan yang lebih lama (Subowo, 2002). Sampel darah segar dicampur dengan zat pewarna supravital (New Methylene Blue atau Brilliant Cresyl Blue) dan diinkubasi, kemudian dari campuran ini dibuat sediaan hapus. Hitung retikulosit diperoleh dari jumlah retikulosit yang ditemukan per 1000 eritrosit dari sediaan hapus yang diperiksa dengan mengunakan mikroskop cahaya (Gandasoebrata, 2011).


15

Namun sejak tahun 80an mulai dikembangkan pemeriksaan yang lebih canggih yaitu flowcytometer menggunakan pewarna yang berfluoresensi spesifik dengan RNA. Hingga saat ini, pengukuran dengan metode flowcytometry menggunakan label fluoresensi, selain mengukur jumlah, ukuran sel, juga dapat mendeteksi petanda dinding sel, granula interaselular, struktur intra sitoplasmik dan inti sel (Ketut Suega, 2011). Hasil penetapan retikulosit pada kenyataannya seringkali tidak sesuai dengan gambaran anemia berdasar kriteria klinik dan laboratorik, yang selanjutnya dapat menggangu dalam penentuan diagnosis pasien. Menurut penelitian Yan Hendrika (2011), penampilan diagnostik pemeriksaan retikulosit metode manual 1000 eritrosit memiliki sensitivitas diagnostik 78% dan spesifisitas diagnostik 61%. Adanya nilai pasti dari pemeriksaan retikulosit diharapkan dapat membantu membuat diagnosis

dan menentukan prognosis suatu penyakit

Berdasarkan hal tersebut maka penelitian ini akan membahas mengenai perbedaan hasil pemeriksaan retikulosit metode basah, metode kering dan metode automatik. 1.2 Rumusan Masalah Berdasarkan latar belakang di atas dapat dirumuskan suatu permasalahan, yaitu : “Adakah perbedaan hasil hitung retikulosit antara metode mikroskopis dan flowcytometri ?” 1.3 Tujuan Penelitian


16

1.3.1 Tujuan Umum Mengetahui perbedaan hasil hitung retikulosit dengan menggunakan metode mikroskopis dan flowcytometri. 1.3.2 Tujuan Khusus 1) Menghitung retikulosit dengan metode mikroskopis menggunakan sediaan basah dan sediaan kering. 2) Menghitung retikulosit dengan metode flowcytometri 3) Menganalisis

perbedaan

jumlah

retikulosit

dengan

metode

mikroskopis dan flowcytometri.

1.4 Manfaat Penelitian 1.4.1 Bagi Akademi Menambah perbendaharaan Karya Tulis Ilmiah dan memberikan informasi serta masukan bagi pembaca di perpustakaan Universitas Muhammadiyah Semarang. 1.4.2 Bagi Penulis Dapat menambah pengetahuan tentang darah dan khususnya tentang retikulosit secara umum baik definisi maupun cara pemeriksaan. 1.4.3 Bagi Tenaga Laboratorium Memberikan informasi tentang perbandingan hasil pemeriksaan retikulosit antara metode metode mikroskopis dan flowcytometri.


17

1.5 Orisinalitas Penelitian Tabel 1.1 Orisinalitas Penelitian No

Judul Penelitian

Nama Peneliti/Tahun Yan Hendrika, 2011

Metode Penelitian Jenis penelitian ini adalah penelitian Deskriptif.

Hasil Penelitian

1.

Pemeriksaan Retikulosit Metode Manual pada pengamatan per 1000 Eritrosit dan per 500 Eritrosit Dibanding Metode Automatik

2.

Gambaran Jumlah Retikulosit Sebelum dan Setelah Donor Darah

Yane Liswanti, Firda Nur Arifah, 2015

Jenis penelitian ini adalah deskriptif

Gambaran jumlah retikulosit sebelum dan setelah donor darah di UDD PMI Kabupaten Majalengka didapatkan hasil 100 % mengalami peningkatan retikulosit.

3.

Indeks Produksi Retikulosit pada berbagai Klasifikasi Anemia

Setyawati, Andaru Dahesidewi, Andreas Agung Winarno, 2005

Jenis Penelitian ini adalah analitik

Ada nilai IPR tinggi yang bermakna antara anemia hemolitik dan anemia hipopoliferatif dan gangguan maturasi.

1. Pemeriksaan retikulosit metode manual 500 eritrosit memiliki korelasi yang kuat dengan metode automatik dibanding metode 1000 eritrosit. 2. Penampilan diagnostik pemeriksaan retikulosit metode manual 500 eritrosit yaitu sensitivitas diagnostik 78% dan spesifisitas diagnostik 69%. 3. Penampilan diagnostik pemeriksaan retikulosit metode manual 1000 eritrosit yaitu sensitivitas diagnostik 78% dan spesifisitas diagnostik 61%. 4. Pemeriksaan retikulosit metode manual 500 eritrosit dapat menggantikan Pemeriksaan retikulosit metode manual 1000 eritrosit .

Penelitian ini berbeda dengan penelitian sebelumnya. Penelitian ini akan mengkaji mengenai perbedaan hasil pemeriksaan retikulosit metode mikroskopis dengan sediaan basah dan kering serta metode flowcytometri.


18

BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Tinjauan Teoritis 2.1.1.Pengertian Retikulosit Retikulosit merupakan eritrosit muda yang tidak berinti dan berasal dari proses pematangan normoblas di sumsum tulang. Sel ini mempunyai jaringan organela basofilik yang terdiri dari RNA dan protoforpirin yang dapat berupa endapan berwarna biru apabila dicat dengan pengecatan BCB (Suega, 2010). Retikulosit yang belum matang memiliki benang-benang atau retikulum didalamnya. Sisa RNA tadi akan menghilang dalam 1-2 hari pertama setelah berada diluar sumsum tulang, dan eritrosit yang belum matang kemudian menjadi eritrosit yang matur atau matang (Hiru, 2012).


19

Jumlah retikulosit menggambarkan aktivitas sumsum tulang. Kegiatan sumsum tulang yang meningkat ditandai dengan peningkatan retikulosit, sedangkan penurunan atau tidak adanya retikulosit menunjukkan kegagalan fungsi sumsum tulang (Hiru, 2012). Selain itu jumlah retikulosit juga menggambarkan produksi eritrosit di sumsum tulang yang digunakan untuk mendiagnosis adanya penyakit anemia. Nilai normal retikulosit adalah 0,5-1,5 % dari jumlah eritrosit atau bisa juga ditulis dalam jumlah eritrosit per ul darah (Gandasoebrata, 2011 ).  Ukuran : 8 - 12 mm  Bentuk: bulat  Warna sitoplasma: pucat  Granularitas: granul tunggal atau multipel, pekat, lembayung.  Bentuk inti: tidak ada  Distribusi dalam darah: 0.5 - 1.5 % dari jumlah eritrosit  Pewarnaan: supravital, dengan Cresyl blue  Perbesaran: 1000x

Gambar 2.1. Retikulosit

2.1.2. Perkembangan dan Pematangan Retikulosit Pematangan eritrosit memerlukan waktu beberapa hari untuk sel berisi hemoglobin ini menyingkirkan sisa RNA sitoplasma setelah nukleus dikeluarkan. Fase terakhir pada proses pematangan, retikulosit yang mengandung RNA berukuran sedikit besar daripada sel matang. Sel ini mengandung fragmen mitokondria, organel sel yang lain, dan RNA ribosomal (Sacher, 2004). Eritrosit yang beredar sebagai retikulosit sekitar 0,5-2,5%. Jumlah tersebut menunjukkan aktivitas sumsum tulang yang normal apabila kadar hemoglobin


20

(Hb) normal. Peningkatan hitung retikulosit pada kadar Hb yang normal menunjukkan kerusakan pada eritrosit, tetapi sumsum tulang telah meningkatkan kadar eritrositnya untuk mengompensasi. Sedangkan, pada kadar Hb yang rendah dan retikulosit normal terjadi gangguan atau penurunan produksi sumsum tulang (Sacher, 2004). Tingkatan maturasi pada retikulosit terdapat beberapa tingkatan yaitu dengan adanya rangsangan eritropoiesis seperti pada proses perdarahan atau hemolisis. Jumlah dan proporsi dari retikulosit muda akan meningkat baik didalam sumsum tulang maupun darah tepi. Masa hidup antara retikulosit normal dan imatur terdapat perbedaan. Retikulosit imatur lebih kaku dan tidak stabil karena masih mempunyai reseptor untuk protein adhesif. Sedangkan, retikulosit normal telah kehilangan reseptor ketika sel bermigrasi ke perifer. Waktu pematangan retikulosit sekitar 2-5 jam tergantung pada metode yang dipakai, spesies yang dipelajari, dan juga tingkat stimulasi proses eritropoiesis (Suega, 2010). 2.1.3. Pewarnaan Retikulosit Adanya RNA pada retikulosit hanya dapat dinyatakan untuk eritrosit yang masih hidup. Sedangkan eritrosit yang telah mengering pada kaca objek atau yang telah mati (terlalu lama) tidak dapat dipulas vital (Gandasoebrata, 2011). Apabila sel yang masih hidup tersebut diberi pewarna khusus dengan brilliant cresyl blue yang berguna untuk mengikat ribosom, maka disebut pewarnaan supravital (Subowo, 2002).


21

Retikulosit mengandung sitoplasma yang dapat menyerap pewarnaan tertentu seperti azure B, briliiant cresyl blue, atau new methylene blue. Inkubasi antara darah dan pewarna tersebut dalam keadaan supravital secara mikroskopik akan tampak sebagai presipitat yang berwarna biru tua didalam sitoplasma, baik hanya mengandung beberapa granula maupun sebagai filamen. Filamen terjadi akibat terbentuknya kompleks dye ribonucleoprotein (Rodak & Bell, 2002). Inkubasi antara darah dengan pewarna membantu dalam proses penyerapan, sehingga dalam pewarnaan supravital membuat benang-benang retikulum dalam eritrosit akan terlihat jelas dan mudah dihitung (FK UNDIP, 1995). Pewarnaan retikulosit digunakan larutan pewarna brilliant cresyl blue atau new methylene blue dengan komposisi sebagai berikut : a. Brilliant cresyl blue (BCB) Pewarna brilliant cresyl blue sebagai larutan 1% dalam metilalkohol atau juga sebagai larutan 1% dalam NaCl 0,85%. Pembuatan larutan NaCl perlu dilakukan pemanasan (Gandasoebrata, 2011). b. New methylene blue Pembuatan pewarna new methylene blue, terdiri dari: new methylene blue 0,5 g, NaCl 0,8 g, K-oksalat 1,4 g, dan dilarutkan dalam aquadest 100 ml. Larutan ini digunakan seperti larutan brilliant cresyl blue dalam air garam (Gandasoebrata, 2011).


22

Pengecatan BCB tidak hanya retikulosit yang ditemukan, tetapi ada struktur lain yaitu Badan Hemoglobin H (HbH) dan Badan Heinz. HbH berupa titik-titik yang berwana biru pucat dan ukurannya bervariasi. Badan ini ditemukan pada kebanyakan eritrosit dan ditemukan pada penyakit HbH. Sedangkan, Badan Heinz berupa granula yang berwarna biru ukurannya bervariasi dan eksentrik (dekat membran sel). Badan ini ditemukan pada defisiensi glukosa-6-fosfatase dehidroginase yang disebabkan oleh terapi medikamentosa tertentu (trans. Chairlan & Lestari Estu, 2011).

2.1.4. Hitung retikulosit Saat

ini,

hitung

retikulosit

masih

didasarkan

pada

penilaian

semikuantitatif terhadap sel dengan pewarnaan supravital yang memperlihatkan serat-serat retikulum. Hitung retikulosit metode manual memiliki ketidaktepatan mencapai 25%, hal ini akan berkurang secara signifikan sesuai peningkatan jumlah retikulosit (Bakta, 2006). Prinsip dalam menghitung retikulosit yaitu darah ditambah larutan brilliant cresyl blue dengan perbandingan tertentu selama beberapa menit. Apusan dibuat kemudian retikulosit dilihat dibawah mikroskop dengan perbesaran kuat, prosentase jumlah retikulosit ditentukan terhadap eritrosit (Riswanto, 2013). Pemeriksaan secara mikroskopik menggunakan lensa objektif perbesaran 1000 kali. Kemudian mengamati bagian ujung apusan tempat eritrosit-eritrosit terpisah satu sama lain dan eritrosit akan berwarna biru pucat. Beberapa ahli


23

hematologi menganjurkan agar jumlah retikulosit dilaporkan dalam satuan konsentrasi (jumlah retikulosit per liter darah), sementara beberapa ahli yang lain menganjurkan untuk dilaporkan dalam fraksi jumlahnya (proporsi retikulosit terhadap eritrosit) (trans. Chairlan & Lestari Estu, 2011). Sistem satuan konvesional retikulosit dilaporkan dalam bentuk prosentase, yaitu proporsi dalam angka persen retikulosit terhadap eritrosit (trans. Chairlan & Lestari Estu, 2011). Perhitungan retikulosit dapat dihitung dengan rumus: (jumlah retikulosit / jumlah 1000 eritrosit) x 100% (Gandasoebrata, 2011). Hitung

retikulosit

merupakan

pemeriksaan

untuk

menunjukkan

peningkatan eritropoiesis. Teknik dengan hitung elektronik maka reliabilitas pemeriksaan makin meningkat. Angka normal retikulosit 0,5-1,5 % tetapi angka normal yang lebih teliti adalah 0,3-2,5 % pada pria dan 0,8-4,1 % pada wanita. Peningkatan retikulosit sebanding dengan beratnya proses hemolisis (Bakta, 2006). 2.1.5. Metode pemeriksaan 1. Metode Mikroskopis a. Sediaan Basah Pemeriksaan retikulosit metode basah yaitu dengan meletakkan satu tetes BCB dalam alkohol atau NaCl ditengah-tengah kaca objek. Kemudian, meletakkan satu tetes darah diatas zat warna dan dicampur memakai sudut kaca objek lain. Selanjutnya ditutup dengan deck glass dan diamati pada mikroskop dengan menggunakan minyak imersi (Gandasoebrata, 2011). b. Sediaan Kering


24

Pemeriksaan retikulosit metode kering yaitu mencampurkan darah dan zat warna dengan perbandingan 1:1 didalam tabung kecil. Kemudian diinkubasi selama 5 menit. Setelah itu, campuran tadi diambil setetes untuk dibuat sediaan apus. Lalu diperiksa dibawah mikroskop dengan perbesaran 1000 kali menggunakan minyak imersi (Gandasoebrata, 2011). c. Metode Flowcytometri Berkembangnya zaman sekarang ini mulai digunakan alat otomatis yang menggunakan flowcytometri atau berkas laser yang dibuyarkan oleh RNA residual. Keunggulan metode ini adalah lebih banyak sel yang dihitung sehingga pengukuran kuantitatif retikulosit menjadi lebih akurat (Sacher, 2004).

Gambar 2.2. Skema alat Flowcytometer

Alat ini dapat menilai tingkat maturasi dari retikulosit dengan menghitung fraksi fluoresensi dari retikulosit pada masing-masing regio baik pada fluoresensi rendah, fluoresensi sedang maupun pada intensitas fluoresensi tinggi. Tingkat intensitas fluoresensi dari retikulosit ini secara langsung berkorelasi dengan kuantitas RNA intraseluler dan oleh karenanya dapat mencerminkan fungsi


25

maturitas seluler. Flowcytometry adalah metode pengukuran jumlah (metri) dan sifat-sifat sel (cyto) yang dibungkus oleh aliran cairan (flow) melalui celah sempit yang ditembus oleh seberkas sinar laser (Ketut Suega, 2011). Sampel darah segar ditambahkan bahan pewarna acridine orange, kemudian jumlah retikulosit dihitung dengan alat flowcytometer. Sistem ini dapat diotomatisasi sehingga dapat memeriksa sejumlah sampel persatuan waktu yang relatif lebih singkat. Dengan metode ini retikulosit diidentifikasi sebagai sel yang lebih besar dan mengandung fluoresce karena RNA-nya menyerap acridine orange (Bakta, 2006). Retikulosit muda biasanya dilepaskan selama episode hemolitik, mengandung lebih banyak RNA dan menunjukkan intensitas yang lebih besar daripada

retikulosit

tua.

Perbedaan

intensitas

fluoresen

memungkinkan

perhitungan indeks maturasi lekosit atau fraksi retikulosit imatur (Bakta, 2006). 2.1.6. Kelebihan dan Kekurangan Metode Pemeriksaan 1. Metode Mikroskopis a. Metode Basah Kelebihan metode basah adalah lebih mudah ringkas dan waktu yang diperlukan lebih efisien. Kelemahan metode basah adalah tidak dapat disimpan dengan waktu yang cukup lama dan sel retikulosit bergerak menyebabkaan sel dapat terhitung ulang (Subowo, 2002). b. Metode Kering Kelebihan metode kering yaitu, sediaan dapat disimpan dalam waktu yang cukup lama jika harus dilakukan penundaan pemeriksaan. Kelemahan metode


26

kering adalah pada proses pembuatan sediaan membutuhkan waktu yang cukup lama (Subowo, 2002). 2. Metode Flowcytometri Kelebihan metode automatik yaitu, pemeriksaan dilakukan dengan waktu yang relatif cepat, menggunakan sampel yang sedikit, memiliki hasil yang lebih akurat karena biasanya sudah melalui quality control. Kelemahan metode automatik adalah tidak dapat menghitung sel abnormal karena terkadang ada beberapa sel yang tidak terhitung karena sel tersebut memiliki bentuk yang abnormal (Ketut Suega, 2011). 2.1.7. Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Hitung Retikulosit 1.

Larutan pewarna yang tidak disaring sebelum digunakan menyebabkan pengendapan cat pada sel-sel eritrosit sehingga tampak seperti retikulosit.

2.

Sampel sebelum digunakan tidak dihomogenkan terlebih dahulu.

3.

Menghitung pada area yang padat, dimana penyebaran eritrosit bertumpuktumpuk.

4.

Peningkatan kadar glukosa darah akan mengurangi pewarnaan

5.

Adanya benda inklusi eritrosit, yang mempengaruhi pembacaan retikulosit yaitu : a. Basofilik Stipling b. Howell Jolly body c.

Cincin Cabot

d. Benda Heinz e. Plasmodium


27

(Riswanto, 2013).

2.2. Kerangka Teori

Gambar 2.3. Kerangka Teori

2.3. Kerangka Konsep

Gambar 2.4. Kerangka Konsep

2.4. Hipotesis


28

Ada perbedaan bermakna antara hasil pemeriksaan jumlah retikulosit metode mikroskopis dan flowcytometri. BAB III METODE PENELITIAN 3.1.

Jenis Penelitian Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian analitik.

3.2.

Desain Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian analitik dengan desain cross sectional

dimana dilakukan penelitian dengan menghitung jumlah retikulosit dengan metode mikroskopis dan flowcytometri. 3.3. Tempat dan Waktu Penelitian 3.3.1. Lokasi Penelitian Pelaksanaan penelitian dilakukan di Laboratorium RSUD dr. Soekardjo Kota Tasikmalaya. 3.3.2. Waktu Penelitian Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Agustus 2016. 3.4. Variabel Penelitian 3.4.1. Variabel Bebas Variabel bebas dalam

penelitian ini adalah pemeriksaan

metode mikroskopis dan metode flowcytometri. 3.4.2. Variabel Terikat


retikulosit

29

Variabel terikat dalam penelitian ini adalah pemeriksaan jumlah retikulosit. 3.5. Defenisi Operasional Tabel 3.1 Defenisi Operasional No. 1.

Variabel Jumlah retikulosit

Defenisi Operasional Banyaknya retikulosit yang dihitung dalam per 1000 eritrosit yang dibaca menggunakan mikroskop perbesaran 1000x atau menggunakan hematology analyzer dan dinyatakan dalam satuan persen (%).

Skala Rasio

2.

Metode Mikroskopis

Metode pemeriksaan retikulosit dengan menggunakan cara manual yaitu membuat sediaan basah dan sediaan kering dengan pewarnaan supravital dibaca menggunakan mikroskop pada perbesaran 1000x.

Nominal

3.

Metode Flowcytometri

Metode pemeriksaan retikulosit secara automatik pada alat hematology.

Nominal

3.6. Populasi, Sampel, dan Teknik Pengambilan Sampel 3.6.1. Populasi Populasi dalam penelitian ini adalah pasien pasca transfusi rawat inap di instalasi laboratorium Rumah Sakit Umum dr. Soekardjo kota Tasikmalaya pada bulan Agustus 2016. 3.6.2. Sampel Besar sampel adalah pasien pasca transfusi rawat inap di RSUD dr. Soekardjo. Sampel dalam penelitian ini adalah jumlah Retikulosit Besar sampel dihitung berdasarkan rumus Faderer (Supranto, 2000): (t – 1) (n– 1) ≥ 15: (3 – 1) (n– 1) ≥ 15 (2) (n – 1) ≥ 15


30

2n – 2 ≥ 15 2n ≥ 15 + 2 n= n = 8,5 ≈ 9 keterangan : t = jumlah perlakuan n = jumlah sampel Jadi jumlah sampel penelitian ini adalah sebanyak 9 sampel dengan masing-masing dilakukan pemeriksaan retikulosit metode mikroskopis dan flowcytometri. 3.6.3. Teknik Pengambilan Sampel Teknik pengambilan sampel pada penelitian ini adalah Non Probability Sample yaitu Accidental Sampling. 3.7. Alat dan Bahan 3.7.1. Alat Alat yang digunakan adalah objek glass, pipet tetes, tabung serologi,, spuit, kapas alkohol 70%, pembendung, mikropipet, mikroskop, dan tissue. 3.7.2. Bahan Bahan yang digunakan adalah darah, brilliant cresyl blue, giemsa dan minyak imersi.


31

3.8. Prosedur Penelitian 3.8.1 Tahap pre analitik : Mempersiapan alat-alat dan bahan yang akan digunakan dalam penelitian. a. Persiapan pasien Sebelum melakukan sampling, terlebih dahulu dilakukan pencatatan identitas pasien, kemudian dilanjutkan dengan menginformasikan kepada pasien tentang tujuan, manfaat penelitian, resiko atau ketidak nyamanan dan kerahasiaan data. b. Pengambilan darah vena 1.

Menyiapkan

disposible

syringe

serta

memeriksa

jarum

dan

penutupnya. 2.

Mencari letak vena, lokasi tusukan harus bebas dari luka.

3.

Memasang tourniquet pada lengan atas dan orang yang akan diambil darahnya diminta untuk mengepal dan membuka tangannya berkalikali agar vena terlihat jelas.

4.

Membersihkan tempat yang akan diambil darahnya dengan alkohol 70% dan biarkan hingga kering.

5.

Menegangkan kulit diatas vena itu dengan jari-jari tangan kiri supaya vena tidak bergerak.

6.

Menusukan jarum pada vena dengan posisi sudut 45º dengan posisi lubang jarum mengarah keatas.

7.

Melepas tourniquet dan perlahan-lahan tarik penghisap semprit sampai jumlah darah yang dikehendaki diadapat.


32

8.

Meletakan kapas diatas jarum dan cabutlah disposible syringe.

9.

Meminta kepada pasien supaya tempat tusukan jarum itu ditekan selama beberapa detik dengan kapas alkohol tadi.

10. Menusukkan kedalam tabung EDTA dan biarkan mengalir tanpa di dorong. 11. Mehomogenkan sampel darah secara halus dengan cara membalikan tabung sebanyak 4 sampai 6 kali. 3.8.2. Tahap Analitik a. Pemeriksaan Retikulosit Metode Basah 1.

Meneteskan satu tetes larutan brilliant cresyl blue dalam alkohol pada kaca objek dan biarkan hingga kering.

2.

Meneteskan sampel darah diatas zat warna, kemudian dicampurkan dengan menggunakan ujung kaca objek lain.

3.

Menutup tetes darah dengan kaca penutup; lapisan darah dalam sediaan basah harus benar tipis benar. Biarkan beberapa menit

4.

Melakukan pemeriksaan menggunakan oil imersi serta menentukaan berapa banyak retikulosit yang terlihat per 1000 eritrosit.

b. Pemeriksaan Retikulosit Metode Kering 1.

Memasukkan 0,5 ml sampai 1 ml larutan brilliant cresyl blue kedalam tabung.

2.

Mencampurkan 5 tetes darah dengan larutan tadi dan biarkan selama 5 menit.


33

3.

dari campuran itu diambil setetes untuk membuat sediaan apus seperti biasa yang kemudian dipulas Wright atau Giemsa

4.

Memeriksa menggunakan minyak imersi dan menentukaan berapa banyak retikulosit yang terlihat per 1000 eritrosit.

c. Pemeriksaan Retikulosit Metode Automatik (Hematologi Analyzer MINDRAY BC-5800) a) Power ON a.1.

Menekan tombol power pada posisi “on” di Main

Unit BC 5800 (samping kiri bawah) dan Air Compressor (belakang). a.2.

Menekan tombol “ON/OFF” di bagian depan Main

Unit BC 5800. a.3.

Menunggu sampai inisialisasi alat sesuai (+/- 4 s/d

12 menit). a.4.

Memasukkan User Name “lab” dan password “123”.

b) Menjalankan “control” 1. Dari menu tekan “QC” 2. Tekan “count” 3. Pilih jenis QC yang akan dijadikan “Low”, “Normal”, atau “Hight” (sesuai huruf dibelakang no lot control L, N, H) 4. Pilih no file 1 untuk menjalankan control pakai AL-WB (Autoloard) 5. Pilih no file 2 untuk menjalankan control pakai OV-WB (Open Vial) 6. Jalankan control


34

c) Troubleshooting 1. Apabila TERJADI “error”, periksa& amati status errornya. 2. Apabila indikasi error karena ada salah satu reagent yang habis, segera ganti yang baru. 3. Tekan tombol indikasi error (baris paling atas dilayar monitor ) 4. Tekan “Remove Error” dan tunggu beberapa saat. 5. Tekan”Close” d) Mematiakan Alat 1. Dari menu utama, pilih tombol ON/OF dilayar monitor. 2. Tunggu beberapa saat sampai proses shutdown selesai & layar monitor gelap. 3.8.3 Tahap Post Analitik Melaporkan dan mendokumentasikan hasil pemeriksaan. 3.9. Alur Penelitian


35

Gambar 3.1 Alur Penelitian

3.10. Analisis Data Data yang diperoleh diuji statistik dengan menggunakan One Way Anova dengan tingkat kepercayaan 95% (α=0,05) dan dengan bantuan komputer program SPSS. Sebelum dilakukan uji statistik One Way Anova, terlebih dahulu dilakukan uji normalitas data apakah berdistribusi normal atau tidak berdistribusi normal menggunakan uji Saphiro-wilk pada tingkat kepercayaan 95% (p α=0,05) dan uji homogenitas varians menggunakan uji Levene’s Test. Karena data hasil penelitian berdistribusi normal dan homogen maka dilakukan analisa statistik One Way Anova pada tingkat kepercayaan 95% (p α=0,05) dengan kriteria pembacaan sebagai berikut: Ho = Apabila Probablitas > Pα (0,05), berarti tidak terdapat perbedaan yang bermakna antara hasil pemeriksaan jumlah retikulosit metode mikroskopis dan metode flowcytometri (Hipotesis ditolak). Ha = Apabila Probabilitas < Pα (0,05), berarti ada perbedaan yang bermakna antara hasil pemeriksaan jumlah retikulosit metode mikroskopis dan metode flowcytometri (hipotesis diterima).


36

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Hasil Penelitian Penelitian dilakukan di Rumah Sakit Umum dr. Soekardjo Kota Tasikmalaya. Sampel yang digunakan adalah darah vena dari pasien pasca transfusi sebanyak 9 responden. Data hasil penelitian ini diolah menggunakan program SPSS yang terlebih dahulu dilakukan uji normalitas Saphiro-Wilk kemudian dilanjutkan dengan uji statistik One-way anova karena data terdistribusi normal. 4.1.1. Distribusi Hasil Perhitungan Jumlah Retikulosit Pengolahan data dari hasil penelitian dimulai dengan melakukan deskripsi hasil perhitungan jumlah retikulosit menggunakan metode mikroskopis dan flowcytometri. Tabel 4.1. Distribusi Hasil Perhitungan Jumlah Retikulosit Metode Jumlah Nilai Rerata Std. deviasi Pemeriksaan Sampel Minimum Sediaan Basah 9 2.944 0,4333 2.4 Sediaan kering 9 2.933 0,4123 2.4 Flowcytometri 9 3.256 0,4275 2.8 Keterangan: Satuan : persen (%) Nilai normal : 0.5 - 1.5 %

Nilai Maksimum 3.5 3.7 3.9

Tabel 4.1 dapat dilihat distribusi hasil pemeriksaan jumlah retikulosit terhadap 9 sampel dengan tiga metode pemeriksaan yaitu sediaan basah, sediaan kering dan flowcytometri. Rerata hasil pemeriksaan retikulosit dengan metode flowcytometri cenderung lebih tinggi daripada hasil pemeriksaan dengan metode mikroskopis.


37

4.1.2. Hasil Uji Normalitas Data Hasil uji yang digunakan adalah uji normalitas Saphiro-Wilk. Hasil uji normalitas yang dilakukan terhadap data dinyatakan memiliki distribusi yang normal. Maka pengolahan data dapat dilanjutkan pada uji selanjutnya yaitu uji one-way anova. 4.1.3. Hasil Uji One-Way Anova Uji parametrik One Way Anova dilakukan untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan antara metode mikroskopis dengan sediaan basah dan sediaan kering dan metode flowcytometri. Sebelumnya dilakukan uji Levene yang bertujuan untuk mengetahui apakah data memiliki variansi yang sama sehingga bisa dilanjutkan pada uji berikutnya yaitu uji One Way Anova. Berdasarkan uji homogentitas yang dilakukan didapatkan hasil uji Levene sebesar 0,875 atau >0,05 sehingga data dinyatakan memiliki variansi yang sama (homogen). Hasil uji One-Way Anova sebesar 0,209 yang berarti bahwa nilai probabilitas >0,05. Karena nilai probabilitas lebih besar dari nilai taraf signifikansi (<0,05) maka dapat di simpulkan bahwa H 0 diterima dan H1 ditolak atau tidak terdapat perbedaan antara hasil pemeriksaan jumlah retikulosit metode mikroskopis dan flowcytometri. 4.2. Pembahasan Pemeriksaan

retikulosit

metode

mikroskopis

terdapat

dua

cara

pemeriksaan, meliputi pemeriksaan dengan sediaan basah dan sediaan kering dengan pewarnaan supravital. Zat warna yang digunakan adalah brilliant Cresyl


38

Blue, sitoplasma akan menyerap warna. Inkubasi antara darah dan pewarna tersebut dalam keadaan supravital secara mikroskopik akan tampak sebagai presipitat yang berwarna biru tua didalam sitoplasma, baik hanya mengandung beberapa granula maupun sebagai filamen. Sediaan basah dibuat sediaan dengan cara meneteskan sampel darah diatas larutan pewarna diatas objek glass yang kemudian ditutup oleh deck glass. Kemudian diperiksa dibawah mikroskop dengan perbesaran 1000x dan dihitung dalam 1000 eritrosit.

Gambar 4.1. menunjukan sel retikulosit dalam sediaan basah. Kelemahan sedian basah tidak dapat disimpan dengan waktu yang cukup lama dan sel retikulosit

bergerak

menyebabkaan

sel

dapat

terhitung

ulang

namun

pengerjaannya cepat dan memerlukan waktu yang singkat. Sediaan kering dibuat sediaan dengan cara membuat apusan pada objek glass dan dibiarkan kering. Kedua cara ini sama-sama diperiksa dibawah mikroskop dengan perbesaran 1000x dan dihitung dalam 1000 eritrosit.


39

Gambar 4.2. menujukan sel retikulosit dalam sediaan kering. retikulosit lebih mudah dibaca karena selnya sudah tidak bergerak-gerak seperti pada sediaan basah, namun pengerjaannya memerlukan waktu yang lebih lama. Beberapa kelemahan yang sering dijumpai pada praktek pemeriksaan hitung retikulosit metode mikroskopis adalah waktu dan suhu inkubasi serta mutu reagensia. Pemeriksaan retikulosit dengan metode flowcytometri dilakukan dengan cara otomatis pada alat hematology analyzer. Pada alat, retikulosit diidentifikasi sebagai sel yang lebih besar dan mengandung fluoresen karena RNA-nya menyerap acridine orange. Hasil perhitungan retikulosit dengan metode ini dinyatakan dalam satuan persen (%). Perbedaan hasil pemeriksaan antara metode mikroskopis dan metode flowcytometri, terlihat dari data hasil pemeriksaan. Namun perbedaan tersebut tidak cukup signifikan sehingga pada hasil uji anova dinyatakan tidak terdapat perbedaan yang bermakna. Hasil pemeriksaan retikulosit dengan metode flowcytometri cenderung memiliki rerata yang lebih tinggi dibandingkan dengan


40

metode mikroskopis. Hal tersebut dimungkinkan karena adanya faktor yang mempengaruhi pembacaan alat hematology analyzer karena alat tersebut membaca flouresensi yang dihasilkan oleh RNA yang menyerap acridine orange. Menurut Riswanto (2013) beberapa faktor yang mempengaruhi pembacaan metode flowcytometri adalah adanya benda inkulsi didalam sel darah, misalnya adalah sel Basofilik Stipling, Howell Jolly body, Cincin Cabot, Benda Heinz, Plasmodium. Keuntungan yang diperoleh dari pemeriksaan retikulosit dengan metode automatik flowcytometri adalah dapat membedakan antara retikulosit awal dan lanjut. Retikulosit muda biasanya dilepaskan selama episode hemolitik, mengandung lebih banyak RNA dan menunjukkan intensitas yang lebih besar daripada

retikulosit

tua.

Perbedaan

intensitas

fluoresen

memungkinkan

perhitungan indeks maturasi lekosit atau fraksi retikulosit imatur. Berdasarkan penelitian ini didapatkan hasil bahwa tidak terdapat perbedaan hasil pemeriksaan jumlah retikulosit metode mikroskopis dan flowcytometri. Hal ini terbukti dari hasil uji one-way anova bahwa nilai probabilitas yang didapatkan adalah sebesar 0,209 atau >0,05.


41

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian ini didapatkan simpulan sebagai berikut : 1. Rerata hasil pemeriksaan retikulosit metode flowcytometri cenderung lebih tinggi (3.256%) dari pada pemeriksaan metode mikroskopis dengan sediaan basah (2.944 %) dan sediaan kering (2.933%). 2. Nilai standar deviasi pada metode mikroskopis dan flowcytometri hampir sama yaitu dikisaran 0,4 %. 3. Hasil uji one-way anova menunjukan tidak ada perbedaan bermakna dari hasil pemeriksaan jumlah retikulosit metode mikroskopis dan flowcytometri.

5.2. Saran Berdasarkan penelitian ini diharapkan praktisi laboratorium lebih mengetahui bahwa metode mikroskopis maupun flowcytometri bisa digunakan untuk pemeriksaan retikulosit, tergantung pada kelengkapan alat yang ada di laboratorium.


42

DAFTAR PUSTAKA Bakta, I Made, 2007. Hematologi Klinik Ringkas. Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Bell & Rodak. 2002. Hematology: Clinical Principles and Applications. W. B. Saunders Company, philadelpia. D’Hiru. 2013. Live Blood Analysis. Penerbit PT Gramedia Pustaka Utama, Jakarta. FK UNDIP. 2010. Petunjuk Praktikum Patologi Klinik hematologi. Penerbit Bursa Buku Senat Mahasiswa FK UNDIP. Gandasoebrata, R. 2011. Penuntun laboratorium Klinik. Dian Rakyat. Jakarta Hoffbrand, A.V dan J.E. Pettit, Kapita Selekta Hematologi, Edisi 4, EGC; Jakarta, 2005 PDTDI,

Perhimpunan

Dokter

Transfusi

Darah

Indonesia

2011,

http://www.hello/darah.indonesia.html diakses tanggal 2 September 2016 Riswanto. 2009. Seri Buku Saku Laboratorium Klinik Pemeriksaan Laboratorium Hematologi. Penerbit Alfamedia & Kanal Medika, Yogyakarta. Sacher RA, McPherson RA. 2004. Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan Laboratorium. Edisi 11. EGC. Jakarta Sevilla, Consuelo G. Et. Al. 2007. Research Methods. Rex Printing Company. Quezon City. Subowo. (2002). Histologi umum, edisi ke 2. Penerbit Bumi Aksara, Jakarta. Suega, Ketut. 2010. Aplikasi Klinis Retikulosit.Journal of Internal Medicine : (diakses pada 26 April 2016). Supranto, J. 2000. Statistik Teori dan Aplikasi. Penerbit Erlangga, Jakarta. World Health organization (WHO). Manual of Basic Techniques for a health laboratory. Alih Bahasa : Chairlan., Lestari Estu. Editor Edisi Bahasa Indonesia: Albertus Agung Mahode. 2011. Pedoman teknik Dasar untuk laboratorium kesehatan. Edisi ke 2. Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.


43

LAMPIRAN 6. Data Hasil Penelitian

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.

Sediaan 3.0% 2.7% 2.4% 2.9% 3.5% 2.6% 2.5% 3.4% 3.5%

Metode Pemeriksaan Sediaan Kering 3.1% 2.9% 2.6% 2.5% 3.2% 2.4% 2.8% 3.2% 3.7%

Flowcytometri 3.5% 2.9% 2.8% 3.2% 3.7% 2.8% 2.9% 3.6% 3.9%

7. Hasil uji Normalitas Tests of Normality a

Kolmogorov-Smirnov pemeriksaanre tikulosit Statistic df Sig. metodepemeriksaan 1 .187 9 .200* 2 .148 9 .200* 3 .242 9 .138 a. Lilliefors Significance Correction *. This is a lower bound of the true significance.

8. Hasil Uji Homogenitas Test of Homogeneity of Variances metodepemeriksaan Levene Statistic df1 df2 Sig. .135 2 24 .875

9. Hasil Uji One-Way Anova


Statistic .894 .955 .881

Shapiro-Wilk df 9 9 9

Sig. .219 .746 .162

44

Descriptives Metode pemeriksaan

N

95% Confidence Interval for Mean

Std. Deviation

Mean

Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum

Maximu m

1

9

2.944

.4333

.1444

2.611

3.278

2.4

3.5

2

9

2.933

.4123

.1374

2.616

3.250

2.4

3.7

3

9

3.256

.4275

.1425

2.927

3.584

2.8

3.9

27

3.044

.4353

.0838

2.872

3.217

2.4

3.9

Total

ANOVA Metode pemeriksa an Sum of Squares Between Groups Within Groups Total

10.

Mean Square

df

.602

2

.301

4.324

24

.180

4.927

26

F 1.671

Dokumentasi Penelitian


Sig. .209

45

Alat mikroskop untuk pemeriksaan mikroskopis

Alat Hematology Analyzer untuk pemeriksaan flowcytometri


46

Sampel Penelitian

Reagen BCB

Preparat Pemeriksaan Retikulosit Metode Mikroskopis

Sediaan kering (perb. 1000x)

Sediaan Basah (Perb. 1000x)


PERBEDAAN HASIL PEMERIKSAAN JUMLAH RETIKULOSIT METODE MIKROSKOPIS DAN FLOWCYTOMETRI SKRIPSI

Recommend Documents