ALKOHOL KONCENTRÁCIÓJÁNAK MEGHATÁROZÁSA

Igazságügyi Szakértıi és Kutató Intézetek

Gyıri Intézet

EMBERI EREDETŐ TESTNEDVEK ALKOHOL KONCENTRÁCIÓJÁNAK MEGHATÁROZÁSA

Iktatási szám: ISZV:134/II/A.

Példány sorszáma:


Készítette:

Átvizsgálta:

Jóváhagyta:

sk.

sk.

sk.

Dr. Tardos Károlyné

Dr. Völgyi Antonia

Dr. Tóth Zsuzsanna

laboratóriumvezetıi feladatokkal megbízott igazságügyi vegyészszakértı

minıségirányítási vezetı

igazgató

Kiadás dátuma: 2007.09.01.

Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 1/14


Gyıri Intézet



1.

Cél

Az utasítás célja az ISZKI Gyıri Intézete véralkohol laboratóriumában alkalmazandó emberi eredető testnedvek alkohol koncentrációjának meghatározásához szükséges mérési eljárás leírása, szabályozása. 2.

Alkalmazási terület

Ezt az utasítást alkalmazzuk az ISZKI Gyıri Intézet laboratóriumában, a vér,- vizelet,- és egyéb emberi testnedvek alkohol koncentrációjának meghatározására. Ez az utasítás vonatkozik az ISZKI Gyıri Intézet véralkohol laboratóriumában dolgozó valamennyi munkatársra. 3.

Hivatkozások

Dr. Balla József: A gázkromatográfia analitikai alkalmazásai MSZ EN ISO/IEC 17025 szabvány Alkalmazási útmutató az MSZ EN ISO/IEC 17025 szabványhoz, NAR 20 Országos Igazságügyi Orvostani Intézet 13. számú módszertani levele az alkoholos állapot és alkoholos befolyásoltság orvosszakértıi vizsgálatáról és véleményezésérıl. Népjóléti Közlöny, 1994. nov.30. „Laboratóriumok higiénés rendje” címő fıigazgatói utasítás „Validálás, mérési bizonytalanság” címő igazgatói utasítás „Pipetta kalibrálás” címő fıigazgatói utasítás „HS-GC-FID készülék kezelése” címő igazgatói utasítás 4.

Fogalommeghatározások

MSZ EN ISO/IEC 17025: 2005 szabvány, valamint NAR 20 szerint meghatározva. HS GC FID Alkohol ‰ Vér,vizeletvételi egységdoboz

Vérvételi

Headspace, gıztér mintaadagoló Gázkromatográf A gázkromatográfhoz illesztett lángionizációs detektor. Alkohol kifejezés jelen dokumentumban az etilakoholt/etanolt jelenti. Az „‰” megjelölés jelen dokumentumban az ún. vegyes ezrelék mértéket jelenti, amely valójában „gramm/liter”, illetve „mg/ml” koncentrációt jelöl. A vér- és vizeletvételi egységdoboz az alkoholos befolyásoltság vizsgálatához rendszeresített eszköz (ún. vérdoboz). A mőanyag doboz tartalmazza a vér,illetve vizeletminta levételéhez szükséges vércsövet, a vérvételi jegyzıkönyvet, és az öntapadó címkét az azonosító számmal. A doboz az azonosító adatokkal kitöltött öntapadós címkével zárható. A vérdobozban elhelyezett nyomtatvány, melynek egyik oldalán a rendıri


Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 2/14


Gyıri Intézet



jegyzıkönyv

Liquor Csarnokvíz

intézkedésre vonatkozó adatok, vérvételre kötelezett személy adatai, valamint a vérvételkor felvett orvosi lelet található. A jegyzıkönyv másik oldala az orvosszakértıi vélemény részben elıre nyomtatott szövegét tartalmazza. A vérvételi jegyzıkönyv egyúttal kirendelı határozatnak (megbízás) is minısül. Agy és- gerincvelıi folyadék Szemgolyóban levı folyadék

5. Leírás 5.1. A vizsgálat pontos megnevezése Etanol koncentráció meghatározása emberi eredető testnedvekbıl (vér,- vizelet,- és egyéb emberi testnedvek) HS-GC-FID módszerrel. 5.2. Módszer elve Az alkohol meghatározására olyan módszert választottunk, amely az alkohol illékonyságán alapul. Ez a módszer az ún. headspace-gázkromatográfia, azaz gıztér-analízises gázkromatográfia. A biológiai mintákban lévı vizsgálandó komponens, az etilalkohol, a folyadékfázisbeli koncentrációjával arányosan dúsul fel a minta gızterében, így lehetıvé válik a gıztérben lévı etanol koncentráció mérésével a folyadékfázisbeli koncentráció meghatározása. Az eljárás során a minta gızterében feldúsult etanolt nagyhatékonyságú gázkromatográfiás (HS-GC) elválasztást követıen lángionizációs módszerrel detektáljuk (FID). A mennyiségi elemzést, az etanol folyadékfázisbeli koncentrációjára kalibrált belsı standard módszerrel végezzük, így megbízható, érzékeny meghatározást érünk el. Belsı standardként a t-butanol került kiválasztásra. A t-butanol elıfordulási gyakorisága minimális a vizsgált mintamátrixban, a nemzetközi gyakorlatban is ezt alkalmazzák. 5.3. A vizsgálat tárgyának pontos meghatározása A vizsgálatokat a kirendelı/megkeresı (vevı) által a mintavételi egységdobozban beküldött vizeletvagy vérmintákon, valamint esetenként más biológiai,- mint például liquor és csarnokvíz - mintákon végezzük el. 5.4. Szükséges létszám 1 fı laboratóriumvezetıi feladatokkal megbízott igazságügyi vegyész szakértı, 1 fı technikus


Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 3/14


Gyıri Intézet



5.5. A vizsgálat leírása 5.5.1.

Szükséges anyagok, eszközök pontos leírása

5.5.1.1. Alkalmazott mőszerek • gázkromatográf két kolonnával, két lángionizációs detektorral (FID), spit/splitless injektorral, automata HS-adagolóval (Perkin Elmer Clarus 500 GC gázkromatográf Turbomatrix Headspace Sampler 40 automatikus gıztér mintaadagolóval felszerelve), • a mőszerhez tartozó számítógépes konfiguráció, telepített vezérlı és értékelı szoftverrel, külsı archiválást biztosító egységgel ellátva, • a mőszer biztonságos üzemeltetéséhez szünetmentes tápegység, • gáz-szabályzó rendszer, • analitikai mérleg, 5.5.1.2. Alkalmazott eszközök • mintaadagoláshoz használt 22 ml állandó térfogatú, légmentesen zárható, peremes üvegfiola, • a 22 ml-es üvegfiolához tartozó/illeszkedı üreges dugasz és alumínium kupak, • a fémkupakhoz és az üvegfiolához illeszkedı fiolazáró szerszám, • kalibrált automata pipetták, 200 µl fix és100-1000 µl méréstartománnyal, hozzátartozó egyszer használatos pipetta hegyek, • 500 ml és 1000 ml térfogatú, csiszolatos, „A” jelzéső sorozathitelesített normállombik, • 50 ml-es „A” jelzéső sorozathitelesített kétjelő hasas pipetta 5.5.2.

Alkalmazott referencia anyagok Anyagnév

Koncentráció (g/l)

Gyártó

Tárolás

1.

CER E-040 Ethanol-10

0,10

Cerrilliant

5±3 ºC

2.

CER E-035 Ethanol-25

0,25

Cerrilliant

5±3 ºC

3.

Medidrug Ethanol W

0,50

Medichem

5±3 ºC

4.

Medidrug Ethanol W

1,00

Medichem

5±3 ºC

5.

Medidrug Ethanol W

1,50

Medichem

5±3 ºC

6.

Medidrug Ethanol W

2,00

Medichem

5±3 ºC

7.

Medidrug Ethanol W

3,00

Medichem

5±3 ºC

8.

Medidrug Ethanol W

4,00

Medichem

5±3 ºC

9.

Medidrug Ethanol VB

1,10

Medichem

5±3 ºC

10.

CER A-056 Multikomponent Alkohol Mix

1,00

Cerrilliant

5±3 ºC


Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 4/14


Gyıri Intézet



5.5.3.

Alkalmazott egyéb vegyszerek Anyag

Minıség

Gyártó

1.

tercier-butanol

a.r. ACS, Reag. Ph. Eur

Merck

2.

Desztillált víz

Kromatográfiás minıség

ISZKI BOI DNS Laboratórium

5.5.4.

Alkalmazott oldatok

5.5.4.1.Belsı standard törzsoldat A laboratóriumban készített, 0,1 g/l koncentrációjú tercier-butanol (továbbiakban: t-butanol) vizes oldata. Két lépésben készítjük: elıször 1,00 g/l koncentrációjú oldatot készítünk, majd ebbıl 10-szeres hígítással készül a 0,10 g/l koncentrációjú oldat. 1,00 g/l-es törzsoldat készítése: 1000 ml-es mérılombikot kb. ½-ig töltünk desztillált vízzel, 1,0000 g szobahımérséklető t-butanolt csiszolatos bemérı edénybe analitikai mérlegen bemérünk, maradéktalanul átmossuk a mérılombikba, majd jelig töltjük. Alapos kézi rázás után készítési dátumát és készítıje nevét ráírjuk, hőtıszekrényben tároljuk. 0,10 g/l-es belsı standard oldat készítése: 500 ml-es mérılombikot ½-ig töltünk desztillált vízzel, hozzáadunk 1,00 g/l koncentrációjú t-butanol törzsoldatból 50,00 ml-t kétjelő pipettával kimérve, jelig töltjük a lombikot és alaposan összerázzuk. Készítési dátumát és készítıje nevét ráírjuk, hőtıszekrényben tároljuk. Felhasználás elıtt jól záró 100 ml-es folyadéküvegekbe töltjük, felcímkézzük. 5.5.5. • • •

Alkalmazott gázok Hidrogén 5.0 Nitrogén 4.5 Szintetikus levegı


Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 5/14


Gyıri Intézet



5.5.6. Alkalmazott mérési körülmények HS Termosztálási hımérséklet Termosztálás ideje Injektáló tő hımérséklete Ciklusidı GC Injektor hımérséklet Belépı gáznyomás Áramlási sebesség Oszlophımérséklet Futási idı

Értékek 70oC 15,0 min 75oC 3+1 min.

Oszlop 1: Elite BAC 1 capillar 200oC 20,00 psi 20,0 ml/min. 40oC 3 min

GC Hımérséklet Hidrogén áramlási sebesség Levegı áramlási sebesség Vivıgáz áramlási sebesség

FID 1 150oC 45 ml/min 450 ml/min 20,0 ml/min

Oszlop 2: Elite BAC 2 capillar 200oC 20,00 psi 20,0 ml/min 40oC 3 min FID 2 150oC 45 ml/min 450 ml/min 20 ml/min

5.5.7. A vizsgálat elvégzésének kritériumai A minta elıkészítése megkezdhetı, • ha a minták és a jelen dokumentumban felsorolt, szükséges anyagok rendelkezésre állnak. • ha a laboratórium személyzete és az elıírt védıfelszerelés, védıruha, gumikesztyő biztosítva van, • ha a mérırendszer bekapcsolt állapotban van, a megfelelı (validált, jóváhagyott) módszer be van töltve és a szoftver READY jelzést ad. A mőszereket vezérlı szoftver (kétirányú kommunikációra képes: beállítja a vizsgálathoz szükséges értékeket és kijelzi aktuális állapotát) minden egyes mérés elıtt automatikusan ellenırzi a módszerben lévı paraméterek beállítását, • ha a detektor jel stabil. 5.5.8

A vizsgálat menetének leírása

Az alkohol meghatározását az Clarus 500 GC gázkromatográffal, Turbomatrix HS 40 mintaadagolóval és számítógépes vezérléssel ellátott analitikai mőszerrel végezzük. A mérésre elıkészített mintákat mintatartó tálcákba helyezzük, ettıl kezdve a mőszer programmal vezérelt analízist hajt végre.


Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 6/14


Gyıri Intézet



Az analízis fıbb lépései: A mintatartó tálcából a minta a termosztáló egységbe kerül; az elıírt termosztálási idı leteltével az injektáló fecskendı a minta gızterébıl mintát vesz, és a gázkromatográf injektor terébe fecskendezi; az injektor térbıl a minta a gázáram segítségével végighalad a párhuzamosan csatolt kapilláris oszlopokon, ahol megtörténik a komponensek elválasztása; az oszlopokról egymást követıen kilépı komponenseket lángionizációs detektor érzékeli. A detektorjelet a számítógép a TC Workstation 6.2.1 szoftver segítségével győjti, értékeli és tárolja. 5.5.8.1 A kalibrációs görbe felvétele Új kalibrációs görbe felvétele szükséges: • vizsgálati módszer elindításakor, • új belsı standard oldat készítése és felhasználása estén, • a standard mintára kapott visszanyerés és szórás megváltozásakor, vagy egyéb meghibásodáskor, • A mérırendszer javítása után az új kalibráció felvételérıl a szakértı dönt: mérlegeli, hogy a meghibásodás és/vagy javítás, hatással volt-e az elválasztásra és a mennyiségi értékelésre. A kalibrációhoz minıségi bizonyítvánnyal ellátott vizes etanol standard oldatokat, valamint saját készítéső 0,1 g/l koncentrációjú t-butanol oldatot használunk. A kalibrációs görbét minimum 5 szinten és 5 párhuzamos minta mérésével készítjük. A kalibráló oldatok elıkészítése: a 22 ml térfogatú peremes fiolába 500 µl 0,1 g/l koncentrációjú tbutanol belsı standard oldatot mérünk, majd ehhez adunk 200 µl térfogatú, vizes etanol standard oldatot, ezt követıen az ampullát azonnal ledugaszoljuk és a alu zárókupakot az ampullazáró segítségével rászorítjuk. Az alkalmazott vizes etanol standardok koncentráció tartománya: 0,1 - 4,0 g/l. (Megjegyzés: A kalibrációhoz felhasználható olyan minıségi bizonyítvánnyal ellátott etanol standard is, amely vérben tartalmazza az ismert koncentrációjú etanolt.) A kalibráló minták mérésekor a gázkromatográfiás mérırendszer legyen mérésre kész állapotban, a mérımódszer legyen betöltve, a kezelési utasítás szerint. A kalibrációs mérési sorozathoz elkészítjük a kalibrációs mérıszekvenciát, majd elindítjuk a mérést. A gázkromatográfhoz kifejlesztett szoftver rendelkezik az adatanalízishez szükséges programokkal. A kezelı a kalibrációs programmal a kezelı által kijelölt mérési adatfájlokból elkészíti a kalibrációs táblázatot és a kalibrációs görbét. Lineáris kalibráció kijelölése esetén a program a legkisebb négyzetek módszerével egyenest illeszt a mérési pontokra és meghatározza a regresszió paramétereit. Ha a korrelációs együttható nagyobb, mint 0,99 egyenesnek fogadjuk el a kalibrációs görbét. 5.5.8.2 A minta érkeztetése A minta az Intézetbe vérvételi egységdobozban érkezik futár útján, postán vagy személyes kézbesítéssel. Kiadás dátuma: 2007.09.01.

Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 7/14


Gyıri Intézet



A minta átvételét a laboratórium dolgozói végzik, iktatása a kezelıirodán történik. A futár útján, jegyzékkel ellátott minták esetében a jegyzéken az átvétel tényét dátummal ill. aláírással igazoljuk. A jegyzék a laboratóriumban kerül megırzésre a „FUTÁRJEGYZÉK” feliratú dossziéban. A postai kézbesítéssel érkezett minták esetében az átvétel a postakönyvben követhetı nyomon. Minták személyes kézbesítéssel többnyire egyéni, vagy szerzıdéses vizsgálati igény esetén érkeznek, így ebben az esetben a mintát megrendelı levél kíséri. 5.5.8.3. Minta elıkészítés A mintavételi egységdobozok felbontása a laboratóriumban történik, erre a célra kialakított munkaasztalon, védıruhában, és gumikesztyőben. Az egységdobozból kivesszük a „Vérvételi jegyzıkönyvet” és a mintát. A „Vérvételi jegyzıkönyv”-re a kezelıirodán rápecsételik az Érkeztetı Bélyegzıt és tollal értelemszerően kitöltik a rovatait (érkezési dátum, intézeti iktatószám - OSZ szám). A kibontott vérvételi egységdobozban lévı „Vérvételi jegyzıkönyv” alapján a szükséges adatokat rögzítjük a „Labor Szakértıi Ügykönyv”-ben: laboratóriumi sorszám (laborszám), érkezési dátum, kirendelı hatóság (vevı), intézkedés alá vont személy neve, a vérvételi jegyzıkönyv száma, minta típusa, megjegyzések. A laborszámot rávezetjük a „Vérvételi Jegyzıkönyv”-re. Ellenırizzük a mintavételi csövön és a „Vérvételi Jegyzıkönyvön” levı kódszám azonosságát. Ha bármilyen eltérést találunk, azt feljegyezzük a labornaplóban, és értesítjük a kezelıirodát a szükséges intézkedések megtétele érdekében. Az adatok egyeztetését követıen, ha nincs intézkedésre okot adó eltérés, a vérvételi csövet felcímkézzük a laboratóriumi sorszámmal. A vérvételi csıben lévı mintát (térfogatát, állagát) szemrevételezéssel ellenırizzük, és a labornaplóban dokumentáljuk. Amennyiben a minta a beérkezés napján nem kerül vizsgálatra, a vizsgálat megkezdéséig hőtıszekrényben (5±3ºC) tároljuk. A hőtıszekrények hımérsékletét naponta feljegyezzük a „Hımérséklet ellenırzı lapon” és a „Laboratórium és hőtık hımérséklete” címő naplóba betesszük. A hőtıszekrényben tárolt mintákat a vizsgálat megkezdése elıtt kb. 1 órával kivesszük a hőtıszekrénybıl, hogy szobahımérsékletre melegedjenek fel. A minta elıkészítésének során a kalibrációhoz, és méréshez is mindig ugyanolyan térfogatú mintatartó üveget, és a lezáráshoz azonos paraméterekkel rendelkezı dugót és kupakot alkalmazunk, illetve azonos térfogatú oldatokat mérünk be. A kontroll minták elıkészítése: 22 ml-es HS üvegbe automata pipettákkal 500 µl belsı standard oldatot, azaz 0,1 g/l koncentrációjú t-butanol oldatot és 200 µl etanol standard oldatot mérünk. Az üveget azonnal ledugaszoljuk és a fém zárókupakot a fiolazáró szerszám segítségével rászorítjuk. Spike-olt minta készítése: 22 ml-es HS üvegbe automata pipettákkal 500 µl belsı standard, azaz 0,1 g/l koncentrációjú t-butanol oldatot és (200-X) µl ismert koncentrációjú mintát és (X) µl etanol standard oldatot mérünk. Az üveget azonnal ledugaszoljuk és a fém zárókupakot a fiolazáró szerszám segítségével rászorítjuk.


Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 8/14


Gyıri Intézet



Vakminta készítése: 22 ml-es HS üvegbe automata pipettákkal 700 µl desztillált vizet mérünk. Az üveget azonnal ledugaszoljuk és a fém zárókupakot a fiolazáró szerszám segítségével rászorítjuk. A vizsgálandó minták elıkészítése: a vizsgálandó mintát lezárt állapotban, lassan többszöri átforgatással homogenizáljuk. A homogenizálást lehetıség szerint úgy végezzük, hogy ne keletkezzen buborék. Amennyiben buborékossá vált a minta várunk a buborékosság megszőnéséig. A 22 ml-es HS üvegbe 500 µl t-butanol belsı standard oldatot és 200 µl mintát mérünk (az egyszer használatos pipetta hegyet a vizsgálati mintával elızetesen átöblítjük). Az üveget azonnal ledugaszoljuk és a fém zárókupakot a fiolazáró szerszám segítségével rászorítjuk. Minden vizsgálandó mintából két beméréssel párhuzamost készítünk elı, és a laborszámot ráírjuk a fiolákra. Minden nap kontrollként 3 különbözı koncentrációjú standardoldatot mérünk le. 5.5.8.4. Mőszeres analízis A HS-GC-FID készülék kezelését a „HS-GC-FID készülék kezelése” címő igazgatói utasítás szerint végezzük. A számítógépes mérési sorozat-táblázat (Sequence table) értelemszerő kitöltése után, az elıkészített kontrollokat és mintákat behelyezzük a mintaadagoló megfelelı számú rekeszeibe (vial). Ezt követıen a mérést elindítjuk. Mérési sorozat összeállítása: Row

Number

Inst Method

Proc Method

Calib Method

sorszá m

vials szám

készülékvezérlı utasításokat tart. módszer

adatfeldolgozási utasításokat tart. módszer

kalibrációs adatokat tart. módszer

1

001

c:\penexe\tcws\ \ver 6.2.1

2 3

002 003

Rpt Fmt File Data / Datb kinyomtatandó jelentés formátumát rögzítı file

adat file neve (tartalmazza a minta laborszámát)

Megjegyzések: • minden mérés azonos „jóváhagyott” módszerrel történik • Egy mérési sorozat eredményeit (ééhhnn_x) néven elmentjük, ahol éé: év, hh: hónap, nn: nap, x: az adott napon 1, 2 stb. hányadik sorozat. 5.5.8.5. Értékelés A gázkromatográfiás mérımódszerben beállított paraméterek és a kalibrációs görbe alapján, a kromatogramok felvétele, kiértékelése (azonosítás, integrálás, mennyiségi meghatározás), elmentése és az eredmények kinyomtatása automatikusan történik.


Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 9/14


Gyıri Intézet



A szoftver a belsı standard módszerrel, az alábbi összefüggések alapján számítja ki a minta koncentrációját: A kalibrációs görbe az etanolnak a t-butanolhoz, mint belsı standard anyag csúcsterületéhez, és koncentrációjához viszonyított, „válaszarány vs. mennyiségarány” függvénye. CE= AE/AtB * RFE * CtB * M * D (g/l) RFEk= (CEk/CtBk) / ( AEk/AtBk), a kalibrációs görbe alapján számítja Ahol: CE: a mérendı etanol koncentráció (g/l) CtB: a bemért t-Butanol koncentrációja (g/l) AE: az etanolra mért kromatográfiás csúcsterület (pA*s) AtB: a t-Butanolra mért kromatográfiás csúcsterület (pA*s) RFEk: a kalibrációs görbébıl meghatározott relatív válaszfaktor M: szorzófaktor, esetünkben =1 D: hígítási faktor, esetünkben = 1 A vizsgált minta alkohol tartalmát 2 párhuzamos vizsgálata során kapott 4 vizsgálati eredmény átlagaként adjuk meg (két tizedes jegy pontossággal). Ellenırizzük, hogy az egyes mérési eredmények az átlagérték 5%-án belül esnek-e. A kiszámított átlag koncentrációt átvezetjük a labornaplóba. Archiválás: a hivatkozott rendeleteknek, és ajánlásoknak megfelelıen az analízist követıen a mintákat fél évig hőtıszekrényben 5+3ºC hımérsékleten tároljuk. 5.5.8.6. Az eredmények napi validálása, érvényesítése vagy elutasítása A gázkromatográfiás mérés ellenırzésére minden mérési sorozatban kontrollként 3 standard mintát mérünk le, és eredményeit összevetjük a standard koncentrációjával. A „Validálás, mérési bizonytalanság” címő igazgatói utasítás szerint egy kiválasztott standard mintára kapott eredményt akkor tartunk megfelelınek, ha a visszanyerés (R) 0,95-1,05 közé esik. A kontroll minták szolgálnak a készülékek (HS-GC-FID), mérıeszközök (pipetta), módszer (összes paraméter) egy adott mérési sorozaton belüli közvetett ellenırzésére. A vizsgált minta alkohol tartalmát 2 párhuzamos vizsgálata során kapott 4 vizsgálati eredmény átlagaként adjuk meg (két tizedes jegy pontossággal), ha az eredmények ± 5 % -on belül térnek el az átlagértéktıl. Eltérı esetben újabb mérés végzése ajánlott. Az eredmény megadásánál mérlegelni kell, hogy az átlag számításánál kihagyható-e a kiugró érték. Amennyiben a vizsgált minta esetében a vizsgálat során bármilyen váratlan körülmény merül föl, a vegyészszakértı dönt a további vizsgálatokról. Amennyiben az ellenırzés eredményeként a vegyészszakértı megfelelınek találta az aznapi vizsgálati eredményeket, azt aláírásával igazolja a „Napi összesített vizsgálati eredményközlı ” címő formanyomtatvány megfelelı rovatában. Kiadás dátuma: 2007.09.01.

Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 10/14


Gyıri Intézet



5.5.8.7.Eljárás nem megfelelı eredmény esetén Ha a kontroll minta nem megfelelısége áll fenn, a mérést fel kell függeszteni és azt megfelelı eredményő kontroll vizsgálat után lehet csak folytatni. Ha a 2 bemérésbıl végzett 2-2 párhuzamos kromatográfiás mérési sorozat eredményei az átlagértéktıl 5%-al nagyobb mértékben térnek el, annak leggyakoribb okai: • A két bemérésbıl kapott eredmények térnek el egymástól, de egy bemérésbıl kapott eredmény mindkét oszlopon közel azonosak. A lehetséges ok az, hogy a vérminta bemérése, a minta jellegzetességei miatt a szokásosnál nagyobb szórással történt. Megoldás: újabb bemérés(ek) készítése, és analízis a vizsgálandó mintából. • Az egy bemérésbıl a két oszlopon kapott eredmények eltérése a szokásosnál nagyobb. Feltételezhetı, hogy az etanol és a t-butanol kromatográfiás csúcsa „szennyezıdött”, azaz más komponens is megjelent a kromatogramon. Megoldás: A kérdéses mintából belsı standard nélkül, és belsı standarddal is újabb 2 bemérést, és analízist végzünk. A minták mérése elıtt vakmintával ellenırizzük a kromatográfiás rendszer tisztaságát. A belsı standarddal és az anélkül készült komatogramok összehasonlításával eldöntjük, hogy megjelent-e a mintában olyan szennyezı komponens, amely a belsı standard csúcsot vagy az etanol csúcsot szennyezi. A korrekcióról a vegyészszakértı dönt. • A szekvencia mérés során alkalmazott standard minta alkohol koncentrációjára a referencia értéktıl 5%-nál nagyobb eltérést kapunk. A hiba lehetséges okai: a rendszer szennyezettsége, dugulás, kupak helytelen zárása, bemérés pontatlansága, stb. Feltárásának legfontosabb lépései: mérırendszer beállított és aktuális paramétereinek ellenırzése, a mérı szekvencia táblázat adatainak ellenırzése, vakmintával a mérırendszer tisztaságának ellenırzése, a belsı standard csúcsterület nagyságának vizsgálata (dugulás keresése), újabb bemérésekkel standard-minta mérése, pipetta ellenırzése, vagy cseréje. A felsoroltakon kívül még más lehetséges hiba is elıfordulhat, a vegyészszakértı dönt esetleges meghibásodáskor a szerviz igénybevételének szükségességérıl. 5.5.8.8. Az eredmények megadása, feljegyzés A mérési eredményeket a „Napi összesített vizsgálati eredményközlı ” címő formanyomtatványon adjuk meg és továbbítjuk azt a kezelıirodának a hozzá tartozó vérvételi jegyzıkönyvekkel együtt. 5.5.8.9. Dokumentálás, adatok tárolása • • • •

A mérési eredményekrıl a mérı szekvencia lefutása után összesítı riportot készítünk, és nyomtatunk ki. A kinyomtatott dokumentumokat lefőzve, dátumozva irattárazzuk a „Napi összesített vizsgálati eredményközlı ” címő formanyomtatvány másolatával együtt. A mérési adatokat a nap végén külsı adatarchiváló eszközön (2-Bay USB 2.0 MODEL:RSM2UF) is archiváljuk, félévente CD-re írjuk, és elkülönített helyen tároljuk. A beérkezı mintákról Labor Szakértıi Ügykönyvet, labornaplót vezetünk és ezt is irattárazzuk. Az alkalmazott pipetták, hımérık kalibrálási bizonyítványok másolatait kalibrálási naplóban győjtjük. Kiadás dátuma: 2007.09.01.

Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 11/14


Gyıri Intézet



5.5.9. Hulladékkezelés A vizsgálat befejezése után a minta maradékát további ellenırzésre alkalmas (laborszám feltüntetése) módon 5+3oC-on hőtıszekrényben tároljuk az elıírt 6 hónapos idıtartamig. A tárolási idıtartam lejárta után a mintákat veszélyes hulladékként kezeljük és a „Laboratóriumok higiénés rendje” címő fıigazgatói utasítás szerint megsemmisítjük. A minta mérése során keletkezı hulladék (pipettahegy, papírvatta, gumikesztyő, stb.) valamint a minta vizsgálata után a méréshez alkalmazott ampulla veszélyes hulladéknak minısül. Győjtése hőtıben, elkülönítetten, kizárólag erre a célra szolgáló hulladéktároló edényben történik. Megsemmisítésre történı elszállítása havi rendszerességgel történik. 5.6. A vizsgálati módszer validálása, mérési bizonytalanság becslése A vizsgálati módszert a „Validálás és mérési bizonytalanság” címő igazgatói utasításban foglaltak szerint hitelesítjük, ezek adatait a „Validálási napló” címő dokumentumban helyezzük el. 6.

Mellékletek

1 sz. melléklet:Vérvételi jegyzıkönyv 7.

Hivatkozott feljegyzések

Validálási napló Kalibrálási napló Pipetta kalibrálási bizonyítvány Hımérı kalibrálási bizonyítvány „Hımérséklet ellenırzı lap” „Napi összesített vizsgálati eredményközlı ” címő formanyomtatvány „Laboratórium és hőtık hımérséklete” címő napló 8.

Módosításokok nyilvántartása Módosítás

Sorszám 0

Dátum 2007.09.01.

Kiadás száma 1.


Leírása, jellege Elsı jóváhagyott kiadás

Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 12/14


Gyıri Intézet



1. sz melléklet Vérvételi jegyzıkönyv 1. oldal


Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 13/14


Gyıri Intézet



Vérvételi jegyzıkönyv 2. oldal


Kiadás száma: 1.

Oldalszám: 14/14

ALKOHOL KONCENTRÁCIÓJÁNAK MEGHATÁROZÁSA

Recommend Documents