BAB II TINJAUAN PUSTAKA. Vitamin C tersebar luas dalam hewan dan tumbuh- Dalam jaringan hewan kadar tertinggi ditemukan

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

1. Tinjauan tentang Vitamin C 1.1. Sumber Vitamin C Vitamin C tersebar luas dalam hewan dan an.

Dalam jaringan hewan kadar

dalam

korteks

tumbuhan semua

adrenal, lensa mata dan

vitamin C dibentuk secara

organ

paling

tertinggi

tumbuh. Kandungan

ditemukan

hati.

Dalam

sinambung

dalam

hijau dan berlimpah dalam

aktif

tumbuh-

daerah

terbesar

yang

ditemukan

dalam kulit buah dan dalam beberapa daun lebih banyak daripada dalam batang [11]. Kadar vitamin C bervariasi dalam jaringan tumbuhan [13]. Dalam

makanan kadar vitamin C ditemukan

sedikit. dalam ikan, daging, susu yang dan

telur,

kering

bertunas. kondisi

dipasteurisasi

sama sekali tidak ada dalam

dan

juga Kadar

butir padi vitamin

pertumbuhan

kecuali

dalam

butir

padi

mereka

makanan

tanaman, maturasi

sangat

telah

tergantung tanaman

perlakuan terhadap bahan-bahan tanaman setelah

dan sele-

sai panen [13]. Beberapa

sumber

vitamin C yang

cukup

penting

dapat dilihat dalam tabel I [10, 13].

6

SKRIPSI

PENGARUH PEMBERIAN VITAMIN C ...

JEMY TANDRA


7

Tabel I. Kadar vitamin C dalam mg/100 g bahan

SKRIPSI

No

Nama Bahan

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 2627. 28. 29. 30. 31. 32

Jambu biji (guava) Daun singkong Buah jeruk (citrus fruit) Black current Jambu monyet Paterseli/daun sup Daun melinjo Cabe (green pepper) Brokoli Daun lobak Sawi Tomat Squash (semacam labu) Mangga muda Bayam Pepaya Kentang Kol Arbei Rambutan Selada Mangga Daun kacang , Daun kecipir Nanas Pala Sirsak Sawo Kacang buncis ASI Pisang ambon Susu sapi


Kadar dalam mg

.

300 275 220 200 197 190 182 120 113 109 102 100 90 89 80 78 73 69 60 58 50 30 29 29 24 22 22 21 19 5 3 2

JEMY TANDRA


8

1.2. Sifat Fisika Kimia Vitamin C

Vitamin

C

adalah sinonim dari

asam

askorbat.

Asam askorbat merupakan serbuk kristal, tidak berwarna

atau putih atau kuning pucat, tidak

berbau

atau

hampir tidak berbau, rasa asam [14]. Asam askorbat mempunyai dua bentuk isomer, yaitu isomer ini

L dan isomer D. Bentuk alamiah

adalah

isomer

L.

Isomer

D

dari

vitamin

aktivitasnya

10%

isomer L [15]. Asam

askorbat

merupakan

bentuk

enol

dari

3-okso-L-gulofuranolakton [14]. Struktur molekul asam askorbat atau vitamin C adalah sebagai berikut [13]: O C

I

HO

- c

HO

- c

H

- c

0

II I

HO - C - H CHoOH

Asam L-askorbat

Nama kimia

:

2,3-Didehidro-L-threo-heksono1,4-lakton.

SKRIPSI

Rumus molekul :

CgHg °6 ■

Berat molekul :

176,1.


JEMY TANDRA


9

Kelarutan : larut dalam 3-3,5 25

bagian

bagian air, dalam

alkohol

dan

dalam

bagian metanol; Larut dalam Praktis

tidak

larut

10

aseton;

dalam

eter,

kloroform dan petroleum eter [14]. pH : 2,0 padgi kadar 50 mg/ml [13] Nilai pK pada 25°C [15] : pK1 =4,04 pK2 =11,4 1.3. Stabilitas Vitamin C

Kristal kering dalam

asam askorbat stabil

dan

temperatur kamar [13].

bentuk

padat, dalam

bentuk

dalam

lingkungan

Walaupun

stabil

larutan

relatif

cepat teroksidasi menjadi asam dehidroaskorbat Larutan

asam askorbat dalam air pH S 7,6

[16].

tidak

oksidasi oleh udara asal tidak ada tembaga dan

dibahan

lain yang dapat mengkatalisa reaksi [13]. Reaksi

yang penting untuk asam askorbat

adalah

sebagai berikut [13, 16]:

SKRIPSI


JEMY TANDRA


10

Q = C ----— CJ II o

I HO - C 0

Ii

- 2H+ ----- » + 2H+

I

0 ----------- >

I 0 = C

4-----

HO - C

H - C ------

t----------- 2H20

i C

H

1 HO - C - OH

+ 2H^0

0

1 HO - c - OH 1

H

- r.

I HO - C - H

HO - C - H

HO - C - H

I CH'jQH

CHoOH

I CHoGH

Asam a sk o rb a t

I

Asam d e h id ro a sk o rb a t

Asam d e h id ro a sk o rb a t

(ben tuk h id r a t )

(bentuk keton)

Asam askorbat sangat peka terhadap berbagai cara degradasi.

Faktor-faktor

yang

dapat

mempengaruhi

degradasi antara lain temperatur, enzim,

pH, katalis

logam, kadar awal asam askorbat dan rasio asam askor bat menjadi asam dehidroaskorbat [15]. 1.4. Vitamin C dalam Tubuh Peran

vitamin

C dalam nutrisi

telah

dikarak-

terisasi dengan baik. Vitamin C penting dalam nutrisi manusia

karena

ia menjaga

bahan-bahan

semen

terletak antara sel-sel jaringan tubuh dalam

yang

kondisi

baik. Sebagai hasil dari aksi ini, vitamin C mencegah perdarahan beberapa

dan sakit gusi, hemorrhage bentuk anemia. Vitamin C

jaringan

membantu

bangan struktur tulang yang baik, kalsifikasi

dan

perkemnormal

dan sifat otot [16].

SKRIPSI


JEMY TANDRA


11

Setelah dengan

pemberian oral, vitamin

cepat.

menurun

Bagian

dengan

dosis

meningkatnya

C

diabsorbsi

terabsorbsi dosis.

cenderung

Didistribusi

secara luas dalam jaringan tubuh. Kadar dalam lekosit dan

platelet lebih tinggi daripada

dalam

eritrosit

dan plasma. Asam askorbat dimetabolisme menjadi

asam.

dehidroaskorbat, asam 2,3-diketogulonat, oksalat karbon

dioksida.

Terjadi sedikit

sulfat

membentuk

askorbat-3-sulfat.

melebihi

kebutuhan

konjugasi

tubuh dieliminasi

Asam

dan

dengan askorbat

dengan

dalam urin. Kurang lebih 85% dosis intravena

cepat diberi

kan pada subyek yang belum tersaturasi dengan vitamin ini diekskresi dalam urin dalam 24 jam, dengan kurang lebih

70% dari dosis diekskresi dalam

bentuk

tidak

berubah dan 15% sebagai asam dehidroaskorbat dan asam diketogulonat.

Jumlah

normal yang ada

dalam

tubuh

melebihi 1,5 g. Kadar dalam plasma dan lekosit secara normal kurang lebih 5-12 ug/ml dan 25-30 ug/10® Berikatan

dengan

protein plasma

kurang

lebih

sel. 25%

[17 3. 2. Tinjauan tentang Kolesterol 2.1. Sifat Fisika Kimia Kolesterol

Kolesterol

merupakan sterol penting yang

dipelajari selama kan

serbuk

atau

bertahun-tahun. Kolesterol merupagranul halus, warna

putih

kekuningan, hampir tidak berbau, praktis tidak

SKRIPSI

telah


atau larut

JEMY TANDRA

Iv; A

1


FbKi t S 'l A U A N

"UNIVEKS u AS AJRl-A^GOA"

S U H •* t> dalam alkohol

air,

perlahan-lahan larut

12

* *

dalam

100

dan dalam 50 bagian dehidrat alkohol,

dalam aseton, kloroform, dioksan, eter, etil

bagian larut asetat,

petroleum eter, dan minyak tumbuhan (14). Rumus bangun kolesterol adalah sebagai berikut:

H

BM = 386,7 Kolesterol memberikan sejumlah reaksi warna yang karakteristik, antara lain dengan reaksi

Liebermann-

Burchard, di mana larutan kolesterol dalam dengan

penambahan asetat anhidrida dan

pekat akan memberikan hijau.

Intensitas

warna

hijau

warna yang

kloroform

asam

sulfat

kebiruan

sampai

diperoleh

bervariasi

sesuai dengan jumlah kolesterol yang ada, oleh karena itu

reaksi

tatif.

SKRIPSI

ini merupakan dasar perhitungan

Reaksi

warna yang lain


dikembangkan

kuantioleh

JEMY TANDRA


13

Salkowski, dengan

yaitu

larutan kolesterol dalam kloroform

penambahan asam sulfat pekat akan

memberikan

warna merah kebiruan sampai violet [18]. 2.2. Kolesterol dalam Tubuh Bagian

terbesar kolesterol dalam tubuh

berasal

dari biosintesis yaitu sekitar 1 gram/hari, dan hanya sekitar

dari

makanan

(diet) biasa. Sebenarnya semua jaringan yang

mengan-

dung

0,3

gram/hari

yang

sel berinti mampu mensintesis kolesterol,

utama hepar, korteks dan

LDL

plasma

dan

yang terus-menerus pada

kadar

manusia

terutama

sedikit dalam HDL

populasi orang Amerika

kira

bertang-

biosintesis kolesterol [6].

Kolesterol dalam

ter-

adrenalis, Jrulit, usus, testis,

aorta. Fraksi mikrosom dan sitosol sel

gungjawab untuk

180

berasal

usia

kolesterol

dan

VLDL.

terdapat kenaikan

sampai tercapai

mg/dl. Setelah usia

rata-rata 25

Dalam

kolesterol

maksimum,

55-60 tahun. Pada usia plasma

diangkut

kira-

21

tahun,

kurang

lebih

tahun, kadar

akan

me-

makanan diserap dari usus

dan

ningkat sampai 200-250 mg/dl [4]. 2.3. Absorbsi dan Transport Kolesterol Kolesterol dalam bersama

SKRIPSI

dengan lipid lain, termasuk kolesterol

disintesa

dalam usus, digabungkan

dan VLDL.

Dari

kolesterol yang


dalam

yang

kilomikron

diserap, 80-90%

di

JEMY TANDRA


14

dalam getah bening diesterifikasi

dengan asam

rantai

panjang.

mukosa

usus. Sterol tanaman (sitosterol)

kurang

baik.

dengan

Pada

hepar,

terhidrolisa VLDL

Esterifikasi dapat

saat

terjadi

ester

dalam

bereaksi kolesteril

kolesterol diambil

dibentuk

dalam

diabsorbsi

kilomikron

sebagian besar dan

yang

sisa

lemak

oleh

hepar

hepar.

mentransport

kolesterol ke dalam plasma [6]. Sebagian

besar

bentuk

ester

dalam

plasma.

kompleks dapat

dan

diangkut

yang

ditemukan

sebagai

Lipoprotein ini

lipida, dan

dalam

lipoprotein

merupakan

mengandung apoprotein,

mengikat

dari

kolesterol

partikel

protein

membantu

yang

pengaturannya

hepar ke dalam plasma [6]. Berdasarkan

fraksi

densitasnya

lipoprotein

lipoprotein . densitas

dan

tersebut,

tinggi

(anti resiko)

(HDL)

di

dapat antara

fraksi adalah

dibagi

lima

kelima

fraksi

lipoprotein

dengan

faktor

pelindung

terhadap terjadinya aterosklerosis.

2.4. Faktor-faktor

yang

Mempengaruhi

Kadar

Kolesterol

dalam Darah

Adanya resiko

terjadinya

menyebabkan kolesterol mempengaruhi

SKRIPSI

kolesterol

sebagai

penyakit

usaha-usaha

salah

jantung

untuk

satu

faktor

koroner

telah

menurunkan

dalam darah. Faktor-faktor

kadar

penting

yang

kadar kolesterol darah antara lain :


JEMY TANDRA


15

- Peningkatan jumlah kolestero-l meningkatkan

yang dimakan sedikit

konsentrasi kolesterol dalam

plasma.

Biasanya, konsentrasi kolesterol plasma tidak dapat berubah

lebih dari

±

15%

dengan mengubah

diet,

walaupun kolesterol yang ekstrem dalam diet mungkin dapat mengubah Peningkatan 100

kadar

sampai

kolesterol

sebanyak ± 30% [19].

dalam

makanan

mg menyebabkan peningkatan

sebanyak

kadar

kolesterol

sebesar 5 mg per 100 ml serum [6]. - diet

yang

jenuh

lemak

meningkatkan

konsentrasi

kolesterol darah sebanyak 15-25% [19]. - makan

lemak

yang

tidak jenuh

mengandung

banyak

asam

biasanya menekan konsentrasi

lemak

koleste

rol darah dalam jumlah ringan sampai moderat [19]. - kekurangan

hormon

tiroid

meningkatkan kolesterol

darah dan sebaliknya [19]. - pada diabetes melitus ningkat,

hal

kolesterol darah

ini diduga akibat

sangat me-

peningkatan

umum

mobilisasi lipid pada keadaan ini [19]. - hormon seks wanita, estrogen, menurunkan kolesterol darah,

sedangkan

meningkatkan

kolesterol

sekali karena laki-laki

hormon

erat

makin

seks

pria,

darah. Efek

SKRIPSI

penyakit

ini

penting

tinggi kadar kolesterol

hubungannya

dengan

kemungkinan terjadinya aterosklerosis - pada

androgen,

retensi

ginjal,


pada

peningkatan [19].

kolesterol

darah

JEMY TANDRA


16

sangat meningkat. - sterol

tanaman

kolesterol

(sitosterol)

berkompetisi

pada proses absorbs! dalam

dikonsumsi dalam jumlah

dengan

usus.

Jika

besar, akan dapat menurun-

kan kadar kolesterol plasma [4]. Sebelum makanan

1952

kandungan

dianggap

sebagai faktor

kadar kolesterol plasma. melaporkan sterol

lemak

Pada

bahwa lemak hewani

plasma,

total yang

dalam

menentukan

waktu itu

Kinsell

meningkatkan

sedangkan lemak tumbuhan

kole

menurun-

kannya. Kemudian Keys menemukan bahwa lemak

jenuh

meningkatkan

tak

jenuh

lemak tak

jenuh

banyak

kolesterol darah,

lemak

menurunkannya, sedangkan

tunggal tidak berpengaruh [4]. 2.5. Kolesterol HDL

Lemak bagi

bertanggung jawab atas penyediaan

tubuh,

tetapi

pengangkutan lemak sirkulasi

terdapat

yang bersifat

energi

permasalahan

dalam

hidrofobik

dalam

darah. Hal ini diatasi dengan

pembentukan

ikatan antara lemak tidak larut dengan golongan

yang

lebih polar seperti fosfolipida, kemudian menggabungkannya

dengan kolesterol dan protein membentuk

kom-

pleks lipoprotein yang hidrofilik [6]. Fraksi protein dalam lipoprotein dikenal sebagai apoprotein. Ada beberapa macam apoprotein, yaitu : - Apoprotein A-I, Apoprotein A-II.

SKRIPSI


JEMY TANDRA


17

- Apoprotein B. - Apoprotein C-I, Apoprotein C-II, Apoprotein C-III. - Apoprotein E Ada lima golongan lipoprotein yaitu VLDL, LDL, IDL, dan

HDL.

kilomikron,

Di antara kelima

golongan

tersebut yang merupakan faktor anti resiko

terhadap

terjadinya aterosklerosis adalah HDL. HDL usus.

disintesa

HDL

yang

tidak mengandung

dan disekresi dari

hepar

dan

baru terbentuk (nascent) dari

usus

apoprotein C,

tapi

hanya

apopro

tein A. Oleh sebab itu, tampaknya apoprotein C disintesa

dalam

hepar

dan

dipindahkan

pada

intestinal pada saat HDL intestinal memasuki HDL

yang

dibentuk

dalam hepar terdiri

lapisan fosfolipida diskoid tein ini

dan kolesterol mirip

dalam

dengan

plasma

bebas.

HDL

plasma. dari

yang mengandung

dua

apopro

Lipoprotein-lipoprotein

partikel-partikel

penderita

hanya

defisiensi

yang ditemukan enzim

lesitin-

kolesterol-asil-transferase (LCAT) [6], Katalisis oleh enzim LCAT akan mengubah fosfoli pida dan

dan kolesterol bebas menjadi lisolesitin.

menuju

Ester

bagian dalam

lisolesitin berlanjut

ester

kolesterol

akan

lapisan fosfolipida,

dipindahkan

ke albumin

menghasilkan suatu

inti

kolesterol bergerak sedangkan

plasma.

Reaksi

nonpolar

yang

memisahkan lapisan sampai terbentuk HDL sferis,

SKRIPSI


yang

JEMY TANDRA


18

dilapisi

oleh suatu film dari lemak-lemak polar

apoprotein.

Hepar dan mungkin juga

usus

dan

merupakan

tempat €erakhir degradasi apoprotein HDL [6]. Faktor-faktor yang mempengaruhi kadar HDL

dalam

darah antara lain : 1. Jenis kelamin Kadar

HDL pada wanita lebih tinggi daripada

pria

[6]. 2. Aktivitas atau latihan fisik Latihan dapat menurunkan

VLDL dan LDL, meningkat

kan HDL [1]. 3. Kafein dan kebiasaan merokok Dapat meningkatkan LDL dan menurunkan HDL [1]. 4. Alkohol Konsumsi

alkohol

yang

tidak

berlebihan

dapat

meningkatkan kadar HDL [1]. 5. Mineral Defisiensi

tembaga menyebabkan peningkatan

kadar

LDL plasma dan penurunan kadar HDL [1]. 6. Vitamin C Terapi

vitamin C dosis tinggi

runan

LDL dan kolesterol total,

menyebabkan dan

penu

peningkatan

HDL Cl]. 2.6. Ekskresi Kolesterol Kira-kira separuh dari' kolesterol yang

dielimi-

nasi dari tubuh diekskresi dalam feces setelah diubah

SKRIPSI


JEMY TANDRA


19

■

menjadi

garam empedu. Sisanya diekskresikan

sebagai

steroid netral. Sebagian besar kolesterol yang dieks kresi

dalam empedu direabsorbsi, dan dipercaya bahwa

kolesterol yang feces

berasal

sterol

utama

berfungsi

sebagai prekursor

sterol

dari mukosa usus. Koprostanol

adalah

dalam feces, dibentuk dari

dalam usus bagian Sebagian

kolesterol

bawah oleh bakteri-bakteri usus.

besar

garam-garam

ekskresi

bilier

portal,

diambil oleh hepar, dan diekskresi

di

dalam

direabsorbsi

empedu.

ke

empedu

Ini dikenal

dalam

sebagai

dari

sirkulasi kembali sirkulasi

enterohepatik. Garam-garam empedu yang tidak

direab

sorbsi atau turunannya diekskresi dalam feces [6]. 3. Tinjauan tentang Hewan Percobaan

Pada antara kera.

penelitian, hewan coba yang dapat

lain

marmot, tikus, babi,

ayam,

digunakan

kelinci

Marmot dipilih sebagai hewan coba dengan

dan

alasan

sebagai berikut [20]: - biayanya relatih murah. - pemeliharaan relatif mudah. - pertimbangan volume darah yang akan diambil. - tidak memerlukan tempat pemeliharaan yang luas. 4. Tinjauan

tentang

Penentuan

Kadar

Kolesterol

dengan

Metode Liebermann-Burchard

SKRIPSI


JEMY TANDRA


20

4.1. Penentuan Kadar Kolesterol Total Penentuan kadar kolesterol total dengan nakan metode Liebermann-Burchard

pertama kali

mukan oleh Liebermann pada tahun 1885, dan untuk analisis kolesterol

oleh

menggu dite

digunakan

Burchard

tidak lama

kemudian.

Pada penelitian-penelitian awal

digunakan

kloroform

sebagai pelarut, tetapi reaksi Liebermann-

Burchard sekarang ini menggunakan medium asam asetatasam sulfat-asetat anhidrida [21]. Metode lain yang banyak digunakan adalah

reaksi

Zak, yang untuk pertama kali digunakan dalam analisis kolesterol 1953,

oleh

Zlatkis, Zak dan Boyle

pembawanya

adalah asam

pada

asetat-asam

tahun sulfat,

tanpa asetat anhidrida. Untuk mendapatkan warna

yang

diinginkan harus ditambahkan Fe^+ [21]. Metode menurut Huang dan kawan-kawan yang

meng

gunakan pereaksi Liebermann-Burchard mempunyai banyak keuntungan

jika dibandingkan dengan metode

Keuntungan

metode Huang dan kawan-kawan

lainnya.

ini

antara

lain [22]: - prosedur pelaksanaannya relatif mudah. - hanya menggunakan

satu

pereaksi warna

dan dengan

pemeriksaan secara langsung. - pereaksi yang digunakan stabil selama 2 minggu pada suhu kamar dan 4 minggu di dalam almari es. - reaksi warna

SKRIPSI

maksimum

sudah


terbentuk

selama 20

JEMY TANDRA


21

menit dan warna yang terjadi tetap stabil selama 20 menit. - faktor suhu tidak begitu mempengaruhi reaksi warna. Pada pemeriksaan antara suhu 21-25°C tidak memberikan

hasil yang berbeda. Metode

rujukan ini

lain

yang

dianggap

adalah metode Abel dan

tnemerlukan

sebagai

metode

kawan-kawan.

beberapa tahap reaksi,

Metode

antara

lain

penyabunan

dari ester kolesterol dan ekstraksi

dari

kolesterol

bebas. Dengan demikian diperlukan

pera-

latan yang banyak dan perlu ketrampilan khusus

serta

memakan

waktu yang lebih lama dan memungkinkan

jadinya

kesalahan

pereaksi

yang lebih besar,

warna yang

digunakan

ter

disamping

hanya stabil

itu

selama

satu jam sehingga harus selalu dibuat baru [22]. Prinsip

reaksi

Liebermann-Burchard

menurut

metode Huang dan kawan-kawan yaitu berdasarkan kolesterol yang kuat

membentuk suatu

berwarna liena

dapat

bereaksi senyawa

hijau kebiruan. Kadar

ini

dapat diukur Pada

kawan-kawan

digunakan

ini

suatu

asam

kolestapoliena

yang

senyawa

secara

spektrofotometri.

dengan

metode

sifat

kolestapo

kolorimetri menurut

pereaksi

atau

Huang

dan

Liebermann-

Burchard yang mengandung 30% asam asetat glasial, 60% asetat anhidrida, dan 10% asam sulfat pekat [23]. Reaksi yang terjadi adalah sebagai berikut :

SKRIPSI


JEMY TANDRA


22

ion. karbanium Kolesterol dari

3

,5 -Dien

Asetat anhidrida SO. Kation Pentenil max 620 nm

4.2 Penentuan Kadar Kolesterol HDL

Kolesterol

HDL

dengan

menggunakan

metode pengendapan selektif yaitu dengan

menggunakan

heparin dan Mangan adalah

ditentukan

klorida. Prinsip dari metode

: lipoprotein-lipoprotein

di

dalam

kecuali HDL diendapkan. Dua tahapan yang harus

ini serum dila

kukan pada penentuan kadar kolesterol HDL yaitu tahap pengendapan dan tahap penentuan kadar kolesterol HDL.

SKRIPSI


JEMY TANDRA

■ M i n k ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

PEKILSIAKmAN "UNIVERSITAS AiiiS 'U R----Oleh

karena itu faktor yang mempengaruhi metode

adalah tergantung pada

ini

kesempurnaan dari pengendapan

lipoprotein-lipoprotein selain HDL [24]. Metode pengendapan selektif ini berdasarkan pada sifat

lipoprotein

dalam darah [selain

HDL],

yaitu

kemampuannya bereaksi dengan kation bervalensi dua n* (Mn^ ) dan polianion (heparin), membentuk partikel kompleks

yang

tidak larut.

polianion atau molekul

Semakin

besar

molekul

lipoproteinnya, akan

semakin

besar

pula kecenderungan

molekul-molekul

untuk

bergabung

partikel

, dengan

jalan

menjadi

memilih pereaksi

tersebut

kompleks.

Maka

sesuai,

dapat

yang

dilakukan pengendapan selektif terhadap fraksi-fraksi lipoprotein selain HDL. Untuk selanjutnya fraksi yang terlarut ditentukan kadar kolesterolnya

HDL

seperti

pada penentuan kadar kolesterol total. 5. Tinjauan tentang Metode Spektrofotometri Metode

spektrofotometri adalah salah satu

instrumental dari

yang didasarkan atas

molekul terhadap sinar.

pengukuran

Metode

metode serapan

spektrofotometri

dapat digunakan untuk analisis kualitatif dan kuantitatif.

Jika

pada panjang gelombang tertentu

suatu

mempunyai serapan yang spesifik, maka metode ini digunakan

untuk penentuan identifikasi

zat

zat dapat

tersebut.

Untuk analisis kuantitatif didasarkan pada nilai

sera

pan pada panjang gelombang tertentu [25].

SKRIPSI


JEMY TANDRA


24

Pengukuran serapan biasanya dilakukan pada panjang gelombang larutan

maksimum.

Pada

pengukuran

serapan

hampir selalu digunakan blanko untuk

suatu

mengatur

spekrofotometer, sehingga pada panjang gelombang pengu kuran mempunyai serapan nol. Maksud dari blanko but

terse

adalah untuk koreksi serapan yang disebabkan

oleh

pelarut. pereaksi, sel ataupun pengaturan alat. Analisis

kuantitatif

dengan

spektrofotometer

didasarkan pada hukum Lambert-Beer, yaitu [26]: A = a.b.c dimana : A = serapan a = daya serap b = tebal medium c = kadar senyawa yang menyerap 6. Tinjauan tentang Uji Validasi Validasi dari suatu metode analisis adalah

suatu

proses untuk meyakinkan bahwa karakteristik dari metode memenuhi

pada

analisis

yang dimaksud. Parameter validasi dari metode

analisis

yang

persyaratan

dipakai

adalah

sebagai

untuk diterapkan

pedoman

presisi, akurasi,

untuk

pengujian

sensitivitas,

mutu

selektivitas,

kelurusan dan ketidakrataan [27]. Yang

akan

dilakukan pada penelitian

ini

adalah

kelurusan, sensitivitas, presisi dan akurasi.

SKRIPSI


JEMY TANDRA


25

6.1. Kelurusan dan Trayek Kelurusan Kelurusan suatu metode analisis

adalah

kemam-

puan memberikan hasil

uji yang secara langsung

melalui

matematik,

transformasi

atau

sebanding

dengan

konsentrasi analit dalam sampel dengan rentang diberikan.

Linieritas

suatu metode analisis

melakukan

penyelesaian matematik

oleh dengan hadap

hasil-hasil analisis

terhadap

yang diperter

sampel

dengan

berbagai kadar analit. Trayek kelurusan adalah dari

yang

masih

terendah

sesuai

sampai

dengan

yang

jarak

tertinggi

yang

hukum yang berlaku [27].

6.2. Sensitivitas Sensitivitas Detection) of

dengan LQD

untuk

dianalisis)

dalam sampel yang masih blsa

LOQ

batas kadar terkecil dari

sampel presisi

yang dan

ditetapkan secara akurasi

of

(Limit

analisisx kuantitatif.

batas kadar terkecil dari arvalit

adalah

(Limit

untuk analisis kualitatif dan LOQ

Quantitation)

adalah

dinyatakan

yang

(zat

LOD yang

dideteksi.

analit

dalam

kuantitatif

dengan

dapat diterima [27].

6.3. Presisi Presisi adalah suatu derajat keterulangan

SKRIPSI

metode

analisis

pada

kondisi

normal.

Biasanya

dinyatakan

relatif

atau disebut juga koefisien

dari

pelaksanaan

yang

dengan simpangan


variasi.

baku Makin

JEMY TANDRA


26

kecil

harga

prosen koefisien

v&riasi

maka

makin

baik presisi suatu metode analisis [27]. 6.4. Akurasi

Akurasi dari

adalah kedekatan hasil

yang

suatu metode analisis dengan kadar

narnya.

Biasanya dinyatakan dengan prosen

diperoleh yang

sebe-

perolehan

kembali [27].

SKRIPSI


JEMY TANDRA

BAB II TINJAUAN PUSTAKA. Vitamin C tersebar luas dalam hewan dan tumbuh- Dalam jaringan hewan kadar tertinggi ditemukan

Recommend Documents