Agave amaniensis tumbuh baik di daerah

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

BAB

II

TINJAUAN PUSTAKA

1. T i n j a u a n tentang Ag a v e amaniensis Trel 1.1.

dan Nowell

Ta n a ma n Agave amaniensis

Agave b e ri kli m

tumbuh

tropik dan banyak

penghasil (3).

amaniensis

serat

Klasifikasi

St ras sburger

et,

baik

dit ana m

dis am pi ng

di

daerah

sebagai

tanaman

sebagai

tanaman

tanaman Agave amaniensis al ad al a h

sebagai

berikut

Di v i s i

S p e r m a t op hy ta

Anak d iv i s i

A n gi o s p e r m a e

Kelas

M o n o c o t y 1edoneae

Bang sa

Li 1 iales

Suku

A m a r y l 1 idaceae

M ar g a

Agave

Jeni s

Agave

hias

menurut : (9)

amaniensis Trel

et

NoweI I Daun Agave nin,

spp. m e ng an d u n g

ma no genin,

s t e r o 1- s t e r o 1 dan

tigogenin,

9-dehidromanogenin, senyawa

steroid

diosge-

klorogenin,

Iain yang

belum

d iketahu i (10,11).

1.2.

Kalus A gave amaniensi s Kalus

Agave

amaniensis

yang

be r ad a ‘

di

6

SKRIPSI

PROFIL PERTUMBUHAN DAN PEMBENTUKAN ...

NUR'AINI SOFYAN


7

L a b o r a t o r i u m Bioteknologi Universitas oleh

Ai rl a n g g a

Setia Dewi

dari

Farmasi

pertama

Fakultas kali

di tu mb uh ka n

daun Agave

pangkal

s is . K al us Agave amaniensi s mempunyai rapuh

dan berwarna kuning

masih

terkandung

tanaman asa ln ya

Ag a v e

sterol (12).

amaniensi s

sapogenin

terang.

me n g a n d u ng

macam

sterol

pada kalus Agave

itu terdapat

glikosida

sterin,

teridentifikasi da la m m ed ia

kalus

Agave

adanya

sapogenin

dan

(13),

(B M = 430),

170 mg/L)

nin

(BM = 446)

telah

steroid yang ka mm ogenin

adalah

dan

sitos skuale-

steroid

jelas (14). pula

terdiri

(BM = 444),

dan

sedangkan

juga pr ek u r s o r sapogenin

pada

fosfat

amaniensis

denga n

amaniensi s

nin

2. T i n j au a n

ion

s t i g m a s t e r o 1, kampesterol

Selain

ion fosfat

mg/1

ini

kalus

sterol-sterol

sebanyak 340

belum

seperti

Juga di l ap or ka n ba h w a

media

na,

Pada kalus

dan h e k o g e n i n

dalam

terol.

amanien

tekstur yang

steroid dengan konsentrasi

koles te ro l,

Farmasi

yang

(konsentrasi Dari

kultur

di lap ork an dari

hekoge

dan m a n o g e

(15).

ten tan g Kultur J a ri ng an T a na ma n

2.1. T i n j a u a n uraum Kultur Jaringan dapat ba g i an

SKRIPSI

/

jaringan

didefinisikan

tanaman yang

telah


sebagai

d ip isa hk an

NUR'AINI SOFYAN


8

dari

tanaman as a l n ya dan di tu m b u h k a n d a l a m keadaan

steril mampu

pada

suatu me dia buatan,

tumbuh dan me n ga da ka n

(16).

Jika

media

se l/j ari ng an (misalnya

kultur kalus.

ho r m o n

dapat

pertumbuhan,

kalus

diagitasi

de ngan

Kultur

yang

pada

kultur

pe rt umb uha n yang diri

terbagi

(lag phase),

phase),

stasioner

fase

fase

wa ktu duplikasi

sel

dan massa

kompotersebut

tanaman baru.

Jika

cair maka

dan akan

(1). dalam

botol

menampilkan atas

(batch

model

kurva

fase-fase

penyesuai-

fase ek sp onensial

( e xp on en

linier

(linear

(stationary phase),

P ad a

kalus

tertentu

di ta na m

um u mn ya

sari

De ng a n m e n g u b a h

kecepatan suspensi

sterii

terdifferensiasi

ini dipin da hka n ke m e d i a

di da p a t k a n kultur

culture)

eksplan

maka

tumbuh menjadi

di re ge ne r a s i k a n menjadi

kultur

sesuai

serbuk

yang me ri s t e m a t i s dan b e l u m

sisi

tial

akar,

akan me mbelah dan

yang disebut

an

d i g u na ka n

daun,

sel-selnya

pembelahan-pembelahan

yang di ta nam sebagai

tangkai

sebagainya) sel

yang

dan

dan

eksponensial, tumbuhan

phase);

fase

fase degradasi. dapat

dihitung

(17).

Rumu s : .dx = |j . dt

SKRIPSI


NUR'AINI SOFYAN


9

1

dx

x dt (log ;<)

d

1

dx d

x

( log x) dt

^ log x - log X q t

log x = pt

+ log x 0

Dengan m e m p l o t k a n h a r g a x pada ordinat Dari yaitu

rumus

t pada ab sis

diperoleh

ini dapat

slope

dan h a r g a

log

= p/2 ,30 3

d i h i t u n g waktu du pl i k a s i

sel

: p

log 2

2,303

td 0,693 ----------

td

Ke terangan x 0 = berat awal x

= berat

td » wa kt u M

Pada mempunyai 1. Ti dak

ak hir

sei

duplikasi

= slope x 2,303

umumnya

Kultur

beberapa keuntungan te rp e n g a r u h o l e h

hama dan pen yakit

SKRIPSI

sel

Jaringan (18,19)

Tanaman

:

letak ge ogr afi s,

iklim,

tanaman.


NUR'AINI SOFYAN


10

2. Kondisi

dapat

dihasilkan

terkontrol,

produk

sehingga

tertentu

dapat

sesuai

dengan

keinginan. 3. Tidak di bu tu h ka n

k. W ak tu dapat

lahan yang

yang diperlukan

luas.

untuk

p e m b u d i d a y a a nn ya

dipersingkat.

Sedan g kontaminasi

kerug ia nny a ya itu k em un gk in an oleh mi k ro or ga ni sm e

bila p e k e r j a a n n y a kurang ase pt is

yang

lebih

terbesar

selain biaya yang

relat i f m a h a l . D e n g a n ad any a k e u n t u n g a n - k e u n t u n g a n but

m ak a

sistem Kultur

d i k e m b an gk a n untuk 1. Produksi

(16,19)

farmasi

2. Biotran sf or mas i se ny aw a

Ta na ma n

dapat

:

senyawa-senyawa

pada bidang

di

J a ri ng an

te rs e

tertentu yang

berguna

medik.

s e nya wa -se ny awa

yang dapat

tertentu m e n j a

dig un ak an

pada

bidang

farmas i/med ik . 3. Produksi enzim,

biosi nt esi s

k . Seleksi kai

se nyawa-senyawa

intermediet,

galur-galur

(misalnya

dll),

tanaman unggul

unt uk

dipa-

pada bidang pertanian dan hortikultura.

5. M ul t i p l i k a s i

SKRIPSI

spesifik

tanaman

secara cepat


dan

seragam.

NUR'AINI SOFYAN


11

2.2. M e d i a Ku l t u r Ja ri nga n Tana man Komponen Tanaman

nutrisi

pada d a sa rn ya

media

terdiri

yang

secara

alami

hi du p

tanaman

(20,21). Me d i a

k o m p on e n

yang

kroelemen, nik,

Penambahan

dari

dibutuhkan

bah an

persenyawaannya

(guia,

be l u m

diketahui

tomat)

dapat

terdiri

sen yaw a

p en ga tu r

baik

yang

a s a m amino)

p e rs en ya wa an nya

me r a n g s a n g

dari

m a k ro el em en ,

dan zat

organik,

kimia

k e la ng su ng an

standar

sumber karbon,

nitrogen,

Jaringan

s e ny aw a

bagi

seimbang ant ar a

vitamin,

sumber

Ku l t u r

miorga-

tumbuh. diketahui

maupun (air

t er jad in ya

yang

kelapa, p em bel ah an

(22).

M e d i a yang u mu m digunakan d a l a m

Ku ltur

J a ri ng an Tan am an adalah m e d i a M u r a s h i g e

Skoog

dan

(2 ) .

Kebutuhan lain

penelitian

( 16)

nutrisi

Kultur Jaringan T a n a m a n

antara

;

- Sumber

karbon

: sukrosa, tosa,

- M a k r o e l e m e n anor ga ni k jumlah

glukosa,

fruk-

manosa.

(yang d i b u t u h k a n dalam

lebih besar dari

0,5 nM ol /L )

: N 0 3',

NH 4+ , P043 - ,

K+ ,

C a 2 + , M g 2 + , SO,,.2 ". - Mikroelemen jumlah

SKRIPSI

anor ga ni k

lebih kecil

dari

( dibutuhkan

dalam

0,5 mMol/L)


NUR'AINI SOFYAN


Pfcl ,; ^Ia K/i a N "ijjMVthit i a S Aifti.ANGGA”

SUR.q/\VA

[

: bermacam

- macam

logam

b e r a t , mi salnya C o 2 + , M n 2 *,

Zn2+ ,

Fe2+ ,

dll. - Vitamin-vitamin

: tiamina,

pir idoksina,

mi oi no si to l,

n i k o t i n am i-

da. - Fitohormon

: kinetin, NAA,

Ion K a l s i u m

IAA,

seperti

da n 2,4 D.

(C a 2 + )

Sec a r a

d i k a t ak an

ion

kalsium

d ip er lu ka n d a l a m m e m b e n t u k Ca-pe cta t

p ad a

dinding

primitif pada

sel

umum

tanaman.

ta na ma n

menetra li sa si nya

dapat

pada

tertentu.

daya

juga

a s a m oksalat.

m i s a l n y a yang Ca* "second

b e b as

t e rha da p

hormon-hormon.

dipengaruhi dan hormon,

oleh

racun,

misal-

de n g a n

ion

spp.

sebagai

perantaraan

ra ng sangan

Aktifitas

dapat

b e r b e n t u k kristal,

bertindak

dalam

al e u r o n

kalsium

pada daun Begonia

dapat

messenger"

diperlukan

dalam

A s a m oksalat

Ca-oksaiat

t erdapat

respon ta na ma n

Ion

toksik atau daya

k a l s i u m a k a n me n ja di

dan

Ion k a l s i u m

p e m b e n t u k a n c a d a n g a n ma k a n a n

biji-biji

SKRIPSI

auksin

suatu

beberapa

seperti

cahaya

enzim-enzim

ra n g s a n g a n dasar

seperti

yang ca ha y a

y a i t u NAD kinase da la m kl or oplas,


NADH

NUR'AINI SOFYAN


13

d e h i d r o g e n a s e eksternal mi to kondria, dehidrogenase memainkan

intra-mitokondria,

yang

perana n penting da la m

tanaman.

Aktivas i

sel

dan

endoplasma

(atau)

NADH

m e ng a kt iv a si sintesis

aktivasi

eksternal

int ra- mitokondria. oleh

dan Dalam

kloroplas

sehingga m e n d u k u n g

dan

dipengaruhi

Kalsium

p e m b e n t uk an

oleh adany a

dan foto-

secara

absolut

dibutuhkan

dan

citrifolia.

O h i r a et a l ., m e m p e r o l e h

pada

k a l s i u m memiliki pertumbuhannya selanjutnya.

produksi

kultur

suspensi

de n ga n

p en in gk at an

Morinda

pe rt umb uha n

padi

jika

0,2-1 m M dan

Pe rt u m b u h a n kultur kalus derivat

ion

me nu ru n

ion

kal siu m

Lithospermi-

sh iki non

ion k a l s i u m dia ta s

Kan du ng an g 1 ikoalkaloid r a u c r a f f r i c i n a


(24, untuk

pada

p e ni ngk ata n

um erythrorhizon dan hasil den ga n

pigmen

konsentrasi

metabolit

ion k a l s i u m

pertumbuhan

maksimum

SKRIPSI

mitokondria

(23).

sekunder

(26).

retik ulu m

sitosolik m e r a n g s a n g

NA D kinase,

P er t u m b u h a n

run

me mb ra n

meni ng-

?+ Ca£ diambil

terang

sel

cende-

m e le wa ti dari

itu

sitosolik b eb as

de hi dr o g en as e

k ea da a n

25).

+

se hingga Ca

d e h i d r o g e n a se

gl utamat

semuanya

tanaman oleh c a h a y a

5X pelepasan Ca*

kat. Pe ni n g k a t a n C a

glutamat

m e t a b o 1 isme

rung m e n i n g k a t k a n pemasukan Ca* plasma

dan

menu3

mM akan

NUR'AINI SOFYAN


14

meningkat kultur

dengan

suspensi Pada

dilakukan dalam

pemberian

10

barbagai

s e la nju tny a

variasi

pula

terikat,

terhadap sterol

bebas

dan

kian

disim pu lka n

ba hw a

berpengaruh

di ma n a

hasil

ka nd un ga n

kalus Agave amaniensis.

kalsium

dalam

ion k a l s i u m

diperoleh

d a l a m ku lt u r dapat

(4)

konsentrasi

m e d i a yang digunakan,

sterol

CaCl2

Rauvolfia serpentina (27).

penelitian

b er var ia si

mM

yang

hekogenin, sterol

total

Dengan

demi-

konsentrasi

terhadap

ion

p e m b en tu ka n

f it os te r o id d ala m kalus Agave amaniensis.

2.4.

Ion M a g n e s i u m

(Mg2 + )

Ion m a g n e s i u m yang media

d a l a m bentuk MgS0^.7H20,

hi j a u

d i j a di k an

Ion

zat hijau

di

daun

dalam a t au

m a g n e s i u m m e r u pa ka n pe ny usu n zat

di ndi ng

primitif

Sel ai n

itu

bu ti r - b u t i r dapat

ion

sel

aleuron.

asimilasi

diuraikan

juga

ion m a g n e s i u m

fotosintesa,

tumbuh an klorofil.

pektin

pada

Ca,Mg-pektat.

dijumpai

da l a m

be rpe ran

telah

ion m a g n e s i u m d a l a m ben.tuk

MgSO^

m en un ju kk an

seperti

da l a m

yang

terdahulu

*10 m g/ L pada kultur

serpentina

sebagai

pada

B e r d as ar kan d a t a - d a t a di atas

oleh peneliti

Pem be ri an seb anyak

tanaman

magnesium

di d u g a bahwa

proses

SKRIPSI

ter utama d i b er ik an

(6).

suspensi

ter ja di ny a


RauwoJfia pe ni n g k a t a n

NUR'AINI SOFYAN


15

glykoalkaloid

raucraffricin

Penelitian mengenai ion

yang

pengaruh

dilakukan

penggantian

kesimpulan

de n g a n

pe na mb a h a n

peroleh

kadar

sterol

tak b e r p e n g a r u h

3. Prod uksi

5 dan

metabolit

baru-baru

ion k a l s i u m

kalus Agave

m a g n e s i u m pada kultur

memberikan

(20).

menunjukkan

10 m M

ion

bahwa

magnesium tetapi

terhadap kadar h e k o g e n i n

sekunder de n g a n

dengan

amaniensi s

yang

yang m e n i n g k a t

ini

teknik

di-

relatif

(fc).

Kultur

3a-

ringan T a n a m a n Metode satu

Kultur

alternatif

sekunder.

Jaringan T a n a m a n m e r u p a k a n

untuk

me m p e r o l e h

D e n g a n Kultur

mempr odu ks i

metabolit

senyawa

Jaringan Ta na ma n sekunder

yang

salah

me ta b o l i t

di m u n g k i n k a n

identik

de ngan

tanaman asalnya. U n t u k m e n d a p a t k a n kadar m e t a bo li t relatif faktor sekunder

yang

tersebut. dapat

berb ed a

se cara

kultur

op ti mal is asi pembentukan

teknik

metabolit

kualitatif,

mau pu n

secara kuantitatif

asalnya. yang

pada

Dengan

diproduksi

lebih kecil

tanaman

perlu dilakukan

b er pe ng ar uh

Tanaman,

atau

SKRIPSI

tinggi,

ti dak

Sebaliknya m am pu

sekunder

yang

faktormet ab ol it

Ku ltur

J a r in ga n

sekunder

yang dapat

lebih

besar,

sama

d i b a n d i n g k a n dengan

dapat

pula

menghasilkan


dihasilkan zat

spesifik

NUR'AINI SOFYAN


16

seperti pada

pada

tanaman asalnya.

kultur

kalus

ma u p u n

wr ight i i, Solanum mammosum, tidak

m am pu memproduksi

tanaman S o l a n u m ,

Hal

kultur

dapat

dilihat

Solarium

suspensi

dan SoJanum k h a s ianum

solasodin,

seperti

ini

zat

yang

sp esifik

tanaman asalnya.

pada

Ku ltur

kalus

Coleus blumei dapat m e n g h a s i l k a n a s a m rosmarinat dengan kadar yang

lebih

tinggi

dari

tanaman

asalnya.

Kadar yang

tanaman

asalnya

ini

pada yang lebih

tinggi

juga ditemui

aiami man,

akhir

tahun

yang dapat tetapi

1988

tidak diproduksi

tanaman

seperti (19)

dapat

yang

yai tu

kalus

di osg eni n.

Bahkan

88

oleh Kultur oleh

K e t i d a k m a m p u a n produksi sel

kultur

telah dipe rol eh

diproduksi

di se babkan

pada

dib and in gk an

pada

Dioscorea deltoideae yang memproduksi sampai

t er ka nd un g

senyawa kimia

J a r i ng an

Tana

tanaman a s a l n y a

meta bo li t oleh

(19).

sekunder

beberapa

telah diur aik an oleh peneliti

pada faktor

terdahulu,

:

1. R e p r e s i f n y a

en z i m

yang

bertanggungjawab

proses bi os int es is metabolit

sekunder

terhadap

tersebut.

2. K e t i d a k m a m p u a n m e n y i m p a n produk. 3. A d a n y a degradasi

3.1.

produk.

F a k t or -f a kt or yang be rp eng aru h pada p e m b e n t u k a n me tab ol it

sekunder

d a l a m Kultur J a r i n g a n T a n a m a n

Faktor -fa kt or tas

SKRIPSI

sistem Kultur

yang me mp eng ar uh i

produk tiv i-

Jaringan Ta n a m a n d a l a m


mengha-

NUR'AINI SOFYAN


17

s i 1kan metaboli t

sekunder

1. F a k t o r - f ak t or

di

luar

dapat

be r u p a

lingkungan

(1,2)

:

ku lt u r

yang

lingkungan ku lt u r

yang

me li pu t i : - cah ay a - temperatur - pe ng oc o ka n 2.

(pada kultur

Fak to r- fa kt or

di d a l a m

suspensi)

me 1 iput i : - komposisi sumber

dan kadar

karbon,

penyusun

media

hormon pertumbuhan,

seperti

prekursor,

serta makro dan m i k r o e 1e m e n . - ke ad aa n pH m ed ia - pr ose nt ase

3.2. H u b u n g a n

oksigen

pert u mb uh an

si s t e m Kultur

terlarut

meta bo lit

metabolit

dengan pertumbuhan sekunder

sel

seringkaii

dan

dipen ga ru hi

be berapa didapat

Berda sa rka n data y an g

pada

kinetik,

hubungan

d i k 1asi fik asi kan

1. p e r t u m b u h a n aku mul as i

sel

2. akum ula si pe rt u m b u h a n

metabolit sel

pe rt um bu ha n metabolit

sebagai

berikut

berlangsung

metabolit

sel yang

pembentukan

kontrol.

dapat

SKRIPSI

d al am ku l tu r

mekanisme studi

pada

Jar ingan Ta n a m an

A k t if it as biosintesis berkaitan

s e kun de r

(28)

bersamaan

: dengan

sekunder. sekunder

terjadi

setelah

berkurang atau berhenti.


NUR'AINI SOFYAN


18

3 . pertumbuhan

sel

sedikit me nd ahului

pertumbuhan

pe m b e n t u k a n p r o d u k .

3,3. Ti ijauan tentang Sap og en in Steroid 3. 5.1.

S a p o g e n i n Steroid Sapogenin dalam

jaringan

glikosida, steroid

yang

terdapat

tanaman d a l a m be n tu k

m e r u p a k a n hasil

steroid menurut

b er da sar kan

ikatan

ura ia n

oleh a s a m - a s a m mineral.

sapogeni n Wulff

steroid

saponin Pembagian

TS CHES CHE

susunan

inti

molekul

sap og en i nn ya

(29) yaitu

1. Sapog enin

steroid

tipe Spirostan.

2.

Sapogenin

steroid

tipe Triterpena.

3.

Sapogenin

steroid

tipe Alkaloida.

Salah dil ap or ka n

satu

amaniensis

pada

terdahulu,

yaitu

sapogenin

:

sapogenin

terdeteksi

dan

steroid

yang

kalus

Agave

dalam

penelitian-penelitian hekogenin,

steroid

tipe

tergolong

spirostan

dengan

inti m o l e k u 1 s ik 1op en ta n o p e r h idrofenant r e n . H e k o ge n in mempunyai dapat

SKRIPSI

sapogenin

gugus karbonil

di ubah ke a t o m

me nj ad i k a n obat

adalah

heko ge nin

steroid

yang

pada a t o m C i2 yang . Sifat

sesuai

inilah yang

untuk

membuat

kortikosteroid.


NUR'AINI SOFYAN


19

Gambar

1.

Sapo gen in

Sarsisapooenin : Sa(W;eA
bar 2.

steroid

iS, 255 58, 25a ■ Hj <2 * S«, 2Sc - GK; R2 - «; 2c. 5s, 25c - CM; - H; li, 5;, 25s

Struktur

Ek st r a k s i

pada

senyava

SKRIPSI

be berapa

sapogen in

tanaman Agave amani ensi s

sapogenin

steroid

yang

jenis yang

(29).

Htco^enin 5c, 2CB, 25j CorrtHooeMn 5,6 - ;20e, '25* Gjntrooenlo 5,6 - :20e, 258

molekul

Ekstraksi .tung

spirostan

■ «; - k; • K; R2 . H;

steroid dari

3.3.2.

tipe

tepat

tumbuhan

akan

sangat dan

dipisahkan.


berganka nd u n g a n Selain

NUR'AINI SOFYAN


20

itu,

ekstraksi

dipengaruhi

dan peny iap an

oleh pola ri ta s

sampel zat

juga

kandu nga n

(30) . Un tu k sa po g e n i n adanya

lemak,

atau

d e n g a n Metanol-HCl, dinetralkan

de n g a n

dengan

dikeringkan,

melakukan u nt uk

selama

mendingin, hi n g g a

di pe ro le h

d i s ar in g

terakhir

de ngan

dan

diekstraksi

Emma

kloro

bebas

ma u p u n

Setelah

sterol

residu di hi dr o l i s i s 2 jam

pada

mencapai

pH

100°C,

di bi a r k a n

dan 10.

bebas

denga n HC1

diba sa ka n Selanjutnya

dengan k l o r o f o r m u n t u k

steroidnya

(1990)

pelarut

sterol

dinetralkan,

dieks tr ak si sap o g e n in

men ar ik steroid.

dipisahkan,

SKRIPSI

Carle

dihidrolisa

eks tr ak y aa ng

pene1itiannya,

ekstraksi

sapog en in

2N

oleh

ke ring

amonia,

cara

kloroform. Dalam

form

tanpa

digunakan

d i k e m u k a k an

bahan

mengandung

alkaloid

m a k a dapat

seperti

Serbuk

res i d u

yang ha n y a

steroid

ekstraksi (19).

sampel

menarik

(6).


NUR'AINI SOFYAN


21

4. T i n j a u a n

te nt an g a n a l i s i s kemurnian n o d a dan

kuantita-

tif 4.1. K r o m a t o g r a f i

La p i s a n Tipis

Kr om at og ra fi teknik

Lapisan

Tipis

p e m i s a h a n campuran zat

daan ny a

(KLT)

k e c e p a t a n migrasi pada

fasa

(KLT)

ad a i a h

berdasarkan

perbe-

masing-masing

diam yang

berupa

komponen-

lapisan

tipis

a b s o r b e n yang ditaburkan pada ba g i a n

inert

plastik,

suatu pelarut

sebagai

a lum in iu m) fasa gerak

dibawah p e n g a r uh (31).

Kr om at o g ra f i

Lapisan

identifikasi

Tipis

d i g u n a k an

pada

sap og en in

stero id karena cara

jumlah

cu plikan yang

yang

singkat

dan me ng has il kan

(31,32).

dideteksi

Ad a n y a

sangat

pendahuluan

kan

baik

(kaca,

kandu nga n

ini h a n y a

sangat

tepat

membutuh-

sedikit,

waktu

p e m i s a h a n yang cukup

sapogenin

steroid

de n g a n warna bercak dan h a r g a

dapat Rf

yang

o pt ik

yang

identik de n g a n pembanding.

4.2. D e n s i t o m e t r i

(TLC-Scanner)

Den si tom et ri dapat

d i g u n a k a n untuk analisis k e m u r n i a n noda

k u a nt it a t if ter lebih grafi

zat

atau

cam puran

da h u l u dipisahkan dengan

La p i s a n T ipi s

noda d i h a s i l k a n

SKRIPSI

merupakan m e t o d e

senyawa

dan

setelah

teknik

Kromato

(33). Unt uk a n al is is

kem ur ni an

kroma to gr am yang


be r up a

sp ektrum

NUR'AINI SOFYAN


22

panjang

gelombang.

maksimum

sampel

Apabila

sama

panjang

denga n

m a k s i m u m pe mba ndi ng mak a

gel om ba ng

panjang

k e m u ng ki na n

gelo mb ang

zat

tersebut

sama .(34). Untuk

tujuan kuantitatif,

d ens itometri optik

d id as ar kan atas p e ng uk ur an

noda

din y at a ka n gram.

kromatogram. d al a m bentuk

Kadar

cara

analisis

membandingkan

ker ap at an

Kerapatan

tersebut

luas kurva noda

zat yang di an alisis luas kurva

de ngan

kromato

di.hitung

sampel

de ngan

de n g a n

luas

k urv a pembanding. De nsi to met ri memiliki

m e r u p a k a n m e t o d e a n a l i s i s yang

sensitifitas

pengerjaannya

tersebut yang

an t a r a

organik.

lempeng area

tersebut

metode

p e n g h a m b ur an lapisan dan

ini

tipis.

konsentrasi

juga

pe r a l a t a n n y a

sampel,

tidak

cahaya H u bu ng an

pelarut

hubungan

ant ar a

iinier

kar en a

(scattering) linier an t a r a

di da sarkan

pada

Ku b e l k a - M u n k de ngan m e n g gu na kan ku rv a telah d i p r o g r a m oleh mikroko mp ut er

SKRIPSI

disa mp in g

dan bany ak nya pe ma ka ia n

D a l a m analisis

dan

K e 1e m a h a n - k e 1emahan

lain dis ebabkan oleh

ar ea den ga n konsentrasi

ad a n y a

dipercaya

meskipun

b e b e r ap a kelemahan.

sangat mahal

luas

dapat

relatif cepat,

k e 1e b i h a n - k e 1ebihan mempunyai

tinggi,


oleh luas hukum

linier

yang

(35,36).

NUR'AINI SOFYAN


I »-« A p^K,-l SfAKAAN ’UNiVEKSiVAi AiKt*MKiA'

S U R A B >. V

a

23

H u k u m K u be lk a- Mu nk

d: = - ( S + K ) - i + S :

di

di ma n a

= - ( S + K ) - i + S i

: i = intensitas

cahaya

de n ga n

lurus me nu j u perm uk aa n J - intensitas

lapisan

c ahaya

denga n

lurus m e ni n g g a l k a n

lapisan

S = faktor satuan K = faktor satuan

pe ng ham bu ran tebal

tebal

tegak

tipis,

-arah

tegak

tipis,

u nt uk

lapisan

pe ny erapan

arah

tiap

satu

tipis, unt uk

lapisan

tiap

satu

tipis,

x = tebal m e d i u m

Ka re na adanya

m e d i u m tidak homogen,

parameter

koefisien

K o e f i s i e n pe ng ha m b u r a n dari te r g an tu n g yang

dari

SKRIPSI

dikenal

penghamburan lempeng

ukuran dan

(SX).

lapisan

dis tribusi

tipis

adsorben

digunakan. R e p r o d u s i b i 1 itas

oleh

maka

faktor -fa kt or

an tara

hasil lain

dapat

dipengaruhi

:


NUR'AINI SOFYAN


24

1. H om o g e n i t a s Lempeng

yang

variasi

ketebalan

variasi

yang

d i g u n a k a n harus

lempeng,

dicatat

P en y e m p r o t a n secara

3. Arah

merata

noda di

ditransmisikan hasil

pe ma n a s a n pe ma n a s a n

harus

untuk m e n c e g a h

intensitas

Scanning

menyebabkan

yang akan me mp eng ar uh i

dan

Sc anning

yaitu

akan

ka rena

oleh densitometer.

Pe n y e m p r o t a n dan

dengan

lempeng

homogen

jumlah c a h a y a yang akan

melalui

2.

lempeng

w a r n a yang

dila ku kan

timbulnya

noda

tidak merata.

noda

noda d i l a k u k a n den ga n a ra h yang

berlawanan

de n g a n arah

scan den ga n arah

eluasi.

sama

Apabila

berb eda akan m e n y e b a b

kan varias i . Ad a k ua nt ita tif

dua

sampel

1. Met od e Dibuat dibuat

me t o d e (37)

yang d i g u n ak an

ana lisis

:

standar

eksternal.

ku r v a kalibrasi antara

konsentrasi.

unt uk

dari

zat

luas a r e a noda

Kadar

mengintrapolasikan

sampel

standar.

standar

Kurva

terhadap

di pe r o l e h de ngan cara

pada kurva

kalibrasi

yang

d ip e r o 1e h .

SKRIPSI


NUR'AINI SOFYAN


25

2. Met od e

standar

Sampel

maupun

internal yang

area

konsentrasi. dengan

SKRIPSI

standar

de ngan

dibuat

dengan

internal.

sifat

di tambah

konsentrasi

adala h noda

rasio standar

Standar f isika

standar

tertentu.

area

noda

internal

internal dan

suatu

di pi li h

kimia yang


Ku rv a standar

terhadap senyawa

sama.

NUR'AINI SOFYAN

Agave amaniensis tumbuh baik di daerah

Recommend Documents