ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
BAB I I I
TJARA PENELITIAN
A. Penentuan alkaloida dalam bunga
Nvctanthes
Arbor Tristis Linn. Larutan jang kami sangka mengandung garam kaloida jang kami dapat dari ekstraksi
al
bunga Srigading
kami tentukan alkaloidanja dengan perekasi umum alkaloi da. Perekasi-perekasi jang kami gunakan ialah : 1. Perekasi Mayer. 2. Perekasi Bouch*rdat. 3. Perekasi Dragendorf. 4. Perekasi Kalium Ferri Cyanida* 5. Pereaksi Kalium Ferro Cyanida.
6 . Perekasi Ferri Chlorida. 7. Perekasi A,Aercuri Chlorida. Larutan jang disangka mengandung alkaloida bil kira-kira sebanjak 2 cc dimasukkan dalam tabung
diam re-
aksi ditetesi dengan pereaksi dan dilihat adanja pengen* dapan atau perubahan warna. Sedang untuk melihat kemung kinan adanja kristal-kristal jang terbentuk dengan mene teskan beberapa tetes larutan jang
disangka
mengandung
15
SKRIPSI
FARMAKODINAMI BUNGA NYCTANTHES ARBOR TRISTIS LINN ...
SUPRIHATI
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
16
alkaloida diatas gelas objek kemudian
pada tetesan
ini
diberi suatu tetes pereaksi. Setelah beberapa laraa dili hat dalam mikroskop. Bila dari pertjobaan ini kami tidak mendapat hasil jang memuaskan, kami mentjoba
melakukan
pemekatan lebih dahulu dengan menguapkan larutan jang di sangka mengandung alkaloida diatas waterbad, hingga kon sentrasi mendjadi tiga kali lebih pekat
baru kami reak-
sikan dengan pereaksi alkaloida dan dilihat adanja enda pan dan kristal jang terbentuk. Bila dengan yer kami mendapatkan endapan kami
raantjoba
Ma melarutkan
endapan jang terdjadi ini didalam spiritus. Hal ini
di-
lakukan untuk membedakan dari zat putih telur jang djuga mengendap dengan pereaksi Mayer tetapi tidak larut dida lam spiritus. Setelah spiritus menguap dilihat apakah en dapan akan terbentuk lagi. Pada pertjobaan dengan
pere
aksi Bouchardat, bila didapatkan endapan dilarutkan
da
lam spiritus, dan apakah endapan ini terbentuk lagi
se
telah spiritus menguap. Untuk membedakan bahwa
endapan
bukan berasal dari ether jang dengan pereaksi Bouchardat mengendap dalam suasana asam, endapan jang berasal
dari
ether bila dientjerkan dengan air, akan larut (17). Pertjobaan-pertjobaan untuk menentukan adanja alkaloida ini kami lakukan empat kali. B. Penentuan kadar Calcium dalam bunga
Nyctan-
thes arbor tristis Linn.
SKRIPSI
FARMAKODINAMI BUNGA NYCTANTHES ARBOR TRISTIS LINN ...
SUPRIHATI
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
17
Untuk menentukan kadar Calcium disini kami
me
makai tjara Permanganometri ( 23 )v Dari larutan
dekok
10 fo diambil 5 cc dengan pipet volume dimasukkan
tabung
centrifuge, lalu ditambah larutan asam hydrochlorida en tjer dan dipanaskan diatas v/aterbad kemudian
ditambah
larutan ammonium oxalat ( 3>5 gram dalam ICO cc
aqua-
dest) berlebih sampai tidak terbentuk ondapan lagi.
La
rutan ini dibuat tepat basa pH 7-3 dengan menambah
la
rutan ammonium hydroksida entjer bertetes-tetes
dilihat
dengan kertas indikator. Disini kami tidak memakai
me-
tylred untuk melihat pH tepat basa karena warna methylred terganggu dengan warna dekok jang tjoklat kehitaman. Larutan ini kemudian dicentrifuge selama 15 menit. rutan diatas endapan dituang dan endapan ditjutji
La dari
ion oxalat dengan menambah aquadest kemudian dicentrifu ge dan larutan diatas endapan dibuang lagi.
Pentjutjian
ini dilakukan tiga kali berturut-turut* Endapan jang su dah bersih dari ion oxalat ini dilarutkan dalam sulfat ( 1 : 3 ) dan dititrasi dengan larutan
asam standard
KMn04 0,1 N, Penentuan kadar Calcium disini kami lakukan tiga kali tiap larutan dekok 10%, dan kami membuat
tiga
kali larutan dekok 10 $. C. Pert.iobaan dengan sediaan usus halus
marmut.
Pada pertjobaan ini kami pakai marmut jang di bunuh dengan djalan menjembelihnja. Hal ini
SKRIPSI
FARMAKODINAMI BUNGA NYCTANTHES ARBOR TRISTIS LINN ...
dilakukan
SUPRIHATI
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
1$
untuk menghindarkan pengaruh obat-obatan apabila memakai anesthasi umum, Marmut sebelum dipakai untuk
pertjobaan
harus puasa selama 12 djam, untuk mendapatkan
kontraksi
usus jang baik ( 7»12 ). Potongan usus halus
sepandjang
kira-kira 2 cm, udjung-udjungnja dikaitkan pada kait bawah dan atas jang terdapat pada tabung tengah dari
wa-
terbad Palmer. Selama pertjobaan suhu didjaga antara 3539°C dan pemberian udara dilakukan setjara teratur
de
ngan menggunakan pompa udara. Sebagai larutan medium di pakai larutan Tyrode dengan komposisi, ( 3 ) : HaCl
B
gram
K Cl
0,2
gram
CaCl^
0,2
gram
MgCl2
0,01 gram
KaH2P0 ^
0,05 gram
Dextrose dan NaHCO^ masing-masing 1 gram,kemudian dilarutkan dalam satu liter aquadest. Larutan Tyrode di atur tetap 50 cc dengan memberi tanda pada tabung,
ini
dimaksudkan untuk memudahkan menghitung dosis* Dosis la rutan dekok dan dekok sisa extraksi jang dipakai tiap pertjobaan ialah 1 cc, dengan konsentrasi 2^5,
untuk
5^,
10‘t>, dan 20';L Sedang larutan garam alkaloida dengan kon sentrasi 5^, 10 /3, 20>j, 40;.5, 100>j. Pada pertjobaan tjobaan ini digunakan djuga larutan Acetyl Choline
- par de
ngan konsentrasi 0,5 gamma tiap cc.
SKRIPSI
FARMAKODINAMI BUNGA NYCTANTHES ARBOR TRISTIS LINN ...
SUPRIHATI
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
19
Pada penelitian ini kami djuga mentjoba melakukan beberapa pertjobaan dengan Nyctanthes arbor tristis Linn pada usus halus kelintji. D* Port.iobaan dengan sediaan rahim marmut. Marmut jang dipakai dalam pertjobaan ini jaitu marmut betina jang belum pernah hamil atau ma3ih
virgin
( 3> 12 ). Sering kami mendapatkan kesukaran dalam
man-
tjari marmut jang betul-betul masin virgin, ini disebab kan karena pembiajaan jang amat terbatas, djuga
karena
kami belum berpengalaman membedakan narmut jang sudah pernah hamil atau melahirkan, dan jang masih
-
virgin*
Seperti pertjobaan terhadap usus halus,marmut di sini disembelih dulu, baru diambil rahimnja dan
dipo
tong kira-kira sepandjang 2 cm, udjung potongan
rahim
ini dikaitkan pada kait bawah dan atas dari t&bung
te-
ngah waterbad Falmer, Sebagai larutan medium dipakai la rutan Jalon ( 3, 12 ). Larutan jalon ialah suatu larutan mondifikasi larutan Tyrode dengan susunan : NaCl
9
gram
KC1
0,42gram
CaCl„
0,06gram
Dextrose
0,5 gram
Dilarutkan dalam aquadest ad satu liter, Pengisian larutan Jalon dalam tabung seperti
pertjobaan
terhadap usus sebanjak 50 cc, djuga pengaliran
SKRIPSI
FARMAKODINAMI BUNGA NYCTANTHES ARBOR TRISTIS LINN ...
udara
SUPRIHATI
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
20
dengan pompa dilakukan setjara teratur, Hanja suhu disi ni agak lebih rendah dari pada pertjobaan terhadap ialah diantara 30 -34 °C> karena menurut pengalaman
usus kami,
rahim marmut berkontraksi balk dan normal disekitar hu tersebut. Dosis dekok, dekok sisa ekstraksi
su
maupun
larutan garam alkaloida jang kami pakai untuk pertjobaan sebanjak 1 cc. Konsentrasi dekok jang kami tjoba
ialah
2j$, 55*t 10%, 20$, sedang konsentrasi larutan garam kaloida ialah 5$, 10$, 20$, 40$, 100$. Dalam
al
pertjobaan
terhadap rahim marmut ini sebagai larutan pembanding ia lah larutan Pitocin dengan dosis 0,002 unit tiap cc* Hasil pertjobaan dengan usus halus maupun
rahim
marmut kami amati pada gambaran jang terdjadi pada
ker
tas jang dihitamkan, jang dibuat oleh alat penulis
jang
berhubungan dengan kait jang ada pada usus maupun rahim.
SKRIPSI
FARMAKODINAMI BUNGA NYCTANTHES ARBOR TRISTIS LINN ...
SUPRIHATI