ABO vércsoport rendszer. Dr. Toldi József OVSZ Szegedi Regionális Vérellátó Központ

ABO vércsoport rendszer Dr. Toldi József OVSZ Szegedi Regionális Vérellátó Központ

Landsteiner, K.: Zur Kenntnis der antifermentativen , lytischen und agglutinierenden Wirkungen des Blutserums und der Lymphe. Zbl.Bakt., 27:357, 1900

Landsteiner, K.: Über Agglutinationserscheinungen normalen menschlichen Blutes. Klin. Wschr., 14: 1132, 1901 Landsteiner, K.: On individual differences of human blood Nobel prince, 1930

Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

Landsteiner felfedezésének jelentősége A fajon belüli - vérsejteken megjelenő polimorfizmus felismerése – Immungenetika

A savóban megjelenő antitestek jelentőségének felismerése – Biztonságos vérátömlesztés

Az agglutinációs technika alkalmazása a polimorfizmus vizsgálatában – Vércsoport szerológia Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

ABO vércsoport rendszer antigénjei  két antigén-tulajdonság négy vércsoportot határoz meg tesztsavók reakciói

kimutatott

vércsoport

anti-A

anti-B

antigén

1.

++++

-

A

‘A’

2.

-

++++

B

‘B'

3.

-

-

sem A, sem B

‘O'

4.

++++

++++

A és B is

‘AB'

 ABO vércsoport nevezéktana

- Landsteiner (ABO) – ISBT001 - haemagglutinogén – antigén - haemagglutinin - antitest


tulajdonság

Kétoldalas ABO vércsoport meghatározás reakciói  Landsteiner szabály az egyén savója normális körülmények között nem tartalmazhatja a saját vörösvérsejtjein található ABO antigén ellenes antitestet, de kötelezően tartalmazza a hiányzó antigén ellenes antitestet. A reagens reakciói az ismeretlen vörösvérsejttel - baloldali reakció – antigén kimutatás -

anti-A

anti-B

tesztsavó

-

kimutatott antigén

A reagens reakciói az ismeretlen savóval - jobboldali reakció – antitest kimutatás -

„A1”

„B”

- testvörösvérsejtek

kimutatott antitest

++++

-

A

-

++++

anti-B

-

++++

B

++++

-

anti-A

-

-

O

++++

++++

anti-AB

++++

A és B

-

-

sem anti-A sem anti-B

++++


ABO kompatibilitás - a Landsteiner szabály transzfúziós alkalmazása  Ottenberg szabály: ki – kinek adhat és ki kitől kaphat vért

Vörösvérsejtek

univerzális donor

Plazma (savó)

- A vörösvérsejt nem tartalmaz AB antigéneket

recipiens - A savó nem tartalmaz ABO antitestet

major kompatibilitás

minor kompatibilitás

- beteg savójának reakciója -

- a donor savójának reakciója -


ABO vércsoportok gyakorisága kaukázusi populáció

hazai megoszlás (Rex-Kiss B. 1971)*

Dél-Magyarországi populáció **

A

35 - 45%

44%

41,7%

O

35 - 42%

32%

31,6%

B

5 - 15%

16%

17,5%

AB

3 - 6%

8%

9,2%

* Rex-Kiss B., Horváth E.: Ergebnisse der Blut und Serumgruppen-Bestimmungen in Ungarn (Phenotypen-Genotypen-und Genfrequenzen). Z. Immun. Forsch., 141:449, 1971 ** Toldi J.: ABO vércsoportok megoszlása az első véradóknál (N=4029)

 Populációs eltérések: Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

- keletre utazva a ‘B’ antigén gyakorisága nő - a Dél-Amerikai indiánok csak ‘O’ vércsoportúak

Populációs eltérések az egyes vércsoportok megoszlásában

Forrás: P.L. Mollison Blood Transfusion in Clinical Medicine IX ed.


ABO vércsoportrendszer antigénjeinek öröklődése - az ABO, H, Se és Le gének kölcsönhatásai 9. q34

19. pter-q13.2

ABO génvariánsok A, A2, Ax, Am B, B2, Bx, Bm O

Se/se Le/le H/h

H/h, Se/se, Le/le és ABO gének kombinációi

a testnedvekben megjelenő vércsoport anyagok

a vörösvérsejten megjelenő antigének

H, Se, A/B, Le

H, A/B,Lea, Leb

H, A/B, Leb

H, Se, OO, Le

H, Lea, Leb

H, Leb

2.

H, sese, A/B, Le

Lea

H, A/B, Lea

20

3.

H, Se, A/B, le/le

H, A/B

H, A/B

9-10

h/h, se/se, A/B, Le

Lea

Bombay vércsoport, Lea

h/h, Se, A/B, Le

Lea

Parabombay vércsoport, Lea

extrém ritka

1.

4.

Megjegyzés: Normál „A” és „B” gének mellett a „H” antigén csak nyomokban van jelen a vörösvérsejteken Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

gyakoriság (%)

70

ABO génszerkezet - ősgén

297

526

657

A

C

C G

*A101

Arg

703

796

803

930

C G

G

Gly Leu Gly

176

235

266

268

- az ősgén variánsai 297

526

657

G

G

C T

*B101

703

796

803

930

A C

A

Gly

Ser Met Ala

176

235

266

268

261

^G

*O01

ter 118

 ABO gének felépítése: - 7 exon (a 6. és a 7. az un. kódoló régió)  eltérés az „A” géntől: - „B” 7 bázis párban (3 kódoló, 4 csendes változás) - „O” idő előtti stop kódon megjelenésében Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

Forrás: Blood Group Antigen Gene Mutation Database

ABO tulajdonság génszintű vizsgálat – az ABO gének bázissorrendjének hatása a polipeptid láncra -


ABO gének termékei – transzferáz enzimfehérjék • A1 transzferáz enzim

COOH

- Integrális membránfehérje (II. típus) - Glikoprotein (41kDa, 354 AS) - Intracelluláris rövid N rész - Transzmembrán hidrofób rész - Rövid enzimérzékeny szár rész - Hosszú extracelluláris C terminális rész - 1 N-glikozid kötés (Asn 113 ) NH2 Az emlősökre jellemző transzferáz enzim

• B transzferáz enzim - A1 transzferázhoz képest kritikus fontosságú eltérés a 226, 268 AS-ban


• O transzferáz enzim - 117 AS felépülő inaktív polipeptid

ABO antigének biokémiája

Forrás: W.A. Flegel: Grundlagen von Blutgruppenantigenen (2004)


ABO struktúra - az epitop szerkezetének vizsgálata A-vércsoport anyag

enzim degradáció

N-acetyl – galactoseamidase

UDP

Mn++

UDP-NacGal

Galactoseamidase

NAcGal

D-gal

H-vércsoport anyag GDP

Transzferáz aktivítás

B-vércsoport anyag

Fucosidase Mg++

GDP-Fuc

Fuc

Cukorlánc maradvány (ABH specifitás nélküli) Toldi J.:J.: A ABO vérhez vércsoport kapcsolódó polimorf jellegek genetikája, biokémiája molekuláris biológiai módszerekkel vizsgálva 2009 Toldi rendszer (OT2015)

Mn++

UDP-Gal

UDP

ABO struktúra - a belső szerkezet vizsgálata - módszer: savas hidrolízis, alkális degradáció • Terminális cukormolekula (epitop) • Cukorlánc maradvány (aktív hely) N-acetellaktozamin egység

H O

-1: Galβ1→3GlcNAcβ1→X -2: Galβ1→4GlcNAcβ1→X -3: Galβ1→3GalNAcα1→X -4: Galβ1→3GalNAcβ1→X -5: Galβ1→3Galβ1→X -6: Galβ1→4Galβ1→X

R

XIV pneumococcus specifitás

D O Z Ó

sejtmembrán

molekula : •GLIKOLIPID Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

•GLIKOPROTEIN

Az ABO struktúrákat hordozó molekulák szerkezete  G L I K O L I P I D (C E R A M I D) Glikoszfingolipidek

GLIKOPROTEIN 1. Ser/Thr- protein (O glikozid kapcsolt)

CERAMID -Szfingozin - zsírsav (2) 1. Rövid (5-15) cukrot tartalmazó lánc Neo-lacto-ceramid (Paraglobozid)

 Alkál labilis struktúra - Glikoforin A, B, C fehérje 2. Asn - protein (N glikozid kapcsolt)

2. Hosszú (~60) cukrot tartalmazó lánc polyglycosyl – ceramid struktúra


 Alkál stabil struktúra - Band 3 - Band 4.5 fehérje

“A” -alcsoportok  felfedezése ( Hirszfeld és Dungern, 1911): az megszokottól gyengébb agglutináció alapján (variáns meghatározás) Alcsoport tulajdonságú vérek szerológiai viselkedése  vörösvérsejtek reakciói “A1” (80%)

anti-A/anti-A+A1/ ++++

anti-A1 ++++

anti-H -

“A2” (20%)

++/+

-

++++

 a savó anti-A tartalmának vizsgálata adszorpció

felülúszó reakciója adszorpció után A1

A2

A1B

A2B

“A1”

teljes

-

-

-

-

“A2”

részleges

+

-

+

-


Transzferáz enzim aktivitás A1 és A2 vércsoport tulajdonság esetében

Forrás: H.S. Brunner Human Blood Groups II ed Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

- a vörösvérsejt anti-A antitest abszorpciójára képes - a savó nem tartalmaz anti-A antitestek

„A” alcsoportok alcsoport

kiemelet tulajdonság

a vörösvérsejt reakciói

vércsopor

anti-A

anti-A1

anti-H

t anyag

1

A1

referencia

++++

++++

-

A és H

A2

az A1-től némileg gyengébb egyértelmű pozitív reakció

++/+

-

++++

A és H

Aint

pozitív reakció mind az anti-A1, mind az anti-H-val

++++

++

++++

A3

kevert mező/véres háttér reakció az antiA és anti-A1-vel

++ (kevert mező)

++++

++ (kevert mező)

Ax

csak egyes anti-A váltanak ki gyenge agglutinációt

+/-

-

Am

anti-A csak kivételesen okoz agglutinációt

-/(+)

-

160.000-440.000

A201

* anti-A1 gyakoriság: 12% (A2), ~25% A2B vércsoport esetén

-

a) ~ 50% (A1); b) 116% (A1 és mód A2); c) ?(mód A2)

40 - 120.000

heterogén genetikai háttér

vörösvérsejtek kis hányada nagy, többsége alacsony sűrűségű "A" antigént tartalmaz

+/++

-

? (A1 és A2-től eltérő transzferáz aktivitás)

agglutinált: 1022000 / szabad: 79000

Ax01/Ax03

az anti-AB reagenssel kifejezett reakció

++++

-

AmA1 , AmA2

100 -1900

a vörösvérsejtek kevesebb mint 5%-a hordoz A antigént

-

nincs mérhető Atranszferáz aktivitás

2100 - 2700

vörösvérsejtek kis hányada nagy, többsége alacsony sűrűségű "A" antigént tartalmaz

bantu populációban: 4%

nincs mérhető Atranszf. aktivitás

A bantu

az A3-hoz hasonló reakciók

A lae

lectin abszorbció / anti-A elució

magyarázat: 1= szekretor gén esetén. 2= az anti-B mellett megjelenő antitest;


megjegyzés

A2 (gyengéb aktivitás)

Aend - hez hasonló viselkedés

csak gyenge anti-A adszorbcióra képes

transzferázt kódoló gén A101

A finn

Ay

transzferáz enzim "A" antigén (aktivitás az A1sűrűség a hez viszonyítva)) vörösvérsejten 1 - 1.500.000

A end

csak anti-A adszorbcióra képes

savóban2

populációs eltérések

A1

gyenge - abnormális A3-ra jellemző reakciók

A el

antitest a

anti-A1* lappok: 34-50% fekete bőrű populáció: 30%, egyéb populáció: 3%

anti-A1

anti-A1

anti-A1

100 - 1400

Ael01

a vörösvérsejtek kevesebb mint 5%-a hordoz A antigént

100 - 1900 Cad vércsoport gyenge formája

ABO tulajdonságra történő vizsgálat - esetismertetés Utolsó véradása alkalmával nem meghatározható ABO vércsoport eredmény. Előzetesen 3 alkalommal vércsoportja „O” RhD poz.

• V2011_042 gyerek Id: 11v042 - ABO

Az eredmény kiértékelése: O1: pozitív; B: pozitív ABO genotípusa: BO1 genotípus A genetikai vizsgálat alapján ABO vércsoportja „B” • V2011_047 anya

• V2011_048 apa Id: 11v047 - ABO

Id: 11v048 - ABO

Az eredmény kiértékelése: O1: pozitív; B: pozitív

Az eredmény kiértékelése: O2: pozitív; B: pozitív

ABO genotípusa: BO1 genotípus

ABO genotípusa: BO2 genotípus

A genetikai vizsgálat alapján ABO vércsoportja „B”

A genetikai vizsgálat alapján ABO vércsoportja „B”


“A” alcsoportok transzfúziós jelentősége  a gyenge reakciók csoporttévesztést eredményezhetnek,  az irreguláris anti-A1 antitest ritkán 37oC-on is aktív

Transzfúziós javaslatok  ha a csoport egyértelműen tisztázható és a savóban nincs irreguláris antitest, “A” vér adása javasolt

 ha a csoport egyértelműen tisztázható, de a savóban irreguláris anti- A1 antitest van, “A2” vagy “O” vér adása javasolt  ha a csoport nem tisztázható egyértelműen, a beteg csak “O” vért kaphat

 ha a csoport “A1” és a savó irreguláris anti-H tartalmaz “A1” vér adása javasolt Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

 H antigén  a 19 kromoszómán található „H” gén terméke  csaknem minden vörösvérsejten megtalálható – az „A” és „B” antigének prekurzor anyaga, mennyisége azokkal fordítottan arányos  Antitestjei tipikus hidegantitestek

 Bombay vércsoport /1952/  Vörösvérsejtjeiről hiányoznak az „A”, B” és „H” antigének  savója minden ABO csoportú vérrel reagál (anti-A, anti-B és anti-H tartalmaz)  a Bombay elnevezés az első ilyen tulajdonságú vér megjelenésének helyére utal (Bhende, Y.M és mtsai: Lancet 1952,1,903)

 Öröklődését a receszív „h” gén homozigóta formában való előfordulása magyarázza (Watkins, V.M., Morgan, W.T.J.: Vox Saq. 1955,5,1)

 a Bombay tulajdonságú egyének 9. kromoszómáján megtalálhatok a szülőktől örökölt ABO gének és azokat utódaiba is átörökítik (Levine, J. és mtsai: Blood 1955(10):1100-1108)  Transzfúzió esetén csak auto-transzfúziót, vagy egy másik Bombay csoportú egyén vérét kaphatja  hazai előfordulás: J. Neuhauser, A. Frisss, J. Losonczy, E. Csató Első magyarországi Bombaycsoportú vér ismertetése (előzetes közlemény) Orv Hetil 1981; 122(7):381-2 Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

 A B H antigének a vörösvérsejten kívül  alkoholban oldható antigénként - minden az ABH gének számára aktív helyet ( N-acetil laktozamin) hordozó sejten ( fehérvérsejt, thrombocyta, szöveti sejtek) megjelennek.

 vízben oldható vércsoport anyagok - megjelenésük a domináns öröklődést mutató Se (FUT2) génhez kötött  a vércsoport anyagok a megfelelő anti-A és anti-B tesztsavók neutralizációjára képesek  kimutathatók a testnedvekből, mint a nyál, emésztőnedvek, tej, vizelet stb.

Az ABO antigének kifejeződésének sokfélsége az emberben célsejtek

ABH aktív struktúra glikoszfingolipid

Vörösvérsejt, fehérvérsejt, thrombocyta

aktív hely cukorlánc típusa

Cukor - Lipid /Protein kötés

kémiai szerkezet

rövid (5-15) lánc

Neo-Lakto - ceramid (Paraglobozid Polyglycosylceramid

type 2, 1, 3(A1), 4 hosszú (~60) lánc

glikoprotein

type 2

Szérum

glikoszfingolipid

type 1

Szekrétum

glikoprotein

type 1, type 2

Szöveti sejtek glikoszfingolipid

type 1 (endoderm), type 2 (ekto-, mezoderm)

ABH antigének aránya vörösvérsejten

5% 20% 1

O-glikozid

glikoforin A

0%

N-glikozid

band-3

60%

band 4,5

15%

endoderm eredetű sejtek termékei, kifejeződésüket a Se és Le gének határozzák meg O-glikozid

glikoprotein

-

glikolipid

-

1=a legújabb vizsgálatok eredményei szerint a glikoforin-A molekulán nem fejeződnek ki ABH antigén tulajdonságok Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

Környezeti hatások normál ABO génekre  ABO antigének megváltozott kifejeződése a vörösvérsejten - leukémiás és tumoros betegedésekben az A, B antigén az I és P antigénekkel egyetemben gyengülhet.  szerzett B antigén


Szerzett B antigén  Szerzett B tulajdonság jellemzői: o

eltérés a Landsteiner szabálytól

o

A vércsoport

o

idős kor – nőkben gyakoribb

o

malignus betegség a diagnózisban

o

visszafordítható folyamat

o

csak bizonyos anti-B reagensek reagál

A1

B

Gal(1

B

PCR

A szerzett B tulajdonság kialakulásának mechanizmusa

H

A2

hiányzó B gén

Gal(1 4)GlcNAc-R 1.2 Fuc

3)Gal(1 4GlcNAc-R

A

GalNac(1 3)Gal(1 4GlcNAc-R

egy biokémiai folyamatban az NacGal változást szenved (deacetilizáció)

Gal

maradvány Gal(1

3)Gal(1 4GlcNAc-R

egyes anti-B reagenssel reakcióra képes

szerzett B antigén Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

P1

P2

P3

ABO vércsoport rendszer antitestjei • a születést követően 3 – 6 hónappal jelennek meg • a megjelenésük az újszülött bélflórájával mutat összefüggést • a ritka kivételektől eltekintve minden ember savója tartalmazza a vörösvérsejtjeiről hiányzó antigén ellenes antitestet (Landsteiner szabály)

• kivételek: újszülöttek, súlyos betegek, idős személyek • az ABO antitestek minden esetben IgM és IgG típusú molekulák keverékei • az ABO antitestek szerológiai jellemzői:

Ig osztályra jellemző antitest tulajdonság

IgM molekula

IgG molekula

reakció hőoptimum

4 - 22ºC

22 - 37ºC

komplementkötő képesség

igen

igen

felerősődik

felerősődik

felerősődik

változatlan

igen

nem

igen

nem

igen

nem

természetes antitestként is jelen van

igen

igen

terhességben koncetrációja növekszik

nem

igen

reakció erősség változása

enzimtesztben

hőmérséklet csökkentésével hatása AB vércsoport anyaggal neutralizálható 2-ME hatása (2 Merkapoethanol) inaktiválható DTT (dithiothreitol)


Titer változás életkorral

Forrás: P.L. Mollison Blood Transfusion in Clinical Medicine IX ed. Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

Titer változás idős korban anti-B titerváltozás (A vércsoport) - százalékos arányok

anti-A titerváltozás (B vércsoport) - százalékos arányok

70 év felett, N=103

30

70 év felett, N=37

30

donorok N=96

25

donorok, N=140 25

20

20 15

15

10

10

5

5

0

0

0

2

4

8

16

32

64

128

256

0

2

4

8

16

32

64

128

256

anti-AB titerváltozás (O vércsoport) - százalékos arányok idősek (anti-A), N=62

35

idősek (anti-B) 30

donorok (anti-A), N=106 donorok (anti-B)

25 20 15 10 5 0 0


2

4

8

16

32

64

128

256

Forrás: Toldi J.: ABO titerváltozás idős korban; Transzfúzió 37.:95-99 (2004)

ABO vércsoportrendszer jelentősége  transzfúziós  transzplantációs  igazságügyi orvostan  populációs genetikai  antropológiai

Transzfúziós jelentősége  az ABO antitestek

 regulárisan jelen vannak a savóban  reakciókban komplement aktiválásra képesek

 az ABO HTR klinikai megnyilvánulása • azonnali súlyos – életveszélyes reakció • jellemző tünetek: ágyékra, mellkasra lokalizálódó fájdalom • objektív lelet: shock, akut, majd krónikus veseelégtelenség Toldi J.: ABO vércsoport rendszer (OT2015)

ABO vércsoport rendszer. Dr. Toldi József OVSZ Szegedi Regionális Vérellátó Központ

Recommend Documents