Esettanulmányok
Dr. Toldi József OVSZ Szegedi Regionális Vérellátó Központ
Esetismertetések: ABO vércsoport meghatározással kapcsolatos nehézségek és megoldások
RhD bizonytalanság kivizsgálása Antitest-azonosítással kapcsolatos esetek elemzése
Transzfúziós szövődmény kivizsgálása Transzfúziós Szabályzat
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Az ABO meghatározás alapja: a Landsteiner szabály Az egyén savója normális körülmények között nem tartalmazhatja a saját vörösvérsejtjein található ABO antigén ellenes antitestet, de kötelezően tartalmazza a hiányzó antigén ellenes antitestet.
vörösvérsejt vizsgálata
vér csoport
anti-A
A
4+
n
B
n
O AB Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
anti-B anti-AB
a savó vizsgálata AK
A1
A2
B
O
4+
n
n
n
4+
n
4+
4+
n
4+
4+
n
n
n
n
n
n
4+
4+
4+
n
4+
4+
4+
n
n
n
n
n
ABO meghatározás hibaforrásainak osztályozása I. Pozitív autokontroll reakció
II. Eltérés a Landsteiner szabálytól 1.
2.
Plusz reakció előfordulása a.
baloldali vércsoport meghatározásban
b.
jobboldali vércsoport meghatározásban - ABO antitest kimutatás
Hiányzó reakció előfordulása a.
baloldali vércsoport meghatározásban - ABO antigén kimutatás
b.
jobboldali vércsoport meghatározásban - ABO antitest kimutatás)
III. Kevertmezős reakció Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
- ABO antigén kimutatás
ABO vércsoport meghatározás nehézségei 1. 1. Eset (B.E.) – öröklött gyenge „A” vércsoport tulajdonság • 69 éves • Dg: Tu • transzfúziós anamnézis: negatív vörösvérsejt vizsgálata A beküldő eredményei
a savó vizsgálata
anti-A
anti-B
anti-AB
AK
A1
A2
B
O
n
n
n
n
n
n
4+
n
A vércsoport tisztázás menete Háromhőmérsékletes laboratóriumi vércsoport vizsgálat
technika megjegyzés: Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
anti-A
anti-B
anti-AB
AK
A1
A2
B
O
Biotest
±/+
n
±/+
n
n
n
4+
n
Human
±/+
n
±/+
n
n
n
4+
n
Pasteur
+
n
+
n
n
n
4+
n
lemezes és csöves módszer - a reakciók 4ºC és 22ºC észlelhetők 37ºC-on negatív, - az anti-A és anti-AB reakciók erőssége közel azonos
1. Eset (B.E.) – öröklött gyenge „A” vércsoport tulajdonság Hidegagglutinin vizsgálat
negatív
Direkt Coombs vizsgálat (DAT)
negatív anti-A1
n
anti-H
4+
"A" alcsoport vizsgálat
Abszorbció - elúciós vizsgálat
az ismeretlen vörösvérsejt anti-A antitestet köt az eluátum A1 vvs-t agglutinált
A szekretor statusz vizsgálata
a nyálból "A" és "H" vércsoport anyag mutatható ki.
Vélemény: A vizsgált személy vércsoportja „A” alcsoport („Am”)
• azonos erősségű reakciók az anti-A és anti-AB savókkal • az irreguláris anti-A1 hiánya • „A” és „H” vércsoportanyag a nyálban Transzfúziós javaslat: Transzfúzió esetén „A” vércsoport javasolt. Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
ABO vércsoport meghatározás nehézségei 2. 2. Eset (K.K.) – szerzett gyenge „A” vércsoport tulajdonság • 45 éves • Dg: ITP • transzfúziós anamnézis: pozitív vörösvérsejt vizsgálata
a savó vizsgálata
anti-A
anti-B
anti-AB
AK
A1
A2
B
O
n
ntd
ntd
n
n
n
n
n
1.
technika
Mikroplate módszer
reagens
Biotest Erytype ABD
ismételt vizsgálat - más módszerrel vörösvérsejt vizsgálata 2.
a savó vizsgálata
anti-A
anti-B
anti-AB
AK
A1
A2
B
O
n
n
1+
n
n
n
n
n
technika Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Oszlopagglutinációs módszer
reagens
Ortho BioVue ABD
2. Eset (K.K.) – szerzett gyenge „A” vércsoport tulajdonság A vércsoport tisztázás menete Háromhőmérsékletes laboratóriumi vércsoport
anti-A
anti-B
anti-AB
AK
A1
A2
B
O
Pasteur
n
1+
1+/ 2+
n
n
n
n
n
SNBTS
n
1+
n
n
n
n
n
n
DiaGast
n
±/+
n
n
n
n
n
n
lemezes és csöves módszer
technika
Hidegagglutinin vizsgálat
negatív
Direkt Coombs vizsgálat (DAT)
negatív anti-A1
n
anti-H
4+
"A" alcsoport vizsgálat
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Abszorbció
sem "A" ; sem "B" titercsökkenés nem történt
Elúció
az eluátum anti-B antitestet tartalmaz
A szekretor státusz (haemagglutináció gátlás)
a nyálból "A" és "B" vércsoport anyag mutatható ki.
2. Eset (K.K.)* – szerzett gyenge „A” vércsoport tulajdonság • 45 éves • Dg: ITP • transzfúziós anamnézis: pozitív • ITP-s betegnél AML-a alakult ki. Vélemény: A vizsgált személy vércsoportja „AB” • nyál „A” és „B” vércsoportanyagot tartalmaz Transzfúziós javaslat: ?(„AB”; „O”)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
* Vezendi K., Toldi J., Varga Gy., Lázár Gy. : Vércsoport-meghatározás nehézsége acut leukaemiában; Transzfúzió 32,139-141(1999)
Plusz reakció a baloldalon – szerzett „B” vércsoport vörösvérsejt vizsgálata
a savó vizsgálata
vér csoport
anti-A
anti-B
anti-AB
AK
A1
A2
B
O
A
poz
1+→2+
poz
neg
neg
neg
poz
neg
A1
A2
B
O
P1 P2
Szerzett B tulajdonság jellemzői:
Tisztázás
o A vércsoport
Az anti-B savó megválasztása
o
idős kor –nőkben gyakoribb
o Malignus betegség a diagnózisban o Visszafordítható folyamat o
csak bizonyos anti-B reagensek reagálnak
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Génszintű vizsgálatok
PCR - hiányzó B
Plusz reakció a jobboldalon - Bombay vércsoport vörösvérsejt vizsgálata
a savó vizsgálata
vér csoport
anti-A
anti-B
anti-AB
AK
A1
A2
B
O
A
neg
neg
neg
neg
poz
poz
poz
poz
A1 Anti-H lektin
A2
B
O
O
O
- hiányzó H
PCR Csató E., Losonczy J., Friss A., Neuhauser J.: Első magyarországi Bombay-csoportú vér ismertetése (Előzetes közlemény) Orv. Hetil. 122(7):381-2(1981)
- jelenlévő B
O1B genotípus Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
ABO tulajdonsága génszintű vizsgálata (PCR-SSP) • Szerológia vizsgálat eredménye vörösvérsejt vizsgálata A beküldő eredményei
1. Ael vércsoport (AO1 genotípus ) a savó vizsgálata
antiA
antiB
antiAB
AK
A1
A2
B
O
n
n
n
n
n
n
4+
n
Id: 12v010 - ABO
Id: 12v010 – ABO sub
1.Az eredmény kiértékelése: ABO-SSP: O1: pozitív; non O1: pozitív; non O2: pozitív; non B pozitív; non A2: pozitív (A O1 genotípus) ABO subtype: Ael01: pozitív 1.Az eredmény leírása: A genetikai vizsgálat alapján a nevezett személy ABO genotípusa: AO1; Vércsoportja: gyenge „A” (Ael01 pozitív) 1.Transzfúziós szempontból, mint donor és potenciális recipiens
gyenge A vércsoportnak (Ael) tekinthető. Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
ABO tulajdonsága génszintű vizsgálata (PCR-SSP) 2. B vércsoport (BO2 genotípus ) Id: 11v048 - ABO
o Az eredmény kiértékelése: O2: pozitív; B: pozitív (O2B genotípus) o Az eredmény leírása: A genetikai vizsgálat alapján ABO vércsoportja „B” o Transzfúziós szempontból a PCR és szerológiai vizsgálatok alapján,
mint donor és potenciális recipiens gyenge B vércsoportnak tekinthető.
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
RhD bizonytalanság kivizsgálása 1. Eset (xy) • kérés: RhD tisztázás • beküldő eredménye: nincs • transzfúziós anamnézis: nincs
RhD tisztázás módszer
inkubáció
reagens
Lemezes albumin technika lemezes papainos technika
37ºC
Human
±/+
22ºC
Human
±/+
IDAT
37ºC
Biotest
1+
Rh fenotípus
• A kapott eredmények kiértékelése
ccee
Rh fenotípus gyakoriság
Rh fenotípus gyakoriság
ccee
14,40%
cde
13%
ccDee
2,10%
cDe
3%
• Utólagos információ: a betegágy melletti RhD pozitív meghatározást követően a beteg 2E keresetlen „A” RhD pozitív vért kapott • Vélemény • az RhD meghatározás eredménye nem egyértelmű • a beteg nagy valószínűséggel RhD negatív • 12 hét múlva RhD ismétlés javasolt • transzfúzió esetén RhD negatív vér adása javasolt • anti-D védőoltás adása az Rh izoimmunizáció kivédésére nem javasolt Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
RhD tulajdonsága génszintű vizsgálata (PCR-SSP) 1. RhD negatív – HYB pozitív Id 11v005
2. RhD pozitív – Dd genotípus Id 11vF07 Dd contr.
1.
Gél-kép Id: 11v006
2.
Az eredmény kiértékelése: a. RHD gén: D pozitív b. RHCE gén: C pozitív, c pozitív, E pozitív, e pozitív
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Antitest azonosítás vizsgálati eljárás eredmény leolvasása OVK Rh panel fenotípus
inkubáció alacsony ionerősségű közeg (LISS)
Enzimteszt
Indirekt - IDAT
direkt
Indirekt - IDAT
direkt
1. savó 2. savó 3. savó 1. savó 2. savó 3. savó 1. savó 2. savó 3. savó 1. savó 2. savó 3. savó
1.
CCDee
n
+/-
n
2+
n
1+
3+
1+
1+
4+
1+
2+
2.
ccDEE
n
+
n
2+
1+
1+
3+
2+
2+
4+
2+
3+
3.
Ccee
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
4.
ccEe
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
5.
Ccee
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
6.
ccDee
n
+/-
n
2+
n
+/-
3+
1+
1+
4+
1+
3+
7.
CCwDee
n
+/-
n
2+
1+
2+
3+
2+
3+
4+
1+
3+
8.
Ccee
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
9.
CcDEe
n
+/-
n
3+
n
2+
3+
n
2+
4+
n
3+
10.
ccEe
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
n
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
1. savó (A.E. terhes; 614/96) • „A” Rh negatív, Rhf: ccee • anti-D; 16 • transzfúziós anamnézis – 1993 műtét • betegágy melletti vércsoport: „A” Rh+ • 2E „A” Rh+ transzfúzió • 7 napra: IDAT-, DAT• 2 hónapra IDAT-, DAT– 1996 I. terhesség • Anti-D max. titer 1/16384 • újszülött „A” Rh+; Ccee • DAT+ • 2x EST – 1997 II. terhesség • anti-D+C; 1024, 2048
• Vélemény szekunder immunizációra jellemző IgG típusú immunválasz Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Rh f
liss
IDAT
pl
plagt
CCDee
n
2+
3+
4+
ccDEE
n
2+
3+
4+
Ccee
n
n
n
n
ccEe
n
n
n
n
Ccee
n
n
n
n
ccDee
n
2+
3+
4+
CC Dee
w
n
2+
3+
4+
Ccee
n
n
n
n
CcDEe
n
3+
3+
4+
ccEe
n
n
n
n
Rh f
liss
IDAT
pl
plagt
CCDee
+/-
n
1+
1+
ccDEE
+
1+
2+
2+
• Anti-D
Ccee
n
n
n
n
• Transzfúziós anamnézis
ccEe
n
n
n
n
Ccee
n
n
n
n
ccDee
+/-
n
1+
1+
CC Dee
w
+/-
1+
2+
1+
Ccee
n
n
n
n
CcDEe
+/-
n
n
n
ccEe
n
n
n
n
2. savó (T.I.M. terhes; 617/96) • „A” Rh negatív, Rhf: ccee
– 1996 I. terhesség • Újszülött vércsoport „A” Rh+ • DAT negatív (G-, C3d-)
• Vélemény Friss immunizációra jellemző IgM típusú primer immunválasz
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
3. savó (E.V. szülőnő; 428/96) • „O” Rh negatív, Rhf: ccee •
anti-D
• transzfúziós anamnézis – 1996 I. terhesség • Újszülött vércsoport „O” Rh+ • DAT negatív • 1996. 05.02 anti-D védőoltást kapott
• A vizsgálat ideje: 1996. 05.13
• Vélemény Passzívan bevitt anti-D antitest a savóban Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Rh f
liss
IDAT
pl
plagt
CCDee
n
1+
1+
2+
ccDEE
n
1+
2+
3+
Ccee
n
n
n
n
ccEe
n
n
n
n
Ccee
n
n
n
n
ccDee
n
+/-
1+
3+
CC Dee
w
n
2+
3+
3+
Ccee
n
n
n
n
CcDEe
n
2+
2+
3+
ccEe
n
n
n
n
Transzfúziós szövődmény kivizsgálása • a beteg adatai • a bejelentés ideje, módja • a bejelentő orvos • a szövődmény rövid leírása
A szerológiai vizsgálat menete I.
Az ABO tévesztés kizárása - beteg vércsoportjának ismétlése
- a donor vércsoportjának ismétlése - a donor DAT (direkt Coombs) vizsgálata
II. A klinikailag jelentős antitestekkel kiváltott szövődmény kizárása - a beteg savójának megismételt antitest vizsgálata - a laboratóriumi vérválasztás megismétlése
III. A beteg DAT (direkt Coombs) vizsgálata Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Transzfúziós szövődmény kivizsgálása - esetismertetés • A szövődmény leírása: koraszülött, 3 alkalommal már transzfúziót kapott. Szövődménye nem volt. A transzfúziót követően 8 órára besárgult, egyéb tünetek nincsenek, labor folyamatban. Transzfúziót megelőző követő mintából I. Az ABO tévesztés kizárása - a beteg vércsoportjának ismétlése
„A” RhD+
- a donor vércsoportjának ismétlése
„A” RhD+ „A” Rh+
- a donor DAT (direkt Coombs) vizsgálata
negatív
II. A klinikailag jelentős antitestek kizárása - a beteg megismételt antitest vizsgálata
negatív
- a laboratóriumi vérválasztás megismétlése
negatív Transzfúziót megelőző követő mintából
III. A beteg DAT (direkt Coombs) vizsgálata Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
negatív
negatív
Transzfúziós szövődmény kivizsgálása - esetismertetés IV. Szerológiai szakvélemény •
ABO tévesztés nem történt
• a beteg savója antitestet nem tartalmaz • a megismételt keresztpróba negatív • a keringésében antigén-antitest fedettség nem
mutatható ki (DAT negatív)
A fenti eredmények alapján a transzfúziós szövődmény immunológiai eredete nagy valószínűséggel kizárható.
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2015)
Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)
Toldi J.: Esetbemutató (OT2007)
