Mendelova univerzita v Brně Agronomická fakulta Ústav výživy zvířat a pícninářství
Vliv tréninku na změny parametrů vnitřního prostředí koní Diplomová práce
Vedoucí práce:
Vypracovala:
prof. Ing. Ladislav Zeman, CSc., dr. h. c. Brno 2016
Bc. Tereza Polesová
Čestné prohlášení
Prohlašuji, že jsem práci: Vliv tréninku na změny parametrů vnitřního prostředí koní vypracoval/a samostatně a veškeré použité prameny a informace uvádím v seznamu použité literatury. Souhlasím, aby moje práce byla zveřejněna v souladu s § 47b zákona. 111/1998 Sb., o vysokých školách ve znění pozdějších předpisů a v souladu s platnou Směrnicí o zveřejňování vysokoškolských závěrečných prací. Jsem si vědom/a, že se na moji práci vztahuje zákon. 121/2000 Sb., autorský zákon, a že Mendelova univerzita v Brně má právo na uzavření licenční smlouvy a užití této práce jako školního díla podle § 60 odst. 1 autorského zákona. Dále se zavazuji, že před sepsáním licenční smlouvy o využití díla jinou osobou (subjektem) si vyžádám písemné stanovisko univerzity, že předmětná licenční smlouva není v rozporu s oprávněnými zájmy univerzity, a zavazuji se uhradit případný příspěvek na úhradu nákladů spojených se vznikem díla, a to až do jejich skutečné výše.
V Brně dne: 25. 4. 2016
…………………………………………………….. podpis
PODĚKOVÁNÍ Chtěla bych poděkovat všem, kteří mi pomáhali a poskytovali odborné poznámky, zejména chci poděkovat vedoucímu diplomové práce
prof. Ing.
Ladislav Zeman, CSc., dr. h. c. za zájem, připomínky a čas, který věnoval mé práci a dále také rodině a mému příteli za podporu a trpělivost.
ABSTRAKT POLESOVÁ T.: Vliv tréninku na změny parametrů vnitřního prostředí koní. Diplomová práce, MENDELU, Brno, 2016, 64 s. Cílem této diplomové práce bylo posouzení vnitřního prostředí dostihových koní v závislosti na zátěži. Pokus byl proveden u deseti koní plemene anglického plnokrevníka. Tyto koně byli připravováni v tréninku pro rovinové dostihy. Odběry krve pro analýzu se prováděly v klidu, 5 a 30 minut po zátěži. Analýza byla provedena pomocí metabolického profilového testu. Byly sledovány biochemické a hematologické parametry koní. U všech koní byly zjištěny vysoké hodnoty selenu od 278,62 do 337,48 µmol/l. Z biochemických parametrů byla u kreatinkinázy v klidu zjištěna nejvyšší hodnota 8,13 μkat/l, 5 minut po zátěži byla v rozmezí od 3,72 – 8,23 μkat/l a 30 minut pak v rozmezí 3,01 - 12,88 μkat/l . Laktát byl v klidu stanoven na nejvyšší údaj 6,58 mmol/l, po 5 ti minutách od zátěže se jeho hodnoty u všech testovaných koní zvýšily až na nejvyšší naměřenou hodnotu 8,98 mmol/l. Také faktor LDH se 5 minut po zátěži zvýšil od klidového stavu až na nejvyšší naměřenou hodnota 9,97 µkat/l. Intenzivní trénink dostihových koní způsobuje, že se sledované parametry po 30 minutách od zátěže nevracejí do normálních hodnot. Většina sledovaných parametrů, obzvláště biochemických, překračuje horní minimum referenčních hodnot. Z toho usuzujeme, že by bylo vhodné upravení referenčních hodnot a norem pro anglického plnokrevníka v zátěži.
Klíčová slova: plnokrevník, dostihy, metabolický profilový test, krevní plazma, referenční hodnoty.
THE ABSTRACT POLESOVÁ T.: Effect of training on changes in the parameters of the internal environment of horses. Diploma thesis, MENDELU, Brno, 2016, 64 p. Objective of this diploma thesis was to evaluate internal environment of racehorses according to physical load. Experiment was done on ten english thoroughbred horses. These horses were prepared in training for the plain racing. Blood collections for analysis were done at rest, 5 and 10 minutes after physical load. Analysis were done by metabolic profile test. Biochemical and hematologic measurements were studied on horses. All horses showed high values of selen, from 278,62 to 337,48 µmol/l. Thanks to biochemical measurements, at creatine kinases, the biggest value that was find out was 8,13 µkat/l at rest, after 5 minutes of rest, it was in range of 3,72 - 8,23 µkat/l and after 30 minutes, in range between 3,01 12,88 µkat/l. At rest the lactate was established at biggest value 6,58 mmol/l, after 5 minutes of rest values on all tested horses increased to biggest measured value 8,98 mmol/l. Factor LDH has increased too, after 5 minutes of rest it has increased from the standing point to the biggest measured value at 9,97 µkat/l. Intensive training of race horses causes that the tracked measurements aren’t going back to the optimal values after the 30 minute rest. Majority of tracked measurements, especially biochemical, exceeds upper minimum of reference values. We conclude that it would be appropriate adjusting the reference values and standards for english thoroughbred in physical load.
Keywords: thoroughbred, racing, metabolic profile test, blood plasma, reference value.
OBSAH Obsah .....................................................................................................................7 1 ÚVOD .................................................................................................................8 2 CÍL PRÁCE .........................................................................................................9 3 LITERÁRNÍ PŘEHLED ................................................................................... 10 3.1 Anglický plnokrevník ................................................................................. 10 3.2 Dostihový sport .......................................................................................... 11 3.2.1 Druhy dostihů ..................................................................................... 11 3.2.2 Jockey club České republiky ............................................................... 12 3.2.3 Trenéři ................................................................................................ 13 3.2.4 Jezdci dostihových koní ...................................................................... 13 3.3 Trénink dostihových koní ........................................................................... 14 3.4 Charakteristika krve ................................................................................... 18 3.4.1 Erytrocyty ........................................................................................... 19 3.4.2 Leukocyty ........................................................................................... 19 3.4.3 Krevní destičky ................................................................................... 20 3.4.4 Chemické složení krve ........................................................................ 20 3.5 Referenční hodnoty parametrů u koní ......................................................... 25 3.6 Faktory ovlivňující krevní parametry .......................................................... 26 4 MATERIEÁL A METODIKA ............................................................................ 27 4.1 Vyšetření krve ............................................................................................ 29 5 VÝSLEDKY A DISKUZE ................................................................................. 31 6 ZÁVĚR ............................................................................................................. 35 7 SEZNAM POUŽITÉ LITERATURY ................................................................. 36 8 SEZNAM TABULEK, GRAFŮ, OBRÁZKŮ .................................................... 40 9 SEZNAM ZKRATEK ........................................................................................ 41 10 PŘÍLOHY ....................................................................................................... 42
1 ÚVOD Dostihový sport je samostatné sportovní odvětví, které se odlišuje od jezdeckého sportu. Dostihy jsou ve světě velmi oblíbené a to především ty rovinové. V České republice je oblíbenost rovinových a překážkových dostihů přibližně na stejné úrovni. Pořádají se na dostihových závodištích, kterých je v ČR v dnešní době 12. Dostihový provoz řídí organizace Jockey club České republiky. Početní stavy koní se v posledních letech začaly mírně zvyšovat a to zejména pro sportovní využití. Právě anglický plnokrevník, jakožto druhé nejpočetnější koňské plemeno v naší republice, je k dostihům nejvhodnější. Koně, kteří jsou připravováni pro dostihy, musejí čelit velmi vysoké fyzické zátěži. Proto je velmi důležitý pravidelný a adekvátní trénink koní. Trénink má pod kontrolou trenér, který představuje nejdůležitější článek v přípravě koní pro dostihy. Trenér rozhoduje o náročnosti tréninku, pečuje o své svěřence jak po fyzické tak i psychické stránce. Metabolický profilový test koní je skupinové hodnocení, které se využívá převážně
u
hospodářských
zvířat.
Výstupní
sestava
zahrnuje
výsledky
biochemických a hematologických hodnot u každého zvířete, staticko matematické zpracování individuálních hodnot zvířat v rámci skupiny a jejich grafické porovnání s fyziologickým rozmezím. Laboratorní diagnostika poskytuje vždy objektivní informace o zdravotním stavu jedince. Metabolický profilový test, který je prováděný z krevní plazmy nebo séra, by měl být schopen pomoci včas zachytit zdravotní problémy nebo např. i snížený výkon u koní. A právě výkonnost a zdraví je u dostihových koní nejdůležitější.
8
2 CÍL PRÁCE Cílem této práce bylo posouzení vnitřního prostředí dostihových koní plemene anglického plnokrevníka v závislosti na zátěži při tréninku (0, 5 a 30 minut po zátěži). Práce byla zaměřena na biochemické a hematologické parametry vnitřního prostředí koní, které byly zjišťovány z krve. Výsledky byly vyhodnoceny prostřednictvím metabolického profilového testu. Po zátěži byly pak zejména sledovány enzymy (AST, ALT, LDH, GMT, LAKTÁT, CK).
9
3 LITERÁRNÍ PŘEHLED 3.1 Anglický plnokrevník Anglický plnokrevník je nejrychlejší kůň na světě, vynikající stavby těla a velké výkonnosti. Je to typicky dostihový a sportovní kůň, vyžadující intenzivní péči a dokonalý trénink. Jsou známí svou odvážnou, bojovnou a aktivní povahou (HERMSEN, 2002). Anglickým plnokrevníkem se pro účely dostihové sportu rozumí teplokrevný kůň, který má v prvních pěti generacích minimálně 51% krve anglického plnokrevníka (JOCKEY CLUB České republiky, 1995). Všeobecně je plnokrevník ušlechtilý, elegantně stavěný kůň. Jeho tělo je svalnaté, silné a přesto jemné. Hlava je ušlechtilá s rovným profilem a bystrým okem. Dlouhý nízko nasazený krk je mírně klenutý a přechází ve výrazný kohoutek. Hřbet je kratší a pevný. Záď je dobře vázaná a silná, bývá rovná nebo mírně sražená (HERMSEN, 2002). Zadní nohy jsou dlouhé, s velmi dobře utvářenými hlezenními klouby, které umožňují maximální sílu odrazu. Přední nohy jsou jemné, s dlouhým, svalnatým předloktím a velkými plochými klouby. Důležitá je kvalita kopyt, která mohou být trochu plošší (ANONYM 1, 2014). Pod jemnou kůží jsou zřetelně znát cévy a srst je hedvábně jemná. Výška se pohybuje do 170 cm, obvod hrudi od 180 do 195 cm, holeň od 19,8 do 21 cm. Hmotnost bývá 500600 kg. Díky stavbě těla má prostorný, plochý krok i klus a vynikají cvalové a skokové schopnosti (HERMSEN, 2002). Zakladatelé chovu anglického plnokrevníka jsou tři hřebci arabského původu, kteří byli dovezeni do Anglie v 17. a 18. Století (Byerley Turk, Darley Arabian a Godolphin Barb). Tito hřebci byli kříženi s domácími dostihovými klisnami. Jejich potomci vykazovali takové schopnosti, že popularita dostihů stoupala (HERMSEN, 2002). Každý anglický plnokrevník je ve světě registrován v plemenné knize. Plnokrevná hříbata není možné pojmenovat bez toho, aby jméno nebylo schváleno a zaregistrováno (ANONYM 2, 2013).
10
Obr. 1 Anglický plnokrevník (FILA, 2015)
3.2 Dostihový sport Struktura dostihového sportu je na celém světě stejná. Základem všeho je vlastník koně, na kterém jsou všichni ostatní závislí. Vlastník (tím může být jednotlivec, společnost, syndikát vlastníků, klub nebo firma) zaměstnává profesionálního trenéra, který koně připravuje pro dostihy a najímá pro ně jezdce. Majitelé mohou své koně chovat čistě jen pro radost, aniž by očekávali návratnost vynaložených prostředků, nebo je mohou naopak chovat z komerčních důvodů (koně i žokejové mohou nést na svých dresech a vybavení firemní nápisy nebo reklamu). Nejčastější je ale kombinace obou důvodů. První linii dostihového sportu tvoří trenéři a žokejové (ANONYM 3, 2008).
3.2.1 Druhy dostihů Za dostih se považuje každý závod, kterého se účastní dostihový kůň s jezdcem v sedle a mají za cíl soutěžit s jiným koněm nebo koňmi o jakoukoli cenu (finanční, věcnou) nebo i jinak vyjádřenou.
11
Podle dostihového řádu se dostihy dělí do dvou kategorií na rovinové dostihy, jejichž trať je vytýčena na dostihové dráze a je bez překážek. A dále na překážkové dostihy, které jsou vymezeny tak, aby účastníci v průběhu dostihu museli překonávat překážky (skoky do výšky, příkopy). A dále se dělí podle druhu a stylu jejich překonávání (JOCKEY CLUB České republiky, 1995). Dostih přes proutěné překážky V tomto dostihu účastníci překonávají pouze proutěné překážky. Rozměry a jejich počet jsou předepsány Dostihovým řádem. Mohou být stabilní nebo přenosné (DUŠEK, 2007). Steeplechase Dostih steeplechase se jezdí v prostoru závodiště na travnatém povrchu, při kterém účastníci překonávají pevné překážky, jejichž rozměry jsou předepsány a od skoková a do skoková plocha musí být na stejné úrovni. Kurs steeplechase nesmí tvořit pouze proutěné překážky a také v něm nesmí být překážky, které se překonávají klusem, vylézáním, slézáním, plaváním a broděním. Steeplechase - cross country Je to překážkový dostih, který se běhá na travnatém, písčitém nebo zoraném povrchu. V průběhu dostihu jeho účastníci překonávají pevné i přenosné překážky, jejichž tvar, rozměry a také počet musí být schválen Jockey clubem ČR a nesmí být v rozporu s Dostihovým řádem. V kurzu musejí být zařazeny i překážky, u kterých jsou od skokové i do skokové plochy výškově rozdílné, nebo překážky u kterých musí být snížena nájezdová rychlost nebo překonání klusem, vylézáním, slézáním, broděním a plaváním (JOCKEY CLUB České republiky, 1995).
3.2.2 Jockey club České republiky Jockey club České republiky zpracovává šlechtitelský program, vede plemennou knihu anglického plnokrevníka, evidenci dostihových koní, jezdců a trenérů, vydává trenérské a jezdecké licence, schvaluje propozice dostihů. Stanovuje podmínky pořádání dostihů a kontroluje regulérnost jejich výsledků. 12
JCČR zastupuje ČR na jednáních mezinárodních autorit chovu anglického plnokrevníka (MISAŘ, JISKROVÁ, 1997).
3.2.3 Trenéři Trenéři dostihových koní jsou vlastníci licence, kterou vydává Jockey club ČR. Tato licence je opravňuje k tréninku dostihových koní. Před zahájením dostihové sezóny mají za povinnost dodat JCČR tréninkovou listinu a také oznámit všechny případné změny, které nastaly v průběhu předešlé dostihové sezóny. Trenéři připravují koně k dostihům a dále po dohodě s majitelem koně je přihlašují do dostihů (DUŠEK, 2007). Rozdělují se podle licence na: Trenéry z povolání
Tito trenéři jsou držitelé licence A, která je opravňuje trénovat neomezený počet koní od různých majitelů. Trenéry
Kteří získali licenci typu B. Tato licence jim dovoluje trénovat neomezený počet koní jednoho majitele, a stanovuje jim také maximální počet 15 trénovaných koní různých majitelů. Trenéry majitele
Jsou to držitelé licence C, dovoleno mají trénovat maximálně 5 koní, u kterých jsou zároveň i majiteli (DUŠEK, 2007).
3.2.4 Jezdci dostihových koní Jezdci dostihových koní musí vlastnit platnou licenci, kterou vydává JCČR. Rozdělují se na jezdce z povolání a amatéry. Dostihový řád uznává tyto kategorie jezdců z povolání:
13
Žokeje, což jsou vyučení jezdci. Titul žokeje získají za 50 vítězství, které stihly získat za svou dosavadní dostihovou karierů, v rovinových a nebo překážkových dostizích. Jezdce, kteří jsou vyučení a získali jen jezdeckou licenci. Jezdce žáky, učně, kteří v průběhu studia získali licenci a připravují se na profesionální dráhu jezdců. Jezdec amatér je držitel licence pro amatéry. Pro její získání musí splnit podmínky, které stanovuje Dostihový řád. Především se jedná o podmínku nejezdit dostihy za odměnu a také nepracovat za odměnu v dostihové stáji (DUŠEK, 2007).
3.3 Trénink dostihových koní Vlastní trénink koní, je přizpůsobování organismu na prováděnou opakovanou fyzickou zátěž. Proces vytváření morfologické a funkční adaptace. Při adaptaci dochází k vylepšení funkční činnosti jednotlivých orgánů a systémů. Tím se stávají orgány a systémy schopné pracovat větší intenzitou ve větším objemu a dosahují tím i většího výkonu. Jednotlivé orgány a systémy se přizpůsobují zátěži specificky (podle druhu zatěžování). Funkce orgánu adaptovaného na rychlost vypadá jinak než na vytrvalost (HANÁK a kol., 2011). Nejdůležitějším článkem dostihového provozu je trenér, což je osoba, která je plně zodpovědná za vše, co souvisí s tréninkem. Bez licencovaného trenéra (absolventa trenérského kurzu) nemůže kůň běhat dostihy. Tyto přísné podmínky mají koním zajistit profesionální přípravu, tak aby nedocházelo k fatálním nehodám způsobeným neodbornou přípravou. Trenér také své svěřence sleduje po zdravotní stránce (kontrola stavu končetin, dobré přijímání krmiva, doba rekonvalescence po dostihu). Většina tréninku dostihových koní probíhá v tzv. lotu. Lot znamená kolektivně pracující koně. Tímto způsobem probíhá většina objemových, kondičních a dechových prací. K tréninku se využívá nejen tréninková dráha, ale i terén v přírodě (MRÁZOVÁ, 2014).
14
Sestavení rámcového tréninkového plánu pro celý rok: A. Objemový trénink B. Zotavení z objemu a jarní přelínání (ztráta zimní srsti) C. Přerůstání kvantity ve kvalitu D. Domácí dostih E. Zaměřovací trénink a dostihový management (kryje se s obdobím hlavním) F. Přechodné období Dodržení pořadí a naplenění tréninkového plánu je základem úspěchu v průběhu celé dostihové sezóny (HANÁK a kol., 2011).
Tři základní faktory v tréninku koní Zvyšování výkonnosti koní je podmíněno optimálním řízeným procesem adaptace organismu. Vhodným zatěžováním organismu během tréninku se zvyšuje adaptační efekt. Tréninkové adaptační podněty jsou popsány třemi základními faktory: určitou intenzitou, objemem a frekvencí. Proporce se mění mezi intenzitou, objemem a frekvencí. Určují charakter zatěžování organismu (specifičnost žádoucího efektu tréninku). Jelikož charakter podnětu je různý, tak i intenzita, objem a frekvence podnětu budou rozdílné. Intenzita zátěže představuje hlavní roli v rychlostním a silovém tréninku. Objem zátěže v tréninku vytrvalostním a opakovanost zátěže v tréninku obratnostním (HANÁK a kol., 2011).
Trénink dvouletých dostihových koní Počáteční trénink koní po příchodu do tréninkového střediska z hřebčína je velmi kritickým obdobím. Základní výcvik dvouletého koně by měl být zaměřen především na rozvoj dokonalé mechaniky pohybu koně s jezdcem. Nejzávažnější období je obsedání ročků, které představuje pro koně velký fyzický i psychický stres. Obsedání musí být provedeno co nejšetrněji. Další součást základního výcviku koně jsou všechny všeobecné prvky, které vedou k přiježděnosti a ovladatelnosti koně (např.: ohebnost, reakce na pobídky, práce v lotu i individuální). Následuje speciální trénink dvouletých koní a to je zejména rozvoj rychlosti, protože právě v tomto období mají mladí koně pro rychlost největší předpoklady. Nejdříve se jedná o tzv. obratnostní rychlost, která vede postupně 15
k rozvoji silové rychlosti (maximální). U těchto mladých koní je důležité přechodné tréninkové období, které jim poskytuje dostatečný čas na zotavení organismu z rychlostní zátěže. Přechodné období je dočasné a je zaměřeno na poklesu výkonosti koně. Mělo by zahrnovat alespoň dva poslední měsíce v roku (HANÁK a kol., 2011).
Trénink tříletých a starších dostihových koní Trénink tříletých a starších dostihových koní je stabilizace výkonnosti v určité distanční disciplíně (letoun, mílař, kůň na střední trať, vytrvalec nebo překážkový kůň), pro kterou je jedinec geneticky disponován a také fyziologicky trénován. U těchto koní můžeme rozlišovat dvě základní etapy tréninku: Etapu dostihového tréninku specializovaného Cílem této etapy je vhodné navázat na dosažený stupeň rozvoje síly koně z předchozího ročního cyklu a na jeho základě poté rozvíjet další trénink potřebný pro požadovaný výkon. Jde o rozvoj vytrvalosti koně k určitému specializovanému výkonu. Při rozvoji vytrvalosti představuje hlavní úlohu objem tréninku. Současně je také cílem této etapy zvýšit zdatnost jedince a zvládnout pohybové reflexy např. mechaniku pohybu (skoku). Etapu dostihového tréninku vrcholového V etapě vrcholového tréninku jde především o dosahování maximálních výkonů v určité disciplíně. Tréninkové podněty, jejich intenzita, objem a frekvence se liší u letounů a mílařů od tréninku koní na střední tratě a vytrvalců nebo překážkových koní. Úkolem etapy je zdokonalení a efektivita tréninku. Roční tréninkový cyklus tříletých a starších koní se rozděluje na přípravné, hlavní a přechodné období. Přípravné období je obdobím růstu výkonnosti koně a mělo by trvat přibližně 3 - 4 měsíce (první měsíce roku). V tomto období převažuje velký tréninkový objem.
16
Hlavní tréninkové období, které je považováno za období dostihové sezóny, slouží k vyladění výkonnosti koně až na hranice maxima. V tréninku převažuje vysoká intenzita a frekvence adaptačních podnětů, jejichž smyslem je dosažení tzv. dostihové formy koně (HANÁK a kol., 2011). Trénink dostihového tempa (galopu = rychlé práce) se provádí na tréninkové dráze, nebo na konkrétních místech, která jsou ověřená, tak aby byla eliminována rizika. Rychlé práce mají v dostihovém tréninku vlastní dané podmínky, kdy se koně učí na podnět vybíhat, zrychlit, soupeřit s ostatními (nejčastěji ve dvojicích) a na konec, když je doběhnuto, na podnět přejít do režimu směrujícímu k uklidnění (MRÁZOVÁ, 2014). Přechodné období je dočasné a záměrně dochází k poklesu výkonnosti koně. Podstatou je nutné zotavení po tréninkové zátěži po stránce biochemické, funkční i psychické. Také v tomto mezidobí probíhá výměna srsti. Mělo by trvat cca 6 – 8 týdnů na konci ročního tréninkového cyklu (HANÁK a kol., 2011).
Trénink koní pro překážkové dostihy Předpokladem pro úspěšnou překážkovou dostihovou kariéru je dobrý zdravotní stav, konstituční vytrvalost, psychická vyrovnanost (s ní spojená také ovladatelnost) a přirozená rovnováha koně. Výhodou je i vrozená obratnost (HANÁK a kol., 2011). Základem je ovladatelnost koně a základní přiježděnost. Začátek skokového tréninku je dobré provádět na jízdárně se zkušeným jezdcem a také vodičem. Takto se nacvičuje skokový pohybový stereotyp a současně i vytrvalostní obratnost. Důležité je, aby kůň klidně cválal a soustředil se na skákání. Po zvládnutí skokového tréninku na jízdárně můžeme přejít k cvičení skákání překážek v terénu. Nejprve trénujeme na sérii malých překážek, poté přistoupíme k nácviku skoku přes proutěnou překážku (HANÁK a kol., 2011).
17
3.4 Charakteristika krve Krev je životně důležitá tělesná kapalina, která koluje v uzavřeném systému a spoluvytváří vnitřní prostředí organismu (DOUBEK a kol., 2003). Mezi hlavní funkce krve patří transport dýchacích plynů (O2, CO2), přenos kyslíku z plic do tkání a oxidu uhličitého z tkání do plic. Zajištění výživy z potravy resorbováním živin. Vylučování metabolického odpadu do ledvin, plic, kůže a střev za účelem jeho vyloučení z těla ven. Udržování normální tělesné acidobasické rovnováhy. Regulace vodní rovnováhy pomocí vlivu krve na výměnu mezi cirkulující a tkáňovou kapalinu. Také regulace tělesné teploty distribucí tělesného tepla. Transportace hormonů a regulace metabolismu a metabolitů (MURRAY, 1998). V neposlední řadě je důležitá obranyschopnost krve proti infekci, která je zabezpečována leukocyty, imunoglobuliny a proteiny akutní fáze (DOUBEK a kol., 2003). Z hlediska morfologicko-funkčního můžeme krev považovat za vitálně významný orgán. Krev je složena z erytrocytů, leukocytů a trombocytů. Tohle složení u dospělých jedinců zaujímá cca 45 % z objemu krve. Dále je to extracelulární oddíl, který odpovídá podpůrné tkáni parenchymatózních orgánů a jeho podíl na celkovém objemu krve je asi 55 %. Množství krve vyjádřené na 1kg živé hmotnosti se u dospělých savců pohybuje v rozmezí od 55 do 90 ml. U koní je to 65 – 75 ml krve/ kg živé hmotnosti (DOUBEK a kol., 2003). Tělem tedy obíhá přibližně 45 litrů krve, které představují 10 % tělesné masy (HIGGINS a kol., 2013). Hustota krve u koně se pohybuje cca do 1,053. Osmotický tlak krve vychází zejména z obsahu NaCl a bílkovin, u savců odpovídá koncentraci 0,95 % NaCl a tlaku 680 kPa. pH krve se u většiny hospodářských zvířat pohybuje v rozsahu 7,35 – 7,45 (JELÍNEK, KOUDELA, 2003). Hlavní složkou je plazma, slámově zabarvená tekutina, jejímiž součástmi jsou: červené krvinky, bílé krvinky, krevní destičky a dále také tuky, uhlovodany, bílkoviny, chemické látky, hormony, vitamíny a enzymy (HIGGINS a kol., 2013). Krevní plazma obsahuje cca 91 – 92 % vody. Tvoří ji z 8 – 9 % organické a anorganické látky. Anorganické látky jsou zastoupeny kationty sodíku, vápníku, draslíku, hořčíku. Nejdůležitější anionty pak chlorovodíkové, hydrogenuhličitanové a také fosfátové. Organické látky mají největší zastoupení bílkovinami (albuminy, globuliny alfa, beta, gama (imunoglobuliny) a fibrinogen. Ostatní látky nemají 18
velký vliv na fyzikálně chemické vlastnosti plazmy, ale mohou být spíše přínosným ukazatelem zdravotního stavu zvířat. Jedná se o lipidy (triacylglycerol, cholesterol, mastné kyseliny), laktát, glukózu, nebílkovinné dusíkaté látky (močovina, kyselina močová, kreatin, aminokyseliny), bilirubin (CIBULKA, 2004).
3.4.1 Erytrocyty Červené krvinky čili erytrocyty obsahují krevní barvivo tzv. dýchací pigment hemoglobin. Vznikají v kostní dřeni a přepravují kyslík do tkání a oxid uhličitý z tkání ven (HIGGINS a kol., 2013). Hemoglobin je hemoprotein složený z globinu a hemu. Globin je syntetizován v ribozomech a jeho podíl činní v hemoglobinu 96 %. Základem hemu je protoporfyrin a centru molekuly je dvojmocné železo Fe2+, na které se váže kyslík. Normální savčí erytrocyt žije asi 60 - 140 dnů (DOUBEK a kol., 2003). Erytrocyty koně mají v průměru 5 - 6 μm, které jsou vyšší než u jiných savců. Mezi teplokrevníky a chladnokrevníky neexistují v morfologii erytrocytů žádné rozdíly (DOUBEK a kol., 2003).
3.4.2 Leukocyty Jsou to bílé krvinky, které se podle přítomnosti nebo spíše nepřítomnosti specifických granulí v cytoplazmě dělí na granulocyty a agranulocyty (HIGGINS a kol., 2013).
Bílé krvinky slouží jako obranný mechanizmus proti bakteriím,
virovým a parazitickým infekcím a cizím bílkovinám. Každý typ má svou specifickou roli v rámci této široké funkce (REECE, 2011). Vznikají v červené kostní dřeni a v lymfatickém systému, hromadí se v místech infekce a vyrábějí protilátky, které chrání tělo proti bakteriím a onemocnění (HIGGINS a kol., 2013). K tomuto účelu jsou leukocyty vybavené řadou enzymů. Zdrojem energie v cytoplazmě je glykogen (DOUBEK a kol., 2003).
19
3.4.3 Krevní destičky Krevní destičky neboli trombocyty. Představují jen velmi malou část krve, opravují poškozené krevní cévy a produkují koagulační faktor (látky způsobující srážení krve), (HIGGINS a kol., 2013). Hlavní funkcí trombocytů je účast na zástavě krvácení a předpokladem uplatnění jejich funkce je aktivace destiček, tedy změny tvaru a metabolismu destičky. Krevní destičky dále vstupují do reakcí při zánětu a také se účastní při hojení ran. Podílejí se na odstraňování mikroorganismů a dalších cizorodých částic. Délka života trombocytů v periferní krvi je vymezena asi na 10 dní. Morfologie krevních destiček u koní se výrazněji neliší od ostatních savců. Fyziologické počty krevních destiček patří k nejnižším u savců (DOUBEK a kol., 2003).
3.4.4 Chemické složení krve Pro analýzu krve se využívá nesražená krev, krevní plazma a nebo sérum. Obsah jednotlivých složek se pohybuje v různém rozsahu průměrných hodnot. Sledování krevních parametrů je významné v diagnostice chorob, jejich prevenci a i v posuzování zátěži souvisejících s produkcí a změnou prostředí (JELÍNEK, KOUDELA, 2003).
Bílkovinný, tukový a glycidový metabolizmus Obsah močoviny v krvi kolísá a je závislý na příjmu dusíkatých látek v krmivu (JELÍNEK, KOUDELA, 2003). Močovina je druhý konečný produkt metabolizmu bílkovin. Ke zvýšení jejího obsahu dochází při nadbytku neplnohodnotných bílkovin v krmivu, při překrmování bílkovin, kdy přísun není adekvátní a také při vysoké tělesné zátěži (vyčerpání, přetrénování). Naopak ke snížení hladiny močoviny dochází při nedostatku bílkovin v krmné dávce (HANÁK, 1996). Aminokyseliny narůstají po příjmu bílkovin a během jejich trávení. Kyselina močová je závislá na příjmu purinů. Amoniak narůstá až několikanásobně při otravě močovinou.
20
Albuminy se podílejí zejména na osmotickém tlaku, na přenosu toxinů, mastných kyselin, bilirubinu a také léků. Alfa a beta globuliny zajišťují transport tuků. Celkový obsah lipidů závisí na příjmu v krmné dávce, k nárůstu dochází při nedostatku energie a mobilizaci zásobního tuku. Na celkovém množství se podílejí neutrální tuky, fosfolipidy, cholesterol a neesterifikované mastné kyseliny. Transport tuků se uskutečňuje pomocí proteinů. Glukóza u sportovních koní klesá při velmi vysoké zátěži (JELÍNEK, KOUDELA, 2003). Snížené hodnoty se také zjišťují při nedostatku lehce stravitelných glycidů v krmivu, hladovění. Její nárůst se pozoruje při stresu (bolestivé fixaci, při psychickém zneklidnění). Kyselina mléčná je produktem anaerobního metabolizmu glycidů. V krvi se zvyšuje po těžké fyzické práci. Vysoké hodnoty kyseliny mléčné se nachází u dostihových koní při maximální rychlostní zátěži. Snížená hladina v krvi nemá diagnostický význam. Mezi výkonosti koně a hladinou kyseliny mléčné po zátěži je negativní vztah. (HANÁK, 1996). U dostihových koní může dosahovat až na 22 mmol.l-1 (JELÍNEK, KOUDELA, 2003).
Minerální a elektrolytový metabolizmus Vápník Vápník v organismu zaujímá víceúčelovou funkci. Je nepostradatelný pro propustnost buněčných membrán, srážení krve, stažitelnost svalových vláken, nervosvalovou dráždivost a srdeční činnost. Je velmi významnou stavební součástí kostní tkáně, kde je vápníku uloženo 99 %. V krvi je volný (izolovaný Ca2+) a vázaný (na albumin), (DOUBEK a kol., 2010). Jeho metabolismus souvisí s metabolismem hořčíku, fosforu a vitamínu D. Jeho plazmatická hladina je velmi stálá (HANÁK, 1996). Hyperkalcemii může způsobovat nadbytek vitamínu D, metabolická
acidóza
(uvolnění
z kostí),
aplikace
vápníkových
preparátů,
dehydratace. Příčiny hypokalcemie mohou být aplikace kortikoidů, látek vázajících Ca, otrava etylenglykolem, vápníkový deficit, fytáty v krmné dávce (DOUBEK a kol., 2010).
21
Fosfor V organismu má stavební funkci, účastí se fosforylačních procesů, je nezbytný pro přenos a uvolňování energie. Je také součástí minerálního profilu tvrdých tkání (kostí, zubů). V krvi je ve formě různých fosforečnanů a organických sloučenin (DOUBEK a kol., 2010). Zvýšený obsah fosforu v krevním séru může nastat při krmení vysokých dávek jádra a nedostatku sena (HANÁK, 1996). Hyperfosforemii může také způsobovat hypervitaminóza D. Fosfor je součástí mnoha organických sloučenin např. ATP, přičemž spotřeba ATP stoupá se zvyšováním intenzity práce koně (ZEMAN a kol., 2005). Nízký obsah fosforu v krvi způsobuje alkalóza, aplikace kortikoidů a inzulinu (DOUBEK a kol., 2010). Hořčík Hořčík je důležitý aktivátor řady enzymů, jejichž prostřednictví zasahuje do celého metabolismu. Hladina hořčíku v krvi je výrazně ovlivňována příjmem Mg v krmivu a také v krmných minerálních doplňcích (HANÁK, 1996). Zvýšení obsahu hořčíku v krevní plazmě může být způsobeno zvýšeným buněčným katabolizmem, metabolickou acidózou a onemocněním ledvin. Snížení hladiny Mg bývá pak způsobeno nedostatečným příjmem v krmivu, průjmy, extrémní fyzická námaha (DOUBEK a kol., 2010). Sodík Sodík je spolu s Ca důležitý pro udržení osmotického tlaku a pH tělních tekutin. Ovlivňuje také hospodaření organismu s vodou. Je nepostradatelný pro přenos vzruchů a nervosvalovou dráždivost. Obsah Na v krevní plazmě je konstantní a velmi úzký. Mění se především při vážném narušení vnitřního prostředí organismu a to zejména zátěží. Stálost jeho hladiny tedy závisí nejen na intenzitě zátěže, ale také na stupni adaptace koně k této zátěži. Zvýšený obsah sodíku v krevní plazmě nalezneme při zkrmování při vyšších dávkách NaCl (HANÁK, 1996). Také tkáňové destrukce, horečka, aplikace iontových roztoků a intoxikace chloridem sodným (DOUBEK a kol., 2010).
Snížený obsah pak
nacházíme při těžkých metabolických acidózách, intenzivním pocení, stresových stavech, přetrénování (HANÁK, 1996). Ztráty sodíku jsou vždy doprovázeny ztrátou vody (dehydratací), (DOUBEK a kol., 2010).
22
Draslík Je velmi důležitý pro udržení správného osmotického tlaku, pH tělních tekutin a pro nervosvalovou činnost. Jeho metabolismus je spojen s metabolismem Na, Cl a glycidů. Jeho hladina v krvi je poměrně stabilní. Při nadbytku draslíku (hyperkalemie) dochází k metabolické acidóze, onemocnění ledvin a může způsobovat šok (přepětí, přetrénování, zchvácení). Naopak nedostatek draslíku (hypokalemie) se vyskytuje po průjmech, dehydratacích a intoxikací solí (HANÁK, 1996). Nedostatek draslíku není příliš obvyklý, může se vyskytnout po intenzivní dlouze trvající fyzické zátěži, při níž dochází k pocení. Také může mít nedostatek draslíku za následek horší růst mladých koní, oslabení dospělých jedinců, snížení výkonnosti a i snížení chuti k žrádlu (ZEMAN a kol., 2005). Chloridy Provázejí v metabolismu Na a K, podílejí se tedy na správném udržování osmotického tlaku a také pH tělních tekutin, ovlivňují i hospodaření organismu s vodou. Obsah chloridů v krevní plazmě je stabilní, mění se pouze při vážném narušení vnitřního prostředí. Stálost hladiny chloridů u dostihových koní je do značné míry podmíněna stupněm přizpůsobení k zátěži (trénovanosti), (HANÁK, 1996). Nadbytek může být způsoben zkrmováním vyšších dávek kuchyňské soli a při dehydratacích. Hyperchloridemii může mít také za příčinu poruchy funkce ledvin. Nižší obsah je pak při nedostatku NaCl, pocení a krvácení (DOUBEK a kol., 2010).
Měď Je součástí a aktivátorem celé řady enzymů, jejichž prostřednictvím zasahuje do celého metabolismu. Podílí se na krvetvorbě, vývoji kostí, činnosti CNS, tvorbě elastinů a pigmentů. Zvýšený obsah v krevní plazmě může nastávat při otravách mědí, snížený obsah pak při karencích Cu (HANÁK, 1996). Železo Železo je součástí hemoglobinu a myoglobinu, slouží zde k přenosu kyslíku a CO2. Množství železa v organismu je přibližně 4 – 5 g na 100 kg živé hmotnosti, které představuje 0,03 – 0,007 % hmotnosti (ZEMAN a kol., 2005). Zvýšená hladina Fe nastává při hemoglobinuriích a myoglobinuriích, žloutenkách, 23
cirhózách, snížená potom při ostatních anémiích (HANÁK, 1996). Nedostatek Fe může způsobovat chudokrevnost a zakrslost (ZEMAN a kol., 2005).
Zinek, mangan, selen Obsah těchto prvků v krevní plazmě odráží jejich příjem (JELÍNEK, KOUDELA, 2003).
Enzymy AST (aspartátaminotransferáza)
U koní je diagnosticky významná při poškození kosterního svalstva a myopatiích, také při poškození srdečního svalu a onemocnění jater. Hladina AST u koní trénovaných je vyšší než u koní netrénovaných (HANÁK, 1996). Ke zvýšení dochází zvláště při postižení svaloviny např. při přetrénování, přepětí, schvácení. Také u koní v začátku tréninkového procesu, ale později klesá (KRAFT, 2001). ALT (alaninaminotransferása)
U koní je specifickým svalovým enzymem. Také je indikátorem poškození svalů. CK (kreatinkináza)
Je důležitým svalově specifickým enzymem, ale lze najít i v jiných orgánech. Aktivita CK se zvyšuje při přímém poškození svalů (traumatické poškození, pohmožděniny, intramuskulární injekce dráždivých látek). Ale také při poškození nepřímém (akutní nebo chronické vyčerpání organismu, tetanus), kdy intenzita zátěže koně není adekvátní. Může se také zvyšovat při šokových stavech (stresu) a při fyzické zátěži netrénovaných koní (KRAFT, 2001). Sledování aktivity CK a AST se uplatňuje především při kontrole stupně trénovanosti koně a adaptace jeho pohybového aparátu k zátěži v průběhu tréninkového procesu (HANÁK, 1996).
24
ALP (Alkalická fosfatáza)
Vyskytuje se nejvíce v kostní tkáni a chrupavkách, v játrech, ledvinách, slezině, erytrocytech, leukocytech, sliznici.
Diagnosticky je významná při
chorobách skeletního systému, změnách kostní tkáně a diferenciální diagnostice onemocnění jater. Zvýšení hladiny ALP zjišťujeme u rostoucích hříbat, kde je produkována při výstavbě kostní tkáně. Zvýšené hladiny u dospělých koní jsou patologické a svědčí o zvýšené činnosti osteoklastů nabourávající kostní tkáň – „šimbajny“, osteoporózy, osteolýzy a benigní tumory kostí. Při snížené hladině Ca v krvi může také docházet k zvýšení ALP (HANÁK, 1996). GMT (Gama – Glutamyltransferása)
Je enzymem, který se vyskytuje v řadě parenchymatózních orgánů. Její klinický diagnostický význam je spojen s cholestázy v játrech. Zvýšení GMT bývá při akutních hepatitidách a poškození jater (HANÁK, 1996).
3.5 Referenční hodnoty parametrů u koní Referenční hodnoty jsou takové hodnoty laboratorního vyšetření, mezi nimiž leží většina naměřených hodnot daného souboru jedinců. Za většinu se považuje 95 % výsledků a je-li dostatečně velké množství dat pro výpočet referenčních hodnot pro zdravé jedince určitého druhu (DOUBEK a kol., 2003). Je dobré mít také jasné rozdělení referenčních hodnot parametrů krve v závislosti na pohlaví, stupni výkonnosti, věku koní a stejného ustájení. Takové to rozdělení je vhodné při vyšetřování hematologického profilu krve koně. Odlišné hodnoty můžeme získat ze vzorků krve u koní plnokrevných, teplokrevných a chladnokrevných. Přibližně stejný věk mezi testovanými koňmi může pomoci ke správné interpretaci námi naměřených hodnot (FRAPE, 2010). Tyto referenční hodnoty pro určitý parametr u zdravých jedinců jsou potřebné k interpretaci našich výsledků. Jsou ohraničeny referenčními mezemi (dolní a horní) a leží mezi mini referenční interval (rozmezí). Zdraví jedinci jsou charakterizováni absencí závažných nemocí a jsou bez probíhajícího onemocnění, tedy bez odchylek klinického a laboratorního vyšetření
25
za uplatnění standardních podmínek a postupů v celém průběhu laboratorního vyšetření (DOUBEK a kol., 2003)
3.6 Faktory ovlivňující krevní parametry Parametry bílého a červeného krevního obrazu bývají ovlivňovány mnoha vnitřními i vnějšími faktory, které se navzájem často prolínají. Patří mezi ně zejména věk, druh, pohlaví zvířat, jejich využití a zoohygienické podmínky prostředí. Změny hematologických ukazatelů může vyvolat řada faktorů, např. stres, výživa, technologie a hygiena ustájení. Při vyšších teplotách z okolního prostředí může být nižší obsah hemoglobinu. To je způsobeno změnami v distribuci železa v organismu. Rozdíly v hematologických ukazatelích mohou být závislé na různých faktorech, jako je chemické složení přijatého krmiva, teplota prostředí, obsah živin v píci. Také může krevní parametry ovlivňovat změna teploty v různých ročních obdobích (PAVLÍK, 2014).
26
4 MATERIEÁL A METODIKA Praktická část této diplomové práce byla zpracována z informací, které poskytla dostihová stáj, která se zabývá především tréninkem rovinových koní. Krevní vzorky zpracovala a vyhodnotila Veterinární klinika v Pardubicích. Jedná se o informace týkající se metabolických profilových testů deseti koní při zátěži. Tyto data byla zpracována dle běžných matematicko-statistických metod a výsledky vyneseny do tabulek a grafů. Koně byly v době pokusu ustájeny v dostihovém středisku v moderních stájích, které mají prostorné boxy a dobré vybavení. Středisko mělo k dispozici kolotoč pro koně a také kvalitní tréninkovou dráhu. Charakteristiky deseti testovaných koní: Mondego Bay Tento hnědý valach se narodil v roce 2012. Jeho otec je hřebec Egerton (GER) a matka Rabbit Montjeu (IRE). V jeho dosavadní kariéře se zúčastnil 11 rovinových dostihů a jeden krát se mu podařilo zvítězit. Poslední start absolvoval v říjnu na dostihovém závodišti v Praze.
Rabbit Mountnelson (GB) Dostihový valach hnědák, narozen v roce 2012. Otcem je Mount Nelson (GB) a matka Al Hawa (USA). Tento valach za svou dosavadní kariéru absolvoval 13 rovinových dostihů a dva starty se mu podařilo zvítězit.
Rabbit Verglas Rabbit Vergals, dostihový valach, bělouš, který se narodil v roce 2009 a byl tedy už sedmiletý. Jeho otec je Verglas (IRE) a matka Best Mother (IRE). Jako jediný z vybrané skupiny koní pro pokus se účastnil jak rovinových, tak i překážkových dostihů. Rovinových dostihů absolvoval 22 a 5 z nich dokázal zvítězit a získat dotaci pro majitele ve výši 198 600 Kč. Čtyři starty také absolvoval na překážkách v dostizích přes proutěné překážky a dva z nich dokázal vyhrát a získat dotaci v hodnotě 66 500 Kč. V roce 2015 nestartoval, ale pro sezónu 2016 je registrován. 27
Love Me Byl již pětiletý dostihový valach, hnědé barvy, narozen v roce 2011. Do sezóny 2016 již není registrován. Jeho otec je Egerton (GER) matka Lorellai. Ve své kariéře startoval ve 14 rovinových dostizích, 3 krát zvítězil a na odměnách vydělal pro svého majitele 1 316 670 Kč.
Valmont ohne Byl čtyřletý hnědý valach, narozen v roce 2011. Otec je Look Honey (IRE), matka Vadeona. Za svou dosavadní kariéru absolvoval 12 dostihů a 2 krát zvítězil. Poslední start v předešlé sezóně absolvoval v říjnu na závodišti v Bratislavě.
Zamira Zamira byla hnědá dostihová klisna, která se narodila v roce 2012. Zatím se specializovala jen na rovinové dostihy, kterých se zúčastnila 6 krát a jednou zvítězila. Pro dostihovou sezónu 2016 je registrována a bude pokračovat v kariéře.
Miss Mikrop Klisna Miss Mirkop byla čtyřletá hnědka, narozena v roce 2012. Otec Egerton (GER) matka Mikrop Fong (GB). Tato klisna startovala pouze pět krát a jednou zvítězila. Pro sezónu 2016 již není registrována.
Fantaggira Lady Dostihová klisna, hnědka, narozena v roce 2012. Otcem je Egerton (GER) a matkou Fanega. Za svou dosavadní kariéru absolvovala 13 rovinových dostihů a 3 krát dokázala zvítězit. Poslední start minulé sezony absolvovala na dostihové dráze v Praze Chuchli.
Golden Irene Golden Irene byla tmavá hnědka, narozená v roce 2012. Otec je Look Honey (IRE) a matka Golden Sound (GB). Absolvovala již 14 startů v rovinových dostizích, 2 krát se jí podařilo zvítězit. Pro sezónu 2016 je také registrována a bude pokračovat v kariéře.
28
Rabbit Kyllachy (GB) Tato hnědá klisna byla nejstarším koněm v pokusu jako osmiletá. Otec této klisny je Kyllachy (GB) a matka Regal Riband (GB). Dostihovou kariéru začala v roce 2010 a absolvovala 33 startů v rovinových dostizích, z těchto startů se jí podařilo 10 krát zvítězit. Pro dostihovou sezónu 2016 již není registrována, ukončila sezónu a nejspíše byla zařazena do chovu.
4.1 Vyšetření krve Laboratorní vyšetření krve lze rozdělit na tři fáze: preanalytickou, analytickou a postanalytickou. Tyto fáze jsou si rovny a žádná by neměla být podceněna (DOUBEK, 2003).
Preanalytická fáze V této fázi se připravili koně a odběrový materiál k odběru krve. Důležité bylo klidné zacházení s koněm, správná volba a použití protisrážlivého prostředku (heparin), použití nevhodného přípravku může změnit složení krve. Postup odběru vzorků Odběry krve koní provedl veterinární lékař do předem připravené zkumavky. Odběry krve se prováděly v klidu, 5 a 30 minut po zátěži. Vzorky krve na hematologické vyšetření u koní se odebraly z vena jugularis externa (hlavní žíla krku). Krev byla odebrána nesrážlivě v dostačujícím množství (cca 0,5 až 1 ml). Déle se zkumavkou zatřáslo, aby se promísila krev s antikoagulantem. Také bylo potřeba zkumavku řádně označit jednoznačnou identifikací vyšetřovaného koně (např. číslem z čipu koně). V poslední řadě se zkumavky s krví zabezpečily tak, aby se zabránilo jejich rozbití a vylití obsahu. Následoval převoz zkumavek do Veterinární kliniky v Pardubicích.
29
Analytická fáze Analýzu odebraných krevních vzorků provedla laboratoř veterinární kliniky v Pardubicích jako akreditované středisko. Tato laboratoř zpracovala krevní vzorky na automatickém biochemickém analyzátoru BS – 300 (Obr. 2) a následně poskytla výsledky. Jednalo se o kompletní metabolické vyšetření.
Postanalytická fáze Ve fázi po analýze byla provedena interpretace výsledků. Tyto výsledky se musely především hodnotit jak vzhledem k referenčním hodnotám popř. kritickým hodnotám, tak i k etiopatogenetickým souvislostem a vzájemným vztahům mezi parametry. Faktory, které mohly ovlivnit preanalytickou a analytickou fázi vyšetření se také objevují i v hodnocení výsledků.
Obr. 2 Biochemický analyzátor BS - 300 (Veterinární klinika Pardubice)
30
5 VÝSLEDKY A DISKUZE Během našeho pokusu s koňmi nedošlo k žádným zdravotním problémům a všechny manipulace s koňmi proběhly v pořádku. V Tab. 1 a 2 jsou vypsány referenční hodnoty biochemických a hematologických parametrů koní. Do Tab. 3 jsou shrnuty výsledky metabolického profilového testu deseti koní. Pro srovnání naměřených výsledků byly použity referenční hodnoty pro sledované faktory, dolní, horní hranice a norma, které jsou obvykle používané v laboratoři. U koně Fantaggira Lady a faktoru glukózy byla zjištěná hodnota 6,68 mmol/l, která překračuje horní hranici. Bilirubin přesahoval horní hranici u všech koní, nejvíce pak u koně Love Me a to naměřenou hodnotou 59,90 μmol/l o 25,9 μmol/l. Žlučové kyseliny mají horní hranici u koní stanovenou na hodnotu 12 μmol/l a klisna Zamira ji překročila o 2,24 μmol/l. U čtyř koní byly zvýšené hodnoty železa. Koně mohou získávat železo na pastvě ze zeminy. Naše koně v pokusu, ale neměly přístup na pastvinu, tak tuto možnost vylučujeme. Další zdroj železa představuje jádro, kterého dostihové koně přijímají v dostatečných dávkách (ŠVEHLOVÁ, 2010). Také jsou pro sportovní koně k dostání různá doplňková krmiva pro udržování zdravých krevních parametrů, které se podávají před dostihy. Například pasty obsahující železo v chelátové formě, které je lépe využitelné (ANONYM 5, 2015). V našem experimentu tyto pasty použity nebyly. Vysoké hodnoty selenu byly zjištěny u všech deseti koní. U dostihových koní tohle není nevysvětlitelné, protože koně v našem pokusu dostávali dávky selenu v premixu. V praxi se jim selen podává v podobě krmného doplňku pro dobrou funkci svalů, také pro nahrazení poničené svalové tkáně a k zlepšení imunitního systému když kůň projevuje zvýšené příznaky únavy (ANONYM 6, 2010). Funkční podobou selenu jsou
selenoproteiny. Mezi nejdůležitější z nich patří enzym glutathionperoxidáza (GSHPx), který měl v našem pokusu u koní také zvýšené hodnoty. GSH-Px je totiž indikátorem dlouhodobého zásobení organismu selenem. Skládá se ze čtyř téměř identických
podjednotek.
Každá
podjednotka
obsahuje
selen
ve
formě
jednoduchého selenocysteinového zbytku. Důležitým antioxidantem je také vitamín E, který působí s GSH-Px společně (LUDVÍKOVÁ, PAVLATA, 2005). V Tab. 4 jsou vypsány sledované parametry z hematologie. Až na několik výjimek všechny naměřené hodnoty odpovídali hraničnímu rozmezí. U koně Valmont Ohne, byla mírně překročena horní hranice pro hematokrit, což mohlo být v důsledku adaptace na zátěž (CIBULKA, 2004). Dále jsme zjistili nižší hodnoty 31
neutrofilních granulocytů koní Rabbit Moutnelson a Vadeta, které nedosahovaly dolní hranice. Neutrofily jsou buňky první obranné linie, které rozpoznávají mikroorganismy. Za fyziologických podmínek jsou do periferní krve vyplavovány jen segmentované neutrofily a právě u těchto byly naměřeny nižší hodnoty. Dále to jsou nesegmentované neutrofily tzv. „tyčky“(nezralá forma), kterých je v krvi jen malé množství. Zralé neutrofily v krvi cirkulují méně než 24 hodin a poté se dostávají do tkání, kde zanikají (CIBULKA, 2004). Valach Mondego Bay měl v krvi zjištěno poměrně málo trombocytů, údaj 97,00 ×109/l, což nedosahovalo průměrné normy stanovené pro koně 200,00 ×109/l. Počet trombocytů (krevních destiček) je stálý a výkyvy jsou u zdravých jedinců malé. Proto je možné, že tento kůň mohl mít v době pokusu nějaké zdravotní problémy. V Tab. 5 a Tab. 6 jsou vypsány průměrné výsledky celé skupiny dostihových koní a dále vyjádřeny 95% intervalem spolehlivosti (SNEDECOR, CHOCHRAN, 1971). Do tabulek 7 až 16 byly zapsány výsledky všech testovaných koní v klidu, 5 minut a 30 minut po zátěži. Sledované faktory trénovaných koní byly srovnány s normou a minimy, které byly stanoveny pro koně netrénující bez jakékoliv zátěže. Proto byly dále tyto hodnoty sledovaných faktorů pro dolní a horní minimum a také pro normu upraveny. Tyto úpravy byly provedeny v důsledku naměřených poměrně vysokých údajů, protože ve většině případů přesahovaly doporučenou horní hranici. Graf 1 znázorňuje metabolický profilový test koní v klidové fázi.
Jak
můžeme z grafu vyčíst, tak jsou některé hodnoty odlišné. U třech koní (Rabbit Verglas,
Zamira
a
Golden
Irene)
jsou
patrně
vyšší
hodnoty
LDH
(laktátdehydrogenázy). Dále zjištěný údaj CK (kreatinkináza) převyšoval referenční hodnotu 2,2 μka/l , kterou uvádí KRAFT a DÜRR (2004) u všech deseti koní. Nejvyšší byla u klisny Miss Mikrop. Laktát (anion kyseliny mléčné), který vysvětluje KODÍČEK (2007), také přesáhl doporučené rozmezí a to nejvíce u koně Valmont Ohne. Další vykreslené hodnoty v grafu se pohybovaly v rozpětí referenčních hodnot. Hodnocení koní 5 minut po zátěži nám ukazuje Graf 2. Tréninkovou zátěží se myslí rychlá cvalová práce, která je koním stanovena podle jejich zaměření a dispozic. Dostihový koně, kteří byli vybráni pro tento pokus, trénovali na rovinové dostihy na distanc od 1 200 m do 2 200 m. Někteří byli tedy sprinteři a jiní naopak vytrvalci. Pro každého z nich se pak stanovil individuální trénink. Z grafického 32
znázornění (Graf 2) vidíme, jak se změnily hodnoty od klidové fáze. ALT (alaninaminotransferáza) a GMT (gamaglutamyltransferáza) se změnili jen nepatrně, za to klesly hodnoty AST, největší pokles byl zaznamenán u koně Rabbit Verglas a to až pod normu 3,3 μkat.l-1 ,kterou uvádí JELÍNEK A KOUDELA (2003). Zvýšené hodnoty po zátěži byly u parametru LDH, nejvíce pak u koně Valmont Ohne a také u valacha Rabbit Verglas. Také bývá obvyklé po těžkém tréninku samozřejmé zvýšení hodnot laktátu a to u všech testovaných koní. Některé hodnoty se zvedly až nad 8 mmol/l. Při zátěžích vysoké intenzity dochází k překročení schopnosti oxidačních svalových enzymů produkovat potřebné množství ATP aerobní cestou. K tomuto procesu dochází především ve svalových vláknech, které jsou označovány jako anaerobní a jsou zapojovány do svalové práce až při vyšší rychlosti nebo silové zátěži. Právě tato svalová vlákna jsou odpovědna za exponenciální nárůst koncentrace laktátu. Většina koní obvykle dosáhne anaerobního prahu při rychlosti 600 - 800 m/min a srdeční frekvenci 160 - 200 tepů/min, kdy je koncentrace laktátu přibližně 4 mmol/l plazmy. Vytrvalostní trénink posunuje tento anaerobní práh do vyšších hodnot. Intenzivní zátěž vede k rozvoji metabolické acidózy, primárně z kumulace laktátu vyplavujícího se z pracujícího svalu do venózní krve. V pracujících svalech je produkovaný laktát za normálních okolností postupně uvolňován z intracelulárního prostoru do plazmy. Při zátěži vysoké intenzity však jeho produkce ve svalu převýší rychlost s jakou je vyplavován do krve. Důsledkem nahromadění laktátu je pak rozvoj metabolické acidózy nejen v krvi, ale i ve svalové tkáni. Intracelulárně nahromaděný laktát značně zvyšuje kyselost prostředí svalových buněk a zastaví další průběh glykolýzy. Kůň musí snížit intenzitu, případně i omezit prováděný rychlostní nebo silový výkon. Kumulace laktátu je tedy jedním z nejdůležitějších faktorů omezujících výkonnost koně (ANONYM 7, 2008). Kreatinkináza se po zátěži u některých koní (Mondego Bay, Rabbit Verglas, Zamira, Miss Mikrop, Fantaggira Lady, Rabbit Kyllachy) zvýšila a u ostatních zůstala přibližně stejná. CK je svalově specifickým enzymem, ale nachází se i v jiných orgánech. Je vhodná pro diagnostiku onemocnění svaloviny (KRAFT, DÜRR, 2004). V našem případě kdy došlo u koní k zvýšení hodnot CK bychom mohli přisuzovat velké fyzické zátěži při tréninku. Následující Graf 3 znázorňuje hodnocení trénovaných koní 30 minut po zátěži. ALT a GMT zůstávají téměř nezměněné. Hodnoty AST a LDH začínají 33
postupně klesat. Laktát také u většiny koní začal pomalu klesat a u zbytku koní se jeho hodnota ustálila. Nejvýraznějším faktorem z tohoto grafu byl CK. U koní Zamira a Miss Mikrop se hodnoty po 30 minutách od tréninku ještě zvýšili. U valacha Love Me došlo k výraznému vzestupu vysoko nad horní hranici referenčního rozmezí. Zvýšení na 12,88 μka/l mohl podle KRAFTA a DÜRRA (2004) znamenat latentní myopatii. Dále by mohl tento atypický nález přisuzován k možnému nevhodnému postupu při odběru krve, nebo také k výběru špatné zkumavky. V posledním grafu 4 jsou vykresleny průměrné hodnoty sledovaných faktorů od klidové fáze po 30 minut po zátěži. Rozmezí faktorů je následující: AST 4,71 – 3,82 µkat/l, ALT 0,306 – 0,469 µkat/l, GMT 0,677 – 0,775 µkat/l, LDH 6,348 – 6,461 µkat/l, Laktát 4,774 – 7,226 mmol/l , CK 5,024 – 6,012 µkat/l. Všechny tyto údaje měli po zátěži vzestupnou tendenci, vyjma AST ten klesající. Vytrénovat dostihového koně k těm nejlepším výsledkům není zdaleka tak jednoduché. Proto je velmi důležité dodržování správného a adekvátního tréninku. Nejdůležitější je pak pro dostihové koně zdravotní stav. Metabolické profilové testy se využívají pro zlepšení zdraví a také pro zachování výkonnosti. Podle našich zjištění jsou závislé nejen na správných analytických laboratorních postupech při odběrech a zpracovaní biologických matriálů (krve), ale také na odborné interpretaci zpracovaných analýz a praktické možnosti případných změn či realizace odborných doporučení. Po zhodnocení sledovaných faktorů vnitřního prostředí deseti koních anglického plnokrevníka byly zjištěny nesrovnatelné hodnoty s referenčními hodnotami, které jsou stanoveny pro koně nemající žádnou fyzickou námahu. Proto by bylo vhodné upravit hraniční minima a normu i pro koně v zátěži. Upravená norma a hraniční minima pro koně v zátěži by mohla být následující: AST: DM – 2,975 μkat.l-1, HM - 5,477 μkat.l-1, norma – 4,710 μkat.l-1 ALT: DM – 0,161 μkat.l-1, HM – 0,715 μkat.l-1, norma – 0,310 μkat.l-1 GMT: DM – 0,480 μkat.l-1, HM – 0,912 μkat.l-1, norma – 0,680 μkat.l-1 LDH: DM – 5,283 μkat.l-1, HM – 8,388 μkat.l-1, norma – 6,350 μkat.l-1 LAKTÁT: DM – 3,790 mmol/l , HM – 9,690 mmol/l, norma – 4,770 mmol/l CK: DM – 1,491 μkat.l-1, HM – 15,647 μkat.l-1, norma – 5,020 μkat.l-1 34
6 ZÁVĚR Odběry krve se prováděly koním v klidové fázi, 5 a 30 minut po zátěži. Následná analýza nám upřesnila výsledky. U všech testovaných koní byly zjištěny vysoké hodnoty selenu od 278,62 do 337,48 µmol/l. U výsledků z hematologie byly u dvou koní zjištěny nižší hodnoty neutrofilních granulocytů 2,74 a 3,08 ×109/l. Nízká hodnota 97 ×109/l byla v jednom případě nalezena u trombocytů. Z biochemických parametrů byla u kreatinkinázy v klidu zjištěna nejvyšší hodnota 8,13 μkat/l. Také u laktátu a to hodnota 6,58 mmol/l. 5 minut po zátěži byl také zvýšen parametr LDH a naměřena nejvyšší hodnota 9,97 µkat/l. Vysoké hodnoty laktátu byly naměřeny po zátěži a zjištěna hodnota až 8,98 mmol/l. Kreatinkináza byla po zátěži v rozmezí od 3,72 – 8,23 μkat/l. Po 30 ti minutách od zátěže byla CK v rozmezí 3,01 - 12,88 μkat/l. Intenzivní trénink koní způsobuju, že se hodnoty po 30 minutách nevracely do normálního stavu. Spíše se stále zvyšovaly, nebo se ustálily. Metabolický profilový test lze využít pro sledování parametrů dostihových koní a řídit tak podle něj dostihový proces. Bylo by tedy vhodné v budoucí době provádět další podobné pokusy koní v zátěži pro upřesnění norem.
35
7 SEZNAM POUŽITÉ LITERATURY Knihy: CIBULKA, J., 2004: Základy fyziologie hospodářských zvířat. 1. vyd. V Praze: Česká zemědělská univerzita v Praze, 200s. ISBN 80-213-1247-5. DOUBEK,
J.
a
kol.,
2010:
Interpretace
základních
biochemických
a
hematologických nálezů u zvířat. 2., dopl. vyd. Brno: Noviko, 102 s. ISBN 978-8086542-22-5. DOUBEK, J. a kol., 2003: Veterinární hematologie. Brno: Noviko, 464 s. ISBN 8086542-02-5 DUŠEK, J., 2007: Chov koní. Vyd. 2., přeprac. Praha: Brázda, 400 s. , [15] s. barev. obr. příl. ISBN 978-80-209-0352-5. FRAPE, D., 2010: Equine nutrition and feeding. 4. vyd. Ames, Iowa: WileyBlackwell Publishing, 648 s. ISBN 978-1-4051-0598-4. HANÁK, J., OLEHLA, Č. a SEDLINSKÁ M., 2011: Fyziologie tréninku dostihových a sportovních koní: (od fyziologie k tréninkové praxi). Brno, 227 s. HANÁK, J., 1996: Základy diagnostiky u koní z aspektu sportovní veterinární medicíny. Plzeň: Medicus veterinarius, 251 s. ISBN 80-902224-8-x. HERMSEN, J., 2002: Encyklopedie koní. 3. vyd. Dobřejovice: Rebo Productions, 312 s. ISBN 80-7234-184-7. HIGGINS, G., MARTIN S. a KERUMOVÁ L., 2013: Pohyb a výkon koně: anatomie. Vyd. 1. V Praze: Metafora, 151 s. ISBN 978-80-7359-360-5.
36
JELÍNEK, P., KOUDELA K., 2003: Fyziologie hospodářských zvířat. Vyd. 1. V Brně: Mendelova zemědělská a lesnická univerzita, 409 s., [4] s. barev. obr. příl. ISBN 80-7157-644-1. JOCKEY CLUB ČESKÉ REPUBLIKY, 1995: Dostihový řád. Praha, 101 s. KRAFT, W., DÜRR M. U., 2001: Klinická laboratórna diagnostika vo veterinárnej medicíne. Bratislava: Hajko & Hajková, 365 s., ISBN 80-88700-51-5. MISAŘ, D., JISKROVÁ, I., 1997: Chov koní: Cvičení. 1.vyd. Brno: MZLU, 63 s. ISBN 80-7157-246-2. MURRAY, R. K., 1998: Harperova biochemie. 2. české vyd., v H & H 1. Praha: H & H, 872 s. ISBN 80-85787-38-5. PAVLÍK, A., 2014: Hematologické parametry a ukazatele acidobazické rovnováhy krve u skotu. Vyd. 1. Brno: Mendelova univerzita v Brně, 25 s. ISBN 978-80-7509133-8. REECE, W., O., CIBULKA J., 2011: Fyziologie a funkční anatomie domácích zvířat. 2. rozš. vyd. Praha: Grada, 473 s. ISBN 978-80-247-3282-4. SNEDECOR W., G., COCHRAN G., W., 1971: Statistical methods. Ames, Iowa, U.S.A. All rights reserved, 592 s. ISBN 0-8138-1560-6. ZEMAN, L., ŠAJDLER P., HOMOLKA P. a KURNA V., 2005: Potřeba živin a tabulky výživné hodnoty krmiv pro koně. Brno: Mendelova zemědělská a lesnická univerzita, 116 s. ISBN 80-7157-855-X.
37
Internetové zdroje: ANONYM 1, 2014: Anglický plnokrevník. Databáze online [cit. 2015-11-19]. Dostupné na: http://ikun.xf.cz/anglicky_plnokrevnik.html ANONYM 2, 2013: Anglický plnokrevník. Databáze online [cit. 2015-11-19]. Dostupné na: http://kralovstvizakone.wz.cz/plemena1.html ANONYM 3, 2008: Dostihový sport. Databáze online [cit. 2015-11-21]. Dostupné na: http://www.stajmyto.cz/dostihov%C3%BD%20sport.htm
ANONYM 4, 2015: Pokyny k odběrům zvířecích vzorků: Stručné instrukce k odběru krve - vhodné pro psy, kočky, skot, koně, ptáky. Databáze online [cit. 2016-1-31]. Dostupné na: http://www.genomia.cz/cz/pokyny/#krev
ANONYM 5, 2015: Zdroj využitelného železa a vitamínů pro závodní koně Databáze
online
[cit.
2016-4-6].
Dostupné
na:
http://www.gaincz.eu/products/bloodaid-zdroj-zeleza-a-vit-b/
ANONYM 6, 2010: Feedmark VitaSel E vitamín E a selen. Databáze online [cit. 2016-4-6]. Dostupné na: http://www.equisboy.cz/pohybovy-aparat-kone--klouby-slachy/feedmark-vitasel-e-vitamin-e-a-selen ANONYM 7, 2008: Metabolická acidóza.
Databáze online [cit. 2016-3-22].
Dostupné na: http://www.dromy.cz/content/41-acidobazicke-poruchy
Jockey club České republiky, 2015: Statistiky. Databáze online [cit. 2016-3-11]. Dostupné na: http://www.dostihyjc.cz/statistiky.php KODÍČEK, M., 2007: laktát. Z Biochemické pojmy : výkladový slovník [online]. Praha: VŠCHT Praha,
Databáze online [cit. 2016-04-07].
Dostupné na:
38
LUDVÍKOVÁ E., PAVLATA L., 2005: Selen a vitamín E v chovech koní v České republice. Databáze online [cit. 2016-4-6]. Dostupné na: http://vetweb.cz/selen-avitamin-e-v-chovech-koni-v-ceske-republice/ MRÁZOVÁ, K., 2014: Mýty kolem dostihů: je dostihový trénink týráním?. Databáze online [cit. 2015-11-26]. Dostupné na: http://www.equichannel.cz/mytykolem-dostihu-je-dostihovy-trenink-tyranim ŠVEHLOVÁ D., 2010: Zemina jako důležitý zdroj železa pro koně. Databáze online [cit. 2016-4-6]. Dostupné na: http://www.equichannel.cz/konske-novinkygenetika-vladne-vyzkumu-i-u-koni
Veterinární klinika Pardubice, 2009: Laboratorní vybavení. Databáze online [cit. 2016-2-3]. Dostupné na: http://vetklinika-laborator.blog.cz/0906/co-nabizime
39
8 SEZNAM TABULEK, GRAFŮ, OBRÁZKŮ Tab. 1 Referenční hodnoty biochemických parametrů u koní Tab. 2 Referenční hodnoty hematologických parametrů u koní Tab. 3 Metabolický profilový test koní Tab. 4 Metabolický profilový test koní - hematologie Tab. 5 Metabolický profilový test koní – upravená norma Tab. 6 Metabolický profilový test koní, hematologie – upravená norma Tab. 7 Metabolický profilový test koně Mondego Bay Tab. 8 Metabolický profilový test koně Rabbit Moutnelson Tab. 9 Metabolický profilový test koně Rabbit Verglas Tab. 10 Metabolický profilový test koně Love Me Tab. 11 Metabolický profilový test koně Valmont Ohne Tab. 12 Metabolický profilový test koně Zamira Tab. 13 Metabolický profilový test koně Miss Mikrop Tab. 14 Metabolický profilový test koně Fantaggira Lady Tab. 15 Metabolický profilový test koně Golden Irene Tab. 16 Metabolický profilový test koně Rabbit Kylachy
Graf 1 Klidová fáze koní Graf 2 Průměrné hodnocení 5 minut po zátěži Graf 3 Průměrné hodnocení 30 minut po zátěži Graf 4 Průměrné hodnoty sledovaných faktorů Obr. 1 Anglický plnokrevník Obr. 2 Biochemický analyzátor BS - 300
40
9 SEZNAM ZKRATEK ALP - alkalická fosfatáza ALT - alaninaminotransrerása AST - aspartátaminotransferáza CK - kreatinkináza CNS - centrální nervový systém DM - dolní mez intervalu spolehlivosti g.l-1 - gram na litr GMT - gama - glutamyltransferása GSH - Px - glutathionperoxidáza fl - entitní objem HM - horní mez intervalu spolehlivosti JCČR - Jockey Club České republiky LDH - laktátdehydrogenáza LAKTÁT - anion kyseliny mléčné MCH - barevná hodnota erytrocytu MCV - průměrný objem erytrocytu MCHC - koncentrace hemoglobinu v erytrocytu mg.l-1 - miligram na litr mmol/l - milimol na litr mOsm/kg - milismol na kilo MPV - střední objem destičky nmol/l - nanomol na litr pg - entitní hmotnost RDW - distribuční šíře erytrocytu T4 - tyroxin Urea - močovina μmol.l-1 - mikromol na litr μkat.l-1 - mikrokatal na litr Ca - vápník, Cu - měď, Fe - železo, K - draslík, Mg - hořčík, Na – sodík ČR - Česká republika, GB - Velká Británie, GER – Německo, IRE – Irsko, USA Spojené státy americké
41
10 PŘÍLOHY Tab. 1 Referenční hodnoty biochemických parametrů u koní
Glukóza Celková bílkovina
Jednotka
Kůň
-1
mmol.1
4,7
g.l-1
75
-1
28,8
Alfa – globuliny
-1
g.l
15,3
Beta – globuliny
g.l-1
18,7
-1
11,1
g.l
Albumin
g.l
Gama – globuliny
mmol.1-1
Močovina
-1
μmol.l
Kreatin
g.l-1
Lipidy celkem
109 3,2
-1
mmol.1
Cholesterol
5,0
-1
2,2
Žlučové kyseliny
μmol.l
<12
Triacylglyceroly
g.l-1
0,7
-1
mg.l
Vitamín A
0,12
μmol.l-1
Bilirubin celkem
12,5
ALP
-1
μkat.l
0,3 - 2,8
GMT
μkat.l-1
0,1 - 0,5
ALT
-1
μkat.l
0,1 - 0,4
AST
μkat.l-1
0,1 - 3,3
-1
0,1 - 0,8
μkat.l
CK Sodík
-1
mmol.1
139
Draslík
mmol.1-1
4,6
Vápník
-1
mmol.1
3,0
Hořčík
mmol.1-1
0,82
Fosfor anorganický
-1
mmol.1
1,6
Chlór
mmol.1-1
101
-1
Železo
μmol.l
19,7
Měď
μmol.l-1
13
-1
15
Mangan
-1
μmol.l
0,6
Selen
μmol.l-1
1,5
-1
0,3
μmol.l
Zinek
μmol.l
Jód
(JELÍNEK, KOUDELA, 2003).
42
Tab. 2 Referenční hodnoty hematologických parametrů u koní Parametr
Jednotka
Hodnota
Hematokrit
l/l
0,32 - 0,53
Hemoglobin
g/l
110 - 190
Erytrocyty
*1012/l
6,8 - 12,9
Retikulocyty
*1012/l
-
Leukocyty
*109/l
5,4 - 14,3
Neutrofily- tyčky
*109/l
0,0 - 0,1
Neutrofily- segmenty
*109/l
2,3 - 8,6
Lymfocyty
*109/l
1,5 - 7,7
Monocyty
*109/l
0,0 - 0,1
Eozinofily
*109/l
0,0 - 0,1
Bazofily
*109/l
0,0 - 0,3
Trombocyty
*109/l
104 - 368 (DOUBEK, 2010)
43
Tab. 3 Metabolický profilový test koní Rovina
Sledované faktory Celková g/l bílkovina Albumin g/l Urea mmol/l Glukóza mmol/l Triglyceridy mmol/l Cholesterol mmol/l Kreatinin µmol/l AST µkat/l ALT µkat/l GMT µkat/l Bilirubin µmol/l celkem ALP µkat/l LDH µkat/l Laktát mmol/l Žlučové µmol/l kyseliny Ca mmol/l Ca- ion. mmol/l
Počet 10 fyziologické rozmezí DM
HM
57,00
79,00
Průměr norma
68,00
Rovinové koně Mondego Bay
R.Mountne lson
R. Verglas
Love Me
Valmont Ohne
Zamira
Miss Mikrop
Fantaggira Lady
Golden Irene
R. Kyllachy
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
54,87
58,21
55,25
53,42
63,59
55,05
56,59
26,00 37,00 31,50 3,70 8,80 6,25 4,10 6,40 5,25 0,15 0,60 0,38 1,80 3,70 2,75 77,00 175,00 126,00 1,90 4,50 3,20 0,00 0,40 0,20 0,00 0,40 0,20
31,74 33,31 3,55 4,31 6,49 5,11 0,30 0,17 2,53 1,17 85,90 117,60 4,27 4,63 0,30 0,20 0,45 0,53
30,60 3,53 5,02 0,11 1,79 97,40 4,32 0,61 0,61
32,73 36,64 3,76 4,25 5,38 6,16 0,20 0,27 2,17 2,22 97,00 106,10 4,23 4,91 0,28 0,31 0,90 0,58
33,55 3,39 6,33 0,19 2,39 98,80 5,02 0,24 0,50
34,25 34,82 32,13 33,87 3,70 3,02 3,19 4,24 6,27 6,68 6,29 5,38 0,36 0,15 0,12 0,23 2,79 2,29 1,94 2,48 92,90 106,60 103,60 126,00 4,64 5,31 4,56 5,21 0,30 0,21 0,23 0,38 0,79 0,98 0,69 0,74
15,00
34,00
24,50
39,50
52,90
40,30
59,90
47,50
42,70
44,20
49,90
54,70
40,50
1,70 1,70 1,11
3,50 6,68 1,78
2,60 4,19 1,45
2,03 6,21 4,57
3,75 4,85 5,46
3,20 7,56 5,25
3,11 6,13 3,76
2,89 6,42 6,58
3,70 7,21 4,50
3,16 6,59 4,51
2,70 5,38 4,08
3,20 7,66 4,97
1,79 5,47 4,06
0,00
12,00
6,00
6,95
3,92
4,15
6,71
0,81
14,24
8,22
6,80
7,23
6,73
2,00 1,45
3,30 1,73
2,65 1,59
3,23 1,84
3,06 1,72
2,97 1,71
2,80 1,58
3,02 1,64
2,82 1,58
2,68 1,49
2,44 1,35
2,31 1,31
2,40 1,34
44
56,63
55,79
52,07
Pokračování tabulky 3 P Mg Na K Cl Cu Fe Zn Se GSH-Px CK T4 Osmolarita
mmol/l mmol/l mmol/l mmol/l mmol/l µmol/l µmol/l µmol/l µmol/l µkat/l µkat/l nmol/l mOsm/kg
1,00 0,90 133,00 3,50 97,00 18,80 13,10 14,90 140,00 300,00 0,50 17,00 279,00
1,80 1,15 147,00 5,50 110,00 21,20 25,10 29,20 250,00 600,00 2,80 54,00 296,00
1,40 1,03 140,00 4,50 103,50 20,00 19,10 22,05 195,00 450,00 1,65 35,50 287,50
1,62 0,96 137,00 4,00 98,00 15,49 23,76 17,12 295,07 632,30 4,51 8,30 284,04
1,76 0,95 138,00 4,20 97,00 23,05 20,08 14,79 278,62 597,10 3,63 21,20 285,42
1,70 0,90 138,00 3,80 99,00 21,61 25,68 17,15 313,51 671,81 5,32 21,60 284,55
45
1,68 0,89 138,00 4,20 99,00 17,08 32,58 11,79 328,16 703,20 4,34 6,40 285,14
1,82 0,99 140,00 5,80 98,00 14,94 28,26 16,88 288,32 617,83 4,45 19,20 290,41
1,83 0,90 139,00 4,30 99,00 16,32 30,37 17,69 322,92 691,97 4,12 28,80 287,72
1,83 0,95 137,00 3,90 97,00 18,06 31,04 14,12 337,48 723,17 8,13 15,80 283,97
1,79 0,98 137,00 4,10 98,00 20,61 27,07 22,44 294,53 631,13 3,95 22,90 283,70
2,06 0,90 139,00 3,80 98,00 17,10 26,10 12,87 304,41 652,30 6,36 35,30 287,48
1,71 0,94 137,00 3,90 96,00 15,67 26,92 14,78 308,56 661,21 5,43 21,00 283,62
Tab. 4 Metabolický profilový test koní – hematologie Rovina
Počet 10
Rovinové koně
fyziologické rozmezí Průměr norma
Mondego Bay
1 Sledované faktory Leukocyty ×109/l 5,50 13,00 9,25 9,75 12 Erytrocyty ×10 /l 6,80 12,90 9,85 10,32 Hemoblobin g/l 110,00 190,00 150,00 149,00 Hematokrit l/l 0,30 0,50 0,40 0,43 9 Neu - seg ×10 /l 3,40 8,58 5,99 5,27 9 Neu - tyčky ×10 /l 0,00 0,50 0,25 0,00 9 Eozinofily ×10 /l 0,00 0,50 0,25 0,10 9 Bazofily ×10 /l 0,00 0,30 0,15 0,00 9 Lymfocyty ×10 /l 1,50 5,30 3,40 3,90 9 Monocyty ×10 /l 0,00 0,70 0,35 0,49 MCV fl 37,00 58,00 47,50 44,00 MCH pg 12,30 19,90 16,10 15,30 MCHC g/l 310,00 370,00 340,00 349,00 RDW % 15,00 21,60 18,30 16,91 9 Trombocyty ×10 /l 100,00 300,00 200,00 97,00 MPV fl 4,60 7,30 5,95 5,60 DM
HM
R. Mountnelson
R. Vergals
2
3
Love Me
Valmont Ohne
Zamira
Miss Mikrop
Fantaggira Lady
Vadeta
R. Kyllachy
4
5
6
7
8
9
10
5,60 7,29 116,00 0,33 2,74 0,00 0,00 0,00 2,52
10,40 10,09 146,00 0,42 5,30 0,10 0,31 0,00 4,37
9,10 8,91 132,00 0,41 4,73 0,00 0,18 0,00 3,82
7,30 10,23 181,00 0,54 3,65 0,07 0,07 0,00 3,43
8,60 8,58 127,00 0,38 4,04 0,00 0,09 0,09 4,39
7,50 9,44 131,00 0,40 3,68 0,00 0,00 0,00 3,68
7,20 9,99 135,00 0,41 3,60 0,00 0,22 0,00 3,31
7,70 9,70 139,00 0,42 3,08 0,00 0,15 0,00 4,24
6,10 8,97 130,00 0,39 3,66 0,00 0,06 0,06 2,26
0,34 45,00 15,90 355,00
0,31 41,00 14,50 351,00
0,36 44,00 13,70 310,00
0,07 44,00 15,00 338,00
0,18 44,00 14,80 334,00
0,15 42,00 13,90 329,00
0,07 41,00 13,50 329,00
0,23 43,00 14,30 334,00
0,06 43,00 14,50 335,00
17,30 134,00 5,80
15,75 183,00 5,90
16,91 251,00 6,60
16,91 164,00 6,00
16,91 138,00 5,80
16,18 174,00 5,80
15,75 232,00 6,00
16,52 152,00 5,80
16,52 199,00 5,70
46
Tab. 5 Metabolický profilový test koní – upravená norma
Celkem
Průměr skupiny
Počet 1
95% interval spolehlivosti
DS Rabbit fyziologické rozmezí Sledované faktory Celková g/l bílkovina Albumin g/l Urea mmol/l Glukóza mmol/l Triglyceridy mmol/l Cholesterol mmol/l Kreatinin µmol/l AST µkat/l ALT µkat/l GMT µkat/l Bilirubin µmol/l celkový ALP µkat/l LDH µkat/l Laktát mmol/l Žlučové µmol/l kyseliny
DM
HM
průměrná norma
upravená norma
DM
rozpětí
HM
rozdíl norma
57,00
79,00
68,00
56,15
53,74
4,80
58,55
-11,85
26,00 3,70 4,10 0,15 1,80 77,00 1,90 0,00 0,00
37,00 8,80 6,40 0,60 3,70 175,00 4,50 0,40 0,40
31,50 6,25 5,25 0,38 2,75 126,00 3,20 0,20 0,20
33,36 3,69 5,91 0,21 2,18 103,19 4,71 0,31 0,68
32,05 3,35 5,44 0,15 1,83 94,15 4,41 0,21 0,54
2,62 0,70 0,95 0,12 0,70 18,08 0,60 0,18 0,27
34,67 4,04 6,39 0,27 2,53 112,23 5,01 0,40 0,81
1,86 -2,56 0,66 -0,17 -0,57 -22,81 1,51 0,11 0,48
15,00
34,00
24,50
47,21
41,84
10,73
52,58
22,71
1,70 1,70 1,11
3,50 0,00 1,78
2,60 4,19 1,45
2,95 6,35 4,77
2,46 5,62 4,14
0,98 1,45 1,28
3,44 7,07 5,41
0,35 2,16 3,33
0,00
12,00
6,00
6,58
3,91
5,33
9,24
0,58
47
Pokračování tabulky 5 Ca Ca ionizovaný P Mg Na K Cl Cu Fe Zn Se GSH-Px CK T4 Osmolarita
mmol/l
2,00
3,30
2,65
2,77
2,53
0,48
3,01
0,12
mmol/l
1,45
1,73
1,59
1,55
1,42
0,28
1,69
-0,04
1,00 0,90 133,00 3,50 97,00 18,80 13,10 14,90 140,00 300,00 0,50 17,00 279,00
1,80 1,15 147,00 5,50 110,00 21,20 25,10 29,20 250,00 600,00 2,80 54,00 296,00
1,40 1,03 140,00 4,50 103,50 20,00 19,10 22,05 195,00 450,00 1,65 35,50 287,50
1,78 0,94 138,00 4,20 97,90 17,99 27,19 15,96 307,16 658,20 5,02 20,05 285,61
1,69 0,91 137,19 3,75 97,14 15,84 24,37 13,65 292,81 627,47 3,98 13,44 283,88
0,19 0,06 1,62 0,91 1,53 4,32 5,64 4,63 28,69 61,46 2,09 13,22 3,44
1,87 0,96 138,81 4,65 98,66 20,15 30,00 18,28 321,50 688,93 6,07 26,66 287,33
0,38 -0,09 -2,00 -0,30 -5,60 -2,01 8,09 -6,09 112,16 208,20 3,37 -15,45 -1,89
mmol/l mmol/l mmol/l mmol/l mmol/l µmol/l µmol/l µmol/l µmol/l µkat/l µkat/l nmol/l mOsm/kg
48
Tab. 6 Metabolický profilový test koní – upravená norma Celkem
Pořadí skupin DS Rabbit
Počet 1
95% interval spolehlivosti
fyziologické rozmezí
Sledované faktory Leukocyty ×109/l Erytrocyty ×1012/l Hemoblobin g/l Hematokrit l/l Neutrofily ×109/l segment Neutrofily ×109/l tyče Eozinofily ×109/l Bazofily ×109/l Lymfocyty ×109/l Monocyty ×109/l MCV fl MCH pg
průměrná norma
upravená norma
HM
5,50 6,80 110,00 0,30
13,00 12,90 190,00 0,50
9,25 9,85 150,00 0,40
7,93 9,35 138,60 0,41
6,75 8,63 125,06 0,37
2,36 1,45 27,09 0,08
9,10 10,08 152,14 0,45
-1,33 -0,50 -11,4 0,01
3,40
8,58
5,99
3,98
3,31
1,33
4,64
-2,01
0,00
0,50
0,25
0,02
0,00
0,06
0,06
-0,23
0,00 0,00 1,50 0,00 37,00 12,30
0,50 0,30 5,30 0,70 58,00 19,90
0,25 0,15 3,40 0,35 47,50 16,10
0,12 0,01 3,59 0,23 43,10 14,54
0,04 0,00 3,03 0,11 42,05 13,97
0,15 0,05 1,13 0,22 2,11 1,14
0,19 0,05 4,15 0,34 44,15 15,11
-0,13 -0,14 0,19 -0,12 -4,40 -1,56
49
DM
rozpětí
HM
rozdíl norma
DM
Pokračování tabulky 6 MCHC RDW Trombocyty MPV
g/l % ×109/l fl
310,00 15,00 100,00 4,60
370,00 21,60 300,00 7,30
336,40 16,56 172,40 5,90
340,00 18,30 200,00 5,95
50
326,34 16,16 136,73 5,69
20,11 0,81 71,34 0,42
346,46 16,97 208,07 6,11
-3,60 -1,74 -27,60 -0,05
Tab. 7 Metabolický profilový test koně Mondego Bay počet
fyziologické rozmezí Sledované faktory AST µkat/l ALT µkat/l GMT µkat/l LDH µkat/l Laktát mmol/l CK µkat/l
DM 1,90 0,00 0,00 1,70 1,11 0,50
Mondego Bay
3
HM 4,50 0,40 0,40 6,68 1,78 2,80
průměrná norma 3,20 0,20 0,20 4,19 1,45 1,65
klid 1 4,27 0,30 0,45 6,21 4,57 4,51
5 min. 2 3,80 0,46 0,48 6,98 7,53 6,06
51
95% interval spolehlivosti
30 min. 3 4,56 0,34 0,65 6,06 6,13 4,72
průměr 4,21 0,37 0,53 6,42 6,08 5,10
DM 3,58 0,23 0,35 5,61 3,66 3,73
rozpětí 1,25 0,27 0,35 1,61 4,83 2,74
HM 4,84 0,50 0,70 7,22 8,49 6,47
Rozdíl norma 1,01 0,17 0,33 2,23 4,63 3,45
Tab. 8 Metabolický profilový test koně Rabbit Mountnelson počet 3 fyziologické rozmezí Sledované faktory AST µkat/l ALT µkat/l GMT µkat/l LDH µkat/l Laktát mmol/l CK µkat/l
DM 1,90 0,00 0,00 1,70 1,11 0,50
HM 4,50 0,40 0,40 6,68 1,78 2,80
průměrná norma 3,20 0,20 0,20 4,19 1,45 1,65
Rabbit Mountnelson klid 5 min. 30 min. 1 4,63 0,20 0,53 4,85 5,46 3,63
2 3,42 0,46 0,55 5,92 8,82 5,37
52
3 4,71 0,26 0,51 5,73 7,64 3,94
95% interval spolehlivosti
průměr 4,25 0,31 0,53 5,50 7,31 4,31
DM 3,07 0,08 0,50 4,57 4,53 2,08
rozpětí 2,36 0,44 0,07 1,86 5,5 3,03
HM 5,43 0,53 0,56 6,43 10,09 5,83
Rozdíl norma 1,05 0,11 0,33 0,31 5,86 2,66
Tab. 9 Metabolický profilový test koně Rabbit Verglas počet 3 fyziologické rozmezí Sledované faktory AST µkat/l ALT µkat/l GMT µkat/l LDH µkat/l Laktát mmol/l CK µkat/l
DM 1,90 0,00 0,00 1,70 1,11 0,50
HM 4,50 0,40 0,40 6,68 1,78 2,80
průměrná norma 3,20 0,20 0,20 4,19 1,45 1,65
95% interval spolehlivosti
Rabbit Verglas klid 5 min. 30 min. 1 4,32 0,61 0,61 7,56 5,25 5,32
2 2,26 1,08 0,76 8,10 7,77 8,23
53
3 4,32 0,35 1,05 7,77 5,93 6,80
průměr 3,63 0,68 0,81 7,81 6,32 6,78
DM 1,69 0,08 0,44 7,37 4,19 4,41
rozpětí 3,88 1,21 0,73 0,89 4,25 4,75
HM 5,57 1,28 1,17 8,25 8,44 9,16
Rozdíl norma 0,43 0,48 0,61 3,62 4,87 5,13
Tab. 10 Metabolický profilový test koně Love Me počet 3 fyziologické rozmezí Sledované faktory AST µkat/l ALT µkat/l GMT µkat/l LDH µkat/l Laktát mmol/l CK µkat/l
DM 1,90 0,00 0,00 1,70 1,11 0,50
HM 4,50 0,40 0,40 6,68 1,78 2,80
průměrná norma 3,20 0,20 0,20 4,19 1,45 1,65
klid 1 4,23 0,28 0,90 6,13 3,76 4,34
95% interval spolehlivosti
Love Me 5 min. 30 min. 2 4,31 0,56 0,56 7,87 8,72 3,72
54
3 3,61 0,32 0,48 5,31 7,88 12,88
průměr 4,05 0,39 0,65 6,44 6,79 16,65
DM 3,43 0,14 0,28 4,31 2,46 0,00
rozpětí 1,25 0,49 0,73 4,26 8,66 47,48
HM 4,67 0,63 1,01 8,57 11,12 40,39
Rozdíl norma 0,85 0,19 0,45 2,25 5,34 15,00
Tab. 11 Metabolický profilový test koně Valmont ohne počet 3 fyziologické rozmezí Sledované faktory AST µkat/l ALT µkat/l GMT µkat/l LDH µkat/l Laktát mmol/l CK µkat/l
DM 1,90 0,00 0,00 1,70 1,11 0,50
HM 4,50 0,40 0,40 6,68 1,78 2,80
průměrná norma 3,20 0,20 0,20 4,19 1,45 1,65
95% interval spolehlivosti
Valmont Ohne klid 5 min. 30 min. 1 4,91 0,31 0,58 6,42 6,58 4,45
2 4,58 0,69 0,53 9,97 8,98 4,57
55
3 2,91 1,06 0,48 8,70 8,73 3,01
průměr 4,13 0,69 0,53 8,36 8,10 24,39
DM 2,39 0,08 0,45 5,43 5,95 0,00
rozpětí 3,50 1,22 0,16 5,87 4,30 67,37
HM 5,88 1,30 0,61 11,30 10,25 58,07
Rozdíl norma 0,93 0,49 0,33 4,17 6,65 22,74
Tab. 12 Metabolický profilový test koně Zamira počet 3 fyziologické rozmezí Sledované faktory AST µkat/l ALT µkat/l GMT µkat/l LDH µkat/l Laktát mmol/l CK µkat/l
DM 1,90 0,00 0,00 1,70 1,11 0,50
HM 4,50 0,40 0,40 6,68 1,78 2,80
průměrná norma 3,20 0,20 0,20 4,19 1,45 1,65
klid 1 5,02 0,24 0,50 7,21 4,50 4,12
Zamira 5 min. 30 min. 2 4,01 0,48 0,50 7,31 7,47 4,81
56
3 4,31 0,35 1,05 6,45 5,98 5,31
95% interval spolehlivosti
průměr 4,45 0,36 0,68 6,99 5,98 4,75
DM 3,60 0,16 0,17 6,22 3,56 3,77
rozpětí 1,69 0,39 1,04 1,53 4,84 1,95
HM 5,29 0,55 1,20 7,76 8,40 5,72
Rozdíl norma 1,25 0,16 0,48 2,80 4,54 3,10
Tab. 13 Metabolický profilový test koně Miss Mikrop počet 3 fyziologické rozmezí Sledované faktory AST µkat/l ALT µkat/l GMT µkat/l LDH µkat/l Laktát mmol/l CK µkat/l
DM 1,90 0,00 0,00 1,70 1,11 0,50
HM 4,50 0,40 0,40 6,68 1,78 2,80
průměrná norma 3,20 0,20 0,20 4,19 1,45 1,65
95% interval spolehlivosti
Miss Mikrop klid 5 min. 30 min. 1 4,64 0,30 0,79 6,59 4,51 8,13
2 4,91 0,36 0,53 7,81 8,49 6,73
57
3 3,54 0,53 0,79 5,74 7,48 7,74
průměr 4,36 0,40 0,70 6,71 6,83 7,53
DM 3,18 0,20 0,46 5,02 3,45 6,36
rozpětí 2,37 0,39 0,49 3,39 6,75 2,36
HM 5,55 0,59 0,95 8,41 10,20 8,71
Rozdíl norma 1,16 0,20 0,5 2,52 5,38 5,88
Tab. 14 Metabolický profilový test koně Fantaggira Lady počet 3 fyziologické rozmezí Sledované faktory AST µkat/l ALT µkat/l GMT µkat/l LDH µkat/l Laktát mmol/l CK µkat/l
DM 1,90 0,00 0,00 1,70 1,11 0,50
HM 4,50 0,40 0,40 6,68 1,78 2,80
průměrná norma 3,20 0,20 0,20 4,19 1,45 1,65
95% interval spolehlivosti
Fantaggira Lady klid 5 min. 30 min. 1 5,31 0,21 0,98 5,38 4,08 3,95
2 4,58 0,47 0,93 5,65 8,11 6,57
58
3 3,21 0,59 0,96 5,14 7,62 5,75
průměr 4,37 0,42 0,96 5,39 6,60 5,42
DM 2,63 0,11 0,92 4,97 3,02 3,24
rozpětí 3,48 0,63 0,08 0,83 7,17 4,37
HM 6,11 0,74 1,00 5,81 10,19 7,61
Rozdíl norma 1,17 0,22 0,76 1,20 5,16 3,77
Tab. 15 Metabolický profilový test koně Golden Irene počet 3 fyziologické rozmezí Sledované faktory AST µkat/l ALT µkat/l GMT µkat/l LDH µkat/l Laktát mmol/l CK µkat/l
DM 1,90 0,00 0,00 1,70 1,11 0,50
HM 4,50 0,40 0,40 6,68 1,78 2,80
průměrná norma 3,20 0,20 0,20 4,19 1,45 1,65
95% interval spolehlivosti
Golden Irene klid 5 min. 30 min. 1 4,56 0,23 0,69 7,66 4,97 6,36
2 4,94 0,34 0,83 7,92 7,72 4,27
59
3 3,32 0,40 1,02 5,45 7,59 4,09
průměr 4,27 0,32 0,85 7,01 6,76 4,91
DM 2,89 0,18 0,58 4,80 4,23 2,85
rozpětí 2,76 0,28 0,54 4,43 5,06 4,12
HM 5,65 0,46 1,12 9,22 9,29 6,96
Rozdíl norma 1,07 0,12 0,65 2,82 5,32 3,26
Tab. 16 Metabolický profilový test koně Rabbit Kyllachy počet 3 fyziologické rozmezí Sledované faktory AST µkat/l µkat/l ALT µkat/l GMT µkat/l LDH Laktát mmol/l CK µkat/l
DM 1,90 0,00 0,00 1,70 1,11 0,50
HM 4,50 0,40 0,40 6,68 1,78 2,80
průměrná norma 3,20 0,20 0,20 4,19 1,45 1,65
Rabbit Kyllachy klid 5 min. 30 min. 1 5,21 0,38 0,74 5,47 4,06 5,43
2 4,69 0,51 0,67 9,05 8,58 6,86
60
3 3,71 0,49 0,76 8,26 7,28 5,88
95% interval spolehlivosti
průměr 4,54 0,46 0,72 7,59 6,64 6,06
DM rozpětí 3,29 2,48 0,35 0,23 0,65 0,15 4,53 6,13 2,85 7,59 4,86 2,38
HM 5,78 0,57 0,8 10,66 10,43 7,25
Rozdíl norma 1,34 0,26 0,52 3,40 5,20 4,41
Klidová fáze koní 9 8 7 6 AST
5
ALT 4
GMT
3
LDH
2
Laktát CK
1 0
Graf 11 Klidová fáze koní
61
Hodnocení 5 minut po zátěži 12 10
8 AST 6
ALT GMT
4
LDH Laktát
2
CK
0
Graf 12 Průměrné hodnocení 5 minut po zátěži
62
Hodnocení 30 minut po zátěži 14 12 10 AST
8
ALT 6
GMT LDH
4
Laktát 2
CK
0
Graf 13 Průměrné hodnocení 30 minut po zátěži
63
Průměrné hodnoty sledovaných faktorů 9 8 7
AST
6
ALT
5
GMT
4
LDH
3
Laktát
2
CK
1 0 Klid
5 minut
Graf 14 Průměrné hodnoty sledovaných faktorů
64
30 minut