A laboratórium szerepe a mérések visszavezethetőségével és standardizációjával kapcsolatosan
Márki-Zay János SZTE ÁOK Biokémia Intézet
Institute for Reference Materials and Measurements
Az IVD direktiva (98/79/EC)
Referencia mérési rendszer (RMS)
Visszavezethetőség (Traceability)
Hibalehetőségek a visszavezethetőségi láncban, commutability (átvihetőség)
A laboratóriumok feladatai
EC - JRC - IRMM
The mission of the IRMM is to promote a common and reliable European measurement system in support of EU policies.
Referencia anyagok: R&D csoportok TSE Testing
Food CRMs
GMO CRMs
Microbiol. CRMs Soil/ Sediment CRMs
Clinical CRMs
Water CRMs
Engin. Mat. CRMs
Accreditation according to ISO Guide 34 & ISO 17025
Megbízható mérési adatok Standardizáció
Metrológia “korrekt” analízis
“harmonizált módszerek”
• Visszavezethetőség (Traceability) • Mérési bizonytalanság (uncertainty)
Meghatározott módszerek/eljárások
Törvényi szabályozás
A módszerekkel szemben támasztott követelmények
IVD direktíva 98/79/EC
Az IVD Direktiva (98/79/EC) „The traceability of values assigned to calibrators and/or control materials must be assured through available reference measurement procedures and/or available reference materials of a higher order.”
!
2005. december 7.− a direktívát alkalmazni kell minden olyan IVD termékre, amit „használatba vesznek”!
Harmonizált standardok (pl. ISO/EN 17511): Önkéntes alapon választható megoldások a megfelelésre "It is essential that results reported to physicians and patients are adequately accurate (true and precise) to allow correct medical interpretation and comparability over time and space."
Referencia mérési rendszer (RMS) Előfeltételek: − Nemzeti/nemzetközi standardok és előírások − Analit definíciója és a mérési egység meghatározása
Referencia anyagok (RM) (a kereskedelemben kapható kalibrátorok és kontrollok kalibrációjához)
Referencia mérési eljárások (RMP) (optimalizált és standardizált) Referencia mérőlaboratóriumok
A rendszer eredményes működéséhez szükséges: – Referencia laboratóriumok hálózata (RMs kifejlesztése és evaluálása!) – External Quality Assurance programok
Az RMS alkalmazásának előnyei A referencia módszerek és/vagy referencia anyagok elérhetősége és megfelelő alkalmazása ¾
¾
¾
Az eredmények térben és időben összehasonlíthatóak és a legmagasabb szintű metrológiai standardokra visszavezethetőek lesznek Meghatározhatóak a referencia tartományok és a különböző klinikai határértékek ill. terápiás tartományok Biztosítja az eredmények megfelelő pontosságát (valósság és precízió)
Visszavezethetőség (Traceability) “The property of the result of a measurement or the value of a standard whereby it can be related to stated references, usually national or international standards, through an unbroken chain of comparisons all having stated uncertainties” International Vocabulary of Basic and General Terms in Metrology, ISO, 1993
Egy mérési eredménynek vagy etalon értékének az a tulajdonsága, hogy ismert bizonytalanságú összehasonlítások megszakítatlan láncolatán keresztül kapcsolódik meghatározott referenciákhoz, rendszerint országos vagy nemzetközi etalonokhoz.
Visszavezethetőségi láncolat MATE RI AL
C AL IBRA TION VAL UE A SS IGNM EN T
PR OC ED URE
a) d efinit ion of SI unit
M ET ROL OGICAL TRA CE AB IL ITY
d) se condary ref er ence m easur em ent pr ocedure e) se con dary calibr at orb
f) manufactur er ’s sele cted m easur em ent pr ocedure
g) manufactu rer’s working calibr ato rb
BI PM, NMI a , ARML BI PM, NMI
a
N MI , ARM L N MI , ARM L, ML ML ML
h) manufa ctu rer’s standin g measur em ent pr ocedu re
i) ma nu factur er’s pr oduct calibr ato rb
ML ML
j) end- user ’s r outin e m easur em ent pr ocedure routin e sample
m anufa cturer an d/or end-user end- user
RESU LT
uc ( y)
C GPM b) primary refere nce m easur em ent pr ocedure
c) pr ima ry calibr ato r
IM PL EMENT AT ION
end- user
a
Visszavezethetőség: mire? ¾
SI Stabil bázis, az SI-re visszavezethetőséget biztosító módszerek reprodukálhatóan összehasonlítható eredményeket szolgáltatnak.
¾
Konvencionális standard (pl. WHO biológiai standard) Az egységek („IU”) az adott anyag tulajdonságai által meghatározottak, melyek nehezen reprodukálhatóak.
¾
Módszer (a mérendő a módszer által meghatározott, pl. hőmérséklet − IVD területen nem jellemző)
9 Vezérelv: A közös standardra való visszavezethetőség biztosítja a független mérések eredményeinek ismert bizonytalanságú helyességét és összehasonlíthatóságát.
A visszavezethetőség feltételei
Az visszavezethetőségi láncolatban használt mérőmódszerek ugyanazt az analitot határozzák meg. Az összehasonlító mérések nem visznek be fel nem ismert eltéréseket (pl. mátrix hatás) A kombinált mérési bizonytalanság becslése során minden lényeges bizonytalansági komponens figyelembe vétele megtörtént A visszavezethetőség biztosítása együttműködést igényel: ● A referencia anyagok és a referencia módszerek szerepe a referencia értékek szolgáltatása ● A referencia laboratóriumok funkciója szintén ezt szolgálja
Hibalehetőségek a visszavezethetőségi láncolat tervezésében
¾
Bizonyos biokémiai analitok (pl. enzimek, fehérjék, DNS) esetében monoparaméteres visszavezethetőségi koncepció alkalmazása, mely nem vesz figyelembe olyan releváns tényezőket, mint a struktúra, denaturáció / intakt állapot, aktivitás, immunológiai reaktivitás és kinetika, mikrokörnyezet, mátrix hatás. Nem megfelelő módszerválasztás vagy érték-átviteli séma Nem megfelelő referencia anyagok és kalibrátorok használata Ilyen esetekben a rutin mérések összehasonlíthatóságában a várt javulás elmarad, sőt akár adverz hatás is megfigyelhető
cTnI standardizáció 1000.00
o Manufacturer’s calibration Δ SRM 2921
cTnI (μg/L)
100.00
10.00
1.00
0.10
0.01
SP 1
SP 2
SP 3 Serum Pools
SP 4
SP 5
SP 6
Commutability (átvihetőség) Degree to which a material yields the same numerical relationships between results of measurements by a given set of measurement procedures, purporting to measure the same quantity, as those between the expectations of the relationships for the same procedures applied to those types of material for which the procedures are intended.
A referencia anyag* tulajdonsága
A mátrix hatása (pl. az aktivitásra, immunoreaktivitásra)
Analitikai artefaktumok, melyek a referencia anyag* feldolgozása (pl. fagyasztása, liofilizálása) során keletkeznek
Hiánya a visszavezethetőségi láncolat megszakadását eredményezi, ha nem áll rendelkezésre alternatív módszer
¾
Azok a referencia anyagok*, melyeknél biztosított felhasználhatóak a visszavezethetőségi láncolat lerövidítésére és általánosan is QC mérésekre
¾
LiquichekTM Cardiac Markers Control (L1) ¾
¾
¾
¾
¾
CK, TOTAL BC Syncron CX (IFCC 2002): Dade B Dimension (IFCC 2002): Ortho Vitros (IFCC 2002): Roche Hitachi (IFCC 2002): CK-MB izoenzim Aktivitásra (6 módszer): Mass (14 módszer):
(BCR-299) 204 U/L 117 U/L 39 U/L 245 U/L
(Aktivitás: ERM-AD455) 6,5-122; U/L 1,9-4,6 ng/mL
Myoglobin 14 különböző módszer:
(CRM projekt folyamatban) 40-65 ng/mL
Troponin-I 10 különböző módszer:
(SRM-2921*) 0,4-5,6 ng/mL
Troponin-T 1 készülék (STAT és normál):
0,2 ng/mL
Laboratóriumok feladatai
Reagensek, kontrollok és kalibrátorok megválasztása: − CE jelölés? Dokumentáció IVDD konform? − A visszavezethetőség (a lehetséges mértékben) biztosított és dokumentált? − Referencia módszer (enzimek)? − Amennyiben a visszavezethetőség lehetősége csak a gyártóig terjed, illetve immunkémiai módszerek esetében „márkahűség”. − Konvencionális (WHO) standardokra visszavezethető módszereknél a legújabb preparátumra visszavezethető kitek preferálása.
Laboratóriumok feladatai 2.
Belső minőségi kontroll: − „Kell érték” − Hosszú távú precizió adatok (mérési bizonytalanság) − Commutability? Külső minőségellenőrzési program(ok)ban való részvétel: − Lehetőleg célérték alapján történő értékelés (QualiCont). − Szükség esetén korrekciós lépések Referencia tartományok felülvizsgálata − Szükséges változtatások elvégzése − Kommunikációja Tapasztalt problémák jelentése ? − Gyártó, OLVSZK, ORKI
Összefoglalás Az eredmények visszavezethetősége Jogszabályi előírás Megvalósítása hatékony eszköz a független mérési eredmények megbízhatóságának és összehasonlíthatóságának biztosításában. Bár a követelmények oroszlánrésze a gyártókra vonatkozik, a laboratóriumokra is fontos szerep hárul. Magyarországon nem kap kellő figyelmet
