��������������������������������������������� ���������������������������������������������
����������������������������������������������������������������� ����������������������������������������������������������������� ���������������������������������������������������������������� ���������������������������������������������������������������� ��������������������������������������������������������������� ��������������������������������������������������������������� �������������������������������������������������� �������������������������������������������������� ���������������������������������������������������������������������������������� �������������������������������������������������������������������������������� ���������������������������������������������������������������������������������� ����������������������������������������������������������������������������������� �������������������������������������������������������������������������������� ������������������������������������������������������������������������������������� ����������������������������������������������������������������������������������� ������� ������������ ������ �� ������������ ���������� ��������� ������������� ����������� ������������������������������������������������������������������������������������� ���������� ����������� ����� ����������� ������ ������������ ����� ������������� ������� ������������ ������ �� ������������ ���������� ��������� ������������� ����������� ������� ��� ���������� ��� ��������� ���������� ��������� ��������� �������� ���������� ������������������� ����� ����������� ������ ������������ ����� ������������� ���������������������������������������������������������������������������������� ������� ��� ���������� �������� ��� ��������� ���������� ��������� ��������� �������� �������������������������������������������������������������������������������� ���������������������������������������������������������������������������������� ���������������������������������������������������������������������������� �������������������������������������������������������������������������������� ������� ��� ������������ ������������ ������ ������� �������������� ������� ��������� ���������������������������������������������������������������������������� ������������������������������������������������������������������������������������ ������� ��� ������������ ������������ ������ ������� �������������� ������� ��������� ����������������������������������������������������� ������������������������������������������������������������������������������������ �����������������������������������������������������
����������������������������������
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz
��������������������������������������������� ����������������������������������������������������������������� ���������������������������������������������������������������� ��������������������������������������������������������������� �������������������������������������������������� ���������������������������������������������������������������������������������� �������������������������������������������������������������������������������� ����������������������������������������������������������������������������������� ������������������������������������������������������������������������������������� ������� ������������ ������ �� ������������ ���������� ��������� ������������� ����������� ���������� ����������� ����� ����������� ������ ������������ ����� ������������� ������� ��� ���������� �������� ��� ��������� ���������� ��������� ��������� �������� ���������������������������������������������������������������������������������� �������������������������������������������������������������������������������� ���������������������������������������������������������������������������� ������� ��� ������������ ������������ ������ ������� �������������� ������� ��������� ������������������������������������������������������������������������������������ �����������������������������������������������������
����������������������������������
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz, UID: KOS181515
��������������������������������������������� ����������������������������������������������������������������� ���������������������������������������������������������������� ��������������������������������������������������������������� �������������������������������������������������� ���������������������������������������������������������������������������������� �������������������������������������������������������������������������������� ����������������������������������������������������������������������������������� ������������������������������������������������������������������������������������� ������� ������������ ������ �� ������������ ���������� ��������� ������������� ����������� ���������� ����������� ����� ����������� ������ ������������ ����� ������������� ������� ��� ���������� �������� ��� ��������� ���������� ��������� ��������� �������� ���������������������������������������������������������������������������������� �������������������������������������������������������������������������������� ���������������������������������������������������������������������������� ������� ��� ������������ ������������ ������ ������� �������������� ������� ��������� ������������������������������������������������������������������������������������ �����������������������������������������������������
����������������������������������
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz, UID: KOS181515
Obsah Seznam zkratek . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Úvod . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 Struèná fyziologie a patologie imunitního systému (J. Bartùòková) . 1.1 Sloky a funkce imunitního systému . . . . . . . . . . . . . . . . 1.2 Bunìèné sloky imunity . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.2.1 Bunìèná imunita nespecifická . . . . . . . . . . . . . . . 1.2.1.1 Fagocytující buòky . . . . . . . . . . . . . . . 1.2.1.2 Buòky NK . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.2.1.3 Bazofily, írné buòky a dalí buòky . . . . . . 1.2.2 Bunìèná imunita specifická . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.2.2.1 Lymfocyty T pomahaèi . . . . . . . . . . . . 1.2.2.2 Lymfocyty T supresorovì cytotoxické buòky 1.2.2.3 Pamìové buòky . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.3 Humorální sloky imunity . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.3.1 Nespecifická imunita humorální . . . . . . . . . . . . . . 1.3.1.1 Komplementový systém . . . . . . . . . . . . . 1.3.1.2 Proteiny akutní fáze . . . . . . . . . . . . . . . 1.3.2 Specifická imunita humorální . . . . . . . . . . . . . . . 1.3.2.1 Protilátky . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.3.2.2 Autoprotilátky . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.3.2.3 Monoklonální protilátky . . . . . . . . . . . . 1.4 Komunikace mezi slokami imunity . . . . . . . . . . . . . . . . 1.4.1 Cytokiny . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.4.2 Adhezivní molekuly . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.5 HLA systém . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.6 Fyziologická imunitní reakce . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.7 Patologické imunitní reakce . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.7.1 Atopická reakce èasná pøecitlivìlost, I. typ . . . . . . . . 1.7.2 Cytotoxická reakce, II. typ . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.7.3 Imunokomplexová reakce, III. typ . . . . . . . . . . . . . 1.7.4 Reakce oddálené pøecitlivìlosti, IV. typ . . . . . . . . . . 1.8 Nemoci z poruch imunity . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.8.1 Imunodeficience . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.8.1.1 Primární imunodeficience . . . . . . . . . . . . 1.8.1.2 Sekundární imunodeficience . . . . . . . . . . 1.8.2 Autoimunitní onemocnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.8.2.1 Systémové autoimunitní choroby . . . . . . . . 1.8.2.2 Orgánovì specifické autoimunitní choroby . . . 1.8.3 Alergie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
12 17 19 19 21 21 21 22 22 23 23 23 24 24 25 25 26 26 26 27 28 28 28 29 30 30 32 33 33 34 34 35 35 35 36 37 38 40 41
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz, UID: KOS181515
2
Metody pouívané v laboratorní diagnostice imunopatologických stavù (M. Paulík, R. píek, O. Hruák, J. Bartùòková) . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1 Metody uívané k vyetøování sloek humorální imunity (M. Paulík) . . 2.1.1 Obecné principy reakce antigen-protilátka . . . . . . . . . . . . . 2.1.1.1 Nativní a rekombinantní antigeny . . . . . . . . . . . . 2.1.1.2 Polyklonální a monoklonální protilátky . . . . . . . . . 2.1.1.3 Afinita . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.1.4 Avidita . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.2 Elektroforéza a imunoelektroforéza . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.2.1 Princip metod a jejich úskalí . . . . . . . . . . . . . . 2.1.2.2 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.2.3 Pøístrojové vybavení a ekonomická rozvaha . . . . . . 2.1.2.4 Podmínky odbìru materiálu, rychlost vyetøení . . . . . 2.1.3 Radiální imunodifuze . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.3.1 Princip metody a její úskalí . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.3.2 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.4 Nefelometrie a turbidimetrie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.4.1 Princip metod a jejich úskalí . . . . . . . . . . . . . . 2.1.4.2 Pøístrojové vybavení, uplatnìní a ekonomická rozvaha . 2.1.5 Aglutinace a hemaglutinace . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.6 Komplement fixaèní testy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.7 Imunoreakce se znaènými protilátkami RIA, ELISA, EIA . . . . 2.1.7.1 Principy metod a jejich úskalí . . . . . . . . . . . . . . 2.1.7.2 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.7.3 Pøístrojové vybavení a ekonomická rozvaha . . . . . . 2.1.8 Imunoblotting . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.8.1 Princip metod a jejich uplatnìní . . . . . . . . . . . . . 2.1.9 Imunofluorescence . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.9.1 Princip metody a její úskalí . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.9.2 Pøístrojové vybavení a ekonomická rozvaha . . . . . . 2.1.9.3 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.1.10 Stanovení protilátek a antigenù prùtokovou cytometrií . . . . . . 2.2 Metody uívané k vyetøování sloek bunìèné imunity (R. píek) . . . . 2.2.1 Techniky izolace bunìk . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.1.1 Gradientová centrifugace . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.1.2 Izolace lymfocytù T pomocí rozet . . . . . . . . . . . . 2.2.1.3 Imunomagnetická selekce bunìk . . . . . . . . . . . . 2.2.1.4 Selekce pomocí prùtokové cytometrie . . . . . . . . . 2.2.2 Prùtoková cytometrie (O. Hruák) . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.2.1 Princip metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.2.2 Analýza a grafické znázornìní . . . . . . . . . . . . . 2.2.2.3 Odesílání výsledkù . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.2.4 Úskalí metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.2.5 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.2.6 Pøístrojové vybavení a ekonomická rozvaha . . . . . . 2.2.2.7 Podmínky odbìru, rychlost vyetøení . . . . . . . . . . 2.2.3 Rozetové testy (J. Bartùòková) . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
43 43 43 44 45 45 45 46 46 47 48 48 48 48 49 50 50 51 52 53 53 54 56 56 57 57 58 58 62 62 63 64 64 64 66 66 68 68 68 69 71 72 72 74 74 75
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz, UID: KOS181515
2.2.4
2.3
Proliferace lymfocytù (blastická transformace) (R. píek) . . . . 2.2.4.1 Princip metody a úskalí . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.4.2 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.4.3 Pøístrojové vybavení a ekonomická rozvaha . . . . . . 2.2.5 Enzyme-linked ImmunoSpot Assay (ELISPOT) (R. píek) . . . 2.2.5.1 Princip metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.5.2 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.5.3 Pøístrojové vybavení a ekonomická rozvaha . . . . . . 2.2.6 Cytotoxické testy (R. píek) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.6.1 Cytotoxický test zaloený na uvolòování 51Cr princip metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.6.2 Úskalí metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.6.3 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.6.4 Podmínky odbìru materiálu, rychlost vyetøení . . . . 2.2.6.5 Pøístrojové vybavení a ekonomická rozvaha . . . . . . 2.2.7 Fagocytóza (J. Bartùòková) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.7.1 Princip metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.7.2 Úskalí metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.7.3 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.7.4 Pøístrojové vybavení a ekonomická rozvaha . . . . . . 2.2.8 Baktericidní test (J. Bartùòková) . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.8.1 Princip metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.8.2 Úskalí metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.8.3 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.8.4 Pøístrojové vybavení, ekonomická rozvaha . . . . . . . 2.2.8.5 Podmínky odbìru materiálu, rychlost vyetøení . . . . 2.2.9 Testy oxidaèního metabolizmu NBT, INT (J. Bartùòková) . . . 2.2.9.1 Princip metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.9.2 Úskalí metody a uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.9.3 Pøístrojové vybavení, ekonomická rozvaha . . . . . . . 2.2.10 Chemiluminiscence (J. Bartùòková) . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.10.1 Princip metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.10.2 Úskalí metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.10.3 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.10.4 Pøístrojové vybavení, ekonomická rozvaha . . . . . . . 2.2.10.5 Podmínky odbìru materiálu, rychlost vyetøení . . . . 2.2.11 Imunohistochemické metody (K. Smetana) . . . . . . . . . . . . 2.2.11.1 Princip metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.11.2 Pøíprava bunìk a tkání . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.11.3 Vlastní imunohistochemická reakce . . . . . . . . . . 2.2.11.4 Metoda vícenásobného znaèení . . . . . . . . . . . . . 2.2.11.5 Úskalí metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.11.6 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.2.11.7 Pøístrojové vybavení a ekonomická rozvaha . . . . . . 2.2.11.8 Podmínky odbìru materiálu, rychlost vyetøení . . . . Metody molekulární biologie (R. píek) . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.1 PCR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . .
. . . . . . . . .
75 75 76 77 77 77 79 79 79
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
79 80 80 81 81 81 81 82 82 82 83 83 83 83 83 84 84 84 84 84 85 85 85 85 86 86 86 86 86 87 88 88 89 90 91 91 91
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz, UID: KOS181515
2.3.1.1 Princip metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Reverznì-transkriptázová PCR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.2.1 Princip metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.2.2 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.3 Kvantitativní PCR v reálném èase . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.3.1 Princip metody . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.3.2 Princip a uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.4 Genomika (M. Paulík, R. píek) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.5 DNA mikroèipy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.5.1 Princip . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.5.2 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.5.3 Pøístrojové vybavení a ekonomická rozvaha . . . . . . . 2.3.6 Proteomika (R. píek) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.6.1 Princip . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.6.2 Uplatnìní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Monosti vyetøování sloek imunity (A. edivá, J. Bartùòková, R. píek, E. Vernerová) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1 Vyetøení parametrù humorální imunity . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.1 Protilátky (A. edivá) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.1.1 Metody vyetøení protilátek . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.1.2 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.1.3 Interpretace patologických výsledkù . . . . . . . . . . . 3.1.2 Vyetøení monoklonální komponenty . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.2.1 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.2.2 Interpretace patologických výsledkù . . . . . . . . . . . 3.1.3 Kryoglobuliny . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.3.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.3.2 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.3.3 Interpretace výsledkù . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.4 Vyetøení imunokomplexù . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.4.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.4.2 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.4.3 Interpretace výsledkù . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.5 Proteiny akutní fáze a sedimentace erytrocytù . . . . . . . . . . . . 3.1.5.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.5.2 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.5.3 Interpretace vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.6 Komplement a jeho sloky . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.6.1 Metody stanovení sloek a funkce komplementu . . . . . 3.1.6.2 Porovnání metodických pøístupù . . . . . . . . . . . . . 3.1.6.3 Indikace k vyetøení a interpretace patologických hodnot 3.1.7 Autoprotilátky (J. Bartùòková) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.7.1 Metody stanovení a jejich porovnání . . . . . . . . . . . 3.1.7.2 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1.7.3 Výskyt jednotlivých typù autoprotilátek . . . . . . . . . 3.1.7.4 Interpretace patologických výsledkù . . . . . . . . . . . 3.2 Vyetøení parametrù bunìèné imunity . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2.3.2
3
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz
. . . . . . . . . . . . . .
92 93 93 94 94 94 96 96 97 97 97 98 99 99 100 101 101 101 101 103 103 104 104 105 105 105 105 106 106 106 106 106 106 107 107 107 108 108 109 109 110 110 111 111 114 114
3.2.1
Stanovení povrchových znakù lymfocytù a dalích bunìk (J. Bartùòková) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.1.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.1.2 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.1.3 Rozmezí normálních hodnot . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.1.4 Interpretace patologických výsledkù . . . . . . . . . . . 3.2.2 Funkèní testy lymfocytù . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.2.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.2.2 Porovnání jednotlivých metodických pøístupù . . . . . . 3.2.2.3 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.2.4 Rozmezí normálních hodnot . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.2.5 Interpretace patologických výsledkù . . . . . . . . . . . 3.2.3 Cytotoxicita NK bunìk a lymfocytù T (R. píek) . . . . . . . . . 3.2.3.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.3.2 Porovnání jednotlivých metodických pøístupù . . . . . . 3.2.3.3 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.4 Stanovení cytokinù (R. píek) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.4.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.4.2 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.5 Fagocytóza (J. Bartùòková) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.5.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.5.2 Porovnání jednotlivých metodických pøístupù . . . . . . 3.2.5.3 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.5.4 Rozmezí normálních hodnot . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.5.5 Interpretace patologických výsledkù . . . . . . . . . . . 3.2.6 Chemotaxe (J. Bartùòková) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.6.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.6.2 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.7 Oxidaèní metabolizmus (J. Bartùòková) . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.7.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.7.2 Porovnání jednotlivých metodických pøístupù . . . . . . 3.2.7.3 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.7.4 Rozmezí normálních hodnot a interpetace patologických výsledkù . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.8 Mikrobicidie fagocytù (J. Bartùòková) . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.8.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.8.2 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.9 Test aktivace bazofilù (E. Vernerová) . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.9.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.9.2 Porovnání jednotlivých metodických pøístupù . . . . . . 3.2.9.3 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.9.4 Rozmezí normálních hodnot . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.9.5 Interpretace patologických výsledkù . . . . . . . . . . . 3.2.10 Eozinofilní kationický protein (ECP) (E. Vernerová) . . . . . . . . 3.2.10.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.10.2 Indikace k vyetøení a rozmezí normálních hodnot . . . . 3.2.10.3 Interpretace patologických výsledkù . . . . . . . . . . .
114 114 114 115 116 117 117 117 118 118 119 119 119 119 119 119 120 120 121 121 121 121 122 122 122 122 123 123 123 124 124 124 124 124 125 125 125 125 126 126 126 127 127 127 127
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz, UID: KOS181515
4
3.2.11 Vyetøení apoptózy (E. Hõlzelová) . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.11.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.11.2 Indikace k vyetøení a interpretace patologických výsledkù 3.2.12 Typizace HLA (R. píek) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.12.1 Metody stanovení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.12.2 Nomenklatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.12.3 Materiál . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.12.4 Indikace k vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Vyetøovací algoritmy pøi diagnostice imunopatologických stavù (A. edivá, J. Bartùòková, E. Vernerová, R. píek) . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.1 Diagnostika imunodeficiencí (A. edivá) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.1.1 Anamnéza . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.1.1.1 Anamnéza rodinná . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.1.1.2 Anamnéza osobní . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.1.2 Klinický obraz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.1.3 Spektrum indikovaných vyetøení imunologických . . . . . . . . . 4.1.3.1 Krevní obraz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.1.3.2 Imunoglobuliny . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.1.3.3 Komplement . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.1.3.4 Poèet, zastoupení a funkce lymfocytù . . . . . . . . . . . 4.1.3.5 Poèet, zastoupení a funkce fagocytárních bunìk . . . . . 4.1.3.6 Genetická vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.1.3.7 Dalí vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2 Diagnostika autoimunitních onemocnìní (J. Bartùòková) . . . . . . . . . . 4.2.1 Anamnéza . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.2 Klinický obraz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.3 Spektrum indikovaných vyetøení imunologických . . . . . . . . . 4.2.3.1 Autoprotilátky . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.3.2 Imunoglobuliny . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.3.3 Komplement . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.3.4 CRP a jiné proteiny akutní fáze . . . . . . . . . . . . . . 4.2.3.5 HLA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.3.6 Subpopulace lymfocytù . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.3.7 Cytokiny . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.4 Spektrum dalích pomocných vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.4.1 Sedimentace erytrocytù . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.4.2 Sérologické vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.4.3 Histologické vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.4.4 Hematologické vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.4.5 Biochemické vyetøení . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.4.6 Zobrazovací a dalí metody . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.4.7 Neurologické pomocné vyetøovací metody . . . . . . . 4.3 Diagnostika alergických onemocnìní (E. Vernerová) . . . . . . . . . . . . 4.3.1 Anamnéza . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.3.2 Klinický obraz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.3.2.1 Alergická rýma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.3.2.2 Atopický ekzém . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
128 128 129 129 129 130 131 131 132 132 132 132 133 133 135 135 136 137 138 139 139 140 140 140 140 141 141 144 144 145 145 145 146 146 146 146 146 146 147 147 147 147 148 149 150 150
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz, UID: KOS181515
4.3.2.3 Astma bronchiale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.3.2.4 Alergie na hmyzí bodnutí . . . . . . . . . . . . . . . 4.3.2.5 Potravinová alergie . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.3.2.6 Systémová anafylaxe . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.3.3 Spektrum indikovaných imunologických vyetøení . . . . . . . 4.3.3.1 Koní testy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.3.3.2 Stanovení koncentrace protilátek IgE . . . . . . . . . 4.3.3.3 Stanovení koncentrace specifických protilátek IgE . . 4.3.3.4 Srovnání koních testù a stanovení specifického IgE . 4.3.3.5 Expozièní testy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.4 Monitorování imunitní odpovìdi pøi aktivní protinádorové imunoterapii (R. píek) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.4.1 In vivo hodnocení antigennì specifické imunity . . . . . . . . . 4.4.1.1 Reakce pozdního typu pøecitlivìlosti (DTH) . . . . . 4.4.2 In vitro fenotypické hodnocení antigennì specifické imunitní reakce . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.4.2.1 Analýza pouívaných variabilních regionù TCR . . . 4.4.2.2 Tetramery MHC molekul s peptidy . . . . . . . . . . 4.4.2.3 Complementarity determining region 3 . . . . . . . . 4.4.3 In vitro funkèní analýza antigennì specifické imunitní reakce . . 4.4.3.1 Proliferace lymfocytù . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.4.3.2 Detekce produkovaných cytokinù . . . . . . . . . . . 4.4.3.3 Detekce intracelulárních cytokinù . . . . . . . . . . 4.4.3.4 Kvantifikace mRNA pro cytokiny pomocí RT-PCR . 4.4.3.5 Cytotoxické testy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.4.4 Výbìr metody pro imunologické sledování protinádorové imunoterapie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 Systémy kvality v laboratoøích (standardizace, certifikace, akreditace) (L. prongl, M. Paulík) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.1 Standardizace (L. prongl) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.2 Certifikace . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.3 Akreditace . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4 Kvalita laboratorní práce v imunologických laboratoøích (M. Paulík) . Závìr . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Doporuèená literatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Rejstøík . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . .
. . . . . . . . . .
150 150 151 151 151 151 153 153 153 154
. . 154 . . 155 . . 155 . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . .
155 155 156 156 156 156 157 157 158 158
. . 159 . . . . . . . .
. . . . . . . .
160 161 162 163 164 166 167 168
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz, UID: KOS181515
12
Vyetøovací metody v imunologii
Seznam zkratek ACA ACLA ADCC AIDS ALPS ANA ANCA APC aPTT ASMA BAT BCG BCR BPI C1 INH CAST CD cDNA CDR CGD CID CL CMV CNS CRP CTL CVID DBPCT DC DNA dsDNA DTH EA EBNA
anticentromérové autoprotilátky antikardiolipinové autoprotilátky (anticardiolipin autoantibodies) bunìèná cytotoxicita závislá na protilátkách (antibody-dependent cellmediated cytotoxicity) syndrom získané imunodeficience (acquired immune deficiency syndrome) autoimunitní lymfoproliferativní syndrom antinukleární autoprotilátky (antinuclear autoantibodies) antineutrofilní cytoplazmatické protilátky (antineutrophil cytoplasmic antibodies) buòka pøedkládající antigen (antigen-presenting cell) aktivovaný parciální tromboplastinový èas protilátky proti hladkému svalu (anti-smooth muscle autoantibodies) test aktivace bazofilù (basophile activation test) bacillus Calmettùv-Guérinùv receptor lymfocytù B (B cell receptor) protein zvyující baktericidii a permeabilitu (bactericidal permeability increasing protein) inhibitor C1 sloky komplementu test degranulace bazofilù (cellular allergen stimulation test) diferenciaèní antigen (cluster of differentiation) komplementární kyselina deoxyribonukleová (complementary DNA) oblast urèující komplementaritu (complementary determining region) chronická granulomatózní choroba (chronic granulomatous diseases) kombinovaný imunodeficit (combined immunodeficiency) chemiluminiscence cytomegalovirus centrální nervový systém C-reaktivní protein (C-reactive protein) cytotoxický lymfocyt T (cytotoxic T lymphocyte) bìný variabilní imunodeficit (common variable immunodeficiency) dvojitì slepý placebem kontrolovaný pokus (double blind placebo controled test) dendritická buòka (dendritic cell) deoxyribonukleová kyselina (deoxyribonucleic acid) dvouroubovice DNA (double strainded DNA) reakce pozdní pøecitlivìlosti (delayed hypersensitivity test) èasný antigen (early antigen) nukleární antigen viru Epsteina-Barrové (EB nuclear antigen)
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz, UID: KOS181515
Seznam zkratek
EBV ECP EDTA EHK EIA ELISA ENA FISH FITC FSc GAD GAPDH G-CSF HBV HCV HIV HLA HLH CH100 CH50 IFN IgA IgD IgE IgG IgM IL INT JCA LAD LFA LKM MAC MALT MBL MCTD
13
virus Epsteina-Barrové (Epstein-Barr virus) eozinofilní kationický protein (eosinophil cationic protein) kyselina dietylen tetraoctová externí hodnocení kvality enzymová imunoanalýza enzymová imunoanalýza na imunosorbentech (enzyme-linked immunosorbent assay) extrahovatelné nukleární antigeny fluorescenèní in situ hybridizace (fluorescent in situ hybridization) fluorescein izothyocyanát forward scatter (parametr analýzy u prùtokové cytometrie) dekarboxyláza kyseliny glutamové (glutamic acid decarboxylase) glyceraldehyd 3-fosfát dehydrogenáza faktor stimulující kolonie granulocytù (granulocyte colony stimulating factor) virus hepatitidy B virus hepatitidy C virus lidské imunodeficience (human immune deficiency virus) hlavní komplex lidských histokompatibilních antigenù (human leukocyte antigen complex) hemofagocytující lymfohistiocytóza celková hemolytická aktivita komplementu (100%) celková hemolytická aktivita komplementu (50%) interferon imunoglobulin A imunoglobulin D imunoglobulin E imunoglobulin G imunoglobulin M interleukin iod-nitroblue tetrazolium juvenilní chronická artritida syndrom defektní adhezivity leukocytù (leukocyte adhesion deficiency syndrome) adhezivní molekula ze skupiny integrinù (leukocyte-function-associated antigen) protilátky proti mikrozomùm jater a ledvin (liver-kidney microsomes antibodies) komplex sloek komplementu atakující membránu a vyvolávající lýzu (membrane attack complex) sliznièní imunitní systém (mucosa associated lymphoid tissue) lektin vázající manózu (mannose binding lectin) smíená choroba pojiva (mixed connective tissue disease)
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz, UID: KOS181515
?
14
Vyetøovací metody v imunologii
MGUS MHC MPO MSHP NADPH NBT NK OPD PAA PAGE PBMC PCR PE PEG PHA PI PMA PMN PWM RA RAST RF RIA RISA RNA RT-PCR SCID SI SLE SSc SSP Tc TCR TdT TGF Th TMB
monoklonální gamapatie nejasného významu (monoclonal gammapathy of unknown significance) molekuly tkáòové sluèitelnosti (major histocompatibility complex) viz HLA myeloperoxidáza mikrosferické hydrofilní partikule nicotinamid adenin dinucleotid fosfát (nicotinamid adenin dinucleotide phosphate) nitrotetrazoliová modø (nitro-blue tetrazolium chlorid) pøirozený zabíjeè (natural killer) ortofenylendiamin polyacrylamid polyakrylamidová gelová elektroforéza mononukleární buòky z periferní krve (peripheral blood mononuclear cells) øetìzová polymerázová reakce (polymerase-chain reaction) phycoerythrin polyetylenglykol fytohemaglutinin (phytohemagglutinin) propidium iodid forbol myristát acetát (phorbol myristate acetate) polymorfonukleární leukocyty (polymorphonuclear cell) poked-wheet antigen revmatoidní artritida radio-allergo sorbent test revmatoidní faktory imunoanalýza s pouitím radioaktivních prvkù (radioimmunosorbentassay) imunoanalýza s pouitím prstence (ring-immunosorbent assay) kyselina ribonukleová (ribonucleic acid) reverznì transkriptázová polymerázová øetìzová reakce (reverse transcriptase polymerase chain reaction) tìký kombinovaný imunodeficit (severe combined immunodeficiency) stimulaèní index systémový lupus erythematodes (systemic lupus erythematodes) side scatter (parametr analýzy u prùtokové cytometrie) sekvenènì specifické primery cytotoxický lymfocyt T (cytotoxic T cell) receptor lymfocytu T (T-cell receptor) terminální deoxyribonukleotid transferáza transformující rùstový faktor (transforming growth factor) pomocný lymfocyt T (helper T cell) tetrametylbenzidin
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz
Seznam zkratek
TNF Tr TSH VCA VCAM
15
faktor nekrotizující nádory (tumor necrosis factor) regulaèní lymfocyt T (regulatory T cell) hormon stimulující thyroideu (thyreoid stimulating hormon) virový kapsidový antigen (viral capsid antigen) vaskulární adhezivní molekula (vascular cell adhesion molecule)
Ukázka knihy z internetového knihkupectví www.kosmas.cz, UID: KOS181515