UJI EFEKTIVITAS LARUTAN BAWANG PUTIH (Allium sativum) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Propionibacterium acnes SECARA IN VITRO
Laporan Penelitian ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar SARJANA KEDOKTERAN
Disusun Oleh : MAYA DAMAYANTI 1111103000004
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA 1435/2014 M
ti. I
'-,r
t UJI EFEKTMTAS LARUTAI\I BAWANG PUTIH (Alliam sativum) TERHADAP PERTUMBUIIAN BAKTERI Propionibacterium acnes SECARA IN VITRO
Laporan Penelitian Diajukan kepada Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran (S.Ked)
Oleh:
Mavq Dqmavanti
NIM:
Pembimbing
1111103000004
I ii
:'
illiar,rtina, M. Biomed
'.t
sL
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN T]NIVERSITAS
IS
LAM NEGERI SYARIF JAKARTA 1435t2014 lll
H
IDAYATULLAH
PENGESAHAN PANITIA UJIAII
o"UrAN BAWAN G PITSt YII$,: puTIH (Auium salivuml TERIIADAP PERTUMBUHAN BAKTERI
g b efjud{,qJ-ILaporan peneliti an van "
propiobacteriumacnessncanllNVITROolehMayaDamayanti(NIM: 1111103000004),."r"r'diujikandalamsidangdiFakul?sK9{o\|erandan'Ilmu
ini telah diterima sebagai Kesehatan pada.l|september 2014. Laporan-penelitian Kedokteran (S' Ked)'pada Prograrh salah satu syarat ,n"nip"rot.ft gelar Saijana Studi Pendidikan Dokter" Ciputat, I 2 SePtember 2014
DEWAN PENGUJI Ketua Sidang
yutlatil S.si, vt.niomea Pembimbing
1
M.Biomed
S.Si, M.Biomed
Penguji
L
@*^ dr. Intan Keumala Dewi, SP.
{"€ryu^$ Siddiqq
dr. Alyya
MK
SP.
FK
PIMPINAN FAKULTAS Kaprodi Pendidikan Dokter UIN SII Jakarta
I)ekan FKIK UIN SII Jakarta
dr.
Prof. Dr (hc). dr. M.K. Tadjudin Sp' And lV
Witrlerdini, M. Gizi, SPGK
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Warahmatullahi Wabarakatuh Puji dan syukur penulis panjatkan atas kehadirat Allah SWT yang telah memberikan nikmat, rahmat dan hidayah-Nya kepada manusia. Shalawat dan salam penulis sanjungkan bagi Nabi Muhammad SAW, yang telah mengajarkan ilmu dari Allah kepada umatnya. Alhamdulillah, penulis dapat menyelesaikan Laporan Penelitian ini yang berjudul “Uji Efektivitas Larutan Bawang Putih (Allium sativum) terhadap Pertumbuhan Bakteri Propionibacterium acnes secara in Vitro”, sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran di Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. Kami menyadari sepenuhnya bahwa dalam menyelesaikan hasil penelitian ini tidak terlepas karena adanya bantuin dukungan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, kami menyampaikan penghargaan, rasa hormat dan terima kasih kepada Ibu Yuliati, M.Biomed dan dr. Lucky Brilliantina, M.Biomed sebagai Pembimbing kami, serta dr. Flori Ratna Sari, Ph.D sebagai penanggung jawab riset kami yang telah banyak memberikan arahan dan bimbingan kepada penulis. Ucapan terima kasih kami persembahkan pula kepada seluruh dosen dan staf Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Jakarta yang telah membina, mendidik serta memberikan doa restu dan dorongan serta dukungan kepada kami. Pada kesempatan ini kami mengucapkan terima kasih kepada: 1. Bapak Prof. Dr. (Hc). dr. M.K. tadjudin, Sp. And selaku Dekan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
v
2.
dr. Witri Ardini, M. Gizi, SpGK selaku ketua Program Studi Pendidikan Dokter, serta seluruh dosen atas bimbingan yang diberikan selama penulis menempuh pendidikan
di Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas
Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta3.
Yuliati, S.Si, M.Biomed dan dr. Lucky Brilliantina" M.Biomed selaku dosen pembimbing yang membimbing dan mengarahkan dalam penyelesaian laporan penelitian ini.
4.
dr. Flori Ratna Sari, Ph.D selaku penanggungiawab riset Program Studi Pendidikan Dokter 2011, yang tidak pernah bosan untuk selalu mengingatkan pada setiap akhir modul.
5. Kedua orang tua" kakatq adilq dan kakek yang telatr mencurahkan kasih sayang dan dukungan yang tak terbatas. 6.
Salmq Arif, Lintang, Niken, dan Fahrul selaku teman satu tim riset yang selalu saling memberikan bantuan dan dukungan satu sama lain selama
menjalani penelitian bersama, sehingga laporan penelitian
ini
dapat
terselesaikan.
7.
I\dbak
Novi dan Pak Bacok yang banyak membantu selama penelitian
berlangsung di Laboratorium Milrobiologi.
Penulis menyadari laporan penelitian ini masi6 jauh dari kesempurnaan dan
juga kekurangan naupun kekelinran yang tak t€rhindarkan- Oleh karena itu, penulis memohon *xitik dan saran demi kesempurnaan laporan penelitian ini. Demikian laporan penelitian ini dibuat, semoga bermanfaat Wassalamu' alaikum Warahmatullahi Wubmakatuh.
Ciputat, 12 September 2014
vl
ABSTRAK Maya Damayanti. Program Studi Pendidikan Dokter. Uji Efektivitas Larutan Bawang Putih (Allium sativum) terhadap Pertumbuhan Bakteri Propionibacterium acnes secara in Vitro. 2014 Bawang putih (Allium sativum) merupakan salah satu tanaman yang sering digunakan masyarakat untuk mengobati berbagai penyakit, terutama penyakit yang disebabkan oleh infeksi bakteri. Bawang putih mengandung alisin yang mempunyai efek antibakteri terhadap bakteri Propionibacterium acnes. Propionibacterium acnes salah satu bakteri yang mempunyai peranan yang besar terhadap penyakit akne vulgaris. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efektivitas larutan bawang putih (Allium sativum) terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes. Pada penelitian ini, proses pembuatan larutan bawang putih adalah dengan melarutkan perasan bawang putih ke dalam aquades steril. Larutan bawang putih dengan konsentrasi 5%, 20%, 55%, 75%, dan 100% serta dengan kontrol positif klindamisin dan kontrol negatif aquades diuji efektivitasnya terhadap bakteri Propionibacterium acnes dengan menggunakan metode disc diffusion pada medium agar darah. Didapatkan hasil bahwa semakin besar konsentrasi larutan bawang putih maka semakin besar hambatan terhadap pertumbuhan Propionibacterium acne (zona hambat yang terbentuk pada konsentrasi 55%; 75%; 100% sebesar 17,67; 19;23 mm). Berdasarkan analisis data dengan menggunakan metode Mann-Whitney menunjukan perbedaan yang bermakna antar setiap konsentrasi larutan bawang putih dengan kontrol positif berupa klindamisin. Dapat disimpulkan bahwa larutan bawang putih memiliki efektivitas antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes. Kata kunci: Bawang putih, Alisin, Antibakteri, Propionibacterium acnes, disc diffusion
vii
ABSTRACT Maya Damayanti. Medical Education Programme. Effectivity Test of Garlic (Allium sativum) Solution on Propionibacterium acnes Growth Inhibition in vitro. 2014. Garlic (Allium sativum) has long been used as a medicinal herb to treat various diseases, particularly the ones caused by bacterial infection. The allicin content of garlic is known to have antibacterial property against Propionibacterium acnes, a species of bacteria known to have a role in the pathogenesis of acne vulgaris. This experiment is conducted to determine the effectivity of Allium sativum solution on inhibiting Propionibacterium acnes growth. Solutions of 5%, 20%, 55%, 75%, and 100% concentration were acquired by dissolving Allium sativum squash using sterile distilled water. Each concentration was tested using disc diffusion method on blood agar medium. Clindamycin and distilled water were used as positive and negative control, respectively. The greater concentration of the solution garlic produces the greater inhibition on the growth of Propionibacterium acne (inhibition zone at the concentration of 55%; 75%; 100% at 1767; 19; 23 mm). Results were compared to controls and analyzed using Mann-Whitney method. In conclusion, garlic solution has antibacterial effectivity against the growth of Propionibacterium acnes. Keywords: garlic, allicin, antibacterial, Propionibacterium acnes, disc diffusion
viii
DAFTAR ISI
Halaman LEMBAR PERNYATAAN ...........................................................................
ii
LEMBAR PERSETUJUAN ..........................................................................
iii
LEMBAR PENGESAHAN ...........................................................................
iv
KATA PENGANTAR ....................................................................................
v
ABSTRAK ......................................................................................................
vii
ABSTRACT ....................................................................................................
viii
DAFTAR ISI ...................................................................................................
ix
DAFTAR TABEL...........................................................................................
xii
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................
xiii
DAFTAR BAGAN ..........................................................................................
xiv
DAFTAR GRAFIK ........................................................................................
xv
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN ...............................................................................
1
1.1 Latar Belakang ..........................................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah .....................................................................................
3
1.3 Tujuan Penelitian ......................................................................................
3
1.4 Manfaat Penelitian ....................................................................................
3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................
5
2.1 Landasan Teori ..........................................................................................
5
2.1.1 Bawang Putih (Allium sativum) .......................................................
5
2.1.1.1 Morfologi dan Klasifikasi Bawang Putih ............................
5
2.1.1.2 Kandungan Bawang Putih ...................................................
6
2.1.1.3 Manfaat Bawang Putih.........................................................
7
2.1.2 Akne Vulgaris (Jerawat) ..................................................................
8
2.1.2.1 Definisi Akne Vulgaris ........................................................
8
2.1.2.2 Patogenesis Akne Vulgaris ..................................................
10
2.1.3 Morfologi dan Klasifikasi Propionibacterium acnes ......................
11
2.1.4 Perbedaan Bakteri Gram Positif dan Bakteri Gram Negatif ............
13
2.1.5 Mekanisme Kerja Antibakteri .......................................................... ix
14
2.1.6 Metode Pengujian Antibakteri ..............................................................
16
2.2 Kerangka Teori .........................................................................................
19
2.3 Kerangka Konsep ......................................................................................
19
2.4 Definisi Operasional .................................................................................
20
BAB III METODOLOGI PENELITIAN ....................................................
21
3.1 Desain Penelitian ......................................................................................
21
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian ...................................................................
21
3.3 Bahan yang Diuji ......................................................................................
21
3.4 Sampel Bakteri ..........................................................................................
21
3.5 Identifikasi Variabel Penelitian.................................................................
22
3.6 Alat dan Bahan Penelitian .........................................................................
22
3.6.1 Alat ..................................................................................................
22
3.6.2 Bahan ...............................................................................................
22
3.7 Cara Kerja Penelitian ................................................................................
22
3.7.1 Tahap Persiapan...............................................................................
22
3.7.1.1 Sterilisasi Alat dan Bahan ......................................................
22
3.7.1.2 Persiapan dan Determinasi Bawang Putih .............................
22
3.7.1.3 Pembuatan Perasan Bawang Putih .........................................
23
3.7.1.4 Pembuatan Konsentrasi Larutan Bawang Putih .....................
23
3.7.1.5 Kultur Bakteri Propionibacterium acnes ...............................
24
3.7.2 Uji Efektivitas Larutan Bawang Putih terhadap Pertumbuhan Propionibacterium acnes ..........................................
24
3.8 Alur Penelitian ..........................................................................................
25
3.9 Analisa Data ..............................................................................................
26
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN........................................................
27
4.1 Pembuatan Larutan Bawang Putih ............................................................
27
4.2 Pewarnaan Gram Bakteri Propionibacterium acnes.................................
28
4.3 Uji Efektivitas Larutan Bawang Putih (Allium sativum) terhadap Pertumbuhan Bakteri Propionibacterium acnes ........................
29
4.4 Uji Kebermaknaan Konsentrasi Larutan Bawang Putih ............................
31
4.5 Pembahasan ................................................................................................
32
4.6 Keterbatasan Penelitian .............................................................................. x
35
BAB V PENUTUP .........................................................................................
36
5.1 Kesimpulan ...............................................................................................
36
5.2 Saran .........................................................................................................
37
DAFTAR PUSTAKA .....................................................................................
38
LAMPIRAN ....................................................................................................
41
xi
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 2.1 Klasifikasi Hambatan Pertumbuhan Bakteri ....................................
16
Tabel 2.2 Definisi Operasional .......................................................................
20
Tabel 4.1.Hasil Analisis Multikomparasi dengan uji post hoc ........................
31
Tabel 4.2 Diameter Zona Hambat Bakteri Gram Positif dan Bakteri Gram Negatif ...................................................................................
xii
34
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Umbi/siung Bawang Putih (Allium sativum)................................
5
Gambar 2.2 Senyawa Kimia γ-glutamil-S-alk (en) il-L-sistein dan Allin .......
6
Gambar 2.3 Jalur pemecahan γ-glutamil-S-alk(en)il-L-sistein ........................
7
Gambar 2.4 Unit Pilosebaseus Normal ............................................................
9
Gambar 2.5 Tipe Dari Lesi Akne .....................................................................
9
Gambar 2.6 Patogenesis Akne .........................................................................
11
Gambar 2.7 Propionibacterium acnes .............................................................
12
Gambar 4.1 Larutan Bawang Putih Pada Berbagai Konsentrasi......................
27
Gambar 4.2 Pewarnaan GramPropionibacterium acnes..................................
28
Gambar 4.3 Efektivitas Bawang Putih (Allium sativum) terhadap Pertumbuhan Bakteri Propionibacterium acnes pada Agar Darah .....................
xiii
29
DAFTAR BAGAN
Halaman
Bagan 2.1 Kerangka Teori ...............................................................................
20
Bagan 2.2 Kerangka Konsep ............................................................................
20
Bagan 3.8 Alur Penelitian ................................................................................
26
xiv
DAFTAR GRAFIK
Halaman
Grafik 4.1 Diameter Rata-rata Zona Hambat ...................................................
xv
30
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1 Surat Hasil Determinasi Tumbuhan ............................................
41
Lampiran 2 Diameter Zona Hambat Pada Uji Antibakteri Larutan Bawang Putih ...................................................................
42
Lampiran 3 Cara Menghitung Konsentrasi Larutan Bawang Putih .................
43
Lampiran 4 Alat dan Bahan Penelitian ...........................................................
44
Lampiran 5 Hasil Uji Efektivitas Larutan Bawang Putih Terhadap Pertumbuhan Bakteri P. acnes .....................................
45
Lampiran 6 Daftar Riwayat Hidup ...................................................................
46
xvi
1
BAB 1 PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang Penggunaan ramuan tumbuh-tumbuhan sebagai pengobatan tradisional saat ini mulai meningkat peminatnya, hal ini karena pengobatan dengan ramuan tradisional lebih murah dan mengingat Indonesia memiliki potensi tanaman obat yang tinggi, jadi tidak sulit untuk didapatkan. Bawang putih (Allium sativum) merupakan salah satu tanaman yang memiliki khasiat obat. 1 Sejak 5000 tahun lalu bawang putih berguna untuk gangguan pencernaan, batuk, gangguan kulit, dan selama perang dunia 1 bawang putih digunakan sebagai antiseptik. 2 Bawang putih memiliki kandungan biologi dan farmakologi seperti, antijamur, antibakteri, antitumor, antiinflamasi,
antitrombotik, dan sifat
hipokolesterolemik.3 Sifat antibakteri dari ekstrak bawang putih (Allium sativum) telah dibuktikan oleh peneliti sebelumya Hernawan et al.,(2003) yang menyatakan bahwa bawang putih (Allium sativum) memiliki aktivitas antibiotik yang luas, baik bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif. 1 Juga dibuktikan oleh Hindi (2013) yang menyatakan bahwa ekstrak bawang putih (Allium sativum) dapat menghambat bakteri patogen diantaranya 5 bakteri Gram positif yaitu Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Enterococcus faecalis dan 9 bakteri Gram negatif yaitu Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluresence, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Escherichia coli, Enterobacter aerugenes,
Klebsiella
pneumoniae, Salmonella typhi, Acinetobacter.4 Efektifitas bawang putih `dalam menghambat dan membunuh bakteri disebabkan oleh diallydisulphide (DADS) dan diallytrisulphide (DATS) yang dihasilkan oleh allisin. Senyawa tersebut bekerja dengan mereduksi sistein dalam tubuh bakteri yang kemudian ikatan disulfida dalam proteinnya akan terganggu.1 Kandungan bawang putih dimanfaatkan pula untuk akne vulgaris, manfaatnya yaitu dapat mengobati akne.5 1
2
Akne vulgaris merupakan peradangan kronik folikel sebasea. Distribusi akne terdapat pada daerah yang banyak mengandung kelenjar sebasea yaitu pada wajah, leher, dada, punggung dan bahu. Lesi yang tampak pada kulit adalah komedo, papul, pustul, nodus dan kista.6,7 Pada negara bagian barat seperti Amerika Serikat, akne vulgaris merupakan penyakit kulit yang sering melanda remaja sekitar 79%-95%.8 Berdasarkan data yang diperoleh dari bagian poliklinik kulit dan kelamin RSUP Prof. Dr. R. D. Kandou Manado periode 2009-2011, sebanyak 10.003 pasien yang berkunjung pada periode tersebut sekitar 121 (3,59%) merupakan pasien dengan
akne vulgaris, perempuan merupakan penderita
terbanyak dengan jumlah 75 pasien (61,9%), usia terbanyak adalah 15-24 tahun dengan jumlah 76 pasien (62,8%).9 Sylvia Lusita (2010) menyatakan dalam penelitiannya bahwa bakteri terbanyak yang ditemukan pada lesi akne adalah Propionibacterium acnes sebesar 78,8%, dan Staphylococcus epidermidis 63,6%.6 Propionibacterium acnes termasuk bakteri flora normal pada kulit. Propionibacterium acnes merupakan bakteri Gram positif, pleomorfik, dan bersifat anaerob aerotoleran. Bakteri ini berperan dalam pembentukan akne, dengan menghasilkan lipase yang memecah asam lemak bebas dari lipid kulit sehingga menyebabkan peradangan. Akibat peradangan tersebut menyebabkan Propionibacterium acnes berproliferasi dan memperparah lesi inflamasi dengan merangsang
produksi
sitokin
proinflamasi.
Dengan
besarnya
pengaruh
Propionibacterium acnes terhadap akne, peneliti tertarik untuk menggunakan bakteri ini dalam penelitian.10,11,12 Niyomkam (2010) melakukan penelitian dengan menggunakan metode well diffusion yang menunjukan ekstrak bawang putih (Allium sativum) mampu menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes dengan konsentrasi 5 mg/disk.13 Sebagian besar bahan uji adalah ekstrak bawang putih (Allium sativum) yang digunakan dalam suatu penelitian, dan tidak banyak yang menggunakan larutan bawang putih (Allium sativum) dalam pengaruhnya terhadap suatu bakteri. Oleh karena itu, penelitian ini akan dilakukan untuk mengetahui efektivitas larutan bawang putih (Allium sativum) terhadap pertumbuhan bakteri
3
Propionibacterium acnes yang merupakan flora normal di kulit manusia dan dapat berpotensi sebagai patogen, Propionibacterium acnes juga bakteri yang paling sering menjadi penyebab dari akne vulgaris. Penelitian ini meliputi uji efektivitas larutan bawang putih (Allium sativum) dalam berbagai konsentrasi terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes dengan metode disc diffusion.
1.2 Rumusan Masalah Berdasarkan uraian dari latar belakang di atas, maka rumusan masalah penelitian adalah bagaimana efektivitas larutan bawang putih (Allium sativum) terhadap Propionibacterium acnes?
1.3 Tujuan Penelitian 1.3.1 Tujuan umum Mengetahui efektivitas bawang putih (Allium sativum) terhadap pertumbuhan Propionibacterium acnes. 1.3.2 Tujuan khusus Untuk mengetahui konsentrasi daya hambat larutan bawang putih (Allium
sativum)
terhadap
Propionibacterium
acnes
dengan
konsentrasi 5%, 20%, 55%, 75%, dan 100%.
1.4 Manfaat Penelitian a. Untuk masyarakat
Hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi sumber informasi bagi masyarakat tentang pengaruh ekstrak bawang putih (Allium sativum) terhadap pertumbuhan Propionibacterium acnes.
b. Untuk institusi
Hasil penelitian ini diharapkan menjadi data dasar untuk penelitian lebih lanjut mengenai pengaruh ekstrak bawang putih (Allium sativum) terhadap pertumbuhan Propionibacterium acnes.
4
Sebagai sumber referensi bagi praktisi yang tertarik dalam penelitian tanaman obat.
Sebagai data dan informasi untuk melakukan penelitian lanjut mengenai daya hambat perasan bawang putih (Allium sativum) terhadap Propionibacterium acnes.
c. Untuk peneliti
Meningkatkan pengetahuan mengenai daya hambat larutan bawang putih (Allium sativum) terhadap bakteri Propionibacterium acnes.
Sebagai sarana untuk menerapkan keilmuan mikrobiologi klinik dalam penelitian, serta melatih keterampilan laboratorium riset.
5
6 Klasifikasi ilmiah bawang putih adalah sebagai berikut:14 Kingdom
: Plantae
Sub-Kingdom
: Tracheobionta
Super division
: Spermatophyta
Division
: Magnoliophyta
Class
: Liliopsida
Sub-Class
: Liliidae
Order
: Liliales
Family
: Liliaceae
Genus
: Allium L.
Spesies
: Allium sativum L.
2.1.1.2 Kandungan Bawang Putih 1, 14 Bawang putih mengandung sekitar 65% air, 28% karbohidrat (terutama fruktosa), 2,3% senyawa organosulfur, 2% protein (terutama alliinase), 1,2% asam amino bebas (terutama arginin), dan 1,5% serat. 16 Senyawa organosulfur yang penting dari bawang putih yaitu asam amino non-volatil γ-glutamil-S-alk (en) il-L-sistein dan S-alk(en)il-sistein sulfoksida atau alliin.1
Gambar 2.2 Senyawa Kimia γ-glutamil-S-alk (en) il-L-sistein dan Allin Sumber: Hernawan et al,. 2003
7 Dari
γ-glutamil-S-alk(en)il-L-sistein
akan
menghasilkan
dua
jalur
pembentukan, yaitu S-allil sistein (SAC) dan thiosulfinat. Thiosulfinat ini yang akan menghasilkan senyawa allisin. Allisin merupakan prekursor pembentukan allil sulfida seperti diallil disulfida (DADS), diallil trisulfida (DATS), diallil sulfida (DAS), metallil sulfida, dipropil sulfida, dipropil disulfida, allil merkaptan, dan allil metil sulfida.1 Dengan bantuan beberapa enzim, γ-glutamil-S-alk(en)ilL-sistein juga berperan dalam pembentukan alliin. Ketika bawang putih diiris-iris atau dihaluskan, enzim allinase menjadi aktif dan menghidrolisis alliin menghasilkan asam allil sufenat yang kemudian mengalami kondensasi dan menghasilkan allisin, asam piruvat dan ion NH4+.1
Gambar 2.3 Jalur pemecahan γ-glutamil-S-alk(en)il-L-sistein Sumber: Hernawan et al,. 2003
2.1.1.3 Manfaat Bawang Putih 1, 16 Bawang putih salah satunya dapat dimanfaatkan dalam bentuk AGE (Aged Garlic Extract). AGE dapat melindungi jaringan dari hipersensitivitas radiasi sinar ultraviolet B. AGE juga dapat menurunkan kadar kolesterol dan dapat mencegah
perkembangan
metastasis
tumor.
AGE
mampu
menghambat
8
karsinogenesis, sejak stadium awal kerusakan DNA sampai stadium akhir, baik pada jaringan kelenjar payudara, epitel kulit, usus besar, maupun lambung. 1 Bawang putih memiliki potensi sebagai antimikroba, kemampuan dalam menghambat pertumbuhan mikroba meliputi virus, bakteri, protozoa, dan jamur. Fungsi bawang putih dalam menghambat pertumbuhan bakteri memiliki spektrum yang luas, karena dapat menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif maupun bakteri Gram negatif. DADS dan DATS yang merupakan kandungan dari bawang putih memiliki berpotensi sebagai antibakteri. Cara senyawa ini bekerja dengan mereduksi sistein dalam bakteri yang akhirnya mengganggu ikatan disulfida dalam protein bakteri.1 Senyawa sulfur dari bawang putih juga memiliki efek antibakteri, dengan cara mengubah reaksi senyawa tiol pada enzim bakteri dan protein lainnya serta RNA dan DNA polimerase (yang dibutuhkan untuk replikasi kromosom bakteri), sehingga mengganggu metabolisme bakteri, virulensi bakteri, dan pertumbuhan bakteri.16
2.1.2 Akne Vulgaris (Jerawat) 2.1.2.1 Definisi Akne Vulgaris 7, 17, 18, 19 Akne vulgaris adalah suatu kondisi dimana kulit mengalami proses peradangan kronik pada kelenjar-kelenjar sebasea. Kelenjar sebasea memiliki selsel yang berisi lemak yang kemudian menghasilkan sebum yang merupakan substansi berminyak yang terdiri dari trigliserida, kolesterol, dan asam lemak bebas yang berpotensi memicu inflamasi. Sebum berfungsi memberi minyak pada rambut dan lapisan kulit bagian luar. Dengan adanya obstruksi pada unit pilosebasea seperti rambut, folikel rambut, dan kelenjar sebasea, maka terbentuklah akne. Lesi dari akne vulgaris biasanya terdapat pada daerah yang memiliki kelenjar sebasea, yaitu pada daerah wajah, leher, punggung dan bahu. Akne vulgaris dapat terjadi pada semua usia, namun lebih sering terjadi pada remaja, sekitar 85% terjadi pada usia 12-24 tahun.
9
Gambar 2.4 Unit Pilosebaseus Normal Sumber: Baxi, 2007 20
Tipe dari lesi akne vulgaris terdiri dari mikrokomedo yang merupakan lesi paling dini tampak pada kulit, komedo putih (whitehead) atau komedo tertutup (blackhead). Akne vulgaris juga ditandai dengan pembentukan papula, pustula, nodul, dan kista, hal ini terjadi akibat perkembangan dari peradangan.
Gambar 2.5 Tipe Dari Lesi Akne Sumber:Marcini, 2008
10 2.1.2.2 Patogenesis Akne Vulgaris 6, 18, 19, 21, 22 Dalam proses terjadinya akne vulgaris terdapat 4 faktor yang berpengaruh, yaitu:
Peningkatan produksi sebum Pada penderita akne vulgaris terjadinya peningkatan produksi sebum oleh kelenjar sabasea diakibatkan oleh peningkatan hormon androgen yang biasanya terjadi saat masa pubertas, umumnya dimulai pada usia 8-9 tahun.
Keratinisasi folikel abnormal Ketika sebum disekresikan, terjadi juga peningkatan jumlah sel epitel yang melapisi folikel dan keratinisasi dalam folikel. Sehingga terjadi penumpukan dari sebum, sel-sel epitel, dan keratin, hal ini menyebabkan pembengkakan pada folikel,dan gambaran klinis yang terlihat berupa lesi yang paling dini terjadi yaitu mikrokomedo.
Proliferasi Propionibacterium acnes Dengan
adanya
peningkatan
produksi
sebum,
maka
akan
memfasilitasi Propionibacterium acnes untuk berkoloni dan mulai menginfeksi. Salah satu kandungan dari sebum yaitu trigliserida akan diubah oleh enzim lipase yang dihasilkan oleh Propionibacterium acnes menjadi digliserida, monogliserida, dan asam lemak bebas yang akan digunakan untuk membantu metabolisme Propionibacterium acnes. Di dalam folikel, Propionibacterium acnes berproliferasi dan menyebabkan infiltrasi dari sel-sel imun seperti limfosit CD4 dan neutrofil.
Reaksi inflamasi Propionibacterium acnes dapat
merusak dinding folikel dan
menyebar ke lapisan dermis disekitarnya sehingga menimbulkan reaksi inflamasi. Reaksi inflamasi yang terjadi pada akne vulgaris menyebabkan timbulnya respon kekebalan tubuh, Propionibacterium acnes yang melepaskan faktor kemotraktan kemudian menarik sel-sel kekebalan tubuh seperti neutrofil, monosit, dan limfosit. Proses
11
inflamasi diawali dengan infiltrasi limfosit CD4 pada unit pilosebasea. Propionibacterium acnes yang berada pada folikel akan difagosit oleh neutrofil. Produksi sitokin dalam reaksi inlfamasi ini melibatkan toll like receptor, terutama toll like receptro 2. Propionibacterium acnes juga menstimulasi produksi sitokin proinflamasi seperti IL-1, IL-8, IL12, dan TNF-α.
Gambar 2.6 Patogenesis Akne (Jerawat) Sumber: Tahir, Muhammad. 2010
2.1.3 Morfologi dan Klasifikasi Propionibacterium acnes 10, 11, 19, 23, 24
Propionibacterium acnes merupakan bakteri flora normal pada kulit, biasanya bakteri ini terdapat pada folikel sabasea. Tidak hanya itu, Propionbacterium acnes juga dapat ditemukan pada jaringan manusia, paru-paru, dan jaringan prostat.24 Kulit merupakan habitat utama dari Propionibacterium acnes, namun dapat juga diisolasi dari rongga mulut, saluran pernafasan bagian atas, saluran telinga eksternal, konjungtiva, usus besar, uretra, dan vagina. 24 Propionibacterium acnes termasuk bakteri Gram positif, pleomorfik, dan bersifat anaerob aerotoleran.10 Propionibacterium acnes memiliki lebar 0,5-0,8 µm dan panjang 3-4 µm, bakteri ini berbentuk batang dengan ujung meruncing atau kokoid (bulat).24
12 Klasifikasi Propionibacterium acnes adalah:10,25 Kingdom
: Bacteria
Phylum
: Actinobacteria
Class
: Actinomycetales
Order
: Propionibacterineae
Family
: Propionibacteriaceae
Genus
: Propionibacterium
Species
: Propionibacterium acnes
Gambar 2.7 Propionibacterium acnes Sumber: Bruggeman, 2010
Pada akne vulgaris, ketika terjadi akumulasi sebum pada unit pilosebasea, maka akan memfasilitasi Propionibacteriium acnes untuk berproliferasi, karena trigliserida yang terdapat pada sebum akan diubah dengan bantuan enzim lipase yang dihasilkan oleh Propionibatrerium acnes menjadi digliserida, monogliserida, dan asam lemak bebas, kemudian ketiga zat tersebut diubah menjadi gliserol yang akan digunakan untuk metabolisme Propionibacterium acnes.19 Unit pilosebasea yang terinfeksi oleh Propionibacterium acnes akan menyebabkan timbulnya respon inflamasi, sehingga gambaran klinis yang timbul berupa papula, pustula, nodul, dan kista.11
13
Selain akne vulgaris, Propionibacterium acnes juga terlibat dalam beberapa penyakit seperti osteomielitis, peritonitis, infeksi gigi, reumatoid artritis, abses otak, empiema subdural, keratitis, ulkus kornea, endoftalmitis, sarkoidosis, dan
radang
prostat.
Sedangkan
penyakit
yang
melibatkan
infeksi
Propionibacterium acnes dan terkait alat-alat medis (kateter, prosthetic joints, implants, dan lain-lain) yaitu konjungtivitis akibat lensa kontak, shunt nephritis, shunt-associated central nervous system infections, dan anaerobic arthritis.23 2.1.4 Perbedaan Bakteri Gram Positif dan Bakteri Gram Negatif 10, 26, 27
Bakteri merupakan mikroorganisme prokariotik uniseluler, bakteri memperbanyak dirinya dengan pembelahan sel dan selnya secara khas terdapat pada dinding sel bakteri. Bakteri diklasifikasikan menjadi bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif, dan dapat dibedakan dengan menggunakan pewarnaan Gram. Dengan pewarnaan Gram, bakteri Gram positif akan menunjukan warna ungu dan bakteri Gram negatif menunjukan warna merah.
Perbedaan bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif terletak pada dinding selnya. Dindig sel pada bakteri berfungsi sebagai penentu bentuk sel, melindungi isi sel dari pengaruh lingkungan luar sel, dan proteksi terhadap tekanan osmotik, dimana ketika tekanan dari dalam sel lebih besar dibanding luar sel, dinding sel akan melindungi bakteri agar tidak pecah. Dinding sel bakteri terdiri dari peptidoglikan atau dikenal dengan murein, semakin tebal lapisan peptidoglikan pada suatu bakteri, maka meyebabkan bakteri tersebut kaku.
Bakteri Gram positif memiliki dinding sel yang banyak mengandung lapisan peptidoglikan yaitu sekitar 40 lembar lapisan peptidoglikan. Bakteri Gram positif juga mengandung polisakarida dan asam teikoat yang mengandung alkohol dan fosfat, salah satu fungsi asam teikoat sebagai penyedia ion magnesium ke dalam sel, karena kemampuannya yang dapat mengikat ion magnesium. Sedangkan, bakteri Gram negatif mengandung satu atau beberapa lapisan peptidoglikan dan mengandung membran luar yang berfungsi melindungi sel dari
14
garam empedu dan memiliki kemempuan untuk mengeluarkan molekul hidrofilik. Molekul antibiotik yang besar cenderung lebih lambat ketika menembus membran luar. Bakteri Gram negatif juga mengandung lipoprotein yang berfungsi menstabilkan membran luar dan merekatkannya ke lapisan peptidoglikan. Dalam bakteri Gram negatif terdapat ruang periplasmik, yaitu ruangan antara mebran bagian dalam dan luar, pada ruangan ini terdapat enzim degradasi konsentrasi tinggi dan protein-protein transpor. 2.1.5 Mekanisme Kerja Antibakteri 28, 29
Antibakteri merupakan suatu obat yang digunakan untuk menghambat atau membunuh bakteri. Berdasarkan aktivitasnya, antibakteri dapat dibagi menjadi 2 kelompok, yaitu aktivitas bakteriostatik dan aktivitas bakterisidal. Istillah bakteriostatik digunakan ketika suatu obat dapat menghambat pertumbuhan bakteri, sedangkan istilah bakterisidal digunakan ketika suatu obat dapat membunuh bakteri. Berdasarkan mekanisme kerjanya, antibakteri dibagi menjadi 5, yaitu: A.
Menghambat metabolisme sel Asam folat dibutuhkan oleh bakteri untuk kelangsungan hidupnya. Asam folat tersebut didapatkan dari asam para amino benzoat (PABA) yang kemudian disintesis sendiri oleh bakteri untuk kebutuhan hidupnya. Untuk mengganggu kehidupan dari bakteri, sulfonamid yang memiliki kemiripan struktur dengan PABA akan berkompetisi untuk ikut dalam pembentukan asam folat, sehingga terbentuk analog asam folat yang nonfungsional. Contoh obat lain yang dapat menghambat metabolisme sel adalah trimetoprim, paminosalisilat (PAS), dan sulfon. Maka dengan mekanisme kerja ini diperoleh efek bakteriostatik.
B. Menghambat sintesis dinding sel Dinding sel bakteri memiliki tekanan osmotik internal yang tinggi dan berfungsi untuk mempertahankan bentuk dan ukuran sel. Maka ketika terjadi kerusakan pada dinding sel, ini akan menyebabkan
15
terjadinya lisis. Mekanisme kerja ini diperoleh efek bakterisidal. Contoh obat yang dapat menghambat sintesis dinding sel adalah penisilin, sefalosporin, basitrasin, vankomisin, dan sikloserin. C. Mengganggu keutuhan membran sel Membran sitoplasma memiliki peranan yang penting bagi sel, karena berfungsi sebagai sawar permeabilitas yang selektif, melakukan transpor aktif, dan mengontrol komposisi dalam sel. Ketika membran sitoplasma sel mengalami kerusakan, maka menyebabkan keluarnya makromolekul seperti protein, asam nukleat, nukleotida, dan ion-ion penting lain. Contoh obat yang dapat mengganggu keutuhan membran sel adalah polimiksin, polien, azoles, dan amfoterisin B. Mekanisme kerja ini diperoleh efek bakterisidal. D. Menghambat sintesis protein sel Bakteri membutuhkan protein untuk kelangsungan hidupnya. Sintesis protein sel berlangsung didalam ribosom. Bakteri memiliki ribosom yang terdiri dari 2 sub unit, 30S dan 50S. Kemudian kedua komponen tersebut menyatu menjadi ribosom 70S agar dapat digunakan untuk sisntesis protein. Kerusakan atau penghambatan pada proses tersebut menyebabkan gangguan pada protein sel. Contoh obat yang dapat menghambat sintesis protein sel adalah aminoglikosid,
makrolid,
linkomisin,
tetrasiklin,
dan
kloramfenikol. E. Menghambat sintesis asam nukleat sel Contoh obat yang dapat menghambat sintesis asam nukleat sel adalah
rifampisin,
trimetropim,
pirimetamin
dan
golongan
kuinolon. Rifampisin berikatan dengan enzim polimerase-RNA sehingga menghambat sintesis RNA dan DNA. Golongan kuinolon menghambat enzim DNA girase pada bakteri yang berfungsi menata kromosom yang panjang sehingga bentuknya spiral dan akhirnya muat didalam sel.
16 2.1.6 Metode Pengujian Antibakteri 10, 26, 30, 31,32 Uji antibakteri digunakan untuk mengukur kerentanan bakteri terhadap suatu antibakteri. Metode yang digunakan untuk menguji antibakteri, yaitu: A. Metode Difusi Pada metode ini zat antibakteri diletakan pada media perbenihan yang telah diinokulasi oleh bakteri, kemudian diinkubasi dan dihitung zona jernih disekitar zat antibakteri yang dinterpretasikan sebagai daya hambat pertumbuhan bakteri oleh zat antibakteri. 27 Terdapat beberapa cara yang dapat dilakukan pada metode ini, yaitu: Metode disc diffusion Metode ini bertujuan untuk menentukan aktivitas zat antibakteri. Cakram disk yang mengandung zat antibakteri diletakan diatas media agar yang telah ditanami bakteri, kemudian diinkubasi selama 24 jam atau lebih. Hitumg zona hambat yang berada di sekeliling
cakram
disk.
Efektivitas
aktivitas
antibakteri
didasarkan pada pembentukan zona hambat yang ditunjukan pada tabel berikut: Tabel 2.1 Klasifikasi Hambatan Pertumbuhan Bakteri Diameter Zona Terang
Respon Hambatan Pertumbuhan
>20 mm
Kuat
16-20 mm
Sedang
10-15 mm
Lemah
<10 mm
Tidak ada
Sumber: Greenwood.1995
E-test Metode ini bertujuan untuk mengukur kadar hambat minimum suatu zat antibakteri. Strip yang mengandung zat antibakteri yang mengandung kadar terendah sampai tertinggi diletakan pada media agar yang telah ditanami bakteri. Hambatan
17
pertumbuhan bakteri dapat dilihat dengan adanya area jernih di sekitar strip. Ditch-plate technique Metode parit ini dilakukan dengan cara membuat potongan membujur pada media agar sehingga terbentuk parit, kemudian diisi oleh zat antibakteri dan bakteri uji (maksimum 6 macam) digoreskan kedalam parit. Cup-plate technique Pada metode ini, media agar dibuat sumur dan ditanami bakteri, kemudian baerikan zat antibakteri pada sumur tersebut. Gradient-plate technique Konsentrasi zat antibakteri pada metode ini bervariasi mulai dari nol sampai maksimal. Media agar yang telah dicairkan ditambahkan zat antibakteri, campuran tersebut dimasukkan ke dalam cawan petri dan diletakan dengan posisi miring, selanjutnya dituang di atasnya, inkubasi selama 24 jam agar zat antibakteri berdifusi maksimal. Bakteri yang diuji (maksimal 6) digoreskan pada plate tersebut mulai dari konsentrasi tinggi ke rendah. Hasilnya diinterpretasikan sebagai panjang total pertumbuhan bakteri maksimal yang mungkin dibandingkan dengan panjang pertumbuhan aktual hasil goresan. B. Metode Dilusi Metode dilusi ini bertujuan untuk menentukan zat antibakteri yang dibutuhka untuk menghambat pertumbuhan atau membunuh bakteri yang akan diuji. Hasil pengamatan pada metode ini dapat diukur dengan Kadar Hambat Minimum (KHM) dan Kadar Bunuh Minimum (KBM) Terdapat 2 cara untuk metode dilusi ini, yaitu: Metode dilusi cair/ broth dilution test Cara untuk melakukan metode ini yaitu dengan mengencerkan zat antibakteri terlebih dahulu, kemudian bakteri dimasukkan kedalam berbagai konsentrasi zat antibakteri yang akan diuji pada media cair. Setelah itu inkubasi selama 18-24 jam, dan
18
diamati pertumbuhan bakteri dengan melihat kekeruhan dari cairan. Metode dilusi padat/ solid dilution test Pada metode ini, zat antibakteri yang akan diuji digabungkan ke dalam agar, tanami bakteri diatas permukaannya. Konsentrasi dari masing-masing zat antibakteri dibagi dengan membuat permukaan agar menjadi kotak-kotak. Inkubasi selama 24 jam atau lebih, dan dapat dihitung pertumbuhan dari bakteri yang diuji tersebut.
19
2.2 Kerangka Teori
Perasan bawang putih Alisin
Diallytrisulphide (DATS)
Diallydisulphide (DADS)
Menghambat sintesis protein dan asam nukleat bakteri
9DADS)
Gangguan pertumbuhan Propionibacterium acnes
Bagan 2.1 Kerangka teori 2.3 Kerangka Konsep
Perasan bawang putih dalam konsentrasi 5%, 20%, 55%, 75%, 100%
Biakan bakteri Propionibacterium acnes
Pertumbuhan bakteri normal
Bagan 2.2 Kerangka konsep
Pertumbuhan bakteri terhambat
20
2.4 Definisi Operasional
Tabel 2.2 Definisi operasional No
Variabel
Definisi
Alat ukur
Hasil ukur
Operasional 1
Zona hambat
Daerah tidak
Skala ukur
Penggaris
Diameter
Propionibacterium ditemukannya
zona
acnes
pertumbuhan
hambat
Propionibacterium
(mm)
Numerik
acnes 2
Konsentrasi
Perasan bawang
Mikropipet jumlah
perasan bawang
putih yang
perasan
putih
dilarutkan dengan
sesuai
etanol 96%
dengan
dengan berbagai
berbagai
konsentrasi
konsentrasi
Kategorik
(%) 3
Larutan kontrol
Larutan kontrol
Mikropipet Cakram uji
negatif
negatif yang berisi
berisi
aquades steril
aquades
Kategorik
steril 4
Kontrol positif
Kontrol positif
Tidak ada
Jumlah
yang berupa kertas
cakram 1
cakram yang berisi
buah berisi
antibiotik
antibiotik
klindamisin
klindamisin
Kategorik
21
BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN
3.1 Desain Penelitian
Pada penelitian ini menggunakan metode eksperimental laboratorik dengan teknik disc diffusion untuk melihat pengaruh larutan bawang putih (Allium sativum) terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes.
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Januari sampai dengan bulan Juni 2014 di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. Proses determinasi bawang putih (Allium sativum) dilakukan oleh Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Kebun Raya Bogor.
3.3 Bahan Yang Diuji
Bahan yang diuji dalam penelitian adalah bawang putih yang dibeli dipasar tradisional Bogor yang kemudian diperas dan dilarutkan dengan pelarut aquades steril.
3.4 Sampel Bakteri
Bakteri Propionibacterium acnes diisolasi pada media agar darah dan dinkubasi pada suhu 37o C selama 24 jam. Dan telah dibuktikan bentuk dan sifatnya dengan pewarnaan Gram.33,34
21
22
3.5 Identifikasi Variabel Penelitian
Variabel bebas pada penelitian ini adalah larutan bawang putih dengan konsentrasi 5%, 20%, 55%, 75%, 100%. Sedangkan variabel terikat adalah pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes pada medium Agar Darah, yang kemudian dilakukan pengukuran zona hambat yang terbentuk.
3.6 Alat dan Bahan Penelitian 3.6.1
Alat Tabung reaksi, ose, bunsen, mikropipet, pinset, vortex, cawan petri,
korek api, swab kapas, tisu, rak tabung, penggaris, kamera, baki, autoclave, alat tulis, label, laminar air flow, inkubator, kasa, lumpang dan alu, plastik tahan panas, sarung tangan, masker, timbangan digital.
3.6.2
Bahan Perasan bawang putih, media agar darah, aquades steril, thioglikolat,
larutan standar 0,5 mF, alkohol 70%, biakan bakteri Propionibacterium acnes, cakram uji antibiotik klindamisin, cakram uji kosong.
3.7 Cara Kerja Penelitian 3.7.1
Tahapan Persiapan 3.7.1.1 Sterilisasi Alat dan Bahan
Seluruh alat yang diigunakan pada penilitan ini dicuci bersih, kemudian disterilisasi didalam autoclave selama 15 menit pada suhu 121oC dengan tekanan 1,5 atm.33,34 3.7.1.2 Persiapan dan Determinasi Bawang Putih Pembelian bawang putih dari pasar di Bogor sebanyak 2 Kg. Kemudian bawang putih tersebut dideterminasi di Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Kebun Raya Bogor untuk memastikan kebenaran dari tanaman yang digunakan. Dengan cara mencocokan morfologi yang ada pada bawang putih terhadap kepustakaan dan dibuktikan dibidang Botani Pusat Penelitian Biologi LIPI Kebun Raya Bogor.
23
3.7.1.3 Pembuatan Perasan Bawang Putih Pembuatan perasan dilakukan dengan mengupas terlebih dahulu bawang putih, kemudian ditimbang sebanyak 350 gram dengan timbangan digital. Bawang putih dimasukan kedalam plastik, dan ditumbuk hingga halus menggunakan lumpang dan alu. Hasil tumbukkan diperas dengan menggunakan kasa yang sebelumnya sudah disterilisasi. Perasan ditampung pada cawan petri yang sudah disterilisasi.35
3.7.1.4 Pembuatan Konsentrasi Bawang Putih Konsentrasi larutan bawang putih yang divariasikan dengan menggunakan pelarut aquades steril yaitu 5%, 20%, 55%, 75%, 100%. Kontrol negatif yang digunakan adalah aquades steril dan kontrol positif adalah antibiotik klindamisin. Semua konsentrasi larutan bawang putih dibuat dalam 5 ml: Konsentrasi larutan bawang putih 5% Pembuatan konsentrasi larutan bawang putih 5% adalah dengan melarutkan 0,25 ml perasan bawang putih ke dalam 4,75 ml aquades steril. Konsentrasi larutan bawang putih 20% Pembuatan konsentrasi larutan bawang putih 20% adalah dengan melarutkan 1 ml perasan bawang putih ke dalam 4 ml aquades steril. Konsentrasi larutan bawang putih 55% Pembuatan konsentrasi larutan bawang putih 55% adalah dengan melarutkan 2,75 ml perasan bawang putih ke dalam 2,25 ml aquades steril. Konsentrasi larutan bawang putih 75% Pembuatan konsentrasi larutan bawang putih 75% adalah dengan melarutkan 3,75 ml perasan bawang putih ke dalam 1,25 ml aquades steril. Konsentrasi larutan bawang putih 100% Pembuatan konsentrasi larutan bawang putih 100% adalah dengan 5 ml perasan bawang putih tanpa dilarutkan dengan aquades steril.
24
3.7.1.5 Kultur Bakteri Propionibacterium acnes Pembuatan stok bakteri ini dilakukan untuk memperbanyak dan meremajakan bakteri dengan cara menginokulasikan 1 ose biakan murni bakteri Propionibacterium acnes ke dalam agar darah, kemudian diinkubasikan pada suhu 37oC selama 24 jam didalam inkubator.33,34
3.7.2 Uji Efektivitas Larutan Bawang Putih terhadap Pertumbuhan Propionibacterium acnes
Bakteri diencerkan dengan mencampurkan 1 ose suspensi bakteri Propionibacterium acnes ke dalam tabung reaksi yang telah berisi Thioglikolat steril. Kemudian dihomogenkan dengan menggunakan vortex dan kekeruhannya distandarisasi
dengan
Propionibacterium
konsentrasi
acnes
0,5
Mc
kemudian dioleskan
Farland. pada
Suspensi media
agar
bakteri darah
menggunakan swab kapas steril. Cakram uji kosong yang telah direndam dalam masing-masing konsentrasi perasan bawang putih kemudian diletakan diatas permukaan agar darah secara steril di laminar air flow. Lalu diinkubasi kedalam inkubator pada suhu 37oC selama 24 jam. Setelah itu diukur diameter zona terang (clear zone) yang terbentuk dengan menggunakan penggaris. Penelitian ini dikerjakan secara triplo.33,34
25
3.8 Alur penelitian
Kultur bakteri Propionibacterium acnes di media Agar Darah
Bakteri Propionibacterium acnes diambil dan dicampurkan ke dalam larutan pengencer thioglikolat
Pembuatan konsentrasi larutan bawang putih 5%, 20%, 55%, 75%, 100%, kemudian masukan ke dalam cawan petri
Thioglikolat dan Propionibacterium acnes divortex hingga homogen Suspensi bakteri Propionibacterium acnes dibandingkan kekeruhannya dengan larutan standar 0,5 Mc Farland
Rendam blank disc dalam cawan petri selama 20 menit
Usapkan bakteri ke media Agar Darah dengan swab kapas steril
Disc dilatekan di media Agar Darah yang telah ditanami Propionibacterium acnes Inkubasi selama 24 jam pada suhu 37oC Hitung diamtere zone terang disekeliling disc dan tentukan potensi antibakteri
Kontrol positif antibiotik klindamisin
Kontrol negatif aquades steril
26
3.9 Analisa Data
Data dari hasil penelitian pengaruh ekstrak bawah putih terhadap Propionibacterium acnes dianalisis dengan menggunakan SPSS 16.0 bertujuan untuk melihat adakah perbedaan bermakna dari masing-masing cakram uji yang mengandung kontrol negatif, kontrol positif dan berbagai konsentrasi ekstrak bawang putih dalam menghambat pertumbuhan Propionibacterium acnes. Data pada penelitian ini beruapa variabel katagorik numerik lebih dari 2 kelompok tidak berpasangan singga menggunakan uji one way ANOVA
jika distribusi
normal. Namun jika distribusi tidak normal maka menggunakan uji nonparametrik yakni Uji Kruskall-Wallis. Analisis Post Hoc menggunakan uji Mann-Whitney dilakukan
untuk
kebermaknaan.
menentukan
pada
konsentrasi
mana
yang
memiliki
27
28
4.2 Pewarnaan Gram Bakteri Propionibacterium acnes Propionibacterium acnes termasuk bakteri Gram positif dan memiliki bentuk batang. Bakteri Propionibacterum acnes yang digunakan pada penelitian didapatkan dari mikrobiologi Universitas Indonesia. Bakteri tersebut dibuktikan bentuk dan sifatnya dengan pewarnaan Gram di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. Hasil dari pewarnaan Gram menunjukan bakteri berwarna ungu yang menyatakan bahwa bakteri termasuk bakteri Gram positif dan bakteri berbentuk batang.
Gambar 4.2 Pewarnaan Gram Propionibacterium acnes
29
4.3 Uji Efektivitas Larutan Bawang Putih (Allium sativum) terhadap Pertumbuhan Bakteri Propionibacterium acnes
Penelitian ini menggunakan uji metode disc diffusion secara triplo dengan konsentrasi larutan bawang putih 5%, 20%, 55%, 75%, 100%. Agar darah yang telah terinokulasi bakteri Propionibacterium acnes diletakkan blank disc yang telah direndam selama 20 menit pada berbagai konsentrasi laruta bawang putih. Setalah diinkubasi selama 24 jam dengan suhu 37 o C, akan terbentuk zona jernih (clear zone) disekeliling blank disc yang menunjukkan adanya respon penghambatan terhadap pertumbuhan bakteri oleh suatu senyawa antibakteri yang terdapat dalam larutan bawang putih. Larutan bawang putih diketahui memberikan efek menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes yang terlihat dengan adanya zona hambat disekitar blank disc.
20%
55%
75%
K (-) K (+)
100% 5%
Gambar 4.3 Efektivitas Bawang Putih (Allium sativum) terhadap Pertumbuhan Bakteri Propionibacterium acnes pada Agar Darah
30
Zona Hambat (mm)
40,0000 35,0000 30,0000 25,0000 20,0000 15,0000 10,0000 5,0000 0,0000 Konsentrasi Konsentrasi Konsentrasi Konsentrasi konsentrasi 5% 20% 55% 75% 100%
Kontrol negatif
Kontrol positif klindamisin
Koonsentrasi Larutan Baawang putih (%) Grafik 4.1 Diameter Rata-Rata Zona Hambat
Pada hasil pengamatan, didapatkan berbagai diameter zona hambat yang terbentuk dari masing-masing konsentrasi larutan bawang putih yang digunakan pada penelitian. Rata-rata diameter pada konsentrasi 100% sebesar 23 mm dengan standar deviasi 1. Pada konsentrasi 75% sebesar 19 mm dengan standar deviasi 1. Pada konsentrasi 55% sebesar 17,67 mm dengan standar deviasi 1,15470. Pada uji kontrol positif yang menggunakan antibiotik klindamisin terbentuk zona hambat dengan rata-rata sebesar 35 dengan standar deviasi 1. Sedangkan pada konsentrasi 5%, 20%, dan kontrol negatif berupa aquades steril tidak terbentuk zona hambat, ini memberikan arti bahwa tidak adanya hambatan terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes.
Berdasarkan hasil uji penelitian diatas, dapat dinyatakan bahwa dengan meningkatnya konsentrasi larutan bawang putih menunjukan bahwa terjadi kenaikan dari diameter zona hambat, hal ini menunjukan bahwa pertambahan konsentrasi larutan bawnag putih berbanding lurus dengan bertambah kuatnya zona hambat pertumbuhan bakteri.
31
4.4 Uji Kebermaknaan Konsentrasi Larutan Bawang Putih
Pada penelitian ini dilakukan uji statistik efektivitas larutan bawang putih (Allium sativum) terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes dengan komperatif variabel numerik. Data yang didapatkan tidak memenuhi syarat untuk dilakukannya uji One Way Anova karena distribusi data tidak normal, maka menggunakan uji Krusall-Wallis. Kemudian dilakukan uji Post Hoc dengan uji Mann-Whitney. Pada uji Kruskall-Wallis nilai signifikansi dikatakan bermakna jika p < 0,05, dan pada penelitian ini uji Kruskall-Wallis menunjukan nilai signifikansi 0,003 yang berarti data penelitian ini bermakna, hal ini menyatakan bawang
putih
mempunyai
efektivitas
terhadap
pertumbuhan
bakteri
Propionibacterrium acnes. Tabel 4.1. Hasil Analisis Multikomparasi dengan uji Mann- Whitney
Konsentrasi
5%
5% 20% 55% 75% 100% Kontrol negatif
20%
55%
75%
100%
Kontrol negatif
Klindamisin
1,00
0,034*
0,037*
0,037*
1,00
0,037*
0,034*
0,037*
0,037*
1,00
0,037*
0,178
0,046*
0,034*
0,046*
0,050*
0,037* 0,037*
0,050* 0,050* 0,037*
Klindamisin
Berdasarkan hasil statistik analisis Post Hoc dengan menggunakan uji Mann-Whitney didapatkan bahwa terdapat perbedaan yang bermakna antar setiap konsentrasi dengan kontrol positif berupa antibiotik klindamisin dengan nilai signifikansi <0,05.
32
4.5 Pembahasan
Pada penelitian ini, diketahui larutan bawang putih mampu menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes. Didapatkan respon hambatan sedang pada konsentrasi 55% dengan rata-rata diameter 17, 67 mm dan 75% dengan rata-rata diameter 19 mm, dan pada konsentrasi 100% dengan rata-rata diameter 23 mm didapatkan respon hambatan kuat.
Menurut Kirana (2010) yang melakukan penelitian mengenai uji aktivitas tumbukan kasar bawang putih terhadap Staphylococcus aureus dengan metode disc diffusion menunjukan bahwa larutan bawang putih yang memiliki respon kuat yaitu konsentrasi 100% dengan diameter 38,5 mm, konsentrasi 50% dengan diameter 31,8 mm, konsentrasi 25% dengan diameter 36,5 mm, dan konsentrasi 10% dengan diameter 25 mm.33
Perbedaan diameter zona hambat pada penelitian ini dengan penelitian Kirana (2010) dipengaruhi oleh konsentrasi yang digunakan, bakteri yang diuji dan metode pembuatan larutan bawang putih yang diuji, pada penelitian yang dilakukan oleh Kirana (2010), bawang putih (Allium sativum) yang digunakan sebagai bahan uji ditumbuk terlebih dahulu kemudian ditambahkan pelarut, sedangkan pada penelitian ini bawang putih ditumbuk kemudian diperas dan selanjutnya ditambahkan pelarut. Zona hambat yang terbentuk disebabkan oleh kandungan dari bawang putih yaitu alisin yang memiliki aktivitas antibakteri dengan mengubah reaksi senyawa tiol pada enzim bakteri dan protein lainnya serta RNA dan DNA polimerase yang penting untuk pertumbuhannya. Perbedaan zona hambat pertumbuhan bakteri terjadi karena Propionibacterium acnes bersifat anaerobik aerotoleran yang berarti bakteri ini dapat hidup walaupun terdapat oksigen disekitarnya, sedangkan Staphylococcus aureus bersifat aerobik atau mikroaerofilik yang berarti bakteri ini masih bisa bertahan dalam kadar oksigen yang rendah, namun tidak dapat bertahan ketika tidak ada oksigen. 16, 10
33
Penelitian lain yang memanfaatkan bawang putih dalam pengaruhnya terhadap suatu bakteri adalah Masniari et al.,(2004) mengenai uji daya hambat perasan bawang putih (Allium sativum) terhadap pertumbuhan bakteri yang diisolasi dari telur ayam kampung. Bakteri yang digunakan pada penelitian tersebut adalah Salmonella sp dan Escherichia coli. Dengan metode disc diffusion dan dilusi dalam penelitian tersebut didapatkan hasil bahwa dengan konsentrasi 50% perasan bawang putih dapat menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella sp dan Eschericia coli dan menunjukan respon yang lemah.
Perbedaan penelitian yang dilakukan oleh Masniari et al.,(2004) dengan penelitian ini adalah konsentrasi yang digunakan, media pertumbuhan bakteri yang digunakan oleh Kusrini et al., adalah Mueller Hinton agar sedangkan penelitian ini menggunakan agar darah dan bakteri yang digunakan oleh Masniari et al.,(2004) adalah bakteri Salmonella sp dan Escherichia coli yang termasuk bakteri
Gram negatif sedangkan penelitian ini menggunakan bakteri
Propionibacterium acnes yang termasuk bakteri Gram positif. Perbedaan respon hambat antara penelitian yang dilakukan oleh Masniari et al.,(2004) dan penelitian ini karena dipengaruhi oleh perbedaan dinding sel dari bakteri Gram negatif dan bakteri Gram positif.35
Bawang putih yang dibentuk menjadi ekstrak juga memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan beberapa bakteri, hal ini dibuktikan oleh Hindi (2013). Dalam penelitiannya dengan menggunakan metode well diffusion menunjukan bahwa ekstrak bawang putih dengan konsentrasi 50% dapat menghambat pertumbuhan 5 bakteri Gram positif yaitu S. aureus, S. epidermidis, S. pyogenes, S. pneumoniae, Enterococcus
faecalis dan 9 bakteri Gram negatif yaitu P.
aeruginosa, Pseudomonas fluresence, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, E. coli, Enterobacter aerugenes, K. pneumoniae, S. typhi, Acinetobacter. 4
34
Tabel 4.2 Diameter Zona Hambat Bakteri Gram Positif dan Bakteri Gram Negatif Bakteri Gram Positif
Staphylococcus aureus
Diamter
Bakteri Gram Negatif
Diameter
zona hambat
zona hambat
(mm)
(mm)
25
Pseudomonas
45
aeruginosa Staphylococcus
28
epidermidis
Pseudomonas
25
fluresence
Streptococcus pyogenes
35
Proteus vulgaris
20
Streptococcus
30
Proteus mirablis
20
40
Escherichia coli
30
Enterobacter
25
pneumonia Enterococcus faecalis
aerugenes Klebsiella pneumoniae
25
Salmonella typhi
50
Acinetobacter
20
Sumber: Hindi, 2013
Dalam penelitiannya Hindi (2013) juga menyatakan bahwa ekstrak bawang putih dalam menghambat pertumbuhan bakteri yang diuji menunjukan respon yang kuat. Perbedaan penelitian yang dilakukan oleh Hindi (2013) dengan penelitian ini yaitu dari pengolahan bawang putih yang diuji, metode penelitian, dan media pertumbuhan bakteri yang digunakan pada penelitian Hindi (2013) adalah Mueller Hinton agar sedangkan pada penelitian ini menggunakan agar darah.4
35
4.6 Keterbatasan Penelitian
Pada penelitian ini, terdapat beberapa keterbatasan selama proses penelitian, yaitu: 1.
Bakteri Propionibacterium acnes tidak dapat bertahan hidup lama dalam waktu yang lama.
2.
Tidak diukur jumlah kadar bahan aktif pada larutan bawang putih yang digunakan pada penelitian ini.
3.
Pada penelitian ini bakteri Propionibacterium acnes tidak diketahui secara spesifik strainnya.
36
BAB 5 PENUTUP
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian maka dapat disimpulkan sebagai berikut: 1. Hasil uji efektivitas bawang putih (Allium sativum) terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes dengan pelarut aquades menunjukan bahwa
bawang putih dapat menghambat
pertumbuhan Propionibacterium acnes, yaitu pada konsentrasi 100% rata-rata zona hambat 23 mm. Pada konsentrasi 75% ratarata zona hambat 19 mm. Pada konsentrasi 55% rata-rata zona hambat 17,67 mm. Tetapi pada larutan bawang putih dengan konsentrasi 5% dan 20% tidak menunjukan adanya zona hambat. 2. Efektivitas larutan bawang putih (Allium sativum) terhadap pertumbuhan
bakteri
Propionibacterium
acnes
menurut
Greenwood (1995) pada konsentrasi 100% tergolong respon hambat yang kuat, pada konsentrasi 75% dan 55% tergolong respon hambat yang sedang, sedangkan pada konsentrasi 20% dan 5% tidak memiliki respon hambat. 3. Hasil uji statistik dengan metode uji Mann-Whitney menunjukan bahwa terdapat perbedaan yang bermakna antar setiap konsentrasi larutan bawang putih (Allium sativum) dengan kontrol positif yaitu klindamisin.
36
37
5.2 Saran
Setelah dilakukannya penelitian ini, maka disarankan untuk penelitian selanjutnya: 1. Dapat melakukan penelitian mengenai efektivitas perasan bawang putih terhadap bakteri lainnya yang bersifat patogen 2. Dapat melakukan penelitian dengan uji aktivitas bawang putih terhadap Propionibacterium acnes secara in-vivo.
38
DAFTAR PUSTAKA
1.
2. 3. 4.
5. 6.
7. 8. 9.
10.
11.
12.
13.
14.
15. 16.
Hernawan, Udhie Eko dan Ahmad Dwi Setyawan. Senyawa Organosulfur Bawang Putih (Allium sativum L.) dan Aktivitas Biologinya. Biofarmasi Vol. 1, No. 2, Agustus 2003, hal. 65-76. Bruno, Gene, Garlic.Dean of Academics, Huntington College of Health Sciences, Knoxville, 2009. Chardon, Kirtland. Garlic: An Herb Society of America Guide.The Herb Society of America, Ohio, 2006. Hindi, Nada KhazalKadhim. In vitro Antibacterial Activity of Aquatic Garlic Extract, Apple Vinegar and Apple Vinegar - Garlic Extract combination. American Journal of Phytomedicine and Clinical Therapeutics, Vol. 1, No.1, 2013, hal. 042-051. Josling, Peter. Stabilised Allicin: Power, Performance, Proof. HRC Publishing, 2003. Sylvia, Lusita. Hubungan Antara Jenis Mikroorganisme yang Ditemukan pada Akne Lesi dengan Bentuk Lesi Akne. Tesis: Fakultas Kedokteran Universitas Andalas Padang, 2010. Price, Sylvia Aderson dan Lorraine McCharty Wilson. Patofisiologi. EGC, Jakarta, 2005. Cardain, Lorren, et al. Acne Vulgaris: A Disease of Western Civilization. Arch Dermatol, Vol. 138, 2002, hal. 1584-1590. Mizwar, Muhammad, Marlyn Grace Kapantow dan Pieter Levinus Suling. Profil Akne Vulgaris di RSUP Prof. Dr. Kandou Manado Periode 2009-2011. Bagian Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin Fakultas Kedokteran Universitas Sam Ratulangi Manado, 2012, hal. 1-7. Brooks, Geo F., Janet S. Butel dan Stephen A. Morse. Mikrobiologi Kedokteran, alih bahasa Huriawati Hartono. Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, 2008. Amro, Bassam I., et al. In vitro antimicrobial and anti-inflammatory activity of Jordanian plant extracts: A potential target therapy for Acne vulgaris. African Journal of Pharmacy and Pharmacology Aman, Vol. 7, No. 29, 2013, hal. 2087-2099. Gaspari, Anthony A., and Stephen K. Tyring (ed.). Clinical and Basic Immunodermatology. British Library Catakoguing in Publication Data London, 2008. Niyomkam, P., et al. Antibacterial activity of Thai herbal extracts on acne involved microorganism. Pharmaceutical Biology, Vol. 48, No. 4, h. 375– 380. Butt, Masood Sadiq, et al., Garlic: Nature's Protection Against Physiological Threats. Critical Reviews in Food Science and Nutrition, Vol. 49, 2009, hal. 538–551 Purwaningsih, Eko. Bawang Putih. Ganeca Exact Bandung, 2010. Cobas, Allejandra Cardella, Ana Cristina Soria, Marta Corteza Martinez, and Mar Villamiel, A Comprehesive Survey of Garlic Functionalty. Madrid: CSIC, 2010, hal. 1-60.
39
17. Sherwood, Lauralee. Fisiologi Manusia, alih bahasa Brahm U. Pendit. Penerbit Buku Kedokteran EGC Jakarta, 2011. 18. Mancini, Anthony J. Incidence, Prevalence, and Pathophysiology of Acne. Proceeding, Vol. 8, No. 4., 2008, hal.1-6. 19. Tahir, Ch. Muhammad. Pathogenesis of acne vulgaris: simplified. Journal of Pakistan Association of Dermatologists, Vol. 20, 2010; hal. 93-97. 20. Baxi. S. OTC Products for the Treatment of Acne. University of Connecticut School of Pharmacy.2007. 21. Oberemok, Steve S. dan Alan R. Shalita. Acne Vulgaris,I: Pathogenesis and Diagnosis. Continuing Medical Education, Vol. 70, 2002, hal. 101-105. 22. Bhambri, Sanjay, James Q. Del Rosso, Avani Bhambri. Pathogenesis of acne vulgaris: recent advances. Journal of Drugs in Dermatology, July, 2009, hal. 1-6. 23. Bruggemann, H., Skin: Acne and Propionibacterium acnes Genomics. Handbook of Hydrocarbon and Lipid Microbiology, DOI 10, 2010, h. 32163223. 24. Oprica Cristina, Characterisation of Antibiotic-Resistant Propionibacterium Acnes from Acne Vulgaris and Other Disease. Karolinska Institutet, Stockhlom, 2006. 25. Propionibacterium acne (species). (cited 16 September 2014). Available from: URL: http://www.uniprot.org/taxonomy/1747 26. Pratiwi, Sylvia T. Mikrobiologi Farmasi. Penerbit Erlangga Jakarta, 2008. 27. Dorland, Newman. Kamus Kedokteran Dorland, edisi ke-31 alih bahasa Alifa Dimanti, dkk. Penerbit Buku Kedokteran EGC Jakarta, 2012. 28. Ganiswarna, Sulistia G., dkk (editor). Farmakologi dan Terapi. Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia Jakarta, 2004. 29. Katzung, Bertram G. Farmakologi Dasar dan Klinik, alih bahasa Azwar Agoes, dkk. Penerbit Buku Kedokteran EGC Jakarta, 2004. 30. Jiang, Lin. Comparison of Disk Diffusion, Agar Dilution, and Broth Microdilution for Antimicrobial Susceptibility Testing of Five Chitosans. Thesis: Faculty of the Louisiana State University and Agricultural and Mechanical College, 2011. 31. Ahmad, Iqbal, Farrukh Aqil and Mohammad Owais (ed.). Modern Phytomedicine: turning medical plants into drugs. Willey VCH Verlag GmBH Weinheim, 2006. 32. Greenwood. Antibiotics Susceptibility (Sensitivity) Test, Antimicrobial and Chemotheraphy. USA: Mc Graw Hill Company. 1995. 33. Kirana, Annisa Nurul. Uji Aktivitas Antimikroba Tumbuhan Kasar Bawang Putih terhadap Staphylococcus aureus secara In-Vitro dengan Metode Difusi. Skripsi: Program Studi Pendidikan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta, 2010. 34. Karina, Rina. Pengaruh Ekstrak Bawang Putih (Allium sativum) terhadap Pertumbuhan Bakteri Streptococcus mutans secara In Vitro. Skripsi: Program Studi Pendidikan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta, 2013 35. Masniari, Poeloengan. Uji Daya Hambat Perasaan Umbi Bawang Putih (Alium sativum) terhadap Bakteri yang Diisolasi dari Telur Ayam Kampung.
40
Seminar Nasional Hari Pangan Sedunia XXVII Dukungan Teknologi untuk Meningkatkan Produk Pangan Hewani Dalam Rangka Pemenuhan Gizi Masyarakat Bogor, 2004, h. 145-148.
41
42
LAMPIRAN 2 (Diameter zona hambat pada uji antibakteri perasan bawang putih) Uji konsnentrasi
A
B
C
Rata-rata
Standar deviasi
Kontrol (-)
0
0
0
0
0
Konsentrasi 5%
0
0
0
0
0
Konsentrasi 20%
0
0
0
0
0
Konsentrasi 55%
17
19
17
17,6667
1,15470
Konsentrasi 75%
19
20
18
19
1
Konsentrasi 100%
22
24
23
23
1
Kontrol (+)
34
36
35
35
1
43
LAMPIRAN 3 (Cara Menghitung Konsentrasi Larutan Bawang Putih)
Konsentrasi larutan bawang putih 5%
0,25 ml perasan bawang putih kemudian dilarutkan ke dalam 4,75 ml aquades steril. Konsentrasi larutan bawang putih 20%
1 ml perasan bawang putih kemudian dilarutkan ke dalam 4 ml aquades steril.
Konsentrasi larutan bawang putih 55%
2,75 ml perasan bawang putih kemudian dilarutkan ke dalam 2,25 ml aquades steril. Konsentrasi larutan bawang putih 75%
3,75 ml perasan bawang putih kemudian dilarutkan ke dalam 1,25 ml aquades steril. Konsentrasi larutan bawang putih 100% 5 ml perasan bawang putih tanpa dilarutkan ke dalam aquades steril.
44
45
46
Lampiran 6 (Riwayat Hidup Penulis)
DAFTAR RIWAYAT HIDUP
Nama
: Maya Damayanti
Tempat, dan Tanggal Lahir
: Karawang, 15 Januari 1993
Alamat
: Turi Timur RT/RW 003/002, Tanjungjaya, Tempuran, Karawang
Email
:
[email protected]
No. Telpon
: 085770372346
Riwayat Pendidikan
1999 – 2005
: SDN Tanjungjaya 1
2005 – 2008
: SMPN 1 Tempuran
2008 – 2011
: SMAN 3 Karawang
2011 – sekarang
: Program Studi Pendidikan Dokter, FKIK Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta
47
