EFEKTIVITAS BAWANG PUTIH (Allium sativum) DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI Staphylococcus epidermidis
Laporan Penelitian ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar SARJANA KEDOKTERAN
OLEH : Shevrina Faradiba NIM : 1111103000046
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA 1435 H/2014 M
KATA PENGANTAR
Assalamualaikum Warahmatullahi Wabarakatuh. Puji syukur saya panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala nikmat dan karunia yang telah diberikan, sehingga saya dapat menyelesaikan penelitian ini. Saya menyadari tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak, sangatlah sulit bagi saya untuk menyelesaikan penelitian ini. Oleh karena itu, saya mengucapkan terima kasih kepada: 1. Prof. DR. (hc) dr. M.K. Tadjudin, Sp. And selaku Dekan FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta yang selalu membimbing dan memberikan kesempatan kepada saya untuk menempuh pendidikan di Program Studi Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. 2. dr. Witri Ardini, M.Gizi, Sp.GK selaku Ketua Program Studi dan untuk seluruh dosen Program Studi Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta yang selalu membimbing serta memberikan ilmu kepada saya selama menjalani masa pendidikan di Program Studi Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. 3. dr. Erike Anggraini Suwarsono, M.Pd dan dr. Siti Nur Aisyah Jauharoh, PhD selaku dosen pembimbing penelitian yang selalu membimbing dan mengarahkan dalam berjalannya penelitian ini. 4. Kedua orang tua tercinta, Moh. Junaidi, SE dan Tri Sulasih S.Pd yang selalu memberikan kasih sayangnya, memberikan doa dan semangat sepanjang waktu. Juga kepada kakak saya, Rudy Febrianto, SE yang selalu mendukung dan memberikan semangat dalam menjalani kehidupan di Program Studi Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. 5. Teman-teman kelompok riset yang banyak membantu dalam penelitian. 6. Semua sejawat PSPD Angkatan 2011 yang tidak dapat disebutkan satu persatu.
v
Saya menyadari laporan penelitian ini masih jauh dari kesempurnaan. Kritik dan saran yang membangun dari semua pihak sangat saya harapkan demi kesempurnaan laporan penelitian ini.
Demikian laporan penelitian ini saya tulis, semoga bermanfaat bagi penyusun khususnya dan para pembaca pada umumnya. Semoga Allah SWT berkenan memasukkannya sebagai amal jariyah untuk tabungan di akhirat nanti. Aamiin
Ciputat, 12 September 2014
Penulis
vi
ABSTRAK Shevrina. Program Studi Pendidikan Dokter. Efektivitas Bawang Putih (Allium sativum) Dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus epidermidis. 2014 Bawang putih (Allium sativum) merupakan salah satu tanaman obat yang sudah dikenal sejak lama oleh masyarakat. Bawang putih diketahui dapat digunakan sebagai obat antibakteri.
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas antibakteri bawang putih terhadap Staphylococcus epidermidis secara invitro. Sampel pada penelitian eksperimental ini adalah ekstrak bawang putih (Allium sativum) yang dibuat dengan metode tumbukan. Metode yang digunakan adalah uji aktivitas antibakteri dengan metode disc difusi, dibagi menjadi 4 kelompok perlakuan dengan konsentrasi 20%, 40%, 60% dan kelompok kontrol yaitu kontrol positif dengan amoksisilin 25ug dan kontrol negatif dengan etanol 96%. Analisis statistik menggunakan One-Way Annova. Hasil untuk uji aktivitas antibakteri untuk Kadar Hambat Minimum (KHM) bawang putih terhadap Staphylococcus epidermidis didapatkan perbedaan bermakna mulai dari konsentrasi 20% hingga 60%. Hasil dari uji aktivitas antibakteri ini adalah bersifat bakterisid terhadap Staphylococcus epidermidis. Berdasarkan klasifikasi respon hambatan pertumbuhan bakteri, tumbukan bawang putih tergolong memiliki efektivitas kuat dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis. Kata kunci : Bawang Putih, Staphylococcus epidermidis, disc diffusi. ABSTRACT Shevrina. Medical Education Study Program. The Effectiveness of Garlic (Allium sativum) on Inhibition Growth of bacteria Staphylococcus epidermidis. 2014 Allium sativum is one of medicine plants known by people
for a long time. It has been known for its antibacterial effect. The purpose of this research was to measure the antibacterial effect of Allium sativum againts Staphylococcus epidermidis. This research was an experimental study with post test control group only design. The sample of this experimental study of Allium sativum used garlic collision method. The antibacterial activity test uses disc diffusion method, these were divided 4 test group with concentration 20%, 40%, 60% and control groups were positive control with amoksisilin 25ug and negative control with etanol 96%. Statistic analysis was done by using One-Way Annova. The result of antibacterial activity, Minimum Inhibitory Concentration (MIC) significant from the concentration 20% until 60%. The result of antibacterial activity test were bacteriostatic for Staphylococcus epidermidis. Based on classification of bacterial growth inhibition response, garlic collision is classified as a strong substance in inhibiting the growth of Staphylococcus epidermidis. Keywords : Garlic, Staphylococcus epidermidis, disc diffuse.
vii
DAFTAR ISI LEMBAR PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................ii LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING ........................................................iii LEMBAR PENGESAHAN PENGESAHAN .........................................................iv KATA PENGANTAR ..............................................................................................v ABSTRAK ................................................................................................................vii ABSTRACT ..............................................................................................................vii DAFTAR TABEL.....................................................................................................x DAFTAR GRAFIK ..................................................................................................x DAFTAR GAMBAR ................................................................................................x DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................................x BAB 1 PENDAHULUAN ........................................................................................1 1.1 Latar Belakang ..................................................................................................1 1.2 Rumusan Masalah .............................................................................................2 1.3 Hipotesis ............................................................................................................2 1.4 Tujuan Penelitian ..............................................................................................2 1.5 Manfaat Penelitian ............................................................................................2 BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ...............................................................................3 2.1 Landasan Teori .................................................................................................3 2.1.1 Klasifikasi Bawang Putih ...........................................................................3 2.1.2 Kandungan Bawang Putih ..........................................................................3 2.1.3 Faktor Penentu Kualitas Budidaya Bawang Putih .....................................7 2.1.3 Manfaat Bawang Putih ...............................................................................8 2.1.4 Efek Samping dan Kontra Indikasi Bawang Putih .....................................11 2.2 Bakteri Staphylococcus epidermidis .................................................................11 2.2.1 Klasifikasi Staphylococcus epidermidis.....................................................11 2.3 Acne Vulgaris ...................................................................................................14 2.4 Patogenesis Acne vulgaris oleh Staphylococcus epidermidis ...........................17 2.5 Patogenesis Staphylococcus epidermidis terhadap kandungan bawang putih ..18 2.6 Antibiotik Amoksisilin .....................................................................................18 2.7 Uji Antibakteri ..................................................................................................20 2.8 Kerangka Teori .................................................................................................22
viii
2.9 Kerangka Konsep..............................................................................................23 2.10 Definisi Operasional .......................................................................................24 BAB 3 METODE PENELITIAN ............................................................................25 3.1 Desain Penelitian ..............................................................................................25 3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ............................................................................25 3.3 Sampel Penelitian ..............................................................................................25 3.4 Identifikasi Variabel ..........................................................................................26 3.4.1 Variabel Bebas .............................................................................................26 3.4.2 Variabel Terikat ...........................................................................................26 3.5 Alat dan Bahan Penelitian .................................................................................26 3.5.1 Alat Penelitian .............................................................................................26 3.5.2 Bahan Penelitian ..........................................................................................27 3.6 Cara Kerja Penelitian .........................................................................................27 3.6.1 Sterilisasi Alat ..............................................................................................27 3.6.2 Pembuatan Media Agar ...............................................................................27 3.6.3 Pembuatan Biakan Bakteri ..........................................................................28 3.6.4 Perwarnaan Gram ........................................................................................28 3.6.5 Prosedur Tumbukan Bawang Putih .............................................................29 3.6.6 Pembuatan Variabel Konsentrasi .................................................................29 3.6.7 Metode disc diffusion...................................................................................30 3.7 Pengolahan dan Analisis Data ...........................................................................30 3.8 Alur Penelitian ...................................................................................................31 BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN..................................................................32 4.1 Hasil dan Pembahasan .......................................................................................36 4.2 Keterbatasan Penelitian .....................................................................................37 BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN..................................................................38 5.1 Kesimpulan ........................................................................................................38 5.2 Saran ..................................................................................................................38 DAFTAR PUSTAKA.............................................................................................39 LAMPIRAN ...........................................................................................................42
ix
DAFTAR TABEL
4.1 Tabel Perbandingan rata-rata dari berbagai parameter perlakuan tumbukan bawang putih sesuai konsentrasi ..........................................................................43
DAFTAR GAMBAR
4.1 Histogram Zona hambat berdasarkan masing-masing konsentrasi tumbukan bawang putih ............................................................................................................43 4.1 Gambar Daya Hambat Bawang Putih Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus epidermidis dalam agar nutrien (clear zone).....................47
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil Identifikasi Bahan Uji ................................................................42 Lampiran 2. Data Hasil Uji Statistik........................................................................43 Lampiran 3. Prosedur Tumbukan Bawang Putih .....................................................44 Lampiran 4. Hasil Uji Efektivitas Bawang Putih Terhadap Staphylococcus epidermidis ..............................................................................................................47 Lampiran 5. Riwayat Penulis ...................................................................................48
x
BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Acne vulgaris disebabkan oleh berbagai faktor antara lain infeksi bakteri patogen yakni Propionibacterium acne atau infeksi bakteri non patogen yakni Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus aureus.1 Menurut data World Health Organization tahun 2008 kejadian acne vulgaris pada wanita usia 14–17 tahun berkisar 83-85% dan pada laki-laki di usia 16-19 tahun berkisar 95-100% dengan lesi predominan berupa komedo dan papul. Sebuah survey di kawasan Asia Tenggara diketahui terdapat 40%-80% kasus acne vulgaris. Sementara menurut catatan kelompok studi dermatologi kosmetika Indonesia, menunjukkan terdapat 23,8% penderita acne di tahun 2003 dan 60% di tahun 2006.2 Bakteri Staphylococcus epidermidis yang bersifat flora normal pada kulit dapat berubah menjadi patogen sehingga menyebabkan peradangan. Peradangan pada kulit salah satunya dapat mengakibatkan timbulnya acne vulgaris. Namun, penyakit lain juga dapat disebabkan oleh bakteri Staphylococcus epidermidis yaitu Endokarditis dan Septicaemia.2 Telah banyak pengobatan farmakologis untuk mengatasi acne vulgaris akibat infeksi mikroorganisme terutama Staphylococcus epidermidis. Namun berkembang pengobatan alternatif, salah satunya dengan bawang putih. Tanaman ini diduga mempunyai efek antibakteri, antiviral, antifungi, antiprotozoa dan antiparasit yang membantu penyembuhan peradangan pada kulit akibat infeksi mikroorganisme. Efektivitas bawang putih yang dianggap memiliki kemampuan sebagai antibakteri sudah banyak dibuktikan oleh peneliti-peneliti terdahulu.3 Hal ini juga sesuai dengan Al-Quran surat Al-Baqarah ayat 61 : “Dan (ingatlah), ketika kamu berkata: “Hai Musa, kami tidak bisa sabar (tahan) dengan satu macam makanan saja. Sebab itu mohonkanlah untuk kami kepada Tuhanmu, agar Dia mengeluarkan bagi kami dari apa yang ditumbuhkan bumi, yaitu sayur-mayurnya, ketimunnya, bawang putihnya, kacang adasnya, dan bawang merahnya.”
1
2
Oleh sebab itu, peneliti tertarik untuk meninjau lebih dalam lagi tentang efektivitas bawang putih dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis sehingga nantinya dapat dipergunakan sebagai salah satu alternatif dalam pemilihan tatalaksana acne vulgaris akibat Staphylococcus epidermidis.4
1.1 Rumusan Masalah Apakah bawang putih (Allium sativum) dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis ?
1.2 Hipotesis Bawang Putih (Allium sativum) dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis.
1.3 Tujuan Penelitian 1.4.1 Tujuan Umum Untuk mengetahui efektivitas bawang putih (Allium sativum) dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis.
1.4.2 Tujuan Khusus Untuk mengetahui konsentrasi bawang putih (Allium sativum) yang paling efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis.
1.4 Manfaat penelitian Masyarakat dapat mempertimbangkan untuk menggunakan bawang putih sebagai pilihan dalam tatalaksana awal pengobatan acne vulgaris yang diakibatkan infeksi bakteri Staphylococcus epidermidis.
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Landasan Teori 2.1.1 Klasifikasi Bawang Putih (Allium sativum) menurut Robert H Whittaker (1969)
Kingdom
: Plantae (Tumbuhan)
Filum
: Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)
Kelas
: Liliopsida (berkeping satu / monokotil)
Ordo
: Liliales
Famili
: Liliaceae (suku bawang-bawangan)
Genus
: Allium
Spesies
: Allium sativum L
Bawang putih sebenarnya berasal dari Asia Tengah, di antaranya Cina dan Jepang yang beriklim subtropik. Di Indonesia ada tiga jenis bawang putih import kering dari China yang cukup terkenal dan mudah didapat yaitu Kating, Sin chung dan Hunan.5
2.1.2 Kandungan Bawang Putih (Allium sativum) Tanaman bawang putih adalah tanaman terna (herbaceous) berbentuk rumput. Daunnya panjang berbentuk pipih (tidak berlubang). Helai daun seperti pita dan melipat ke arah panjang dengan membuat sudut pada permukaan bawahnya, kelopak daun kuat, tipis, dan membungkus kelopak daun yang lebih muda sehingga membentuk batang semu yang tersembul keluar. Bunganya hanya sebagian keluar atau sama sekali tidak keluar karena sudah gagal tumbuh pada waktu berupa tunas bunga. Tanaman bawang putih memiliki beberapa bagian yang terdiri dari:5, 6 A. Akar Bawang putih merupakan tanaman monokotil berakar serabut dan berumpun. Sistem perakarannya sangat dangkal dan berada di permukaan tanah. Oleh karena itu, tanaman ini sangat rentan dengan kekeringan. 5
3
4
Akar serabut pada tanaman bawang hanya berfungsi untuk menyerap atau mengisi air dan nutrisi yang ada di sekelilingnya saja. Akar tidak memiliki kemampuan menyimpan cadangan air dan nutrisi yang cukup bagi pertumbuhan bawang putih.5 A. Batang Bagian yang berfungsi sebagai batang pada tanaman bawang putih adalah cakram. Cakram merupakan lingkaran pipih yang terdapat di dasar umbi bawang serta bertekstur kasar dan padat. Cakram ini berfungsi sebagai batang pokok tidak sempurna bagi tanaman bawang dan terletak di dalam tanah. Pada permukaan bawah cakram inilah nantinya tumbuh akar-akar serabut tanaman bawang putih. Sementara yang tampak sebagai batang di atas permukaan tanah adalah kelopak daun yang saling membungkus kelopak daun di bawahnya sehingga terlihat seperti batang. Bagian ini biasanya disebut dengan batang semu.5 B. Umbi Satu bongkahan umbi bawang putih tersusun atas beberapa siung yang mengelompok dan duduk pada satu cakram. Setiap siung dibungkus oleh selaput tipis yang merupakan pangkal pelepah daun. Ukuran umbi bawang putih sangat bervariasi, bergantung pada varietasnya masing-masing.5 Siung bawang putih berbentuk lonjong dan muncul dari setiap ketiak daun. Hampir pada setiap ketiak daun muncul siung-siung bawang putih ini, kecuali daun paling luar. Jumlah siung yang dihasilkan tiap bongkahan umbinya berbedabeda, bergantung pada varietas dan kondisi lingkungan penanamannya. Namun, rata-rata umbi varietas lokal menghasilkan 15-20 siung setiap umbinya. Para petani di daerah jawa menyebut umbi tunggal ini dengan sebutan “bawang lanang”.5 Bawang lanang terbentuk akibat pengaruh lingkungan. Lingkungan penanaman yang tidak mendukung pertumbuhan tanaman bawang menyebabkan tanaman bawang putih hanya berkembang dalam satu tunas saja, yaitu tunas utama. Tunas utama ini tumbuh dominan merajai pertumbuhan tanaman. Ia menekan pertumbuhan tunas-tunas lain yang merupakan bakal siung-siung lainnya sehingga terbentuk siung tunggal yang utuh.5
5
Jika bagian punggung siung bawang putih dibelah secara vertical, kita bisa melihat pertumbuhan vegetatif bibit bawang ini. Tunas vegetatif dilindungi oleh daging buah sekaligus berfungsi sebagai cadangan makanan. Biasanya, tunas ini terletak di bagian tengah daging buah. Pada pertumbuhannya, tunas vegetative ini tumbuh menerobos bagian ujung siung. Kecepatan pertumbuhannya bergantung pada kondisi lingkungan di sekitarnya.5 Oleh karena itu, siung bawang putih juga bisa digunakan sebagai calon benih untuk penanaman bawang putih selanjutnya. Sebagai calon benih, siung bawang putih melewati masa dormansi sekitar 6-8 bulan.5 C. Daun Tanaman bawang putih mempunyai daun yang sangat menarik. Helain daun menyerupai pita, tipis, dan bagian pangkalnya membentuk sudut. Daun berwarna hijau, biasanya terlihat lebih gelap pada sebelah atas dan lebih cerah pada sisi daun bagian bawah.5 Kelopak daun menutupi siung umbi bawang putih hingga pangkal daun. Kelopak daun saling menutupi dan membalut kelopak daun yang lebih muda di bawahnya sehingga kekompakan kelopak ini membentuk batang semu pada tanaman bawang putih yang posisinya ada persis di atas umbi bawang.5 D. Bunga Bawang putih biasanya tidak berbunga, namun pada beberapa varietas ada juga yang menghasilkan bunga. Akan tetapi, bunga pada tanaman bawang putih ini tidak memiliki nilai ekonomi maupun produksi. Malah jika dibiarkan tumbuh dan berkembang, kehadiran bunga ini justru menurunkan produksi umbi. Oleh karena itu, jika muncul pada tanaman bawang putih, sebaiknya harus segera dibuang dari tanaman.5 Bunga tanaman bawang putih ini berwarna merah muda (pink). Biasanya bunga ini muncul pada balutan kelopak yang membentuk batang semu. Kehadiran bakal bunga ditandai oleh membengkaknya bagian batang semu.5 Bahan yang terkandung dalam beberapa jenis bawang kadar airnya cukup tinggi, yaitu antara 63 ml – 90 ml, sedangkan komponen utamanya berupa protein, karbohidrat dan lemak. Komponen ini merupakan zat organik yang diperlukan untuk pertumbuhan dan perkembangan tubuh manusia serta untuk kelangsungan
6
hidupnya. Disamping itu, sebagian besar bawang mengandung zat-zat seperti kalsium, besi serta unsur kimia lainnya bahkan jenis bawang tertentu mengandung vitamin A dan serat (crude fibre). Kandungan zat gizi yang terkandung pada berbagai jenis bawang disajikan pada table berikut.6 Tabel 2.1 Kandungan Zat Gizi pada Berbagai Jenis Bawang dalam 100 gr bahan :
USDA National Nutrient Database for Standard Reference (2010)
Diantara beberapa komponen bioaktif yang terdapat pada bawang putih, senyawa sulfida adalah senyawa yang terbanyak jumlahnya. Senyawa-senyawa tersebut antara lain adalah dialil sulfida atau dalam bentuk teroksidasi disebut dengan allicin. Selain senyawa fenolik lainnya, allicin mempunyai fungsi fisiologis yang sangat luas, termasuk di antaranya adalah antioksidan, antikanker, antitrombotik, antiradang, penurunan tekanan darah, dan dapat menurunkan kolesterol darah. Data epidemiologis juga menunjukkan bahwa terdapat korelasi antara konsumsi bawang putih dengan penurunan penyakit kardiovaskuler, seperti aterosklerosis (penumpukan lemak), jantung koroner, dan hipertensi.7
7
Hal tersebut menunjukkan tanda-tanda akan kekuasaan Allah SWT dalam menciptakan salah satu jenis tanaman obat yang banyak memberikan manfaat bagi kesehatan manusia, sebagaimana firman Allah SWT dalam Q.S. As-Syu’araa ayat 7-8:8 “Dan apakah mereka tidak memperhatikan bumi, berapakah banyaknya kami tumbuhkan di bumi itu pelbagai macam tumbuh-tumbuhan yang baik. Sesungguhnya pada yang demikian itu benar-benar terdapat suatu tanda kekuasaan Allah dan kebanyakan mereka tidak beriman”.
2.1.3 Faktor Penentu Kualitas Budidaya Bawang Putih Keberhasilan usaha budidaya pertanian bawang putih sangat ditunjang oleh faktor bibit karena dalam produksinya tergantung dari mutu bibit yang digunakan. Umbi yang digunakan harus bermutu tinggi dengan tanaman yang pertumbuhannya normal, sehat, serta bebas dari hama dan patogen.5 Mutu bibit/benih bawang putih yang baik harus memenuhi persyaratan sebagai berikut:5
Bebas hama dan penyakit
Pangkal batang berisi penuh dan keras
Siung bernas
Besar siung untuk bibit 1,5 sampai 3 gram
Gambar 2.1 Budidaya Bawang Putih, Bawang Merah dan Bawang Bombay.2007.
5
8
2.1.4 Manfaat Bawang Putih (Allium sativum) Beberapa artikel menyebutkan khasiat ataupun manfaat dari bawang putih dalam bidang medis atau non medis.6 Beberapa manfaat tersebut, diantaranya:7 1) Mencegah Kanker Bawang putih mengandung antioksidan yang dapat membantu mencegah kanker.7 2) Anti Radang Bawang putih mengandung anti-peradangan.7 3) Anti Bakteri Bawang putih juga merupakan anti-bakteri yang baik.7 4) Menyuburkan rambut Bawang putih dapat mengatasi masalah kerontokan rambut. Dengan kandungan Allicin yang tinggi, mirip senyawa belerang yang ditemukan pada bawang merah, yang dipercaya efektif untuk mengatasi masalah rambut rontok.7 5) Membersihkan jerawat Mungkin tidak ditemukan sebagai bahan utama dalam obat jerawat yang ada di apotek, tetapi bawang putih merupakan obat alami yang mampu mengusir jerawat karena mengandung antioksidan yang dapat membunuh bakteri.7 6) Mencegah dan mengobati flu Dengan adanya kandungan antioksidan dapat menjaga sistem imun tubuh manusia.7 7) Menyembuhkan penyakit kulit Dengan adanya bukti bahwa bawang putih memiliki khasiat anti radang, maka dapat berguna mengurangi terjangkitnya penyakit kulit.7 8) Mengontrol berat badan Ahli gizi Cynthia Sass di Amerika menyebutkan penelitian pada tikus yang memakan bawang putih menunjukkan adanya pengurangan berat badan dan penyimpanan lemak.7 9) Mengatasi Keracunan Antioksidan yang terkandung di dalam bawang putih juga mampu membantu mengusir racun dari dalam tubuh. Manfaat ini tak hanya baik untuk kesehatan, namun juga dapat membantu memperlambat penuaan dini.7
9
10) Meredakan Nyeri Pada penderita arthritis (radang sendi) tumbuk bawang putih mentah dapat meredakan nyeri.7 11) Pertolongan Pertama Keracunan Merkuri Keracunan akibat merkuri atau arsenik juga dapat diringankan dengan mengonsumsi bawang putih mentah. Namun, pertolongan ini hanya berfungsi sebagai pertolongan pertama saja.7 12) Menghilangkan Gatal akibat Jamur Dengan sifat anti-jamurnya, bawang putih dapat menjadi obat tradisional bagi para atlet yang sering mengalami jamur untuk menghilangkan rasa gatal di kaki dengan merendam kaki dalam bak berisi air hangat dengan irisan bawang putih.7 13) Menyembuhkan sariawan Menurut penelitian di Amerika, bawang putih mengandung suplemen yang dapat membantu proses penyembuhan pada masalah sariawan. Dengan adanya sifat alami anti-inflamasi membantu mengurangi rasa sakit dan pembengkakan.7 14) Melancarkan Peredaran Darah Mengkonsumsi bawang putih mentah dapat membantu memperlancar peredaran darah dan membuka pembuluh darah yang tersumbat.7 15) Mengatasi Diabetes Bagi penderita diabetes, bawang putih juga baik untuk membantu mengontrol jumlah kadar gula di dalam darah.7 Beberapa
penelitian
mengenai
bawang
putih
(Allium
sativum)
menunjukkan bahwa adanya aktivitas bakterisidal terhadap organisme patogen termasuk bakteri Gram negatif dan Gram positif 24. Bawang putih juga telah dilaporkan memiliki efek menghambat pertumbuhan bakteri aerob dan anaerob 7. Penelitian lain menunjukkan bahwa bawang putih memiliki efek antibakteri terhadap bakteri yang sudah resisten terhadap beberapa jenis antibiotik.9,10 Ada beberapa penelitian yang menyatakan tentang khasiat bawang putih seperti pengaruhnya sebagai agen antibakteri. Beberapa faktor yang berpengaruh yaitu:10
10
1) Alliin Asam amino yang membentuk Allicin.10 2) Sugar Regulation Faktor Sejenis bahan yang dapat dimanfaatkan dalam pengobatan diabetes mellitus.10 3) Anthiarthritis Factor Zat atau faktor anti rematik.10 4) Sinar gorwitch (gorwitch rays) Sejenis sinar radiasi yang dapat merangsang pertumbuhan sel tubuh dan memiliki anti-aging.10 5) Antihaemolitityc Factor Faktor anti kekurangan sel darah darah merah.10 6) Selenium Sejenis antioksidan (anti sel kerusakan tubuh) atau mikromineral yang sifatnya dapat menghindari penggumpalan darah.10 7) Allithiamine Sumber ikatan biologis yang aktif (B1).11 8) Antitoksin Anti racun atau zat pembersih darah yang berguna menjaga daya tahan tubuh penderita asma.11 9) Seordinin Zat yang dapat mempercepat perkembangan tubuh, berat badan, peningkatan tenergi dan pengobatan penyakit kardiovaskular.11 10) Methylallyl Trisulfide Pencegah terjadinya pengumpalan darah.11 Bawang putih memiliki efek bakterisidal terhadap beberapa organisme seperti Staphylococcus Aureus, Escherichia coli, Propionibacterium acne.Bawang putih yang mengandung komponen kimia yakni allicin dapat menghambat dan menghancurkan berbagai pertumbuhan jamur dan bakteri pada kulit. Sehingga bawang putih menjadi salah satu pengobatan herbal pada tinea versikolor (panu).12
11
2.1.5 Efek Samping dan Kontra Indikasi Bawang Putih Menurut National Center for Complementary and Alternative Medicine tahun 2011, tanaman bawang putih cukup aman untuk sebagian besar orang dewasa. Efek sampingnya berupa bau badan dan bau mulut, heatburn, nyeri perut serta reaksi alergi bila mengkonsumsi bawang putih mentah. Bawang putih dapat mengencerkan darah dengan cara yang mirip dengan aspirin, sehingga sebaiknya tidak dikonsumsi ketika akan mengalami pembedahan ataupun jika ada riwayat gangguan pembekuan darah. Bawang putih akan berinteraksi dengan saquinavir yang merupakan obat untuk terapi infeksi Human Immunodeficiency Virus (HIV) dan menurunkan efektivitasnya dikarenakan dapat mengurangi kadar protease inhibitor. Bawang putih juga dapat memperberat efek obat-obatan antiagregasi platelet seperti indometasi dan aspirin serta obat pengencer darah seperti warfarin.12 Sementara efek samping yang ditimbulkan pada penggunaan bawang putih di wajah sebagai penghilang jerawat dapat menyebabkan kulit melepuh pada kulit yang sensitif dan menimbulkan rasa panas karena adanya kandungan belerang namun tidak perlu khawatir karena rasa panas tersebut merupakan respon kulit melawan bakteri. Bawang putih dianggap memiliki peran dalam mempengaruhi siklus menstruasi sehingga hal ini membuat bawang putih dikontraindikasikan bagi ibu hamil dan menyusui.12
2.2 BAKTERI Staphylococcus epidermidis 2.2.1 Klasifikasi dan Morfologi Staphylococcus epidermidis menurut Jawetz dkk (2005)1
Kingdom
: Protista
Divisi
: Schizophyta
Class
: Schyzomycetes
Ordo
: Eubacteriales
Famili
: Enterobacteriaceae
Genus
: Staphylococcus
Spesies
: Staphylococcus epidermidis
12
Bakteri Staphylococcus epidermidis merupakan flora normal yang terdapat pada kulit, selaput lendir, bisul dan luka manusia. Bakteri ini adalah salah satu patogen utama infeksi nosokomial khususnya yang berkaitan dengan infeksi benda asing serta menghasilkan glycocalyx “lendir” sebagai perekat pada sel dan resistensi terhadap fagositosis maupun beberapa jenis antibiotik.13 Ciriciri :
Gram positif, koagulase negatif, katalase positif.13
Aerob atau anaerob.13
Berbentuk kokus tunggal, berpasangan, tetrad dan berbentuk rantai juga tampak dalam biakan cair.13
Berdiameter 0,5-1,5 µm yang tersusun dalam bentuk kluster yang tidak teratur.13
Bakteri tidak memiliki kapsul.13
Bakteri tidak membentuk spora dan tidak bergerak.13
Berkoloni mengerombol menyerupai buah anggur. Koloni biasanya berwarna putih atau krem bersifat anaerob.13
S.epidermidis tumbuh cepat pada suhu optimum 37°C.13
Gambar 2.2 Perwarnaan Gram bakteri Staphylococcus epidermidis
Bakteri ini merupakan bakteri yang tergolong : 1) Koagulase Negatif Koagulase merupakan protein ekstraseluler yang mengikat prothrombin hospes dan membentuk komplek yang disebut staphylothrombin. Karakteristik aktifitas protease pada thrombin diaktifasi dalam komplek tersebut, menghasilkan konversi fibrinogen menjadi fibrin.
Bakteri S.epidermidis tidak dapat membentuk
kompleks tersebut sehingga darah dari hospes tidak menggumpal.14
13
2) Katalase positif Uji katalase digunakan untuk mengetahui aktivitas katalase pada bakteri. Bakteri S.epidermidis memproduksi enzim katalase yang dapat memecah H2O2 menjadi H2O dan O2. Karena H2O2 dapat menjadi racun bagi bakteri ini selain itu proses tersebut merupakan mekanisme pernafasan dari bakteri tersebut.14 Dinding bakteri S.epidermidis terdiri dari peptidoglikan yaitu suatu polimer polisakarida yang mengandung subunit-subunit. Lapisan tersebut menempel pada permukaan luar membran sel. Bakteri jenis ini tidak memiliki membran luar maupun ruang periplasmik. Sehingga ketika menggunakan perwarnaan gram, maka akan terlihat berwarna ungu.14 Peptidoglikan memiliki beberapa fungsi, yaitu:15 1) Dapat mempertahankan bentuk bakteri.15 2) Menahan tekanan osmotik perlawanan sampai 20 atmosfir.15 3) Sebagai antigen yang dapat membentuk Ig pada manusia.15 4) Bersifat sensitif sehingga hanya untuk disinfektan berbasis fenol.15 5) Stimulator imunitas/daya tahan tubuh yang berperan sebagai adjuvant.15 6) Substrat dari imunitas yang tidak spesifik, dihancurkan oleh enzim bakteriofaga dan lisozim tertentu.15 Selain itu, bakteri Staphylococcus epidermidis yang bersifat gram positif memiliki molekul tambahan berupa:16
Protein A.16
Asam teikoat yaitu polimer gliserol yang diikat ke peptidoglikan kemudian menjadi antigenik. Molekul ini terdiri atas gliserol, fosfat dan ribitol gula alkohol.16
Enzim-enzim seperti hialuronidase (faktor penyebaran), staphylokinase (faktor fibrinolisis), proteinase dan beta-laktamase.16
Endotoksin yang menyebabkan nekrosis kulit.16
Lekosidin yang menyebabkan infeksi rekuren karena Staphylococcus berkembang biak intraselular.16
Toksin eksploatif terdiri dari 2 protein yang menyebabkan deskuamasi kulit luas.16
14
Enterotoksin yang berkembang biak pada makanan dapat menyebabkan gejala diare dan muntah.16 Faktor-faktor yang berperan menghilangkan flora normal bersifat
sementara pada kulit yakni.16
pH rendah.16
Asam lemak pada sekresi sebasea.16
Adanya lisozim.16 Jumlah mikroorganisme pada permukaan kulit dapat berkurang apabila
menggunakan sabun yang mengandung heksaklorofen atau desinfektan lain, namun flora secara cepat muncul kembali dari kelenjar sebasea dan keringat.16
2.3 Acne Vulgaris (Jerawat) Acne vulgaris adalah penyakit peradangan menahun folikel polisebasea yang umumnya terjadi pada masa remaja dan dapat sembuh sendiri. Gambaran acne vulgaris sering polimorfi; terdiri atas berbagai kelainan kulit berupa komedo, papul, pustule, nodus dan jaringan parut yang terjadi akibat kelainan aktif tersebut, baik jaringan parut yang hipotrofik maupun yang hipertrofik.18 Tempat predileksi acne vulgaris adalah di muka, bahu, dada bagian atas, dan punggung bagian atas. Erupsi kulit morfi, dengan gejala predominan salah satunya komedo, papul yang tidak beradang dan pustule, nodus dan kista yang beradang. Dapat disertai rasa gatal, namun umumnya keluhan penderita adalah keluhan estetis. Komedo adalah gejala patognomonik bagi acne vulgaris berupa papul miliar yang mengandung sumbatan sebum, bila berwarna hitam akibat mengandung unsur melanin disebut komedo hitam atau komedo terbuka (black comedo, open comedo). Sedang bila berwarna putih karena letaknya lebih dalam sehingga tidak mengandung unsur melanin disebut sebagai komedo putih atau komedo tertutup (white comedo, close comedo).18 Sebagian besar penyebab acne vulgaris merupakan akibat dari infeksi agen mikroorganisme. Hal ini dapat disertai rasa gatal, namun umumnya keluhan penderita adalah keluhan estetika.18
15
Ada beberapa hal yang menjadi faktor resiko timbulnya acne vulgaris, yaitu:18 1) Sebum Merupakan faktor utama penyebab timbulnya acne.18 2) Genetik Faktor herediter sangat berpengaruh pada besar dan aktivitas kelenjar glandula sebasea4. Apabila kedua orang tua mempunyai parut bekas akne, kemungkinan besar anaknya akan menderita acne.18 3) Usia Umumnya insiden acne vulgaris terjadi pada usia 14 – 17 tahun pada wanita, 16 – 19 tahun pada pria. Pada masa itu lesi yang predominan adalah komedo dan papul jarang terlihat lesi beradang pada penderita.18 4) Jenis kelamin Tidak terdapat hubungan yang signifikan antara jenis kelamin dan acne vulgaris.18 5) Kebersihan wajah. Meningkatkan perilaku kebersihan diri dapat mengurangi kejadian acne vulgaris pada remaja.18 6) Psikis Pada beberapa penderita, stres dan gangguan emosi dapat menyebabkan eksaserbasi acne. Kecemasan menyebabkan penderita memanipulasi acne secara mekanis, sehingga terjadi kerusakan pada dinding folikel dan timbul lesi radang yang baru.18 7) Hormon endokrin a) Androgen Pada pria konsentrasi testosteron dalam plasma penderita acne tidak berbeda dengan yang tidak menderita acne. Sedangkan pada wanita konsentrasi testosteron plasma sangat meningkat pada penderita acne.18 b) Estrogen Pada keadaan fisiologi, estrogen tidak berpengaruh terhadap produksi sebum. Estrogen dapat menurunkan kadar gonadotropin yang berasal dari kelenjar hipofisis. Hormon gonadotropin mempunyai efek menurunkan produksi sebum.18
16
c) Progesteron Progesteron, dalam jumlah fisiologis tidak mempunyai efek terhadap efektivitas kelenjar lemak. Produksi sebum tetap selama siklus menstruasi, namun kadang-kadang progesteron dapat menyebabkan acne premenstrual.18 7) Diet Pada penderita yang makan banyak karbohidrat dan zat lemak, tidak dapat dipastikan akan terjadi perubahan pada pengeluaran sebum atau komposisinya karena kelenjar lemak bukan alat pengeluaran lemak yang kita makan.18,19 8) Iklim Di daerah yang mempunyai empat musim, biasanya acne bertambah hebat pada musim dingin, sebaliknya kebanyakan membaik pada musim panas 4. Bertambah hebatnya acne pada musim panas tidak disebabkan oleh sinar UV melainkan oleh banyaknya keringat pada keadaan yang sangat lembab dan panas tersebut.18,19 9) Bakteria Mikroba yang terlibat pada terbentuknya akne adalah Corynebacterium acnes, Staphylococcus epidermidis, dan Pityrosporum ovale.18,19 10) Kosmetika Pemakaian bahan-bahan kosmetika tertentu seperti bedak dasar (foundation), pelembab (moisturizer), krim penahan sinar matahari (sunblock), dan krim malam secara terus menerus dalam waktu lama dapat menyebabkan suatu bentuk akne ringan yang terutama terdiri dari komedo tertutup dan beberapa lesi papulopustular pada pipi dan dagu.18,19
2.4 Patogenesis Acne vulgaris oleh Staphylococcus epidermidis Salah satu mikroba yang terlibat dalam patogenesis acne vulgaris adalah Staphylococcus epidermidis. Adanya seborrhea pada pubertas biasanya disertai dengan kenaikan jumlah Corynebacterium acne, tetapi tidak ada hubungan antara jumlah bakteri pada permukaan kulit atau dalam saluran pilosebasea dengan derajat terjadinya acne. Staphylococcus epidermidis bukanlah penyebab primer pada proses patologis akne.18
17
Beberapa lesi mungkin timbul tanpa ada mikroorganisme yang hidup, sedangkan pada lesi yang lain mikroorganisme mungkin memegang peranan penting. Bakteri mungkin berperan pada lamanya masing-masing lesi. Apakah bakteri yang berdiam dalam folikel mengadakan eksaserbasi tergantung pada lingkungan mikro dalam folikel tersebut.18 Menurut hipotesis Saint-Leger, skualen (senyawa kimia yang terdapat dalam minyak hati ikan) yang dihasilkan oleh kelenjar sebasea dioksidasi dalam kelenjar folikel dan hasil oksidasi ini dapat menyebabkan terjadinya komedo. Hal tersebut menyebabkan berkurangnya kadar oksigen di dalam folikel sehingga terjadi kolonisasi Staphylococcus epidermidis yang bersifat anaerob. Bakteri ini memproduksi endotoksin yang dilepaskan dalam folikel akan menjadi katalisator untuk terjadinya oksidasi skualen, sehingga oksigen dalam folikel semakin berkurang. Penurunan tekanan oksigen dan tingginya jumlah bakteri ini dapat menyebabkan peradangan folikel. Hipotesis ini dapat menerangkan mengapa acne hanya dapat terjadi pada beberapa folikel, sedangkan folikel yang lain tetap normal.18,19 Patogenesis tersebut menyebabkan perubahan patogenik pada kulit sehingga menimbulkan tanda dan gejala pada acne vulgaris, yaitu:18 1) Perubahan pola keratinisasi dalam folikel. Keratinisasi dalam folikel yang biasanya berlangsung longgar berubah menjadi padat sehingga sukar lepas dari saluran folikel tersebut.18 2) Produksi sebum yang meningkat yang menyebabkan peningkatan unsur komedogenik dan inflamatogenik penyebab terjadinya lesi akne.18 3) Terbentuknya fraksi asam lemak bebas penyebab terjadinya proses inflamasi folikel dalam sebum dan kekentalan sebum yang penting pada patogenesis penyakit.18 4) Peningkatan
jumlah
flora
folikel,
Propionibacterium
acnes
dan
Staphylococcus epidermidis yang berperan pada proses kemotaktik inflamasi serta pembentukan enzim lipolitik pengubah fraksi lipid sebum.18 5) Terjadinya respon hospes berupa pembentukan circulating antibodies yang memperberat akne.18
18
6) Peningkatan
kadar
hormon
androgen,
anabolik,
kortikosteroid,
gonadotropin serta ACTH yang mungkin menjadi faktor penting pada kegiatan kelenjar sebasea.18 7) Terjadinya stress psikis yang dapat memicu kegiatan kelenjar sebasea, baik secara langsung atau melalui rangsangan terhadap kelenjar hipofisis.18 8) Faktor lain; usia, ras, familial, makanan, cuaca/musim yang secara tidak langsung dapat memacu peningkatan proses pathogenesis tersebut.18
2.5 Patogenesis Staphylococcus epidermidis terhadap kandungan bawang putih Berdasarkan penelitian National Nutrient Database for Standard Reference bawang putih memiliki kandungan agen antimikroba yang paling banyak yakni senyawa alkaloid, allicin, dan tannin.20 A. Senyawa alkaloid berfungsi sebagai racun yang dapat menyebabkan lisis sel, sehingga pertumbuhan koloni bakteri Staphylococcus epidermididis terhambat.20 B. Alllicin
dapat
meningkatkan
permeabilitas
dinding bakteri
yang
menyebabkan gugus SH (sulfihidril dan disulfida) pada asam amino sistin dan sistein hancur6. Gugus SH yang hancur dapat menghambat sintesis enzim protease yang merusak membran sitoplasma pada dinding bakteri dan mengganggu metabolisme protein dan asam nukleat sehingga tidak terjadi proliferasi pada bakteri. Hal tersebut menyebabkan pertumbuhan koloni bakteri Staphylococcus epidermididis terhambat.20 C. Tanin berfungsi menghambat enzim proteolitik yang menyebabkan protein tidak dapat diuraikan menjadi asam amino, sehinggga dapat merusak membran sitoplasma pada dinding bakteri dan menghambat pertumbuhan koloni bakteri Staphylococcus epidermididis.20
2.6 Antibiotik Amoksisilin Peneliti memilih kontrol positif dari golongan antibiotik beta-laktam yaitu amoksisilin dengan dosis 25 ug. Secara keseluruhan mekanisme kerja antibiotik
19
golongan beta-laktam yaitu merusak dinding sel bakteri. Namun proses perusakan dinding sel bakteri terjadi dalam beberapa tahapan, pertama terjadi pelekatan pada protein mengikat penisilin yang spesifik sebagai reseptor obat pada bakteri, kedua terjadi penghambatan sintesis dinding sel dengan cara menghambat transpeptidasi dari peptidoglikan, dan pengaktifan enzim autolitik di dalam dinding sel yang menghasilkan kerusakan pada dinding sel sehingga menyebabkan kematian sel (lisis).21 Tabel Klasifikasi Zona Hambat berdasarkan CLSI guidelines 201122 Zona hambat agen antimikroba berdasarkan CLSI guidelines 2011 Antibiotik
Dosis
Perlakuan
Susceptible
(µg) Amoksisilin
Intermedietly
Resistant
susceptible
20/10
Enterobacteriaceae
≥ 18 mm
Haemophilus
≥ 20 mm
≤ 19 mm
≥ 20 mm
≤ 19 mm
14-17 mm
≤ 13 mm
influenzae
Staphylococcus aureus
Tabel Klasifikasi Zona Hambat Berdasarkan Greenwood23 Rata-rata Zona Hambat
Respon Hambatan Pertumbuhan
≤ 10 mm
Tidak ada
11-15 mm
Lemah
16-20 mm
Sedang
> 20 mm
Kuat Sumber : Pratama.2005
20
2.7 Uji Antibakteri Antibakteri adalah zat yang dapat mengganggu pertumbuhan atau bahkan mematikan bakteri dengan cara mengganggu metabolisme mikroorganisme yang merugikan. Dalam hal ini mikroorganisme digunakan sebagai penentu konsentrasi komponen tertentu untuk menentukan potensi mutagenik atau karsinogenik suatu komponen zat.24 Aktivitas zat antibakteri dibagi menjadi dua jenis yaitu bakteriostatik dan bakteriosida. Bakteriostatik adalah zat antibakteri yang memiliki aktivitas menghambat pertumbuhan bakteri namun tidak mematikan. Bakteriosida adalah zat antibakteri yang memiliki aktivitas membunuh bakteri. 24 Uji antibakteri adalah diperolehnya suatu sistem pengobatan yang efektif dan efisien. Terdapat bermacam-macam metode uji antibakteri, yaitu:24 1.
Metode Disc Diffusion (Tes Kirby & Bauer)
Metode ini untuk menentukan aktivitas agen antibakteri. Blank disc yang berisi agen antibakteri diletakkan pada media agar yang telah ditanami bakteri yang akan berdifusi pada media agar. Area jernih mengindikasikan adanya hambatan pertumbuhan bakteri oleh agen antibakteri pada permukaan media agar. 24 2. Metode E-Test Metode E-Test digunakan untuk menghitung MIC (Minimum Inhibitory Concentration) atau KHM (Konsentrasi Hambat Minimum) yaitu konsentrasi minimal suatu agen antibakteri untuk dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme. 24 Pada metode ini digunakan strip plastik yang mengandung agen antibakteri dari kadar terendah hingga tertinggi dan diletakkan pada permukaan media agar yang telah ditanami bakteri. Pengamatan dilakukan pada area jernih yang menunjukkan kadar agen antibakteri dapat menghambat pertumbuhan bakteri pada media agar. 24 3. Ditch Plate Technique Pada metode ini sampel uji berupa agen antibakteri yang diletakkan pada parit yang dibuat dengan cara memotong media agar dalam cawan petri pada bagian tengah secara membujur dan mikroba uji (maksimum 6 macam) digoreskan ke arah parit yang berisi agen antibakteri.24
21
4. Cup Plate Tehnique Metode ini serupa dengan metode Disc Diffusion, media agar yang telah ditanami dengan bakteri akan dibuat sumur yang kemudian akan diisi oleh senyawa antimikroba uji.24 5. Gradient Plate Tehnique Pada metode ini konsentrasi agen antibakteri pada media agar secara teoritis bervariasi dari nol hingga maksimal. Media agar dicairkan dan larutan uji ditambahkan. Campuran kemudian dituang ke dalam cawan petri dan diletakkan dalam posisi miring.24 Plate diinkubasi selama 24 jam untuk memungkinkan agen antibakteri berdifusi dan permukaan media mengering. Hasil diperhitungkan sebagai panjang total pertumbuhan bakteri maksimum yang mungkin dibandingkan dengan panjang pertumbuhan hasil goresan.24 6. Metode Dilusi Cair / Broth Dilution Test Metode ini mengukur MIC (Minimum Inhibitory Concentration) atau KHM (Konsentrasi
Hambat
Minimum)
dan
MBC
(Minimum
Bactericidal
Concentration) atau KBM (Kadar Bunuh Minimum). Cara yang dilakukan adalah dengan membuat seri pengenceran agen antibakteri pada medium cair yang ditambahkan dengan bakteri uji. Larutan uji agen antibakteri pada kadar terkecil yang terlihat jernih tanpa adanya pertumbuhan bakteri uji ditetapkan sebagai KHM. Larutan yang ditetapkan sebagai KHM tersebut selanjutnya dikultur ulang pada media cair tanpa penambahan bakteri uji ataupun agen antibakteri dan diinkubasi selama 18-24 jam. Media cair yang tetap terlihat jernih setelah inkubasi ditetapkan sebagai KBM.24 7. Metode Dilusi Padat / Solid Dilution Test Metode ini serupa dengan metode difusi cair namun menggunakan media padat (solid). Keuntungan metode ini adalah satu konsentrasi agen antibakteri yang diuji dapat digunakan untuk menguji beberapa bakteri uji 3.
22
2.9 Kerangka Teori
Acne Vulgaris
Bawang putih (Allium sativum)
Etiologi : Staphylococcus epidermidis
Agen Antimikroba
Tumbukan Bawang Putih
Senyawa alkaloid
Aktivasi enzim alliinase
Tanin
Racun
Hidrolisis alliin
Menghambat enzim proteolitik
Lisis sel bakteri
Terbentuk senyawa intermediate asam allyl sulfenate
Protein tdk dpt diuraikan menjadi asam amino
Kondesasi asam
Allicin
Pertumbuhan koloni Staphylococcus epidermidis terhambat
Tidak terjadi proliferasi pada bakteri
Bersifat bakteriostatik daripada bakterisidal
Permeabilitas
Metabolisme protein & asam nukleat terganggu Merusak membran sitoplasma pd dinding bakteri
Menghambat sintesis enzim
Menghancurkan gugus S-H (sulfihidril & disulfida) pada asam amino sistin & sistein
23
2.8 Kerangka Konsep
Bawang Putih (Allium sativum)
Tumbuk Bawang Putih (Allium sativum)
Perasan Bawang Putih
Acne vulgaris
Aktivasi Zat aktif Multifaktorial
Agen Antimikroba
Bakteriosidal
Etiologi : Staphylococcus epidermidis patogen Bakteriostatik
Pertumbuhan koloni Staphylococcus epidermidis terhambat
24
2.10 Definisi Operasional Variabel
Definisi Operasional
Skala
Kategori
Numerik
Numerik/Angka
Variabel Dependen Diameter zona hambat pada Zona Hambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis secara in vitro
Variabel Independen 60% Tumbukan (Bawang Putih + Aquades Steril)
Konsentrasi tumbukan bawang putih dengan proses tumbuk
Kategorik
40%
menggunakan pelarut aquades 20% 60%
Tumbukan (Bawang Putih + Etanol)
Konsentrasi tumbukan bawang putih dengan proses tumbuk
Kategorik
40%
menggunakan pelarut etanol 20% Pelarut etanol 96% digunakan
Kontrol Negatif
sebagai kontrol pertumbuhan Staphylococcus epidermidis
Kategorik
Etanol 96%
Kategorik
Aquades steril
secara in vitro Aquades steril digunakan sebagai kontrol pertumbuhan Staphylococcus epidermidis secara in vitro Antibiotik yang digunakan Kontrol Positif
sebagai kontrol pertumbuhan Staphylococcus epidermidis secara in vitro
Kategorik
Amoksisilin 25 µg
25
BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN
3.1 Desain Penelitian Penelitian ini menggunakan jenis penelitian uji eksperimental secara in vitro dengan post test control only design menggunakan teknik disc diffusion untuk melihat peranan tumbukan bawang putih dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis.
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian Penelitian ini dilakukan pada semester 6 bulan Juni - Juli 2014 di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah
Jakarta.
Lokasi
pembelian
dan determinasi
dilakukan di
Laboratorium IPB (Institut Pertanian Bogor).
3.3 Sampel Penelitian Penelitian ini menggunakan bakteri Staphylococcus epidermidis yang ditanamkan dalam media nutrient agar. Penelitian ini menggunakan uji in vitro maka jumlah kelompok sama dengan jumlah pengulangan sesuai rumus Federer. Pada penelitian ini, peneliti menggunakan jumlah kelompok sebanyak 4 kelompok. Tumbukan bawang putih dengan variasi konsentrasi 20%, 40%, 60% ini lebih besar dibandingkan penelitian sebelumnya 8 dengan menggunakan pelarut aquades steril atau pelarut etanol 96% serta kontrol positif menggunakan antibiotik amoksilin 25 ug maupun kontrol negatif menggunakan pelarut etanol 96%. Penentuan jumlah sampel menggunakan rumus federer : (k-1).(n-1) ≥ 15
Keterangan : k = Jumlah kelompok perlakuan n = Jumlah sampel dalam tiap kelompok
25
26
Sehingga hasil perhitungan sampel menurut rumus faderer sebagai berikut : (k-1).(n-1) ≥ 15 (4-1).(n.1) ≥ 15 3.(n.3) ≥ 15 3n-3
≥ 15
3n
≥ 18
n
≥ 18/3
n
≥6
Maka jumlah pengulangan yang dipakai pada penelitian ini berjumlah 6 pengulangan.
3.4 Identifikasi Variabel 3.4.1 Variabel Bebas Tumbukan bawang putih yang berasal dari bawang putih 100% disaring dan diencerkan dengan dua pelarut yaitu aquades steril ataupun etanol 96% dengan berbagai variasi konsentrasi (20%, 40%, 60%), kontrol positif menggunakan antibiotik amoksisilin 25 ug serta kontrol negatif menggunakan pelarut etanol 96%.
3.4.2 Variabel Terikat Zona hambat (zona bening) pada pertumbuhan bakteri S.epidermidis di media nutrien agar yang diukur diameternya menggunakan penggaris dengan satuan mm (millimeter).
3.5 Alat dan Bahan Penelitian 3.5.1 Alat Penelitian
Bunsen
Mikro pipet
Label
Alumunium foil
Autoclav
Baki
Laminar air flow
Ose
Kamera
Tabung reaksi
Alat tulis
Sarung tangan
Rak tabung
Timbangan
Masker
Blank disc
elektronik
Vorteks
27
Alat pendingin
Alkohol
Plastik steril
Tissue
Penggaris
Lumpang steril
Pinset
Inkubator
Kassa steril
Objek gelas
Pengukur waktu
Gelas beker
Rak object glass
Cawan petri
Korek api
Pisau
3.5.2 Bahan Penelitian Nutrien agar
Aquades Steril
Aseton alkohol
Bawang Putih
Etanol 96%
Safranin
Biakan
Gentian violet
bakteri
Lugol
Staphylococcus epidermidis
(counter
stain) Antibiotik amoksisilin 25 ug
3.6 Cara Kerja Penelitian 3.6.1 Sterilisasi alat Seluruh peralatan yang akan digunakan selama penelitian harus dibersihkan dengan cara dicuci kemudian dikeringkan lalu dibungkus dengan kertas. Kemudian dilakukan sterilisasi di dalam autoclave selama 30 menit dengan mengatur tekanan sebesar 1 atm pada suhu 121°C.
3.6.2 Pembuatan media agar Pada penelitian ini digunakan 10 gram bubuk nutrien agar dalam 500 mL aquades yang dipanaskan sampai mendidih selama ± 10 menit. Setelah itu dilakukan sterilisasi di dalam autoklaf pada suhu 121°C selama 30 menit.
Gambar 3.6.2 Pembuatan Media Agar
28
3.6.3 Pembuatan biakan bakteri Pembuatan biakan bakteri dilakukan untuk perbanyakan stok dengan cara menginokulasikan 1 ose biakan murni Staphylococcus epidermidis ke dalam agar nutrien, kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam di dalam inkubator.
3.6.3 Biakan Bakteri Staphylococcus epidermidis
3.6.4 Pewarnaan Gram Pada penelitian ini dilakukan pewarnaan gram yaitu suatu metode untuk membedakan spesies bakteri gram-positif atau gram-negatif. Langkah-langkah dalam pewarnaan gram yaitu : 1) Buat sediaan bakteri S.epidermidis yang telah dibiakan pada nutrien agar menggunakan ose pada objek gelas, diamkan hingga kering kemudian fiksasi objek gelas diatas api bunsen 2) Tuangkan larutan gentian violet di objek gelas dengan rata, biarkan selama 5 menit 3) Zat warna dibuang dan bubuhi dengan larutan lugol biarkan 3 menit 4) Lugol dibuang dan berikan alkohol 96% 5) Kemudian pulas dengan larutan safranin (counter stain) 30 detik 6) Cuci (siram) dengan aquades kemudian berikan larutan imersi untuk dilihat menggunakan mikroskop.
29
Gambar 3.6.4 Hasil Pewarnaan Gram Bakteri Staphylococcus epidermidis
3.6.5 Prosedur Tumbukan Bawang Putih 1) Kupas bawang putih sebanyak 1 kg hingga bersih, kemudian cuci menggunakan aquades 2) Masukan bawang putih tersebut ke dalam plastik steril 3) Kemudian letakan plastik berisi bawang putih diatas lumpang 4) Lalu tumbuk hingga halus 5) Ambil tumbukan di dalam plastik lalu bungkus dan saring menggunakan kassa steril diatas cawan petri 6) Pindahkan hasil tumbukan yang disaring menggunakan makro pipet ke dalam masing-masing cawan petri sesuai hasil hitung konsentrasi
3.6.6 Pembuatan Variabel Konsentrasi Uji antibakteri dengan tumbukan bawang putih yang disaring dan diencerkan menggunakan aquades steril dengan berbagai variasi konsentrasi disesuaikan dengan penelitian sebelumnya yaitu 20%, 40%, 60% dan kontrol positif menggunakan antibiotik amoksisilin 25 ug. Sedangkan kontrol negatif menggunakan pelarut etanol 96% ataupun aquades. Volume zat terlarut
Konsentrasi
=
X 100% Volume zat terlarut + volume pelarut
30
Volume Pelarut
=
Volume total larutan
-
Volume zat terlarut
Keterangan : n = volume zat terlarut Maka secara berturut-turut volume zat terlarut saat konsentrasi 20%, 40%, 60% adalah 1mL, 2mL, 3mL dan volume zat pelarut aquades ataupun etanol 96% saat 20%, 40%, 60% adalah 4mL, 3mL, 2mL.
3.6.7 Metode disc diffusion Bakteri diencerkan dengan mencampurkan 1 ose suspensi bakteri Staphylococcus epidermidis menggunakan pelarut NaCl. Kemudian dicampurkan menggunakan vorteks dan dibandingkan dengan larutan standar 0,5 mF. Suspensi bakteri S.epidermidis dioleskan menggunakan kapas lidi steril pada media pertumbuhan nutrien agar.Kemudian blank disk direndam selama 15-30 menit di dalam cawan petri yang berisi saringan bawang putih yang telah ditumbuk. Kemudian blank disk yang sudah terendam selama 20 menit maupun antibiotic disk amoksisilin 25 ug diletakkan di cawan petri yang sudah berisi biakan murni bakteri Staphylococcus epidermidis. Lalu diinkubasi didalam inkubator dengan suhu 37 o selama 24 jam. Kemudian disk akan berdifusi pada media nutrient agar tersebut. Area jernih mengindikasikan adanya hambatan pertumbuhan mikroorganisme di permukaan media nutrient agar. Kemudian diukur diameter zona hambat menggunakan penggaris.
3.7 Pengolahan dan Analisis Data Analisis data yang digunakan adalah uji statistik one way ANOVA. Uji statistik one way ANOVA digunakan untuk mengetahui adanya pengaruh pemberian tumbukan bawang putih yang diencerkan dengan pelarut terhadap pertumbuahan Staphylococcus epidermidis. Analisis data menggunakan program SPSS (Statistical Product of Service Solution) for Windows
31
3.8 Alur Penelitian Uji Determinasi
Pengambilan Sampel Bawang Putih
Tumbuk Bawang Putih
Encerkan dengan pelarut aquades steril atau etanol 96%
Variasi Konsentrasi
Kelompok A (Tumbukan bawang putih konsentrasi 20 % dgn pelarut etanol 96% atau Aquades steril)
Kelompok B (Tumbukan bawang putih konsentrasi 40 % dgn pelarut etanol 96% atau Aquades steril) 40 %
Kelompok C (Tumbukan bawang putih konsentrasi 60 % dgn pelarut etanol 96% atau Aquades steril) 40 %
Kelompok D Kontrol Positif (Amoksisilin 25 ug)
Kelompok E Kontrol Negatif (Etanol 96%)
Uji disk difusi
Kultur bakteri Staphylococcus epidermidis
Rerata tiap kelompok dengan mengukur masing-masing zona hambat
Uji statistik Nutrien Agar Kesimpulan
Kelompok F Kontrol Negatif (Aquades steril)
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil dan Pembahasan Berdasarkan penelitian telah didapatkan hasil uji efektivitas bawang putih sebagai berikut : Parameter
Hasil
Tumbukan Bawang Putih 60%
Mean
Median
SD
35,83
22,50
3,18852
27,50
27,50
2,73861
22,83
35,00
2,04124
11,33
25,00
9,32884
dengan pelarut aquades steril
Tumbukan Bawang Putih 40% dengan pelarut aquades steril
Tumbukan Bawang Putih 20% dengan pelarut aquades steril
Amoksisilin 25 ug
Zona Hambat (mm)
40 Tumbukan bawang putih dengan pelarut equades steril
35
30 25
Tumbukan bawang putih dengan pelarut etanol 96%
20 15 10
Amoksisilin 25 ug
5 0
Etanol 96%
Aquades Steril
Konsentrasi Tumbukan Bawang Putih
32
33
Berdasarkan penelitian, hasil uji aktivitas antibakteri oleh tumbukan bawang putih dengan pelarut aquades steril dan kontrol positif amoksisilin 25 ug menunjukkan adanya aktivitas antibakteri. Zona
hambat
tertinggi
dibandingkan
dengan
parameter
lainnya
ditunjukkan oleh tumbukan bawang putih konsentrasi 60% yang telah diencerkan dengan aquades steril sebesar 35,83 mm. Hal ini mengindikasikan bahwa lebih besarnya konsentrasi dan volume zat terlarut dibandingkan volume zat pelarut banyak mengandung agen antibakteri aktif. Gabungan antara agen antibakteri aktif yang bersifat polar pada bawang putih menyebabkan pada penelitian ini memiliki zona hambat yang paling besar. Namun yang memiliki daya hambat terkecil yaitu tumbukan bawang putih konsentrasi 20% yang telah diencerkan dengan aquades steril sebesar 22,83 mm. Zona hambat yang dihasilkan oleh kontrol positif amoksisilin 25 ug sebesar 11,33 mm. Sedangkan pada kontrol negatif didapatkan hasil pada pelarut etanol 96% ataupun aquades steril sebesar 0 mm. Dengan menghasilkan zona hambat pada kontrol negatif sebesar 0 mm, hal ini mengindikasikan bahwa tidak adanya pengaruh pelarut dalam zona hambat yang dihasilkan pada tumbukan bawang putih. Dari hasil penelitian ini terlihat bahwa tumbukan bawang putih dengan pelarut aquades steril menghasilkan zona hambat pada pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis. Pelarut aquades steril merupakan senyawa polar yang akan bercampur dengan senyawa polar pada tumbukan bawang putih dan senyawa-senyawa lainnya yang memiliki efek antibakteri sehingga terbentuk zona hambat. Hal ini diduga karena banyaknya dan tingginya efek antibakteri yang terdapat pada bawang putih. Beberapa kandungan tersebut, diantaranya senyawa alkaloid yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri atau dapat menyebabkan sel bakteri menjadi lisis bila terpapar oleh zat tersebut dan senyawa tannin yang akan mengganggu sel bakteri dalam penyerapan protein oleh cairan sel. Hal ini dapat terjadi karena tannin menghambat proteolitik yang berperan menguraikan protein menjadi asam amino.6
34
Gambar 4.1 Hasil Uji Aktivitas Bakteri Staphylococcus epidermidis dengan pelarut Aquades steril
Pada penelitian lain yang dilakukan oleh (Puspita, I. 2008) yang menggunakan variasi konsentrasi 10%, 20%, 30%, 40% dan 50% dari bawang putih jenis Allium sativum terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis didapatkan hasil pada konsentrasi 20% merupakan konsentrasi terendah ditemukan zona hambat dengan diameter 6 mm.4 Berdasarkan hasil penelitian ini, ditemukan zona hambat pada konsentrasi 20% dengan diameter lebih besar yaitu 10 mm. Pada penelitian lainnya (Hadi S. 2006) dilakukan pembandingan antara tumbukan bawang putih jenis Allium sativum dan Sin chung dengan variasi konsentrasi 10%, 25%, 50% dan 75% dalam menghambat pertumbuhan Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Propionibacterium acnes. Penelitian tersebut menunjukkan bahwa bawang putih jenis Allium sativum lebih kuat dalam menghambat pertumbuhan bakteri daripada bawang putih jenis kating dan zona hambat terkecil ada pada konsentrasi 25%. Kedua jenis bawang putih tersebut lebih efektif terhadap golongan Staphylococcus epidermidis. Maka pada penelitian ini, peneliti menggunakan bawang putih jenis Allium sativum dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis dengan konsentrasi terkecil yaitu 20% hingga konsentrasi terbesar yaitu 60%.
35
Berdasarkan
penelitian
The
American
Society
of
Microbiologi
Antimicrobial Agent and Chemoteraph paling banyak ditemukan komponen antimikroba aktif mayor bawang putih adalah thiosulfinate terutama allicin. Allicin menunjukkan aktivitas antimikroba dengan menghambat sistesis RNA dengan cepat dan menyeluruh. Disamping itu, sintesa DNA dan protein juga dihambat secara partial.14 Hal ini menunjukkan RNA adalah target utama dari aksi allicin. Perbedaan struktur bakteri juga berperan dalam kerentanan bakteri terhadap unsur bawang putih. Kandungan lipid pada masing-masing membran bakteri dapat mempengaruhi permeabilitas allicin dan unsur bawang putih yang lain. Banyak bakteri tidak resisten terhadap bawang putih karena cara kerja antibakterinya berbeda dengan antibiotik yang lain. Pembentukan resisten terhadap antibiotik β-laktam 1000 kali lebih mudah bila dibandingkan allicin dari bawang putih, sehingga menjadi pilihan utama dalam penggunaan terapeutik. 6,11,14 Tumbukan bawang putih menggunakan pelarut aquades steril dengan konsentrasi 60% didapatkan rata-rata zona hambat 35,83 mm dan konsentrasi 40% dengan rata-rata 27,50 mm serta konsentrasi 20% dengan rata-rata 22,83 mm bersifat susceptible yaitu sensitif terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis.
Gambar 4.1 Hasil Uji Aktivitas Bakteri Staphylococcus epidermidis dengan pelarut Etanol 96%
Tumbukan bawang putih menggunakan pelarut etanol 96% dengan konsentrasi 20%, 40% dan 60% maupun kontrol negatif dengan pelarut etanol 96% tidak menunjukkan adanya aktivitas antibakteri.
36
Hal ini dapat disebabkan oleh pelarut etanol 96% yang bersifat non polar, sehingga tidak dapat menarik zat aktif yang terkandung di dalam bawang putih. Oleh karena itu, pada penelitian ini tidak memiliki zona hambat. Pada
peneliti
digunakan antibiotik amoksisilin 25 ug terhadap
pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis. Bakteri Staphylococcus epidermidis merupakan family dari Staphylococcus aureus. Walaupun dosis peneliti (25 ug) yang digunakan tidak sama dengan CLSI guidelines 2011 namun dengan perbedaan dosis sekitar 25% maka dapat dianggap mendekati CLSI guidelines 2011. Kontrol positif dengan menggunakan amoksisilin 25 ug menghasilkan zona hambat pada pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis sebesar 11,33 mm, maka dapat dikategorikan respon hambatan pertumbuhan sesuai pada table Greenwood adalah lemah. Hal tersebut dapat disebabkan oleh berbagai faktor seperti kontaminasi bakteri maupun prosedural saat penelitian. Peneliti melakukan pengolahan data statistik menggunakan SPSS. Uji nomalitas dengan jumlah sampel 24 menghasilkan signifikansi 0,065 (p>0,05) yang mengindikasikan bahwa distribusi data normal. Sehingga uji hipotesis selanjutnya dengan cara One-way anova. Pada pengolahan data menggunakan one-way anova menghasilkan signifikansi 0,000 (p<0,05) yang mengindikasikan bahwa terdapat perbedaan efek pada pemberian tiap konsentrasi terhadap zona hambat. Sedangkan hasil dari Uji Post Hoc Tukey berarti setiap konsentrasi memiliki perbedaan yang signifikan dengan konsentrasi yang lain, yang ditunjukkan oleh angka signifikansi 0,000 (p< 0,05). Uji One-way annova menghasilkan signifikasi 0,000 (p<0,05) yang mengindikasikan bahwa terdapat perbedaan signifikan pada tiap konsentrasi terhadap zona hambat. Hasil uji Post Hoc menunjukkan bahwa kelompok tumbukan bawang putih dengan konsentrasi 60% memiliki peran dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis lebih baik daripada kelompok yang lain.
37
4.2 Keterbatasan Penelitian Pada uji penelitian ini terdapat keterbatasan antara lain : 1. Dosis disk amoksisilin 25 ug kurang sesuai dengan CLSI guidelines (20/10 ug). 2. Keterbatasan waktu untuk melakukan penelitian. 3. Kurangnya ketelitian melihat zona hambat saat konsentrasi 20%.
BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan 1.
Kelompok uji tumbukan bawang putih konsentrasi 20%, 40%, 60% dengan
pelarut
aquades
steril
berpengaruh
dalam
menghambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis. 2.
Hasil uji statistik dengan metode uji One-way annova menghasilkan signifikansi 0,065 (p>0,05), hal ini mengindikasikan bahwa terdapat perbedaan efek pada pemberian tiap konsentrasi menggunakan tumbukan bawang putih konsentrasi 20%, 40%, 60% dengan pelarut aquades steril, tumbukan bawang putih konsentrasi 20%, 40%, 60% dengan pelarut etanol 96%, kontrol negatif dengan aquades steril ataupun etanol 96%, dan konsentrasi positif dengan amoksisilin 25 (µg).
3.
Hasil uji Post Hoc Tukey menunjukkan bahwa kelompok tumbukan bawang putih konsentrasi 60% dengan pelarut aquades steril memiliki daya hambat yang lebih baik terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis secara in vitro dari pada kelompok tumbukan bawang putih yang lain.
5.2 Saran Untuk lebih mengetahui perbandingan daya hambat yang lebih baik dari tiap kelompok maka diperlukan penelitian selanjutnya menggunakan pelarut yang berbeda secara in vitro.
38
DAFTAR PUSTAKA
1. Jawetz, Melnick, Adelberg. Mikrobiologi Kedokteran. Edisi 23. Stafilokokus. Jakarta: Salemba Medika; 2005. 225-231 p.
2. World Health Organization. Guidelines on Standart Operating Procedures for Microbiology. New Delhi: WHO Health Organization; 2008.
3. Watanabe T. Penyembuhan dengan Terapi Bawang Putih. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama; 2001. 118 p.
4. Puspitasari I. Uji Aktivitas Antibakteri Perasan Bawang Putih (Allium sativum) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus epidermidis in vitro.2008.http://docs.google.com/eprints.undip.ac.id/2008/08/25/Indri.pdf[Di akses : 20 Juli 2014].
5. Wibowo S. Budidaya Bawang Putih, Bawang Merah dan Bawang Bombay. Jakarta: Penebar Swadaya; 2007. 28-33 p.
6. Magase H, Petesch B, Matsuura H. Intake of garlic and its bioactive components. New York: American Society of Nutrition; 2011.
7. Atmadja S. Manfaat Bawang Putih untuk Kesehatan. Edisi 10. Jakarta: Bumi Aksara; 2002. 26-31 p.
8. Ar-Rasyid A. Menghidupkan Sunnah-Sunnah yang Terlupakan. Jakarta: Pustaka Imam Asy-Syafi’i; 2010. 46 p.
9. Hadi S. Pengaruh Jenis Tanaman Obat Bawang Putih dan Bentuk Sediaan Serbuk Terhadap Daya Bunuh Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Propionibacterium acnes Secara In Vitro. Surabaya: Jurnal Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Surabaya; 2006.
39
40
10. Nurvitasari A. T. Pengaruh Filtrat Bawang Putih terhadap Jumlah Bakteri (Staphylococcus aureus). Malang: Jurnal Fakultas MIPA Universitas Brawijaya; 2009.
11. Tsao S, Yin M. C. In-vitro antimicrobial activity of four diallyl sulphides occuring naturally in garlic and Chinese leek oils. USA: Journal Medical Microbiology; 2011.
12. Cappucino, James G, Natalie Sherman. Microbiology a Laboratory Manual. 6th Edition. San Francisco: Addison-Wesley Company; 2004. 13. Tortora G. J. Microbiology An Introduction. 10th Edition. Cell Structure. USA: Benjamin Cummings; 2010. 14. Bergey S. Manual of Systematic Bacteriology. 2nd ed. USA: Department of Microbiology and Molecular Genetics Michigan State University; 2005. 15. Ray C. George R, Kenneth J. Medical Microbiology. 4th Edition. USA: McGraw-Hill; 2004. 16. Ingraham J. L, Catherine A. Introduction to Microbiology. 3rd Edition. A Case History Approach. USA: Thimson Brooks/Cole; 2004. 17. McKane L, Kandel. Microbiology: Essential and Application. 2nd Edition. New York: McGraw-Hill Book Company; 2004.
18. Djuanda A. Ilmu Penyakit Kulit Dan Kelamin. Edisi kelima. Akne, Erupsi Akneiformis, Rosasea, Rinofima. Sjarif Wasitaatmadja. Jakarta: Balai Penerbit FKUI; 2007. 255 p.
19. Putra D. N, Fauzi N. Kesehatan Kulit dan Kelamin. Edisi Kedua. Surabaya: Berkala Medika; 2006. 180-181 p.
41
20. Miron T, Wilchek M, Weiner L. The Mode of action of Allicin :its ready permeability through phospholipid membranes may Contribute to Its Biological Activity. New York: Biochim Biophys Acta; 2005.
21. Nafrialdi, Setawati A. Farmakologi dan Terapi. Edisi 5. Jakarta: Departemen Farmakologi dan Terapeutik FKUI; 2007. 585-592 p.
22. Clinical and Laboratory Standart Institute. Performance Standart for Antimicrobial Susceptibility Testing. USA: Guidelines CLSI; 2011.
23. Greenwood. Antibiotics Susceptibility (Sensitivity) Test Antimicrobial and Chemotherapy. USA: McGraw-Hill; 1995.
24. Turnidge J. D. Susceptibility Test Methods: Dilution and Diffusion Methods. 18th
Edition. Washington DC: American Society for
Mirobiology Press; 2008. 1108-1117 p. [Diakses 1 Mei 2014].
LAMPIRAN
LAMPIRAN 1 Hasil Identifikasi/Determinasi Bahan Uji
42
43
LAMPIRAN 2 Tabel 4.1 Perbandingan rata-rata dari berbagai parameter perlakuan tumbukan bawang putih sesuai konsentrasi (I) Uji_konsentrasi
konsentrasi 20%
konsentrasi 40%
konsentrasi 60%
kontrol positif amoxicilin
(J) Uji_konsentrasi
konsentrasi 40% konsentrasi 60% kontrol positif amoxicilin konsentrasi 20% konsentrasi 60% kontrol positif amoxicilin konsentrasi 20% konsentrasi 40% kontrol positif amoxicilin konsentrasi 20% konsentrasi 40% konsentrasi 60%
Mean Difference (I-J) -4.66667* -13.00000*
Std. Error
Sig.
1.41716 1.41716
.004 .000
11.50000*
1.41716
.000
4.66667* -8.33333*
1.41716 1.41716
.004 .000
16.16667*
1.41716
.000
13.00000* 8.33333*
1.41716 1.41716
.000 .000
24.50000*
1.41716
.000
-11.50000* -16.16667* -24.50000*
1.41716 1.41716 1.41716
.000 .000 .000
44
LAMPIRAN 3 Gambar 3.6.5 Prosedur Tumbukan Bawang Putih
45
46
Masukkan ke dalam incubator selama 1x24 jam
47
LAMPIRAN 4
Gambar 4.1 Hasil Uji Efektivitas Bawang Putih (Allium sativum) dengan pelarut aquades steril Terhadap Staphylococcus epidermidis
Gambar 4.1 Hasil Uji Efektivitas Bawang Putih (Allium sativum) dengan pelarut etanol 96% Terhadap Staphylococcus epidermidis
LAMPIRAN 5 RIWAYAT PENULIS
Identitas Nama
: Shevrina Faradiba
Jenis Kelamin
: Perempuan
Tempat, Tanggal Lahir
: Jakarta, 08 Oktober 1992
Agama
: Islam
Alamat
: Perum Harapan Indah. Nusa Indah X Blok MJ 23. RT 004/018 Bekasi Barat
E-mail
:
[email protected]
Riwayat Pendidikan
1997-1998
: TK Alodia Bekasi
1998-2004
: SDN 04 Jakarta Timur
2004-2007
: SMP Negeri 193 Jakarta Timur
2007-2010
: SMA Negeri 10 Bekasi
2010-2011
: D1 Bahasa Inggris LBPP LIA
2011-sekarang
: UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
48
