perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK KLOROFORM DAUN TOMAT( Solanum lycopersicum L. ), DAUN CABAI MERAH (Capsicum annum L.) DAN DAUN CIPLUKAN (Physalis angulata L.) DENGAN METODE DPPH
TUGAS AKHIR Diajukan untuk memenuhi salah satu persyaratan Memperoleh gelar Ahli Madya D3 Farmasi
Oleh: SARI ASTUTI NIM. M3511050
PROGRAM STUDI DIPLOMA 3 FARMASI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET SURAKARTA commit to user 2016
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
commit to user
ii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
commit to user
iii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK KLOROFORM DAUN TOMAT (Solanum lycopersicum L. ), DAUN CABAI MERAH (Capsicum annum L.) DAN DAUN CIPLUKAN (Physalis angulata L.) DENGAN METODE DPPH Sari Astuti Program Studi Diploma 3, Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret
INTISARI Antioksidan merupakan senyawa yang mampu menghambat proses oksidasi, memberikan elektron, mengikat dan mengakhiri reaksi berantai radikal bebas. Tomat (Solanum lycopersicum L.), cabai merah (Capsicum annum L.) dan ciplukan (Physalis angulata L.) berpotensi memiliki aktivitas antioksidan. Namun, penelitian aktivitas antioksidan pada bagian daun tanaman tersebut belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan ekstrak kloroform daun tomat (Solanum lycopersicum L. ), daun cabai merah (Capsicum annum L.) dan daun ciplukan (Physalis angulata L.) dengan melihat nilai IC50. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental. Daun tomat (Solanum lycopersicum L.), daun cabai merah (Capsicum annum L.) dan daun ciplukan (Physalis angulata L.) diekstraksi secara perkolasi dengan pelarut kloroform. Pengujian aktivitas antioksidan digunakan metode DPPH (1,1-difenil-2 pikrilhidrazil). Identifikasi kandungan fitokimia dengan KLT (Kromatografi Lapis Tipis) dan uji aktivitas antioksidan dengan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 514,5 nm dengan pembanding vitamin C. Hasil pengujian ekstrak daun tomat dan daun ciplukan mengandung senyawa saponin dan flavonoid. Sedangkan daun cabai merah hanya mengandung flavonoid. Nilai IC50 daun tomat sebesar 88,94 ppm ± 0,22 ; daun cabai merah sebesar 76,57 ppm ± 0,13 ; dan daun ciplukan sebesar 82,07 ppm ± 0,19. Aktivitas antioksidan pada ekstrak kloroform daun tomat, daun cabai merah, dan daun ciplukan termasuk antioksidan kuat (50-100 ppm).
Kata kunci :Daun Tomat, Daun Cabai Merah, Daun Ciplukan, Antioksidan, DPPH
commit to user
iv
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
ANTIOXIDANT ACTIVITY OF CHLOROFORM EXTRACT OF TOMATO’S LEAVES (Solanum lycopersicumL. ), RED-CHILI’S LEAVES (Capsicum annum L.), AND CIPLUKAN’S LEAVES (Physalis angulata L.) BY DPPH METHOD Sari Astuti Diploma 3 of Pharmacy, Faculty of Mathematic and Sciences Sebelas Maret University
ABSTRACT Antoxidant is a compound that can inhibit oxidation process, give electron, binding and terminated chain reactions of free radicals. Tomato (Solanum lycopersicum L.), red-chili (Capsicum annum L.), and ciplukan (Physalis angulata L.) are potential as antioxidant activity. But, the antioxidant activity in that leaves arestill unknown. The aim of this study is to determinate the antioxidant activity of chloroform extract of tomato’s leaves (Solanum lycopersicum L.), red-chili’s leaves (Capsicum annum L.), and ciplukan’s leaves (Physalis angulata L.) by measured IC50 value. Extraction process using percolation method with chloroform as solvent. Antioxidant activity test using DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhidrazyl) method. Identification of phytochemical contents by Thin Layer Chromatography (TLC). The quantitative antioxidant activity test using Ultraviolet visible spectrofotometric at maximum wavelenght of 514,5 nm with vitamin C injection as comparator. The result showed that chloroform extract of tomato’s leaves (Solanum lycopersicum L.) and ciplukan,s leaves (Physalis angulata L.) are contained of saponin and flavonoid. Chloroform extract of red-chili leaves (Capsicum annum L.) only contained of flavonoid. IC50 value of tomato’s leaves, red-chili’s leaves, and cipukan’s leaves are 88,94 ppm ± 0,22 ; 76,57 ppm ± 0,13 ; 82,07 ppm ± 0,19 respectively. Antioxidant activity of their leaves included strength category of antioxidant. Keyword :Tomato’s Leaves, Red-chili’s Leaves, Ciplukan’s Leaves, Antioxidant, DPPH
commit to user
v
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
MOTTO
Tanpa terus-menerus tumbuh dan berkembang, kata-kata seperti kemajuan, prestasi, dan sukses tak punya arti apa-apa (Benjamin Franklin)
Waktu itu gratis, tapi sangat berharga.Kamu tidak akan dapat memiliki, tapi dapat memanfaatkannya. Kamu tidak dapat menyimpan, tapi dapat menghabiskannya. Sekali kehilangan, kamu tidakakan bias mendapatkannya kembali (Harvey MacKay)
Kepuasan itu terletak pada usaha, bukan pada pencapaian hasil. Berusaha kerasa dalah kemenangan besar (Mahatma Gandhi)
commit to user
vi
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
PERSEMBAHAN
Tugas akhir ini aku persembahkan untuk….. Bapak dan Ibu yang selalu memberikan doa, semangat dan kasih sayang Kakakku tersayang yang selalu memberi semangat dan motivasi Ibu Anif Nur Artanti, M.Sc.,Apt yang telah memberikan, ilmu, bimbingan, motvasi, dan pengalaman Teman-teman terbaikku
commit to user
vii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
KATA PENGANTAR Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah melimpahkan rahmat dan karunia-Nya sehingga saya dapat menyelesaikan Tugas Akhir berjudul “Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kloroform Daun Tomat (Solanum lycopersicum L.), Daun Cabai Merah (Capsicum annum L.) dan Daun Ciplukan (Physalis angulata L.) Dengan Metode DPPH (1,1-difenil-2pikrilhidrazil)” dengan baik dan lancar. Tugas Akhir ini disusun guna melengkapi salah satu persyaratan untuk dapat memperoleh gelar Ahli Madya Farmasi di Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Dalam penulisan Tugas Akhir ini penulis telah berusaha semaksimal mungkin untuk memberikan hasil yang terbaik. Pelaksanaann Tugas Akhir ini tidak mungkin dapat terselesaikan jika tanpa adanya bimbingan, dorongan, semangat, harapan, dan motivasi serta bantuan baik doa, moril, maupun materil dari berbagai pihak. Penulis pada kesempatan ini mengucapkan terimakasih kepada : 1. Prof. Ir. Ari Handono Ramelan, M.Sc. (Hons), Ph.D, selaku Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta. 2. Ibu Estu Retnaningtyas N., S.TP.,M.Si, selaku Kepala Program Studi D3 Farmasi Universitas Sebelas Maret Surakarta. 3. Ibu Anif Nur Artanti, M.Sc., Apt, selaku pembimbing Tugas Akhir atas segala kesabaran dan keikhlasannya dalam memberikan arahan, bimbingan, dan saran. 4. Ibu Vinci Mizranita, S.Farm.,M.Pharm.,Apt selaku pembimbing akademik.
commit to user
viii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
5. Bapakku Sri Hartono dan Ibuku Surasi yang telah memberikan doa serta dukungan. 6. Kakakku Bangun Arizona yang selalu memberikan dukungan dan semangat. 7. Teman-teman sepenelitianku Renita, Dias, Maryani, serta teman-teman D3 Farmasi 2013 khususnya Desi, Niky, Mey, Azizah yang telah berbagi suka dan duka serta pengalaman selama kuliah dan penelitian Tugas Akhir. 8. Sahabat-sahabat dari SMA Atika, Ukhfiya, Nurul, serta teman-teman kos Kusuma yang selalu mendukung dan memberi semangat. 9. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu, yang telah membantu pelaksanaan dan penyusunan Tugas Akhir. Penulis menyadari masih banyak kekurangan dalam penulisan Tugas Akhir ini. Untuk itu penulis mengharapkan adanya kritik dan saran yang membangun dari semua pihak untuk perbaikan sehingga akan menjadi bahan pertimbangan dan masukan untuk penyusunan tugas-tugas selanjutnya. Penulis berharap semoga Tugas Akhir ini dapat bermanfaat bagi pembaca pada umumnya dan dapat menjadi bekal bagi penulis dalam pengabdian Ahli Madya Farmasi di masyarakat pada khususnya.
Surakarta,
Juli 2016
Penulis
commit to user
ix
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR ISI Halaman COVER.………………………………………………………………………….. i HALAMAN PENGESAHAN..………………………………………………….. ii HALAMAN PERNYATAAN.…………………………………………………... iii INTISARI.............................................................................................................. iv ABSTRACT…………………………………………………………………….. v MOTTO………………………………………………………………………….. vi PERSEMBAHAN…..………………………………………………………….. vii KATA PENGANTAR………………………………………………………….. viii DAFTAR ISI….……………………………………………………………….. .
x
DAFTAR TABEL.……………………………………………………………... xiii DAFTAR GAMBAR.………………………………………………………….. xiv DAFTAR LAMPIRAN………………………………………………………… xv DAFTAR SINGKATAN.……………………………………………………… xvi BAB I. PENDAHULUAN...................................................................................
1
A. LATAR BELAKANG MASALAH.......................................................
1
B. RUMUSAN MASALAH.......................................................................... 4 C. TUJUAN PENELITIAN .........................................................................
4
D. MANFAAT PENELITIAN....................................................................
4
BAB II. LANDASAN TEORI............................................................................
5
A. TINJAUAN PUSTAKA......................................................................... 5 1. Tanaman Tomat (Solanum lycopersicum L.)................................... 5 2. Tanaman Cabai Merah (Capsicum annum L.)…............................. 6 3. Tanaman Ciplukan (Physalis angulata L.)...................................... 7 4. Ekstraksi dan Ekstrak……………………………………………... 8 5. Kromatografi……………………………………………………... 10 6. Radikal Bebas……………………………………………………. 12 7. Antioksidan………………………………………………………. 14 8. Metode Pengujian Antioksidan…………………………………... 16 commit to user
x
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
8.1. Metode Perendaman Radikal DPPH…………………………. 16 8.2. Metode Reducing Power…………………………………….. 17 8.3. Metode FRAP……………………………………………….. 18 8.4. Metode Tiosianat…………………………………………….. 18 8.5. Aktivitas Penghambatan Radikal Superoksida…..…………. 19 9. Spektrofotometri UV-VIS……………………………………...
19
B. KERANGKA PEMIKIRAN………………………………………..
21
C. HIPOTESIS………………………………………………………....
22
BAB III. METODOLOGI PENELITIAN…………………………………….
23
A. JENIS PENELITIAN……………………………………………….. . 23 B. WAKTU DAN TEMPAT PENELITIAN…………………………….. 24 C. ALAT DAN BAHAN……………………………………………......... 24 D. PROSEDUR PENELITIAN…………………………………………. 25 1. Determinasi Tanaman……………………………………… ….. 25 2. Pengumpulan dan Pengolahan Sampel………………………… 25 3. Pembuatan Serbuk Simplisia…………………………………… 25 4. Ekstraksi………………………………………………………... 25 5. Kontrol Kualitas Ekstrak……………………………………….. 26 6. Skrining Fitokimia dengan KLT………………………………... 26 6.1. Uji Flavonoid………………………………………........ 26 6.2. Uji Tanin……………………………………………....... 27 6.3. Uji Saponin…………………………………………....... 28 6.4. Uji Polifenol……………………………………………. 28 7. Uji Aktivitas Antioksidan……………………………………… 29 7.1. Pembuatan Larutan DPPH 0,004%……………………... 29 7.2. Penentuan
Panjang
Gelombang
Maksimum
Pengukuran……………………………………………... 29 7.3. Penyiapan Larutan Kontrol Positif (Vit. C)……………. 30 7.4. Penyiapan Larutan Sampel……………………………... 30 7.5. Pengukuran Absorbansi Ekstrak dan Vitamin C…...........31 commitAntioksidan…………………………. to user 7.6. Analisa Aktivitas 31
xi
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
7.7. Analisa Data dengan SPSS………………………….........32 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN………………………………..............33 A. DETERMINASI TANAMAN………………………………………...33 B. PEMBUATAN EKSTRAK…………………………………………...33 C. SKRINING FITOKIMIA……………………………………………..36 D. UJI
KUANTITATIF
ANTIOKSIDAN
DENGAN
METODE
DPPH….................................................................................................39 1. Penentuan Panjang Gelombang Maksimal………………..............40 2. Analisa Kuantitatif Sampel dan Vitamin C……………….............40 BAB V. PENUTUP………………………………………………………............47 A. KESIMPULAN………………………………………………….........47 B. SARAN………………………………………………………………..47 DAFTAR PUSTAKA……………………………………………………............48 LAMPIRAN……………………………………………………………………...52
commit to user
xii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR TABEL Halaman Tabel I. Data Hasil Uji Organoleptis…………………………………………… 36 Tabel II. Data Hasil Skrining Fitokimia Estrak Daun Tomat, Ekstrak Daun Cabai Merah, dan Ekstrak Daun Cipukan……………………………………. 39 Tabel III.Data Absorbansi Sampel Ekstrak dan Vitamin C……………………. 41 Tabel IV.Data (%) Aktivitas Antioksidan Sampel……………………………… 42 Tabel V. Data Nilai IC50 Sampel dan Vitamin C………………………………. 45
commit to user
xiii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1. Tanaman Tomat…………………………………………………….. 5 Gambar 2. Tanaman Cabai Merah……………………………………………… 6 Gambar 3. Tanaman Ciplukan…………………………………………………... 7 Gambar 4. Struktur DPPH………………………………………………………. 16 Gambar 5. Reaksi Reduksi DPPH………………………………………………. 17 Gambar 7. Hasil KLT………………………………………………………….. 37 7.A. Hasil KLT Ekstrak Daun Tomat………………………………… 37 7.B. Hasil KLT Ekstrak Daun Cabai Merah…………………………. 37 7.C. Hasil KLT Ekstrak Daun Ciplukan……………………………… 38 Gambar 8. Grafik Regresi Linear Ekstrak Daun Tomat……………………….. 43 Gambar 9. Grafik Regresi Linear Ekstrak Daun Cabai Merah………………... 43 Gambar 10.Grafik Regresi Linear Ekstrak Daun Ciplukan…………………… 43 Gambar 11.Grafik Regresi Linear Vitamin C………………………………...
commit to user
xiv
44
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran I. Hasil Determinasi Daun Tomat……………………………………. 53 Lampiran II. Hasil Determinasi Daun Cabai Merah……………………………. 54 Lampiran III. Hasil Determinasi Daun Ciplukan……………………………….. 55 Lampiran IV. Hasil Ekstraksi Sampel………………………………………….. 56 Lampiran V. Penentuan Panjang Gelombang Maksimal……………………….. 57 Lampiran VI. Diagram Alir Cara Kerja Pembuatan Ekstrak…………………… 58 Lampiran VII. Cara Kerja Skrining Fitokimia dengan KLT……………………. 59 Lampiran VIII. Cara Kerja Uji Aktivitas Antioksidan………………………….. 59 Lampiran IX. Perhitungan Rf hasil KLT……………………………………….. 61 Lampiran X. Data Absorbansi, Perhitungan % Aktivitas Antioksidan dan IC50 dengan menggunakan regresi linear..…………………………….. 62 Lampiran XI. Hasil Perhitungan dengan SPSS Probit…………………………. 66 Lampiran XII. Proses Penelitian……………………………………………….. 90
commit to user
xv
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR SINGKATAN DPPH = 1,1-diphenyl-2-picrylhidrazil KLT
= Kromatografi Lapis Tipis
IC50
= Inhibitory Concenteration
BHT
= Butylated hydroxyltoluen
BHA = Butylated hydroxylanisole TBHQ = Tersierbutylhydroquinone FRAP = Ferric Reducing Ability of Plasma AAPH = 2,2’-Azobis(2-aminidopropana) hidroksiklorida nm
= nanometer
p.a.
= pro analisis
PPM = parts per million UV
= Ultraviolet
Vis
= Visible
SPSS = Statistical Product and Service Solution
commit to user
xvi
