UJI AKTIVITAS ANTIFUNGI EKSTRAK DAUN KATEMAS (Euphorbia heterophylla L.) TERHADAP Colletotrichum capsici TCKr2, Alternaria porri KP10, DAN Fusarium oxysporum BNT2
Skripsi Untuk memenuhi sebagian persyaratan mencapai derajat Sarjana Kimia
Oleh: Fina Ida Matus Silmi 11630010
PROGRAM STUDI KIMIA FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SUNAN KALIJAGA YOGYAKARTA 2015
HALAMAN PERSETUJUAN SKRIPSI
ii
NOTA DINAS KOSULTAN
iii
HALAMAN PERNYATAAN KEASLIAN SKRIPSI
v
HALAMAN PENGESAHAN SKRIPSI
vi
MOTTO Jika kita berupaya sekuat tenaga menemukan sesuatu, dan pada titik akhir upaya itu hasilnya masih nihil, maka sebenarnya kita telah menemukan yang kita cari dalam diri kita sendiri, yakni kenyataan, kenyataan yang harus dihadapi sepahit apapun keadaanya (Andrea Hirata)
Hidup ini memang sekali, tapi bukan berarti jika kita mendapatkan kegagalan dalam menjalani hidup hanya putus asa yang dirasa. Percayalah jika Tuhan masih memberimu waktu, artinya ada kesempatan untuk bangkit dan merubah diri jadi lebih baik (Fina Ida Matus Silmi)
“Sebaik-baik manusia adalah mereka yang membaca dan mengamalkan al-qur’an” (Hadist R. Muslim)
vii
HALAMAN PERSEMBAHAN
Sebagai rasa syukurku kepada Allah SWT, Kupersembahkan karya ini teruntuk: Mamah dan Bapakku Uswatun Khasanah dan Abdul Azis Sebagai rasa hormat dan cintaku kepadanya Adik-adikku Almh. Azmi dan Labib
serta Almamaterku tercinta Progam Studi Kimia UIN Sunan Kalijaga Yogyakarta
viii
KATA PENGANTAR
Segala puji bagi Allah SWT sang penguasa alam semesta dan kehidupan yang telah
memberikan
ridho
dan
rahmatNya
sehingga
peulis
dapat
menyelesaikan skripsi ini. Sholawat serta salam senantiasa tercurahkan kepada junjungan baginda Nabi Muhammad SAW, yang telah memberikan jalan bagi umatnya dengan secercah kemuliaan dan kasih sayang serta ilmu pengetahuan yang tiada ternilai untuk menjalani kehidupan yang penuh berkah. Tanpa mengurangi rasa hormat, penulis menyampaikan terimakasih tiada terhingga kepada pihak-pihak yang telah berperan demi terwujudnya penulisan skripsi ini. khususnya kepada: 1. Dr. Hj. Maizer Said Nahdi, M. Si. selaku Dekan Fakultas Sains dan Teknologi UIN Sunan Kalijaga Yogyakarta. 2. Ibu Susi Yunita Prabawati, M.Si. selaku Ketua Program Studi Kimia Fakultas Sains dan Teknologi UIN Sunan Kalijaga Yogyakarta. 3. Ibu Esti W.Widowati, M. Si., M. Biotech dan Ibu Lela Susilawati, S.Pd., M.Si selaku Dosen Pembimbing yang telah dengan tekun dan sabar meluangkan waktunya dalam membimbing, mengarahkan dan memotivasi hingga skripsi ini tersusun. 4. Bapak Didik Krisdiyanto, M.Sc., selaku Dosen Pembimbing Akademik yang telah sabar memberikan penulis arahan juga motivasi. 5. Dosen-dosen dan Laboran Program Studi Kimia Fakultas Sains dan Teknologi UIN Sunan Kalijaga Yogyakarta yang sudi membagi ilmunya.
ix
x
6. Mamah dan Bapak yang selalu setia mendoakan dan memberikan semangat motivasi yang sangat tak terhingga serta tak henti membawa canda tawa dalam hidup penulis. 7. Adek-adekku dan keluarga besar dari Mamah dan Bapak yang selalu memberikan perhatiannya serta tak henti-hentinya memberikan dukungan. 8. Teman-teman satu Tim (Xarisa, Bagus, Ida, Ayu, Luluk, Mba Ratu, Mba Desi, Mba Putri, Mba Ismi, Mas Didi, dan Mas Tarno) terima kasih buat waktu belajar barengnya. 9. Keluarga Kos Aswaja Khususnya Win, Wiwit, Mba Yul, Mba Irma, Sri, Ira, Atin, dan Inov terima kasih sudah mau menjadi bagian dari keluarga selama di Jogja. 10. Keluarga Besar Kimia 2011, terima kasih telah memberikan kehangatan disetiap waktu. Khususnya, Ida, Dewi, Dian dan Alfi yang telah memberikan banyak memori mengesankan. 11. Keluarga KKN 83GK103 Cekel Mba Dhita, Mba Oliv, Teteh Milda, Neng Hilda, Bangkit, Nopri dan Sultan, terimakasih untuk kebersamaannya, selalu ada tawa saat bersama kalian. 12. Serta semua pihak yang tidak dapat penyusun sebutkan satu-persatu. Yogayakarta, 02 Desember 2015 Penulis
DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL................................................................................................ i HALAMAN PERSETUJUAN SKRIPSI ................................................................ ii NOTA DINAS KOSULTAN ................................................................................. iii HALAMAN PERNYATAAN KEASLIAN SKRIPSI ........................................... v HALAMAN PENGESAHAN SKRIPSI ................................................................ vi MOTTO ................................................................................................................ vii HALAMAN PERSEMBAHAN .......................................................................... viii KATA PENGANTAR ........................................................................................... ix DAFTAR ISI .......................................................................................................... xi DAFTAR TABEL ................................................................................................ xiii DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xv ABSTRAK ........................................................................................................... xvi BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1 A. Latar Belakang Masalah ............................................................................... 1 B. Rumusan Masalah ........................................................................................ 4 C. Tujuan Penelitian ......................................................................................... 4 D. Manfaat Penelitian ....................................................................................... 5 BAB II TINJAUAN PUSTAKA DAN LANDASAN TEORI ............................... 6 A. Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 6 B. Landasan Teori ............................................................................................. 7 1.
Katemas .................................................................................................... 7
2.
Uji Aktivitas Antifungi ............................................................................. 8
3.
Fungi ....................................................................................................... 10
4.
Metabolit Sekunder ................................................................................ 14
5.
Ekstraksi ................................................................................................. 17
6.
Kromatografi Lapis Tipis ....................................................................... 18
7.
Kromatografi Kolom Vakum ................................................................. 19
xi
xii
8.
Skrining Fitokimia .................................................................................. 20
9.
Gas Chromatography- Mass Spectrometry (GC-MS) ............................ 21
BAB III METODE PENELITIAN....................................................................... 22 A. Waktu dan Tempat Penelitian .................................................................... 22 B. Alat-alat Penelitian ..................................................................................... 22 C. Bahan Penelitian......................................................................................... 22 D. Cara Kerja Penelitian ................................................................................. 23 1.
Determinasi Tumbuhan .......................................................................... 23
2.
Pembuatan Simplisia .............................................................................. 23
3.
Pembuatan Crude Extract Daun Katemas .............................................. 23
4.
Uji Aktivitas Antifungi Crude Extract Daun Katemas .......................... 24
5.
Fraksinasi ................................................................................................ 26
6.
Uji Aktivitas Antifungi Fraksi-fraksi Hasil Pemisahan Crude extract .. 27
7.
Skrining Fitokimia .................................................................................. 28
8.
Identifikasi Senyawa .............................................................................. 29
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 30 A. Pembuatan Simplisia .................................................................................. 30 B. Pembuatan Crude Extract Daun Katemas.................................................. 31 C. Uji Aktivitas Antifungi Crude Extract Daun Katemas .............................. 32 D. Pemisahan Crude Extract Etil Asetat Daun Katemas ................................ 36 E. Uji aktivitas Antifungi Fraksi-Fraksi Hasil Pemisahan Crude Extract Daun Katemas ...................................................................................................... 40 F.
Skrining Fitokimia ..................................................................................... 42
G. Identifikasi Senyawa .................................................................................. 43 BAB V PENUTUP ................................................................................................ 49 A. Kesimpulan ................................................................................................ 49 B. Saran ........................................................................................................... 49 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 50 LAMPIRAN .......................................................................................................... 55
DAFTAR TABEL Halaman Tabel 3.1 Fase gerak yang digunakan pada pemisahan crude extract etil asetat daun Katemas secara Kromatografi Kolom Vakum ............................. 27 Tabel 4.1 Randemen crude extract daun Katemas dengan pelarut n-heksana, etil asetat, dan etanol................................................................................... 31 Tabel 4.3 KHM crude extract etil asetat daun Katemas terhadap fungi C. capsici dan F. oxysporum ................................................................................. 35 Tabel 4.4. Hasil KLT crude extract etil asetat daun Katemas menggunakan plat silika gel F254 dengan berbagai sistem pelarut. ..................................... 38 Tabel 4.5 Pengelompokkan fraksi menjadi fraksi yang sederhana berdasarkan profil KLT dengan eluen n-heksana:etil asetat (3:2). ........................... 39 Tabel 4.6 Diameter zona hambat fraksi-fraksi hasil pemisahan crude extract etil asetat daun Katemas terhadap Colletotricum capsici, dan Fusarium oxysporum pada konsentrasi 400 dan 160 mg mL-1. ............................ 41 Tabel 4.7 Hasil skrining fitokimia dari F9 hasil pemisahan crude extract etil asetat daun Katemas dengan reagen semprot FeCl31% (Fenolik), Anisaldehid asam sulfat (Terpenoid), dan Dragendorff (Alkaloid) .......................... 42 Tabel 4.8 Hasil analisis spektra massa dari F9 hasil pemisahan crude extract daun Katemas. ............................................................................................... 45
xiii
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1 Tumbuhan Katemas............................................................................ 8 Gambar 2.2 Aservulus fungi Colletotrichum sp ................................................. 12 Gambar 2.3 Konidia fungi Alternaria porri ........................................................ 13 Gambar 2.4 Mikroskopis konidia isolat Fusarium sp ......................................... 13 Gambar 2.5 Contoh senyawa Fenol ..................................................................... 15 Gambar 2.6 Contoh senyawa Terpenoid .............................................................. 16 Gambar 2.7 Contoh senyawa Alkaloid ................................................................ 16 Gambar 4.1 Aktivitas antifungi crude extract etil asetat daun Katemas terhadap fungi C. capsici dan F. oxysporum ............................................... 34 Gambar 4.2 Aktivitas antifungi F9 hasil pemisahan crude extract etil asetat daun Katemas ......................................................................................... 41 Gambar 4.3 Kromatogram GC F9 hasil pemishan crude extract etil asetat daun Katemas ......................................................................................... 43 Gambar 4.4 Perkiraan senyawa (a) acetic acid, ethyl ester; (b) dodecanoic acid, 1,2,3- propanetriyl ester ................................................................ 46 Gambar 4.5 Pola Fregmentasi senyawa acetic acid, ethyl ester ........................... 46 Gambar 4.6 Pola Fragmentasi senyawa dodecanoic acid, 1,2,3-propanetriyl ester (CAS) ............................................................................................. 48
xiv
DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Data determinasi tanaman Katemas ................................................. 55 Lampiran 2. Crude extract n-heksana, etil asetat dan etanol ................................ 56 Lampiran 3. Diameter zona hambat uji aktifitas antifungi ................................... 56 Lampiran 4. Hasil KHM crude extract Etil asetat Daun Katemas terhadap C. capsici dan F. Oxysporum .................................................................. 57 Lampiran 5. KLT hasil pemisahan crude extract etil asetat dun Katemas ........... 58 Lampiran 6. Pemisahan crude extract etil asetat dun Katemas menggunakan KKV ......................................................................................................... 58 Lampiran 7. Profil hasil pemisahan dengan KLT terhadap 19 fraksi hasil KKV crude extract etil asetat daun Katemas ............................................ 59 Lampiran 8. Hasil uji antifungi F9 hasil pemisahan crude extract etil asetat daun Katemas dengan metode difusi agar terhadap fungi uji C. capsici dan F. Oxysporum................................................................................... 59 Lampiran 9. Skrining fitokimia F9 pemisahan crude extract etil asetat daun Katemas ........................................................................................... 60 Lampiran 10. Spektra massa hasil dari GCMS ..................................................... 61
xv
UJI AKTIVITAS ANTIFUNGI EKTRAK DAUN KATEMAS (Euphorbia heterophylla L.) TERHADAP Colletotrichum capsici TCKr2, Alternaria porri KP10, DAN Fusarium oxysporum BNT2 Oleh: Fina Ida Matus Silmi NIM. 11630010 Dosen Pembimbing: Esti Wahyu Widowati, M.Si, M.Biotech Lela Susilawati, M.Si ABSTRAK Katemas (Euphorbia heterophylla L.) merupakan salah satu tanaman yang mempunyai banyak manfaat, diantaranya sebagai antibakteri, antiinflamasi, antikanker dan penyembuh luka. Pemanfaatan yang perlu dikaji lebih dalam adalah aktivitasnya sebagai antifungi. Penelitian ini bertujuan mengetahui kemampuan ekastrak daun Katemas dalam menghambat pertumbuhan fungi Colletotrichum capsici, Alternaria porri dan Fusarium oxysporum, fungi patogen penyebab penyakit pada tanaman hortikultura seperti cabai, bawang dan tomat serta mengetahui senyawa yang berperan sebagai antifungi. Penelitian diawali dengan pembuatan crude extract simplisia daun Katemas. Crude extract diperoleh dengan metode maserasi menggunakan pelarut n-heksana, etil asetat dan etanol. Crude extract yang diperoleh ditentukan aktivitas antifunginya dengan metode difusi agar dan ditentukan Konsentrasi Hambat Minimumnya (KHM). Hasilnya menunjukkan crude extract etil asetat adalah crude extract paling potensial dalam menghambat pertumbuhan Colletotrichum capsici dan Fusarium oxysporum dengan KHM masing-masing 400 mg mL-1 dan 160 mg mL-1. Pemisahan crude extract etil asetat menjadi fraksi-fraksi dilakukan dengan Kromatografi Kolom Vakum dan diprofiling menggunakan KLT. Hasil KKV dan profiling diperoleh 16 fraksi yang lebih sederhana. Hasil uji antifungi menunjukkan bahwa F9 merupakan fraksi paling tinggi dalam menghambat fungi uji dengan diameter zona hambat untuk Colletotrichum capsici dan Fusarium oxysporum rata-rata 7,40 mm. Identifikasi golongan senyawa dalam crude extract F9 dilakukan dengan skrining fitokimia. Crude extract F9 positif mengandung golongan fenolik yang berperan sebagai antifungi. Kata kunci: Antifungi, Katemas (Euphorbia heterophylla L.), Colletotrichum capsici, Alternaria porri dan Fusarium oxysporum
xvi
BAB I PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah Indonesia merupakan negara tropis yang mempunyai berbagai jenis tanaman hortikultura. Beberapa contoh tanaman hortikultura yaitu cabai, bawang, dan tomat. Tanaman-tanaman tersebut dapat mengalami beberapa kendala dalam pertumbuhannya. Salah satu kendala yang sering dihadapi para petani tanaman hortikultura yaitu adanya penyakit pada tanaman yang disebabkan oleh pertumbuhan fungi patogen. Beberapa fungi patogen yang dapat menyebabkan penyakit pada tanaman diantaranya Colletotrichum capsici, Alternaria porri dan Fusarium oxysporum (Semangun, 2004). Colletotrichum capsici merupakan fungi yang terdapat pada daun, batang, buah tanaman dan gulma (James dkk., 2010). Fungi ini dapat menyebabkan penyakit busuk pada buah cabai (antraknosa). Penyakit ini menyebabkan buah mengering dan mengerut (Semangun, 2004). Fungi C. capsici selain menyerang buah cabai, juga dapat menyerang batang tanaman tersebut (James dkk., 2010). Fungi lain yang merusak tanaman adalah Alternaria porri. Fungi jenis ini sangat merusak tanaman bawang. Banyak upaya yang telah dilakukan untuk mengisolasi, mengidentifikasi dan mempelajari pola pertumbuhan patogen ini (Madhavi dkk., 2012). Fungi yang menyebabkan penyakit bercak ungu (trotol) pada bawang merah ini dapat mengakibatkan pembusukan (Semangun, 2004). Sementara itu, penyakit layu Fusarium yang disebabkan oleh Fusarium oxysporum merupakan penyakit yang sering menjadi kendala pada budidaya
1
2
tomat. Penyakit ini ditandai dengan nekrosis pada jaringan tanaman yang mengakibatkan terjadinya kelayuan akibat serangan patogen pada jaringan vaskular tanaman. Serangan fungi ini dalam beberapa minggu dapat menyebabkan kematian tanaman (Diana dkk., 2014). Metode pengendalian yang sering digunakan dalam menekan pertumbuhan fungi adalah penggunaan fungisida sintetis, tetapi fungisida sintesis mempunyai kekurangan karena meninggalkan residu beracun yang tidak mudah terurai di tanah (Rustini, 2010). Selain itu, penggunaan fungisida yang tidak bijaksana dapat menimbulkan masalah pencemaran lingkungan, gangguan keseimbangan ekologis dan bersifat karsinogenik (Damayanti, 2009). Salah satu alternatif untuk mengurangi dampak penggunaan fungisida sintetis adalah dengan menggunakan fungisida alami yang berasal dari alam. Alam telah menyediakan bahan-bahan alami berupa tanaman yang dapat dimanfaatkan untuk menanggulangi serangan fungi pada tanaman. Tanaman mempunyai senyawa bioaktif berupa metabolit sekunder. Metabolit sekunder seperti flavonoid, triterpenoid dan tanin diduga dapat menghambat pertumbuhan fungi patogen (Ismaini, 2011). Hal ini sepadan dengan Wahyuni dkk. (2014) yang menyatakan bahwa flavonoid memiliki efek sebagai antifungi terhadap Diplodia sp. karena mengandung senyawa fenol. Selain itu, menurut Cowan (1999) senyawa triterpenoid juga dapat mengganggu proses terbentuknya dinding sel fungi dengan melarutkan lipid (salah satu penyusun dinding sel fungi). Ismaini (2011) menambahkan ketiga senyawa tersebut berperan dalam terjadinya penghambatan pertumbuhan fungi F. oxysporum.
3
Berdasarkan hasil penelitian tersebut, metabolit sekunder dapat digunakan sebagai fungisida alami. Tanaman yang akan diteliti aktivitas antifunginya adalah Katemas (Euphorbia heterophylla L.). Katemas merupakan tanaman asli Amerika Tengah dan Amerika Selatan, yang penyebarannya meluas ke daerah tropis dan subtropis termasuk ke Indonesia. Studi pendahuluan mengenai fitokimia daun Katemas (Euphorbia heterophylla L.) yang diekstrak menggunakan etanol dan pelarut lain menunjukkan adanya senyawa aktif flavonoid, saponin, alkaloid, tanin, diterpen dan ester (Falodun, 2006; James, 2010). Secara tradisional Katemas (Euphorbia heterophylla L.) digunakan untuk mengobati sembelit, bronkitis dan asma (Falodun dkk. 2006). Selain itu, menurut beberapa penelitian seperti Meenakshi, dkk (2010), mengatakan bahwa ekstrak etanol Katemas mempunyai aktivitas antimikroba terhadap bakteri Proteus vulgaris dan Staphylococcus aureus. Ekstrak air dan etanol menunjukkan aktivitas penyembuhan luka yang signifikan ketika ekstrak diberikan pada tikus (James dkk., 2010). Falodun dkk. (2006) mengatakan bahwa ekstrak daun Katemas (Euphorbia heterophylla L.) juga dapat digunakan sebagai antiinflamasi. Selain itu, menurut Moshi dkk. (2007) beberapa jenis tanaman yang digunakan sebagai obat tradisional di Tanzania dapat digunakan sebagai antimikroba (antifungi), salah satu tanamanya yaitu Euphorbia heterophylla L. Berdasarkan beberapa hasil penelitian mengenai Katemas tersebut, maka perlu dilakukan penelitian lebih lanjut pada daun Katemas sebagai agen antifungi terhadap fungi patogen pada tanaman hortikultura. Oleh karena itu, pada
4
penelitian ini akan dilakukan uji aktivitas terhadap fungi Colletotrichum capsici, Alternaria porri dan Fusarium oxyosporum dengan menggunakan ekstrak etil asetat daun Katemas (Euphorbia heterophylla L.) yang akan dipisahkan menjadi beberapa fraksi serta mengidentifikasi senyawa yang ada didalamnya menggunakan GC-MS. B. Rumusan Masalah Berdasarkan latar belakang di atas, maka dapat dirumuskan masalah sebagai berikut: 1. Bagaimanakah aktivitas antifungi dari crude extract n-hexana, etil asetat, dan etanol daun Katemas (Euphorbia heterophylla L.) terhadap pertumbuhan Colletotrichum capsici, Alternaria porri dan Fusarium oxysporum ? 2. Bagaimanakah aktivitas antifungi dari fraksi-fraksi hasil pemisahan crude extract daun Katemas (Euphorbia heterophylla L.)? 3. Bagaimanakah identifikasi senyawa yang terdapat dalam fraksi hasil pemisahan crude extract daun Katemas (Euphorbia heterophylla L.)? C. Tujuan Penelitian Berdasarkan rumusan masalah, maka tujuan dari penelitian adalah: 1. Mengetahui aktivitas antifungi dari ekstrak daun Katemas (Euphorbia heterophylla L.) terhadap pertumbuhan Colletotrichum capsici, Alternaria porri dan Fusarium oxysporum. 2. Mengetahui aktivitas antifungi fraksi-fraksi hasil pemisahan crude extract daun Katemas (Euphorbia heterophylla L.).
5
3. Mengetahui golongan senyawa yang terdapat dalam fraksi hasil pemisahan crude extract daun Katemas (Euphorbia heterophylla L.). D. Manfaat Penelitian Hasil yang diperoleh dari penelitian ini diharapkan dapat memberikan beberapa manfaat, diantaranya: 1. Informasi mengenai aktivitas antifungi ekstrak daun Katemas (Euphorbia heterophylla L.) sebagai fungisida alami yang aman bagi lingkungan. 2. Memperkaya khasanah keilmuan khususnya yang berkaitan dengan pemanfaatan bahan alam sebagai antimikroba.
BAB V PENUTUP
A. Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian, maka dapat diambil kesimpulan bahwa: 1. Crude extract etil asetat daun Katemas adalah crude extract paling potensial dalam menghambat pertumbuhan fungi Colletotrichum capsici dan Fusarium oxysporum dengan KHM masing-masing 400 mg mL-1dan 160 mg mL-1. 2. Hasil uji antifungi menunjukkan bahwa F9 merupakan fraksi paling besar dalam menghambat fungi uji dengan diameter zona hambat untuk Colletotrichum capsici dan Fusarium oxysporum rata-rata 7,40 mm. 3. Senyawa yang terkandung dalam F9 hasil pemisahan crude extract etil asetat daun Katemas yang diduga berperan sebagai antifungi adalah senyawa golongan fenolik B. Saran Berdasarkan kesimpulan diatas maka perlu dilakukan peelitian lebih lanjut mengenai: 1. Perlu dilakukan purifikasi senyawa fenolik ekstrak daun Katemas yang berperan sebagai antifungi. 2. Perlu dilakukan uji aktivitas antifungi dengan fungi patogen yang lain.
49
DAFTAR PUSTAKA
Abbasi, M. A., Hina Saleem, Aziz-ur-Rehman, Tauheeda Riazand Muhammad Ajaib, 2013, Determination of Antioxidant Activity and Phytoconstituent Screening of Euphorbia heterophylla Linn, British, Journal of Pharmaceutical Research, 2, 3, 202-216. Achi, N. K, O. C. Ohaeri., 2015, GC-MS Detrmination of Bioaktive Constituents of the Methanolic Fractions of Cnidozcolus aconitifolius, Journal of Pharmaceutical Research, 3, 5, 163-172. Achrom, M. dan Joni H., 2011, Pengaruh Iradiasi Sinar Gamma (Cobalt 60) Terhadap Mikroflora Umbi Bawang Merah (Allium scalonium L.). Jurnal Balai Uji Terap Teknik dan Metode Karantina Pertanian. Adnan, M., 1997, Teknik Kromatografi untuk Analisis Bahan Makanan, Yogyakrta: ANDI. Agoramoorthy,G., M. Chandrasekaran, V. Venkatesalu, and M.J. Hsu., 2007, Antibacterial and Antifungal Activities of Fatty Acid Methyl Esters of The Blind-Your-Eye Mangrove from India. Brazilian Journal of Microbiology, 38, 739-742. Agusta, A., 2000, Minyak Atsiri Tumbuhan Tropika Indonesia, Bandung: Penerbit ITB. Agustin, N. W. S., M. Afriastini, Yoana Maulida, Potensi Asam Lemak dari Mikroalga Nannocloropsis sp Sebagai Antioksidan Dan Antibakteri, Seminar Nasional XI Pendidikan Biologi FKIP UNS, Surakarta. Agrios, G. N., 1996, Plant Pathology, Penerjemah: Munzir Busnia dalam Ilmu Penyakit Tumbuhan. Yogyakarta: Gajah Mada University Press. Atlas, Ronald M., 2004, Handbook of Microbiological Media Third Edition, Nnew York: CRC Press. Brathwaite, Chelston W. D., 1981, An Introduction to the Diagnosis of Plant Disease, Inter-American Institute For Cooperation An Agriculture, San Jose: Costa Rica. Campbell, N. A. and J. B. Reece. Mitchell L.G., 2003, Biologi, Edisi Kelima, (diterjemahkan oleh Prof. Dr. Ir. Wasmen Manalu), Jakarta: Erlangga. Canell, Richard J.P., 1998, Methods in Biotechnology: Natural Product Isolation, Edition 4, Totowa, New Jersey: Humana Press.
50
51
Colegate, Steven M. and Molyneux, R. J., 2008, Bioactive Natural Product: Detection, Isolation, and Structural Determination. London: CRC Press. Cowan, M., 1999, Plant Product as Antimicrobial Agent, Clinical Microbiology Reviews, 4, 12, 564-582. Damayanti, D., 2009, Jamur Fusarium. http://sciweb.nybg.org/science2/hcol/ fusarium3.asp, Diakses tanggal 28 November 2015. Day. Jr dan Underwood A.L, 2002, Analisis Kimia Kuantitatif, Jakarta: Penerbit Erlangga. Desiderio, D. M., 1994, Mass Spectrometry, New York: Plenum Press. Diana, N. Siti K, Mukarlina., 2014, Penghambatan Pertumbuhan Jamur Fusarium oxysporum Schlecht pada Batang Padi (Oryza sativa L.) Menggunakan Ekstrak Metanol Umbi bawang Mekah (Eleutherine palmifolia Merr.), Jurnal Protobiont, 2, 3, 225-231. Endrasari, R., Qanytah, Bambang P., 2012, Pengaruh Pengeringan Terhadap Mutu Simplisia Temulawak Di Kecamatan Tembalang Kota Semarang, Publikasi Prosiding Makalah Penunjang Oral. Falodun A, Okunrobo L.O and Uzoamakan, 2006, Phytochemical Screening And Anti-Inflammatory Evaluation Of Methanolic And Aqueous Extracts of Euphorbia heterophylla Linn (Euphorbiaceae), African Journal of Biotechnology, 6, 5, 529-xxx. Gandjar, I., Oetari A., dan Sjamsuridzal, W., 2006, Mikologi: Dasar dan Terapan, Jakarta: Yayasan Obor Indonesia. Gritter, R.J., Bobbit, J.M., Schawarting, A.E., 1991, Pengantar Kromatografi, edisi 2, (diterjemahan oleh: Padmawinata. K), Bandung: ITB. Harborne J.B., 1987, Metode Fitokimia: Penuntun Cara Menganalisis Tumbuhan, 2nd ed, (diterjemahkan oleh Padmawinata K. Soediro I), Bandung: ITB. Harris, Daniel, C., 2010, Quantitative Chemical Analysis, New York: W. H. Freeman and Company. Helmi, Henny., 2008, Aktivitas Bakterisida dan Fungisida Ekstrak Kasar Biji Kolowe, Jurnal Enviagro, 2, 2. Howe, I dan Wiliams D.H, 1981, Mass Spectrometry and Application 2th Edition, London: Mc Graw Hill.
52
Imani, A. Z., 2014, Uji Aaktifitas Antijamur Ekstrak Etanol Daun Mangga Bacang (Mangifera foetida L.) Terhadap Candida albinans Secara In Vitro, Naskah Publikasi. Ismaini, Lily., 2011, Aktivitas Antifungi Ekstrak (Centella asiatica (L.) Urban terhadap Fungi Patogen pada Daun Anggrek (Bulbophyllum flavidiflorum Carr.), Jurnal Penelitian Sains,1 (D), 14. James, Omale and Emmanuel. T. Friday, 2010, Phytochemical Composition, Bioactivity And Wound Healing Potential Of Euphorbia heterophylla (Euphorbiaceae) Leaf Extract, International Journal on Pharmaceutical and Biomedical Research, 1, 1, 54-63. Jawetz, Melnick, and Adelberg’s, 2007, Medical Microbiology 24th Edition. New York: McGraw Hill Lange. Kitson, Fulton G, 2011, Gas Chromatography and Mass Spectrometry, USA: Academic Press. Madhavi, M., A. Kavitha., and M. Vijayalakshmi, 2012,Sudies on Alternaria porri (Ellis) Ciferri Pathogenic to Onion (Allium cepa L.), Archives of Applied Science Research, 1, 4. Meenakshi, Sundaram, M., Karthikeyan, K., Sudarsanam, D., Brindha, P., 2010, Antimicrobial and Anticancer Studies on Euphorbia heterophylla, Journal of Pharmacy Research, 9, 3, 2332. Moshi, M.J., Beukel C.J.P., Hamzah O.J.M., Z.H. Mwambo, R.O.S. Nondo, P.J. Masimba, M.I.N. Matee, M.C. Kapingu, Frans Mikx, P. E. Verweij, And A.J.A.M. Van Der Ven, 2007, Brine Shrimp Toxicity Evaluation Of Some Tanzanian Plants Used Traditionally For The Treatment Of Fungal Infections, Afr. Journal Traditional Complementary and Alternative Medicines, 2, 4, 219-225. Muchtaridi, 2005, Aplikasi Teknologi Ekstraksi Fasa Padat-GC/MS (Gas Chromatography-Mass Spectrometry) pada Preparasi Analisis Senyawa Atsiri dalam Darah Mencit, Jurnal Bionatura, 2, 7, 30-45. Mursyid, 1989, Analisis Metabolit Sekunder, Yogyakarta: PAU Bioteknologi UGM. Nirwanto, Herrry, 2008, Kajian Aspek Spasial Penyakit Bercak Ungu (Alternaria porri Cif. (Ell)) Pada Tanaman Bawang Merah, Jurnal Pertanian Mapeta, 3, 10, 211-217.
53
Nugraheni, Endah S., 2010, Karekterisasi Biologi Isolat-Isolat Fusarium sp Pada Tanaman Cabai Merah (Capsicum annum L.) Asal Boyolali, Skripsi, Surakarta: Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret. Onwukaeme, DN. TB Ikuegbvweha and CC Asonye, 2007, Evaluation of Phytocheical Constituents, Antibacterial Activities and Effect of Pycanthus Angolensis Weld Warb (Mysristicaceae) on Corneal Ulcers in Rabbits, Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 2, 6, 725-730. Pelczar M.J. dan Chan E.C.S, 1988, Dasar-dasar Mikrobiologi, (diterjemahkan oleh Hadioetomo R.S, Imas T, Tjitrosomo S.S, Angka S.L.), Jakarta: UI press. Rahim, A, Gemini A, Rina A, Muh. Rusydi, 2012, Skrining Toksisitas Ekstrak Herba Bandotan (Ageratum conyzoides L), Majalah Farmasi dan Farmakolog, 2, 16, 99-106. Rahmah, N., dan Aditya R., 2010, Uji fungistatik ekstrak daun sirih terhadap Candida albicans, http://fmipa.unlam.ac.id/bioscientiae, diakses tanggal 25 Oktober 2015. Rahmawati, Ismi., Shinta N, dan Yudi R., 2010, Uji Aktifitas Antifungi n-Heksana, Etil Asetat Dan Air dari Daun pepaya (Carica papaya Linn.) Terhadap Candida albicans ATCC 10231, Jurnal Farmasi Indonesia, ISSN: 1693-8615, 30-34. Robinson, T., 1995, Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi, Bandung: ITB. Sarker, Satyajit D., and Nahar, Lutfun., 2007, Chemistry for Pharmacy Student General, organic and Natural product Chemistry, Chicester, West Sussex: John Wiley & Sons Ltd.. Sarker, Setyajit D., Latif, Zahid, and Gray, Alezander I., 2006, Methods in Biotechnology: Natural Product Isolation. Edition 20. Totowa, New Jersey: Humana Press. Sastrohamidjojo, H., 2005, Kromatografi, Yogyakarta: Penerbit Liberty. Sastrohamidjojo, H., 1996, Sintesis Bahan Alam, Yogyakarta: UGM Press. Schmelzer, G.H, A. Gurib-Fakim. Assoc., 2008, Plant Resources of Tropical Africa: Medicinal plants I, Wagening, Netherlands: Prota Foundation. Semangun, Haryono., 2004, Penyakit-penyakit Tanaman Hortikultura Di Indonesia, Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
54
Srinivasan, V., R. Panneerselvam, S. Gunaesekaran, S. Palani., 2014, Ethanolic extract of Melia against Acetaminophen induced Nephrotoxicity, International Journal of PharmTech Research,1, 6, 70-79. Stahl, E., 1985, Analisis Obat Secara Kromatografi dan Mikroskopi, Bandung: ITB. Tortora Gerard J, Berdell R. Funke, Christine L. Case., 2001, Microbiology: An Introduction 7th Ed. USA: Pearson Education. Voight, R, 1994, Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, (diterjemahkan oleh: S. Noerono), Yogyakarta: Gajah Mada University Press. Wahyuni, Sri, Mukarlina, dan Ari H.Y., 2014, Aktivitas antifungi Ekstrak Metanol Daun Buas-buas (Premna serratifolia) Terhadap Jamur Diplodia sp. Pada Jeruk Siam (Citrusnobilis var. microcarpa), Jurnal Protobiont, 2, 3, 274-379. Wattimena JR, Sugiarso NC, Widianto MB, Sukandar EY, Soemardji AA, Setiabudi A. R., 1991, Farmakodinamik dan Terapi Antibiotik, Yogyakarta: UGM press. Widiastuti, F. A., 2013, Aktivitas Larvasida Fraksi Polar Ekstrak Etanol 96 % Buah Cabai Jawa (Piper retrofractum Valh.) Terhadap Larva Nyamuk Anopheles aconitus Dan Aedes aegypti Serta Profil Kromatografi Lapis Tipisnya, Skripsi, Yulianti dan Tundjung, T.T.H., 2007, Pengaturan Lama Perendaman Benih Cabai (Capsicum Annuum L.) Dalam Fungisida Berbahan Aktif Benomyl Untuk Menekan Perkembangan Penyakit Antraknosa (Colletotrichum Capsici). Jurnal Sains MIPA, 1, 13, 49-54.
LAMPIRAN Lampiran 1. Data determinasi tanaman Katemas
55
56
Lampiran 2. Crude extract n-heksana, etil asetat dan etanol
Crude extract n-heksana
Crude extract etil asetat
Crude extract etanol Lampiran 3. Diameter zona hambat uji aktifitas antifungi crude extract etil asetat daun Katemas terhadap C.capsici dan F. oxysporum. tanda (-) menunjukan tidak ada zona hambat, (*) menunjukan tidak dilakukan uji, dan (+) menunjukan ada zona hambat No. 1. 2. 3. 4.
Konsentrasi (mg mL-1) 1.280 640 320 160
Diameter Zona Hambat (mm) C.capsici F.oxysporum * 8,20 7,78 7,75 6,50 7,55 7,66
57
Lampiran 4. Hasil KHM crude extract Etil asetat Daun Katemas terhadap C. capsici dan F. Oxysporum
`
58
Lampiran 5. KLT hsail pemisahan crude extract etil asetat dun Katemas dengan pelarut (a) n-heksana; (b) etil asetat; (c) etanol; (d) n-heksana:etil asetat (3:1); (e) n-heksana:etil asetat (1:3); (f) n-heksana:etil asetat (3:2); (g) n-heksana:etil asetat (2:3); (h) etil asetat:etanol (3:1); (i) etil asetat:etanol (1:3); (j) etil asetat:etanol (3:2); dan (k) etil asetat:etanol (2:3). Hasil dideteksi dengan lampu UV pada Error! Reference source not found. = 254 nm
Lampiran 6. Pemisahan crude extract etil asetat dun Katemas menggunakan KKV (a) proses selama KKV dan (b) fraksi-fraksi hasil pemisahan ditampung dalam botol
(a)
(b)
59
Lampiran 7. Profil hasil pemisahan dengan KLT terhadap 19 fraksi hasil KKV crude extract etil asetat daun Katemas, totolan sampel dari 1, 2, 3,.... sampai 21 fraksi (kiri – kanan). Hasil dideteksi dengan lampu UV pada Error! Reference source not found. = 254 nm
Lampiran 8. Hasil uji antifungi F9 hasil pemisahan crude extract etil asetat daun Katemas dengan metode difusi agar terhadap fungi uji C. capsici dan F. Oxysporum
60
Lampiran 9. Skrining fitokimia F9 pemisahan crude extract etil asetat daun Katemas (sinar tampak setelah disemprot dengan pereaksi masingmasing uji)
(a) (a)
(b)
(c)
Uji fenolik menggunakan fase gerak= Etil asetat:asam formiat: toluene:air (6:1,5:3:0,5); pereaksi FeCl3. (b) Uji alkaloid menggunakan fase gerak= Toluen : etil asetat : dietil amin (7:2:1); pereaksi Dragendorf. (c) Uji terpen menggunakan fase gerak= Heksan : etil asetat (93:7); pereaksi Anisaldehid asam sulfat.
61
Lampiran 10. Spektra massa hasil dari GCMS Puncak ke-1
Puncak ke-2
Puncak ke-3
62
Puncak ke-4
Puncak ke-5
Puncak ke-6
63
Puncak ke-7
Puncak ke-8
Puncak ke-9
64
Puncak ke-10
Puncak ke-11
Puncak ke-12
