UJI AKTIVITAS ANTIDIABETES FRAKSI ETIL-ASETAT EKSTRAK ETANOL DAUN LENGLENGAN (Leucas lavandulifolia J.E. SMITH) PADA TIKUS DIABETES MELLITUS TIPE-2 YANG MENGALAMI RESISTENSI INSULIN
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat dalam mencapai derajat Sarjana Farmasi Program Studi Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang
Oleh : Dhiyaul Hasyimi 105010614
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS WAHID HASYIM SEMARANG 2015 i
PENGESAHAN SKRIPSI Berjudul UJI AKTIVITAS ANTIDIABETES FRAKSI ETIL-ASETAT EKSTRAK ETANOL DAUN LENGLENGAN (Leucas lavandulifolia J.E. SMITH) PADA TIKUS DIABETES MELLITUS TIPE-2 YANG MENGALAMI RESISTENSI INSULIN Oleh: Dhiyaul Hasyimi 105010614 Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Pada tanggal : 31 Desember 2015
Pembimbing Utama
Mengetahui : Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Dekan,
(Yance Anas, M.Sc., Apt.)
(Sri Susilowati, S.Si., M.Si., Apt)
Pembimbing Pendamping
(Maulita Cut Nuria, M.Sc., Apt.) Penguji : 1. Risha Fillah Fithria, M.Sc., Apt.
(
)
2. Sri Susilowati, S.Si., M.Si, Apt.
(
)
3. Yance Anas, M.Sc., Apt.
(
)
4. Maulita Cut Nuria, M.Sc., Apt.
(
)
ii
SURAT PERNYATAAN
Yang bertandatangan dibawah ini : Nama
: Dhiyaul Hasyimi
NIM
: 105010614
Judul Skripsi
: Uji Aktivitas Antidiabetes Fraksi Etil-asetat Ekstrak Etanol Daun Lenglengan (Leucas lavandulifolia J.E. Smith) pada Tikus Diabetes Mellitus Tipe-2 yang Mengalami Resistensi Insulin
Menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya yang pernah ditulis dan diterbitkan oleh orang lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Demikian surat pernyataan ini saya buat untuk dapat digunakan sebagaimana mestinya.
Semarang, 31 Desember 2015
Dhiyaul Hasyimi
iii
MOTTO DAN PERSEMBAHAN
“Berikan waktu untuk masa depan”
“Masa depan yang diimpikan tidak akan terjadi, jika kita hanya menunggu”
“Aku berfikir maka aku ada” Rene Descartes
Kupersembahakan untuk : Orang tuaku sebagai wujud bakti dan hormatku, atas doa, kasih sayang, dan dukungannya yang dicurahkan setiap saat; Kakak-kakakku, kerabat dan sahabat sebagai wujud kasih sayang Almamaterku sebagai wujud terima kasih iv
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur senantiasa penulis panjatkan atas kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan taufiq dan hidayah-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Uji Aktivitas Antidiabetes Fraksi Etil-asetat Ekstrak Etanol Daun Lenglengan (Leucas lavandulifolia J.E. Smith) pada Tikus Diabetes Mellitus Tipe-2 yang Mengalami Resistensi Insulin”. Adapun maksud dari penyusunan skripsi ini adalah sebagai salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang. Penulis menyadari bahwa keberhasilan dalam menyusun skripsi ini atas segala bantuan dan dukungan dari semua pihak. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan terima kasih kepada : 1. Ibu Sri Susilowati, S.Si., M.Si., Apt, selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang. 2. Bapak Yance Anas, M. Sc., Apt, selaku dosen pembimbing utama atas segala bantuan, bimbingan, masukan dan nasihat kepada penulis selama penyusunan skripsi. 3. Ibu Maulita Cut Nuria, M.Sc., Apt, selaku dosen pembimbing pendamping atas segala bantuan, bimbingan, saran dan koreksinya selama penyusunan skripsi. 4. Ibu Sri Susilowati, S.Si., M.Si., Apt. dan Ibu Risha Fillah Fithria, M.Sc., Apt selaku dosen penguji atas segala bantuan, saran dan koreksinya selama penyusunan skripsi. v
5. Bapak dan Ibu Dosen Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang yang telah memberikan bekal ilmu sebagai dasar penulisan skripsi. 6. Segenap staf laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang atas bantuan yang diberikan. 7. Teman-teman seperjuangan Nandang Prasetyo W., Masruri, Ryan Ketut S., Faiz, Elly, Sholikin, Amir, Arief Rafsanjani, Lala, Dinar dan teman-teman yang telah mendukung serta membantu. 8. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang telah membantu penyusunan skripsi. Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kelemahan dan kekurangannya. Untuk itu, segala macam kritik dan saran yang membangun sangat diharapkan penulis untuk perbaikan sktipsi ini. Semoga skripsi ini dapat memberikan sumbangan yang berarti bagi ilmu pengetahuan.
Semarang, 31 Desember 2015
Penulis
vi
DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL ...................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................
ii
SURAT PERNYATAAN ............................................................................
iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ...................................................................
iv
KATA PENGANTAR .................................................................................
v
DAFTAR ISI ...............................................................................................
vii
DAFTAR TABEL .......................................................................................
x
DAFTAR GAMBAR ...................................................................................
xi
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................
xii
INTISARI ....................................................................................................
xiii
ABSTRACT ..................................................................................................
xiv
BAB I.
PENDAHULUAN .......................................................................
1
A. Latar Belakang Masalah .........................................................
1
B. Rumusan Masalah ..................................................................
2
C. Tujuan Penelitian ...................................................................
3
D. Manfaat Penelitian .................................................................
3
E. Tinjauan Pustaka ....................................................................
3
1. Lenglengan (Leucas lavandulifolia J.E. Smith) .................
3
2. Senyawa Golongan Terpenoid ..........................................
5
3. Glukosa Darah..................................................................
5
4. Diabetes Mellitus .............................................................
6
5. Ekstraksi ..........................................................................
10
vii
6. Partisi Cair-Cair ...............................................................
11
7. Model Hewan Percobaan Diabetes Mellitus ......................
12
8. Metode Pengukuran Kadar Glukosa .................................
13
9. Kromatografi Lapis Tipis .................................................
14
F. Landasan Teori ......................................................................
15
G. Hipotesis ................................................................................
16
BAB II. METODE PENELITIAN .............................................................
17
A. Desain dan Variabel Penelitian ...............................................
17
B. Bahan Dan Alat Penelitian .....................................................
18
1. Bahan ...............................................................................
18
2. Alat ..................................................................................
18
C. Perhitungan Jumlah Sampel ...................................................
19
D. Tahapan Penelitian .................................................................
19
1. Determinasi Tanaman .......................................................
19
2. Pembuatan Serbuk Simplisia ............................................
20
3. Ekstraksi Daun Lenglengan ..............................................
20
4. Fraksinasi Ekstrak Etanol Daun Lenglengan .....................
21
5. Penetapan Dosis Uji FEADL ............................................
22
6. Pembuatan Sediaan Uji.....................................................
23
7. Pembuatan
Tikus
DM
Tipe-2
yang
Mengalami
Resistensi Insulin .............................................................
24
8. Uji Aktivitas Antidiabetes FEADL dan Metformin pada Tikus DM Tipe-2 yang Mengalami Resistensi Insulin ......
25
9. Validasi dan Pengukuran Kadar Glukosa Darah Puasa ......
26
viii
10. Uji Kromatografi Lapis Tipis............................................
27
E. Analisa Data ..........................................................................
28
1. Data Kadar GDP pada Pembuatan Tikus DM Tipe-2 yang Mengalami Resistensi Insulin...................................
28
2. Data Kadar GDP pada Uji Aktivitas Antidiabetes .............
28
3. Penetapan Potensi Efek Antidiabetes (ED50) .....................
29
BAB III. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN .............................
30
A. Determinasi Tanaman Lenglengan .........................................
30
B. Pembuatan Ekstrak Etanol dan Fraksi Etil-asetat Daun Lenglengan ............................................................................
31
C. Pembuatan Tikus DM Tipe-2 yang Mengalami Resistensi Insulin ....................................................................................
32
D. Uji Aktivitas Antidiabetes FEADL dan Metformin pada Tikus DM Tipe-2 yang Mengalami Resistensi Insulin ............
35
E. Identifikasi Senyawa Aktif Golongan Terpenoid ....................
37
BAB IV. KESIMPULAN ...........................................................................
39
DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................
40
LAMPIRAN ................................................................................................
44
ix
DAFTAR TABEL Halaman Tabel I.
Data Perolehan Fraksi Etil-asetat Ekstrak Etanol Daun Lenglengan (FEADL) ..................................................................
31
Tabel II. Persen Efek Antidiabetes FEADL dan Metformin ........................
36
x
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1.
Tanaman Lenglengan (Leucas lavandulifolia J.E. Smith) .........
4
Gambar 2.
Struktur Kimia Isoprena ..........................................................
5
Gambar 3.
Struktur Kimia Metformin .......................................................
10
Gambar 4.
Skema Reaksi Umum yang Terjadi pada Glukometer ..............
14
Gambar 5.
Skema
Proses
Pembuatan
Serbuk
Simplisia
Daun
Lenglengan ..............................................................................
20
Gambar 6.
Skema Proses Fraksinasi Ekstrak Etanol Daun Lenglengan......
22
Gambar 7.
Skema Pembuatan Tikus DM Tipe-2 Menggunakan Insulin Eksogen Selama 14 Hari..........................................................
Gambar 8.
Skema Uji Aktivitas Antidiabetes dan Penetapan Kadar Glukosa Darah .........................................................................
Gambar 9.
25
26
Kunci Tanaman Lenglengan (Leucas lavandulifolia J.E. Smith) beserta Gambar Tanamannya .......................................
30
Gambar 10. Ekstrak Etanol Daun Lenglengan (A) dan Fraksi Etil-Asetat Ekstrak Etanol Daun Lenglengan (B) ....................................... Gambar 11. Perbandingan Rata-Rata Kadar
GDP
Tikus
32
Sebelum
Perlakuan (hari ke-0) dan Tiga Hari Sesudah Perlakuan 14 Hari (hari ke-17) ......................................................................
33
Gambar 12. Perbandingan Kadar GDP Tikus Sebelum dan Sesudah Pemberian Sediaan Uji ............................................................
35
Gambar 13. Uji KLT Senyawa Terpenoid ...................................................
37
xi
DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1.
Surat Keterangan Determinasi Tanaman Lenglengan ............
Lampiran 2.
Surat
Keterangan
Telah
Melakukan
Penelitian
44
di
Laboratorium Biologi Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang .............................................................................. Lampiran 3.
Surat
Keterangan
Telah
Melakukan
Penelitian
47
di
Laboratorium Farmakologi dan Farmasi Klinik Universitas Wahid Hasyim Semarang .....................................................
48
Lampiran 4.
Hasil Kromatografi Lapis Tipis Senyawa Terpenoid .............
49
Lampiran 5.
Data Kadar GDP Tikus Sebelum Perlakuan dan Tiga Hari Sesudah
Perlakuan
Insulin
1,8
IU/KgBB/hari
dan
Akuabides 5 mL/KgBB/hari selama 14 Hari (hari ke-17) ...... Lampiran 6.
Hasil Uji Statistik Data Kadar GDP Tikus DM Tipe-2 karena Pemberian Insulin 1,8 IU/KgBB Selama 14 hari ........
Lampiran 7.
54
Data Kadar GDP Tikus Sebelum dan Sesudah Pemberian Sediaan Uji Selama 14 Hari ..................................................
Lampiran 8.
52
56
Hasil Uji Statistik Kadar GDP Tikus Sebelum dan Sesudah Pemberian Sediaan Uji Selama 14 Hari.................................
57
Hasil Analisa Probit Penetapan ED50 FEADL .......................
61
Lampiran 10. Perhitungan Dosis Insulin, Metformin dan FEADL ...............
64
Lampiran 11. Perhitungan Volume Pemberian Metformin dan FEADL .....
66
Lampiran 12. Foto-Foto Penelitian .............................................................
71
Lampiran 9.
xii
INTISARI
Beberapa penelitian terdahulu melaporkan bahwa lenglengan dapat digunakan sebagai herbal antidiabetes. Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan adanya efek antidiabetes fraksi etil-asetat ekstrak etanol daun lenglengan (FEADL) pada tikus diabetes tipe-2 yang mengalami resistensi insulin. Penelitian menggunakan randomized pretest and posttest matched control group design. Sebanyak 25 ekor tikus jantan galur Wistar dibuat DM dengan pemberian insulin eksogen kerja panjang dosis 1,8 IU/KgBB/hari (s.c.) selama 14 hari. Tikus DM tipe-2 dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan. Tiga kelompok diberi FEADL dosis (62,5; 125 dan 250) mg/KgBB/hari. Tikus kelompok kontrol positif diberikan metformin 150 mg/kgBB/hari dan kelompok kontrol diabetes diberi CMC-Na 0,5% 12,5 mL/KgBB/hari. Sediaan uji diberikan satu kali sehari selama 14 hari. Data yang diamati adalah perbedaan kadar glukosa darah puasa (mg/dL) sebelum dan sesudah perlakuan sediaan uji. Data diuji secara statistik dengan uji T-berpasangan (p: 0,95). Hasil penelitian menyimpulkan FEADL dosis (62,5; 125 dan 250) mg/KgBB/hari, serta metformin 150 mg/KgBB/hari memiliki efek antidiabetes sebesar 5,13%; 15,07%; 18,72% dan 18,75%. Potensi (ED50) FEADL sebagai antidiabetes adalah sebesar 514,5 mg/KgBB. FEADL terbukti mengandung senyawa aktif golongan terpenoid.
Kata kunci : fraksi etil-asetat daun lenglengan, resistensi insulin
xiii
ABSTRACT
Some earlier research reported that Leucas lavandulifolia J.E. Smith can be used as a herbal antidiabetic. This study aims was to prove the antidiabetic effects of the ethyl-acetat fraction of the ethanol extract of Leucas lavandulifolia J.E. Smith leaves (EAFLL) in type 2 diabetes rats who have insulin resistance. This research used randomized pretest and posttest matched control group design. A total of 25 male Wistar rats induced DM by treated with long-acting exogenous insulin dose of 1.8 IU / kgBW / day (sc) for 14 days. Type 2 diabetes rats were divided into 5 groups. Three groups were given EAFLL dose (62.5; 125 and 250) mg/KgBW/day. Positive control group were given metformin 150 mg/kgBW/day and diabetic control group were given CMC-Na 0.5% 12.5 mL/KgBW/day. Treatment of the dosage form is done for 14 days. The observed data is the difference in fasting blood glucose levels (mg / dL) before and after treatment the test preparation. Data were statistically tested with paired T-test (p: 0.95). The result showed that EAFLL (62,5; 125 and 250 mg/KgBW/day) and metformin 150 mg/KgBW/day had antidiabetic effect of 5.13%; 15.07%; 18.72% and 18.75%. Potency (ED50) FEADL as antidiabetic is equal 514.5 mg/KgBW. FEADL contains the active compound of terpenoids.
Keywords : ethyl-acetat fraction of Leucas lavandulifolia J.E. Smith leaves, insulin resistance
xiv
