PŮVODCI STŘEVNÍCH NÁKAZ II
Entamoeba histolytica Balantidium coli Dientamoeba fragilis
PRIMÁRNÍ LOKALIZACE
TENKÉ STŘEVO
TLUSTÉ STŘEVO
Giardia intestinalis
Entamoeba histolytica
Cryptosporidium parvum Â
Dientamoeba fragilis
Cyclospora cayetanensis
Balantidium coli
Entamoeba histolytica
Nancy Gillen
patogenní střevní améba parazituje v lumen tlustého střeva nevniká do buněk schopná invaze do střevní stěny původce střevní a mimostřevní amébózy
Entamoeba histolytica
rozšíření: celosvětově častější výskyt v tropických a subtropických oblastech s nízkým hygienickým standardem a s vyšší hustotou osob hyperendemický výskyt: Mexiko, Kuba, Egypt, Indie, Vietnam (odlišná klinická manifestace nákazy)
prevalence: 40 milionů klinicky nemocných 40 – 100 tisíc úmrtí ročně Třetí nejvýznamnější parazitární onemocnění (po malárii a schistosomóze)
ORGANISMUS V životním cyklu Entamoeba histolytica se střídají 2 stádia
1. TROFOZOIT – pohyblivé améboidní stádium: 2 formy
Odd.tropické medicíny 1.LF UK
(1) forma minuta živí se bakteriemi neinvazní
(2) forma magna erytrofágní zabíjí jaderné buňky invazní
rod Entamoeba 1 jádro
Kansas State Univ. website
centrálně umístěné malé jadérko
Kansas State Univ. website
2. CYSTA - nepohyblivé „klidové“ stádium - odolné vůči vnějšímu prostředí (stěna obsahuje chitin) - slouží k přenosu infekce • 1, 2 nebo 4 jádra • velikost cysty: 12-15 μm
Odd.tropické medicíny 1.LFUK
• 1, 2 nebo 4 jádra • velikost cysty: 12-15 μm Cysty jsou životaschopné - ve vlhku - za nehty 45 minut
Cysty ničí - var, vyschnutí - zmražení - 5% kyselina octová
ŽIVOTNÍ CYKLUS
4-jaderná cysta
1. polknutí 4-jaderné cysty 2. ileum: excystace uvolnění a následné dělení 1-jaderné améby = forma minuta 3. colon ascendens a transversum: v lumen se živí bakteriemi, dělí se 4. colon descendens: encystace 1 jaderná cysta, 2 jaderná cysta, infekční 4-jaderná cysta vyloučena se stolicí
4-jaderná cysta = zralá, infekční
JAK K NÁKAZE DOCHÁZÍ: PŘENOS Entamoeba histolytica
zdroj nákazy: výhradně člověk, který vylučuje cysty antroponóza: Entamoeba histolytica je parazit člověka cysty pouze v částečně formované stolici !!! ne v dysenterické !!! asymptomatické nosičství je téměř stejné u mužů a u žen, ale u mužů častěji klinicky manifestní nákaza
přenos: fekálně-orální člověk – člověk: kontaktem - mezi rodinnými příslušníky, sousedy, při vyšší hustotě osob, špatných hygienických podmínkách - při sexuálním styku
vodou nebo potravou kontaminovanou cystami - špatná osobní hygiena (příprava potravy) - hnojení zeleniny lidskými výkaly - kontaminace zdroje pitné vody
Konverze intraluminálních améb forma minuta na invazní améby forma magna ???
STRESOVÁ REAKCE • tepelný stres • změny bakteriální flóry • změny redox na sliznici
forma minuta
forma magna (dyzenterická)
-
napadá sliznici nekonvertuje na f.minuta neencystuje!!! slepá linie
PATOGENEZE AMÉBÓZY: invaze střevní stěny formou magna MUKUS
adheze améb k mukusu lektin rozrušení mukusu
ENTEROCYTY adheze k enterocytům lyze (amebapor) LAMINA PROPRIA rozrušení bazální membrány ECM proteinázy SUBMUKÓZA ROZSEV
vřed hematogenní CD59
CYTOLYTICKÝ ÚČINEK ZÁVISLÝ NA KONTAKTU INICIAČNÍ PROCES PŘI INVAZI STŘEVA
1. ADHEZE 2. CYTOLÝZA 3. FAGOCYTÓZA
ADHEZE LEKTINEM ZPROSTŘEDKOVANÝ ROZPOZNÁVACÍ PROCES Gal/GalNAc LEKTIN
VAZBA NA MEMBRÁNU CÍLOVÉ BUŇKY A SIGNALIZACE PRO SEKRECI CYTOLYTICKÉHO FAKTORU
CYTOLYTICKÝ FAKTOR = AMEBAPOR • LOKALIZOVÁN V CYTOPLAZMATICKÝCH GRANULECH • KONTAKT S CÍLOVOU BUŇKOU = SIGNÁL PRO EXOCYTÓZU AMEBAPÓROVÝCH GRANUL • V MÍSTĚ KONTAKTU: VKLÁDÁNÍ DO MEMBRÁNY, TVORBA PÓRŮ • IONOFOROVÝ EFEKT NA CÍLOVOU BUŇKU: RYCHLÁ NEKROTICKÁ CYTOLÝZA
M.Leippe
CYTOTOXICKÉ PRODUKTY NEZÁVISLÉ NA KONTAKTU ROZŠIŘOVÁNÍ LÉZÍ
PROTEINÁZY S ÚČINKEM NA PROTEINY EXTRACELULÁRNÍ MATRIX: KOLAGEN FIBRONEKTIN LAMININ, ELASTIN
ÚNIK PŘED IMUNITNÍ ODPOVĚDÍ ANTIGENY AMÉB JSOU IMUNOGENNÍ: TVORBA PROTILÁTEK
PROTILÁTKY NEJSOU PROTEKTIVNÍ STRATEGIE ÚNIKU: • RYCHLÁ OBMĚNA MEMBRÁNY • DEGRADACE IMUNOGLOBULINŮ PROTEINÁZAMI • INHIBICE KOMPLEMENTU • POTLAČENÍ AKTIVACE MAKROFÁGŮ
JÁTRA nejčastěji infikovaný orgán mimo střevo > 98% případů
Hematogenní rozsev
forma magna
PATOLOGICKÉ ZMĚNY V JÁTRECH ŽÁDNÁ ZÁNĚTOVÁ REAKCE OBSAH ABSCESU: mrtvé hepatocyty, ztekucené buňky, buněčná drť na periferii trofozoity améb ohraničení vrstvou vaziva okolní jaterní parenchym beze změn LYTICKÁ NEKRÓZA kontaktní cytolýza způsobená amébami APOPTÓZA indukovaná proteázami améb
KLINICKÝ OBRAZ NÁKAZY Entamoeba histolytica
1. asymptomatická kolonizace tlustého střeva (f.minuta) u 10% osob se rozvine klinicky manifestní nákaza
2. symptomatická střevní amébóza (f.magna): amébová dyzenterie amébová kolitida 3. mimostřevní (extraintestinální) amébóza (f.magna): amébový absces
1. asymptomatická kolonizace tlustého střeva subjektivně bez obtíží: záchyt náhodný (návrat z endemické oblasti, kontakt)
stolice formovaná !!! nosič cyst
2. symptomatická střevní amébóza (a) amébová dyzenterie „walking“ lehký průběh PRŮJMY S HLENEM A KRVÍ MÁLO BUNĚČNÉHO EXUDÁTU BEZ TEPLOT BOLESTI V EPIGASTRIU
Odd.tropické medicíny 1.LF UK
Lehké postižení sliznice: solitérní vřídky oddělené neporušenou slizicí
b) amébová kolitida: těžký zánět tlustého střeva PRŮJMY S TMAVOU NATRÁVENOU KRVÍ ZAKRVÁCENÝM HLENEM KUSY TKÁNĚ ¾15 DENNĚ ČASTO HOREČKY ZVRACENÍ, PLYNATOST, SVALOVÉ KŘEČE DYSURIE KOMPLIKACE:
PERFORACE STŘEVA PERITONITIDA ČASTO KONČÍ SMRTÍ
Entamoeba
Odd.tropické medicíny 1.LF UK
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA STŘEVNÍ AMÉBÓZY PŘÍMÝ PRŮKAZ
• parazitologické vyšetření stolice (koprologické vyšetření) • vyšetření materiálu z rektoskopie či sigmoidoskopie • histologie • PCR
DIAGNÓZA STŘEVNÍ AMÉBÓZY SE OPÍRÁ O PŘÍMÝ PRŮKAZ E.histolytica
NEPŘÍMÝ PRŮKAZ
Vyšetření sérových protilátek: přínosné při symptomatické formě nákazy • je pozitivní při amébové dyzenterii a (!) při amébové kolitidě
PARAZITOLOGICKÉ VYŠETŘENÍ STOLICE 3 nefixované vzorky: odběry alespoň obden 1 vzorek čerstvý: do 2 hodin při pokojové teplotě ! NE do lednice !!! dyzenterie, kolitida: krev!!! průkaz f.magna (dyzenterických améb)
2 vzorky lze skladovat v lednici (max. 48 hodin; nesmí zmrznout!!!) průkaz cyst
Dyzenterické améby forma magna: nativní preparát
trvalý barvený preparát
pohlcené erytrocyty
pohlcené erytrocyty Odd.tropické medicíny 1.LF UK
Cysty: trvalý barvený preparát (Trichrom)
jádro
Odd.tropické medicíny 1.LF UK
VYŠETŘENÍ MATERIÁLU Z REKTOSKOPIE SIGMOIDOSKOPIE KOLONOSKOPIE
HISTOLOGIE
Masarykův onkol.ústav Brno
Případ
28letý muž byl přijat na interní oddělení nemocnice pro asi 2měsíce trvající noční pocení a horečky přes 38oC, slabost, zvýšenou únavu a bolest v pravém podžebří nezávislou na příjmu potravy, při pohybu občas zhoršení. Za 2 měsíce zhubl asi o 12 kg. Stolice pravidelná, formovaná, bez příměsi. Zobrazovací metody (CT) prokázaly v jaterním parenchymu cystický útvar o průměru 11 cm. Osobní anamnéza (OA): v posledních šesti letech pobýval opakovaně v Indii, před rokem navštívil Brazílii a Španělsko.
3. MIMOSTŘEVNÍ AMÉBÓZA jaterní amébový absces - pravý jaterní lalok - bolest v pravém podžebří - septické teploty - absces je zpravidla jeden - muži 18-50 let - muži 7x častěji než ženy - děti nemají amébové abscesy!!! - perforace (provalení do břišní dutiny) 80% smrtelná
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA (b) extraintestinální amébóza Nepřímý průkaz specifických sérových protilátek
IHA
• celkové imunoglobuliny • IgG: vysoká hladina
Materiál: 3-5 ml srážlivé krve Protilátky v séru přetrvávají rok i déle, pokles velmi pomalý.
ELISA IgG
Přímý průkaz améb v obsahu abscesu: velmi vzácný! sterilní, bezbuněčná drť lyzovaných hepatocytů
PCR
Odd.tropické medicíny 1.LF UK
Entamoeba histolytica x Entamoeba dispar 2 mikroskopicky nerozlišitelné druhy améb, které parazitují v tlustém střevě GENETICKÉ ROZDÍLY
PATOGENNÍ
E.histolytica
invazní
NEPATOGENNÍ
E.dispar
ODLIŠENÍ E.histolytica a E.dispar při nálezu cyst ve stolici metoda: PCR materiál: DNA isolovaná ze stolice
E.h. E.d.
PRAKTICKÝ VÝZNAM Při průkazu nepatogenní Entamoeba dispar není třeba vyšetřovanou osobu léčit!
Odd.tropické medicíny FNB
Balantidium coli
• patogenní střevní nálevník • parazituje v lumen tlustého střeva • je invazní, napadá střevní stěnu • vyvolává mimostřevní nákazy
Balantidium coli ROZŠÍŘENÍ kosmopolitní, nejčastěji v tropech a subtropech Hlavní ohniska výskytu: střední a jižní Amerika, střední Asie, Filipíny, Indonesie, Irán
REZERVOÁR NÁKAZY: prase
PŘENOS: vodou a potravou kontaminovanou výkaly prasat malé děti: koprofágie
ileum: excystace
1. TROFOZOIT velká, obrvená buňka J.T.Sullivan
v lumen tlustého střeva invazní: napadá sliznici, proniká do střevní stěny
2. CYSTA vylučovaná ve stolici: infekční, odolná, životaschopná týdny ve vlhké stolici J.T.Sullivan
KLINICKÉ FORMY: obdoba infekce Entamoeba histolytica a) STŘEVNÍ INFEKCE asymptomatické: nosiči symptomatické (95%: terminální ileum, tlusté střevo - esovitá klička, rektum) - mírná chronická forma (průjmy, zácpa, bolesti břicha): řadu let - těžší akutní forma: dyzenterie (ve stolici krev, hlen) apendicitida vzácně perforace střeva, peritonitida, smrt
b) MIMOSTŘEVNÍ INFEKCE: velmi vzácné nákaza jater, pleuritida, pneumonie LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA: jako E.histolytica
Dientamoeba fragilis • patogenní střevní bičíkovec (trichomonáda) • parazituje v lumen tlustého střeva (cékum-rektum, apendix) • neinvazní (?) • parazit člověka
EPIDEMIOLOGIE • rozšíření:
kosmopolitní
• prevalence: není známa (neznalost parazita, chybná laboratorní diagnostika) odhad: srovnatelná s nákazou G.intestinalis (Švédsko, Kanada) • výskyt: děti i dospělí - u dětí (6-9 let) častější než u dospělých - u chlapců < 10 let častější než u děvčat (Švédsko: až o 50%) - u dospělých: hromadná zařízení, semikomunální skupiny • časté samostatné nákazy, bez nálezu jiných střevních prvoků
ORGANISMUS Dientamoeba fragilis je střevní trichomonáda, NETVOŘÍ CYSTY POUZE 1 STÁDIUM: TROFOZOIT • kulovitý, 7-12 μm • jedno- nebo dvojjaderný (převaha: 60-80%) • jádro obsahuje 4-8 centrálně uložených chromatinových granul (diagnostický znak) • extranukleární mitotické vřeténko (diagnostický znak)
ORGANISMUS Dientamoeba fragilis je střevní trichomonáda bez bičíků, POHYB PANOŽKAMI
panožky: hranaté, tupé (diagnostický znak)
Odd.tropické medicíny 1.LF UK
JAK K NÁKAZE DOJDE: PŘENOS Dientamoba fragilis
• ŽÁDNÁ ODOLNÁ STÁDIA NEBYLA PROKÁZÁNA (dientaméby netvoří cysty?) • TROFOZOITY JSOU VELMI CITLIVÉ - rychle ztrácejí životaschopnost při pokojové teplotě - okamžitě odumírají ve vodě - odumírají v roztocích simulujících žaludeční šťávu • PERORÁLNÍ NÁKAZA LIDSKÝCH DOBROVOLNÍKŮ A PRIMÁTŮ SE OPAKOVANĚ NEZDAŘILA
PŘÍMÝ FEKÁLNĚ-ORÁLNÍ PŘENOS VODOU NEBO POTRAVOU KONTAMINOVANOU DIENTAMÉBAMI JE NEPRAVDĚPODOBNÝ
FEKÁLNĚ-ORÁLNÍ PŘENOS PROSTŘEDNICTVÍM VAJÍČEK ROUPŮ JE PRAVDĚPODOBNÝ, ale neprokázaný Enterobius vermicularis roup dětský
Odd.tropické medicíny 1.LF UK
• SOUBĚH NÁKAZ D.fragilis A E.vermicularis • HISTOPATOLOGICKÁ ANALÝZA APENDIXŮ PŘI KO-INFEKCI: nález „malých améb“ ve vajíčkách roupů • ÚSPĚŠNÁ NÁKAZA D.fragilis 3 LIDSKÝCH DOBROVOLNÍKŮ vajíčky roupů od pacienta s ko-infekcí (dientaméb a roupů)
Dientamoeba fragilis v celém tlustém střevě, často v apendix Nákaza je klinicky manifestní u 25% dospělých a až u 90% dětí
• klinický obraz: obvykle chronické průjmy bez krve, bolest břicha ??? zánět slepého střeva periferní eosinofilie (děti) LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA Přímý mikroskopický a/ nebo kultivační průkaz dientaméb Materiál: čerstvá stolice, ihned zpracovaná !!! NESMÍ DO LEDNICE !!!
KULTIVACE: dvoufázová Dobellova půda + škrob
Odd.tropické medicíny 1.LF UK
NATIV
TRVALÝ BARVENÝ PREPARÁT
DIAGNOSTICKÉ ZNAKY • DVOJJADERNÉ FORMY • EXTRANUKLEÁRNÍ MITOTICKÉ VŘETÉNKO
PCR AMPLIFIKACE SPECIFICKÉ DNA ZE STOLICE Isolace DNA: z nefixované stolice zmražená (- 20oC, 1 týden) nezmražená (4oC, max 48 hodin) Primery: navrženy dle sekvence genu pro SSU rRNA
STŘEVNÍ PARAZITIČTÍ PRVOCI PATOGENNÍ Giardia intestinalis Cryptosporidium parvum Cyclospora cayetanensis Isospora belli Entamoeba histolytica Dientamoeba fragilis Balantidium coli
B.Koudela
Giardia • tenké střevo • extracelulárně
Cryptosporidium, Cyclospora, Isospora • primárně tenké střevo (Cryptosporidium: celé střevo …)
• intracelulárně • nevniká do stěny střeva
Entamoeba histolytica Balantidium coli • tlusté střevo • extracelulárně • vniká do stěny střeva • mimostřevní nákazy
ALIMENTÁRNÍ NÁKAZY PŮSOBENÉ PRVOKY PŘENOS: INFEKČNÍMI STÁDII VYLUČOVANÝMI DO PROSTŘEDÍ ZDROJ NÁKAZY: člověk: giardióza, amébóza, kryptosporidióza, cyklosporóza, isosporóza, infekce D.fragilis (?vajíčky střevních helmintů), balantidióza, + jiní savci: giardióza, kryptosporidióza, balantidióza INFEKČNOST: ihned po vyloučení: Giardia, Entamoeba, Cryptosporidium, Balantidium zrání na vzduchu: Cyclospora, Isospora FORMA NÁKAZY: střevní: giardióza, amébóza, kryptosporidióza, cyklosporóza, isosporóza, infekce D.fragilis, balantidióza
+ mimostřevní: amébóza, balantidióza, (kryptosporidióza …) HL. PŘÍZNAK STŘEVNÍ NÁKAZY: PRŮJEM PRŮJEM bez zánětu: giardióza, kryptosporidióza, cyklosporóza, isosporóza, infekce D.fragilis + zánět: amébóza, balantidióza
STŘEVNÍ PARAZITIČTÍ PRVOCI NEPATOGENNÍ bičíkovci:
améby:
Enteromonas hominis
Entamoeba dispar
Chilomastix mesnili
Entamoeba hartmanni
Retortamonas intestinalis
Entamoeba coli
Pentatrichomonas hominis
Endolimax nana Jodamoeba bütschlii
NEVYVOLÁVAJÍ ONEMOCNĚNÍ
MORFOLOGIE JADER STŘEVNÍCH AMÉB = diagnostický znak 1. Entamoeba histolytica/dispar 2. Entamoeba coli 3. Endolimax nana 4. Jodamoeba bűtschlii 5. Dientamoeba fragilis (bičíkovec)
Chilomastix mesnili
Enteromonas hominis
Jodamoeba bütschlii