Použití v laboratorních podmínkách
Obsah Velcorin® – použití v laboratorních podmínkách
Strana 3–5
Úvod
Strana 3
Bezpečnostní opatření
Strana 3
Pracovní postup (senzoricky)
Strana 4
Pracovní postup (mikrobiologicky)
Protokol: laboratorní pokus Velcorin® Pokyny Zobrazení
Strana 4–5
Strana 6–8 Strana 6 Strana 7–8
Velcorin® – použití v laboratorních podmínkách
Úvod Velcorin® (DMDC) je v průmyslu výroby nápojů dávkován do nápojů bezprostředně před stáčením pouze pomocí speciálních dávkovacích zařízení. Pouze tak je zaručeno rovnoměrné dávkování, ekvivalentní průtoku, homogenní rozptýlení při maximální době působení a přísné dodržení nezbytných bezpečnostních opatření vyškoleným personálem. Při mikrobiologických pracích v laboratoři nelze používat dávkovací zařízení. Protože se Velcorin® v nápoji velmi rychle rozpadá, je mísitelný s vodou pouze v malém rozsahu a vykazuje nízkou rychlost rozpouštění, doporučujeme pro práce v laboratorních podmínkách zde popsaný, speciální pracovní postup.
Bezpečnostní opatření Při manipulaci s přípravkem Velcorin® musí být dodržena všeobecná doporučená bezpečnostní opatření pro chemikálie. Musí být dodržován aktuální bezpečnostní list. Tento obsahuje další údaje ke značení, přepravě a skladování jakož i informace o zacházení, bezpečnosti produktu, toxicitě a vztahu k životnímu prostředí. Bezpečnostní list musí být v laboratoři k dispozici; další informace o přípravku Velcorin®, jako postup v případě úrazu, opatření první pomoci etc., by měly být také k dispozici jako dokument „Bezpečnost a manipulace s přípravkem Velcorin®“! Upozorňujeme zejména na následující: Při veškerých pracích s přípravkem Velcorin® je nutné nosit osobní ochranné vybavení (laboratorní/pracovní oděv, těsně přiléhající ochranné brýle, plastové rukavice na jedno použití). S produktem manipulovat pouze při dostatečném větrání (digestoř), resp. není-li digestoř k dispozici, je nutné nosit ochranu dýchacích cest. 3
Pracovní postup (senzoricky): 1. Dávku nápoje zvolit pouze tak velkou, aby mohla být v co nejkratší době stočena (cca do 10 min.). 2. Pracovat při pokojové teplotě. Přitom dbát na to, že při 20 °C/68 °F (= pokojová teplota) je za cca 17 minut zhydrolyzováno již 50 % přídavku Velcorin®. Teplota nápoje musí odpovídat teplotě místnosti. 3. Dávkování, vztaženo na Velcorin®, se zpravidla pohybuje mezi 80–200 μl/L hotového nápoje = 100–250 mg/L hotového nápoje. Potřebné množství dávky přípravku Velcorin® se vypočte na základě požadované koncentrace přípravku Velcorin® a objemu hotového nápoje, použitého při pokusu, a přidá se pomocí vhodné pipety do nápoje. Poté intenzivně protřepat (10krát, přičemž jednou protřepat = nahoru a dolů, 30 cm za 10 s). Při stáčení dbát na to, aby byly uzávěry navlhčeny ošetřeným nápojem. 4. Po cca 4hodinovém skladování při pokojové teplotě (20 °C/68 °F) je Velcorin®, který byl do nápoje přidán, kompletně zhydrolyzován. Před uplynutím hydrolýzy nesmějí být nápoje, ošetřené přípravkem Velcorin®, ochutnávány/požívány. Pracovní postup (mikrobiologicky): 1. K přezkoušení účinnosti přípravku Velcorin® se provede dodatečná kontaminace škodlivinami nápojů. Nápoj by měl být nejprve sterilizován vhodnými metodami. Poté se do nápoje přidají zkušební zárodky (např. 5, 50 a 500 cfu/mL). Poté se přidá Velcorin® dle výše uvedeného předpisu.
4
2. Vzorky jsou inkubovány v souladu s optimální teplotou pro růst mikroorganizmů (např. 26°/79 °F a 37°C/99 °F). Přitom by měly být v závislosti na cíli pokusu ošetřené nápoje sledovány po dobu 4–6 týdnů (nebo déle). Podle plánu zkoušek se pak po 24 h, a po 1, 2, 4, 6 (8 a 12 týdnech) odebírají za sterilních podmínek vzorky k vyhodnocení. Kromě optického vyhodnocení lze jako metody sledování uvést: •M etoda kultivace smísením podle Kocha (agar) plate method): Definované množství nápoje (10 mL) se zapracuje do 30 mL vhodné (viz příloha živné půdy) sterilní agarové živné půdy (nasadit v souladu s protokolem výrobce) a po ztuhnutí se inkubuje při příslušné teplotě po dobu 2–5 dní (je nutné dbát na optimální teplotu pro růst mikroorganizmů a na aerobní/anaerobní inkubaci). Poté se vzorky vyhodnotí. •M embránová filtrace (vhodná pouze pro čiré, řídké nápoje): Po 24 hodinách se podle očekávaného počtu zárodků přefiltruje 10 až 100 mL ve vhodném zařízení přes membránový filtr. Filtrační destičky se vloží do Petriho misek na živné půdy (používat nespecifickou nebo specifickou živnou půdu), nechá se inkubovat 2–7 dní při příslušné teplotě a poté se vizuálně zkontroluje růst mikroorganizmů. •E xistuje také možnost logaritmického testu zničení. K vyhodnocování lze používat systémy firem Neogrid, Sartorius, Merck atd. Je nutné dodržovat protokol výrobce.
K prokazování škodlivých látek v nápojích doporučujeme následující živné půdy: Škodliviny v nápojích
Živné půdy
Všeobecně
Agar s pomerančovým extraktem, např. Merk 1.10673
Kvasinky a plísně
Agar se sladovým extraktem, např. Oxoid CM 59
Baktérie kyseliny mléčné/kyseliny octové
Agar MRS, např. Oxoid CM 361
Baktérie
Blood-Agar-Base, např. Oxoid CM 55
5
Protokol: laboratorní pokus Velcorin®
Pokyny: 1. S přípravkem Velcorin® smí pracovat pouze zkušený laboratorní personál (bezpečné zacházení s pipetami a chemikáliemi). 2. K provádění pokusů je oprávněn pouze distribučním partnerem zaškolený personál. Prezentace vyobrazení nenahrazuje předvedení a zaškolení distribučním partnerem přímo na místě! 3. Přesný postup naleznete v předchozím dokumentu „Aplikace v laboratorních podmínkách“.
6
Protokol: laboratorní pokus Velcorin®
1
2
3
4
5
6
7
8
9
7
Protokol: laboratorní pokus Velcorin®
10
11
12
13
14
15
16
17
18
8
Předcházející informace a naše uživatelsko-technické poradenství slovem, písmem a pokusy následují podle našich nejlepších znalostí, platí však pouze jako nezávazné informace, také ve vztahu na možná ochranná práva třetích osob. Poradenství Vás neosvobozuje od vlastní zkoušky našich aktuálních poradenských informací – obzvláště našich letáčků bezpečnostních údajů a technických informací – a našich produktů ohledně jejich způsobilosti pro zamýšlenou metodu a účel. Aplikace, použití a zpracování našich produktů a na základě našeho uživatelsko-technického poradenství Vámi vyrobených produktů následuje mimo našich kontrolních možností a nachází se tedy výhradně v oblasti Vaší zodpovědnosti. Prodej našich produktů následuje podle pravidel našich aktuálních všeobecných prodejních a dodavatelských podmínek. Vydání 2009–06 Velcorin® je nebezpečná látka a vykazuje dle směrnic ES následující zdravotní rizika: zdraví škodlivá (při spolknutí), jedovatá (při vdechnutí), leptavá.
