Použití komponent v diagnostice alergií RNDr. Petr Šotkovský, Ph.D. Tel.: +420 724 756 980
Email:
[email protected]
ImmunoCAP®
Směsi 80
Extrakty přes 600
Komponenty přes 100
Značení komponent
včela Api m 1
arašídy Ara h 2
bojínek Phl p 1 vejce Gal d 1
bříza Bet v 1
CCD!
Cross-reactive Carbohydrate Determinants
• nJug r 2 vlašský ořech
nCry j 1 kryptomerie japonská nPhl p 4 bojínek
• nCup a 1 cypřiš
nPla a 2 platan
Marketing info no. 37, 2012
Systém ImmunoCAP®
• 3D celulózový polymer • Velký vnitřní povrch • Standardní jednotky U/ml • Kvantitativní stanovení • mg alergenu na test
Řešení dvojí pozitivity s rekombinantními komponenty bez CCD •50-60% pacientů: dvojitá pozitivita sIgE na včelu i vosu •Klinická reakce pouze na jednu z nich •Zkřížená reakce vlivem CCD (Cross-reactive Carbohydrate Determinants) • Rekombinantní komponenty bez CCD pomohou rozlišit:
- společnou citlivost na včelu i vosu - křížovou reaktivitu závislou na CCD
Přesná diagnostika = použití extraktu i rekombinantní komponenty
DOPORUČENÉ TESTY: MUXF3 CCD (o214) ImmunoCAP Tryptase Měření hladiny tryptázy před použitím SIT Cukr z bromélie
zvážit i včelu (pozitivní sIgE, kožní testy, BAT na oba jedy)
Doplňující informace • sIgE proti jedům: 0,1-0,35 U/ml = těžká reakce u některých pacientů • V době reakce sIgE negativní – nový odběr po 5-6 týdnech • Není žádná zkřížená reakce mezi včelí rApi m 1(bez CCD) a vosí rVes v 1 • 80% pacientů senzitivita na rApi m 1. Pokud je negativní, možná reakce s rApi m 2 a nApi m 4 (pouze ISAC) • 90% pacientů rozpoznává Ves v 1 nebo Ves v 5 • Ves v 1 + Ves v 5 dohromady zvyšuje senzitivitu na 96,3% (jen Ves v 5 – 90%) • Skupina s dvojí pozitivitou – jen Ves v 5 pozitivní u 50%. Ves v 5 + Ves v 1 zvýší senzitivitu na 80% • Pro kvalitní diagnostiku je třeba Ves v 1 i Ves v 5
Žena, 45 let • Bodnutí neznámým hmyzem do prostředníčku.
• Po několika minutách – svědění – zrudnutí v místě vpichu – dušnost a svírání v krku • Zlepšení po podání glukokortikoidů a antihistaminik.
Konvenční vyšetření Skin-prick-test jed včely (100 μg/ml) jed vosy (300 μg/ml) ImmunoCAP® • jed včely • jed vosy
i1 i3 i77 • ImmunoCAP® Total IgE • ImmunoCAP® Tryptase
++ ++ 5.9 kUA/l 1.3 kUA/l 1.0 kUA/l 16.7 kUA/l 5.4 μg/l
Molekulární diagnostika pomocí ® komponent ImmunoCAP ImmunoCAP® Komponenty Jed včely
rApi m 1
4.7 kUA/l
Jed vosy
rVes v 1 rVes v 5 rPol d 5
<0.1 kUA/l <0.1 kUA/l <0.1 kUA/l
CCD
MUXF3
1.3 kUA/l
Muž, 68 let • Bodnutí neznámým hmyzem do pravého ramene.
• Po 30 minutách: – pocit tepla – svědění – vyrážka – otok – závrať • Zlepšení po podání glukokortikoidů intravenózně a antihistaminik orálně.
Konvenční diagnostika Skin-prick-test jed včely jed vosy ImmunoCAP® Jed včely Jed vosy ImmunoCAP® Total IgE ImmunoCAP® Tryptase
(100 μg/ml) (100 μg/ml)
i1 i3
+ +
3.5 kUA/l 4.0 kUA/l 460 kUA/l 1.1 μg/l
Molekulární diagnostika pomocí ® komponent ImmunoCAP ImmunoCAP® komponenty Jed včely
rApi m 1
3.9 kUA/l
Jed vosy
rVes v 1 rVes v 5
1.1 kUA/l 3.7 kUA/l
CCD
MUXF3
<0.1 kUA/l
ImmunoCAP komponenty pomáhají v: • posouzení rizika reakce pomocí přesného kvantitativního měření sIgE protilátek. • rozlišení mezi primární a zkříženou alergickou reakcí. • rozhodování s výběrem optimální léčby. • zlepšení života pacienta.
Alergie na ořechy – rostoucí tendence Ořechy jsou oblíbenou součástí stravy. Paralelně vzrůstá počet alergických pacientů.
Některé komponenty způsobují systémové reakce, jiné vedou k toleranci.
Některé komponenty mohou způsobit alergii vlivem zkřížené reakce, jiné ne.
ImmunoCAP komponenty ořechů Profilin
PR-10 protein
Profilin
Ara h 8
Ara h 9
Ara h 1 Ara h 2 Ara h 3
LÍSKOVÝ OŘECH
Profilin
Cor a 1
Cor a 8
Cor a 9 Cor a 14
VLAŠSKÝ OŘECH
Profilin
Jug r 3
Jug r 1
PARA OŘECH
Profilin
Ber e 1
KEŠU
Profilin
Ana o 3
ARAŠÍDY
LTP
Storage Proteins
Kešu - nový arašíd?
Savvas
Arašíd – 1 500 publikací/ Kešu – 100 publikací
Vyšší riziko těžkých alergických reakcí (kešu 74%, arašíd 30%) Symptomy se objevují po první expozici, velmi malá dávka (vůně, dotek bez požití) Kešu vs pistácie – ořeší dvojčata
Alergie na vlašský ořech Odhadovaná prevalence kolem 0,5% populace, u dětí až 4% Symptomy se objevují po první expozici, velmi malá dávka Může způsobit potravinami indukovanou anafylaxi ve spojení se cvičením, léky nebo alkoholem.
Komponenty vlašského ořechu Reakce na Jug r 1 – vyšetření také na kešu, lískový a pekanový ořech Reakce na Jug r 3 – možná reakce s LTP v broskvích, jablcích, hroznech nebo dalších ořechách.
Alergie na lískový ořech Patří mezi 5 hlavních potravin způsobujících alergické reakce Prevalence 0,2% u dětí a 4,5% u dospělých Skrytý alergen v pečivu a sušenkách
Komponenty Cor a 9 a Cor a 14 lískového ořechu (Masthoff et al., J Allergy Clin Immunol 2013)
Obě komponenty jsou vysoce specifickým markerem pro alergii na lískový ořech. Většina dětí a téměř polovina dospělých má protilátky proti těmto komponentám. Komponenty
Specificita (%)
Cut-off (kU/L)
Děti
Dospělí
nCor a 9
93
1
1
rCor a 14
98
5
1
Kazuistika – Sofie, 8 let Symptomy (v 6 letech): Předchozí alergie na mléko Rinokonjunktivitida během jara a časného léta Orální symptomy po požití lískových ořechů Výsledky tesů: SPT
ImmunoCAP (kU/L)
bříza
+3
3,4
lískový ořech
+2
0,6
Diagnóza: alergie na pyl břízy Doporučení: orální antihistaminika během pylové sezóny, bez lískových ořechů
Symptomy (8 let): Těžký angioedém po musli, na pohotovosti antihistaminika a orální steroidy (bez epinefrinu) ImmunoCAP s extrakty (kU/L): Lískový ořech 3,9 Bříza 5,3
ImmunoCAP s komponenty (kU/L): Cor a 1 2,2 Cor a 9 1,3 Cor a 8 <0,1 Cor a 14 2,0 Bet v 1 4,5
Konečná diagnóza: alergie na lískový ořech a pyl břízy Komentář: striktní vyloučení lískových ořechů, pohotovostní balíček
ImmunoCAP komponenty pomáhají: posoudit riziko reakce pomocí přesného kvantitativního měření sIgE protilátek. rozlišení mezi primární a zkříženou alergickou reakcí. s rozhodnutím optimální léčby. zlepšit život pacienta.
Diagnostika Shoda mezi symptomy a testy sIgE SPT vs sIgE Kvalita a standardizace alergenů? Několik pylů – primární nebo křížové reakce?
Komponenty břízy mohou pomoci v: Identifikaci „pravé“ alergie na pyl břízy (Bet v 1) Křížová reakce (Bet v 2, Bet v 4, Bet v 6) Potravinové alergie spojené s pylem břízy (Bet v 1, Bet v 6)
Nalezení vhodných pacientů pro SIT Bet v 1 SIT → úleva od symptomů Minoritní křížově reagující alergeny → slabší výsledek SIT
Pyl břízy – návrh testování
Kazuistika
Výsledky vyšetření sIgE extraktů (U/ml)
Výsledky vyšetření sIgE komponent (U/ml)
Děkuji za pozornost