PERUBAHAN JUMLAH DAN DIAMETER SERAT OTOT GASTROKNEMIUS DAN SOLEUS PADA TIKUS BERUSIA 1 HARI, 3 BULAN, DAN 12 BULAN

Perubaha n j umlah dan di ameter ser at otot gastrok nemius da n soleus Damianus Journal of Medicine; Vol.13 No.1 Februari 2014: hlm. 39–49pa da tik us ber usi a 1 ha ri , 3 bulan , dan 12 bulan

ARTIKEL PENELITIAN

PERUBAHAN JUMLAH DAN DIAMETER SERAT OTOT GASTROKNEMIUS DAN SOLEUS PADA TIKUS BERUSIA 1 HARI, 3 BULAN, DAN 12 BULAN CHANGES IN NUMBER AND DIAMETER OF MUSCLE FIBER OF GASTROCNEMIUS AND SOLEUS IN RATS AGED 1 DAY, 3 MONTHS, AND 12 MONTHS Veronika Maria Sidharta

Departemen Histologi, Fakultas Kedokteran Unika Atma Jaya, Jl. Pluit Raya No. 2, Jakarta Utara 14440 Korespondensi: Veronika Maria Sidharta, Departemen Histologi, Fakultas Kedokteran Unika Atma Jaya, Jl. Pluit Raya No. 2, Jakarta Utara 14440. E-mail: [email protected]

ABSTRACT Background: Skeletal muscle is a dynamic tissue. Its development and regeneration processes are influenced by various growth factors. There are many opinions on how the number and diameter of muscle fiber changes during developmental period. The total number of skeletal muscle fibers has traditionally considered unchanged. Objectives: The purpose of this study was to determine whether there is an increase in the number and diameter of skeletal muscle fiber in the rats of 3 different age groups. It is assumed that with age increase, there will be increment of the number and diameter of skeletal muscle. Methods: This is a cross-sectional study. Subjects are male Sprague-Dawley rats, divided into 3 age groups: 1-4 days (A), 3-4 months (B), and 12-16 months (C). Gastrocnemius and soleus muscle was chosen as each represent different types of skeletal muscle. Slides were made and stained with hematoxylineosin. Microphotographs were analysed using Digimizer Image Analyzer. Results: Mean number of muscle fiber from gastrocnemius muscle are 3127±68, 10766±380, and 11867±387, from soleus muscle are 307±15, 2866±281, and 2936±162 for the group A, B, and C, respectively. Mean diameter of muscle fiber from gastrocnemius muscle are (5.64±0.12) µm, (22.14±1.31) µm, and (38.61±1.16) µm, from soleus muscle were (5.42±0.9) µm, (21.11±1.21) µm, and (27.67±0.89) µm for the group A, B, and C, respectively. Conclusion: The number and diameter of skeletal muscle fiber is increase according to age. Key Words: fiber diameter, fiber number, skeletal muscle development

ABSTRAK Latar belakang: Otot rangka adalah jaringan yang dinamis. Proses perkembangan dan regenerasinya dipengaruhi oleh berbagai faktor pertumbuhan. Banyak pendapat yang dikemukakan mengenai perubahan jumlah dan diameter serat otot selama masa perkembangan. Pada awalnya jumlah serat otot rangka dianggap tidak mengalami perubahan. Tujuan: Penelitian ini bertujuan memastikan adanya peningkatan jumlah dan diameter serat otot rangka pada 3 kelompok usia tikus. Dihipotesiskan bahwa

Vol. 13, No.1, Februari 2014

39

DAMIANUS Journal of Medicine

seiring bertambahnya usia akan terjadi peningkatan jumlah dan diameter otot rangka. Metode: Desain penelitian ini adalah perbandingan potong lintang. Subjek adalah tikus Sprague-Dawley jantan usia 1-4 hari (A), 3-4 bulan (B), dan 1216 bulan (C). Serat otot gastroknemius dan soleus dipilih karena mewakili jenis serat otot rangka yang berbeda. Sediaan diwarnai dengan pewarnaan hematoksilin-eosin. Fotomikro dianalisis dengan menggunakan Digimizer Image Analyzer. Hasil: Secara berurutan dari kelompok A, B, dan C, rerata jumlah serat otot gastroknemius adalah 3127±68, 10766±380, dan 11867±387, sedangkan rerata jumlah serat otot soleus adalah 307±15, 2866±281, dan 2936±162. Kemudian secara berurutan pula dari kelompok A, B, dan C, rerata diameter serat otot gastroknemius adalah (5,64±0,12) µm, (22,14±1,31) µm, dan (38,61±1,16) µm, sedangkan rerata diameter serat otot soleus adalah (5,42±0,9) µm, (21,11±1,21) µm, dan (27,67±0,89) µm. Kesimpulan: Jumlah dan diameter serat otot rangka mengalami peningkatan seiring pertambahan usia. Kata Kunci: diameter serat, jumlah serat, perkembangan otot rangka

PENDAHULUAN

sulin. Hormon-hormon ini akan meningkatkan

Pada pertumbuhan pascalahir, serat otot

sintesis protein anabolik dan penyerapan protein

bertambah panjang dan tebal, hingga mencapai

oleh serat otot. Sebaliknya serat otot juga bisa

diameter 10-70 µm, tergantung jenis otot dan

menjadi lebih tipis bila tidak digunakan dalam

spesiesnya. Serat-serat otot dari otot yang samapun bisa bervariasi tebalnya. Pada masa dewasa, serat otot dapat mengalami peningkatan diameter lebih lanjut sebagai respons terhadap

waktu cukup lama, misalnya akibat imobilisasi dengan plaster of Paris (gips) karena tulang patah, disebut atropi akibat tidak digunakan (atrophy of disuse).

aktivitas otot yang terus-menerus, disebut

Selain hipertrofi, juga terjadi hiperplasia, yaitu per-

hipertrofi akibat penggunaan (hypertrophy of

tambahan jumlah serat otot.2,3 Ada dua meka-

use).1

nisme terjadinya hiperplasia otot. Pertama adalah

Hipertrofi otot bisa terjadi pada miofibril atau sarkoplasma. Hipertrofi miofibrilar disebabkan tegangan otot tingkat tinggi, sedangkan hipertrofi sarkoplasmik disebabkan kelelahan glikolitik tingkat tinggi. Olah raga beserta kerusakan dan deplesi yang disebabkannya akan meningkatkan

pembelahan serat otot melalui pembelahan longitudinal serat otot.2,4,5 Kedua adalah pembentukan serat baru yang dihasilkan oleh sel satelit.2,6-12 Hiperplasia disebabkan oleh tegangan otot yang sangat tinggi disebabkan kontraksi dan peregangan.

berbagai hormon, seperti somatotropin (growth

Berkat adanya sel satelit ini pula, bila terjadi ke-

hormone, GH), somatomedin (terutama insulin-

rusakan serat otot, rangka dapat memperbaiki

like growth factor-1, IGF-1), testosteron, dan in-

diri, sehingga tidak terjadi pengurangan massa

40


Perubaha n j umlah dan di ameter ser at otot gastrok nemius da n soleus pa da tik us ber usi a 1 ha ri , 3 bulan , dan 12 bulan

Gambar 1. Reaksi seluler pada pembentukan otot rangka embrional yang terulang pada proses regenerasi otot rangka11

otot. Kerusakan serat otot dapat terjadi akibat

Pada model aves dan mamalia, sel satelit secara

penggunaan sehari-hari (wear and tear). Proses

dinamis berperan dalam perbaikan otot rangka

pertumbuhan otot dan rangsangan pada otot,

sepanjang masa dewasa, kemudian aktivitasnya

misalnya olah raga atau terjadinya kerusakan,

mulai menurun pada proses penuaan. Proses

dapat mengaktifkan sel satelit yang kemudian

penuaan akan meningkatkan kerentanan sel

akan mengalami serangkaian respons selular

satelit terhadap apoptosis, sehingga akan terjadi

yang kesinambungan. Sel satelit berproliferasi

penurunan jumlah sel satelit. Akibatnya terjadi pe-

dan berdiferensiasi menjadi mioblas lalu miosit,

nurunan respons regenerasi bila terjadi kerusak-

berfusi satu sama lain atau dengan serat otot

an. Perubahan ini diduga disebabkan oleh per-

yang lama. Proses ini sama dengan yang terjadi

ubahan pada lingkungan mikro (niche) yang akhir-

pada masa embrional.6,11 Dengan demikian,

nya menghambat regulasi sel satelit. Proses

terbentuklah serat otot rangka yang baru untuk

penuaan juga memengaruhi komposisi matriks

menggantikan yang rusak. (Gambar 1)

ekstraselular di sekitar otot, termasuk berbagai

Proses penuaan akan menyebabkan penurunan fungsi dan massa otot rangka (atropi). Otot tetap harus digunakan dan pasti akan mengalami

molekul dan faktor-faktor pertumbuhan yang disekresinya, yang berpengaruh pada proses regenerasi otot rangka.8-12

kerusakan yang memerlukan perbaikan. Sel

Berkaitan dengan proses penuaan otot rangka,

punca, dalam hal ini sel satelit, berperan untuk

terdapat berbagai pendapat mengenai perbedaan

mempertahankan jumlah dan fungsi serat otot,

jumlah dan diameter otot rangka antar usia. Ada

serta memperbaiki kerusakan. Namun seiring

yang berpendapat bahwa jumlah serat otot

bertambahnya usia, kemampuan otot rangka

rangka akan berkurang seiring bertambahnya

yang rusak untuk memperbaiki diri akan menurun.

usia dari lahir sampai tua. Pendapat lain me-


41


nyatakan bahwa penurunan jumlah serat baru

Coba Puslitbang Biomedis dan Farmasi Depkes

terjadi sejak usia 60 tahun. Penelitian-penelitian

RI. Kaji etik dikeluarkan oleh Litbangkes Depkes

pada berbagai mamalia lainnya (tikus, anjing,

RI. Penelitian dilakukan di Laboratorium

babi, dan sapi) menunjukkan adanya penurunan

Departemen Histologi Fakultas Kedokteran Uni-

jumlah serat otot rangka dari usia muda ke de-

versitas Indonesia.

wasa. Di lain pihak ada juga yang justru tidak menemukan perubahan jumlah serat otot mencit usia satu hari sampai enam bulan. Penelitian pada perkembangan otot pterigoideus tikus berbagai usia menunjukkan bahwa jumlah serat otot pada tikus jantan bertambah dua kali lipat antara sejak lahir dan enam minggu kemudian. Peningkatan ini kemudian diikuti oleh penurunan sampai lebih dari 10% antara usia enam minggu sampai tahap dewasa. Jumlah serat pterigoideus lateral meningkat sekitar 45% antara sejak lahir hingga dewasa.13 Penelitian perkembangan pada 12 ekor tikus dari usia remaja (25 hari) sampai dewasa (365 hari) menunjukkan bahwa tidak terjadi perubahan, dalam hal ini penurunan jumlah serat dari usia remaja sampai dewasa. 14 Beberapa penelitian menemukan bahwa pada proses penuaan akan terjadi atropi otot rangka, terutama tipe II. Tetapi beberapa penelitian yang lain justru tidak menemukan adanya perbedaan

Jenis kelamin ditentukan sama, yaitu jantan, untuk menyamakan kondisi hormonal subjek penelitian, karena hormon (estrogen/testosteron) merupakan salah satu faktor yang memengaruhi perkembangan otot. Penentuan usia neonatus untuk melihat kondisi pada saat laju pertumbuhan dan perkembangan sangat pesat, serta pada saat ini regenerasi diketahui berlangsung sangat baik. Usia remaja dipilih 3-4 bulan karena sudah masuk masa puber, sehingga sudah ada pengaruh hormon tapi tidak terlalu jauh dengan usia neonatus dan usia dewasa, dibandingkan dengan usia manusia kira-kira 15 tahun, perkembangan masih cukup pesat, kapasitas regenerasi masih baik. Usia dewasa dipilih dengan membandingkan dengan usia manusia kira-kira 30 tahun, yaitu sudah mencapai masa akhir perkembangan, semua organ bisa dikatakan sudah matur, juga kapasitas regenerasi sudah menurun.15,16 (Tabel 1 dan 2)

diameter.9-12

Permasalahan yang timbul adalah ketika harus METODE

mengambil otot gastroknemius dan otot soleus dari tungkai belakang tikus neonatus karena

Hewan Coba

masih sangat halus sehingga sulit dibedakan.

Subjek penelitian adalah 27 ekor tikus putih jantan

Oleh karena itu, keseluruhan tungkai belakang

galur Sprague-Dawley, dibagi dalam tiga kelom-

diambil dan diproses sampai menjadi blok parafin

pok usia, yaitu neonatus (kelompok A, usia 1-4

dengan mengatur posisi tungkai sedemikan rupa,

hari), remaja (kelompok B, usia 3-4 bulan), dan

sehingga diperkirakan akan mendapatkan

dewasa (kelompok C, usia 12-16 bulan).15 Sub-

potongan melintang terbaik yang mengenai kedua

jek penelitian diperoleh dari Laboratorium Hewan

otot yang diinginkan. Setelah dilakukan

42



Tabel 1. Perbandingan usia manusia dengan usia tikus pada berbagai tahapan kehidupan16

Periode

Usia tikus

Usia manusia

Sepanjang hidup Masa penyapihan

13,2 hari 42,4 hari

= 1 tahun

Masa prepubertas

3,3 hari

Masa remaja

10,5 hari

Dewasa Menua

11,8 hari 17,1 hari

Rerata

16,4 hari

Tabel 2. Perbandingan Usia Tikus dengan Usia Manusia15,16 Usia tikus (bulan)

Usia tikus (tahun)

Usia tikus dibandingkan dengan usia manusia

1,5 bulan (pubertas)

0,125 tahun

12,5 tahun (pubertas)

6 bulan (kematangan sosial)

0,5 tahun

18 tahun (kematangan sosial)

12 bulan

1 tahun

30 tahun

18 bulan

1,5 tahun

45 tahun

24 bulan

2 tahun

60 tahun

30 bulan

2,5 tahun

75 tahun

36 bulan

3 tahun

90 tahun

42 bulan

3,5 tahun

105 tahun

45 bulan

3,75 tahun

113 tahun

48 bulan

4 tahun

120 tahun

pewarnaan, identifikasi kedua otot dilakukan

JPEG. Pada sediaan otot neonatus, fotomikro otot

berdasarkan posisinya terhadap kulit, tulang tibia,

gastroknemius dan otot soleus langsung dilaku-

dan fibula, serta orientasi dengan otot-otot

kan tanpa pemindaian, setelah sebelumnya diten-

lainnya.17 (Gambar 2)

tukan terlebih dahulu posisi kedua otot tersebut. Dari masing-masing sediaan diambil 5 lapangan

Metode Penghitungan

pandang besar (10x40) yang dipilih secara acak,

Pada tahap pertama, diambil tiga buah sediaan

lalu dibuat fotomikro dengan kamera digital Kodak

otot terbaik dari tiap subjek (otot gastroknemius

EasyShare V1003 dalam format JPEG. Mikro-

dan otot soleus), yaitu bagian median panjang

meter okuler sudah terpasang di lensa okuler, se-

otot, paramedian kiri, dan paramedian kanan.

hingga pada foto akan terlihat dan bisa dijadikan

Pada subjek remaja dan dewasa, sebelumnya

panduan pengukuran. Setelah itu, dengan piranti

sediaan dipindai dengan pemindai Canoscan

lunak Digimizer Image Analyzer (versi 3.6.1.0,

N640P, kemudian hasil disimpan dalam format

Belgium) dilakukan penilaian.


43


Gambar 2. Skema anatomis tungkai belakang tikus17

Hasil pemindaian sediaan otot tikus remaja dan

HASIL

dewasa dianalisis luas masing-masing penampang ototnya (satuan mm2). Fotomikro (neonatal, remaja, dan dewasa) dianalisis dengan

Gambaran Histologi Otot Rangka Ketiga Kelompok Usia

Digimizer Image Analyzer, ditentukan area peng-

Gambaran histologi otot gastroknemius dan so-

hitungan dengan panduan mikrometer, lalu

leus tikus neonatus memperlihatkan sel-serat

dihitung seluruh jumlah serat yang ada dalam area

otot yang berukuran kecil, inti terletak di tepi, rasio

tersebut dengan sistem tagging. Dihitung rerata-

inti dan sitoplasma lebih kecil dibandingkan serat

nya dari kelima lapangan pandang. Penghitungan

otot remaja dan dewasa. Masih bisa dijumpai sel

jumlah serat otot dilakukan dengan membagi luas penampang otot dengan luas area pemandu, dikali jumlah rerata serat. Hasil berupa data

mesenkim. (Gambar 3) Perbedaan Jumlah Serat Otot Rangka Ketiga Kelompok Usia

numerik. Jumlah serat otot rangka yang dihitung dalam tiap Diukur diameter terpendek dari lima buah serat

sediaan paling sedikit di kelompok A (gastro-

otot rangka, dengan panduan mikrometer. Serat

knemius = 3127±68; soleus = 307±15), jumlah-

otot dipilih secara acak dari tiap sediaan, posisi

nya meningkat di kelompok B (gastroknemius =

kiri atas, kanan atas, tengah, kiri bawah, kanan

10766±380; soleus = 2866±281) dan kelompok

bawah. Hasil pengukuran diambil nilai reratanya.

C (gastroknemius = 11867±387; soleus =

Hasil berupa data numerik.

2936±162). (Gambar 4)

44



Kelompok A

Kelompok B

Kelompok C

Gambar 3. Perbandingan gambaran histologis potongan melintang otot rangka tikus Sprague-Dawley pada ketiga kelompok usia (perbesaran 400x)

Perbedaan Diameter Serat Otot Rangka

seluruh gambaran histologi tidak memperlihatkan

antara Ketiga Kelompok Usia

adanya matriks ekstrasel yang masih utuh. Inti

Diameter serat otot rangka di kelompok A merupakan yang terkecil (gastroknemius = 5,64µm±0,12; soleus = 5,42µm±0,9), bertambah besar di kelompok B (gastroknemius =

sel fibroblas dan sel darah dapat terlihat di ruang ekstrasel, namun tidak terlihat substansi dasar dan serat-serat sebagai komponen matriks ekstrasel. Penyebabnya adalah hilangnya

22,14µm±1,31; soleus= 21,11µm±1,21) dan ter-

komponen matriks ekstrasel pada saat proses

besar di kelompok C (gastroknemius =

pembuatan sediaan.

38,61µm±1,16; soleus = 27,67µm±0,89).

Uji normalitas data (One-Sample Kolmogorov-

(Gambar 5)

Smirnov) menunjukkan data jumlah serat otot gastroknemius dan otot soleus pada ketiga

PEMBAHASAN

kelompok usia terdistribusi normal. Tetapi uji

Gambaran histologi otot tikus remaja serupa

homogenitas data menunjukkan bahwa data pada

dengan gambaran otot rangka tikus dewasa. Pa-

ketiga kelompok usia tidak homogen. Uji statistik

da kedua kelompok umur tersebut jelas terlihat

yang dipilih untuk menilai perbedaan jumlah serat

peningkatan ukuran serat otot rangka, terutama

otot gastroknemius dan otot soleus pada ketiga

dibandingkan dengan tikus neonatus. Inti terletak

kelompok usia tersebut bermakna atau tidak

di tepi, rasio inti dan sitoplasma lebih besar diban-

adalah One-Way Anova. Analisis perbandingan

dingkan serat otot tikus neonatus. Perbedaan an-

dengan uji Least Significant Difference (LSD)

tara otot tikus remaja dengan tikus dewasa

menunjukkan perbedaan antar kelompok usia

adalah pada jumlah dan diameter sel per lapang-

satu dengan yang lain. Semuanya menunjukkan

an pandang. Ruang antar serat otot rangka pada

perbedaan yang bermakna, kecuali pada jumlah


45


Gambar 4. Perbandingan jumlah serat otot gastroknemius dan soleus ketiga kelompok usia

serat otot soleus kelompok usia remaja dan

bermakna. Hal ini mengindikasikan bahwa jumlah

dewasa. Jumlah serat otot gastroknemius antar

serat otot soleus tidak mengalami peningkatan

kelompok usia berbeda bermakna. Tetapi jumlah

jumlah yang berarti dari usia remaja sampai

serat otot soleus antara kelompok remaja dan

dewasa. Penambahan massa otot bukan

dewasa tidak menunjukkan perbedaan

terutama karena hiperplasi otot.

46



Gambar 5. Perbandingan diameter serat otot gastroknemius dan soleus ketiga kelompok usia

Uji normalitas dan homogenitas data diameter

antar kelompok sangat bermakna. Analisis

serat otot gastroknemius dan otot soleus ketiga

perbandingan (multiple comparison) dengan LSD

kelompok usia menunjukkan distribusi normal dan

menunjukkan perbedaan bermakna antar

homogen. Hasil Uji Anova adalah perbedaan dia-

kelompok usia satu dengan yang lain. Semuanya

meter serat otot gastroknemius dan otot soleus

menunjukkan perbedaan yang bermakna.


47


Perubahan diameter serat otot rangka meng-

of Histology. 12th ed. New York: Chapman

gambarkan proses hipertrofi serat otot rangka.

and Hall; 1994.

Serat otot rangka tikus masih imatur. Serat otot

2. Tamaki T, Akatsuka A, Yoshimura S, Roy RR,

rangka remaja berada pada masa pertumbuhan

Edgerton VR. New fiber formation in the in-

dan perkembangan sehingga diameter seratnya

terstitial spaces of rat skeletal muscle dur-

lebih besar dari serat otot rangka neonatus, tetapi

ing postnatal growth. J Histochem Cytochem.

lebih kecil dari serat otot tikus dewasa. Serat otot rangka tikus dewasa sudah mengalami maturasi lengkap, sehingga diameternya paling besar di

2002; 50(8):1097-111. 3. Lewis SEM, Kelly FJ, Goldspink DF. Pre- and post-natal growth and protein turnover in smooth muscle, heart and slow- and fast-

antara ketiga kelompok usia.

twitch skeletal muscles of the rat. Biochem J. 1984; 217:517-26.

KESIMPULAN

4. Goldspink G, Ward PS. Changes in rodent Berdasarkan hasil yang didapatkan, dapat

muscle fibre types during post-natal growth,

disimpulkan bahwa seiring bertambahnya usia

undernutrition and exercise. J Physiol.

otot rangka, maka (1) jumlah serat otot rangka

1979;296;453-69

akan mengalami peningkatan, dari yang paling

5. Ho KW, Roy RR, Tweedle CD, Heusner

sedikit pada kelompok usia neonatus sampai

WW, Van Huss WD, Carrow RE. Skeletal

paling banyak pada kelompok usia dewasa dan

muscle fiber splitting with weight-lifting exer-

(2) diameter serat otot rangka akan mengalami

cise in rats. Am J Anat. 1980; 157(4):433-40.

peningkatan diameter, dari yang paling kecil pada

6. Le Grand F, Rudnicki MA. Skeletal muscle

kelompok usia neonatus sampai paling besar

satellite cells and adult myogenesis. Curr

pada kelompok usia dewasa.

Opin Cell Biol. 2007;19(6):628-33. 7. Hurme T, Kalimo H. Adhesion in skeletal

UCAPAN TERIMA KASIH

muscle during regeneration. Muscle Nerve.

Penulis mengucapkan terima kasih kepada segenap staf Departemen Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, khususnya staf laboran, atas bantuannya selama proses penelitian berlangsung dari awal sampai akhir. Ucapan terima kasih juga diberikan ke pihak Universitas Katolik Indonesia Atma Jaya atas bantuan

1992;15(4):482-9. 8. Williams GN, Higgins MJ, Lewek MD. Aging skeletal muscle: physiologic changes and the effects of training. Phys Ther. 2002; 82:628. 9. Nicks DK, Beneke WM, Key RM, Timson BF. Muscle fibre size and number following immobilization atrophy. J Anat. 1989; 163:1-5.

dana penelitian, sehingga penelitian ini dapat 10. Siu PM, Pistilli EE, Always SE. Apoptotic re-

terlaksana dengan baik.

sponses to hindlimb suspension in gastrocnemius muscles from young adult and aged

DAFTAR PUSTAKA

rats. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol.

1. Fawcett DW. Bloom and Fawcett: A Textbook 48

2005; 289:1015-26.



11. Chargé SBP, Rudnicki MA. Cellular and molecular regulation of muscle regeneration. Physiol Rev. 2004; 84:209-38.

muscle fibre number in the rat from youth to adulthood. J Anat. 1990; 173:33-6 15. Hanson A. How old is a rat in human years?

12. Grounds MD, W hite JD, Rosenthal N, Bogoyevitch MA. The role of stem cells in skeletal and cardiac muscle repair. J Histochem Cytochem. 2002; 50(5): 589-610.

[document on the Internet]. 2012 [cited 2014 Apr

28].

Available

from:

http://

www.ratbehavior.org/RatYears.htm. 16. Sengupta P. The laboratory rat: relating its age with human's. Int J Prev Med. 2013 June;

13. Rayne J, Crawford GNC. Increase in fibre numbers of the rat pterygoid muscles during postnatal growth. J Anat. 1975; 119(2):347-57

4(6): 624-30 17. Wang LC, Kernell D. Quantification of fibre type regionalisation: an analysis of lower hindlimb muscles in the rat. J Anat. 2001;

14. Timson BF, Dudenhoeffer GA. Skeletal

198:295-308


49

PERUBAHAN JUMLAH DAN DIAMETER SERAT OTOT GASTROKNEMIUS DAN SOLEUS PADA TIKUS BERUSIA 1 HARI, 3 BULAN, DAN 12 BULAN

Recommend Documents