PENGARUH RADIASI GAMMA TERHADAP PROFIL PROTEIN Plasmodium berghei STADIUM ERITROSITIK

Prosiding Seminar Nasional Keselamatan, Kesehatan dan Lingkungan IV dan International Seminar on Occupational Health and Safety I Depok, 27 Agustus 2008

PENGARUH RADIASI GAMMA TERHADAP PROFIL PROTEIN Plasmodium berghei STADIUM ERITROSITIK Devita Tetriana*, Darlina*, Armanu**, dan Mukh Syaifudin*) *) Pusat Teknologi Keselamatan dan Metrologi Radiasi *)Pusat Penelitian dan Pengembangan Teknologi Isotop dan Radiasi ABSTRAK PENGARUH RADIASI GAMMA TERHADAP PROFIL PROTEIN Plasmodium berghei STADIUM ERITROSITIK. Malaria merupakan salah satu penyakit akibat infeksi parasit yang utama di dunia. Salah satu bagian sel yang berperan sebagai faktor virulensi adalah protein. Protein tersebut sekaligus dapat dijadikan sebagai kandidat vaksin malaria. Tujuan pada penelitian ini akan dipelajari kandungan dan profil protein P. berghei stadium eritrositik hasil iradiasi sinar gamma yang akan dimanfaatkan untuk pengembangan vaksin malaria dipelajari kandungan dan profil protein Plasmodium berghei stadium eritrositik pasca iradiasi gamma. Setelah kultur P. berghei diiradiasi dengan variasi dosis sinar gamma 150, 175, dan 200 Gy, dilakukan analisis terhadap kandungan protein dengan metode Lowry, dan profil protein dianalisis dengan SDS-PAGE dengan konsentrasi gel 10% dan berat molekul standar 10 – 220 kDa. Hasil percobaan menunjukkan bahwa kandungan protein P. berghei semakin menurun sebanding dengan kenaikan dosis radiasi, dengan kadar teringgi pada kontrol yaitu 490 mg/ml dan terendah pada dosis radiasi 200 Gy yaitu 315 mg/ml. Dosis radiasi gamma 150 Gy menyebabkan perubahan profil protein yaitu hilangnya protein pada kisaran 15 kDa. Pada dosis radiasi 175 dan 200 Gy tidak tampak adanya perbedaan profil protein sehingga perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan elektroforesis 2 dimensi untuk mengetahui pengaruh iradiasi gamma terhadap profil protein dengan berat molekul yang sama. Kata kunci : malaria, Plamodium berghei, radiasi gamma, protein ABSTRACT THE EFFECT OF GAMMA RAYS TO PROTEIN PROFILE OF ERYTHROCYTIC STAGE OF Plasmodium berghei. Malaria is the one of the most important parasite diseases in the world. One of cell components affecting its virulence factors is proteins. These proteins are also can be used as candidate of malaria vaccine. In this research the protein profile of irradiated Plasmodium berghei post irradiation with gamma ray was studied. After in vivo culture of P. berghei was irradiated with gamma rays at dose variations of 150, 175, and 200 Gy, protein concentrations of parasites were analyzed by Lowry method and their profiles were studied with SDS-PAGE at 10% gel concentration and the range of standard molecular weight was 10 – 220 kDa. The results showed that protein concentration was decreased by increasing of irradiation dose, the highest concentration is 315 mg/ml for 0 Gy and the lowest concentration is 215 mg/ml for 200 Gy. Irradiation with 150 Gy altered protein profiles where the 15 kDa protein was not appeared but there was no different protein profiles found at higher dose (175 and 200 Gy). Keywords : malaria, Plamodium berghei, gamma irradiated, protein

Pusat Teknologi Keselamatan dan Metrologi Radiasi (PTKMR) – Badan Tenaga Nuklir Nasional Fakultas Kesehatan Masyarakat (FKM) – Universitas Indonesia

282


memanfaatkan teknik nuklir. Strategi ini

PENDAHULUAN Malaria

merupakan

salah

satu

sedang

dikembangakan

oleh

WHO

penyakit infeksi parasit yang utama di

dalam program Roll Back Malaria5,6.

dunia. Setiap tahun 300 – 500 juta kasus

Teknik

malaria menyebabkan 2 juta kematian1.

melemahkan Plasmodium dengan meng-

Penyebab malaria adalah parasit dari

gunakan

genus Plasmodium. Ciri utama genus ini

penggunaan tenknik ini adalah memiliki

adalah siklus hidup terjadi dalam dua

efektifitas dalam peningkatan respon

inang yang berbeda. Siklus seksual

imun

terjadi dalam tubuh nyamuk Anopheles

konvensional seperti pemanasan atau

betina, yang bertindak sebagai vektor

kimia7.

perantara penyebaran parasit. Siklus

nuklir sinar

digunakan gamma.

dibandingkan

Salah

satu

Keuntungan

dengan

cara

untuk

teknik

pengendalian

aseksual terjadi dalam tubuh manusia2.

malaria yang mulai dikembangkan di

Penyebaran

dapat

dunia adalah vaksinasi. Empat macam

beberapa cara,

tipe vaksin adalah (1) vaksin inaktif dari

penyakit

malaria

dikendalikan dengan yaitu

mencegah

kontaminasi

dari

organisme patogen yang dimatikan, (2)

lingkungan, memutuskan siklus hidup

vaksin

parasit, mengendalikan perkembangan

dilemahkan, (3) vaksin dengan subunit

vektor perantara dengan menggunakan

protein hasil rekombinasi, dan (4) vaksin

insektisida, mencegah terjadinya infeksi,

asam

dan

penyakit yang disebabkan oleh protozoa

mencegah

pematangan

parasit 3

aktif

dari

nukleat.

organisme

Malaria

yang

merupakan

melalui kemo-profilaksis dan vaksinasi .

dan umumnya vaksin untuk protozoa

Masalah yang timbul saat ini

adalah vaksin aktif dengan menggunakan

adalah munculnya resistensi plasmodium

radiasi sinar gamma untuk melemahkan

terhadap obat malaria dan insektisida.

organisme target4.

Selain itu, pemanasan global turut

Sasaran dari vaksin malaria adalah

berperan dalam meningkatnya kasus

tahap perkembangan plasmodium yang

malaria.

terjadi

berbeda yaitu: pre-eritrosit, aseksual dan

pada

seksual1,2,4. Vaksin pre-eritrosit ideal

daerah dataran tinggi atau pegunungan4.

untuk penduduk di daerah non endemis

Salah satu alternatif untuk pencegahan

atau pengunjung yang akan masuk ke

penyakit

dengan

daerah endemis karena vaksin ini dapat

yang

memberikan perlindungan hingga 90%.

Di

peningkatan

pembuatan

dunia,

mulai

transmisi

tersebut vaksin

malaria

adalah malaria


283


Vaksin

ini

dihasilkan

dengan

diketahui

P.

memiliki

falciparum

melemahkan parasit stadium sporozoit

sekurangnya

menggunakan sinar gamma dosis 150 –

berbagai macam protein yang berfungsi

200 Gy8. Vaksin stadium eritrositik

dalam

dibagi

yaitu

transport materi organik dari dan ke

sebagai anti-komplikasi dan anti-invasi.

dalam sel, fungsi dasar kehidupan seperti

Vaksin stadium aseksual bertujuan untuk

replikasi-perbaikan-rekombinasi

menghambat perkembangan merozoit

yang disebut sebagai gen house-keeping,

dan mengurangi angka kesakitan pada

dan lain-lain11. Parasit malaria juga

daerah

vaksin

memiliki jumlah gen yang mengkode

seksual bertujuan untuk mencegah atau

enzim yakni protein yang berfungsi

mengurangi transmisi parasit ke inang

sebagai biokatalis dan protein transport

baru (anti-invasi)4.

yang jauh

berdasarkan

endemis.

Plasmodium

fungsinya

Sedangkan

adalah

berghei

protozoa yang menyebabkan penyakit malaria

pada

berbagai

aspek

rodensia.

5.300

proses

gen

penyandi

metabolisme,

lebih

sedikit

fungsi

DNA

jumlahnya

dibandingkan dengan organisme bersel satu non-parasit12.

Penelitian

Bila sel terkena sinar gamma akan

malaria

mengalami kerusakan secara langsung

banyak menggunakan P. berghei dan

atau tidak langsung. Efek langsung

mencit sebagai hospesnya karena dengan

adalah

model ini ada kemungkinan dilakukan

senyawa-senyawa penyusun sel. Efek

manipulasi pada hospes sehingga dapat

tidak langsung terjadi karena materi sel

dipelajari perubahan imunologis yang

terbanyak

imunologis

9

terjadinya

adalah

pemutusan

air

yang

ikatan

apabila

terjadi selama infeksi malaria . Salah

terkena sinar gamma akan mengalami

satu bagian sel yang berperan sebagai

hidrolisis

faktor virulensi adalah protein 10.

bebas. Radikal bebas akan menyebabkan

Genom plasmodium penyebab

dan

menghasilkan

radikal

kerusakan materi sel13.

malaria tersusun dalam 14 kromosomnya

Perubahan intensitas (konsentrasi)

dan berada dalam inti sel dan sebagian

protein dapat disebabkan oleh kerusakan

lainnya terletak di mitokondria serta

yang diakibatkan oleh iradiasi sinar

hanya sebagian kecil yang berada di

gamma, baik pada struktur maupun

apicoplast. Ukuran genom P. falciparum

ikatan proteinnya. Perubahan struktur

misalnya hampir mencapai 23 Mbp. Dari

dapat

hasil pembacaan sekuen genom ini

maupun degradasi protein. Hal ini terjadi

diakibatkan

oleh

denaturasi


284


karena

adanya

perubahan

yang

diakibatkan oleh iradiasi gamma, baik

C. Pengukuran protein P. bergehei stadium eritrositik dengan Metode Lowry

pada stuktur maupun ikatan proteinnya.

Setelah

diiradiasi

gamma

Perubahan struktur dapat diakibatkan

kandungan protein dalam kultur diukur.

oleh

Sampel dipecah terlebih dahulu dengan

denaturasi

protein,

protein,

maupun

degradasi

perubahan

DNA.

melarutkan kultur ke dalam aseton (1 : 1)

Perubahan DNA dapat menyebabkan

dan disonifikasi selama 15 menit. Ke

sintesis protein tertentu meningkat atau

dalam 1 ml sampel ditambahkan 5 ml

dihasilkannya protein baru. Tujuan pada

larutan Lowry I dan dibiarkan selama 10

penelitian ini akan dipelajari kandungan

menit. Kemudian ditambahkan 0,5 ml

dan profil protein P. berghei stadium

larutan Lowry II dan dibiarkan selama

eritrositik hasil iradiasi sinar gamma

30 menit. Dilakukan pembacaan dengan

yang

spektrofotometer

akan

dimanfaatkan

untuk

pada

panjang

pengembangan vaksin malaria.

gelombang 700 nm.

BAHAN DAN METODE PENELITIAN

D. Karakterisasi Profil Protein Plasmodium berghei. Profil protein dianalisis dengan

A. Strain P. berghei.

menggunakan metode elektroforesis satu

P. berghei strain ANKA yang

dimensi

SDS-PAGE

dengan

sistem

diperoleh dari Laboratorium Malaria,

buffer Laemmli dan konsentrasi gel

Lembaga Biologi Molekuler Eijkman

poliakrilamid 10% (BioRad). Kultur

dibiakkan secara in vivo dalam tubuh

iradiasi sebanyak 20 μl ditambahkan 10

mencit Swiss di Laboratorium Hewan

μl aseton dan disonikasi selama 15 menit.

Bidang Biomedika PTKMR-BATAN.

Kemudian ditambahkan buffer sampel

B. Iradiasi Plasmodium berghei dengan Sinar Gamma.

Laemli sebanyak 20 μl dan dipanaskan

Kultur eritrositik microtube.

P.

stadium

berghei

ditempatkan Selanjutnya

di

dalam

dilakukan

iradiasi gamma dengan dosis 150, 175, dan 200 Gy di Iradiator IRPASENA PATIR-BATAN dengan laju dosis 360,9 Gy/jam.

selama 15 menit dalam air mendidih. Setelah itu disentrifugasi pada 8000 rpm selama 5 menit. Sebanyak 5 μl filtrat sampel dan standar dimasukkan ke dalam kolom gel dan dielektroforesis pada kondisi 200 V dan 40 mA selama 90

menit.

Gel

diwarnai

dengan

commassie R-250 (BioRad) selama 1


285


jam lalu didestaining dengan destaining

memproduksi antobodi melawan protein

solution commassie R-250 (BioRad)

malaria. Hal ini menurunkan sejumlah

selama 24 jam. Hasil yang diperoleh

protein yang dihasilkan oleh parasit dan

dianalisis untuk menentukan jumlah pita.

tetap hidup, dan akhirnya menyebabkan

HASIL DAN PEMBAHASAN Para

peneliti

telah

mengidentifikasi sejumlah protein yang diproduksi

oleh

parasit

yang

bertanggung jawab terhadap keparahan penyakit (Gambar 1). Mereka berharap protein ini dapat dijadikan sebagai target pembuatan

vaksin

menyelamatkan penderita

sehingga

ribuan

malaria.

dapat

anak-anak

Temuan

tersebut

memfokuskan diri pada sejumlah protein yang ditemukan pada permukaan sel

parasit

memproduksi

kurang

berbahaya.

parasit malaria bertahan hidup dalam tubuh manusia dengan menghentikan pembuangan sel darah dalam limpa dan oleh karenanya memungkinkan parasit untuk melakukan reproduksi13. Parasit

malaria

pada apakah seseorang yang terinfeksi tersebut adalah berusia muda (anakatau

kekebalan

dewasa yang

dengan

telah

ilmuwan

protein yang hanya pada malaria anakanak dapat mempercepat proses ini akan tetapi mereka belum sepenuhnya berhasil mengidentifikasi protein yang terlibat. Salah satu yang ditemukan adalah PfEMP1

yang

menyebabkan

sel

terinfeksi menjadi stuck dalam pembuluh darah atau dihilangkan dalam limpa. Sel darah

terinfeksi

terdegradasi

yang

14

menyebabkan demam . Dari

penelitian

ini

diketahui

bahwa iradiasi dengan dosis berbeda pada P. berghei stadium eritrositik menunjukkan adanya perubahan kadar protein total (Gambar 2). Kadar protein mengalami penurunan sebanding dengan peningkatan dosis iradiasi. Kadar protein

menghasilkan

berbagai macam protein, bergantung

anak)

Para

yang

berharap vaksin yang didasarkan pada

darah merah yang terinfeksi parasit. Protein tersebut diketahui membantu

protein

respon

berkembang

dengan baik. Pada saat tubuh manusia

pada dosis iradiasi 150 Gy adalah 435 mg/ml dan pada dosis iradiasi 200 Gy adalah 315 mg/ml. Hal ini diduga karena iradiasi

menyebabkan

terjadinya

pemutusan rantai protein. Hasil statistik menunjukkan adanya pengaruh dosis iradiasi terhadap kandungan protein.

melawan parasit, tubuh mengembangkan respon imun terhadap parasit dengan Pusat Teknologi Keselamatan dan Metrologi Radiasi (PTKMR) – Badan Tenaga Nuklir Nasional Fakultas Kesehatan Masyarakat (FKM) – Universitas Indonesia

286


STARP SALSA SSP-2

LSA-1

CSP-1 EXP-1 Sporozoit

Stadiumhepatik

Dalampembuluhdarah(3-5 menit)

Dalamsel hati (1-2 minggu)

LSA-3

Pre-eritrositik RAP-1 Stadiumseksual Dalamtubuhnyamuk (10 –14 hari)

Pfs25 Pfs230 Pfg27

SERA-1 MSP-2

Dalamsel darah merah (2 hari/siklus)

MSP-1

Pfs45/48

Pfs27

Stadium merozoit

RAP-2

Pfs16

AMA-1 MSP-5

EBA-175 Pf55 GLURP

RESA

EMP-1

Pfs28

MSP-3

Pf35

MSP-4

Gambar 1. Beberapa macam protein Plasmodium sp pada setiap stadium perkembangan 4.

Protein (mg/ml)

600 500 400 300 200 100 0 0

150

175

200

Dosis (Gy)

Gambar 2. Kandungan protein P. berghei stadium eritrositik pasca iradiasi gamma

Perubahan

kadar

diduga

jumlah pita sebanyak 13 buah dengan

menyebabkan perubahan kadar antigen

berat molekul berkisar antara 10 – 60 kDa.

protein.

diketahui

Darah yang tidak mengandung P. berghei

dengan mengamati profil protein setelah

hanya memiliki 10 pita. Pasca iradiasi

dilakukan

dosis 150 Gy terlihat bahwa kultur

Perubahan

protein

tersebut

elektroforesis. Profil protein

dari darah yang terinfeksi P. berghei yang

mengalami

diiradiasi dan tidak diiradiasi memiliki

kisaran

kehilangan 15

kDa.

protein Hasil


pada analisis 287


menunjukkan bahwa iradiasi dosis 150 Gy

pita tetapi tampak adanya perbedaan

menyebabkan adanya perubahan profil

ketebalan pita yang menunjukkan adanya

protein, sedangkan dosis 175 dan 200 Gy

perbedaan protein pada p.i yang berbeda.

tidak merubah profil (Gambar 3). Protein

Perbedaan p.i. ini akan tampak apabila

pada dosis 175 dan 200 Gy tidak

profil protein dianalisis menggunakan 2

menunjukkan adanya perbedaan jumlah

dimensi.

A

B

C

D

E

Std 200 kDa 97.4kDa 66 kDa 45 kDa 31 kDa

21.5 kDa

14.4 kDa

Gambar 3. Profil protein kultur P. berghei hasil iradiasi sinar gamma. A: darah tanpa P. berghei; B: kultur P. berghei (0 Gy); C: kultur P. berghei (150 Gy); D: kultur P. berghei (175 Gy); E: kultur P. berghei (200 Gy)


288


Suatu materi hidup seperti sel, bila

molekul.

Terjadinya

kedua

jenis


denaturasi ini tergantung pada keadaan

kerusakan secara langsung atau tidak

molekul. Yang pertama terjadi pada

langsung.

adalah

rantai

terjadinya pemutusan ikatan senyawa-

kedua

senyawa

penyusun

molekul yang bergabung dalam ikatan

langsung

terjadi

Efek

langsung sel.

Efek

karena

tidak

materi

sel

polipeptida, terjadi

sekunder.

sedangkan

pada

yang

bagian-bagian

Denaturasi

protein,

apabila

dimungkinkan terjadi degradasi protein.


Degradasi protein dapat menyebabkan

hidrolisis

radikal

protein tersebut kehilangan fungsinya

bebas. Radikal bebas akan menyebabkan

sebagai protein dan degradasi struktur

kerusakan materi sel15.

dapat berasal dari hilangnya gugus

terbanyak

adalah dan

air

yang

menghasilkan

Perubahan intensitas (konsentrasi)

samping16.

protein dapat disebabkan oleh kerusakan

Hasil-hasil di atas menunjukkan

yang diakibatkan oleh iradiasi sinar

bahwa iradiasi gamma sebagai metode

gamma, baik pada struktur maupun

untuk

ikatan proteinnya. Perubahan struktur

berpotensi

dapat

denaturasi

vaksin. Keuntungan vaksin ini adalah

maupun degradasi protein. Hal ini terjadi

memberikan imunitas humoral yang

karena

yang

tinggi bila booster diberikan, tidak

diakibatkan oleh iradiasi gamma, baik

menyebabkan mutasi atau reversion,

pada stuktur maupun ikatan proteinnya.

dapat digunakan untuk pasien immuno-

Perubahan struktur dapat diakibatkan

defisiensi,

oleh

daerah tropis tetapi vaksin jenis ini

diakibatkan adanya

perubahan

denaturasi

protein,

oleh

protein,

maupun

degradasi

perubahan

DNA.

Perubahan DNA dapat menyebabkan

melemahkan besar

cocok

dalam

Plasmodium pembuatan

digunakan

untuk

membutuhkan biaya yang lebih tinggi karena membutuhkan booster17.

sintesis protein tertentu meningkat atau dihasilkannya protein baru. Protein mengalami

terdenaturasi

Kandungan protein P. berghei

dua kemungkinan, yaitu

akan semakin menurun seiring dengan

pengembangan

yang

KESIMPULAN DAN SARAN

rantai

peptida

dan

kenaikan dosis iradiasi tetapi tidak

pemecahan protein menjadi unit yang

merusak protein secara total sehingga

lebih kecil tanpa disertai pengembangan

protein ini dapat dijadikan sebagai salah


289


satu bahan antigen vaksin. Sinar gamma dengan dosis 150 Gy menyebabkan adanya perubahan profil protein yaitu dengan terjadinya kehilangan protein pada kisaran 15 kDa. Profil protein pada dosis 175 dan 200 Gy tidak tampak adanya perbedaan jumlah pite tetapi terdapat perbedaan ketebalan pita yang menunjukkan adanya perbedaan protein pada p.i yang berbeda. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan elektroforesis 2 dimensi untuk mengetahui pengaruh iradiasi gamma terhadap profil protein dengan berat molekul yang sama. DAFTAR PUSTAKA 1. WORLD HEALTH ORGANIZATION, Initiative for Vaccine Research, State the art of vaccine research and development, 2005, http:/www.who.int/vaccinesdocuments 2. DEPARTEMEN KESEHATAN, Mengendalikan penyakit malaria dan mulai menurunnya jumlah kasus malaria dan penyakit lainnya pada 2015. 3. GUNAWAN, S., Malaria: Epidemiologi, patogenesis dan manifestasi klinis, edited by Harijanto, Penerbit Buku Kedokteran EGC, pp 1-25. 2000 4. ANONIMUS. Parasite control, Nature reviews/immunology. Nature publishing group. 2005. 5. GROTH, S., KHAN, B., ROBINSON, A., & HENDRICHS, J., Nuclear sciences figths malaria. Radiation and molecular techniques

can play targeted roles, IAEA Bulletin 43/2/2001, pp. 33-36 (2001). 6. ABEKU, T.A., Response to malaria epidemics in Africa, Emerging Infectious Diseases Vol. 13, No.5, pp. 681- 686 (2007) 7. WORLD HEALTH ORGANIZATION / ROLL BACK MALARIA. Malaria early warning systems – concepts, indicators and partners. A framework for field research in Africa. Geneva : The organization. 2001 8. HOFFMAN, S.L., GOH, M.L., LUKE, T.C., Protection of humans against malaria by immunization with radiation-attenuated Plasmodium falciparum. The Journal of Infectious Diseases, 185 : 1155 – 64. 2002. 9. WIJAYANTI, M.A., SOERIPTO, N., SUPARGIYONO., FITRI, L.E., Pengaruh Imunisasi Mencit Dengan Parasit Stadium Eritrositik Terhadap Infeksi Plasmodium berghei. Berkala Ilmu Kedokteran. Vol 29, No. 2: 5359. 1997 10. GOFFAUX, Secretion of Virulence Factors by Escherichis coli. Laboratorie de Bacteriologie, Faculte de Medicine Veterinaire, Universite de Liege. Belgium. 181-202. 1999. 11. THEISEN, M., SOE, S., BRUNSTEDT, K., FOLLMANN, F., BREDMOSE, L., ISRAELSEN, H., MADSEN, S.M., and DRUILHE, P., A Plasmodium falciparum GLURP– MSP3 chimeric protein; expression in Lactococcus lactis, immunogenicity and induction of biologically active antibodies, Vaccine 22 (9-10), 1188-1198, 2004. 12. BASTOS, M.S., DA SILVANUNES, M., MALAFRONTE, R.S., HELLENA, E., HOFFMANN, E., WUNDERLICH, G., MORAES, S.L., and FERREIRA, M.U., Antigenic polymorphism and naturally acquired antibodies to


290


Plasmodium vivax merozoite surface protein 1 in rural Amazonians. Clinical and Vaccine Immunology, 14. 10:1249-1259, 2007. 13. SHI, Q., LYNCH M.M., ROMERO M.; and BURNS J.M., Enhanced protection against malaria by a chimeric merozoite surface protein vaccine, Infection and immunity, 75(3), 1349-1358, 2007. 14. DARUSSALAM, M., Radiasi dan Radioisotop: Prinsip Penggunaannya dalam Biologi, Kedokteran dan Pertanian. Tarsito. Bandung. 1996. 15. WINARNO, H., Lipid A-Pusat Aktif Endotoksin, Struktur Kimia dan

Bioaktivitasnya. Jurnal Cermin Dunia Kedokteran. 103: 59-62. 1995. 16. SYAIFUDIN, M., Indikator Biokimia Sel terhadap Radiasi Pengion. Buletin ALARA, Pusat Penelitian dan Pengembangan Keselamatan Radiasi dan Biomedika Nuklir. Badan Tenaga Nuklir Nasional (BATAN), Vol. 4, 125-131. 2005. 17. GAFFAR, A., Parasitology: Blood and Tissue. University of South California, http://www.med.sc.edu:85/parasitolo gy/blood-proto.htm.


291



292

PENGARUH RADIASI GAMMA TERHADAP PROFIL PROTEIN Plasmodium berghei STADIUM ERITROSITIK

Recommend Documents