PENETAPAN KADAR BORAKS PADA MIE BASAH YANG BEREDAR DI PASAR CIPUTAT DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS MENGGUNAKAN PEREAKSI KURKUMIN

PENETAPAN KADAR BORAKS PADA MIE BASAH YANG BEREDAR DI PASAR CIPUTAT DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS MENGGUNAKAN PEREAKSI KURKUMIN

Skripsi

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi

OLEH : RAISANI RUSLI NIM : 105102003340

PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA 1430 H/2009 M

LEMBAR PERSETUJUAN SKRIPSI

NAMA : RAISANI RUSLI NIM

: 105102003340

JUDUL : PENETAPAN KADAR BORAKS PADA MIE BASAH YANG BEREDAR

DI

PASAR

CIPUTAT

SPEKTROFOTOMETRI

DENGAN

UV-VIS

METODE

MENGGUNAKAN

PEREAKSI KURKUMIN

Menyetujui, Pembimbing I

Pembimbing II

Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc, Apt

Zilhadia M.Si, Apt

NIP. 1956010619851010001

NIP. 150408672

Mengetahui, Ketua Program Studi Farmasi FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc, Apt NIP. 1956010619851010001

ii

Skripsi dengan judul PENETAPAN KADAR BORAKS PADA MIE BASAH YANG BEREDAR DI PASAR CIPUTAT DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS MENGGUNAKAN PEREAKSI KURKUMIN Telah disetujui, diperiksa dan dipertahankan di hadapan penguji oleh RAISANI RUSLI NIM 105102003340 Pembimbing

Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc, Apt

Zilhadia M.Si, Apt

NIP. 1956010619851010001

NIP. 150408672 Penguji

Supandi, M.Si,Apt Penguji I

Azri Fitria, M.Si, Apt Penguji II

Eka Putri, M.Si, Apt Penguji III

Mengetahui, Ketua Program Studi Farmasi UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc, Apt Dekan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Prof. DR. (hc). dr. M.K. Tadjudin, Sp. And Tanggal lulus : 07 Januari 2010

iii

LEMBAR PERNYATAAN

DENGAN INI SAYA MENYATAKAN BAHWA SKRIPSI INI BENARBENAR KARYA SENDIRI YANG BELUM PERNAH DIAJUKAN SEBAGAI SKRIPSI ATAU KARYA ILMIAH PADA PERGURUAN TINGGI ATAU PADA LAMBAGA PENDIDIKAN MANAPUN.

Jakarta,

Desember 2009

Penulis

iv

KATA PENGANTAR

Alhamdulillah, puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan karunia-Nya serta shalawat dan salam selalu tercurah kepada junjungan kita Nabi Muhammad SAW karena dengan segala rahmat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi dengan judul “PENETAPAN KADAR BORAKS PADA MIE BASAH YANG BEREDAR

DI

PASAR

SPEKTROFOTOMETRI

CIPUTAT

UV-VIS

DENGAN

MENGGUNAKAN

METODE PEREAKSI

KURKUMIN”. Skripsi ini disusun untuk memenuhi tugas akhir sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Program Studi Farmasi UIN Syarif Hidayatullah, Jakarta. Pada kesempatan ini perkenankanlah penulis menyampaikan ucapan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada: 1. Bapak Prof. DR. (hc) dr. M.K Tadjudin Sp.And, selaku Dekan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. 2. Bapak Drs. Muhammad Yanis Musdja, M.Sc, Apt, selaku Ketua Program studi Farmasi FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta sekaligus pembimbing 1 yang telah memberikan ilmu dan bimbingan selama penulisan skripsi ini . 3. Ibu Zilhadia M.Si, Apt, selaku pembimbing II yang telah memberikan waktu, semangat, ilmu, dan bimbingan selama penulisan skripsi ini. 4. Kedua orang tua, Ayahanda H.Rusli Gucci dan Ibunda tercinta Hj.Mariah yang selalu memberikan kasih sayang, doa, dan dukungan baik moril maupun materil. Tiada apapun di dunia ini yang dapat membalas semua kebaikan, cinta dan kasih sayang yang telah engkau berikan. 5. Kakak-kakakku, Dra. Ratnawati Rusli, H. Deny Rusli dan Istri, Letkol Heri Rusli dan istri, Rasti Rusli, Temy Rusli dan Istri, Rini Rusli, Jimmy Rusli, Amd.Par dan istri atas doa, dukungan baik moril maupun materil. 6. Bapak dan Ibu dosen yang telah memberikan ilmu dan pengetahuan hingga penulis dapat menyelesaikan studi di jurusan Farmasi FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

v

7. Para staf dan karyawan program studi Farmasi. Staf Administrasi Farmasi yang telah banyak membantu selama penelitian dan penyelesaian skripsi. 8. Kakak Erlis dan Kakak Nurul selaku asisten laboratorium kimia farmasi UIN Syarif Hidayatullah dan Kakak Prita dan Kakak Pipit selaku asisten laboratorium pangan PLT UIN Syarif Hidayatullah yang telah banyak membantu selama penelitian berlangsung. 9. Kepada teman-teman Farmasi angkatan 2005, terimakasih untuk kebersamaan, dukungan, saran dan kritiknya. Kebersamaan kita didalam suka dan duka akan selalu terkenang di dalam hati sanubari. 10. Kepada adik-adik Farmasi 2007 dan Tim Saman 02-03 yang telah membantu dan menemani melewati semua perjuangan ini dengan berbagi tangis dan tawa, serta semua kisah selama penelitian dan penulisan skripsi ini. 11. Teman-teman Farmasi UP Lena dan Farmasi UNAIR Ratna

terimakasih

untuk bantuan, dukungan, saran dan kritiknya selama penelitian dan penulisan skripsi ini. 12. Serta semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang turut membantu menyelesaikan skripsi ini. Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih belum sempurna. Oleh karena itu kritik dan saran yang bersifat membangun sangat penulis harapkan guna tercapainya kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, dengan segala kerendahan hati, penulis berharap semoga hasil penelitian ini dapat bermanfaat baik bagi kalangan akademis, khususnya bagi mahasiswa farmasi, masyarakat pada umumnya dan bagi dunia ilmu pengetahuan.

Jakarta, Desember 2009

Penulis

vi

DAFTAR ISI

Halaman HALAMAN JUDUL…………………………………………………… i LEMBAR PERSETUJUAN.................................................................... ii LEMBAR PENGESAHAN……………………………………………. iii LEMBAR PERNYATAAN……………………………………………. iv KATA PENGANTAR………………………………………………….. v DAFTAR ISI……………………………………………………………. vii DAFTAR TABEL………………………………………………………. ix DAFTAR GAMBAR…………………………………………………… x DAFTAR LAMPIRAN………………………………………………… xi ABSTRAK………………………………………………………………. xii ABSTRACT…………………………………………………………….. xiii BAB I PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang……………………………………………. 1 1.2. Perumusan masalah ……………………………………….3 1.3. Hipotesa…………………………………………………...3 1.4. Tujuan Penelitian…………………………………………..4 1.5. Manfaat Penelitian………………………………………... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Bahan tambahan makanan……………………………... 5 2.1.1. Peranan Bahan Tambahan Makanan……………. 5 2.1.2. Jenis dan Golongan Bahan Tambahan Makanan…..7 2.2. Boraks …………………………………………………... 8 2.2.1. Sifat Kimia Boraks………………………………. 8 2.2.2. Sifat Farmakologi ………………………………. 9 2.3. Spektrofotometer UV-Vis……………………………….. 11 2.4. Metode Validasi …………………………………………. 19 2.5. Metode Analisa Boraks ………………………………… 24 2.5.1. Kurkumin …………………………………………27 2.6. Teknik sampling ………………………………………… 29 BAB III KERANGKA KONSEP .......................................................... 33 BAB IV METODE PENELITIAN 4.1. Pengambilan Sampel …………………………………….. 34 4.2. Tempat dan Waktu Penelitian ……………………………. 34 4.3. Alat dan Bahan Penelitian ………………………………...34 4.3.1. Alat ……………………………………………….. 34 4.3.2. Bahan …………………………………………….. 35 4.4. Prosedur Penelitian ………………………………………. 35 4.4.1. Penyiapan bahan baku dan pereaksi……………… 35 4.4.2. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum …. 37 4.4.3. Pembuatan Kurva Kalibrasi dan validasi metode… 37

vii

4.4.4. Analisa sampel pasar…………………………….. 38 A. Uji Kualitatif …..………………… ……... 38 B. Uji kuantitatif ……………………………….. 39 BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN 5.1. Hasil Penelitian …………………………………………... 41 5.2. Pembahasan ………………………………………………. 42 BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN 6.1. Kesimpulan ……………………………………………… 51 6.2. Saran …………………………………………………….. 51 DAFTAR PUSTAKA................................................................................ 53 LAMPIRAN……………………………………………………………… 55

viii

DAFTAR TABEL

Halaman Tabel 1. Tabel 2. Tabel 3. Tabel 4. Tabel 5.

Pengukuran serapan konsentrasi larutan boraks pada panjang gelombang 545,95 nm………………..... ……………………… 66 Hasil penentuan batas deteksi dan batas kuantitasi boraks pada mie basah simulasi............................................................. 67 Hasil uji perolehan kembali mie basah simulasi.....…………… 68 Hasil uji presisi mie basah simulasi…….…………………….. 69 Hasil identifikasi boraks pada empat sampel mie basah pasar Ciputat ………………………………………………….. 70

ix

DAFTAR GAMBAR

Halaman Gambar 1. Gambar 2. Gambar 3. Gambar 4. Gambar 5. Gambar 6. Gambar 7. Gambar 8. Gambar 9. Gambar 10. Gambar 11. Gambar 12. Gambar 13. Gambar 14. Gambar 15. Gambar 16. Gambar 17. Gambar 18. Gambar 19 Gambar 20. Gambar 21.

Spektrum Elektromagnit…………………………………. 12 Skema instrument UV-Vis………………………………... 13 Skema spektrofotometri UV-Vis tipe single beam………. 15 Skema spektrofotometri UV-Vis tipe double beam………. 15 Rumus Bangun Kurkumin………………………………… 27 Kurva kalibrasi boraks pada mie basah…………………… 41 Kompleks Rosocyanin…..………………………………… 45 Dinatrium tetraborat……………………………………… 56 Skema pembuatan larutan uji dan pereaksi………………. 57 Skema pembuatan mie basah simulasi…..……………….. 58 Skema pembuatan larutan dari 11 mie basah simulasi yang mengandung boraks dengan kadar 6,25-50 µg/ml……….. 59 Skema penetuan panjang gelombang maksimum pada larutan mie basah simulasi dengan kadar 25 µg/ml.….….. 60 Skema pembuatan kurva kalibrasi dan validasi metode…. 61 Skema pengujian sampel mie basah pasar secara kualitatif.. 62 Skema pengujian sampel mie basah pasar secara kuantitatif. 64 Kurva absorbs boraks dengan pereaksi kurkumin……….. 65 Spektrofotometri UV-Vis………………………………… 71 Penggiling adonan mie…………………………………… 71 Pencetak mie……………………………………………… 71 Sampel mie basah pasar Ciputat………..………………... 72 Hasil uji kualitatif sampel mie basah dari pasar Ciputat…. 73

x

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman sampel boraks…………………………………………….. 56 Skema kerja......................................................................... 57 Penentuan panjang gelombang maksimum……………..... 65 Pembuatan kurva kalibrasi……………………………...... 66 Penentuan batas deteksi dan batas kuantitasi boraks pada mie basah simulasi ……………………..……………….. 67 Lampiran 6. Uji perolehan kembali mie basah simulasi………………. 68 Lampiran 7. Uji presisi simulasi mie basah……….………………….... 69 Lampiran 8. Penetapan kadar boraks pada mie basah yang beredar di pasar Ciputat ........................................................................ 70 Lampiran 9. Alat yang digunakan dalam penelitian…………………….. 71 Lampiran 10. Sampel mie basah dari pasar Ciputat.................................... 72 Lampiran 11. Hasil uji kualitatif mie basah dari pasar Ciputat.................... 73

Lampiran 1 Lampiran 2. Lampiran 3. Lampiran 4. Lampiran 5.

xi

ABSTRAK

Judul : Penetapan Kadar Boraks pada Mie Basah yang Beredar di Pasar Ciputat Dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis Menggunakan Pereaksi Kurkumin

Analisa boraks dalam mie basah dilakukan dengan menggunakan pereaksi kurkuin sebagai pereaksi warna yang menghasilkan kompleks rosocyanin dan diamati dengan menggunakan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang maksimum 545,95 nm. Sebelum digunakan terhadap sampel yang diambil dari pasar Ciputat metode ini divalidasi. Hasil dari penelitian menunjukkan kurva kalibrasi linier pada rentang 6,25-50 µ g/ml dengan persamaan regresi y = 0,008 + 0,012x dan koevisien korelasi (r) = 0,9994. Metode ini memberikan batas deteksi sebesar 3,1132 µg/ml dan batas kuantitasi sebesar 10,3775 µg/ml. Persen perolehan kembali dari larutan mie basah simulasi yang diperoleh dalam penelitian ini sebesar 99,767±1,114 %. Hasil pemeriksaan sampel mie basah yang beredar di pasar Ciputat empat diantaranya diantaranya mengandung senyawa boraks 3,76112±0,0451, 108,592±0,02185, 117,9461±0,01455, dan 6,275±0,0221. Kata kunci : Boraks, mie basah, kurkumin, spektrofotometri UV-Vis

xii

ABSTRACT

Title

: Determination of Borax contain in wet noodles which distributed in Ciputat market by spectrofotometri UV-Vis method using curcumin reagent.

Determining of borax contain in wet noodles done by curcumin reagent as color regent which produced rosocyanin complexs and monitor by using spectrofotometri UV-Vis in maximum wave length in 545,95 nm. Before it was used in sample which taken from Ciputat market this method was validated. The result showed that calibration curve in linier 6,25-50 µg/ml with regression equal y = 0,008 + 0,012x and corelation coevision (r) = 0,9994. this method gave detection limit at 3,1132 µg/ml and qualification limit at 10,3775 µg/ml. The recovery of wet nodles simulation was 99,767±1,114 %. The result of examination wet noodles sample which was marketed in Ciputat market that four of five contain 3,76112±0,0451, 108,592±0,02185, 117,9461±0,01455, and 6,275±0,0221 borax. Key Words : Borax, wet noodle, curcumin, spectrofotometri UV-Vis.

xiii

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Boraks yang berasal dari bahasa arab yaitu Bouraq pada awal mula dikenal mempunyai aktivitas sebagai bahan antiseptik yang digunakan sebagai bahan pembersih, pengawet kayu, dan herbisida. Namun saat ini boraks tidak digunakan sebagai pembersih, tetapi umum sebagai pengenyal atau pengawet makanan. Dengan adanya boraks, adonan dapat lebih liat dan elastis, sehingga tidak cepat molor atau sagging. Boraks banyak digunakan oleh industri kecil atau industri rumah tangga, dalam pembuatan adonan mie, gendar, atau kerupuk gendar (kerupuk nasi). Mie merupakan salah satu produk makanan yang sangat digemari oleh masyarakat, baik anak–anak maupun orang dewasa, terbuat dari tepung gandum, tepung beras, atau tepung tapioka. Pada proses pembuatannya terutama pada mie basah yang memiliki kadar air 51 % sering ditambahkan boraks untuk memperpanjang daya tahannya terhadap kerusakan dan kebasian. (Winarno et al,1994). Meskipun jumlah yang ditambahkan tidak terlalu banyak, namun boraks mempunyai efek akumulasi yang berbahaya. Dalam air, boraks merupakan campuran natrium metaborat dan asam borat. Sedangkan dalam suasana asam boraks terurai menjadi asam borat. Dengan demikian, baik waktu pengolahan makanan dengan air maupun karena dimakan dan melalui lambung yang bersifat asam, didalam tubuh akan ditemukan asam borat

setelah

mengkonsumsi makanan yang mengandung boraks. Gejala keracunan boraks

1

akut meliputi rasa mula, muntah-muntah, diare, kejang perut, bercak–bercak pada kulit, temperatur tubuh menurun, ruam eritema kulit yang menyerupai campak dan kerusakan pada ginjal, gelisah, dan lemah juga dapat terjadi, kematian terjadi akibat kolaps pernapasan. Sedangkan pada keracunan kronik dapat menyebabkan demam, anoreksia, anuria, kerusakan ginjal, depresi dan bingung (Haddad et al,1990; Dreisbach,1974; Gosselin et al). Kasus keracunan boraks yang bukan dari makanan, dilaporkan pertama kali pada tahun 1907. Menurut laporan tersebut, banyak anak usia dini menderita sariawan pada mulut, kemudian dioleskan campuran madu dan boraks. Ternyata kelainan pasca pengolesan pada kulit, terjadi eritema, dan wajah tampak keriput. Di Indonesia tepatnya di Palembang Sumatera Selatan terjadi kasus keracunan boraks yang berasal dari makanan pada pertengahan tahun 1994. Dilaporkan 5 orang meninggal dunia dan 56 orang terpaksa di rawat di rumah sakit (Goodman,1975; Akmal,1995). Pada tahun 2009 Dinas Kesehatan kota Depok mengumumkan hasil pengujian di kantin Sekolah Dasar yang rata-rata menjajakan jajanan khas sekolah, terbukti 30 persen mengandung boraks dan 16 persen mengandung formalin. Larangan penggunaan boraks juga diperkuat dengan adanya Permenkes RI No. 1168/MENKES/PER/X/1999 menyatakan bahwa salah satu BTM yang dilarang digunakan dalam makanan adalah boraks (Depkes,1999). Karena hal-hal tersebut maka pada penelitian ini akan dilakukan penetapan kadar boraks pada mie basah yang dijual di pasar Ciputat. Pasar Ciputat dipilih karena letak pasar yang dekat dengan kampus UIN Syarif

2

Hidayatullah dan merupakan pasar tradisional besar sehingga penelitian ini dilakukan sebagai dharma UIN terhadap masyarakat sekitar. Penetapan kadar boraks dilakukan dengan metode spektrofotometri sinar tampak, dimana pada metode ini ada dua pereaksi pembentuk kompleks warna yaitu Quinalizarin dan Kurkumin. Pada penelitian–penelitian sebelumnya, peraksi yang banyak digunakan adalah kurkumin dimana kompleks warna yang terjadi adalah rosocyanin yang berwarna rosa. (Dibble,1965) Berdasarkan hal tersebut, maka identifikasi dan penetapan kadar boraks dapat dilakukan dengan menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis dengan menggunakan pereaksi kurkumin dan perlu dilakukan penelitian terhadap beberapa mie

basah yang

dijual dipasar Ciputat, Karena

kemungkinan mie tersebut juga menggunakan boraks pada pembuatannya.

1.2 Perumusan Masalah Pada penelitian ini yang menjadi perumusan masalah adalah sebagai berikut :. 1. Apakah

validasi

metode

penetapan

kadar

boraks

menggunakan

spektrofotometer UV-Vis dapat memenuhi persyaratan. 2. Apakah mie basah yang beredar di pasar Ciputat mengandung boraks sebagai bahan tambahan makanan.

1.3 Hipotesis 1. Validasi metode pada boraks dengan menggunakan Spektrofotometer UVVis dapat memenuhi persyaratan.

3

2. Mie Basah yang dijual di pasar Ciputat mengandung bahan tambahan makanan boraks sebagai pengenyal

1.4 Tujuan Penelitian Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui adanya boraks pada mie basah dan mengetahui kadar boraks pada mie basah yang dijual di pasar Ciputat.

1.5 Manfaat Penelitian 1. Penelitian ini diharapkan memberikan informasi kepada masyarakat tentang bahaya penggunaan boraks pada makanan. 2. Hasil penelitian diharapkan meningkatkan kewaspadaan mayarakat pada produk yang mengandung boraks di pasar Ciputat

4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1

Bahan Tambahan Makanan Pengertian atau definisi bahan tambahan makanan (BTM) cukup bervariasi. Secara umum yang dimaksud dengan bahan tambahan makanan adalah bahan-bahan yang ditambahkan ke dalam makanan selama produksi, pengolahan, pengemasan atau penyimpanan untuk tujuan tertentu.

2.1.1 Peranan Bahan Tambahan Makanan Peranan BTM pada dasarnya sebagai senyawa yang ditambahkan dalam bahan pangan untuk memperbaiki penampilan, cita rasa, tekstur, atau sifat-sifat penyimpanannya serta untuk mempengaruhi kualitas yang dikehendaki. BTM digunakandi industri-industri

makanan untuk

meningkatkan mutu pangan olahanpenggunaan.

Bahan tambahan

makanan tersebut hanya dibenarkan jika ditujukan untuk keperluan berikut: 1. Mempertahankan nilai gizi makanan. Sebagai contoh, penambahan bahan antioksidan seperti BHA (butyl hidroksianisol) dalam pengolahan vitamin A akan mempertahankan potensi vitamin tersebut bila ditambahkan pada makanan. 2. Sebagai konsumsi segolongan orang tertentu yang memerlukan makanan diit.

5

Misalnya penambahan bahan pemanis buatan seperti sakarin ke dalam makanan atau minuman, sehingga tidak menambah kalori kedalam makanan tersebut. 3. Mempertahankan

mutu

atau

kestabilan

makanan

atau

untuk

memperbaiki sifat-sifat organoleptiknya hingga tidak menyimpang dari sifat alamiahnya, dan dapat membantu mengurangi makanan yang dibuang. Bahan pengawet memegang

peranan penting dalam

memperpanjang daya simpan berbagai jenis makanan,

sehingga

memungkinkan bagi makanan-makanan tersebut ditransportasikan dalam jarak yang jauh, disimpan untuk waktu yang lama, tetapi masih dapat dikonsumsi secara aman. 4. Sebagai keperluan pembuatan, pengolahan, penyediaan, perlakuan, pewadahan, pembungkusan, pemindahan, atau pengangkutan. Beberapa makanan dalam proses pengolahannya

membutuhkan

penggunaan bahan-bahan, seperti bahan penstabil, bahan penjernih, dan bahan

pengikat

logam.

Penggunaan

bahan-bahan

tersebut

memungkinkan bagi industri dalam skala besar memproduksi makanan dengan komposisi dan mutu yang konstan sepanjang tahun.

5. Membuat makanan menjadi lebih menarik

Penggunaan bahan

tambahan makanan, seperti pewarna dan bahan pemantap tekstur memperbaiki bahan baku yang bervariasi sehingga nantinya produk akhir mempunyai penampakan, rasa, serta penampilan yang selalu sama setiap waktu (Winarno,Titi,1994; Des Rosier, 1988).

6

2.1.2 Jenis dan Penggolongan Bahan Tambahan Makanan (BMT) Pada umunya Bahan Tambahan Makanan (BTM) dapat dibagi menjadi dua golongan besar, yaitu : 1. BTM yang ditambahkan dengan sengaja ke dalam makanan. BTM ini dibagi lagi berdasarkan fungsinya dalam pengolahan makanan, antara lain sebagai anti oksidan; pemanis buatan; pemutih tepung; pengemulsi dan pengental; pengeras; pewarna serta penyedap rasa dan aroma. 2. BTM yang tidak sengaja tidak ditambahkan pada makanan. BTM ini tidak mempunyai fungsi dalam makanan, terdapat secara fisik sengaja baik dalam jumlah sedikit atau cukup banyak akibat perlakuan selama proses produksi, pengolahan dan pengemasan. Bahan ini dapat pula merupakan residu atau kontaminan dari bahan yang sengaja yang ditambahkan untuk tujuan produksi bahan mentah atau penanganannya yang masih terus terbawa ke dalam makanan yang akan dikonsumsi. Contoh BTM dalam golongan ini adalah residu pestisida (termasuk insektisida, herbisida, dan fungisida), kontaminan radio aktif, logam berat, residu obat ternak (termasuk hormone dan antibiotic), serta migrasi komponen–komponen plastik dari pembungkus ke dalam makanan. Menurut sumbernya, BTM dapat dibedakan menjadi dua, yaitu : a)

Alamiah, seperti lesitin dan asam sitrat.

b)

Buatan/ sintetik dari bahan kimia yang mempunyai sifat serupa dengan bahan alamiah yang sejenis, baik susunan kimis maupun

7

sifat metabolismenya, seperti asam askorbat.Pada umunya bahan sintetik mempunyai kelebihan yaitu lebih pekat, lebih stabil dan lebih murah. Walaupun demikian terdapat kelemahan yaitu sering terjadi ketidaksempurnaan proses sehingga mengandung zat–zat yang berbahaya bagi kesehatan, kadang bersifat karsinogenik (Winarno,1988). 2.2

Boraks

2.2.1 Sifat Kimia Boraks Rumus Molekul

: Na2 B4O7. 10H2 O

Nama Kimia

: Natrium Tetraborat

Berat Molekul

: 381,37

Berat Jenis

: 1,68 – 1,72

Titik Leleh

: 750 C

Boraks merupakan senyawa kimia yang mengandung unsur boron (B). Boraks merupakan kristal lunak tidak berwarna, terjadi dalam suatu deposit hasil proses penguapan hot spring (pancuran air panas) atau danau garam. Boraks termasuk kelompok mineral borat, suatu jenis senyawa kima alami yang terbentuk dari boron (B) dan oksigen (O2). Beberapa jenis boraks jarang ditemui, dan terjadi pada daerah tertentu saja, sebaliknya

beberapa

diantaranya,

(Na2B4O74H2O) dan colemanite

misalnya

boraks,

kernite

(Ca2B6O11.5H2O) secara

komersil

ditambang untuk pembuatan boraks, asam borat serta berbagai garam boron sintesis (Winarno,Titi,1994).

8

Boraks berupa hablur transparan tidak berwarna atau serbuk hablur putih dan tidak berbau. Larutannya bersifat basa terhadap fenoftalen. Pada udara kering merapuh. Hablur sering dilapisi serbuk warna putih. Larut dalam 20 bagian air, 0,6 bagian air mendidih dan 1 bagian gliserol, praktis tidak larut dalam etanol (Reynold,1982; Farmakope IV,1995; Farmakope III,1979). 2.2.2 Sifat Farmakologi A. Absorbsi Boraks diabsorpsi secara cepat oleh saluran cerna, kulit yang terbakar dan pada kulit yang terluka. Namun boraks tidak diabsorpsi secara baik pada kulit yang utuh. Boraks didistribusikan ke seluruh tubuh dan memiliki afinitas yang besar terhadap hati, otak dan ginjal, sehingga dapat terakumulasi pada organ tersebut. (Goodman,1975; Winarno,1994; Haddad et al,1990) Pada keadaan normal, konsentrasi boraks didalam serum sebesar 7 mg/l, tetapi pada keracunan berat konsentrasinya 20–150 mg/l. Sedangkan pada kasus kematian dapat terjadi pada konsentrasi 200–15000 mg/l (Flanaga et al,1995). B. Ekskresi Boraks diekskresikan sebagian besar melalui ginjal. Lebih dari 50% dosis oral diekskresikan tanpa perubahan melalui ginjal selama 24 jam dan 90% setelah 96 jam. Sebagian kecil dikeluarkan melalui kelenjar keringat. Waktu paruh boraks dilaporkan bervariasi, antara 5–21 jam (Haddad et al,1990).

9

C. Toksisitas. Keracunan boraks terjadi karena absorpsi yang berlangsung dengan segera dari saluran pencernaan makanan, kulit yang terluka, lecet, atau terbakar yang mendapat pengobatan secara berulang–ulang dengan serbuk atau larutan asam borat. Selain itu, ekskresi boraks yang lambat juga memperbesar terjadinya akumulasi akibat penggunaan berulang. Pada bayi dan anak-anak keracunan lebih mudah terjadi dibanding orang dewasa, dan kematian dapat terjadi setelah penggunaan topikal dari serbuk boraks untuk mengobati ruam. Keracunan dapat bersifat akut maupun kronis dengan manifestasinya yang utama adalah kulit mengelupas, demam, dan anuria. Gejala keracunan boraks akut meliputi rasa mula, muntah-muntah, diare, kejang perut, bercak–bercak pada kulit, temperatur tubuh menurun, ruam eritema kulit yang menyerupai campak dan kerusakan pada ginjal, gelisah, dan lemah juga dapat terjadi, kematian terjadi akibat kolaps pernapasan. Sedangkan pada keracunan kronik dapat menyebabkan demam, anoreksia, anuria, kerusakan ginjal, depresi dan bingung (Haddad et al,1990; Dreisbach,1974; Gosselin et al). Untuk boraks nilai LD50 (Letal Death 50 ) pada tikus melalui penggunaan oral adalah 3,0 g/kg berat badan. Uji yang dilakukan terhadap 10 orang dewasa menunjukkan bahwa dengan penyuntikan 20 g boraks tidak menimbulkan kematian, tetapi, mengakibatkan mual, muntah– muntah, diare, atau gangguan mental selama beberapa hari. Anak kecil lebih rentan dari orang dewasa, berdasarkan pengujian terhadap 11 bayi

10

yang baru lahir yang diberi asam borat pada makanannya, karena 5 anak yang mendapatkan 4,5–14 g meninggal dalam waktu 2-3 hari, sedangkan 6 bayi lainnya mendapat 2–4,5 g dapat bertahan (Winarno,Titi,1994). 2.3

Spektrofotometer UV –Vis Pada awalnya, spektroskopi adalah ilmu yang mempelajari tentang radiasi sinar tampak yang berinteraksi dengan molekul pada panjang gelombang tertentu dan menghasilkan suatu spektra, yang merupakan hasil interaksi antara energi radian dengan panjang gelombang atau frekuensi. Kemudian pengertian ini dikembangkan tidak hanya untuk radiasi sinar tampak, tapi juga jenis radiasi elektromagnetik yang lain seperti sinar X, ultraviolet, inframerah, gelombang mikro, dan radiasi frekuensi radio. Ilmu yang berhubungan dengan pengukuran spektra tersebut dinamakan spektrofotometer (Skoog,West,Holler,1996). Spektrofotometri UV-Vis adalah alat yang digunakan untuk mengukur serapan yang dihasilkan dari interaksi kimia antara radiasi elektromagnetik dengan molekul atau atom dari suatu zat kimia pada daerah UV-Vis (FI edisi IV, 1995). Jangkauan panjang gelombang yang tersedia untuk pengukuran membentang dari panjang gelombang pendek ultraviolet sampai ke garis inframerah.

11

Gambar 1. Spektrum elektromagnit

Untuk kemudahan pengacuan, daerah spektrum secara garis besarnya dibagi dalam : 1.

Daerah ultraviolet jauH

: 100 nm – 190 nm

2.

Daerah ultraviolet dekat

: 190 nm – 380 nm

3.

Daerah cahaya tampak

: 380 nm – 780 nm

4.

Daerah inframerah dekat

: 780 nm – 3000 nm

5.

Daerah inframerah

: 2,5 µm – 40 µm atau 4000 cm-1 –

250 cm-1 Spektrofotometer

UV-Vis

adalah

anggota

teknik

analisis

spektroskopik yang memakai sumber radiasi elektromagnetik ultraviolet (190-380 nm) dan sinar tampak (380-780 nm) dengan memakai instrument spektrofotometer. Spektrofotometer UV–Vis merupakan metoda analisa yang penggunaannya cukup luas, baik untuk analisa kualitatif kuantitatif. Untuk analisa kuantitatif yang diperhatikan adalah : a)

Membandingkan λ maksimum.

12

maupun

b)

Membandingkan serapan (A), daya serap (a),

c)

Membandingkan spektrum serapannya

.

Prinsip dari spektrofotometri UV-Vis adalah mengukur jumlah cahaya yang diabsorbsi atau ditransmisikan oleh molekul-molekul di dalam larutan. Ketika panjang gelombang cahaya ditransmisikan melalui larutan, sebagian energi cahaya tersebut akan diserap (diabsorpsi). Besarnya kemampuan molekul-molekul zat terlarut untuk mengabsorbsi cahaya pada panjang gelombang tertentu dikenal dengan istilah absorbansi (A), yang setara dengan nilai konsentrasi larutan tersebut dan panjang berkas cahaya yang dilalui (biasanya 1 cm dalam spektrofotometri) ke suatu point dimana persentase jumlah cahaya yang ditransmisikan atau diabsorbsi diukur dengan phototube.

Gambar 2. Skema instrument UV-Vis Spektrofotometri sederhana terdiri dari : 1.

Sumber radiasi Sumber radiasi monokromator kuvet detektor amplifier rekorder 21 Sumber cahaya berasal dari lampu Deutrium (H0) untuk UV dengan panjang gelombang 180 – 400 nm dan lampu Tungsten (wolfram) untuk Vis dengan panjang gelombang 400 – 800 nm.

13

2.

Monokromator Monokromator merupakan alat yang berfungsi sebagai penyeleksi cahaya dengan panjang gelombang tertentu. Monokromator akan memisahkan radiasi cahaya putih yang polikromatis menjadi cahaya monokromatis (mendekati monokromatis).

3.

Kuvet Pada umumnya spektrofotometri melibatkan larutan, dengan demikian diperlukan wadah/ sell untuk menempatkan larutan.

4.

Detektor Fungsinya mengubah energi radiasi yang jatuh mengenainya menjadi suatu besaran yang dapat diukur.

5.

Amplifier Fungsinya untuk memperkuat sinyal listrik.

6.

Recorder Alat untuk mencatat, dapat berupa gambar/angka-angka.

Tipe instrumentasi dari spektrofotometri UV-Vis (Harmita, 2006) : 1.

Single Beam Pada spektrofotometri UV-Vis

tipe

single beam absorbsi

berdasarkan pada sinar tunggal dimana sampel akan ditentukan jumlahnya pada satu panjang gelombang atau fix wave lenght. Hasil biasanya dibandingkan dengan blangko (biasanya pelarut).

14

Gambar 3 . Skema spektrofotometri tipe single beam Keterangan gambar: 1). Dari celah mengeluarkan satu sinar monokromotis 2). Wadah atau kuvet yang dapat dilalui sinar hanya satu. 3). Setiap perubahan panjang gelombang, alat harus dinolkan 2.

Double Beam Pada spektrofotometri UV-Vis tipe double beam absorbsi biasanya mempunyai variabel panjang gelombang atau ”multi wave length”. Hasilnya bisa langsung dibandingkan dengan blangko.

Gambar 4 . Skema spektrofotometri tipe double beam. Keterangan gambar: 1). Dari celah mengeluarkan dua sinar monokromotis. 2). Sinar melaui 2 wadah atau kuvet yang sekaligus. 3). Alat hanya di auto zero satu kali dengan cara mengisi kedua kuvet dengan larutan blanko 15

Persyaratan suatu sampel dapat dianalisa menggunakan Spektrofotometri UV Vis adalah : 1.

Bahan mempunyai gugus kromofor

2.

Bahan tidak mempunyai gugus kromofor tapi berwarna

3.

Bahan tidak mempunyai gugus kromofor dan tidak berwarna, maka ditambahkan pereaksi warna (Vis)

4.

Bahan tidak mempunyai gugus kromofor dibuat turunannya yang mempunyai gugus kromofor (UV). Dasar dari metoda ini karena adanya perubahan sifat fisikokimia

dari bahan yang diperiksa dengan jalan mengamati sifat serapannya terhadap energi cahaya atau radiasi elektromagnetik. Spectrum UV-Vis merupakan hasil interaksi antara radiasi elektromagnetik (REM) dengan molekul. REM merupakan bentuk energi radiasi yang mempunyai sifat gelombang dan partikel (foton). Karena bersifat sebagai gelombang maka beberapa parameter perlu diketahui, misalnya panjang gelombang (λ), frekuensi (v), bilangan gelombang (v), dan serapan (A). REM mempunyai vektor listrik dan vektor magnet yang bergetar dalam bidang-bidang yang tegak lurus satu sama lain dan masing-masing tegak lurus pada arah perambatan radiasi. Bila suatu cahaya monokromatis atau bukan monokromatis jatuh pada medium homogen, maka sebagian dari cahaya ini akan dipantulkan, sebagian akan diabsorbsi dan sisanya akan diteruskan, sehingga dalam hal ini dapat dinyatakan sebagai berikut: IO = Ir + Ia + It

16

Dimana : I0

= intensitas cahaya yang datang

Ir

= intensitas cahaya yang dipantulkan

Ia

= intensitas cahaya yang diserap

It

= intensitas cahaya yang diteruskan

Pengaruh

Ir

dapat

dihilangkan

dengan

menggunakan

blanko/kontrol, sehingga : I0 = Ia + It Dua hukum empiris telah merumuskan tentang intensitas serapan. Hokum Lambert telah menyatakan bahwa fraksi penyerapan sinar tidak bergantung dari intensitas sumber cahaya. Hukum Beer mengatakan bahwa penyerapan sebanding dengan jumlah molekul yang menyerap (Sudjadi, 1983) Gabungan dari hukum Lambert-Beer menurunkan secara empiris hubungan antara intensitas cahaya yang ditransmisikan dengan tebalnya larutan, dan hubungan antara intensitas tadi dengan konsentrasi zat (Depkes,1995). Rumus : A = log (Io/It) = ε . b . c = a.b.c Dimana :

A = Serapan Io = Intensitas sinar yang datang It = Intensitas sinar yang diteruskan ε = Absorptivitas molekuler ( L.mol-1.cm-1) = a x BM a = Daya serap (L.g-1.cm-1)

17

b = Tebal larutan / kuvet (cm) c = Konsentrasi zat (g/L, mg/mL) Sampel yang sering dianalisis dengan metode spektrofotometer UV-Vis adalah senyawa

organik.

Senyawa organik

yang dapat

memberikan serapan adalah senyawa yang memiliki gugus kromofor dan auksokrom. Gugus kromofor adalah gugus fungsional tidak jenuh yang memberikan serapan pada daerah ultraviolet atau cahaya tampak. Hampir semua kromofor mempunyai ikatan rangkap seperti alkena (C=C), C=O, NO2, benzene, dan lain-lain. Sedangkan auksokrom adalah gugus fungsional seperti –OH, -NH2, -X, yaitu gugus yang mempunyai elektron nonbonding dan tidak mengabsorbsi radiasi pada λ diatas 200 nm, akan tetapi mengabsorbsi radiasi UV jauh (Harmita, 2006). Ruang lingkup spektroskopi serapan dapat diperluas dengan menggunakan reaksi warna, yang seringkali diiringi dengan peningkatan sensitivitas atau selektivitas. Reaksi warna digunakan untuk memodifikasi spektrum dari molekul pengabsorbsi sehingga dapat dideteksi pada daerah visible, dan terpisah dari senyawa pengganggu lain yang memiki serapan di daerah UV. Selain itu, modifikasi kimia ini dapat digunakan untuk mengubah molekul yang tidak mengabsorbsi menjadi senyawa turunan yang stabil yang memiliki serapan yang bermakna. Panjang gelombang dimana absorbsi spektrum maksimum disebut panjang gelombang maksimum (λ maks). Pengukuran ditunjukkan untuk

18

menghitung jumlah senyawa dalam sampel. Jika konsentrasi senyawa semakin tinggi maka lebih banyak cahaya yang diabsorbsi oleh sampel. 2.4

Metode Validasi Validasi metode analisis adalah suatu tindakan penilaian terhadap parameter

tertentu,

berdasarkan

percobaan

laboratorium,

untuk

membuktikan bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaanya. Parameter tersebut adalah : 1. Kecermatan (Accuracy) Kecermatan adalah kedekatan hasil penetapan yang diperoleh dengan hasil sebenarnya.

Kecermatan dinyatakan sebagai hasil

perolehan kembali dari analit yang ditambahkan. Cara penentuan akurasi dapat dilakukan dengan cara absolute dan cara audisi. Syarat akurasi yang baik : 98 – 102 %, untuk sampel hayati (biologis atau nabati) : ±10 %. Beberapa pendapat mangatakan antara 95-105 %, dan beberapa berpendapat antara 80-120 %. Hal ini dikarenakan semakin kompleks penyiapan sampel dan semakin sulit metode analisis yang digunakan, maka recovery yang diperbolehkan semakin rendah atau kisarannya semakin lebar. Perhitungannya sebagai berikut : % Perolehan kembali = Kadar hasil analisis Kadar sesungguhnya

19

x 100%

Dianjurkan untuk melakukan penentuan akurasi dengan 5 konsentrasi berbeda. ( (Harmita, 2006 ; Snyder, dkk, 1988 ; Gandjar, 2009) 2. Keseksamaan (precision) Keseksamaan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil uji individual, diukur melalui penyebaran hasil individual dari rata – rata jika prosedur diterapkan secara berulang pada sampel – sampel yang diambil dari campuran yang homogen. Keseksamaan diukur sebagai simpangan baku atau simpangan baku relatif (koefisien variasi).

Keseksamaan

dapat

dinyatakan

sebagai

keterulangan

(repeatability) atau ketertiruan (reproducibility). Kriteria seksama diberikan jika metode memberikan simpangan baku relatif atau koefisien variasi 2% atau kurang. Keseksamaan dapat dihitung dengan cara sebagai berikut : a. Hasil analisis adalah x1, x2, x3, x4,……………….xn maka simpangan bakunya adalah : SD = √ ( ∑ (x – x )2 ) n–1 b. Simpangan baku relatif atau koefisien variasi (KV) adalah : KV = SD x 100 % (Harmita, 2006) x 3. Selektivitas (specificity) Selektivitas atau spesifisitas suatu metode adalah kemampuannya yang hanya mengukur zat tertentu saja secara cermat dan seksama dengan adanya komponen lain yang mungkin ada dalam matriks sampel.

20

Selektivitas seringkali dapat dinyatakan sebagai derajat penyimpangan (degree of bias) metode yang dilakukan terhadap sampel yang mengandung bahan yang ditambahkan berupa cemaran, hasil urai, senyawa sejenis, senyawa asing lainnya, dan dibandingkan terhadap hasil analisis sampel yang tidak mengandung bahan lain yang ditambahkan. Pada metode analisa yang melibatkan kromatografi, selektivitas ditentukan melalui perhitungan daya resolusinya (Rs). Pemisahan kromatogram yang baik diperoleh bila nilai resolusinya lebih besar dari 1,5 (Harmita, 2006). 4. Linearitas dan Rentang Linearitas adalah kemampuan metode analisis yang memberikan respon yang secara langsung atau dengan bantuan transformasi matematik yang baik, proporsional terhadap konsentrasi analit dalam sampel. Rentang metode adalah pernyataan batas terendah dan tertinggi analit yang sudah

ditunjukkan dapat ditetapkan

dengan kecermatan,

keseksamaan, dan linearitas yang dapat diterima. Penentuan linearitas dalam praktek, digunakan satu seri larutan yang berbeda konsentrasinya antara 50 – 150% kadar analit dalam sampel. Di dalam pustaka, sering ditemukan rentang konsentrasi yang digunakan antara 0 – 200%. Jumlah sampel yang dianalisis sekurang-kurangnya delapan buah sampel blanko. Sebagai parameter adanya hubungan linier digunakan koefisien korelasi r pada analisis regresi linier Y = a + bx. Untuk memperoleh nilai a dan b digunakan metode kuadrat terkecil (least square):

21

a

= (Σy i) (Σxi)2 – (Σxi) (Σyi) N (Σxi2) – (Σyi2) b = N(Σxi.yi) - (Σxi) (Σyi) N (Σxi2) – (Σxi) 2 Linieritas ditentukan berdasarkan nilai koefisien (r) r

=

N(Σxy) - (Σx) (Σy) [ (N (Σx2) – (Σx) 2) (N (Σy2) (Σy)2) ]1/2

Hubungan linear yang ideal dicapai jika nilai b = 0 dan r = +1 atau -1 bergantung pada arah garis. Sedangkan nilai a menunjukkan kepekaan analisis terutama instrument yang digunakan. Parameter lain yang harus dihitung adalah simpangan baku residual (Sy). Sy = √ ∑ (y1 – ŷ1)2

di mana ŷ1 = a + bx

N–2 Sx0 = Sy b Vx0 = Sx0

Sx0 = standar deviasi dari fungsi X

100%

Vx0 = koefisien variasi dari fungsi

x Syarat kelinearan garis : a) Koefisien korelasi (r) r ≥ 0,9990 b) Jumlah kuadrat sisa masing-masing titik temu (ri) mendekati nol (0) (ri)2 sekecil mungkin ≈ 0 ri = yi – (b x i + a) c) Koefisien fungsi regresi Vx0 ≤ 2,0% (sediaan farmasi)

22

≤ 5,0% (sediaan biologi)

d) Kepekaan analisis (∆y/∆x) ∆y/∆x = y2 – y1 ≈ y3 – y2 ≈ y4 – y5 X2 – x1 X3 – x2 x4 – x5

≈ yn – yn-1 xn – xn-1 (Harmita, 2006)

5. Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Batas deteksi didefinisikan sebagai konsentrasi analit terendah dalam sampel yang masih dapat dideteksi, meskipun tidak selalu dapat dikuantitasi. Batas deteksi merupakan batas uji yang secara spesifik menyatakan apakah analit di atas atau di bawah nilai tertentu. Batas kuantitasi merupakan parameter pada analisis renik dan diartikan sebagai kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi kriteria cermat dan seksama. Pada analisis instrument batas deteksi dapat dihitung dengan mengukur respon blangko beberapa kali lalu dihitung simpangan baku respon blangko dan formula di bawah ini dapat digunakan untuk perhitungan Q=

1

Keterangan : Q = LOD (batas deteksi) atau LOQ (batas kuantitasi) k = 3 untuk batas deteksi atau 10 untuk batas kuantitasi Sb = simpangan baku respon analitik dari blangko S1 = arah garis linear (kepekaan arah) dari kurva antara respon terhadap konsentrasi = slope (b pada persamaan garis y = a+bx)

23

Batas deteksi dan kuantitasi dapat dihitung secara statistik melalui garis regresi linier dari kurva kalibrasi. Nilai pengukuran akan sama dengan nilai b pada persamaan garis linier y = a+bx, sedangkan simpangan baku blangko sama dengan simpangan baku residual(Sy/x) a. Batas deteksi (Q) karena k = 3 atau 10 Simpangan baku (Sb) = Sy/x, maka Q=

3

/ 1

b. Batas kuantitasi (Q) Q= 2.5

10

/ 1

(Harmita, 2006; Gandjar, 2009;Snyder, dkk, 1988)

Metoda Analisa Boraks 1. Kualitatif Metoda analisa boraks/asam borat secara kualitatif dapat dilakukan dengan beberapa cara, antara lain sebagai berikut : a.

Penambahan asam sulfat pekat dengan bantuan panas. Ketika dipanaskan, asap putih asam borat dilepaskan. Reaksi yang terjadi : Na2B4O7 + H2SO4 + 5 H2 O → 4 H3 BO3 ↑ + 2 Na+ + SO42(Setiono, et al 1985)

b.

Uji nyala api. Uji nyala api dilakukan dengan penambahan asam sulfat pekat dan alkohol. Alkohol akan terbakar dengan

24

nyala hijau, disebabkan oleh pembentukan etil borat atau metal borat. (Setiono, et al 1985; Basir, 1992) c.

Uji kertas kunyit (Turmeri). Menggunakan sehelai kertas kunyit yang dicelup ke dalam larutan suatu borat yang diasamkan dengan asam klorida encer kemudian dikeringkan. Apabila suatu sample mengandung boraks dan diidentfikasi menggunakan kertas kurkumin dilihat melalui perubahan warna kertas dari kuning menjadi hijau biru gelap setelah ditambah amonia encer. (Wiliam,2002)

d.

Menggunakan natrium karbonat dan penambahan asam klorida dengan bantuan pemanasan akan mengidentifikasi adanya boraks melalui perubahan residu dari berwarna merah ceri berubah menjadi hijau kehitaman.

e.

Metoda Titrasi (Wisnu 2008; Slamet,2007).

1)

Titrasi langsung basa kuat Di dalam larutan air boraks merupakan campuran natrium metaborat dan asam borat. Asam borat adalah asam sangat lemah sehingga tidak dapat dititrasi langsung. Dengan adanya senyawa poli-ol seperti gliserol dan manitol asam borat dapat membentuk kompleks yang mempunyai keasaman yang lebih tinggi. Oleh karena itu, boraks dapat dititrasi dengan adanya gliserol atau manitol menggunakan fenolftalen sebagai indikator. Reaksi yang terbentuk : 25

Na2B4O7 + 10H2 → 2NaBO2 + 2 H3 BO3 + 7 H2 O 2H3 BO3 + 2 NaOH→ 2NaBO2 + 4H2O 2) Titrasi dengan asam. Penetapan kadar dilakukan dengan menggunkana HCL untuk membentuk asam borat dan mengunakan merah metal sebagai indicator. Reaksi yang terbentuk : Na2B4O7 + 10H2 + 2HCL→ 4 H3 BO3 + 2 NaCl + H2O 2. Kuantitatif Penentuan kadar boraks dapat dilakukan dengan metode asambasa.

Spektrofotometri

dan

AAS

(Atomic

Absorption

Spectrophotometric ). Pada metode asam-basa dapat dikerjakan dengan cepat namun terbatas untuk sampel dengan kadar yang relatif cukup besar, pada metode AAS dapat digunakan untuk menetapkan sample dengan kadar yang sangat kecil namun jarang laboratorium yang memiliki alat tersebut. Sedangkan pada metode spektrofotometri UV-Vis dapat digunakan untuk penetapan sample dengan kadar yang sangat kecil dan beberapa laboratorium banyak yang memiliki alat tersebut. Pada penetapan kadar

boraks (secara

spektrofotometri)

dilakukan dengan metoda spektrofotometri sinar tampak, dimana pada metoda ini ada dua pereaksi pembentuk kompleks warna yaitu Quinalizarin

dan

Kurkumin.

26

Pereaksi

quinalizarin

jarang

digunakan karena bentuk kompleks warna yang terjadi harus dilarutkan terlebih dahulu dalam asam sulfat yang pekat yang memberikan kesulitan pada saat pengamatannya. Yang sering digunakan pada penelitian-penelitian sebelumnya adalah kurkumin dimana kompleks warna yang terjadi yaitu rosocyanin yang berwarna

rosa.

Rosocyanin

ini

pada

penetapan

secara

spektrofotometri sinar tampak dilakukan dengan melarutkannya dalam alkohol 96% dan diamati pada panjang gelombang 548 nm (Dibble,1965). 2.5.1 Kurkumin Nama Kimia : 1,7 – Bis – ( 4 – hydroxyl – 3 – methoxyphenyl ) – 1,6 – diene – 3,5 dione Rumus molekul : C21 H20O6 Berat molekul : 368,39 Titik leleh

: 179 0 C – 1820 C

Rumus bangun :

Gambar 5. Rumus bangun Kurkumin Kurkumin merupakan senyawa alam yang terdapat di dalam umbi tanaman Curcuma longa L, nama lain tanaman ini adalah

27

Curcuma domestica Val, sedangkan nama daerahnya adalah kunir, kunyit, atau temu kuning (Anonim,1992). Dalam keadaan murni dapat berupa Kristal berbentuk batang atau prisma, berwarna kuning jingga. Larut dalam etanol dan asam asetat glacial, tidak larut dalam air dan dietil eter. Dalam alkali berwarna merah kecoklatan, dan dalam asam berwarna kuning (Windholz et al,1983). Kurkumin merupakan zat warna alam, digunakan untuk pewarna makanan dan kosmetik, juga sebagai penunjuk boraks. Dimana kurkumin akan bereaksi dengan asam borat atau boraks membentuk kompleks kelat rosasianin yang berwarna merah (Roth,1978). Kurkumin atau diferuloyl methane pertama kali diisolasi pada tahun 1815. Kemudian tahun 1910, kurkumin didapatkan berbentuk Kristal dan bisa dilarutkan dengan pelarut alkohol. Banyak hasil penelitian menunjukkan bahwa kurkumin aman dan tidak toksik bila dikonsumsi oleh manusia. Jumlah kurkumin yang aman dikonsumsi manusia adalah 100 mg/hari. Kunyit merupakan salah satu tanaman obat potensial penghasil kurkumin. Selain sebagai bahan baku obat dapat juga dipakai sebagai bumbu dapur dan zat pewarna alami. Rimpangnya sangat bermanfaat sebagai anti koagulan, menurunkan tekanan darah, obat cacing, obat asma, penambah darah, mengobati sakit perut, penyakit hati, karminatif, stimulant, gatal-gatal, gigitan serangga,

28

diare dan reumatik. Kandungan kurkumin didalam kunyit berkisar 3–4% (Joe et al; 2004; Eighner dan Schulz, 1999). 2.6

Teknik Sampling Sampel adalah bagian dari populasi yang menjadi objek penelitian

(sampel

sendiri secara

harfiah berarti contoh). Alasan perlunya

pengambilan sampel adalah sebagai berikut : keterbatasan waktu, tenaga dan biaya; lebih cepat dan lebih mudah; memberi informasi yang lebih banyak dan dalam; dapat ditangani lebih teliti (Nasution R, 2003). Populasi penelitian terdiri dari populasi sampling dan populasi sasaran. Populasi sampling adalah keseluruhan objek yang diteliti, sedangkan populasi sasaran adalah populasi yang benar-benar dijadikan sumber data. Pemilihan teknik pengambilan sampel merupakan upaya penelitian untuk mendapat sampel yang representatif (mewakili), yang dapat menggambarkan populasinya. Teknik pengambilan sampel tersebut dibagi atas 3 kelompok besar, yaitu : 1. Sampel Acak atau Random Sampling / Probability Sampling : pada pengambilan sampel secara

random, setiap unit populasinya

mempunyai kesempatan yang sama untuk diambil sebagai sampel. Keuntungan pengambilan sampel dengan probability sampling adalah sebagai berikut : - Derajat kepercayaan terhadap sampel dapat ditentukan. - Beda penaksiran parameter populasi dengan statistik sampel, dapat diperkirakan. - Besar sampel yang akan diambil dapat dihitung secara statistik.

29

Ada 5 cara pengambilan sampel yang termasuk secara random, yaitu sebagai berikut : a. Sampel Random Sederhana (Simple Random Sampling) : Proses pengambilan

sampel

dilakukan

dengan

memberi

kesempatan yang sama pada setiap anggota populasi untuk menjadi anggota sampel. Keuntungan

: prosedur mudah dan sederhana

Kerugian

: membutuhkan daftar seluruh anggota populasi, biaya transportasi besar.

b. Sampel Random Sistematik (Systematic Random Sampling) : Proses pengambilan sampel, setiap urutan dari titik awal yang dipilih secara random. Keuntungan

: perencanaan dan penggunaannya mudah, sampel tersebar di daerah populasi.

Kerugian

: membutuhkan daftar populasi.

c. Sampel Random Berstrata (Stratified Random Sampling) : Populasi dibagi strata-strata (sub populasi), kemudian pengambilan sampel dilakukan dalam setiap strata baik secara simple random sampling,maupun secara systematik random sampling. Keuntungan

: taksiran mengenai karakteristik populasi lebih tepat.

Kerugian

: daftar populasi setiap strata diperlukan.

d. Sampel Random Berkelompok (Cluster Sampling) :

30

Pengambilan sampel dilakukan terhadap sampling unit, dimana sampling unitnya terdiri dari satu kelompok (cluster). Tiap item (individu) di dalam

kelompok yang terpilih akan diambil sebagai

sampel. Keuntungan

: tidak memerlukan daftar populasi

Kerugian

: prosedur sulit

e. Sampel Bertingkat (Multi Stage Sampling) : Proses pengambilan sampel dilakukan bertingkat, baik bertingkat dua maupun lebih. Keuntungan Kerugian

: biaya transportasi kurang :prosedur

sulit,prosedur

pengambilan

sampel

memerlukan perencanaan yang lebih cermat. 2. Non Probability Sample (Selected Sample) : pemilihan sampel tidak secara random. Cara ini dipergunakan : bila biaya sangat sedikit, hasil yang diminta segera, tidak memerlukan ketepatan yang tinggi. Ada 3 cara yang dikenal : a. Pusposive Sampling : Pengambilan sampel dilakukan hanya atas dasar pertimbangan penelitinya saja yang menganggap unsur-unsur yang dikehendaki telah ada dalam anggota sampel yang diambil. b. Accidental Sampling : Sampel diambil atas dasar seandainya saja, tanpa direncanakan lebih dahulu. Juga jumlah sampel yang dikehenadaki tidak berdasarkan pertimbangan yang dapat dipertanggung jawabkan, asal memenuhi keperluan saja. Kesimpulan yang diperoleh bersifat kasar dan sementara saja. 31

c. Quota Sampling : Pengambilan sampel hanya berdasarkan pertimbangan peneliti saja, hanya disini besar dan kriteria sampel telah ditentukan lebih dahulu. Cara ini dipergunakan kalau peneliti mengenal betul daerah dan situasi daerah dimana penelitian akan dilakukan. 3. Investigatif Sampel : pemilihan sampel diambil secara acak dan dilihat dari nomor registrasi peminatan

yang

masyakarakat

berbeda untuk setiap sampel serta

yang

cukup

tersebut.

32

tinggi

terhadap

produk

BAB III KERANGKA KONSEP Boraks bukan merupakan senyawa yang digunakan pada makanan atau sebagai bahan tambahan Boraks memilik efek akumulasi yang berbahaya jika dikonsumsi karena menimbulkan keracunan akut maupun kronis bahkan kematian Berdasarka penelitian-penelitian masih banyak ditemukan produk mie yang mengandung boraks

Boraks tidak boleh digunakan sebagai BTM (Permenkes RI 1168/MENKES/PER/X/1999 Perlu diteliti kandungan boraks pada mie yang beredar di pasar Ciputat Penyiapan Alat dan Bahan Pembuatan Kurva Kalibrasi Uji Linearitas

Pembuatan Larutan Uji dan Pereaksi Uji Validasi

Uji Akurasi Uji Presisi Uji LOD dan LOQ

Larutan Kurkumin 0,125%

Larutan Asam Sulfat Pekat – Asetat 1 : 1 Larutan NaOH 10% Pembuatan Mie Basah dengan kadar boraks 6,2550 µg/ml

Penetapan Kadar dengan Sampel Uji

Uji Kualitatif

Uji Kuantitatif dengan Spektrofotometer UV–Vis

Tes Nyala Api

Tes Warna dengan Peraksi Kurkumin 3 3

BAB IV METODOLOGI PENELITIAN

4.1

Pengambilan Sampel Sampel yang digunakan terdiri dari 5 Mie basah yang beredar di pasar Ciputat. Mie basah yang diambil berdasarkan teknik sampling investigativ, yaitu mencari tahu secara langsung asal pabrik pembuat mie basah yang dijual para pedagang tersebut. Dari hasil investigasi seluruh pedagang mie basah yang berjumlah ± 20 pedagang didapatkan 5 pabrik utama yaitu pabrik di daerah Bandung, pabrik di daerah Parung, pabrik dari Tangerang, dan 2 sampel dari pabrik di Ciputat dengan bentuk dan warna yang berbeda.

4.2

Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian dilakukan di laboratorium Kimia Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan (FKIK) UIN Syarif Hidayatullah Jakarta . Penelitian ini berlangsung dari bulan Agustus 2009 sampai dengan bulan November 2009.

4.3

Alat dan Bahan

4.3.1

Alat Alat yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu: Alat gelas yang umum terdapat dilaboratorium, timbangan listrik,

mesin

penggiling mie sederhana, oven, tanur, alat refluks, kertas saring, Bunsen, waterbath, hot plate dan instrument spektrofotometer UV-Vis.

34

4.3.2

Bahan Bahan- bahan yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu : Boraks proanalisa (Merck), Kurkumin proanalisa (Merck), tepung terigu merk cakra kembar, telur, garam dapur, soda kue (natrium karbonat), Alkohol 96%, asam asetat pekat, asam sulfat pekat, NaOH 10%, H2 O2 30%, Ca(OH)2, asam oksalat, mie basah, aquades,

4.4

Prosedur Penelitian

4.4.1

Penyiapan Bahan Baku dan Pereaksi 1.

Pembuatan Larutan kurkumin 0,125% Ditimbang kurkumin sebanyak 125 mg, dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml, ditambahkan asam asetat pekat sampai larut dan ditambahkan asam asetat tersebut sampai larut dan sampai garis tanda.

2.

Pembuatan larutan asam sulfat pekat-asam asetat (1 : 1) Diukur 100 ml larutan asam asetat pekat, dimasukkan ke dalam Erlenmeyer 250 ml. diukur asam sulfat pekat 100 ml, dicampurkan sedikit–sedikit pada asam asetat pekat sampai homogen.

3.

Pembuatan larutan NaOH 10% Ditimbang NaOH 10 gram dilarutkan dengan air suling sampai larut dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml, ditambahkan aquadest sampai garis tanda.

4.

Pembuatan mie basah dengan penambahan boraks Ditimbang 250 gram tepung terigu, 1 buah telur ayam (62,5 gram), garam 0,5 gram, soda kue (natrium bikarbonat) 0,4 gram dan air suling 15 ml. campurkan semua bahan dalam wadah plastik, dan aduk hingga

35

tercampr rata. Timbang adonan 20 gram sebanyak 12 buah. Kemudian setiap 20 gram adonan mie ditambahkan dengan boraks sesuai dengan kadar (2.5 mg boraks untuk 6,25 µg/ml, 4 mg boraks untuk 10 µg/ml, 5 mg boraks untuk 12,5 µg/ml, 7mg boraks untuk 18,75 µg/ml, 8mg boraks untuk 20 µg/ml, 10 mg boraks untuk 25 µg/ml, 12 mg boraks untuk 30 µg/ml, 12,5 mg boraks untuk 31,25 µg/ml, 15 mg boraks untuk 37 µg/ml, 17,5 mg boraks untuk 43,75 µg/ml, 20 mg boraks untuk 50 µg/ml. Kemudian masing-masing adonan dihaluska dan di cetak seperti mie. 5.

Pembuatan larutan Mie basah yang sudah ditambahkan boraks Ditimbang mie yang sudah dicampur boraks dengan kadar 6,25 µg/ml sebanyak 5 gram Dimasukkan ke dalam labu alas bulat 250 ml, kemudian ditambahkan 20 ml H2SO4 pekat. Labu ditutup dengan alat refluks sederhana dan dipanaskan selama 5 menit untuk meratakan larutan asam, sampai permukaan larutan mulai bergerak dan larutan akan menjadi hitam dan licin kemudian labu tersebut didinginkan dalam air es dan bila terdapat asap dibiarkan terbuka beberapa saat. Kemudian larutan dengan cepat ditambahkan 20 ml H2O2 30 %, larutan akan bergolak sehingga mie yang padat berubah menjadi cairan, dan akan keluar asap keunguan, dibiarkan hingga asap berkurang, kemudian di refluks kembali selama 15 detik, dinginkan didalam air es, didiamkan pada suhu ruangan. Kemudian di masukkan ke dalam labu ukur 100 ml, dan diencerkan dengan aquadest pada suhu ruangan. Lakukan cara yang sama pada mie

36

dengan boraks pada kadar 10 µg/ml, 12,5 µg/ml, 18,75 µg/ml, 20 µ g/ml, 25 µg/ml, 30 µg/ml, 31,25 µg/ml, 37 µg/ml, 43,75 µg/ml, 50 µg/ml.

4.4.2

Penentuan panjang gelombang maksimum. Dari larutan mie dengan kadar 25 µg/ml dipipet 1 ml kemudian dimasukkan ke dalam cawan porselin dan ditambahkan 1 ml larutan NaOH 10%, dipanaskan di atas penangas air sampai kering, kemudian pemanasan dilanjutkan dengan oven pada suhu 1000 ± 50 C selama 5 menit, didinginkan. Ditambahkan 3 ml larutan kurkumin 0,125% dipanaskan sambil diaduk selama 5 menit, didinginkan lagi. Kemudian ditambahkan 3 ml larutan asam sulfat–asetat (1:1) dipanaskan sambil diaduk sampai tidak ada warna kuning, baik pada cawan maupun pada pengaduk, didiamkan selama 15 menit. Ditambahkan sedikit alkohol kemudian dimasukkan ke dalam labu kur 100 ml, diencerkan dengan alkohol sampai garis tanda. Kemudian larutan disaring dengan kertas penyaring. Hasil saringan dikumpulkan dan diamati serapannya pada panjang gelombang antara 400 sampai 600 nm.

4.4.3

Pembuatan kurva kalibrasi dan validasi metoda Dari larutan 6,25 µg/ml dipipet 1 ml kemudian dimasukkan ke dalam cawan porselin dan ditambahkan 1 ml larutan NaOH 10%, dipanaskan di atas penangas air sampai kering, kemudian pemanasan dilanjutkan dengan oven pada suhu 1000 ± 50 C selama 30 menit, kemudian didinginkan pada suhu ruangan. Ditambahkan 3 ml larutan kurkumin 0,125% dipanaskan sambil diaduk selama 5 menit, didinginkan lagi. Kemudian ditambahkan 3 ml larutan asam sulfat–asetat (1:1) dipanaskan sambil diaduk sampai tidak ada warna kuning, baik pada cawan maupun pada pengaduk, didiamkan selama 15 menit. 37

Ditambahkan sedikit alkohol kemudian dimasukkan ke dalam labu kur 100 ml, diencerkan dengan alkohol sampai garis tanda. Disaring dengan kertas saring. Hasil saringan dikumpulkan dan diamati serapannya pada panjang gelombang 545,95 nm. Lakukan hal yang sama pada, 12,5 µg/ml, 18,75 µg/ml, , 25 µg/ml, , 31,25 µg/ml, 37 µg/ml, 43,75 µg/ml, 50 µg/ml untuk kurva kalibrasi dan 10 µg/ml, 20 µg/ml, 30 µg/ml untuk validasi metoda.

4.4.4

Analisa sampel pasar secara kualitatif dan kuantitatif a.

Analisa kualitatif

1.

Uji nyala api Ditimbang 5gram sampel dan masukkan dalam cawan

porselen

ditambahkan 10 tetes asam sulfat pekat, kemudian ditambah 2 ml methanol dan dibakar. Bila timbul nyala hijau akan terdapat senyawa boron sebagai metal borat atau etil borat.

2.

Uji kurkumin Lebih kurang 20 gram sampel dibubuhi hablur natrium karbonat secukupnya. Arangkan di atas nyala api Bunsen dan abukan didalam tanur listrik. Dinginkan, lalu tambahkan air dan beberapa tetes asam klorida 5 N, saring. Tambahkan 4 tetes asam oksalat jenuh dan1 ml ekstak etil alkohol dan kurkumin. Uapkan di atas penangas air, bila residu berwarna merah ceri dan berubah menjadi hijau kehitaman setelah diberi ammonium/natrium hidroksida encer, boraks/asam borat positif .

38

b.

Analisa Kuantitatif dengan Spektrofotometri Uv-Vis Ditimbang sampel mie basah dari pasar sebanyak 5 gram Dimasukkan ke dalam labu alas bulat 250 ml, kemudian ditambahkan 20 ml H2SO4 pekat. Labu ditutup dengan alat refluks sederhana dan dipanaskan selama 5 menit untuk meratakan larutan asam, sampai permukaan larutan mulai bergerak dan larutan akan menjadi hitam dan licin kemudian labu tersebut didinginkan dalam air es dan bila terdapat asap dibiarkan terbuka beberapa saat. Kemudian larutan dengan cepat ditambahkan 20 ml H2O2 30 %, larutan akan bergolak sehingga mie yang padat berubah menjadi cairan, dan akan keluar asap keunguan, dibiarkan hingga asap berkurang, kemudian di refluks kembali selama 15 detik, dinginkan didalam air es, didiamkan pada suhu ruangan. Kemudian di masukkan ke dalam labu ukur 100 ml, dan diencerkan dengan aquadest pada suhu ruangan. Dari larutan tersebut dipipet 1 ml kemudian dimasukkan ke dalam cawan porselin dan ditambahkan 1 ml larutan NaOH 10%, dipanaskan di atas penangas air sampai kering, kemudian pemanasan dilanjutkan dengan oven pada suhu 100 0

± 50 C selama 5 menit,

didinginkan. Ditambahkan 3 ml larutan kurkumin 0,125% dipanaskan sambil diaduk selama 5 menit, didinginkan lagi. Kemudian ditambahkan 3 ml larutan asam sulfat–asetat (1:1) dipanaskan sambil diaduk sampai tidak ada warna kuning, baik pada cawan maupun pada pengaduk, didiamkan selama 15 menit.

39

Ditambahkan sedikit alkohol kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml, diencerkan dengan alkohol sampai garis tanda. Disaring dengan kertas saring. Hasil saringan dikumpulkan dan diamati serapannya pada panjang gelombang 545,95 nm

40

BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN

5.1

Hasil Dari penelitian yang dilakukan didapatkan hasil sebagai berikut : 1. Pada penentuan panjang gelombang didapatkan panjang gelombang serapan maksimum boraks sebesar 545,9 nm. Data selengkapnya dapat dilihat pada lampiran 3. 2. Hasil uji liniearitas dan pembuatan kurva kalibrasi Pada pembuatan kurva kalibrasi dilakukan dengan menggunakan deret konsentrasi pada kisaran 6,25-50 µ g/ml, dan didapatkan kurva kalibrasi boraks sebagai berikut :

kurva Kalibrasi 0.6 y = 0.012x + 0.008 R² = 0.999

0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0

10

20

30

40

konsentrasi (µg/ml)

Gambar 6. Kurva kalibrasi boraks pada mie basah Persamaan garis

: y = 0,008 + 0,012x

Koefisien korelasi (r)

: 0,9994

Data selengkapnya dapat dilihat pada lampiran 4.

50

41

3. Pada Pengujian batas deteksi boraks dengan mie basah simulasi pada percobaan ini adalah sebesar 3,1132 µg/ml sedangkan untuk batas kuantitasi sebesar 10,3775 µg/ml. Data selengkapnya dapat dilihat pada lampiran 5. 4. Hasil Uji Perolehan Kembali (Akurasi) dari 3 konsentrasi boraks dalam mie basah simulasi yaitu 99,767±1,114 %. Data selengkapnya dapat dilihat pada lampiran 6. 5. Hasil uji keseksamaan (presisi) pada 3 konsentrasi boraks dalam mie basah simulasi yang diuji pada percobaan ini memberikan nilai koefisien variasi dibawah 2%. Data selengkapnya dapat dilihat pada lampiran 7. 6. Pada 2 uji kualitatif sampel mie basah yang beredar di pasar Ciputat dari lima sampel yang beredar, pada penelitian ini negativ mengandung boraks. Data selengkapnya dapat dilihat pada lampiran 11. 7. Penetuan kadar sampel mie basah yang beredar di pasar Ciputat dari lima sampel

yang beredar, terdapat empat mie basah yang

mengandung boraks. Mie tersebut memiliki kadar boraks yang berbeda-beda. Data selengkapnya dapat dilihat pada lampiran 8.

5.2

Pembahasan Boraks pada awal mula dikenal sebagai bahan antiseptik yang digunakan sebagai bahan pembersih, pengawet kayu, dan herbisida namun sekarang banyak digunakan sebagai bahan tambahan makanan pada mie, gendar, atau kerupuk gendar (kerupuk nasi) sebagai pengenyal dan

42

pengawet. Pada penelitian ini menggunakan sampel mie basah yaitu mie yang mengandung kadar air 51 % dan sering ditambahkan boraks sebagai pengenyal. Absorbsi boraks secara berulang atau absorpsi berlebihan dapat mengakibatkan toksik (keracunan).

Dalam air, boraks merupakan

campuran natrium metaborat dan asam borat. Sedangkan dalam suasana asam boraks terurai menjadi asam borat. Dengan demikian, baik waktu pengolahan makanan dengan air maupun karena dimakan dan melalui lambung yang bersifat asam, didalam tubuh akan ditemukan asam borat setelah mengkonsumsi makanan yang mengandung boraks. Gejala dapat berupa mual, muntah, diare, suhu tubuh menurun, lemah, sakit kepala, rash erythematus, bahkan dapat menimbulkan shock. Metode pada penelitian ini terdiri dari beberapa tahap sehingga sampel yang berupa padatan dapat dijadikan larutan yang dapat dibaca pada alat spektrofotometri UV-Vis. Tahap awal yaitu mendestruksi sampel mie basah menggunakan larutan H2SO4 pekat yang ditutup dengan refluks dan dipanaskan dengan suhu kecil 500-700 C untuk meratakan larutan asam selama 30 menit atau sampai larutan menjadi hitam dan licin. Kemudian ditambahkan oksidator

H2O2 30 % yang berguna untuk mereduksi

senyawa organik menjadi C0 2 dan H2O sehingga larutan akan menjadi jernih. Penggunaan H2SO4 dan H2 O2 30 % dilakukan dengan perbandingan 1:1. Selanjutnya di encerkan dengan aquadest. Dari larutan tersebut dipipet 1 ml dan ditambahkan NaOH sebagai pengikat unsur boron. Kemudian dipanaskan dengan water bath selama 90 menit dan dikeringkan dengan oven pada suhu 100±5 0 C selama 30 menit.

43

Hal ini dilakukan karena senyawa kompleks ini mudah terhidrolisis oleh adannya air, sehingga diusahakan untuk menghilangkan air yang ada dengan jalan pemanasan. Larutan boraks merupakan larutan yang tidak berwarna, hal ini menjadi kendala

karena

larutan

yang

akan

digunakan dengan

spektrofotometri UV-Vis harus memiliki gugus kromofor yang ditandai dengan warna. Sehingga pada penelitian ini boraks direaksikan dengan dengan kurkumin sebagai pembentuk kompleks warna rosocyanin yang menghasilkan warna rosa. Kurkumin merupakan zat warna alam, selain digunakan untuk pewarna makanan dan kosmetik, juga dapat digunakan sebagai penunjuk adanya boraks pada makanan. Oleh asam kuat, boraks terurai dari ikatanikatannya menjadi asam borat dan diikat oleh kurkumin membentuk kompleks warna rosa yang sering disebut kelat rosasianin atau senyawa Boron Cyano Kurkumin Kompleks. yaitu suatu zat yang berwarna merah, dengan reaksi sebagai berikut

44

O C

O

O C H2

C

C

CH

CH

CH

CH

OH

C H

C

CH

CH

CH

CH

OH

OH

H 3 CO

OCH3

H 3 CO

OH

OCH3

OH

+ H3 BO 3

Kurkumin

(OH)3 B O HC

O

C H2

CH

CH

CH

CH

CH

OH

OH

H 3 CO

OCH3

Gambar 7. Kompleks Rosocyanin Konsentrasi kurkumin yang digunakan adalah 0,125 % berdasarkan penelitian terdahulu, bahwa pada kisaran 0,100%-0,150% kurkumin dapat larut sempurna dalam asam asetat tanpa proses penyaringan. Stabilitas kompleks warna yaitu 2 jam setelah kompleks warna yang terjadi dilarutkan dalam alkohol dalam keadaan asam, sehingga dalam percobaan ini pengamatan pada spektrofotometer tidak lebih dari 2 jam setelah kompleks tersebut dilarutkan dalam alkohol. Penentuan nilai serapan suatu sampel harus berada pada panjang gelombang maksimum sehingga didapatkan nilai yang maksimal. Pada penelitian sebelumnya panjang gelombang maksimum boraks yaitu 548 nm. Namun dikarenakan kondisi preparasi sampel yang berbeda sehingga perlu dilakukan penetapan panjang gelombang maksimum pada penelitian ini. Penetapan dilakukan dengan menggunakan simulasi mie basah dengan

45

kadar boraks sebesar 25 µg/ml. Dari hasil pengukuran panjang gelombang serapan maksimum boraks tersebut adalah sebesar 545,95 nm berdasarkan nilai tertinggi dari data serapan. Suatu

metode

penelitian

perlu

dilakukan

validasi

untuk

membuktikan bahwa hasil yang diperoleh merupakan hasil yang akurat dan memenuhi persyaratan untuk penggunaannya. Validasi metode analisis merupakan suatu tindakan penilaian terhadap parameter tertentu yang bertujuan untuk menjamin bahwa metode analisa yang digunakan akurat, spesifik, dan tahan pada kisaran analit yang akan dianalisis dan sesuai dengan . Dalam penelitian ini, parameter- parameter validasi yang dilakukan yaitu liniearitas, batas deteksi dan batas kuantisasi, kecermatan, dan keseksamaan. Menggunakan sampel mie yang dibuat sendiri dengan penambahan boraks pada kadar tertentu, hal ini dimaksudkan agar tidak terjadi penyimpangan yang terlalu jauh. Tahap pertama yaitu pembuatan kurva kalibrasi. Kurva kalibrasi dihitung berdasarkan persamaan yang diperoleh dari nilai absorban pada berbagai deret konsentrasi. Deret konsentrasi yang dibuat yaitu 6,25-50 µg/ml dan kurva kalibrasi ini untuk memperoleh hasil-hasil uji secara langsung proporsional dengan konsentrasi analit pada kisaran yang diberikan. Dari kurva kalibrasi tersebut didapat persamaan regresi y = 0.012x + 0.008 dengan koefisien korelasi (r) sebesar 0,9994. Kriteria penerimaan dari koefisien korelasi adalah (r) sebesar ≥ 0,9995 yang berarti bahwa hasil kurva antara absorban dan konsentrasi tersebut linier, yaitu

46

apabila terjadi peningkatan pada nilai konsentrasi, nilai absorban juga meningkat. (Ibrahim,2009; Harmita,2006) Berdasarkan data kurva kalibrasi, dapat dilakukan validasi metode yaitu linieritas, batas kuantitasi, dan batas deteksi. Linieritas adalah kemampuan metode analisis yang memberikan respon yang secara langsung atau dengan bantuan transformasi matematika yang baik, proporsional terhadap konsentrasi analit dalam sampel. Sebagai parameter adanya hubungan linier digunakan koefisien korelasi r pada analisis regresi linier Y = a + bx. Hubungan linear yang ideal dicapai jika nilai b = 0 dan r ≥ 0,9995 dan nilai a yang menunjukkan kepekaan analisis terutama instrument yang digunakan (Harmita, 2006). Hasil yang didapat yaitu Y = 0.012x + 0.008 dengan r = 0,9994, sehingga disimpulkan hasil yang didapat memenuhi persyaratan dari parameter linieritas. Parameter selanjutnya yang menggunakan data kurva kalibrasi yaitu parameter batas deteksi dan batas kuantitas. Batas deteksi adalah jumlah terkecil analit dalam sampel yang dapat dideteksi yang masih memberikan respon signifikan, sedangkan batas kuantitasi merupakan parameter pada analisa sebagai kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi kriteria cermat dan seksama (Harmita,2006). Batas deteksi dan kuantitasi dihitung secara statistik melalui garis linier dari kurva kalibrasi. Pada penelitian ini didapatkan nilai batas deteksi sebesar 3,1132 µg/mldan batas kuantitasi sebesar 10,3775 µg/ml. Hasil tersebut menyatakan bahwa nilai terkecil yang dapat dideteksi dan masih memberikan respon signifikan yaitu sebesar 3,1132 µg/ml dan kuantitas

47

terkecil yaitu sebesar 10,3775 µg/ml yang masih dapat memenuhi kriteria cermat dan seksam. Selanjutnya dilakukan uji kecermatan yang merupakan derajat kedekatan hasil yang diperoleh dengan kadar analit yang sebenarnya. Parameter kecermatan ditentukan dengan cara mengukur absorban dari tiga konsentrasi larutan mie buatan yang mengndung boraks. Kecermatan metode dapat dilihat dari persen perolehan kembali boraks pada mie. Persen perolehan kembali yang diperoleh dalam penelitian ini sebesar 99,767±1,114 %. Hasil yang dapat memenuhi syarat dari uji perolehan kembali yaitu sebesar 98-102% (Harmita,2006). Pada penetapan kembali kadar boraks dengan metode spektrofotometri Uv-Vis ini, banyak faktor yang menyebabkan hilangnya kadar boraks yaitu mulai saat proses pembuatan mie sampai pengamatannya pada spketrofotemer, yang mana kehilangan kadar tersebut tidak dapat dihindari sehingga untuk mengatasi hal tersebut, dalam analisa ini dibuat keseragaman proses antara lain wadah yang digunakan untuk membuat mie adalah sama, proses penggilingan mie dilakukan tiga kali dengan alat penggiling mie, waktu pemanasan pada penangas air sama yaitu 1 jam dan pengeringan dengan oven sama yaitu selama 30 menit dan setelah terbentuk kompleks warna dalam larutan alkohol diamati pada waktu tidak kurang dari 2 jam. Uji yang dilakukan selanjutnya adalah uji keseksamaan, yaitu derajat keterulangan dari suatu metode analisis. Parameter keseksamaan ditentukan dengan cara mengukur absorban dari tiga konsentrasi boraks dalam mie sebanyak tiga kali dalam satu hari. Keseksamaan metode dapat

48

diukur dari nilai keofisien variansi dari data tersebut. Nilai koefisien variasi yang diperoleh dalam penelitian ini yaitu 1,12 %. Nilai yang didapat memenuhi kriteria dari uji keseksamaan yaitu sebesar ≤ 2 % (Harmita,2006). Setelah didapat nilai validasi yang dapat memenuhi kriteria, kemudian dilakukan identifikasi boraks pada mie yang beredar di pasar Ciputat. Metode pengambilan sampel yaitu metode investigasi dan acak. Di dapatkan lima penjual besar di pasar tersebut. Sehingga sampel yang diambil sebanyak lima sampel mie basah dari pasar Ciputat. Identifikasi pertama dilakukan secara kualitatif dengan dua pengujian, yaitu uji nyala api dan uji kurkumin. Pada uji nyala api, sampel ditambahkan asam sulfaft pekat 1ml dan methanol 5ml yang kemudian dibakar. Indikasi adanya boraks pada sampel adalah dengan adanya nyala hijau pada saat pertama dibakar. Hasil pada kelima sampel pasaran tersebut negatif atau tidak dihasilkan nyala hijau pada saat dibakar. Methanol akan terbakar dengan nyala hijau disebabkan oleh pembentukan etil borat atau metal borat (soetiono,1985;Basir,1992). Pada uji kedua dilakukan dengan penambahan kurkumin dengan perubahan warna sebagai indikator. 20 gram sampel pasaran ditambahkan natrium karbonat kemudian diarangkan dengan api Bunsen kemudian diabukan dalam tanur. Tambahkan asam klorida5 N, dan disaring. Tambahkan asam oksalat jenuh dan kurkumin yang dilarutkan dengan etil alkohol kemudian diuapkan diatas penangas air. Perubahan warna sebagai indikator posistif yang terjadi yaitu merah ceri yang akan berubah warna

49

menjadi hijau kehitaman setelah diberi natrium hidroksida encer. Pada sampel pasaran warna yang timbul yaitu merah ceri, namun ketika ditambahkan natrium hidroksida encer tidak berubah warna atau tetap berwarna merah ceri. Sehingga disimpulkan tidak ada boraks pada sampel mie pasar tersebut. Setelah dilakukan uji kualitatif, kemudian dilanjutkan dengan pengujian secara kuantitatif. Untuk analisa kuantitatif, pada penelitian ini dilakukan dengan menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis dengan menggunakan pereaksi kurkumin, dimana boron dari senyawa boraks diikat oleh kurkkumin membentuk kompleks warna rosa. Dari lima sampel yang diuji didapatkan empat sampel mengandung boraks sebesar 3,76112±0,0451 pada sampel yang berasal dari produksi di Ciputat.1, 108,592±0,02185 pada sampel yang berasal dari produksi di Ciputat 2, 117,9461±0,01455 pada sampel yang berasal dari produksi di Parung, dan 6,275±0,0221 pada sampel yang berasal dari produksi di Tangerang.

50

BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN

6.1

Kesimpulan Dari hasil penelitian yang telah dilakukan dapat diambil kesimpulan sebagai berikut : 1. Validasi metode yang telah dilakukan dapat memenuhi syarat dilihat dari hasil-hasil antara lain : hasil Uji linieritas pada rentang konsentrasi 6,25-50 µg/mL dengan nilai koefiesien korelasi (r) 0,9994. Batas deteksi dari larutan mie boraks sebesar 3,1132

µg/mL dan batas

kuantitasi sebesar 10,3775 µg/mL. Persen perolehan kembali dari 3 larutan mie simulasi yang diperoleh dalam penelitian ini sebesar 101,09 %, 98,88 %, dan 99,33% 2. Berdsarkan hasil uji kualitatif pada lima sampel mie basah yang beredar di pasar Ciputat tidak ditemukan adanya boraks namun hasil uji kuantitatif positif empat sampel mengandung boraks dengan kadar boraks 3,76112 µg/mL , 108,592 µg/mL, 117,9461 µg/mL, dan 6,275 µg/mL 6.2

Saran Berdasarkan hasil-hasil penelitian dapat disarankan sebagai berikut: 1. Agar dilakukan penelitian lebih lanjut pada produk mie basah atau mie lainnya dengan menggunakan metode atau alat lain.

51

2. Agar dilakukan penetapan kadar pada sampel selain mie, seperti lontong, tahu, otak-otak atau kerupuk yang diketahui sering ditambahkan boraks pada pembuatannya di pasar-pasar besar lainnya. 3. Agar adanya penertiban dan kerja sama dari berbagai pihak dalam memberikan informasi tentang penggunaan bahan tambahan makanan yang tidak boleh digunakan pada makanan agar masyarakat dapat mengerti.

52

DAFTAR PUSTAKA Basir. Keberadaan Asam Borat pada Bahan Makanan . Buletin penelitian dan pengembangan Industri.1992; 15,39-40 Cahyadi, wisnu. Analisa dan Aspek kesehatan Bahan Tambahan pangan.Bumi Aksara.Jakarta.2008; 4, 252 – 253, 266 – 267

Departemen Kesehatan RI. 1995. Farmakope Indonesia Edisi III. Jakarta : Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan; 49 -50,427-428 Departemen Kesehatan RI. 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta : Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan 1979; 605,1061-1063 Departemen Kesehatan R.I. Peraturan Mentri Kesehatan Republik Indonesia No. 1168/MENKES/PER/X/1999. Tentang Bahan Tambahan Makanan .Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.1999 Des

Rosier, N.W. Teknologi Press.Jakarta.1988;76-77

Pengawetan

Pangan,edisi

III.UI

Dibble,W.T,Analytical Chemistry vol.26.1965;418-421 Dit. Jen. POM. Penggunaan pengawet, Pewarna dan Pemanis pada Produk Mie, Bakso, Kerupuk, dan Minuman Ringan. Buletin Direktorat Jendral POM. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1994; 16, 22, 26, 29 Dreisbach, R.H.Handbook of Poisoning, 8th ed. Lange Medical Publication,Los Altos, Calirornia.1974; 314-315 Flanaga, R.J.,Braithwaite,R.A.,Brown,S.S.,Widdop,B.,de Wolff,F.A.Basic Analytical Toxicology, World Healt Organization. Geneva1995; 85 Gandjar, Ibnu Gholib dan Abdul Rohman. 2009. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Hal: 18-19;199;456-474 Goodman, LS,, Gilman, A. The Pharmacological Basis of Therapeutics 5 th ed. Macmillan Publishing Co.,Inc,NY.1975; 994 – 995. Gosselin, R.E.,Smith,Robert P.,Hodge,H.C.,Clinical Toxicology of Commercial Products, 5th ed London.66-68. Haddad, L.M.,Winchester,J.F.Borats on Clinical Management of Poisoning and Drug Overdose.WB Saunders Co. Philadelphia-London-MontrealToronto-Sydney-Tokyo.1990; 1447-1449. Harmita,APT. Analisa Fisikokimia.UI Press. Jakarta. 2006;17,144-152.

53

Horwitz, Wiliam. Official Method of Analysis of the Association of official Analytical Chemist International,17th ed.AOAC Inc, USA. 2002; 11-12. http://dapurvie.multiply.com/journal/item/46/Mie_aYAm. 12 Juni 2009. pukul 17.25. Ibrahim, slamet.,Sriwoelan press.2007

S.Seri

Farmakokimia

Metode

Volumetri.ITB

Mulya, Muhammad., Syahrani,Ahmad.Aplikasi Analisis Spektrofotometri UvVis..Mechipso Grafika.Surabaya.1987; 3 -44.

Mujamil, jejen. Boraks pada Beberapa Jenis Makanan di Kotamadya Palembang . Cermin Dunia Kedokteran.1997 ; No. 120 hal 17-21. Reynold, J. E. F. Martindale The Extra Pharmacopoeia, 28th ed. The Pharmaceutical Press. London. 1982; 337, 432. Roth, H.J.Pharmaeutische Analytic.George thime Verlag.Sutgart.1978;22-23. Soetanto.1992.Penetapan Kadar Boraks Dlam Bakso Dengan Metode Spektrofotometri Sinar Tampak Menggunakan Pereaksi Kurkumin.skripsi Proram Sarjana Farmasi.FMIPA-UNAIR.Surabaya. Setiono, L.,Pudjaatmaka, A.H. Vogel, Buku Teks Analisa Anorganik Kualitatif Makro dan Semimakro,ed 5. PT Kalman Media Pusaka. Jakarta.1985;368. Winarno, F.G.,Sulistyowati, Titi. Bahan Tambahan untuk Makanan dan Kontaminan. Pustaka Sinar Harapan. Jakarta. 1994; 104-105, 108. Winarno, F.G.,Sulistyowati, Titi. Bahan Tambahan untuk Makanan dan Kontaminan. Pustaka Sinar Harapan. Jakarta. 1994; 6-10. Winarno, F.G.Kimia Pangan dan Gizi.Gramedia Press.Jakarta.1988; 224 – 225. Windholz, Martha, et el.The Merck Index,10 th ed.Merck & Co,Inc.New York, USA.1983; 255 – 257. Zulharmita, Akmal. Kandungan Boraks pada Makanan Jenis Mie yang Beredar di Kotamadya Padang. Cermin Duni Kedokteran. Grup PT Kalbe Farma,1995; 27

5 4

55

Lampiran 1. Sampel Boraks

Gambar 8. Dinatrium Tetraborat (Boraks)

56

Lampiran 2. Skema Kerja

a. Pembuatan larutan uji dan pereaksi.

Larutan Uji

NaOH 10 %

Timbang 100 gr NaOH Larutkan dengan Aquadest hingga larut

Kurkumin 0,125%

Asam Sulfat Pekat : Asam asetat (1 : 1)

Timbang 125 mg Kurkumin

Siapkan 50 ml asam asetat pekat dan 50 ml asam sulfat pekat

Dilarutkan dengan asam asetat pekat 100

Masukan 50 ml asam asetat Pekat ke dalam labu ukur 100

Masukan ke labu ukur 100 ml dan ad kan dengan Aquadest sampai garis tanda

Tambahkan 50 ml asam sulfat pekat sedikit demi sedikit

Kocok pelan-pelan hingga homogen

Gambar 9. Skema Pembuatan larutan uji dan pereaksi

57

b. Pembuatan mie basah simulasi

Timbang tepung terigu 250 gr, garam 0,5 gr soda kue 0,4 gr dan 1 buah telur ayam

Campurkan semua bahan diatas aduk hingga homogen

Tambahkan air suling 15 ml

Aduk Kembali hingga homogen

Giling dengan alat penggiling mie

Ambil 20 gr dari adonan sebanyak 11 buah

• 2.5 mg boraks untuk 6,25 µg/M • 4 mg boraks untuk 10 µg/mL • 5 mg boraks untuk 12,5 µg/mL

Tambahkan boraks pada 20 gr adonan sehingga didapatkan deret boraks dalam mie basah

• 7mg boraks untuk 18,75 µg/mL • 8mg boraks untuk 20 µg/mL • 10 mg boraks untuk 25 µg/mL • 12 mg boraks untuk 30 µg/mL

Aduk hingga tercampur rata

• 12,5 mg boraks untuk 31,25 µg/mL • 15 mg boraks untuk 37µg/mL

Giling dengan alat penggiling mie

• 17,5 mg boraks untuk 43,75 µg/mL • 20 mg boraks untuk 50 µg/mL

Cetak mie dengan alat pencetak mie

Gambar 10. Skema pembuatan mie basah simulasi

58

c. Pembuatan larutan dari 11 mie basah simulasi yang mengandung boraks dengan kadar 6,25-50 µg/ml Timbang 5 gr mie basah yang sudah terdapat boraks Masukkan ke dalam labu alas bulat kemudian tambahkan 20 ml H2SO4 pekat

Kemudian di refluks agar tercampur selama 5 menit sampai larutan bergerak dan

Labu didinginkan ke dalam air es ± 1 menit (jika ada asap dibiarkan sebentar)

Tambahkan 20 ml H2O2 30%

Biarkan hingga bergulak dan timbul asap dan larutan menjadi jernih

Dinginkan dalam air es, diamkan pada suhu ruangan

Pindahkan ke dalam labu ukur 100 ml dan ditambahkan Aquadest sampai garis tanda

Gambar 11. Skema pembuatan larutan dari 11 mie basah simulasi yang mengandung boraks dengan kadar 6,25-50 µg/ml

59

d. Penentuan panjang gelombang maksimum pada larutan mie basah simulasi dengan kadar 25 µg/ml Pipet 1 ml Larutan mie basah dengan kadar 25 µg/ml masukkan dalam cawan penguap

Tambahkan NaOH 10% 1 ml

Panaskan dalam water bath hingga kering (1,5 )

Masukkan Cawan dalam oven suhu 1000C ± 5 0C ± 30 menit

Pindahkan dan dinginkan pada suhu ruangan

Tambahkan 3 ml larutan kurkumin 0,125% aduk hingga homogen ±5 menit

Tambahkan 3 ml asam asetat – asam pekat (1 : 1) aduk hingga warna kuning tidak terihat

Diamkan selama 15 menit

Larutkan dengan alkohol 96% kemudian dimasukkan ke labu ukur 100 ml dan tambahkan alkohol sampai garis tanda

Kemudian baca pada spektrofotometri Uv-Vis pada panjang gelombang 400 – 600 nm

Gambar 12. Skema Penentuan panjang gelombang maksimum pada larutan mie basah simulasi dengan kadar 25 µg/ml

60

e. Pembuatan kurva kalibrasi dan validasi metode

Pipet masing-masing 1 ml Larutan mie basah dengan kadar ,25 µg/ml,10 µg/ml, 12,5 µg/ml, 18,75 µg/ml, 20 µg/ml, 25 µg/ml,30 µg/ml, 31,25 µg/ml, 37,5 µg/ml, 43,75 µg/ml, 50 µg/ml dan masing-masing dimasukkan dalam cawan penguap

Tambahkan NaOH 10% 1 ml Panaskan dalam water bath hingga kering (2,5 – 3 jam)

0

0

Masukkan Cawan dalam oven suhu 100 C ± 5 C ± 30 menit

Pindahkan dan dinginkan pada suhu ruangan

Tambahkan 3 ml larutan kurkumin 0,125% aduk hingga homogen ±5 menit Tambahkan 3 ml asam asetat – asam pekat (1 : 1) aduk hingga warna kuning tidak terihat

Diamkan selama 15 menit

Larutkan dengan alkohol 96% kemudian dimasukkan ke labu ukur 100 ml dan tambahkan alkohol sampai garis tanda

Kemudian baca pada spektrofotometri Uv-Vis pada panjang gelombang 545,95 nm Gambar 13. Skema pembuatan kurva kalibrasi dan validasi metode

61

f. Pengujian Sampel mie basah pasar 1. Uji Kualitatif Uji Kualitatif

Uji nyala api

Uji Kurkumi

Timbang sampel 5 gr masukkan pada cawan penguap

20 gr sampel di bubuhi hablur Natrium Karbonat

Tambahkan H2SO4 10 tetes

Arangkan diatas nyala api bunsen Abukan didalam tanur listrik

Tambahkan 2 ml metanol Dinginkan Bakar Tambahkan beberapa tetes asam klorida 5 N

Indikator positif jika nyala api berwarna hijau

Tambahkan 4 tetes asam oksalat jenuh dan 1 ml ekstrak etil alkohol kurkumin

Uapkan di Water Bath Indikator positif jika warna merahceri berubah jadi hijau kehitaman saat ditambahkan NaOH encer

Gambar 14. Skema pengujian sampel mie basah pasar secara kualitatif

62

2. Uji Kuantitatif Timbang 5 gr sampel mie basah Masukkan ke dalam labu alas bulat kemudian tambahkan 20 ml H2SO4 pekat

Kemudian di refluks agar tercampur selama 5 menit sampai larutan bergerak dan licin Labu didinginkan ke dalam air es ± 1 menit (jika ada asap dibiarkan sebentar)

Tambahkan 20 ml H2O2 30%

Biarkan hingga bergulak dan timbul asap dan larutan menjadi jernih

Dinginkan dalam air es, diamkan pada suhu ruangan

Pindahkan ke dalam labu ukur 100 ml dan ditambahkan Aquadest sampai garis tanda

63

Lanjutan

Pipet 1 ml Larutan sampel mie basah masukkan dalam cawan

Tambahkan NaOH 10% 1 ml

Panaskan dalam water bath hingga kering (2,5 – 3 jam)

Masukkan Cawan dalam oven suhu 1000C ± 5 0C ± 30 menit

Pindahkan dan dinginkan pada suhu ruangan

Tambahkan 3 ml larutan kurkumin 0,125% aduk hingga homogen ±5 menit

Tambahkan 3 ml asam asetat – asam pekat (1 : 1) aduk hingga warna kuning tidak terihat

Diamkan selama 15 menit

Larutkan dengan alkohol 96% kemudian dimasukkan ke labu ukur 100 ml dan tambahkan alkohol sampai garis tanda

Kemudian baca pada spektrofotometri Uv-Vis pada panjang gelombang 545,95 nm

Gambar 15. Skema pengujian sampel mie basah pasar secara kuantitatif

64

Lampiran 3. Penentuan panjang gelombang maksimum

2.00

1.8

5 45.9 5

1.6

1.4

1.2

1.0 A 0.8

0.6

0.4

0.2

0.0

-0. 20 450.0

500

550

600 nm

650

700

750.0

Gambar 16. Kurva absorpsi boraks dengan pereaksi kurkumin Keterangan : Panjang gelombang 545,95 nm

65

Lampiran 4. Pembuatan kurva kalibrasi Tabel 1. Pengukuran serapan konsentrasi larutan boraks pada panjang geombang 545,95 nm

Konsentrasi

Serapan

(µg/mL)

(A)

6,25 12,5

0,0934 0,1623

31,25 37,5

0,3862 0,4752

43,75

0,5387

66

Lampiran 5. Penentuan batas deteksi dan batas kuantitasi boraks pada mie basah simulasi

Tabel 2. Hasil penentuan batas deteksi dan batas kuantitasi boraks pada mie basah simulasi Konsentrasi Serapan (µg/mL)

(A)

y'

y-y'

(y-y')2

6,25

0,0934

0,083

0,0104

0,00010816

12,5

0.1623

0,158

0,0043

0,00001849

31,25

0,3862

0,383

0,0032

0,00001024

37,5

0,4752

0,458

0,0172

0,00029584

43,75

0,5387

0,533

0,0057

0,00003249

Jumlah

0,00046522

y−y′ ² S (y / x)2 = −2 = 0,000155073

S (y / x) = 0,000155073 = 0,01245284439 = 0,012453 a. LOD LOD = 3. S(y / x ) = b

3 x 0,012453 0,012

= 3,1132 µg/mL

b. LOQ LOQ = 10. S(y / x ) = b

10 x 0,012453 0,01

67

= 10,3775 µg/mL

Lampiran 6. Uji perolehan kembali mie basah simulasi Tabel 3. Hasil uji perolehan kembali mie basah simulasi

C sbnrnya Absorban

UPK

UPK

UPK±SD

(µg/mL)

(%)

(%)

(%)

10,125

101,25

101,09

10,117

101,01

10,117

101,01

19,78

98,9

0,2454

19,78

98,9

0,2453

19,77

98,85

0,3656

29,8

99,33

0,3656

29,8

99,33

0,3655

29,79

99,33

(A) 0,1295 0,1294

20

30

Rata-rata

C yang diperoleh

(µg/mL) 10

Rata-rata

0,1294 0,2454

98,88

99,33

X = 99,767

UPK

=

nilai yang diperoleh Nilai yang sebenarnya

68

x 100 %

99,767±1,114

Lampiran 7. Uji Presisis mie basah simulasi Tabel 4. Hasil Uji Presisi mie basah simulasi

C sbnrnya Absorban (µg/mL) (A) 10 0,1295 0,1294

0,1294 0,2454 0,2454 0,2453 0,3656 0,3656 0,3655

20

30

C yang diperoleh (µg/mL) 10,125 10,117

UPK (%) 101,25 101,01

10,117 19,78 19,78 19,77 29,8 29,8 29,79

101,01 98,9 98,9 98,85 99,33 99,33 99,33

Rata-rata UPK (%) 101,09

(x-x)

( (x-x) )2

1,323

1,750329

98,88

-0,887

0,786769

99,33

-0,437

0,190969

X = 99,767 (

a. SD =

( −) −1

=

2,481028 2

= 1,113783641 = 1,114 b. KV =

=

100 %

1,114 100 % 99,767

= 1,116601682 % = 1,12 %

69

∑ = 2,481028

Lampiran 8. Penetapan kadar boraks pada mie basah yang beredar di pasar Ciputat Tabel 5. Hasil Identifikasi boraks pada empat sampel mie basah pasar Ciputat.

Sampel Sampel 1

Sampel 2

Sampel 3

Sampel 4

Berats ampel (gr) 5,0004 5,0004 5,0004 5,0004 5,0004 5,0004 5,0004 5,0004 5,0004 5,0004 5,0004 5,0004

absorban 0.0538 0,0529 0,0527 1,3112 1,3113 1,3108 1,4232 1,4234 1,4235 0,0835 0,0834 0,0830

Kadar (ppm) 3,8167 3,74167 3,725 108,6 108,6083 1008,567 117,93 117,95 117,9583 6,2917 6,2833 6,25

70

Kadar rata- Kadar rata-rata ± rata SD (%) 3,76112 3,76112±0,0451

108,592

108,592±0,02185

117,9461

117,9461±0,01455

6,275

6,275±0,0221

Lampiran 9. Alat yang digunakan dalam penelitian

Gambar 17. Spektrofotometer Uv Vis

Gambar 18. Penggiling adonan mie

Gambar 19. Pencetak

71

Lampiran 10. Sampel mie basah dari pasar Ciputat .

Gambar 20. Sampel mie basah pasar Ciputat.

72

Lampiran 11. Hasil uji kualitatif mie basah dari pasar Ciputat Sumber Sampel Mie Uji nyala api basah

Uji Warna dengan Kurkumin

Bandung

Ciputat 1

Ciputat 2

Parung

Tangerang

Gambar 21. Hasil Uji Kualitatif sampel mie basah dari pasar Ciputat

7 3

xiv