PENETAPAN KADAR FORMALDEHID PADA TAHU YANG DIJUAL DI PASAR CIPUTAT DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI

PENETAPAN KADAR FORMALDEHID PADA TAHU YANG DIJUAL DI PASAR CIPUTAT DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-Vis DISERTAI KOLORIMETRI MENGGUNAKAN PEREAKSI NASH

Skripsi Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi

Oleh: SANNY SUSANTI 106102003428

PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA 2010

LEMBAR PENGESAHAN SKRIPSI

NAMA : SANNY SUSANTI NIM

: 106102003428

JUDUL : PENETAPAN KADAR FORMALDEHID PADA TAHU YANG DIJUAL DI PASAR CIPUTAT DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-Vis DISERTAI KOLORIMETRI MENGGUNAKAN PEREAKSI NASH.

Disetujui oleh:

Pembimbing I

Pembimbing II

Zilhadia M.Si, Apt

Dr. Mirzan T. Razzak, M.Eng, APU

NIP. 197308222008012007

Mengetahui, Ketua Program Studi Farmasi FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc, Apt. NIP. 195601061985101001

ii

LEMBAR PENGESAHAN SKRIPSI

Skripsi dengan judul PENETAPAN KADAR FORMALDEHID PADA TAHU YANG DIJUAL DI PASAR CIPUTAT DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-Vis DISERTAI KOLORIMETRI MENGGUNAKAN PEREAKSI NASH

Telah disetujui, diperiksa dan dipertahakan dihadapan tim penguji oleh

Sanny Susanti NIM: 106102003428

Menyetujui,

Pembimbing: 1. Pembimbing I

Zilhadia M.Si, Apt

2. Pembimbing II

Dr. Mirzan T. Razzak, M.Eng, APU ........................

........................

Penguji: 1. Ketua Penguji

Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc, Apt.

........................

2. Anggota Penguji I

Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc, Apt.

........................

3. Anggota Penguji II

Sandra Hermanto, M.Si.

........................

4. Anggota Peguji III

Lina Elfita, M.Si, Apt.

........................

Mengetahui, Dekan Fakultas Kedokteran Dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Prof. Dr. (hc). dr. M.K. Tadjudin, Sp. And Tanggal lulus : 23 Agustus 2010

iii

LEMBAR PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi yang berjudul: PENETAPAN KADAR FORMALDEHID PADA TAHU YANG DIJUAL DI PASAR CIPUTAT DENGAN METODE SPKETROFOTOMETRI UV-Vis DISERTAI KOLORIMETRI MENGGUNAKAN PEREAKSI NASH Adalah karya saya sendiri dan belum pernah diajukan dalam bentuk apapun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun yang tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam daftar pustaka

Sanny Susanti

iv

ABSTRAK

JUDUL : PENETAPAN KADAR FORMALDEHID PADA TAHU YANG DIJUAL DI PASAR CIPUTAT DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-Vis DISERTAI KOLORIMETRI MENGGUNAKAN PEREAKSI NASH

Tahu merupakan suatu produk makanan terbuat dari kedelai. Tahu memiliki kandungan air yang banyak sehingga mudah ditumbuhi mikroba. Berdasarkan survei telah ditemukan banyak produk tahu yang mengandung formaldehid sebagai pengawetnya. Formaldehid merupakan pengawet yang dilarang pemakaiannya sebagai pengawet makanan karena dapat menyebabkan kanker pada manusia. Telah dilakukan penelitian tentang penetapan kadar formaldehid menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis pada tahu yang dijual di pasar Ciputat. Proses ekstraksi sampel menggunakan metode destilasi uap. Destilat direaksikan dengan pereaksi Nash. Hasil validasi metode menunjukkan bahwa kurva kalibrasi dengan konsentrasi pada rentang 100 – 300 µg/mL memiliki koefisien korelasi r = 0,9992. Dari perhitungan diperoleh persamaan regresi y = 0,0032x – 0,0079. Metode yang digunakan mempunyai batas deteksi 11,1328 µg/mL, sedangkan batas kuantitasinya 37,1094 µg/mL. Metode analisis ini memiliki presisi kurang dari 2% sedangkan nilai akurasi untuk tahu 98,69% ± 0,4085%. Hasil analisis sampel pasar Ciputat seluruh sampel terdeteksi mengandung formaldehid. Konsentrasi formaldehid yaitu 104,87 µg/mL, 11,21 µg/mL, 1,96 µg/mL, 190,80 µg/mL, 201,98 µg/mL, 10,47 µg/mL, dan 3,31 µg/mL. Kata kunci : Formaldehid, Spektrofotometri UV-Vis, Tahu, Pereaksi Nash.

v

ABSTRACT

TITLE : DETERMINATION CONCENTRATION OF FORMALDEHYDE IN TOFU FROM TRADITIONAL MARKET CIPUTAT WITH SPECTROFOTOMETRY UV-Vis METHOD USING COLORIMETRY WITH NASH REAGENT Tofu is a food product made from soybean. Tofu contain of water and it is very easy to overgrown microbes. Based on a survey, many products of tofu contain of formaldehyde as preservative. Formaldehyde is a preservative that the use is prohibited for food because it can cause cancer in humans. A research on determination concentration of formaldehyde in tofu from traditional market Ciputat using spectrofotometry UV-Vis method has been conducted. Steam distillation has been used for sample extraction process. Distillate was reacted with Nash reagent. The calibration curve with range between 100 – 300 µg/mL has correlation coefficient of the linear regression 0,9992. From calculation, the equation of linear regression was y=0,0032x – 0,0079. The result also showed that this method’s detection limit was 11,1328 µg/mL and the quantitation limit was 37,1094 µg/mL. The precision of this analytical method were lower than 2% for each of the sample, while method’s accuration for tofu was 98,69% ± 0,4085%. Results of sample analysis from Ciputat market, some samples were detected containing formaldehyde. Formaldehyde concentrations are 104,87 µg/mL, 11,21 µg/mL, 1,96 µg/mL, 190,80 µg/mL, 201,98 µg/mL, 10,47 µg/mL, and 3,31 µg/mL. Keywords: Formaldehyde, Spectrofotometry UV-Vis, Tofu, Nash reagent.

vi

KATA PENGANTAR

Alhamdulillah, segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT karena atas limpahan nikmat dan rahmat-Nya penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi ini. Salawat serta salam semoga selalu tercurahkan kepada junjungan Nabi Muhammad SAW, keluarga, para sahabat dan pengikutnya yang senantiasa mengikuti sunnahnya sampai akhir zaman. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat menempuh ujian akhir guna mendapatkan gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Adapun judul skripsi ini adalah ”Penetapan Kadar Formaldehid Pada Tahu Yang Di Jual Di Pasar Ciputat Dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis Disertai Kolorimetri Menggunakan Pereaksi Nash”. Selesainya penelitian dan penyusunan skripsi ini tidak lepas dari bantuan berbagai

pihak,

maka

dalam

kesempatan

ini

perkenankanlah

penulis

menyampaikan ucapan terimakasih yang tulus dan sebesar-besarnya, khususnya kepada: 1. Prof. Dr. (hc) dr. M. K. Tadjudin, Sp.And selaku Dekan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. 2. Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc, Apt selaku Ketua Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. 3. Ibu Zilhadia, M.Si, Apt sebagai pembimbing I dan Bapak Dr. Mirzan T Razzak, M.Eng, APU sebagai pembimbing II, yang dengan sabar membimbing dan mengajari penulis serta telah meluangkan waktu, tenaga dan pikiran kepada penulis selama ini. 4. Ayahanda tercinta Dasma E. Djunaedi, SE dan Ibunda tersayang Sisyanti Rasyid, SIP juga Nenek Emik tersayang di Sumedang yang tiada henti mendoakan penulis, memberikan kasih sayang, semangat dan dukungannya, baik moral maupun material yang tak terhingga kepada penulis. 5. Untuk kakak-kakak dan adikku tersayang Achmad, Dian dan Farid, Ka Asep dan istri juga keponakan-keponakan kecilku Naufal dan Farrel meskipun tidak

vii

terjun langsung membantu penulis dalam menyelesaikan skripsi ini, namun tawa kalian memberikan keceriaan di hari-hari penulis. 6. Ibu/Bapak Dosen dan Staf Akademika Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. 7. Untuk para kakak-kakak laboran di Pusat Laboratorium Terpadu, ka Prita dan ka Pipit di laboratorium pangan yang telah membantu mengoperasikan alat dan berdiskusi tentang skripsi penulis, juga ka Erni, pak Adi, pak Aris, dll di laboratorium kimia lantai 3 yang telah membantu dalam jalannya proses penelitian selama ini. 8. Ka eris yang membantu penulis selama melakukan pekerjaan di laboratorium farmasi, ka via yang membantu penulis dalam pengurusan surat dan ka nurul yang menemani berdiskusi. 9. Ayun, Mia, Rahma, Yayah, Wulan, Tri, dan Sarah terimakasih atas persahabatan yang sudah terjalin selama 4 tahun ini, dan karena semangat yang terus diberikan kepada penulis. 10. Laukha Mahfudloh dan Yopi Mulyana yang telah berbaik hati menolong penulis dalam survei, memenuhi kebutuhan penelitian juga berdiskusi dan tak lupa memberi semangat selalu. Mba Dini yang memberi pesan-pesan khusus seputar penelitian, Serta teman-teman seperjuanganku Farmasi teofilin yang lain, khususnya kelas B angkatan 2006. Terimakasih atas tawa ceria dan penghiburan yang kalian berikan selama ini. 11. Indah, Erma dan Shelvy sebagai teman kosan sejak pertama masuk kuliah, terimakasih atas kebersamaannya selama ini. 12. Dan kepada semua pihak yang telah membantu penulis selama ini yang tidak dapat disebutkan namanya satu persatu.

Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi ini masih ada kekurangan dan jauh dari kesempunaan, kritik dan saran dari para pembaca diharapkan oleh penulis guna memperbaiki kemampuan penulis kedepannya.

Jakarta, Agustus 2010 Penulis

viii

DAFTAR ISI

Halaman LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................ ii LEMBAR PENGESAHAN SKRIPSI ……………………………………. iii LEMBAR PERNYATAAN ………………………………………………. iv ABSTRAK ...................................................................................................... v ABSTRACT ………………………………………………………………. .. vi KATA PENGANTAR .................................................................................... vii DAFTAR ISI................................................................................................... ix DAFTAR TABEL .......................................................................................... xi DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xii DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xiii BAB I

PENDAHULUAN …………………………………………… 1.1. Latar Belakang …………………………………………... 1.2. Perumusan masalah ……………………………………… 1.3. Tujuan Penelitian ………………………………………… 1.4. Manfaat Penelitian ………………………………………..

1 1 3 4 4

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Formaldehid ……………………………............................ 2.1.1. Pengertian Formaldehid …………….……………. 2.1.2. Sifat Fisikokimia Formaldehid …………………… 2.1.3. Sifat Farmakologi ………………………………… 2.1.4. Penggunaan Formalin …………………………….. 2.1.5. Dampak Terpapar Formaldehid ………………….. 2.1.6. Cara Penyimpanan Formaldehid …………………. 2.2. Tahu (Tofu)…………………………………………….... 2.2.1. Pengertian Tahu…...……………………………… 2.2.2. Tahu Yang Mengandung Formaldehid ...………… 2.3. Bahan Tambahan Makanan ……………………………… 2.3.1. Peranan Bahan Tambahan Makanan ..................... 2.3.2. Penggolongan Bahan Tambahan Makanan ........... 2.4. Destilasi …………………………………………………. 2.4.1. Pengertian Destilasi ............................................... 2.4.2. Macam Destilasi ..................................................... 2.5. Sektrofotometri UV-VIS ………………………………… 2.5.1. Pengertian Spektrofotometri .................................. 2.5.2. Tipe instrumentasi dari spektrofotometri UV-Vis .. 2.6. Validasi Metode …………………………………………. 2.6.1. Pengertian Validasi Metode ................................... 2.6.2. Parameter Validasi Metode .................................... 2.7. Teknik Sampling …………………………………………. 2.7.1. Pengertian Teknik Sampling .................................. 2.7.2. Teknik Pengambilan Sampel ..................................

5 5 6 7 10 11 13 13 13 14 15 15 16 17 17 18 21 21 24 27 27 28 33 33 34

ix

BAB III KERANGKA KONSEP .......................................................... 37 BAB IV METODOLOGI PENELITIAN …………………………….. 4.1. Pengambilan Sampel …………………………………….. 4.2. Tempat dan Waktu Penelitian ……………………………. 4.3. Alat dan Bahan Penelitian ………………………………... 4.4. Prosedur Penelitian ………………………………………. 4.4.1. Penyiapan Bahan Baku dan Pereaksi ……………. 4.4.2. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ……... 4.4.3. Validasi Metoda...................................................... 4.4.4. Analisa sampel pasar …………………………….. BAB V

38 38 38 38 39 39 41 41 43

HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN ……………… 45 5.1. Hasil Percobaan ………………………………………….. 45 5.1.1. Panjang gelombang maksimum …….................….. 45 5.1.2. Linearitas dan Kurva kalibrasi …............................. 46 5.1.3. Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ………............. 47 5.1.4. Kecermatan / Akurasi ……………......…………..... 47 5.1.5. Keseksamaan / Presisi ………………………........... 48 5.1.6. Analisis Sampel Pasar ………………………........... 49 5.2. Pembahasan ………………………………………………. 50

BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN ……………………………… 59 6.1. Kesimpulan ………………………………………………... 59 6.2. Saran ……………………………………………………..... 59 DAFTAR PUSTAKA ……………………………...………………….… 60 LAMPIRAN …………………………………………...………………..... 64

x

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1.

Hasil uji batas deteksi dan batas kuantitasi formaldehid .............. 47

Tabel 2.

Hasil uji perolehan kembali formaldehid pada tahu simulasi ....... 47

Tabel 3.

Hasil uji presisi formaldehid pada tahu simulasi .......................... 48

Tabel 4.

Hasil uji penetapan kadar formaldehid pada tahu pasar Ciputat ... 79

Tabel 5.

Hasil data uji linearitas larutan standar formaldehid..................... 81

Tabel 6.

Data uji batas deteksi, batas kuantitasi formaldehid ..................... 82

Tabel 7.

Data uji perolehan kembali formaldehid pada tahu simulasi ........ 83

Tabel 8.

Data uji keseksamaan pada tiga konsentrasi formaldehid............. 84

xi

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1.

Serapan optimum formaldehid ............................................... 45

Gambar 2.

Kurva kalibrasi formaldehid .................................................. 46

Gambar 3.

Grafik hasil analisis tahu pasar Ciputat ................................. 49

Gambar 4.

Reaksi perubahan warna pada campuran formaldehid dan pereaksi Nash............................................................................ 52

Gambar 5.

Bahan proses pembuatan tahu.................................................. 64

Gambar 6.

Bahan dalam proses analisis tahu dan formaldehid ............... 64

Gambar 7.

Kurva absorbsi formaldehid dengan pereaksi Nash............... 66

Gambar 8.

Sampel tahu pasar .................................................................. 74

Gambar 9.

Gambar pembuatan tahu simulasi .......................................... 76

Gambar 10.

Gambar proses analisis sampel tahu pasar ............................. 78

Gambar 11.

Gambar alat yang digunakan dalam proses analisis sampel... 80

xii

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1.

Bahan yang digunakan dalam analisis ..................................... 64

Lampiran 2.

Perhitungan jumlah sampel yang dianalisis ........................... 65

Lampiran 3.

Penentuan panjang gelombang maksimum formaldehid ........ 66

Lampiran 4.

Skema bagan kerja .................................................................. 67

Lampiran 5.

Sampel tahu pasar Ciputat...................................................... 74

Lampiran 6.

Pembuatan tahu simulasi........................................................ 76

Lampiran 7.

Proses analisis sampel ........................................................... 78

Lampiran 8.

Penetapan kadar formaldehid pada tahu pasar Ciputat .......... 79

Lampiran 9.

Alat yang digunakan pada analisis ......................................... 80

Lampiran 10.

Uji linearitas dan pembuatan kurva kalibrasi ......................... 81

Lampiran 11.

Data penentuan batas deteksi dan batas kuantitasi................. 82

Lampiran 12.

Data uji kecermatan ......................………... ......................... 83

Lampiran 13.

Data uji keseksamaan......................………... ........................ 84

xiii

BAB I PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang Formaldehid adalah suatu senyawa kimia yang berbentuk gas dengan rumus CH2O. Formaldehid merupakan suatu aldehida yang juga disebut metanal. Larutannya tidak berwarna dan baunya sangat menusuk dan biasanya ditambah metanol hingga 15% sebagai stabilisator. (Dir. Jen. POM., 2003 ; Winarno, 2007). Formaldehid biasa digunakan sebagai pembunuh kuman sehingga dimanfaatkan untuk pembersih, bahan pengawet produk kosmetika dan pengeras kuku dalam konsentrasi <1%, cairan pembalsam atau pengawet mayat (Dreisbach, 1982). Melalui sejumlah survey dan pemeriksaan laboratorium, ditemukan sejumlah produk pangan yang menggunakan formaldehid sebagai pengawet. Beberapa contoh produk yang sering mengandung formalin misalnya ikan asin, ikan segar, ayam potong, mie basah dan tahu yang beredar di pasaran . (Dir. Jen. POM, 2003). Penggunaan formaldehid pada bahan makanan oleh produsen dimaksudkan untuk memperpanjang umur penyimpanan, karena formalin adalah senyawa antimikroba serbaguna yang dapat membunuh bakteri, jamur bahkan virus. Selain itu interaksi antara formaldehid dengan protein dalam pangan menghasilkan tekstur yang tidak rapuh dan untuk beberapa produk pangan seperti tahu, mie basah, ikan segar, memang dikehendaki oleh konsumen. Bau yang ditimbulkan

oleh

formaldehid

menyebabkan

lalat

tidak

mau

hinggap.

Penyimpanan yang lebih lama ini sangat menguntungkan bagi produsen maupun pedagang. Alasan lain penggunaan formaldehid sebagai bahan pengawet makanan

1  

2  

adalah tingginya harga solar dan mahalnya harga es balok untuk mengawetkan ikan saat nelayan melaut. Tetapi bahaya yang ditimbulkan dari konsumsi formaldehid itu sendiri sangat serius (Suwahono, 2009). Formaldehid atau formalin merupakan bahan beracun dan berbahaya bagi kesehatan manusia. Dampak yang ditimbulkan dari konsumsinya tidak langsung terlihat tetapi akan terasa bertahun-tahun kedepan setelah kadar formaldehid pada tubuh terakumulasi. Dosis Fatal formaldehid adalah 60 – 90 mL (Dreisbach, 1982). Ambang batas kadar Formaldehid yang dapat ditolerir oleh tubuh adalah 0,2 miligram per kilogram berat badan. (Anonim, 2006 ; Dir. Jen. POM., 2003 ). Berdasarkan Peringatan Badan POM No. KH.01.04.53.094 tanggal 24 Juli 2007 tentang Produk Pangan Impor China dan produk pangan dalam negeri yang Mengandung Bahan Berbahaya, Balai POM di daerah telah mengambil sampel di beberapa sarana penjualan dan menguji kandungan formaldehid dalam produkproduk tersebut yang hasilnya positif mengandung formaldehid. Sebelumnya BPOM mengumumkan bahwa berdasarkan hasil penelitian tahun 2002 terhadap 700 sampel produk makanan yang diambil dari Pulau Jawa, Sulawesi Selatan dan Lampung, 56% diantaranya mengandung Formaldehid. Ada 3 dasar hukum yang melarang penggunaan formaldehid. Pertama, UU No 7/1996 tentang Pangan dan UU No 8/1999 tentang Perlindungan Konsumen. Kedua, formaldehid merupakan bahan tambahan pangan (BTP) yang dilarang penggunaannya dalam makanan menurut peraturan Menteri Kesehatan (Menkes) Nomor 1168/Menkes/PER/X/1999. Ketiga, Peraturan Pemerintah RI Nomor 28 Tahun 2004 tentang Keamanan, Mutu dan Gizi Pangan. (Depkes RI, BPOM 2003).

3  

Dengan alasan tersebut maka pada penelitian ini dilakukan penetapan kadar formaldehid pada berbagai sampel tahu yang beredar di sekitar pasar Ciputat. Diduga tahu yang beredar dipasaran menggunakan formaldehid sebagai pengawet pada pembuatannya. Pasar Ciputat dipilih sebagai lokasi pengambilan sampel karena letaknya yang dekat dengan Kampus UIN Syarif Hidayatullah dan merupakan pasar tradisional besar sehingga penelitian ini dilakukan sebagai dharma UIN terhadap masyarakat sekitar. Penetapan kadar formaldehid dilakukan dengan metode spektrofotometri sinar tampak, dengan menggunakan pereaksi larutan Nash yang mengandung campuran ammonium asetat, asam asetat glasial, asetil aseton dan air. Formaldehida dengan adanya asetil aseton dan ammonium asetat akan berkondensasi membentuk senyawa 2,6-dimetil-3,5-diasetil-1,4-dihidropiridin yang berwarna kuning dengan disertai fluorosensi hijau dan memberikan serapan pada daerah cahaya tampak pada panjang gelombang ± 412nm. 1.2. Perumusan Masalah Pada penelitian ini yang menjadi perumusan masalah adalah sebagai berikut: 1. Apakah hasil validasi metode penetapan kadar formaldehid pada tahu menggunakan Spektrofotometer UV-VIS memenuhi standar yang disyaratkan? 2. Apakah tahu yang beredar di pasar Ciputat mengandung formaldehid sebagai bahan tambahan makanan?

4  

1.3. Tujuan Penelitian Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui adanya formaldehid yang digunakan sebagai pengawet dalam pembuatan makanan tahu secara kuantitatif mengetahui

pada makanan tahu yang dijual di pasar Ciputat. Dan untuk cara

kerja

penetapan

kadar

formaldehid

dengan

metode

spektrofotometri UV-Vis disertai kolorimetri menggunakan pereaksi Nash. 1.4. Manfaat Penelitian Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat tentang tahu yang dijual disekitar pasar Ciputat dari aspek kandungan formaldehid.

5  

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1.

Formaldehid

2.1.1. Pengertian Formaldehid Formaldehid adalah suatu senyawa kimia berbentuk gas dan baunya sangat menusuk. Formalin mengandung 37 persen formaldehid dalam air. Biasanya ditambahkan metanol hingga 15 persen sebagai pengawet dan stabilisator (Mulono, H.J. 2005). Formaldehid berbentuk serbuk atau padatan disebut dengan paraformaldehid. Formalin dan paraformaldehid dapat melepaskan gas formaldehid (Anonim, 2004). Formaldehid

dalam

bentuk

formalin

biasanya

digunakan

untuk

mengawetkan spesimen hayati. Formalin dikenal sebagai bahan pembunuh hama (desinfektan) dan banyak digunakan dalam industri. (Dir. Jen. POM, 2003 ; Norliana, S et al. 2009).

Formaldehid sangat sesuai untuk

digunakan sebagai desinfektan hanya dalam situasi yang memang dapat mempertahankan tingkat keamanan terhadap bahan kimia. Hal ini dikarnakan penggunaan formaldehid yang memang membutuhkan keamanan yang tinggi, sebab merupakan bahan yang berbahaya (Fauziah, 2005 ; Norliana, S et al. 2009). Formaldehida awalnya disintesa oleh kimiawan Rusia Alexander Butlerov tahun 1859, tapi diidentifikasi oleh Hoffman tahun 1868. Formaldehida ditemukan August Wilhelm von Hoffman pada tahun 1868 ketika ia mengalirkan uap methanol dan air di atas spiral platinum yang

6  

panas. Namun, fungsinya sebagai disinfektan (pembasmi kuman) baru ditemukan pada tahun 1888. (Anonim, 2006 ; Dir. Jen. POM, 2003)

2.1.2. Sifat Fisikokimia Formaldehid Rumus Molekul

: CH2O

Nama Kimia

: Formaldehyde

Nama lain

: Formol , Morbicid , Methanal , Formic aldehyde, Methyl oxide, Oxymethylene, Methylene aldehyde, Oxomethane, Formoform, Formalith, Karsan, Methylene glycol, Paraforin, Polyoxymethylene glycols, Superlysoform, Tetraoxymethylene, Trioxane.

Massa molar

: 30,03 g/mol

Titik Leleh

: - 920C

Titik didih

: - 210C

Kelarutan dalam air (g/100 ml): bercampur sempurna Rumus stuktur

:

Formaldehid gas pada suhu ambien mudah terbakar dan meledak jika dicampur dengan udara pada konsentrasi 7- 73% reaktif pada suhu ambien, dapat berpolimerisasi pada suhu di bawah 800C. Formalin adalah larutan formaldehid 37%. Ambang bau formaildehid 0,1—1 ppm (Fauziah, 2005).

7  

Formaldehid bergabung dengan protein dari jaringan sehingga membuatnya keras dan tidak larut dalam air. Keadaan ini mencegah pembusukan dari spesimen (Sihombing, 1996). Suhu tinggi mempercepat volatilisasi atau penguapan formaldehid dan juga mempercepat pembentukan senyawa formaldehid. Sebenarnya formaldehid yang terdapat pada cumi kering juga terbentuk akibat proses pemanasan dan pendidihan. Hal ini menunjukkan bahwa proses memasak dapat mempercepat produksi formaldehid. Dari hasil data penelitian penentuan

formaldehid

pada

cumi

menggunakan

metode

HPLC

menunjukan bahwa hasil dari metode HPLC dapat digunakan untuk menentukan formaldehid dari cumi dan juga produk makanan lainnya dengan memberi hasil yang memuaskan (Li, 2007).

2.1.3. Sifat Farmakologi A. Absorpsi Absorpsi dari saluran pernapasan sangat cepat, absorpsi dari saluran pencernaan juga cepat, namun absorpsi lambat bila dikonsumsi dengan makanan. Jika formaldehid dimetabolisme menjadi asam format, dapat menyebabkan ketidakseimbangan asam basa dan sejumlah efek sistemik. Reaksi-reaksi yang terjadi secara alamiah, terdapat di dalam hati. Methanol yang kadang-kadang disebut sebagai alkohol kayu, sangat beracun. Jika methanol masuk ke dalam tubuh, senyawa ini cepat diserap ke aliran darah dan diangkut ke hati untuk dioksidasi menjadi formaldehid.

8  

Formaldehid merupakan senyawa yang sangat reaktif. Senyawa ini menghancurkan daya katalis enzim dan menyebabkan jaringan hati mengeras. Jika methanol dicerna, terjadi kebutaan sementara atau tetap karena kerusakan saraf mata (Gosselin, 1976).

B. Ekskresi Hampir semua jaringan di tubuh mempunyai kemampuan untuk memecah dan memetabolisme formaldehid. Salah satunya membentuk asam format dan dikeluarkan melalui urin. Formaldehid dapat dikeluarkan sebagai CO2 dari dalam tubuh. Tubuh juga diperkirakan bisa memetabolisme formaldehid bereaksi dengan DNA atau protein untuk membentuk molekul yang lebih besar sebagai bahan tambahan DNA atau protein tubuh (Gosselin, 1976).

C. Toksisitas Menurut WHO maupun US-EPA, Reference dose (RfD) untuk FA adalah 0.2 mg per kilogram per hari. RfD (istilah versi WHO untuk RfD adalah acceptable daily intake, ADI) adalah jumlah maksimun suatu zat asing yang dapat masuk ke dalam tubuh setiap harinya tanpa menimbulkan efek samping yang merugikan. (Anonim, 2009 ). Nilai acuan dari WHO untuk masyarakat umum 0,1 ppm. Nilai acuan dari WHO untuk pajanan pekerjaan 1 ppm selama 5 menit, dengan tidak lebih dari 8 puncak dalam satu periode bekerja (sampai 8 jam). Efek iritan dapat terjadi pada konsentrasi 1—3 ppm ke atas. Pajanan terhadap

9  

konsentrasi di atas 10 ppm dapat mengakibatkan iritasi yang parah pada mata dan saluran pernapasan. Batas keselamatan kerja 1 ppm di AS. Dengan demikian, semua tindakan pencegahan harus dilakukan untuk menghindari inhalasi senyawa ini selama penanganannya. NIOSH IDLH: 20 ppm (Fauziah, 2005). Toksisitas formaldehid telah dievaluasi oleh berbagai organisasi ternama seperti IARC (International Agency for Research on Cancer), ATSR (Agency for Toxic Substances and Disease Registry, USA), dan IPCS (International Programme on Chemical Safety). Aldehid-aldehid toksik yang bersifat volatil terutama formaldehid telah diklasifikasi oleh International Agency For Researh On Cancer (IARC) kedalam kelompok senyawa pertama yang beresiko menyebabkan kanker. Hasil evaluasi semua organisasi tersebut memberikan kesimpulan yang sama bahwa formaldehid merupakan suatu karsinogen (dapat menyebabkan kanker). Status terakhir yang diberikan oleh IARC menunjukan adanya data epidemiologi terbaru yang merujuk pada kesimpulan bahwa formaldehid positif dapat menyebabkan kanker saluran pernafasan pada manusia. Kesimpulan ini merupakan peningkatan dari status sebelumnya pada tahun 1995 (Uzairu, A et al. 2009). Berdasarkan penelitian sebelumnya, formaldehid kemungkinan besar dapat menyebabkan kanker pada manusia dan positif menyebabkan kanker pada hewan percobaan. Penggunaan bahan tersebut dalam pengawetan makanan tentu sangat berbahaya dan tidak dapat ditolerir. Penggunaannya sebagai pengawet dalam produk-produk non-pangan

10  

haruslah memperhitungkan segala risiko terpaparnya manusia saat produk tersebut digunakan (Sihombing, 1996).

2.1.4. Penggunaan Formaldehid A. Penggunaan Formaldehid Yang Benar Formaldehid biasanya digunakan sebagai pembunuh kuman sehingga dimanfaatkan untuk pembersih lantai, kapal, gudang, dan pakaian. Pembasmi lalat dan berbagai serangga lain. Bahan pada pembuatan sutra buatan, zat pewarna, cermin kaca, dan bahan peledak. Dalam dunia fotografi biasanya digunakan untuk pengeras lapisan gelatin dan kertas. Bahan pembuatan pupuk dalam bentuk urea. Bahan untuk pembuatan produk parfum. Bahan pengawet produk kosmetika dan pengeras kuku. Pencegah korosi untuk sumur minyak. Bahan untuk insulasi busa. Bahan perekat untuk produk kayu lapis (plywood). Cairan pembalsam (pengawet mayat). Dalam konsentrasi yang sangat kecil (< 1%) digunakan sebagai pengawet untuk berbagai barang konsumen seperti pembersih rumah tangga, cairan pemcuci piring, pelembut, perawat sepatu, sampo mobil, lilin dan pembersih karpet (Dir. Jen. POM, 2003).

B. Penggunaan Formaldehid Yang Salah Penggunaan Formalin yang salah adalah hal yang sangat disesalkan. Melalui sejumlah survey dan pemeriksaan laboratorium, ditemukan sejumlah produk pangan yang menggunakan formalin

11  

sebagai pengawet. Praktek yang salah seperti ini dilakukan oleh produsen atau pengelola pangan yang tidak bertanggung jawab. Beberapa contoh produk yang sering diketahui mengandung formalin misalnya: 1. Ikan segar : Ikan basah yang warnanya putih bersih, kenyal, insangnya berwarna merah tua (bukan merah segar), awet sampai beberapa hari dan tidak mudah busuk. 2. Ayam potong : Ayam yang sudah dipotong berwarna putih bersih, awet dan tidak mudah busuk. 3. Mie basah : Mie basah yang awet sampai beberapa hari dan tidak mudah basi dibandingkan dengan yang tidak mengandung formalin. 4. Tahu : Tahu yang bentuknya sangat bagus, kenyal, tidak mudah hancur, awet beberapa hari dan tidak mudah basi. 5. Ikan Asin : ikan yang keringnya merata, awet sampai beberapa minggu atau bulan dan tidak mudah busuk. (Dir. Jen. POM, 2003).

2.1.5. Dampak Terpapar Formaldehid Formalin atau formaldehid merupakan bahan beracun dan berbahaya bagi kesehatan manusia. Pemakaian formalin pada makanan dapat menyebabkan keracunan pada tubuh manusia. Gejala yang biasa timbul antara lain sukar menelan, sakit perut akut disertai muntah-muntah, mencret berdarah, timbulnya depresi susunan saraf, atau gangguan

12  

peredaran darah (Norliana, S et al. 2009). Efek pada kesehatan manusia terlihat setelah terkena dalam jangka waktu yang lama dan berulang, efek sampingnya terlihat setelah jangka panjang karena terjadi akumulasi formalin dalam tubuh. Jika kandungannya dalam tubuh tinggi, akan bereaksi secara kimia dengan hampir semua zat di dalam sel sehingga menekan fungsi sel dan menyebabkan kematian sel yang menyebabkan keracunan pada tubuh. Selain itu, kandungan formalin yang tinggi dalam tubuh juga menyebabkan iritasi lambung, alergi, bersifat karsinogenik (menyebabkan kanker) dan bersifat mutagen (menyebabkan perubahan fungsi sel/jaringan), serta orang yang mengkonsumsinya akan muntah, diare bercampur darah, kencing bercampur darah, dan kematian yang disebabkan adanya kegagalan peredaran darah (Gosselin, 1976). Formaldehid bila menguap di udara, berupa gas yang tidak berwarna, dengan bau yang tajam menyesakkan, sehingga merangsang hidung, tenggorokan, dan mata. Dalam tubuh manusia, formaldehid dikonversi menjadi asam format yang meningkatkan keasaman darah, tarikan nafas menjadi pendek dan sering, hipotermia, juga koma, atau sampai pada kematian (Anonim, 2006 ; Norliana, S et al. 2009). Beberapa penelitian yang dilakukan oleh NCI (National Cancer Institute) di Amerika menunjukkan bahwa para petugas anatomis (pembuat preparat biologi dari makhluk hidup untuk penelitian) atau yang bekerja di pengawetan mayat, lebih beresiko terkena kanker otak dan leukemia. Formaldehida juga dapat membuat “jembatan amin” yang menghubungkan asam amino satu dengan yang lain, sehingga bisa mengganggu metabolisme sel hidup. Inilah

13  

sebabnya formaldehid sangat ampuh membunuh kuman dan sering digunakan sebagai desinfektan (Windholz, 1983).

2.1.6. Cara Penyimpanan Formaldehid Formalin yang merupakan 37% formaldehid dalam air sering digunakan untuk berbagai keperluan. Maka dari itu dibutuhkan pengetahuan cara penyimpanan formalin yang baik agar menghindari bahaya yang ditimbulkan. Cara penyimpanan diantaranya adalah disimpan di lingkungan bertemperatur suhu di atas 150C, tempat penyimpanan harus terbuat dari baja tahan karat, alumunium murni, polietilen atau poliester yang dilapisi fiberglass, tempat penyimpanan tidak boleh terbuat dari baja biasa, tembaga, nikel atau campuran seng dengan permukaan yang tidak dilindungi/dilapisi, tidak menggunakan bahan alumunium bila temperatur lingkungan berada di atas 60 derajat Celsius (Dir. Jen. POM, 2003).

2.2.

Tahu (Tofu)

2.2.1. Pengertian Tahu Tahu berasal dari Cina. Metode pembuatan tahu pertama kali ditemukan oleh Liu An pada tahun 164 SM. Liu An adalah seorang filsuf, guru, ahli hukum dan ahli politik yang mempelajari kimia dan meditasi dalam agama Tao. Dia memperkenalkan tahu pada teman-temannya yang tidak menyantap daging, yaitu para pendeta. Pada masa itu kedelai termasuk

salah

satu

bahan

makanan

utama

orang-orang

kuil

14  

(pendeta). Oleh para pendetalah sambil menyebarkan agama Budha, tahu tersebar ke seluruh dunia (Purwoningsih, 2007). Tahu

merupakan

suatu

produk

yang

terbuat

dari

basil

penggumpalan protein kedelai yang diendapkan dengan batu tahu (CaSO4) atau dengan asam asetat (CH3COOH). Sehingga kandungan protein dalam tahu ditentukan oleh kandungan protein pada kedelai yang digunakan. Kedelai yang biasa digunakan untuk membuat tahu adalah kedelai kuning atau kedelai hitam. Kedelai mengandung protein 35 % bahkan pada varitas unggul kadar proteinnya dapat mencapai 40 - 43 %. Dibandingkan dengan beras, jagung, tepung singkong, kacang hijau, daging, ikan segar, dan telur ayam, kedelai mempunyai kandungan protein yang lebih tinggi, hampir menyamai kadar protein susu skim kering. Dalam perdagangan dikenal 2 jenis tahu, yaitu tahu biasa dan tahu Cina. Kedua jenis tahu ini berbeda dalam bentuk dan cara pembuatannya. Pada pembuatan tahu Cina, kedelai direbus terlebih dahulu sebelum direndam dan biasanya mempunyai ukuran lebih besar. (Suprapti, 2005)

2.2.2. Tahu yang mengandung formaldehid Tahu yang mengandung formaldehid memiliki ciri yang dapat dibedakan. Semakin tinggi kandungan formalin, maka tercium bau obat yang semakin menyengat; sedangkan tahu tidak berformaldehid akan tercium bau protein kedelai yang khas. Tahu yang berformalin mempunyai sifat membal (jika ditekan terasa sangat kenyal), sedangkan tahu tak

15  

berformalin jika ditekan akan hancur. Tahu berformalin akan tahan lama, sedangkan yang tak berformalin paling hanya tahan satu dua hari. Tahu yang memakai pewarna buatan dapat ditandai dengan cara melihat penampakannya. Jika tahu memakai pewarna buatan, warnanya sangat homogen/seragam dan penampakan mengilap. Sedangkan jika memakai pewarna kunyit, warnanya cenderung lebih buram (tidak cerah). Jika kita potong tahunya, maka akan kelihatan bagian dalamnya warnanya tidak homogen/seragam. Bahkan, ada sebagian masih berwarna putih (Dir. Jen. POM, 2003).

2.3.

Bahan Tambahan Makanan Bahan tambahan makanan (BTM) adalah bahan-bahan yang ditambahkan

ke

dalam

makanan

selama

produksi,

pengolahan,

pengemasan atau penyimpanan untuk tujuan tertentu. 2.3.1. Peranan Bahan Tambahan Makanan Peranan BTM pada dasarnya sebagai senyawa yang ditambahkan dalam bahan pangan untuk memperbaiki penampilan, cita rasa, tekstur, atau sifat-sifat penyimpanannya serta untuk mempengaruhi kualitas yang dikehendaki. BTM digunakan di industri-industri makanan untuk meningkatkan mutu pangan olahan penggunaan. Bahan tambahan makanan tersebut hanya dibenarkan jika ditujukan untuk keperluan mempertahankan nilai gizi makanan, sebagai konsumsi segolongan orang tertentu yang memerlukan

makanan diet, mempertahankan mutu atau

16  

kestabilan

makanan,

sebagai

keperluan

pembuatan,

pengolahan,

penyediaan, perlakuan, pewadahan, pembungkusan, pemindahan, atau pengangkutan, membuat makanan menjadi lebih menarik (Mulono, H.J. 2005).

2.3.2. Penggolongan Bahan Tambahan Makanan (BTM) Bahan Tambahan Makanan (BTM) dapat dibagi menjadi dua golongan besar, yaitu : 1. BTM yang ditambahkan dengan sengaja ke dalam makanan. BTM ini dibagi lagi berdasarkan fungsinya dalam pengolahan makanan, antara lain sebagai anti oksidan; pemanis buatan; pemutih tepung; pengemulsi dan pengental; pengeras; pewarna serta penyedap rasa dan aroma. 2. BTM yang tidak sengaja tidak ditambahkan pada makanan. BTM ini tidak mempunyai fungsi dalam makanan, terdapat secara fisik sengaja baik dalam jumlah sedikit atau cukup banyak akibat perlakuan selama proses produksi, pengolahan dan pengemasan.

Menurut sumbernya, BTM dapat dibedakan menjadi dua, yaitu : a)

Alamiah, seperti lesitin dan asam sitrat.

b)

Buatan/ sintetik dari bahan kimia yang mempunyai sifat serupa dengan bahan alamiah yang sejenis, baik susunan kimis maupun sifat metabolismenya, seperti asam askorbat.Pada umunya bahan sintetik mempunyai kelebihan yaitu lebih pekat, lebih stabil dan

17  

lebih murah. Walaupun demikian terdapat kelemahan yaitu sering terjadi ketidaksempurnaan proses sehingga mengandung zat–zat yang berbahaya bagi kesehatan, kadang bersifat karsinogenik (Winarno, 1988 ).

2.4.

Destilasi

2.4.1. Pengertian Destilasi Destilasi adalah proses pemisahan komponen dari dua atau lebih cairan berdasarkan perbedaan kecepatan dan kemudahan menguap masingmasing komponen. Dalam destilasi, cairan dididihkan sehingga menguap sehingga menguap, dan uap itu kemudian didinginkan kembali dalam bentuk cairan. Zat yang memeiliki titik didih paling rendah akan menguap terlebih dahulu. Penerapan proses ini didasarkan pada teori bahwa pada suatu larutan, masing-masing komponen akan menguap pada titik didihnya. Metode ini merupakan jenis operasi kimia perpindahan massa, dan idealnya model destilasi berdasarkan pada hukum Dalton dan Hukum Raoult, yaitu “jika larutan yang terdiri dari dua komponen yang cukup mudah menguap dididihkan, maka fase uap yang akan terbentuk akan mengandung komponen yang lebih menguap dalam jumlah yang relative banyak dibandingkan dengan fase cair.” Contohnya adalah: larutan benzene-toulena, larutan n-Heptan dan n-Heksan dan larutan lain yang sejenis dididihkan.

18  

Destilasi pertama kali ditemukan oleh kimiawan Yunani pada abad pertama masehi oleh Hypathia dan Alexandria. Dan Zossimus dan Alexandria-lah yang dianggap berhasil menggambarkan proses destilasi secara akurat sekitar abad ke-4, dan dimodernisasi oleh ahlikimia islam pada masa khalifah Abbasiyah terutama masa Al-Razzi. 2.4.2. Macam-macam destilasi Berdasarkan ekstraksi secara fitokimia, destilasi dibagi menjadi: 1. Destilasi Uap Merupakan suatu proses pemisahan yang umumnya dilakukan untuk bahan yang sangat sensitive terhadap suhu, seperti senyawa alam aromatik. Karena banyak senyawa organik akan terurai pada suhu tinggi. Tapi jika yang didestilasi sangat sensitive terhadap panas, destilasi dengan uap dapat juga dikombinasikan dengan destilasi dalam vakum. Aplikasi dari destilasi uap ini adalah untuk pengerjaan minyak essensial, contohnya parfum. Pada metode ini, uap air dilewatkan melalui material tumbuhan yang berisi minyak yang diinginkan. Namun, penggunaan destilasi uap ini hanya digunakan dalam skala industri karena biaya yang diperlukan sangatlah mahal walaupun hasil yang didapat akan menghasilkan hasil yang maksimal. Prinsip Kerja

:

Ketel uap dan penyulingan terpisah, ketel uap yang berisi air dipanaskan dan uapnya dialirkan ke ketel penyulingan yang berisi

19  

bahan baku, partikel minyak terbawa uap dan dialirkan dalam pendingin kemudian dipisahkan.

2. Destilasi Air Destilasi air merupakan cara tertua, ditemukan di Negara Mesir dan India Kuno. Namun, sampai sekarang masih dipakai oleh petani tradisional. Karena peralatan yang digunakan masih sederhana dan relative murah, namun hasil yang didapat tidak setinggi/sebagus dari cara yang lain. Proses ini menggunakan bunga dan tumbuhan herba yang telah ditumbuk sempurna. Kemudian ditaruh diatas air dan bau harumnya disadap. Prinsip Kerja

:

Ketel penyulingan diisi air sampai volume hamper separuh, lalu dipanaskan, sebelum air mendidih, bahan baku dimasukkan dalam ketel, bahan baku biasanya yang tidak rusak oleh panas uap air misalnya bunga atau daun yang mudah bergerak dalam air.

3. Destilasi Uap – Air Metode ini menggunakan kombinasi uap dan air untuk membebaskan kotoran minyak yang masuk kedalam kantung aromatik tumbuhan. Karena panas dan tekanan maka akan berubah bentuk kedalam intisari cairan tersebut. Proses destilasi ini sangat rumit, dan harganya pun lebih mahal.

20  

Pada proses destilasi ini air dan material ditemukan keduanya dalam labu yang dipenuhi lubang/jaringan, yang akan digunakan untuk memisahkan keduanya. Pembakaran langsung merupakan satu pendekatan yang digunakan dalam dasar destilasi, karena pembakaran langsung ini menampakkan bagian atas dari labu destilasi. Karena pembakaran langsung ini material tumbuhan dapat menjadi sangat panas. Uap air akan berkontak sendiri, karena adanya pemisahan dari material tumbuhan dari air, di dalam system ini. Uap air yang disebabkan dari air dalam labu destilasi akan menjadi terlalu panas atau kering, dan harus dihindari ketika temperature tidak bisa naik keatas sehingga akan terbentuk uap jenuh. Destilasi seperti ini, menghadirkan suatu kasus penyulingan yang khas dengan uap tekanan rendah dipenuhi. Persiapan material tumbuhan jauh lebih penting didalam metode destilasi uap dibandingkan didalam destilasi air, karena uap air hanya akan kontak dengan material sebagai kenaikan saja. Prinsip Kerja

:

Ketel diisi air sampai batas saringan/langsang. Bahan baku diletakkan diatas angsang sehingga tidak kontak langsung dengan air yang mendidih tetapi berhubungan dengan uap air, air yang menguap akan membawa partikel minyak atsiri dan dialirkan kealat pemisah (Anonim, 2000)

21  

2.5.

Spektrofotometri UV-Vis

2.5.1. Pengertian Spektrofotometri Pada awalnya, spektroskopi adalah ilmu yang mempelajari tentang radiasi sinar tampak yang berinteraksi dengan molekul pada panjang gelombang tertentu dan menghasilkan suatu spektra, yang merupakan hasil interaksi antara energi radian dengan panjang gelombang atau frekuensi. Kemudian pengertian ini dikembangkan tidak hanya untuk radiasi sinar tampak, tapi juga jenis radiasi elektromagnetik yang lain seperti sinar X, ultraviolet, inframerah, gelombang mikro, dan radiasi frekuensi radio. Ilmu yang berhubungan dengan pengukuran spektra tersebut dinamakan spektrofotometer. Spektrofotometri UV-Vis adalah alat yang digunakan untuk mengukur serapan yang dihasilkan dari interaksi kimia antara radiasi elektromagnetik dengan molekul atau atom dari suatu zat kimia pada daerah UV-Vis (FI edisi IV, 1995). Jangkauan panjang gelombang yang tersedia untuk pengukuran membentang dari panjang gelombang pendek ultraviolet sampai ke garis inframerah. Untuk kemudahan pengacuan, daerah spektrum secara garis besarnya dibagi dalam : 1.

Daerah ultraviolet jauh

: 100 nm – 190 nm

2.

Daerah ultraviolet dekat

: 190 nm – 380 nm

3.

Daerah cahaya tampak

: 380 nm – 780 nm

4.

Daerah inframerah dekat

: 780 nm – 3000 nm

22  

5.

: 2,5 μm – 40 μm atau 4000 cm-1 –

Daerah inframerah

250 cm-1 Spektrofotometer UV-Vis adalah teknik analisis spektroskopik yang memakai sumber radiasi elektromagnetik ultraviolet (190-380 nm) dan

sinar

tampak

(380-780

nm)

dengan

memakai

instrument

spektrofotometer. Spektrofotometer UV–Vis merupakan metoda analisa yang penggunaannya cukup luas, baik untuk analisa kualitatif maupun kuantitatif. Untuk analisa kuantitatif yang diperhatikan adalah : a)

Membandingkan λ maksimum.

b)

Membandingkan serapan (A), daya serap (a),

c)

Membandingkan spektrum serapannya

.

Prinsip dari spektrofotometri UV-Vis adalah mengukur jumlah cahaya yang diabsorbsi atau ditransmisikan oleh molekul-molekul di dalam larutan. Ketika panjang gelombang cahaya ditransmisikan melalui larutan, sebagian energi cahaya tersebut akan diserap (diabsorpsi). Besarnya kemampuan molekul-molekul zat terlarut untuk mengabsorbsi cahaya pada panjang gelombang tertentu dikenal dengan istilah absorbansi (A), yang setara dengan nilai konsentrasi larutan tersebut dan panjang berkas cahaya yang dilalui (biasanya 1 cm dalam spektrofotometri) ke suatu point dimana persentase jumlah cahaya yang ditransmisikan atau diabsorbsi diukur dengan phototube.

23  

Spektrofotometri sederhana terdiri dari : 1.

Sumber radiasi Sumber radiasi monokromator kuvet detektor amplifier rekorder 21 Sumber cahaya berasal dari lampu Deutrium (H0) untuk UV dengan panjang gelombang 180 – 400 nm dan lampu Tungsten (wolfram) untuk Vis dengan panjang gelombang 400 – 800 nm.

2.

Monokromator Monokromator merupakan alat yang berfungsi sebagai penyeleksi cahaya dengan panjang gelombang tertentu. Monokromator akan memisahkan radiasi cahaya putih yang polikromatis menjadi cahaya monokromatis (mendekati monokromatis).

3.

Kuvet Pada umumnya spektrofotometri melibatkan larutan, dengan demikian diperlukan wadah/ sell untuk menempatkan larutan.

4.

Detektor Fungsinya mengubah energi radiasi yang jatuh mengenainya menjadi suatu besaran yang dapat diukur.

5.

Amplifier Fungsinya untuk memperkuat sinyal listrik.

6.

Rekorder Alat untuk mencatat, dapat berupa gambar/angka-angka.

24  

2.5.2. Tipe instrumentasi dari spektrofotometri UV-Vis 1.

Single Beam Pada spektrofotometri UV-Vis tipe single beam absorbsi berdasarkan pada sinar tunggal dimana sampel akan ditentukan jumlahnya pada satu panjang gelombang atau fix wave lenght. Hasil biasanya dibandingkan dengan blangko (biasanya pelarut).

2.

Double Beam Pada spektrofotometri UV-Vis tipe double beam absorbsi biasanya mempunyai variabel panjang gelombang atau ”multi wave length”. Hasilnya bisa langsung dibandingkan dengan blangko.

Persyaratan suatu sampel dapat dianalisa menggunakan Spektrofotometri UV Vis adalah : 1.

Bahan mempunyai gugus kromofor

2.

Bahan tidak mempunyai gugus kromofor tapi berwarna

3.

Bahan tidak mempunyai gugus kromofor dan tidak berwarna, maka ditambahkan pereaksi warna (Vis)

4.

Bahan tidak mempunyai gugus kromofor dibuat turunannya yang mempunyai gugus kromofor (UV). (Harmita, 2006) Dasar dari metoda ini karena adanya perubahan sifat fisikokimia

dari bahan yang diperiksa dengan jalan mengamati sifat serapannya terhadap energi cahaya atau radiasi elektromagnetik. Spectrum UV-Vis merupakan hasil interaksi antara radiasi elektromagnetik (REM) dengan

25  

molekul. REM merupakan bentuk energi radiasi yang mempunyai sifat gelombang dan partikel (foton). Karena bersifat sebagai gelombang maka beberapa parameter perlu diketahui, misalnya panjang gelombang (λ), frekuensi, bilangan gelombang, dan serapan (A). REM mempunyai vektor listrik dan vektor magnet yang bergetar dalam bidang-bidang yang tegak lurus satu sama lain dan masing-masing tegak lurus pada arah perambatan radiasi. Bila suatu cahaya monokromatis atau bukan monokromatis jatuh pada medium homogen, maka sebagian dari cahaya ini akan dipantulkan, sebagian akan diabsorbsi dan sisanya akan diteruskan, sehingga dalam hal ini dapat dinyatakan sebagai berikut: I O = Ir + Ia + It Dimana : I0

= intensitas cahaya yang datang

Ir

= intensitas cahaya yang dipantulkan

Ia

= intensitas cahaya yang diserap

It

= intensitas cahaya yang diteruskan

Pengaruh

Ir

dapat

dihilangkan

dengan

menggunakan

blanko/kontrol, sehingga : I0 = Ia + I t Dua hukum empiris telah merumuskan tentang intensitas serapan. Hukum Lambert telah menyatakan bahwa fraksi penyerapan sinar tidak

26  

bergantung dari intensitas sumber cahaya. Hukum Beer mengatakan bahwa penyerapan sebanding dengan jumlah molekul yang menyerap (Sudjadi, 1983) Gabungan dari hukum Lambert-Beer menurunkan secara empiris hubungan antara intensitas cahaya yang ditransmisikan dengan tebalnya larutan, dan hubungan antara intensitas tadi dengan konsentrasi zat (Depkes, 1995). Rumus : A = log (Io/It) = ε . b . c = a.b.c Dimana :

A = Serapan Io = Intensitas sinar yang datang It = Intensitas sinar yang diteruskan ε = Absorptivitas molekuler ( L.mol-1.cm-1) = a x BM a = Daya serap (L.g-1.cm-1) b = Tebal larutan / kuvet (cm) c = Konsentrasi zat (g/L, mg/mL)

Sampel yang sering dianalisis dengan metode spektrofotometer UV-Vis adalah senyawa organik. Senyawa organik yang dapat memberikan serapan adalah senyawa yang memiliki gugus kromofor dan auksokrom. Gugus kromofor adalah gugus fungsional tidak jenuh yang memberikan serapan pada daerah ultraviolet atau cahaya tampak. Hampir semua kromofor mempunyai ikatan rangkap seperti alkena (C=C), C=O, NO2, benzene, dan lain-lain.

27  

Sedangkan auksokrom adalah gugus fungsional seperti –OH, -NH2, -X, yaitu gugus yang mempunyai elektron nonbonding dan tidak mengabsorbsi radiasi pada λ diatas 200 nm, akan tetapi mengabsorbsi radiasi UV jauh (Harmita, 2006). Ruang lingkup spektroskopi serapan dapat diperluas dengan menggunakan reaksi warna, yang seringkali diiringi dengan peningkatan sensitivitas atau selektivitas. Reaksi warna digunakan untuk memodifikasi spektrum dari molekul pengabsorbsi sehingga dapat dideteksi pada daerah visible, dan terpisah dari senyawa pengganggu lain yang memiki serapan di daerah UV. Selain itu, modifikasi kimia ini dapat digunakan untuk mengubah molekul yang tidak mengabsorbsi menjadi senyawa turunan yang stabil yang memiliki serapan yang bermakna. Panjang gelombang dimana absorbsi spektrum maksimum disebut panjang gelombang maksimum (λ maks). Pengukuran ditunjukkan untuk menghitung jumlah senyawa dalam sampel. Jika konsentrasi senyawa semakin tinggi maka lebih banyak cahaya yang diabsorbsi oleh sampel.

2.6.

Validasi Metode

2.6.1. Pengertian Validasi Metode Validasi metode analisis adalah suatu tindakan penilaian terhadap parameter

tertentu,

berdasarkan

percobaan

laboratorium,

untuk

membuktikan bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaanya. (Harmita, 2006)

28  

2.6.2. Parameter Validasi Metode 1. Kecermatan (Accuracy) Kecermatan adalah kedekatan hasil penetapan yang diperoleh dengan hasil sebenarnya. Kecermatan dinyatakan sebagai hasil perolehan kembali dari analit yang ditambahkan. Cara penentuan akurasi dapat dilakukan dengan cara absolute dan cara audisi. Syarat akurasi yang baik : 98 – 102 %, untuk sampel hayati (biologis atau nabati) : ±10 %. Beberapa pendapat mangatakan antara 95-105 %, dan beberapa berpendapat antara 80-120 %. Hal ini dikarenakan semakin kompleks penyiapan sampel dan semakin sulit metode analisis yang digunakan, maka recovery yang diperbolehkan semakin rendah atau kisarannya semakin lebar. Perhitungannya sebagai berikut : % Perolehan kembali = Kadar hasil analisis

x 100%

Kadar sesungguhnya Dianjurkan untuk melakukan penentuan akurasi dengan 5 konsentrasi berbeda. (Gandjar, 2009) 2. Keseksamaan (precision) Keseksamaan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil uji individual, diukur melalui penyebaran hasil individual dari rata – rata jika prosedur diterapkan secara berulang pada sampel – sampel yang diambil dari campuran yang homogen. Keseksamaan diukur sebagai simpangan baku atau simpangan baku relatif (koefisien variasi).

Keseksamaan

dapat

dinyatakan

sebagai

keterulangan

29  

(repeatability) atau ketertiruan (reproducibility). Kriteria seksama diberikan jika metode memberikan simpangan baku relatif atau koefisien variasi 2% atau kurang. Keseksamaan dapat dihitung dengan cara sebagai berikut : a. Hasil analisis adalah x1, x2, x3, x4,……………….xn maka simpangan bakunya adalah : SD = √ ( ∑ (x – x )2 ) n–1 b. Simpangan baku relatif atau koefisien variasi (KV) adalah : KV = SD x 100 % (Harmita, 2006) x 3. Selektivitas (specificity) Selektivitas atau spesifisitas suatu metode adalah kemampuannya yang hanya mengukur zat tertentu saja secara cermat dan seksama dengan adanya komponen lain yang mungkin ada dalam matriks sampel. Selektivitas seringkali dapat dinyatakan sebagai derajat penyimpangan (degree of bias) metode yang dilakukan terhadap sampel yang mengandung bahan yang ditambahkan berupa cemaran, hasil urai, senyawa sejenis, senyawa asing lainnya, dan dibandingkan terhadap hasil analisis sampel yang tidak mengandung bahan lain yang ditambahkan. Pada metode analisa yang melibatkan kromatografi, selektivitas ditentukan melalui perhitungan daya resolusinya (Rs). Pemisahan kromatogram yang baik diperoleh bila nilai resolusinya lebih besar dari 1,5 (Gandjar, 2009).

30  

4. Linearitas dan Rentang Linearitas adalah kemampuan metode analisis yang memberikan respon yang secara langsung atau dengan bantuan transformasi matematik yang baik, proporsional terhadap konsentrasi analit dalam sampel. Rentang metode adalah pernyataan batas terendah dan tertinggi analit yang sudah ditunjukkan dapat ditetapkan dengan kecermatan, keseksamaan, dan linearitas yang dapat diterima. Penentuan linearitas dalam praktek, digunakan satu seri larutan yang berbeda konsentrasinya antara 50 – 150% kadar analit dalam sampel. Di dalam pustaka, sering ditemukan rentang konsentrasi yang digunakan antara 0 – 200%. Jumlah sampel yang dianalisis sekurang-kurangnya delapan buah sampel blanko. Sebagai parameter adanya hubungan linier digunakan koefisien korelasi r pada analisis regresi linier Y = a + bx. Untuk memperoleh nilai a dan b digunakan metode kuadrat terkecil (least square): a

= (Σyi) (Σxi)2 – (Σxi) (Σyi) N (Σxi2) – (Σyi2)

b

= N(Σxi.yi) - (Σxi) (Σyi) N (Σxi2) – (Σxi) 2

Linieritas ditentukan berdasarkan nilai koefisien (r) r

=

N(Σxy) - (Σx) (Σy) [ (N (Σx2) – (Σx) 2) (N (Σy2) (Σy)2) ]1/2

31  

Hubungan linear yang ideal dicapai jika nilai b = 0 dan r = +1 atau -1 bergantung pada arah garis. Sedangkan nilai a menunjukkan kepekaan analisis terutama instrument yang digunakan. Parameter lain yang harus dihitung adalah simpangan baku residual (Sy). Sy = √ ∑ (y1 – ŷ1)2

di mana ŷ1 = a + bx

N–2 Sx0 = Sy

Sx0 = standar deviasi dari fungsi

b Vx0 = Sx0

X

Vx0 = koefisien variasi dari fungsi

100%

x Syarat kelinearan garis : a) Koefisien korelasi (r) r ≥ 0,9990 b) Jumlah kuadrat sisa masing-masing titik temu (ri) mendekati nol (0) (ri)2 sekecil mungkin ≈ 0 ri = yi – (b x i + a) c) Koefisien fungsi regresi Vx0 ≤ 2,0% (sediaan farmasi) ≤ 5,0% (sediaan biologi) d) Kepekaan analisis (∆y/∆x) ∆y/∆x = y2 – y1 X2 – x1

≈ y3 – y2 ≈ y4 – y5 ≈ yn – yn-1 X3 – x2

x4 – x5

xn – xn-1 (Harmita, 2006)

32  

5. Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Batas deteksi didefinisikan sebagai konsentrasi analit terendah dalam sampel yang masih dapat dideteksi, meskipun tidak selalu dapat dikuantitasi. Batas deteksi merupakan batas uji yang secara spesifik menyatakan apakah analit di atas atau di bawah nilai tertentu. Batas kuantitasi merupakan parameter pada analisis renik dan diartikan sebagai kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi kriteria cermat dan seksama. Pada analisis instrument batas deteksi dapat dihitung dengan mengukur respon blangko beberapa kali lalu dihitung simpangan baku respon blangko dan formula di bawah ini dapat digunakan untuk perhitungan Q = k x Sb S1 Keterangan : Q = LOD (batas deteksi) atau LOQ (batas kuantitasi) k = 3 untuk batas deteksi atau 10 untuk batas kuantitasi Sb = simpangan baku respon analitik dari blangko S1 = arah garis linear (kepekaan arah) dari kurva antara respon terhadap konsentrasi = slope (b pada persamaan garis y = a+bx) Batas deteksi dan kuantitasi dapat dihitung secara statistik melalui garis regresi linier dari kurva kalibrasi. Nilai pengukuran akan sama dengan nilai b pada persamaan garis linier y = a+bx, sedangkan simpangan baku blangko sama dengan simpangan baku residual (Sy/x)

33  

a. Batas deteksi (Q) karena k = 3 atau 10 Simpangan baku (Sb) = Sy/x, maka Q = 3. S y/x S1 b. Batas kuantitasi (Q) Q = 10. S y/x S1

2.7.

(Harmita, 2006; Gandjar, 2009)

Teknik Sampling

2.7.1. Pengertian Teknik Sampling Sampel adalah bagian dari populasi yang menjadi objek penelitian. Sampel sendiri secara harfiah dapat diartikan sebagai ”contoh”. Pengambilan sampel perlu dilakukan karena keterbatasan waktu, tenaga dan biaya, lebih cepat dan lebih mudah, memberi informasi yang lebih banyak dan dalam, dapat ditangani lebih teliti. Populasi penelitian terdiri dari populasi sampling dan populasi sasaran. Populasi sampling adalah keseluruhan objek yang diteliti, sedangkan populasi sasaran adalah populasi yang benar-benar dijadikan sumber data.Pemilihan teknik pengambilan sampel merupakan upaya penelitian untuk mendapat sampel yang representatif (mewakili), yang dapat menggambarkan populasinya.

34  

2.7.2. Teknik pengambilan sampel dibagi atas 3 kelompok 1.Sampel Acak (Random Sampling / Probability Sampling) Pada pengambilan sampel secara random, setiap unit populasinya mempunyai kesempatan yang sama untuk diambil sebagai sampel. Keuntungan pengambilan sampel dengan probability sampling adalah derajat kepercayaan terhadap sampel dapat ditentukan. Beda penaksiran parameter populasi dengan statistik sampel, dapat diperkirakan. Besar sampel yang akan diambil dapat dihitung secara statistik. Ada 5 cara pengambilan sampel yang termasuk secara random, yaitu sebagai berikut : a. Sampel Random Sederhana (Simple Random Sampling) Proses pengambilan

sampel

dilakukan

dengan

memberi

kesempatan yang sama pada setiap anggota populasi untuk menjadi anggota sampel. Keuntungannya adalah prosedur mudah dan sederhana. Kerugiannya adalah membutuhkan daftar seluruh anggota populasidan biaya transportasi besar. b. Sampel Random Sistematik (Systematic Random Sampling) Proses pengambilan sampel, setiap urutan dari titik awal yang dipilih secara random. Keuntungannya adalah perencanaan dan penggunaannya mudah, sampel tersebar di daerah populasi. Kerugiannya adalah membutuhkan daftar populasi. c. Sampel Random Berstrata (Stratified Random Sampling) Populasi dibagi strata-strata (sub populasi), kemudian pengambilan sampel dilakukan dalam setiap strata baik secara sampel random

35  

sederhana,

maupun

secara

sampel

random

sistematik.

Keuntungannya adalah taksiran mengenai karakteristik populasi lebih

tepat. Kerugiannya adalah daftar populasi setiap strata

diperlukan. d. Sampel Random Berkelompok (Cluster Random Sampling) Pengambilan sampel dilakukan terhadap sampling unit, dimana sampling unitnya terdiri dari satu kelompok (cluster). Tiap item (individu) di dalam

kelompok yang terpilih akan diambil sebagai

sampel. Keuntungannya adalah tidak memerlukan daftar populasi. Kerugiannya adalah prosedur sulit. e. Sampel Bertingkat (Multi Stage Sampling) Proses pengambilan sampel dilakukan bertingkat, baik bertingkat dua maupun lebih. Keuntungannya adalah biaya transportasi kurang.

Kerugiannya

adalah

prosedur

sulit

dan

prosedur

pengambilan sampel memerlukan perencanaan yang lebih cermat. 2. Sampel Non Acak (Non Probability Sample / Selected Sample) Pemilihan sampel tidak secara random. Cara ini dipergunakan bila biaya sangat sedikit, hasil yang diminta segera dan tidak memerlukan ketepatan yang tinggi.

36  

Ada 3 cara yang dikenal : a. Sampel Pertimbangan (Pusposive Sampling) Pengambilan sampel dilakukan hanya atas dasar pertimbangan penelitinya saja yang menganggap unsur-unsur yang dikehendaki telah ada dalam anggota sampel yang diambil. b. Sampel Kebetulan (Accidental Sampling) Sampel diambil atas dasar seandainya saja, tanpa direncanakan lebih dahulu. Juga jumlah sampel yang dikehenadaki tidak berdasarkan pertimbangan yang dapat dipertanggung jawabkan, asal memenuhi keperluan saja. Kesimpulan yang diperoleh bersifat kasar dan sementara saja. c. Sampel Kuota (Quota Sampling) Pengambilan sampel hanya berdasarkan pertimbangan peneliti saja, hanya disini besar dan kriteria sampel telah ditentukan lebih dahulu. Cara ini dipergunakan kalau peneliti mengenal betul daerah dan situasi daerah dimana penelitian akan dilakukan. 3. Sampel Penyelidikan (Investigatif Sampel) Pemilihan sampel diambil secara acak dan dilihat dari nomor registrasi yang berbeda untuk setiap sampel serta peminatan masyakarakat yang cukup tinggi terhadap produk tersebut. (Harmita, 2006 ; Isgiyanto, 2009).

37  

BAB III KERANGKA KONSEP

ALUR PENELITIAN Formaldehid merupakan zat pengawet yang berbahaya dan penggunaannya dilarang sebagai bahan pengawet makanan

Formaldehid akan menimbulkan efek yang sangat berbahaya pada kesehatan jika terakumulasi dalam tubuh manusia dan terlihat setelah jangka waktu yang lama dan berulang.

Perlu dilakukan penelitian terhadap produk tahu yang beredar di sekitar pasar Ciputat

Berdasarkan penelitianpenelitian sebelumnya, masih banyak ditemukan formaldehid pada berbagai produk pangan yang dijual dipasaran, termasuk produk tahu

Formalin merupakan bahan tambahan pangan (BTP) yang dilarang penggunaannya dalam makanan menurut peraturan Menteri Kesehatan (Menkes) Nomor 1168/Menkes/PER/X/1999.

Pengambilan sampel dilakukan dengan teknik sampling yaitu investigatif sampel Larutan Baku Induk Formaldehid 6 mg/ml Penyiapan Alat dan Bahan Larutan baku kerja Formaldehid 100 – 300 ppm dari larutan induk Pembuatan Kurva Kalibrasi

Pembuatan Larutan Uji dan Pereaksi

Uji Linearitas

Uji Akurasi

Uji Presisi

Uji Validasi

Penetapan Kadar dengan Sampel Uji

Uji LOD dan LOQ Uji Kuantitatif dengan Spektrosfotometer UV-Vis

Larutan Blanko Pembuatan Tahu dengan kadar formaldehid 100 – 300 ppm Larutan Uji dari sampel tahu

38  

BAB IV METODOLOGI PENELITIAN

4.1.

Pengambilan Sampel Sampel berupa produk tahu yang terdiri dari beberapa jenis tahu yang dijual di pasar Ciputat. Sampel tahu diambil secara acak dengan menghitung sumber produsen tahu kemudian jumlah sampel yang diuji dihitung menggunakan rumus populasi. Data perhitungan selengkapnya terdapat di Lampiran 2.

4.2.

Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian dilakukan di Laboratorium Kimia dan laboratorium pangan di Pusat Laboratorium Terpadu UIN Syarif Hidayatullah. Lama penelitian kurang lebih selama 3 bulan dari bulan Mei hingga Juli 2010.

4.3.

Alat dan Bahan Penelitian

4.3.1. Alat Penelitian Alat yang digunakan adalah labu ukur, labu destilasi, alat destilasi uap,

gelas ukur, erlanmeyer, thermometer, tabung reaksi, kaca arloji,

spatula besi, neraca analitik, alumunium foil, sarung tangan dissposable, masker, cawan petri, pipet volumetri, waterbath, spektrofotometer UVVis.

39  

4.3.2. Bahan Penelitian Bahan yang digunakan untuk penelitian adalah Formalin (Merck) Mengandung 37% formaldehid dalam air, Ammonium asetat (Merck), Asam asetat glacial (Merck), Asetil aseton (Merck), Asam fosfat 10% (Merck), Kacang kedelai, CaSO4/Sioko, Aquadest.

4.4.

Prosedur Penelitian

4.4.1. Penyiapan Bahan Baku dan Pereaksi 1.

Pembuatan Larutan Nash Ditimbang 150 gram ammonium asetat dilarutkan dalam 700 ml air. Ditambahkan 3 ml asam asetat glasial dan 2 ml asetil aseton. Ditambahkan aquadest hingga volume tepat 1000 ml. (Anonim, 1995 ; Marliana, 2008)

2.

Pembuatan larutan baku induk formaldehid 6 mg/ml Dipipet formalin (mengandung 37% formaldehid dalam air) sebanyak 1,1 ml (jika berbentuk larutan), dimasukkan kedalam labu ukur 200 ml. Kemudian di cukupkan dengan aquadest hingga garis tanda.

3.

Pembuatan larutan baku formaldehid konsentarsi 100 – 300 ppm. Dari larutan baku induk formaldehid 6 mg/ml, dibuat konsentrasi 100 ppm dengan mengukur 1,7 ml larutan induk di cukupkan dengan aquadest sampai 100 ml, kemudian dibuat konsentrasi 150 ppm dengan mengukur 2,5 ml larutan induk di cukupkan dengan

40  

aquadest sampai 100 ml, lalu dibuat konsentrasi 200 ppm dengan mengukur 3,3 ml larutan induk di cukupkan dengan aquadest sampai 100 ml, kemudian dibuat konsentrasi 250 ppm dengan mengukur 4,2 ml larutan induk di cukupkan dengan aquadest sampai 100 ml, lalu dibuat konsentrasi 300 ppm dengan mengukur 5 ml larutan induk dicukupkan dengan aquadest sampai 100 ml. Digunakan labu ukur 100 ml untuk pembuatannya. 4.

Pembuatan larutan asam fosfat 10% Diukur asam fosfat (85%) 11,8 ml dilarutkan dengan air suling sampai larut dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml, ditambahkan aquadest sampai garis tanda.

5.

Pembuatan Tahu Simulasi untuk Penambahan Formaldehid Dicuci kedelai sebanyak 1 kg, kemudian direndam dengan air bersih selama kurang lebih 5 - 6 jam. Dicuci kembali kedelai yang sudah direndam dengan air bersih, lalu ditumbuk atau dihancurkan kedelai menggunakan blender dengan ditambahkan air hangat (perbandingan kedelai dan air yaitu 1:2). Dikumpulkan hasil blender ke suatu wadah lalu dipanaskan hingga membentuk bubur tetapi tidak sampai mengental. Ditandai dengan gelembunggelembung kecil pada suhu 70 - 80˚C. Disaring bubur kedelai dengan kain saring, dan dibuang ampasnya. Dipanaskan kembali hasil saringan dan ditambahkan batu tahu/ bubuk sioko/ CuSO4 sebanyak 1 sendok makan per ½ kg kedelai untuk pengendapannya secara perlahan sambil diaduk pelan sampai terbentuk gumpalan

41  

tahu. Didiamkan beberapa menit sampai gumpalan menjadi banyak. Disiapkan tempat cetak tahu dengan dialaskan kain putih dan tahu dicetak pada tempatnya lalu lipat kain hingga menutupi seluruh permukaan adonan tahu. Cetakan ditindih dengan menggunakan sesuatu yang berat selama 15 menit agar tahu menjadi mampat. Didiamkan beberapa menit sampai tahu mengeras.

4.4.2. Penentuan panjang gelombang maksimum. Dipipet 1 ml larutan formaldehid konsentrasi 150 ppm dimasukkan kedalam tabung reaksi bertutup. Ditambahkan air hingga volumenya 10 ml dan 5 ml pereaksi Nash lalu dipanaskan dalam penangas air pada suhu 37˚C selama 30 menit. Setelah dingin dipindahkan kedalam labu ukur 25 ml secara kuantitatif dan ditepatkan volumenya menggunakan air, dikocok hingga homogen. Diamati serapannya pada panjang gelombang 400 – 500 nm dengan alat spektrofotometer UV-Vis hingga didapat panjang gelombang maksimum.

4.4.3. Validasi Metoda 1. Pembuatan Kurva kalibrasi dan Penentuan Linearitas Dipipet 1 ml larutan formaldehid konsentrasi 100 ppm dimasukkan kedalam tabung reaksi bertutup. Ditambahkan air hingga volumenya 10 ml dan 5 ml pereaksi Nash lalu dipanaskan dalam penangas air pada suhu 37˚C selama 30 menit. Dipindahkan kedalam labu ukur 25 ml secara

42  

kuantitatif setelah dingin dan ditepatkan volumenya menggunakan air, dikocok hingga homogen. Diamati serapannya pada panjang gelombang 400 – 500 nm dengan alat spektrofotometer uv-vis. Dilakukan cara yang sama untuk konsentrasi 150, 200, 250 dan 300 ppm kemudian dibuat kurva kalibrasi hingga didapat persamaan linier y=a+bx. Linieritas dari kurva kalibrasi dilihat dengan menghitung koefisien korelasi (r) dari persamaan garis regresi linier. 2. Penentuan Batas Deteksi / Limit Of Detection (LOD) dan Batas Kuantitasi / Limit Of Quantitation (LOQ) LOD dihitung melalui persamaan garis regresi linier dari kurva kalibrasi, dengan rumus : LOD = Sedangkan nilai batas kuantitasi (LOQ) diperoleh dengan rumus : LOQ = Dimana (Sy/x) adalah simpangan baku residual, b adalah slope dari persamaan regresi. 3. Uji Kecermatan / Perolehan Kembali (Akurasi) a. Penyiapan sampel uji tahu simulasi Ditimbang sampel tahu sebanyak 10 g, dihancurkan dalam lumpang kemudian ditambahkan formaldehid konsentrasi 125 ppm dan dimasukkan kedalam labu destilasi. Ditambahkan 100 ml air dan 10 ml asam fosfat 10% kemudian dilakukan destilasi uap menggunakan alat destilasi uap. Destilat ditampung kedalam erlenmeyer 100 ml yang telah berisi 10 ml air (ujung pendingin/pipa destilat dicelup kedalam air) dan dilakukan destilasi

43  

hingga diperoleh destilat sampai tanda batas, ditutup dengan alumunium foil dan kocok sampai homogen. Dilakukan cara yang sama pada sampel tahu yang dicampur formaldehid dengan kadar 175 ppm dan 225 ppm kemudian dihitung nilai perolehan kembali. Dilakukan 3 kali destilasi untuk masing-masing konsentrasi sehingga diperoleh 9 destilat dan diukur serapannya menggunakan alat Spektrofotometer UV-Vis. b. Perhitungan Nilai UPK Nilai perolehan kembali dihitung dengan cara membandingkan konsentrasi yang diperoleh dari hasil formaldehid ekstraksi tahu simulasi dengan konsentrasi formaldehid sebenarnya yang ditambahkan pada tahu simulasi dan dikalikan 100%. Nilai UPK = Konsentrasi yang diperoleh x 100% Konsentrasi yang sebenarnya 4. Uji Keseksamaan (Presisi) Selisih dari nilai UPK rata-rata ketiga konsentrasi formaldehid tahu simulasi dikurangi nilai UPK rata-rata per konsentrasi. Kemudian dihitung nilai simpangan baku (SD) dan nilai Simpangan baku relatif atau koefisien variasi (KV) masing-masing konsentrasi.

4.4.4. Analisa sampel pasar secara Kuantitatif Ekstraksi dan Pengukuran Sampel Pasar Ditimbang sampel tahu sebanyak 10gram dan dimasukkan kedalam labu destilasi. Ditambahkan 100 ml air dan 10 ml asam fosfat 10% kemudian dilakukan destilasi uap menggunakan alat destilasi uap. Destilat ditampung kedalam labu ukur 100 ml yang telah berisi 10 ml air ( ujung

44  

pendingin dicelup) dan dilakukan destilasi hingga diperoleh destilat sampai tanda batas, kocok sampai homogen. Dipipet 1 ml destilat dan dimasukkan kedalam tabung reaksi bertutup. Ditambahkan air hingga volumenya 10 ml dan 5 ml pereaksi Nash lalu dipanaskan dalam penangas air pada suhu 37oC selama 30 menit. Dipindahkan kedalam labu ukur 25 ml

secara

kuantitatif

setelah

dingin

dan

ditepatkan

menggunakan air. Dikocok hingga homogen (Anonim . 1995).

volumenya

45  

46  

BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN

5.1.

Hasil Percobaan

5.1.1.

Panjang gelombang maksimum

1.00

 

0.9

412.73

 

0.8

 

0.7

 

0.6

A

 

0.5

 

0.4

 

315.89

 

0.3

 

0.2

 

0.1

0.00

 

300.0

320

340

360

380

400 nm

420

440

460

 

480

500.0

Gambar 1. Serapan optimum formaldehid Formaldehid yang diukur menggunakan spektrofotometer UV-Vis memberikan serapan optimum di daerah panjang gelombang 412,73 nm dalam pelarut air dan penambahan pereaksi Nash (Ammonium asetat, Asam asetat glasial dan Asetil aseton). Hasil spektrum serapan larutan formaldehid lebih lengkap dapat dilihat pada lampiran 3, gambar 7.

5.1.2.

Linearitas dan Kurva kalibrasi

Kurva Kalibrasi 1,2 1

47    

Gambar 2. Kurva kalibrasi formaldehid berupa konsentrasi (µg/ml) dibandingkan dengan nilai absorbansi. Kurva kalibrasi Formaldehid yang dibuat dari lima konsentrasi formaldehid bertingkat yaitu 100 µg/ml, 150 µg/ml, 200 µg/ml, 250 µg/ml dan 300 µg/ml. Berdasarkan hasil kurva yang didapat menunjukkan bahwa nilai absorbansi yang dihasilkan meningkat sejajar dengan peningkatan konsentrasi formaldehid yang dibuat. Dan dari kurva didapatkan persamaan linier antara konsentrasi dan absorbansi formaldehid yaitu y=0,0032x-0,0079. Persamaan linier tersebut dapat digunakan sebagai penentu konsentrasi formaldehid dari absorbansi yang diperoleh. Data selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran 10, Tabel 5.

5.1.3.

Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Tabel 1. Hasil uji batas deteksi dan batas kuantitasi formaldehid

48  

∑ (y - y)²

0,00042294

S(y/x)²

0,00014098

S(y/x)

0,011875

LOD (Limit Of Detection)

11,1328 µg/ml

LOQ (Limit Of Quantitation)

37,1094 µg/ml

Dari data kurva kalibrasi dan liearitas didapat nilai LOD (Limit Of Detection) atau batas deteksi adalah 11,1328 µg/ml, sedangkan nilai LOQ (Limit Of Quantitation) atau batas kuantitasi yang didapat adalah sebesar 37,1094 µg/ml. Data selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran 11, Tabel 6.

5.1.4.

Kecermatan / Perolehan kembali (Akurasi) Tabel 2. Hasil uji perolehan kembali formaldehid pada tahu simulasi C

Rata-rata

Rata-rata UPK

(µg/ml)

UPK (%)

±SD (%)

125

99,14

175

98,59

225

98,36

98,69 ± 0,4085

X = 98,69 Tabel 2 menunjukkan nilai uji perolehan kembali (UPK) atau uji kecermatan (Akurasi) formaldehid pada tahu buatan dengan konsentrasi 125 µg/ml, 175 µg/ml dan 225 µg/ml. Rata-rata nilai UPK seluruh konsentrasi sebesar 98,69%. Syarat nilai UPK yang baik adalah ≥ 98%.

49  

Maka hasil yang diperoleh telah memenuhi syarat uji kecermatan. Data selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran 12, Tabel 7

5.1.5.

Keseksamaan (Presisi) Tabel 3. Hasil uji presisi formaldehid pada tahu simulasi

C (sebenarnya)

Rata-rata (x – x)

((x – x)²)

(µg/ml)

UPK (%)

125

99,14

0,45

0,2025

175

98,54

- 0,15

0,0225

225

98,36

X = 98,69

- 0,33

0,1089

∑

0,3339

SD

KV

0,4086

0,4139%

Tabel 3 menunjukkan hasil perhitungan simpangan baku (SD) dari data yang diperoleh sebesar 0,4086 dan nilai koefisien variasi (KV) sebesar 0,4139%. Data selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran 13, Tabel 8.

5.1.6.

Analisis Sampel Pasar

50  

Grafik Kadar Formaldehid Pasar Ciputat

Konsentrasi (µg/ml)

250 Sampel 1 Sampel 2 Sampel 3 Sampel 4 Sampel 5 Sampel 6 Sampel 7

200 150 100 50 0 Gambar 3. Grafik hasil analisis tahu yang dijual di pasar Ciputat Grafik diatas menunjukkan besar konsentrasi (µg/ml) formaldehid yang terdapat pada sampel tahu pasar Ciputat yang dianalisis. Masingmasing sampel memiliki kadar formaldehid yang bervariasi. Kadar formaldehid tertinggi terdapat pada sampel 5 sebesar 201,98 µg/ml. Berikutnya sampel 4 sebesar 190,80 µg/ml dan sampel 1 sebesar 104,87 µg/ml. Dan kadar formaldehid terendah terdapat pada sampel 2 sebesar 11,20 µg/ml. Sedangkan pada sampel 3, sampel 7 sebesar, dan sampel 6 dikatakan tidak terdeteksi karena nilai yang di dapat berada dibawah batas deteksi yang diperoleh. Data selengkapnya pada lampiran 8, tabel 4.

5.2.

Pembahasan

51  

Tahu dipilih sebagai sampel penelitian ini karena tahu merupakan makanan tradisional sederhana yang konsumsinya cukup besar setiap harinya oleh masyarakat karena rasanya enak dan tidak mahal. Pengambilan sampel dilakukan dengan cara sampling acak dan mencari tahu asal pabrik pemasok tahu ke pasar Ciputat dan mencatat jumlah pabriknya sehingga dapat dihitung jumlah sampel yang akan diambil dengan menggunakan rumus pengambilan sampel populasi (N) diketahui. Validasi metode dan penetapan kadar formaldehid dilakukan menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis dengan penambahan pereaksi Nash (Anonim, 1995; Arifin, 2005). Pemilihan metode spektrofotomentri UV-Vis karena formaldehid memiliki serapan pada daerah sinar tampak. Daerah sinar tampak yaitu berada pada daerah 380nm-780nm. Metode spektrofotometri UV-Vis merupakan metode sederhana, tetapi dapat digunakan untuk penentuan kadar dengan konsentrasi yang kecil. Selain itu metode tersebut memiliki daya sensitivitas yang baik dalam proses analisis. Penelitian didahului dengan proses penentuan panjang gelombang maksimum atau serapan optimum dari larutan formaldehid yang dilarutkan dengan air dan pereaksi nash menggunakan alat spektrofotometer UV-Vis pada rentang panjang gelombang 400 – 500 nm. Menurut literatur, formaldehid memiliki serapan optimum pada 412– 415nm. Setelah di lakukan pengukuran, formaldehid yang dilarutkan dengan air dan ditambah pereaksi Nash menghasilkan panjang gelombang maksimum 412,73nm. Panjang gelombang yang diperoleh berada di

52  

daerah serapan optimum formaldehid. Pemilihan panjang gelombang maksimum formaldehid dilakukan agar dapat mengetahui daerah formaldehid bekerja memberi serapan warna yang dapat diabsorbsi oleh alat spektrofotometer UV-Vis, sehingga dapat dihasilkan nilai berupa absorbansi. Selain itu pemilihan panjang gelombang maksimum juga berfungsi untuk mengetahui selektifitas dan sensitifitas formaldehid, jika panjang gelombang maksimum yang dihasilkan berada pada daerah serapan optimum formaldehid sesuai literatur, maka formaldehid yang digunakan memenuhi syarat penggunaannya untuk analisis. Contoh spektrum serapan formaldehid dapat dilihat pada lampiran 3, gambar 7. Larutan formaldehid merupakan larutan yang tidak berwarna. Syarat senyawa yang dapat diukur serapannya dengan alat spektrofotometer UV-Vis adalah senyawa organik yang dapat memberikan serapan yaitu senyawa yang memiliki gugus kromofor. Gugus kromofor adalah gugus fungsional tidak jenuh yang memberikan serapan pada daerah ultraviolet atau cahaya tampak. Oleh karena itu pada proses pengukuran sampel direaksikan dengan pereaksi yang dapat memberikan spektrum serapan berwarna dengan formaldehid yaitu pereaksi Nash yang terdiri dari campuran ammonium asetat, asam asetat glasial dan asetil aseton. Campurannya dengan formaldehid dapat memberi serapan berwarna kuning terang. Semakin kuning warna larutan yang didapat maka diperkirakan konsentrasi yang terdapat dalam analit juga semakin besar.

53  

Formaldehid dengan penambahan pereaksi Nash disertai pemanasan selama 30 menit akan menghasilkan warna kuning yang mantap, sehingga dapat diukur serapannya menggunakan spektrofotometri sinar tampak pada panjang gelombang 412 - 415 nm. (Jon, 1980 ; Nash, 1953)

Gambar 4. Reaksi perubahan warna pada campuran formaldehid dan pereaksi Nash. Pada proses preparasi sampel, dilakukan proses ekstraksi sampel dengan cara metode destilasi menggunakan alat destilasi uap. Metode destilasi uap dilakukan karena formaldehid merupakan senyawa yang berbentuk gas dan bersifat sangat volatil atau mudah menguap juga memiliki titik didih dibawah 100°C yaitu 96°C. Destilasi uap diperlukan untuk menjaga senyawa formaldehid agar tidak rusak, karena destilasi uap digunakan untuk mengekstraksi senyawa-senyawa yang tidak tahan

54  

pemanasan atau suhu tinggi. Sampel tahu ditimbang ± 10gram dan dihancurkan pada lumpang. Kemudian sampel yang telah halus dimasukkan ke dalam labu destilasi dengan ditambahkan 100 ml aquadest dan 10 ml asam phospat 10%. Formaldehid yang terdapat dalam tahu akan terikat dengan protein dalam tahu, maka penambahan asam phospat ditujukan untuk menghancurkan atau melepaskan ikatan antara formaldehid dengan protein sehingga formaldehid dapat terpisah dengan proses destilasi uap. Sampel yang telah siap langsung diekstraksi menggunakan destilasi uap dengan suhu ± 96°C, labu penampung destilat terlebih dahulu diisi air 10ml, kemudian ujung pendingin tercelup kedalam air, hal ini bertujuan untuk menangkap uap formaldehid yang dihasilkan proses destilasi ke dalam air yang telah ditampung. Setelah hasil destilat diperoleh 100 ml lalu proses destilasi dihentikan. Sebanyak 1 ml destilat dimasukkan ke tabung reaksi, ditambahkan 9 ml aquadest dan ditambahkan 5 ml pereaksi Nash (campuran ammonium asetat, asam asetat glasial, dan asetil aseton) kemudian di vortex selama 1 menit bertujuan agar campuran destilat-air-pereaksi nash terdispersi sempurna sehingga warna yang dihasilkan merata, lalu di panaskan diatas penangas air dengan suhu 37°C selama 30 menit. Larutan sampel akan berubah menjadi berwarna kuning jika menunjukkan hasil positif. Sampel di cukupkan 25 ml dengan aquadest dan divortex kembali. Kemudian dilakukan pengukuran dengan alat spektrofotometer ultraviolet-visibel pada panjang gelombang 412,73mn. Validasi metode dilakukan dengan tujuan untuk membuktikan bahwa metode analisis yang digunakan dapat

55  

memberikan hasil yang valid. Validasi metode penetapan kadar diawali dengan melakukan pembuatan kurva kalibrasi dan penentuan linearitas. Kurva kalibrasi yang dibuat adalah hubungan antara nilai absorbansi dari analit terhadap konsentrasi dari analit. Nilai yang dihasilkan oleh kurva kalibrasi dikatakan baik apabila nilai koefisien korelasi (r) mendekati 1. Artinya peningkatan nilai absorbansi analit berbanding lurus dan signifikan dengan peningkatan konsentrasinya. Pada pembuatan kurva kalibrasi dibuat deret standar formaldehid dari larutan induk formaldehid konsentrasi 6mg/ml. Konsentrasi yang digunakan sebagai deret standar formaldehid adalah 5 konsentrasi bertingkat dengan rentang 100, 150, 200, 250 dan 300 ppm (µg/ml). Dihasilkan kurva kalibrasi dengan persamaan Y = 0,0032x - 0,0079 dan nilai koefisien korelasi (r) = 0,9992, nilai koefisien variasi fungsi regresi sebesar 0,4139%. Koefisien variasi fungsi regresi menunjukkan besarnya penyimpangan data yang dihasilkan dari data yang sebenarnya. Semakin kecil nilai persen koefisien variasi fungsi maka menunjukkan data yang diperoleh memiliki akurasi yang tinggi. Berdasarkan hasil percobaan yang dilakukan, kedua nilai yang didapat memenuhi persyaratan yaitu syarat nilai koefisien kolerasi (r) yang baik adalah ≥ 0,9990, sedangkan nilai koefisien variasi fungsi regresi (Vxo) yang baik adalah sebesar ≤ 2%. Setelah didapat kurva kalibrasi yang memenuhi persyaratan analisis, kemudian data yang didapat diolah dan dilanjutkan dengan menentukan batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ). Batas deteksi merupakan konsentrasi analit terendah dalam sampel yang masih

56  

dapat dideteksi (Harmita, 2006). Hasil percobaan didapat nilai LOD sebesar 11,1328 µg/ml. Batas kuantitasi merupakan kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat ditentukan dengan metode yang digunakan dan memenuhi criteria cermat dan seksama. Nilai LOD dapat digunakan sebagai acuan dalam pemilihan konsentrasi sampel pada pengujian selektivitas (Harmita, 2006). Dari data hasil percobaan diperoleh nilai LOQ sebesar 37,1094 µg/ml. Lalu dilanjutkan dengan uji kecermatan (uji akurasi). Akurasi merupakan kedekatan hasil penetapan yang diperoleh dengan hasil sebenarnya dan dinyatakan dalam persen perolehan kembali (UPK). Dilakukan pengukuran dari 3 konsentrasi berbeda formaldehid yaitu 125 µg/ml, 175 µg/ml, dan 225 µg/ml yang dimasukkan kedalam sampel tahu buatan. Kemudian tahu diekstraksi dengan metode destilasi uap untuk memisahkan formaldehid dari tahunya hingga dihasilkan destilat sebanyak 100 ml dan diukur serapannya menggunakan spektrofotometer uv-vis dengan 3 kali pengulangan. Dari percobaan 3 konsentrasi berbeda formaldehid pada tahu buatan diperoleh rata-rata persen nilai UPK tiap konsentrasi pertama sebesar 99,14% untuk konsentrasi 125 µg/ml, yang kedua sebesar 98,59% untuk konsenrasi 175 µg/ml dan yang ketiga 98,36% untuk konsentrasi 225 µg/ml. Rata-rata persen nilai UPK seluruh konsentrasi yaitu sebesar 98,69% dengan nilai simpangan baku (SD) sebesar 0,4086 sedangkan syarat uji perolehan kembali nilai UPK ratarata berkisar 98 – 102% telah terpenuhi. Seluruh data yang diperoleh memenuhi syarat uji akurasi sehingga data yang diperoleh dapat dikatakan

57  

memberi hasil uji akurasi yang baik dan metode analisis dapat bekerja cukup akurat dan memberi hasil yang baik untuk pengukuran sampel pasar selanjutnya. Uji selanjutnya yang dilakukan sebagai pendukung proses validasi metode yaitu uji keseksamaan. Uji keseksamaan atau uji presisi merupakan ukuran derajat kesesuaian antara hasil individual dari rata-rata jika prosedur diterapkan secara berulang pada sampel-sampel yang diambil dari campuran yang homogen (Harmita, 2006). Hasil percobaan yang dilakukan didapat nilai koefisien variasi sebesar 0,4139% dan nilai simpangan baku (SD) sebesar 0,4086. Syarat uji keseksamaan yaitu menghasilkan nilai koefisien variasi ≤ 2%. Maka dapat dilihat bahwa semua hasil uji hasil yang didapat memenuhi syarat sebagai parameter uji dari validasi metode penetapan kadar formaldehid pada tahu. Sehingga metode yang digunakan dapat dikatakan valid dan dapat memberikan hasil yang baik dalam pengukuran sampel selanjutnya. Jika kandungan dalam tubuh tinggi, formaldehid akan bereaksi secara kimia dengan hampir semua zat di dalam sel, sehingga menekan fungsi sel dan menyebabkan kematian sel yang menyebabkan kerusakan pada organ tubuh Penemuan di bidang patologi menunjukkan bila bahan ini terhirup dapat menyebabkan nekrosis atau kematian sel yang disebabkan oleh kerusakan sel secara akut pada membran mukosa. Selain

58  

itu, ditemukan perubahan degeneratif pada hati, ginjal dan otak (Dreisbach, 1971). Hasil penetapan kadar dari seluruh sampel yang diperiksa menghasilkan data absorbansi. Kadar formaldehid dihitung menggunakan persamaan linier yang didapat dari kurva kalibrasi yaitu Y=0,0032x0,0079. Dari sampel pertama diperoleh rata-rata absorbansi sampel setelah 3 kali pengukuran sebesar 0,3277 dan kadar formaldehid yang ditafsirkan sebesar 104,879µg/ml. Sampel kedua diperoleh rata-rata nilai absorbansi sebesar 0,0279 dan kadar formaldehid yang terkandung sebesar 11,2083 µg/ml. Sampel ketiga memiliki nilai rata-rata absorbansi sebesar 0,0010 dan dikatakan tidak terdeteksi adanya formaldehid karena nilai yang diperoleh berada dibawah batas deteksi sehingga ketepatannya diragukan. Sampel keempat diperoleh nilai rata-rata absorbansi sebesar 0,6026 dan konsentrasi formaldehid sebesar 190,8021 µg/ml. Sampel kelima memiliki rata-rata nilai absorbansi sebesar 0,6384 dan kadar formaldehid sebesar 201,9896 µg/ml. Sampel keenam memiliki rata-rata nilai absorbansi sebesar 0,0256 dan dikatakan tidak terdeteksi adanya formaldehid. Sampel ketujuh memiliki rata-rata nilai absorbansi sebesar 0,0027 dan dikatakan tidak terdeteksi adanya formaldehid. Dari penentuan kadar masing-masing sampel tahu pasar, dapat dilihat bahwa semua tahu yang analisis mengandung formaldehid dengan kadar berbeda tiap ml nya. Kadar formaldehid terbesar yaitu pada sampel kelima sebesar 201,9896 µg/ml, sedangkan kadar formaldehid terrendah yaitu sampel kedua sebesar 11,2083 µg/ml.

59  

BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN

6.1. Kesimpulan 1. Uji linearitas pada rentang konsentrasi 100 - 300 µg/mL memberikan nilai koefisien korelasi (r) 0,9992 dan nilai koefisien variasi fungsi sebesar 0,4139 % dengan batas deteksi (LOD) formaldehid 11,1328 µg/mL dan batas kuantitasi (LOQ) 37,1094 µg/mL. Rata-rata persen perolehan kembali yang dihasilkan pada konsentrasi 125 µg/mL, 175 µg/mL

dan 225 µg/mL adalah 98,69±0,4085%. Dari hasil tersebut,

dapat disimpulkan bahwa metode penetapan kadar formaldehid pada produk dengan metode spekrtofotometri UV-Vis terbukti memiliki nilai validitas yang cukup baik. 2. Sampel tahu pasar yang diperiksa beberapa mengandung formaldehid sebagai pengawetnya. Kadar terbesar adalah sampel 5 sebesar 201,9896µg/ml, sedangkan kadar terendah adalah sampel 2 yaitu sebesar 11,2083µg/ml.

6.2. Saran Sebaiknya pada penelitian selanjutnya dilakukan analisis penetapan kadar formaldehid dalam produk makanan tahu ataupun produk makanan lainnya yang beredar dipasar Ciputat dengan menggunakan metode lainnya seperti GC-MS atau HPLC.

60  

DAFTAR PUSTAKA

Anonim . 1995. Jurnal Association Of Official Analytical Chemests. Chap 47:548

Anonim. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI.

Anonim. 2004. Guidelines: Formaldehyde. Environmental and Occupational Health and Safety Services. Newark: University Of Medicine Dentistry Of New Jersey.

Anonim, 2006. IAEC Monographs on the Evaluation of Carsinogenic Risks to Humans Vol 88. World Health Organization International Agency For Reasearch On Cancer.

Arifin, Zainal dkk. 2005. Deteksi Formalin Dalam Ayam Broiler Dipasaran. Bogor: Balai Penelitian Veteriner.

Dir. Jen. POM. 1995. Farmakope Indonesia Edisi III. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal: 259-260; 676.

Dir. Jen. POM. 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal: 1157

Dir. Jen. POM. 2001. Kodeks Makanan Indonesia Tentang Bahan Tambahan Makanan. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal: 630, 665-669

Dir. Jen. POM. 2003. Formalin. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal: 3-20

Dreisbach, Robert H. 1982. Hand Book Of Poisoning. Washington: University Of Washington. Hal: 200-201

61  

Doyle ME et al. Food Safety. New York-Basel-Hongkong: Marcel Dekker, Inc. 1993.

Fauziah, Munayah. 2005. Pengelolaan Aman Limbah Layanan Kesehatan. Jakarta: EGC. Hal: 104. Terjemahan Dari Safe Management Of Wastes From Health Care Activities. 1999. Pruss, A. WHO.

Gandjar, Ibnu Gholib dan Abdul Rohman. 2009. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Hal: 18-19;199;456-474 Gosselin ER et al. Clinical Toxicology of Commercial Products: Acute Poisoning, 4th ed. Baltimore: The Williams and Wilkins Co, 1976, p. 166–67.

Harmita. 2006. Analisa Fisikokimia .UI Press. Jakarta. 2006;17, 144-152.

Isgiyanto, Awal. 2009. Teknik Pengambilan Sampel. Jogjakarta: Mitra Cendikia Press. Hal: 80-81.

Jon Compton, Bruce, et al. 1980. Jurnal of The mechanism of the reaction of the Nash and the Sawicki aldehyde reagent. Department of Chemistry, McGill University, 801 Sherbrooke St. W., Montreal, P.Q., Canada H3A 2K6.

Li, Jianrong, et al. 2007. Jurnal of Determination of formaldehyde in squid by high-performance liquid chromatography. College of Food Science, Biotechnology and Environmental Engineering, Zhejiang Gongshang University, Food Safety Key Lab of Zhejiang Province, Hangzhou, China, 310035 Marliana, Herci. 2008. Optimasi Pereaksi. Skripsi FMIPA UI. Jakarta: UI. Hal: 516 Mulono, H.J. 2005. Toksikologi Lingkungan. Surabaya: Universitas Airlangga. Hal: 134-155

62  

Nash, T. 1953. Jurnal of The Colorimetric Estimation of Formaldehyde by Means of the Hantzsch Reaction. Air Hygiene Laboratory, Public Health Laboratory Service, Colindale Avenue, London, N.W. 9.

Norliana, S et al. 2009. The Health Risk of Formaldehyde to Human Beings. Malaysia: University Putra Malaysia, Faculty of Food Science and Technology.

Pujaatmaka, Dr. A. Handayani dan Ir. L Setiono. 1994. Buku Ajar Vogel Kimia Analisis Kuantitatif Anorganik edisi 4. Jakarta: EGC. Hal: 4-9

Purwoningsih, Eko. 2007. Cara Pembuatan Tahu dan Manfaat Kedelai. Bekasi: Ganeca Exact. Hal: 5-7

Reynold, J. E. F. 1982. Martindale The Extra Pharmacopoeia, 28th ed. London: The Pharmaceutical Press. Hal: 563 – 564

Sihombing, Marice. 1996. Kandungan Zat Gizi Tahu Yang Direndam Dalam Formalin. Majalah Kesehatan Masyarakat Indonesia Ed:24. Hal: 173-174

Sihombing, Marice dan Geertruida Sihombing. 1996. Nilai Biologik Tahu Yang Direndam Dalam Formalin. Cermin Dunia Kedokteran No:111. Hal: 1719.

Suprapti, Ir. M. Lies. 2005. Pembuatan Tahu. Yogyakarta: Kanisius. Hal: 11

Suwahono, S.Pd, et al.2009 Jurnal Analisis Kualitatif Adanya Formaldehid Pada Mie Basah. Semarang: IAIN Walisongo.

Terelak, K et al. 2003. Pilot Plant Formaldehyde distillation Experiments and Modelling. Poland: Institute of Heavy Organic Synthesis “Blachownia”

63  

Tunhun, Dusadee et al. Detection of Illegal Addition of Formaldehyde to Fresh Fish. Thailand: The Kasetsart University Research and Development Institute.

Uzairu, A et al. 2009. Formaldehyde Levels In Some Manufactured Reguler Foods In Makurdi, Benue State, Nigeria. (Jurnal Of Applied Sciences in Environmental Sanitation, V N 211-214)

Windholz, Martha, et al. The Merck Index, 10th ed. Merck&Co, Inc. New York, USA. 1983. Hal: 604-605

Winarno, F.G. 2007. Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. Hal: 214, 224-225

Winarno, F.G.,Sulistyowati, Titi. Bahan Tambahan untuk Makanan dan Kontaminan. Pustaka Sinar Harapan. Jakarta. 1994; 104-105, 108.

64  

LAMPIRAN Lampiran 1. Bahan yang digunakan dalam analisis

Kedelai

CaSO4 / Sioko

Gambar 5. Bahan dalam proses pembuatan tahu

Formaldehid

Ammonium Asetat

Asam Phospat

Asetil Aseton

Asam Asetat Glasial

Gambar 6. Bahan dalam proses analisis tahu dan formaldehid

65  

Lampiran 2. Perhitungan jumlah sampel yang dianalisis Terdapat 7 pabrik utama pemasok tahu ke Pasar Ciputat Menggunakan Rumus Sampling populasi (N) diketahui (Isgiyanto, 2009) N= 7 Z²1-α/2 = 1,96 d = 0,1 P = 0,25 n = ?? n = N Z²1-α/2 P(1-P) Nd²+ Z²1-α/2 P(1-P)    =

7 (1,96)² (0,25) (1-0,25) = 6,3799 ∞ 6 sampel 7 (0,1)²+(1,96)²(0,25)(1-0,25)

Dari perhitungan didapat 6 sampel yang harus diperiksa, karena hanya terdapat 7 pabrik utama, maka dapat diperiksa seluruhnya, yaitu 1 sampel dari tiap pabrik.

66  

Lampiran 3. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Formaldehid Spectrum: FORMALIN Comment: Panjang gelombang max formalin Threshold: 0.1000 Abscissa units: nm Ordinate units: A No. Abscissa Ordinate Type ------------------------------------1 412.73 0.6555 Peak 2 315.89 0.1874 Peak 3 311.93 1.3908 Peak 4 305.87 6.6468 Peak 1 321.36 -0.941 Base 2 314.25 -0.000 Base 3 309.27 -0.713

Date: 3/5/2010

Time: 2:05:05 PM

1.00

0.9

0.8

412.73

0.7

0.6

A

0.5

0.4

 

315.89 0.3

0.2

0.1

0.00 300.0

320

 

 

340

360

380

400 nm

420

440

460

480

500.0

Description: Panjang gelombang max formalin Spectrum Name: C:\UVWINLAB\DATA\FORMALIN.SP Date Created: Mon May 03 14:05:05 2010

 

Instrument Model: Lambda 25

Scan Speed: 240.00 nm/min Slit Width: 1.0000 nm Smooth Bandwidth: 6.00 nm

 

Data Interval: 1.0000 nm

Gambar 7. Kurva absorbsi formaldehid dengan pereaksi nash

 

67  

Lampiran 4. Skema bagan kerja a. Skema bagan pembuatan larutan pereaksi

Larutan Pereaksi

Larutan Nash

150 gram ammonium asetat dilarutkan dengan 700 ml air

Ditambah 3 ml asam asetat glasial

2 ml asetil aseton

Ad dengan air hingga 1000 ml

Larutan Asam Fosfat 10%

Diukur asam fosfat (85%) sebanyak 11,8 ml

Dimasukkan kedalam labu ukur 100 ml dan di ad dengan aquades hingga tanda batas

68  

b. Skema Pembuatan larutan baku

Larutan Baku

Larutan baku induk formaldehid 6 mg/ml 

Ditimbang 1,2 g (padatan) atau 1,1ml (cairan) formalin

Di ad kan dengan aquadest pada labu ukur 200 hingga tanda batas

Kocok hingga homogen

Larutan baku kerja

Larutan blanko

Dibuat larutan baku konsentrasi 100 ppm – 300 ppm dari larutan baku induk

Dimasukkan 10ml air + 5ml pereaksi Nash ke dalam tabung reaksi bertutup

1,7 ml di ad 100ml aquadest dalam labu 100ml (100 ppm)

2,5 ml di ad 100ml aquadest dalam labu 100ml (150 ppm)

3,3 ml di ad 100ml aquadest dalam labu 100ml (200 ppm)

4,2 ml di ad 100ml aquadest dalam labu 100ml (250 ppm)

5 ml di ad 100ml aquadest dalam labu 100ml (300 ppm)

Dipanaskan dalam penangas air suhu 37oC selama 30 menit

Setelah dingin dimasukkan kedalam labu ukur 25ml secara kuantitatif. Volume ditepatkan hingga batas tanda

Kocok hingga homogen

69  

c. Skema pembuatan tahu dengan penambahan formalin Kacang Kedelai

Disortasi kemudian ditimbang ½ kg

Dicuci berkali-kali dengan air bersih

Direndam dengan air bersih Dicuci kembali dan ditiriskan Perbandingan air dan kedelai yaitu 2:1 pada blender

Kacang kedelai dihancurkan dengan blender Hasil blender berupa air kedelai yang masih berampas

Dimasak sampai mengental

Disaring dangan kain saring Ampas dibuang

Hasil saringan diendapkan dengan batu tahu / CuSO4

Dicetak pada cetakan tahu

Tahu

Tahu dibagi 3 bagian

+ formalin 125 ppm

+ formalin 175 ppm

+ formalin 255 ppm

70  

d. Skema pembuatan larutan tahu formalin

Tahu formalin

Ditimbang tahu sebanyak 10mg

Dihancurkan hingga halus

Ditambahkan formaldehid konsentrasi 125 ppm 

destilasi uap 

Destilat ditampung kedalam erlenmeyer 100 ml yang telah berisi 10 ml air (ujung pendingin harus tercelup) 

+ 100 ml air dan 10 ml asam fosfat 10%

Hasil destilat ditutup rapat dan kocok homogen, perlakuan sama untuk konsentrasi lainnya yaitu 175 dan 225 ppm. 

Dimasukkan kedalam labu destilasi 

71  

e. Skema penentuan panjang gelombang maksimum

Dipipet sejumlah larutan (1ml) formaldehid dengan kadar formaldehid 150 ppm 

Dimasukkan kedalam tabung reaksi bertutup 

Tambahkan air hingga volumenya 10 ml dan 5 ml pereaksi Nash 

Panaskan dalam penangas air pada suhu 37˚C selama 30 menit 

Amati serapannya pada panjang gelombang maksimum 

Kocok homogen 

Setelah dingin masukkan ke labu ukur 25 ml + aquadest hingga tanda batas 

72  

f. Skema pembuatan kurva kalibrasi

Dipipet sejumlah larutan (1ml) formaldehid dengan kadar formaldehid 100 ppm 

Dimasukkan kedalam tabung reaksi bertutup 

Tambahkan air hingga volumenya 10 ml dan 5 ml pereaksi Nash 

Panaskan dalam penangas air pada suhu 37˚C selama 30 menit 

Amati serapannya pada panjang gelombang maksimum 

Lakukan hal yang sama pada kadar formaldehid 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 300 ppm 

Kocok homogen 

Setelah dingin masukkan ke labu ukur 25 ml + aquadest hingga tanda batas 

73  

g. Skema analisa sampel pasar secara kuantitatif

 

Analisa Kuntitatif 

   

Ditimbang 10 g sampel kedalam labu destilasi 

     

100 ml air dan 10 ml asam fosfat 10% 

   

Destilasi Uap    

Destilat ditampung kedalam labu ukur 100 ml yang telah berisi 10 ml air (ujung pendingin harus tercelup)

           

Dipipet sejumlah destilat dan   dimasukkan kedalam tabung reaksi   bertutup   

Tambahkan air hingga volumenya 10 ml dan 5 ml pereaksi Nash 

Panaskan dalam penangas air pada suhu 37oC selama 30 menit 

       

 

 

Periksa dengan alat spektrofotometer Uv-Vis

Setelah dingin pindahkan kedalam labu ukur 25 ml secara kuantitatif dan tepatkan volumenya menggunakan air , kocok hingga homogen

74  

Lampiran 5. Sampel tahu pasar Ciputat

Bentuk

: segi empat, besar

Warna

: putih kekuningan

Kekenyalan

: kenyal

Bau

: tercium bau formaldehid

Kepadatan

: padat keras

Bentuk

: segi empat, kecil

Warna

: putih

Kekenyalan

: kenyal

Bau

: tercium bau kedelai

Kepadatan

: padat

Bentuk

: segi empat, besar

Warna

: putih

Kekenyalan

: kenyal

Bau

: bau kedelai

Kepadatan

: agak lembek

Sampel 1. Tahu TOP

Sampel 2. Tahu JM

Sampel 3. Tahu NS

75  

Bentuk

: Segi empat, besar

Warna

: Putih agak kekuningan

Kekenyalan

: kenyal

Bau

: tercium bau formaldehid

Kepadatan

: sangat padat

Bentuk

: segi empat, besar

Warna

: putih agak kekuningan

Kekenyalan

: kurang kenyal

Bau

: tercium bau formaldehid

Kepadatan

: sangat padat

Bentuk

: segi tiga, kecil

Warna

: coklat

Kekenyalan

: kurang

Bau

: bau tengik

Kepadatan

: keras

Bentuk

: segi empat, kecil

Warna

: kuning tak merata

Kekenyalan

: agak kenyal

Bau

: tercium bau kedelai

Kepadatan

: agak lembek

Sampel 4. Tahu ARN

Sampel 5. Tahu BNS

Sampel 6. Tahu SS

Sampel 7. Tahu DS

Gambar 8. Sampel tahu pasar

76  

Lampiran 6. Pembuatan tahu simulasi

Kedelai

Setelah direndam, diblender

Diblender dengan air 2:1

Hasil blender dimasak

Disaring dengan kain putih

Hasil berupa susu kedelai

Ampas kedelai diperas

Bubuk sioko dilarutkan air Dicampur kedalam susu kedelai

77  

Proses penggumpalan

Tahu dicetak

Cetakan tahu dan kain putih

Adonan tahu dituang

Kain dilipat dalam cetakan Diberi pemberat hingga mampat

Hasil tahu buatan

Gambar 9. Gambar pembuatan tahu simulasi

78  

Lampiran 7. Proses analisis sampel

Sampel tahu dihaluskan

sampel dimasukkan labu

hasil destilat tahu

destilasi + air + as fosfat 10%

1ml destilat dalam tabung reaksi + 9 ml aquadest

setelah ditambahkan preaksi nash (contoh sampel mengandung formaldehid)

Gambar 10. Gambar proses analisis sampel tahu pasar

79  

Lampiran 8. Penetapan kadar formaldehid pada tahu pasar Ciputat Tabel 4. Hasil uji penetapan kadar formaldehid pada tahu pasar Ciputat Berat sampel Kadar Kadar Sampel Absorbansi Kadar rata-rata (gram) (ppm) (rata-rata)

Sampel 1

Sampel 2

Sampel 3

Sampel 4

Sampel 5

Sampel 6

Sampel 7

10,003

0,3146

100,7812

10,003

0,3510

112,1562

10,003

0,3175

101,6875

10,001

0,0279

11,1875

10,001

0,0274

11,0312

10,001

0,0286

11,4062

10,008

0,0000

-

10,008

0,0021

3,1250

10,008

0,0009

2,7500

10,003

0,6113

193,5000

10,003

0,5918

187,4062

10,003

0,6049

191,5000

10,006

0,6334

200,4062

10,006

0,6387

202,0625

10,006

0,6433

203,5000

10,001

0,0247

10,1875

10,001

0,0230

9,6562

10,001

0,0291

11,5625

10,004

0,0021

3,1250

10,004

0,0040

3,7187

10,004

0,0020

3,0937

104,8749

104,8749

11,2083

11,2083

-

Dianggap tidak terdeteksi

190,8021

190,8021

201,9896

201,9896

-

-

Dianggap tidak terdeteksi

Dianggap tidak terdeteksi

80  

Lampiran 9. Alat yang digunakan

Destilasi Uap

Spektrofotometer Uv-Visible

Water bath / Penangas air

Blender & Cetakkan Tahu

Alumunium Foil

Alat-alat gelas

Timbangan Analitik

Pipet Volume

Vortex

Gambar 11. Gambar alat yang digunakan dalam proses analisis sampel

81  

Lampiran 10. Uji Linearitas dan Pembuatan Kurva Kalibrasi Tabel 5. Hasil Data Uji Linearitas Larutan Standar Formaldehid Konsentrasi (µg/mL)

Absorbansi (A)

100

0,3113

150

0,4523

200

0,6354

250

0,7937

300

0,9562

Keterangan : Persamaan regresi

: Y = 0,0032 x – 0,0079

Koefisien korelasi (r) : 0,9992 Panjang gelombang

: 412,73 nm

82  

Lampiran 11. Data Penentuan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Tabel 6. Data penentuan batas deteksi, batas kuantitasi dan koefisien variasi fungsi Formaldehid Konsentrasi Absorbansi y’

y – y’

(y – y’)²

0,3113

0,3121

- 0,0008

0,00000064

150

0,4523

0,4721

- 0,0198

0,00039204

200

0,6354

0,6321

0,0033

0,00001089

250

0,7937

0,7921

0,0016

0,00000256

300

0,9562

0,9521

0,0041

0,00001681

µg/ml(ppm)

(A) / y

100

Jumlah

=

S(y/x)² =

S(y/x) = LOD =

LOQ =

= 0,00014098

= =

=

0,00042294

= 0,011875 = 11,1328 µg/ml

= 37,1094 µg/ml

83  

Lampiran 12. Data Uji Kecermatan / Perolehan Kembali (Akurasi) Tabel 7. Data uji perolehan kembali Formaldehid pada tahu simulasi C

Absorban

C diperoleh

UPK

Rata-rata

Rata-rata

(µg/ml)

(A)

(µg/ml)

(%)

UPK (%)

UPK±SD (%)

0,3876

123,59

98,87

0,3904

124,47

99,57

0,3880

123,72

98,97

0,5452

172,84

98,77

0,5443

172,56

98,61

0,5423

172,22

98,41

0,6986

220,78

98,12

0,7024

221,96

98,65

0,6999

221,18

98,3

125

175

225

99,14

98,59

98,69 ± 0,4085

98,36

X = 98,69

84  

Lampiran 13. Data Uji Keseksamaan (Presisi) Tabel 8. Data uji keseksamaan pada tiga konsentrasi Formaldehid

C (µg/mL)

125

175

225

Rata-rata UPK

(A)

C diperoleh (µg/mL)

0,3876

123,59

98,87

0,3904

124,47

99,57

0,3880

123,72

98,97

0,5452

172,84

98,77

0,5443

172,56

98,61

0,5423

172,22

98,41

0,6986

220,78

98,12

0,7024

221,96

98,65

0,6999

221,18

98,3

Absorban

(%)

UPK

(x – x)

((x – x)²)

99,14

0,45

0,2025

98,59

- 0,15

0,0225

98,36

- 0,33

0,1089

(%)

∑

SD = √ ( ∑ (x – x )2 ) = √0,3339 = √0,16695 = 0,4086 n–1 2 KV = SD x 100% = 0,4085 x 100% = 0,413922383% = 0,4139% X 98,69

0,3339