Èesky
Pall eBDS REF: 400-03E
VZORKOVÁ SADA PALL eBDS Systém k detekci bakterií pro testování produktù z trombocytù a deleukotizovan˝ch erytrocytù. K diagnostickému pouΩití in vitro. NENÍ URÈENO K TRANSFUZÍM.
Better Blood, Better Care.SM
Èesky 8. Zavìste nebo podrΩte vak s krevními komponentami nad vzorkov˝m vakem tak, aby byly plnicí pøívody vodorovné. (Poznámka: vzorkov˝ port musí smìøovat dolù.) 9. Otevøete svorku a nechte kapalinu téci, aΩ její hladina dosáhne mezi dvì rysky na vzorkovém vaku. (Vak se povaΩuje za „nedostateènì naplnìn˝“, pokud je hladina kapaliny pod první ryskou, a za „pøeplnìn˝“, je-li hladina kapaliny nad druhou ryskou.) Pøeplnìní vzorkového vaku mùΩe b˝t pøíèinou faleπnì pozitivního v˝sledku. Nedostateèné naplnìní mùΩe b˝t pøíèinou faleπnì negativního v˝sledku. 10. Zasvorkujte hadièku. 11. Utìsnìte hadièku na obou stranách zpìtného ventilu*. Poznámka: Na vaku s krevními komponentami musí zùstat 10-15 cm hadièky. Poznámka: Testujete-li trombocyty v pomocném roztoku PAS nebo erytrocytární komponenty, zadejte do pole Pall Data identifikátor (ID) dárcovského odbìru, kód produktu a èíslo πarΩe vaku eBDS. 12. Odpojte zpìtn˝ ventil ze vzorkového vaku a vaku s krevními komponentami a zlikvidujte jej*. Poznámka: Krevní komponenty v hadièce lze opìt pouΩít stáhnutím obsahu hadièky zpìt do vaku s krevními komponentami. 13. Umístìte vzorkov˝ vak na horizontální agitátor do inkubátoru pøi teplotì 35 °C. Pøísluπnou dobu skladování vzorku a intervaly inkubace naleznete v níΩe uvedené tabulce. Vzorkov˝ vak poloΩte tak, aby se pohyb provádìl podél delπí osy vzorkového vaku. Zkontrolujte, zda je vytiπtìn˝ πtítek orientován nahoru. 14. Vak s krevními komponentami vra∫te do skladovacího prostoru. 15. Zmìøte procento kyslíku v prostoru nad vzorkem ve vzorkovém vaku v prùbìhu intervalu inkubace pøi teplotì 35 °C (viz tabulka níΩe).
VZORKOVÁ SADA PALL eBDS Systém k detekci bakterií pro testování produktù z trombocytù a deleukotizovan˝ch erytrocytù K diagnostickému pouΩití in vitro NENÍ URÈENO K TRANSFUZÍM (Objednací èíslo: 400-03E) URÈENÉ POU≥ITÍ Vzorková sada Pall eBDS je urèena k pouΩití s kyslíkov˝m analyzátorem Pall eBDS v kvalitativních postupech izolace a detekce aerobních a fakultativnì anaerobních mikroorganismù (bakterií) pøi zkouπkách kontroly kvality trombocytov˝ch produktù z aferézy a z plné krve v plazmì nebo v pomocném roztoku PAS (Platelet Additive Solution) a deleukotizovan˝ch erytrocytárních komponent. Sterilní systém k pøenosu kapalin. Sterilizováno gama záøením. SOUHRN A VYSVÌTLENÍ Vzorková sada Pall eBDS se pouΩívá ke zjiπtìní pøítomnosti bakterií v normálnì sterilních produktech z deleukotizovan˝ch a nedeleukotizovan˝ch trombocytù a z deleukotizovan˝ch erytrocytù. Stanovení obsahu bakterií v produktech z trombocytù obecnì zahrnovalo klasické mikrobiologické metody. Zkoumalo se vyuΩití markerù rùstu bakterií, jako je pH a koncentrace glukózy; tyto metody ale nebyly dostateènì citlivé a specifické.1,2,3,4 Vzorková sada eBDS pouΩívá jako marker bakteriálního rùstu koncentraci kyslíku. Pøi pouΩití se sterilním pøipojovacím zaøízením je vzorková sada eBDS funkènì uzavøen˝m systémem pro zpracování vzorkù a nevyΩaduje Ωádné dalπí reagencie. Systém vyΩaduje pouΩití kyslíkového analyzátoru Pall eBDS ke zmìøení procenta kyslíku ve vzorkovém vaku po inkubaci vzorku krevních komponent pøi teplotì 35 °C ve vzorkovém vaku. PRINCIP ZKOUˇKY Metoda detekce je zaloΩena na mìøení obsahu kyslíku ve vzduchu uvnitø vzorkového vaku jako markeru bateriálního rùstu. Systém Pall eBDS pouΩívá k mìøení procentuálního obsahu kyslíku v prostoru nad vzorkem ve vzorkovém vaku kyslíkov˝ analyzátor Pall eBDS. Jsou-li v odebraném vzorku krevních komponent pøítomny bakterie, pak jejich metabolická èinnost spotøebovává vzrùstající mnoΩství kyslíku pøi proliferaci bakterií do vzorku bìhem inkubace, coΩ zpùsobuje mìøiteln˝ pokles obsahu kyslíku ve vzorku i ve vzorkovém vaku. REAGENCIE Dvì tablety, z nichΩ kaΩdá obsahuje 1,75 mg polyanetholsulfonanu sodného (SPS), tryptikázov˝ sójov˝ bujón, chlorid vápenat˝ a zpracující èinidla, jsou uloΩeny ve vzorkovém vaku. Postup testu neobsahuje Ωádné kroky rekonstituce, míchání ani rozpouπtìní. SKLADOVACÍ PODMÍNKY Maximální skladovací teplota je 40 °C. Nezmrazujte. NepouΩívejte, je-li obal poπkozen nebo pokud je uvolnìn èi odstranìn ochrann˝ kryt ukonèení. NepouΩívejte, pokud je vzorková sada eBDS viditelnì poπkozená nebo pokud vak neobsahuje dvì tablety. NepouΩívejte po uplynutí data exspirace. Obsah kusového balení je nutno pouΩít do 14 dnù po otevøení. UPOZORNÌNÍ K diagnostickému pouΩití in vitro. NENÍ URÈENO K TRANSFUZÍM. INSTRUKCE K POU≥ITÍ Potøebn˝ materiál, kter˝ není souèástí dodávky: 35 °C inkubátor s ploch˝m agitátorem trombocytù Zaøízení pro sterilní propojení a plotny Sváøeèka na hadièky Kleπtì na stahování obsahu hadièek Svorka nebo hemostat Odbìr a pøíprava vzorku Pozná mka: Pokud odebíráte vzorky trombocytù do pomocného roztoku PAS nebo vzorky erytrocytárních komponent, zkontrolujte, zda je pouΩita správná konfigurace Pall Data a kyslíkového analyzátoru Pall eBDS. 1. Optimální detekce bakterií v trombocytárních produktech bude dosaΩeno, pokud se vzorek testuje po 24 hodinách po odbìru nebo pozdìji. Optimální detekce bakterií v erytrocytárních komponentách bude dosaΩeno, pokud se vzorek testuje po 24 hodinách po odbìru nebo pozdìji. Pokud se provede test døíve neΩ po v˝πe uvedeném intervalu, pak velmi pomalu rostoucí organismy nemusí mít dostatek èasu k proliferaci na úroveò pøekraèující detekèní limit. 2. V pøísluπné dobì po odbìru vyjmìte krevní komponenty ze skladovacího prostoru a pøipravte vzorek podle níΩe uvedeného postupu. 3. Pøipevnìte hadièku vzorkové sady pod zpìtn˝ ventil. 4. Trombocytové komponenty: Produkt z trombocytù jemnì promíchejte a stáhnìte obsah hadièky vaku s trombocyty. Erytrocytární komponenty: Desetkrát promíchejte pøeklopením, stáhnìte obsah hadièky, aby bylo moΩno provést sterilní pøipojení ke vzorkové sadì eBDS. Zajistìte úplné naplnìní hadièky dobøe promíchan˝m reprezentativním vzorkem 5. Vak s krevními komponentami sterilním zpùsobem pøipojte ke vzorkové sadì eBDS podle instrukcí v˝robce. Pøipojení maximální délky hadièky vzorkové sady k vaku s krevními komponentami docílíte, pokud umístíte zátku hadièky vzorkové sady na konec záøezu ve sterilním propojovacím zaøízení. 6. Je-li tøeba, na πtítek vzorkového vaku pøilepte nálepku s èíslem jednotky. 7. Vak s krevními komponentami jemnì promíchejte.
Inkubaèní doba vaku eBDS pøi 35 ºC
Komponenta
Minimální prodleva pøed testem eBDS a podmínky k dosaΩení optimální citlivosti
Trombocyty v plazmì
24 hodin pøi 22 ºC ±2 ºC
18-30 hodin
Trombocyty v PAS
24 hodin pøi 22 ºC ±2 ºC
24-48 hodin
Erytrocyty
24 hodin pøi 4 ºC ±2 ºC
48-72 hodin
Postup testu (za pouΩití kyslíkového analyzátoru Pall eBDS) 16. Zkontrolujte, zda je kyslíkov˝ analyzátor eBDS pøipraven k mìøení vzorku. 17. Pomocí vzorkového stojanu orientujte mìøenou stranu svisle. VloΩte sondu kyslíkového analyzátoru pøes septum na vzorkovací stranì a pøes ochrannou membránu do prostoru nad vzorkem ve vzorkovém vaku. Poznámky: • Nemaèkejte vzorkov˝ vak pøi vkládání sondy; pùsobení tlaku by mohlo aktivovat alarm kyslíkového analyzátoru. • Nevkládejte sondu do kapaliny ve vzorkovém vaku. • K èiπtìní místa odbìru vzorku nepouΩívejte alkohol. Alkohol mùΩe ovlivòovat anal˝zu obsahu kyslíku. 18. Zmìøte procentuální obsah kyslíku tak, Ωe nasajete vzduch z prostoru nad vzorkem ve vzorkovém vaku podle instrukcí k pouΩití analyzátoru. (Viz „Postup testování vzorku“ v návodu k pouΩití kyslíkového analyzátoru Pall eBDS.) 19. Zobrazí-li se nápis „Pass“, test nezjistil bakteriální kontaminaci a indikuje, Ωe vzorek je NEGATIVNÍ v dobì mìøení kyslíku. Zaznamenejte v˝sledek a zlikvidujte vzorkov˝ vak eBDS.* 20. Blikající „FAIL“ znamená, Ωe procento kyslíku nedosahuje pøijatelného limitu. 21. Pokud se objeví blikající „FAIL“, je vzorek pravdìpodobnì kontaminován bakteriemi a doporuèuje se, aby se jednotka s krevními komponentami po potvrzující kultivaci zlikvidovala*. 22. Pokud se zobrazí v˝straΩné hláπení, postupujte podle instrukcí uveden˝ch na displeji kyslíkového analyzátoru Pall eBDS a proveïte opakovan˝ test. U jednoho vzorkového vaku eBDS je moΩno provést pouze jeden opakovan˝ test procenta kyslíku. Je-li zapotøebí provést opakovan˝ test, vra∫te se ke kroku 16. 23. Je-li nutn˝ dalπí test jednotky krevních komponent, pøipojte novou vzorkovou sadu eBDS a postupujte podle kroku 2 v˝πe. INTERPRETACE V˙SLEDKÙ Pozitivní nebo negativní v˝sledky jsou urèeny podle softwaru kyslíkového analyzátoru Pall eBDS. Pozitivní v˝sledky indikující moΩnou bakteriální kontaminaci jsou zobrazeny jako „FAIL“. Negativní v˝sledky jsou zobrazeny jako „Pass“. Pokud se zobrazí chybové hláπení, které není vyøeπeno, nebo pokud lze z nìjakého dùvodu pochybovat o moΩnosti obdrΩení správné indikace „Pass“ nebo „Fail“, test je nutno povaΩovat za neplatn˝. OÈEKÁVANÉ HODNOTY Oèekává se, Ωe >99 % vπech testovan˝ch produktù nebude obsahovat Ωádné bakterie a v tom pøípadì bude koncentrace kyslíku pøijatelná, coΩ bude indikováno hláπením „Pass“ zobrazen˝m v dobì mìøení kyslíku. Jednotky s koncentrací kyslíku pod limitem pøijatelnosti budou vykazovat pozitivní v˝sledek se zobrazen˝ch hláπením „FAIL“. V˙KONNOSTNÍ CHARAKTERISTIKY Pøi pouΩití s kyslíkov˝m analyzátorem Pall eBDS umoΩòuje vzorková sada Pall eBDS izolaci a detekci aerobních a fakultativnì anaerobních bakterií v trombocytech a deleukotizovan˝ch komponentách erytrocytù. Trombocyty Vyhodnocení vzorkové sady Pall eBDS zahrnovalo testování jednotek
1
Èesky deleukotizovan˝ch a nedeleukotizovan˝ch trombocytù naoèkovan˝ch jedním z 10 druhù bakterií, o nichΩ je známo, Ωe byly pøíèinou 98 % úmrtí v dùsledku bakteriální kontaminace trombocytov˝ch koncentrátù v období mezi rokem 1976 a 19885. Souhrnnì tyto studie ukázaly, Ωe bylo dosaΩeno 100% detekce testováním 280 jednotek deleukotizovan˝ch trombocytù kontaminovan˝ch bakteriemi s nízkou biologickou zátìΩí, pøi odbìru pro test Pall eBDS po 24 hodinách skladování. Tyto studie také ukázaly, Ωe bylo dosaΩeno 100% detekce testováním 189 jednotek nedeleukotizovan˝ch trombocytù kontaminovan˝ch bakteriemi s nízkou biologickou zátìΩí, pøi odbìru pro test Pall eBDS po 24 hodinách skladování. Struèn˝ popis vyhodnocujících studií je následující: Trombocytov˝ koncentrát z deleukotizované aferézy nebo z plné krve náhodn˝ch dárcù byl naoèkován cílovou dávkou 1-15 CFU/ml kaΩdého z deseti mikroorganizmù, o nichΩ je známo, Ωe se podílí na infekcích pøenáπen˝ch transfúzemi (viz Tabulka 1 níΩe). OkamΩitì po smíchání byl odebrán vzorek ke stanovení obsahu bakterií v trombocytovém koncentrátu (Tabulka 1). Po 24 hodinách skladování naoèkovaného trombocytového koncentrátu byl odebrán dalπí vzorek k urèení rùstu po 24 hodinách (Tabulka 1) a alikvotní díl vzorku byl uloΩen do vzorkového vaku eBDS, kter˝ pak byl inkubován 24 hodin pøi teplotì 35 °C s agitací na horizontální tøepaèce. Studie se zúèastnila ètyøi zkuπební pracoviπtì, pøièemΩ na dvou z nich byly testovány trombocyty z aferéz a na dvou pracoviπtích byly testovány trombocyty z plné krve. KaΩdé pracoviπtì provedlo nejménì 5 opakovan˝ch zkouπek pro kaΩd˝ z deseti mikroorganismù. Pro PAS byly na tøech dalπích zkuπebních pracoviπtích provedeny studie na trombocytech z aferéz a z buffy coatu, uloΩen˝ch v PAS. Trombocytov˝ koncentrát z nedeleukotizované plné krve byl naoèkován cílovou dávkou 1-15 CFU/ml kaΩdého z deseti mikroorganizmù, o nichΩ je známo, Ωe se podílí na infekcích pøenáπen˝ch transfúzemi trombocytù (viz Tabulka 1). Po 24 hodinách skladování naoèkovaného trombocytového koncentrátu byl odebrán vzorek k urèení rùstu po 24 hodinách (Tabulka 1) a alikvotní díl vzorku byl uloΩen do vzorkového vaku eBDS, kter˝ pak byl inkubován 24 aΩ 30 hodin pøi teplotì 35 °C s agitací na horizontální tøepaèce. Studie se zúèastnila tøi zkuπební pracoviπtì, pøièemΩ na dvou z nich byly testovány vzorky s CP2D a na jednom pracoviπti byly testovány vzorky s CPD. KaΩdé pracoviπtì provedlo nejménì 5 opakovan˝ch zkouπek pro kaΩd˝ z deseti mikroorganismù. Dále byly 24 hodin po naoèkování do vzorkového vaku Pall eBDS odebrány alikvotní díly deleukotizovaného a nedeleukotizovaného trombocytového koncentrátu, které pak byly inkubovány 18 hodin pøi teplotì 35 °C s agitací na horizontální tøepaèce (Tabulka 2). V souhrnu tyto studie ukázaly, Ωe pøi testování 247 deleukotizovan˝ch jednotek trombocytù bylo dosaΩeno 99,2% detekce a pøi testování 198 nedeleukotizovan˝ch jednotek trombocytù bylo dosaΩeno 96% detekce, v obou pøípadech pøi libovolné kontaminaci jednotek bakteriemi s nízkou biologickou zátìΩí a pøi odbìru vzorku pro test Pall eBDS po 24 hodinách skladování, po nìmΩ následovala 18hodinová inkubace. Navíc byly v pìti opakovan˝ch studiích vπech deseti mikroorganizmù odebírány vzorky po 30hodinové inkubaci (doplòující 24-hodinovou inkubaci) pøi 35°C pøed testováním procentuálního obsahu kyslíku. Nakonec bylo také odebráno celkem 226 nenaoèkovan˝ch standardních vzorkù trombocytového koncentrátu (24 z aferézy a 202 jednotek trombocytù náhodn˝ch dárcù) a testováno za pouΩití sady Pall eBDS. Jak ukazují tabulky 1 a 2, umoΩnila sada Pall eBDS detekci aerobních a fakultativnì anaerobních bakterií z produktù z trombocytù s koncentracemi bakterií 1-15 CFU/ml a vyππími. U 10 z 914 kontaminovan˝ch jednotek trombocytù, které byly hodnoceny sadou Pall eBDS, doπlo k selhání detekce (Tabulka 2 po 18hodinové inkubaci). 2 deleukotizované jednotky byly naoèkovány Enterobacter cloacae a byly odebrány v èase „24“ s 18hodinovou inkubací, a 8 nedeleukotizovan˝ch jednotek (4 jednotky byly naoèkovány Staphylococcus epidermidis, 2 jednotky byly naoèkovány Klebsiella pneumoniae, 1 jednotka byla naoèkována Pseudomonas aeruginosa a 1 jednotka byla naoèkována Serratia marcescens) bylo odebráno v èase „24“ s 18hodinovou inkubací. Nicménì u vπech tìchto deseti pøípadù byla kontaminace zjiπtìna testováním v èase „24“ po 24 hodinové inkubaci (Tabulka 1). TudíΩ 100% detekce bylo dosaΩeno po odbìru vzorkù trombocytù jak z aferézy, tak z plné krve, po 24 hodinách po naoèkování, po nichΩ následovala 24hodinová inkubace vπech testovan˝ch vzorkù. Podobnì bylo 100% detekce dosaΩeno po 30 hodinách inkubace. ≥ádná z 372 nenaoèkovan˝ch kontrolních jednotek nebyla pozitivní pøi testu pomocí sady Pall eBDS. Erytrocyty Vyhodnocení vzorkové sady Pall eBDS zahrnovalo testování jednotek deleukotizovan˝ch erytrocytù naoèkovan˝ch 12 druhy bakterií, o nichΩ je známo, Ωe byly pøíèinou 88 % úmrtí v dùsledku bakteriální kontaminace erytrocytárních komponent v období mezi rokem 1976 a 1998.6 Struèn˝ popis vyhodnocujících studií je následující: Deleukotizované erytrocyty v CPD/SAGM nebo CP2D/AS-3 byly naoèkovány cílovou dávkou 1-15 CFU/ml kaΩdého z dvanácti mikroorganizmù, o nichΩ je známo, Ωe se podílí na infekcích pøenáπen˝ch transfuzemi (viz Tabulka 3 níΩe). OkamΩitì po smíchání byl odebrán vzorek ke stanovení obsahu bakterií v jednotce erytrocytù (Tabulka 3). Po 24 hodinách skladování jednotky erytrocytù byl odebrán dalπí vzorek k urèení rùstu po 24 hodinách (Tabulka 4) a alikvotní díl vzorku byl uloΩen do vzorkového vaku eBDS, kter˝ pak byl inkubován 48 hodin pøi teplotì 35°C s agitací na horizontální tøepaèce. Vzorky k urèení rùstu byly také odebrány po 7 dnech, po 21 dnech a po 35 dnech (platí pro komponenty z erytrocytù v CPD/SAGM) nebo po 42 dnech (platí pro komponenty z erytrocytù v CP2D/AS-3) (Tabulka 5, 6 a 7). Studie se zúèastnila tøi zkuπební pracoviπtì. KaΩdé pracoviπtì provedlo nejménì 5 opakovan˝ch zkouπek pro kaΩd˝ z dvanácti mikroorganismù. Bylo také odebráno 633 nenaoèkovan˝ch standardních vzorkù jednotek erytrocytù a testováno za pouΩití sady Pall eBDS. Jak ukazuje Tabulka 3 aΩ Tabulka 7, umoΩnila sada Pall eBDS detekci aerobních a fakultativnì anaerobních bakterií z deleukotizovan˝ch erytrocytárních komponent s koncentracemi bakterií 1-15 CFU/ml a vyππími. 100% detekce bylo dosaΩeno po odbìru vzorkù po 0 h, 24 h, 7 dnech, 21 dnech a 35 nebo 42 dnech po naoèkování, po nichΩ následovala 48-hodinová inkubace vπech testovan˝ch vzorkù. ≥ádná z 633 nenaoèkovan˝ch jednotek nebyla pozitivní pøi testu pomocí sady Pall eBDS.
UPOZORNÌNÍ A OMEZENÍ POSTUPU 1. Vzorková sada Pall eBDS je urèena k detekci bakteriální kontaminace trombocytù a deleukotizovan˝ch komponent erytrocytù. UΩivatelé si musí b˝t vìdomi toho, Ωe nìkteré bakterie rostou velmi pomalu7, a pokud je poèáteèní hladina kontaminace takov˝ch bakterií velmi nízká, pak alikvotní díl odebran˝ k testování pomocí eBDS nemusí obsahovat Ωádnou bakterii. V tìchto pøípadech nebudou bakterie zjiπtìny a bude indikován negativní v˝sledek („Pass“). Pøi delπím období skladování krevních komponent pøed odebráním vzorku se pravdìpodobnì zv˝πí schopnost detekce tìchto pomalu rostoucích mikroorganizmù. 2. Testy vzorkové sady eBDS byly provedeny pomocí trombocytov˝ch produktù CP2D a ACD-A. Byly provedeny studie PAS za pouΩití 20-30% plazmy CPD a 70-80% PASII (T-Sol). Studie erytrocytù byly provedeny za pouΩití standardních komponent CPD/SAGM nebo CP2D/AS-3. 3. Toto zaøízení bylo testováno za pouΩití níΩe uveden˝ch bakterií. Bakterie, jejichΩ rùst v krevní komponentì nebo ve vzorkovém vaku není dostateèn˝ nebo které nespotøebovávají mnoΩství kyslíku postaèující k urèení pozitivity, nebyly zjiπ∫ovány. 4. Pokud je bìhem doby inkubace pøeruπeno protøepávání, mohou se objevit faleπnì negativní v˝sledky. 5. Údaje o citlivosti a specificitì jsou odvozeny ze studií ve vlastních laboratoøích firmy i v terénu za pouΩití trombocytov˝ch koncentrátù z aferéz a od náhodn˝ch dárcù, které byly úmyslnì kontaminovány nízk˝mi koncentracemi bakterií (cílová dávka 1-15 CFU/ml) a z nichΩ byly odebrány vzorky buï okamΩitì, nebo byly skladovány po dobu 24 hodin a pak z nich byly odebrány vzorky pro testy pomocí vzorkové sady eBDS, a u nichΩ byl následnì stanoven procentuální obsah kyslíku po 24 aΩ 30 hodinách inkubace pøi 35 °C. Podobné studie byly vyhodnoceny pro komponenty z erytrocytù, které byly skladovány po dobu 24 hodin a pak z nich byly odebrány vzorky pomocí vzorkové soupravy eBDS, a u nichΩ byl následnì stanoven procentuální obsah kyslíku po 48 aΩ 72 hodinách inkubace pøi 35 ºC. ProdlouΩená doba skladování pøed odebráním vzorku mùΩe zv˝πit citlivost. V podmínkách skuteèného pouΩití mohou b˝t pozorovány odchylky od tìchto statistick˝ch hodnot. POZNÁMKA: Pokud nejsou tablety rozpuπtìny v kapalinì, mohou se objevit faleπnì pozitivní v˝sledky. 6. Negativní v˝sledek („Pass“) nesmí b˝t interpretován tak, Ωe testovaná krevní komponenta je sterilní. Negativní v˝sledek mùΩe b˝t zpùsoben faktory souvisejícími s procesem, jako je nesprávné odebrání vzorku pro sadu eBDS nebo nedostatek mikroorganizmù v alikvotním dílu odebraném do vzorkového vaku. 7. Pøeplnìní vzorkového vaku mùΩe b˝t pøíèinou faleπnì pozitivního v˝sledku. Nedostateèné naplnìní mùΩe b˝t pøíèinou faleπnì negativního v˝sledku. [Vzorkov˝ vak je povaΩován za „pøeplnìn˝“, je-li naplnìn kapalinou do úrovnì pøevyπující druhou rysku (linku). Vzorkov˝ vak je povaΩován za „nedostateènì naplnìn˝“, je-li naplnìn kapalinou do úrovnì nedosahující první rysky.] 8. Nedeleukotizované erytrocyty nebo trombocyty s neobvykle vysok˝m poètem trombocytù (>3,0 x 109 v ml) mohou vykazovat faleπnì pozitivní v˝sledky. 9. Alkohol mùΩe ovlivòovat anal˝zu kyslíku a nesmí se pouΩívat k èiπtìní místa odbìru pøed vloΩením sondy kyslíkového analyzátoru. 10. PouΩijte sváøeèku na sterilní spojování hadièek podle instrukcí v˝robce. Zachování uzavøeného systému vyΩaduje v˝hradnì pouΩití hadièek kompatibilních se sváøeèkami pro sterilní spojování. Rozmìry a sloΩení hadièky pro vzorkovou sadu eBDS splòují poΩadavky pro pouΩití se sváøeèkami pro sterilní spojování hadièek a je moΩno je pouΩívat v˝hradnì s produkty s potvrzenou kompatibilitou. * Bìhem zpracování vΩdy respektujte následující upozornìní: 1. Svaøení je nutno provést zpùsobem vyluèujícím rozstøíknutí kapaliny. 2. Produkty zneèiπtìné krví vΩdy likvidujte podle pøedpisù pro nakládání s BIOLOGICKY NEBEZPEÈN˙MI materiály. REFERENCE 1. Mitchell KT a Brecher ME: Approaches to the detection of bacterial contamination in cellular blood products. Transfusion Medicine Reviews 1999;13:132-144. 2. Wagner SJ, Robinette D: Evaluation of swirling, pH, and glucose tests for the detection of bacterial contamination in platelet concentrates. Transfusion 1996;36:989-993. 3. Brecher ME, Boothe G, Kerr A: The use of chemiluminescence-linked universal bacterial ribosomal RNA gene probe and blood gas analysis for the rapid detection of bacterial contamination in white cell-reduced and non reduced platelets. Transfusion 1993;33:450-457. 4. Burstain JM, Brecher ME, Workman, et al: Rapid identification of bacterially contaminated platelets using reagent strips: glucose and pH analysis as markers of bacterial metabolism. Transfusion 1997;37:255-258. 5. Brecher ME: Bacterial contamination of blood products. Simon T, Dzik WH, Snyder E, Stowell CP and Strauss RG. Principles of Transfusion Medicine, 3rd edition. Lippincott Williams & Wilkins; 2002; 789-801. 6. Brecher ME, Hay S. Bacterial contamination of blood components. Clinical Microbiology Reviews 2005; Jan. 18(1):195-204. 7. Brecher ME, et al., Growth of bacteria in inoculated platelets: implications for bacteria detection and the extension of platelet storage. Transfusion 2000;40:1308-1312. a Pall jsou registrované ochranné známky spoleènosti Pall Corporation. Better Blood, Better Care. je servisní znaèka spoleènosti Pall Corporation. 147400034Z, vydáno v únoru 2007.
2
Èesky
HODNOTY TROMBOCYTÙ Tabulka 1 ukazuje koncentrace bakterií v produktech z trombocytù v dobì naoèkování a po 24hodinovém uskladnìní, kdy byly odebrány vzorky do vzorkové sady Pall eBDS s 24 aΩ 30hodinovou dobou inkubace, a v˝slednou èetnost detekce (v datech pro plazmu jsou zahrnuty v˝sledky produktù z deleukotizovan˝ch i nedeleukotizovan˝ch trombocytù) .
Tabulka 1
Medián Medián koncentrace koncentrace naoèkované naoèkované bakterie bakterie (rozsah) CFU/ml (rozsah) Plazma CFU/ml PAS S. epidermidis
Detekce s odbìrem vzorku po 24 hodinách Hladina bakterií pøi odbìru vzorku po 24 hodinách uskladnìní Detekované (doba odbìru vzorku = 24 hodin; doba inkubace 24-30 hodin) pøípady Detekované z poètu pøípady testovan˝ch ≤5 z poètu 6-15 16-50 > 51 ≤5 6-15 16-50 > 51 pøípadù CFU/ml CFU/ml CFU/ml CFU/ml CFU/ml CFU/ml CFU/ml CFU/ml testovan˝ch Plazma Plazma pøípadù PAS PAS PAS PAS PAS Plazma Plazma Plazma
7 (2-52)
4 (1-10)
7
15
19
7
16
2
3
2
45 z 45
26 z 26
5 (2-20)
10 (1-17)
3
6
11
2
17
8
14
10
45 z 45
26 z 26
8 (2-51)
8 (3-25)
2
8
39
24
47 z 47
26 z 26
9 (1-15)
8 (3-17)
1
1
1
8
32
24
41 z 41
26 z 26
8 (1-55)
10 (2-34)
11
2
3
8
6 (2-15)
6 (1-20)
5
2
ATCC 49134
S. agalactiae ATCC 12927
S. aureus ATCC 27217
P. aeruginosa ATCC 27853
S. choleraesuis
17
9
38 z 38
19 z 19
37
20
44 z 44
20 z 20
11
16
19
46 z 46
20 z 20
2
41
20
51 z 51
20 z 20
14
17
50 z 50
20 z 20
51
20
62 z 62
20 z 20
264
165
469 z 469 (100 %)
223 z 223 (100 %)
7
ATCC 8326
E. coli ATCC 25922
E. cloacae
8 (2-13)
13 (5-32)
14
5
13 (3-27)
3 (1-7)
5
3
5 (1-17)
5 (1-14)
21
11
9 (1-16)
9 (1-18)
7
1
1
ATCC 29005
B. cereus ATCC 7064
K. pneumoniae
1
2
4
ATCC 8045
S. marcescens
3
ATCC 43862
CELKEM:
73
22
17
55
19
77
Tabulka 2 ukazuje koncentrace bakterií v produktech z trombocytù po 24hodinovém uskladnìní, kdy byly odebrány vzorky do vzorkové sady Pall eBDS s 18hodinovou dobou inkubace a v˝slednou èetnost detekce (v˝sledky produktù z deleukotizovan˝ch i nedeleukotizovan˝ch trombocytù).
Tabulka 2
≤5 CFU/ml Plazma
6 - 15 CFU/ml Plazma
16 - 50 CFU/ml Plazma
> 51 CFU/ml Plazma
Detekce s odbìrem vzorku po 24 hodinách Zjiπtìné pøípady z poètu testovan˝ch pøípadù Plazma
15
12
10
7
44 z 48
16
4
12
6
38 z 38
3
2
6
28
39 z 39
3
35
38 z 39
Hladina bakterií pøi odbìru vzorku po 24 hodinách uskladnìní (doba odbìru vzorku = 24 hodin, inkubace 18 hodin)
S. epidermidis ATCC 49134
S. agalactiae ATCC 12927
S. aureus ATCC 27217
P. aeruginosa ATCC 27853
S. choleraesuis
10
7
8
2
16
5
5
4
16
8
7
1
96
45
16
5
38 z 38
28
38 z 38
ATCC 8326
E. coli ATCC 25922
E. cloacae
8
43 z 45
35
44 z 44
6
7
37 z 39
3
49
60 z 61
70
208
419 z 429 (97,7 %)
14
ATCC 29005
B. cereus ATCC 7064
K. pneumoniae ATCC 8045
S. marcescens ATCC 43862
CELKEM:
3
Èesky
DATA ERYTROCYTÁRNÍCH KOMPONENT Tabulka 3 ukazuje koncentrace bakterií v deleukotizovan˝ch erytrocytárních komponentách a detekci s odbìrem vzorku z jednotek okamΩitì po naoèkování (doba odbìru vzorku = 0 h).
Tabulka 3 Koncentrace bakterií v deleukotizovan˝ch erytrocytárních komponentách odvozen˝ch z plné krve (ihned po naoèkování a promíchání vzorkù) (doba odebrání vzorku = 0 h)
Detekce pøi odebrání vzorku po 0 h Poèet detekcí pøi rùzn˝ch úrovních CFU/ml Bakterie
< 5 CFU/ml
K. pneumoniae
6-15 CFU/ml
16-50 CFU/ml
> 51 CFU/ml
Celkovì detekovan˝ch pøípadù
4
11
3
18 z 18
6
1
10
5
ATCC 8045
S. liquefaciens
8
15 z 15
ATCC#35551
P. aeruginosa
3
18 z 18
3
6z6
3
18 z 18
ATCC#278530
P. putida
3
ATCC#492819128
P. fluorescens
8
5
2
5
3
2
11
4
7
3
3
22 z 22
7
3
13 z 13
ATCC#17569
E. amnigenes
10 z 10
ATCC#33731
E. coli
15 z 15
ATCC 25922
Y. enterocolitica
9
ATCC#27729
B. cereus
3
ATCC 7064
L. monocytogenes
10
10 z 10
ATCC#19115
S. aureus
1
8
2
8
33
68
1
10 z 10
ATCC 27217
S. epidermidis
3
13 z 13
21
168 ze 168 (100%)
ATCC 49134
CELKEM:
46
Tabulka 4 ukazuje koncentrace bakterií v deleukotizovan˝ch erytrocytárních komponentách a detekci po 24hodinovém uskladnìní, kdy byly odebrány vzorky do vzorkové sady Pall eBDS (doba odebrání vzorku = 24 hodin), a v˝slednou èetnost detekce.
Tabulka 4 Koncentrace bakterií v deleukotizovan˝ch erytrocytárních komponentách odvozen˝ch z plné krve (po 24hodinovém uskladnìní) (doba odebrání vzorku = 24 h)
Detekce pøi odebrání vzorku po 24 h Poèet detekcí pøi rùzn˝ch úrovních CFU/ml Bakterie
< 5 CFU/ml
6-15 CFU/ml
16-50 CFU/ml
> 51 CFU/ml
K. pneumoniae
2
4
9
3
S. liquefaciens
9
5
1
P. aeruginosa
1
9
6
P. putida
1
2
P. fluorescens
2
7
2
E. amnigenes
6
1
2
8
7
1
2
5
4
3
5
1
6
E. coli Y. enterocolitica
9
B. cereus L. monocytogenes
3
S. aureus
Celkovì detekovan˝ch pøípadù 18 z 18 15 z 15
2
18 z 18
3
6z6
3
14 ze 14 9z9 15 z 15 17 ze 17 12 z 12 10 z 10
9
1
S. epidermidis
4
5
1
3
13 z 13
CELKEM:
37
56
40
24
157 ze 157 (100%)
4
10 z 10
Èesky
DATA ERYTROCYTÁRNÍCH KOMPONENT pokraèování Tabulka 5 ukazuje koncentrace bakterií v deleukotizovan˝ch erytrocytárních komponentách a detekci po 7denním uskladnìní, kdy byly odebrány vzorky do vzorkové sady Pall eBDS (doba odebrání vzorku = 7 dní), a v˝slednou èetnost detekce.
Tabulka 5 Koncentrace bakterií v deleukotizovan˝ch erytrocytárních komponentách odvozen˝ch z plné krve (po 7denním uskladnìní) (doba odebrání vzorku = 7 dní)
Detekce s odbìrem vzorku po 7 dnech Poèet detekcí pøi rùzn˝ch úrovních CFU/ml Bakterie K. pneumoniae
< 5 CFU/ml
6-15 CFU/ml
16-50 CFU/ml
> 51 CFU/ml
12
12 z 12
S. liquefaciens P. aeruginosa P. putida
Celkovì detekovan˝ch pøípadù
6
8
2
P. fluorescens
15
15 z 15
3
17 ze 17
3
5z5
18
18 z 18
E. amnigenes
1
1
E. coli
11
4
Y. enterocolitica
3
1
1
B. cereus
4
4
3
L. monocytogenes
1
4
S. aureus
5
4
1
S. epidermidis
4
3
2
4
13 z 13
CELKEM:
43
27
16
67
153 z 153 (100 %)
1
7
10 z 10 15 z 15
12
17 ze 17 11 z 11
5
10 z 10 10 z 10
Tabulka 6 ukazuje koncentrace bakterií v deleukotizovan˝ch erytrocytárních komponentách a detekci po 21denním uskladnìní, kdy byly odebrány vzorky do vzorkové sady Pall eBDS (doba odebrání vzorku = 21 dní), a v˝slednou èetnost detekce.
Tabulka 6 Koncentrace bakterií v deleukotizovan˝ch erytrocytárních komponentách odvozen˝ch z plné krve (po 21denním uskladnìní) (doba odebrání vzorku = 21 dní)
Detekce s odbìrem vzorku po 21 dnech Poèet detekcí pøi rùzn˝ch úrovních CFU/ml > 51 CFU/ml
Celkovì detekovan˝ch pøípadù
15
15 z 15
6
1
18 z 18
2
1
6z6
P. fluorescens
18
18 z 18
E. amnigenes
10
10 z 10
15
17 ze 17
6
10 z 10
Bakterie K. pneumoniae
< 5 CFU/ml
6-15 CFU/ml
1
1
16-50 CFU/ml
2z2
S. liquefaciens P. aeruginosa
4
P. putida
3
7
E. coli
9
Y. enterocolitica
2
B. cereus
4
L. monocytogenes
3
1
S. aureus
6
4
S. epidermidis
7
CELKEM:
39
9z9
4z4
10 z 10
13
5
2
1
10 z 10
10
67
129 z 129 (100%)
Èesky
DATA ERYTROCYTÁRNÍCH KOMPONENT pokraèování Tabulka 7 ukazuje koncentrace bakterií v deleukotizovan˝ch erytrocytárních komponentách a detekci po 35denním uskladnìní (platí pro CPD/SAG-M) nebo po 42 dnech uskladnìní (platí pro CP2D/AS-3), kdy byly odebrány vzorky do vzorkové sady Pall eBDS (doba odebrání vzorku = 35 nebo 42 dní), a v˝slednou èetnost detekce.
Tabulka 7 Koncentrace bakterií v deleukotizovan˝ch erytrocytárních komponentách odvozen˝ch z plné krve po 35denním uskladnìní (platí pro CPD/SAG-M) nebo po 42denním uskladnìní (platí pro CP2D/AS-3) (doba odebrání vzorku = 35 nebo 42 dní)
Detekce s odbìrem vzorku po 35 nebo 42 dnech Poèet detekcí pøi rùzn˝ch úrovních CFU/ml Bakterie
< 5 CFU/ml
6-15 CFU/ml
16-50 CFU/ml
> 51 CFU/ml
K. pneumoniae
0z0
S. liquefaciens P. aeruginosa
10
P. putida
2
3
3 2
P. fluorescens E. amnigenes E. coli
Celkovì detekovan˝ch pøípadù
10
10 z 10
2
18 z 18
1
5z5
13
13 z 13
10
10 z 10
4
4z4
Y. enterocolitica
12
B. cereus
2
L. monocytogenes
1
S. aureus
9
S. epidermidis
8
CELKEM:
36
12 z 12 2z2
2
7
10 z 10 9z9
3 3
10
6
11 z 11 55
104 z 104 (100%)
Aktuální revize návodu k pouΩití tohoto v˝robku je: P/N pøíbalové informace: 147400034Z Datum poslední aktualizace: únor 2007 Kopii návodu k pouΩití ve preferovaném jazyce mùΩete získat kter˝mkoli z následujících zpùsobù: StaΩením návodu k pouΩití z: www.pall.com/eBDS_EU E-mailem: z
[email protected] obdrΩíte verzi ve formátu pdf. Telefonicky: na èísle 00 800 3876 7255 si vyΩádejte v˝tisk nebo verzi na CD-ROM. Kopie lze také vyΩádat u nejbliΩπího zástupce firmy Pall.
MANUFACTURER Pall Medical, a division of Pall Europe Ltd., Europa House, Havant Street, Portsmouth, PO1 3PD, England +44 (0)23 9230 3452 phone +44 (0)23 9230 3324 fax INTERNATIONAL OFFICES Pall France S.A., 3 Rue des Gaudines, BP 5253, 78175 St-Germain-en-Laye, Cedex, France Pall GmbH, Philipp-Reis-Straße 6, D-63303 Dreieich, Deutschland Pall Schweiz AG, Schäferweg 16, CH-4057 Basel, Schweiz
Pall Austria Filter Ges. m. b. H., Thaliastraße 85, A-1160 Wien, Österreich Pall Italia s.r.l., Via Emilia, 26, 20090 Buccinasco (MI), Italia Pall España s.a., c/ Isla de Córcega, 2, 28100 Alcobendas, Madrid, España CORPORATE HEADQUARTERS Pall Corporation, 2200 Northern Boulevard, East Hills, NY 11548, USA Navπtivte nás na www.pall.com 147400034Z, vydáno v únoru 2007.
