Moderní technologie ve studiu aplikované fyziky reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/07.0018.
Laserový rastrovací konfokální mikroskop LEXT OLS 3100
Hana Šebestová
Společ Společná laboratoř laboratoř optiky Univerzity Palacké Palackého a Fyziká Fyzikální lního ústavu Akademie vě věd České eské republiky 17. listopadu 50a, 772 07 Olomouc, hana.sebestova @upol. hana.sebestova@ upol.cz
Obsah 1. Laserová rastrovací konfokální mikroskopie 2. LEXT OLS 3100 3. Možné využití 4. Pořízení obrazu 5. Zobrazení 6. Filtrace 7. Analýza 8. Ukázky měření 9. Přednosti laserové rastrovací konfokální mikroskopie 10. Možná rozšíření LEXT OLS3100
2
1. Laserová rastrovací konfokální mikroskopie
první konfokální rastrovací mikroskop - Marvin Minsky, 1957 LCSM běžně - konec 80. let 20. stol. – zdroj světla - laser
úzký laserový paprsek se přes objektiv s velkou aperturou zaměří na preparát
obraz se nevytváří najednou, ale bod po bodu - osvětlen je jen jeden bod, odražený signál prochází dírkovou clonu, umístěnou v konfokální rovině – odstraní se signál z mimoohniskových poloh → snímán fotodetektorem → obraz na monitoru
rozmítání laserového svazku zrcadly – řádkování → optický řez v dané rovině xy
přesně definovaný posuv v ose z + další řezy → složením vzniká 3D rekonstrukce
3
2. LEXT OLS 3100
rezonanční snímač s galvanickým zrcadlem rychlé a přesné vykreslení obrazu v široké ploše
změna snímacího úhlu galvanického zrcadla → optický zoom (až 6x)
„autofocus“ „one push gain“ – optimalizace jasu
možnost využití laserového svazku společně s tradičními technikami pozorování ve světlém/tmavém poli, v polarizovaném světle a D.I.C. interferenční kontrast (zvýraznění jemných textur)
zobrazení vzorků ve třech rozměrech a ve skutečných barvách (kombinuje laserové 3D zobrazení s plnobarevným zobrazením ve světlém poli)
nedestruktivní zobrazování a submikronových povrchových struktur
měření 4
LEXT OLS 3100
zvětšení 120x – 14 400x (obj. 5x, 10x, 20x, 50x, 100x + 1x - 6x optický zoom)
garantované rozlišení 120 nm laterálně, 40 nm vertikálně
maximální velikost vzorku 100 mm x 150 mm maximální zdvih pro 3D měření 10 mm – možných 1000 řezů minimální krok pro měření v ose z 10 nm (obj. 100x)
velikost obrazu 2560 μm x 1920 μm (obj. 5x) až 128 μm x 96 μm (obj. 100x)
možné pozorování v reálných barvách bezkontaktní nedestruktivní měření vodivých i nevodivých materiálů nevyžaduje speciální přípravu vzorku
5
4. Možné využití
2D měření a obrazová analýza - měření rozměrů - měření obsahů ploch - struktura materiálů - analýza částic a fází
3D rekonstrukce povrchu - zobrazení profilů - měření výšek, objemů a povrchů vybraných elementů - měření drsnosti - měření tloušťky vrstvy
Materiálový výzkum, metalografie - analýza výbrusů, hodnocení lomových ploch Morfologie povrchů, studium jemných struktur, povrchových defektů, vyhodnocení indentačních zkoušek Studium povlaků, nátěrů, oxidických vrstev - tloušťka, poréznost Studium tenkých vrstev - nečistoty, defekty, deformace, tloušťka Polovodiče - hodnocení kvality elektrických kontaktů Keramika - rozdělení velikostí a tvarů částic Textilní průmysl – měření barevnosti, průměru vlákna, studium nanesených vrstev Automobilový a letecký průmysl - kontrola výroby komponentů s velmi malou tolerancí přesnosti výroby (měření skutečných vzdáleností, objemů, ploch a průmětů) Studium chemických a biologických preparátů
6
5. Pořízení obrazu
Volba zvě zvětšení ení
Zaostř Zaostření ení
Nastavení Nastavení jasu
Zadá eníí v ose z Zadání intervalu pro měř měřen
Zadá Zadání velikosti kroku v ose z – poč počet řezů ezů
7
6. Zobrazení
2D – intenzitní intenzitní nebo výš výškový obraz, skuteč skutečné barvy 3D – povrch, textura, skuteč skutečné barvy, drá drátěný model, vrstevnice č-b obraz, pseudobarvy nebo skuteč skutečné barvy
8
7. Filtrace
Spike Removal Smoothing Profile Shape Correction Surface/ Surface/Tilt Correction Height Noise Removal Edge Enhancement Contrast Enhancement FFT Digital Zoom
Noise Removal for Convexivity Noise Removal for Jagged Surface Noise Removal for Flat Surface Noise Removal for Semisphere
9
8. Analýza
Distance/Area Measurement - vzdá vzdálenost dvou bodů bodů, dX, dX, dY, dY, dZ - velikost plochy
Line Width Measurement - měřen ěřeníí úseků seků (prů (průnik př přímky a profilu)
10
Analýza
Geometric Analysis - XY, XZ a YZ profil - urč určení ení vzdá vzdálenosti, stř středu, polomě poloměru
polohy
Particle Analysis - analýza částic – plocha, povrch, objem, rozlož rozložení ení četnosti, % celé celé plochy… plochy…
11
Analýza
Step measurement - měřen ěřeníí výš výšky
Volume Measurement měřen objemů objektů ěřeníí objemů objektů pod/nad zvolenou rovinou
12
Analýza
Roughness Analysis - urč určení ení parametrů parametrů drsnosti z čáry nebo plochy - Rp, Rp, Rv, Rv, Rz, Rz, Ra, Ra, Rq… Rq…
! Nelze dle normy ISO 4288-1996 – měřená délka pro Ra = (0,1 – 2) μm > 5 x 800 μm pro Ra = (0,1 - 0,3) μm ... obj. 100x... obraz (128 x 96) μm pro Ra = (0,8 - 1,6) μm ... obj. 50x... obraz (320 x 240) μm Objektivy s menším zvětšením – nedostatečné rozlišení - šum
! Použ Použitý filtr, objektiv – různé zné hodnoty parametrů parametrů ! Malá á plocha – v rů Malá měřen ěřená různých polohá polohách různé zné parametry drsnosti té téhož hož vzorku
13
9. Ukázky měření křemí emík - lom
14
Ukázky měření shluky nanotrubek
15
Ukázky měření
laserem př přetavený povrch ní nízkouhlí zkouhlíkové kové oceli
16
Ukázky měření
laserové texturování křemíku
17
Ukázky měření
část povrchu mince 18
Ukázky měření
část EPROM
19
Ukázky měření
muš muškátový oř oříšek íšek
20
Ukázky měření
špirlice bělolistá lolistá
21
Ukázky měření
rosnatka kapská kapská
22
Ukázky měření
Berkovichů Berkovichův hrot
23
Ukázky měření
tyvek
24
Ukázky měření drá drážky ve skle řezané ezané drá drátovou pilou
25
10. Přednosti laserové konfokální mikroskopie
Vysoké axiální rozlišení při vysoké ostrosti obrazu Konstrukce 3D obrazů Bezkontaktní povrchová profilometrie (i málo odrazivých materiálů) Možnost snímání obrazu ve skutečných barvách Pozorování nevodivých materiálů Pozorování porézních materiálů Použití obrazové analýzy Využití klasických metod světelné mikroskopie (světlé, tmavé pole, nomarského diferenciální kontrast, fázový kontrast, polarizační filtry) Pozorování živých exemplářů bez nutnosti jejich usmrcení Nedochází k degradaci vzorku Jednoduchá výměna vzorku Snadná obsluha, opakovatelnost měření Možnost optických řezů a pozorování průhledných vzorků i pod povrchem
Přechod mezi optickou světelnou a elektronovou řádkovací mikroskopií
26
11. Možná rozšíření LEXT OLS 3100
Modul pro měření tloušťky transparentní vrstvy – známe-li index lomu pro 408 nm Modul pro měření hrany – zvýraznění hran – mikroelektronika
Stolek s přesnými řízenými posuvy Modul pro skládání pořízených obrazů
27
Tato prezentace byla připravena za finanční podpory Evropského sociálního fondu v ČR v rámci projektu CZ.1.07/2.2.00/07.0018 „Moderní technologie ve studiu Aplikované fyziky“.
Děkuji Vám za pozornost.
28