11865820001V17.0
LIP
Fotometrické stanovení lipázy Informace pro objednání Analyzátor(y), na kterých lze soupravu použít 11821792 216 Lipase colorimetric assay ([1] 6 x 20 mL, [2] 6 x 13 mL) Roche/Hitachi MODULAR P 11821822 216 Lipase colorimetric assay ([1] 6 x 64 mL, [2] 6 x 42 mL) Roche/Hitachi MODULAR P 11821733 216 Lipase colorimetric assay ([1] 12 x 40 mL, [2] 6 x 50 mL) Roche/Hitachi 902 10759350 190 Calibrator f.a.s. (12 x 3 mL ) Kód 401 10759350 360 Calibrator f.a.s. (12 x 3 mL, pro USA) Kód 401 10171743 122 Precinorm U (20 x 5 mL) Kód 300 12149435 122 Precinorm U plus (10 x 3 mL) Kód 300 12149435 160 Precinorm U plus (10 x 3 mL, pro USA) Kód 300 10171778 122 Precipath U (20 x 5 mL) Kód 301 12149443 122 Precipath U plus (10 x 3 mL) Kód 301 12149443 160 Precipath U plus (10 x 3 mL, pro USA) Kód 301 05117003 190 PreciControl ClinChem Multi 1 (20 x 5 mL) Kód 391 05947626 190 PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 mL) Kód 391 05947626 160 PreciControl ClinChem Multi 1 (4 × 5 mL, pro USA) Kód 391 05117216 190 PreciControl ClinChem Multi 2 (20 x 5 mL) Kód 392 05947774 190 PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 mL) Kód 392 05947774 160 PreciControl ClinChem Multi 2 (4 × 5 mL, pro USA) Kód 392 Některé zobrazené analyzátory a soupravy nemusí být dostupné ve všech zemích. Pro další systémové aplikace kontaktujte místní zastoupení Roche Diagnostics. Česky Systémové informace Pro analyzátory Roche/Hitachi MODULAR P: ACN 731 (ne pro USA), ACN 733 (STAT). Použití Enzymatické in vitro stanovení pro kvantitativní měření lipázy v lidském séru a plazmě na automatizovaných analyzátorech klinické chemie Roche. Souhrn1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11 Lipázy jsou glykoproteiny s molekulovou váhou 47000 daltonů. Jsou definovány jako hydrolázy, které katalyzují štěpení triglyceridů na diglyceridy s následným vznikem monoglyceridů a mastných kyselin. Spolu s α‑amylázou je pankreatická lipáza již po mnoho let nejdůležitějším biochemickým parametrem v diferenciální diagnostice onemocnění pankreatu. Měření aktivity lipázy budilo vždy zájem pro svou vysokou specifičnost a rychlost odezvy. Při akutní pankreatitidě se aktivita lipázy zvyšuje do 4‑8 hodin, vrcholu dosahuje po 24 hodinách a klesá po 8 až 14 dnech. Není však prokázána souvislost mezi úrovní aktivity lipázy naměřené v séru a rozsahem poškození pankreatu. Bylo popsáno mnoho postupů měření lipázy, které měří turbidimetricky či nefelometricky pokles zákalu substrátu nebo měří degradační produkty. Tato metoda je založena na štěpení specifického chromogenního substrátu 6‑metylresorufinu esteru kyseliny 1,2‑O‑dilauryl‑rac‑glycero‑3‑glutarové, emulgované žlučovými kyselinami. Aktivita pankreatického enzymu se měří specificky kombinací žlučových kyselin a kolipázy použitou v tomto stanovení. Ideálně bez přítomnosti kolipázy nelze detekovat v séru žádnou aktivitu lipázy. Kolipáza aktivuje jen pankreatickou lipázu, nikoliv však žádný jiný lipolytický enzym v séru. Velké množství cholátů zabraňuje esterázám přítomným v séru reagovat s chromogenním substrátem tím, že vytvářejí vysoce negativní náboj na povrchu. Princip testu8 Enzymatické fotometrické stanovení. ▪ Vzorek a přidání R1 ▪ Přidání R2 a zahájení reakce:
glutarová kys. + metylresorufin Chromogenní substrát lipázy 1,2‑O‑dilauryl‑rac‑glycero‑3‑glutarové kyseliny‑(6‑metylresorufin) ester je štěpen katalytickou aktivitou lipázy v alkalickém prostředí a vzniká 1,2‑O‑dilauryl‑rac‑glycerol a nestabilní meziprodukt, ester kyseliny glutarové‑(6‑metylresorufin) ester. Ten se spontánně rozkládá v alkalickém prostředí na kyselinu glutarovou a methylresorufin. Intenzita červeného zabarvení je přímo úměrná aktivitě lipázy a lze ji měřit fotometricky. Reagencie – pracovní roztoky R1
BICINa pufr: 50 mmol/L, pH 8.0; kolipáza (prasečí pankreas) ≥ 0.9 mg/L; Na‑deoxycholat: 1.6 mmol/L; chlorid vápenatý: 10 mmol/L; detergent; konzervans
R2
Vinanový pufr: 10 mmol/L, pH 4.16; ester kys. 1,2‑O‑dilauryl‑rac‑glycero‑3‑glutarové‑(6‑metylresorufin): 0.27 mmol/L; taurodeoxycholát: 8.8 mmol/L; detergent; konzervans
a) BICIN = N,N‑bis(2‑hydroxyethyl)‑glycin
Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření, nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. Pro USA: Pouze na předpis. Zacházení s reagenciemi
lipáza
6‑methylresorufin ester kyseliny 1,2‑O‑dilauryl‑rac‑glycero‑3‑glutarové 1,2‑O‑dilauryl‑rac‑glycerol + 6‑methylresorufin ester kyseliny glutarové
2015-04, V 17.0 Česky
spontánní rozklad
6‑methylresorufin ester kyseliny glutarové
R1:
Připravena k přímému použití
R2:
Připravena k přímému použití
Uskladnění a stabilita Součásti neotevřené soupravy: do data exspirace při 2‑8 °C Reagencii R2 chraňte před světlem.
1/5
11865820001V17.0
LIP
Fotometrické stanovení lipázy R1:
4 týdny otevřená v chlazeném prostoru analyzátoru
R2:
4 týdny otevřená a v chlazeném prostoru analyzátoru
Odběr vzorků a příprava Pro odběr a přípravu vzorků používejte vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou přijatelné. Sérum Plazma: Heparinovaná (Li‑, Na‑ nebo NH4+‑) plazma. EDTA‑, oxalátová, fluoridová nebo citrátová plazma způsobuje snížení výsledků (inhibice aktivity lipázy). Uvedené druhy vzorků byly testovány s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazeny všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Stabilita:12
7 dní při 20‑25 °C 7 dní při 4‑8 °C 1 rok při -20 °C
Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) ▪ Viz část "Informace pro objednání" ▪ 0.9% NaCl ▪ Celkové vybavení laboratoře Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Provádění aplikací, které nejsou schváleny Roche, je bez záruky a musí být definováno uživatelem. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizována podle reagencií Roche pomocí kalibrovaných pipet na manuálním fotometru, stanovením absolutních hodnot a specifické absorptivity substrátu, ε. S1:
0.9% NaCl
S2:
C.f.a.s. (Calibrator for automated systems)
Frekvence kalibrace 2bodová kalibrace se doporučuje ▪ po změně šarže reagencií ▪ jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality Kontrola kvality Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Vyšší hodnoty (3‑7krát vyšší) lze získat při použití kontrolního materiálu od jiných výrobců.
Omezení - interference13 Kritérium: Výtěžnost v rámci ±10 % počátečních hodnot při aktivitě lipázy 50 U/L. Ikterus:14 Bez významných interferencí do hodnoty I indexu 60 pro konjugovaný a nekonjugovaný bilirubin (přibližná koncentrace konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu: 60 mg/dL nebo 1026 µmol/L). Hemolýza:14 Bez významných interferencí do hodnoty H indexu 500 (přibližná koncentrace hemoglobinu: 500 mg/dL nebo 311 µmol/L). Lipémie (Intralipid):14 Bez významných interferencí do hodnoty L indexu 1000. Mezi L indexem (odpovídá zákalu) a koncentrací triglyceridů je slabá korelace. Ve velmi vzácných případech gamapatie, především u typu IgM (Waldenströmova makroglobulinémie), může způsobit nespolehlivé výsledky.15 Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Vzhledem k tomu, že stanovení lipázy je citlivé na světlo, mělo by se během měření zabránit přímému světlu nad analyzátorem. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na analyzátorech Roche/Hitachi je použití speciálních mycích cyklů povinné. Pro další pokyny čtěte nejnovější verzi seznamu zamezení přenosu (carry‑over) a návod k použití. Uživatelé v USA naleznou pokyny pro speciální mycí cykly v dokumentu Special Wash Programming, dostupném na stránce usdiagnostics.roche.com, a v návodu k použití. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků prove deno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry‑over). Meze a rozmezí Měřící rozsah Analyzátory Roche/Hitachi 902/MODULAR Měřící rozsah: 3‑300 U/L (0.05‑5.00 µkat/L) Analyzátory Roche/Hitachi MODULAR Vzorky s vyšší aktivitou stanovte pomocí funkce rerun. Vzorky ředíme 1:11 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků naředěných funkcí rerun jsou automaticky vynásobeny faktorem 11. Analyzátor Roche/Hitachi 902 Na přístrojích bez funkce rerun ručně nařeďte vzorky s vyšší aktivitou 0.9% roztokem NaCl nebo destilovanou/deionizovanou vodou (např. 1 + 10). Výsledek vynásobte odpovídajícím faktorem (např. 11). Dolní meze měření Mez detekce testu 3 U/L (0.05 µkat/L) Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Počítá se jako hodnota ležící 3 standardní odchylky nad nejnižším standardem (standard 1 + 3 SD, opakovatelnost, n = 21). Očekávané hodnoty16 Dospělí: 13‑60 U/L (0.22‑1.00 µkat/L) Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o použití13 Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla měřena použitím lidských vzorků a kontrol podle interního protokolu s opakovatelností (n = 21) a mezilehlou precizností (3 alikvoty na sérii, 1 série denně, 11 dní). Byly získány následující výsledky:
Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá aktivitu analytu pro každý vzorek. Převodní faktor: U/L x 0.0167 = µkat/L
Opakovatelnost Průměr
2/5
Vzorek
U/L
µkat/L
Lidské sérum I
33.5
0.56
Mezilehlá preciznost VK
Průměr
VK
%
U/L
µkat/L
%
1.2
35.3
0.59
0.7
2015-04, V 17.0 Česky
11865820001V17.0
LIP
Fotometrické stanovení lipázy Opakovatelnost Průměr
Mezilehlá preciznost VK
Průměr
Nastavení přístroje Uživatelé v USA: Doplňující informace o ovládání vyhledejte v aplikačním letáku a dokumentu Special Wash Programming, dostupném na stránce usdiagnostics.roche.com. Uživatelé analyzátorů Roche/Hitachi MODULAR: Zadejte aplikační parametry prostřednictvím letáku s čárovým kódem.
VK
Vzorek
U/L
µkat/L
%
U/L
µkat/L
%
Lidské sérum II
71.3
1.19
0.7
63.3
1.06
0.9
Precinorm U
57.7
0.96
0.7
71.7
1.20
1.3
Analyzátor Roche/Hitachi 902 Normální aplikace (10 min)
Porovnání metod Porovnání stanovení lipázy použitím fotometrického stanovení Roche Lipase a konverzním faktorem 3.2 (y) s turbidimetrickým stanovením lipázy Roche (x) na analyzátoru Roche/Hitachi 747 poskytlo následující korelaci (U/L): Passing/Bablok17
Lineární regrese
y = 0.295x + 7.55
y = 0.304x + 6.56 r = 0.986
Počet naměřených vzorků: 87 Aktivita vzorku (turbidimetrická metoda) byly v rozmezí 5 až 661 U/L (0.08‑11.0 µkat/L). Odkazy 1 Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer Verlag 1995. 2 Keller H, ed. Klinisch-chemische Labordiagnostik für die Praxis, 2nd ed. Stuttgart/New York: Georg Thieme Verlag 1991:354-361. 3 Kazmierczak S, Catrou P, Van Lente F. Diagnostic accuracy of pancreatic enzymes evaluated by use of multivariate data analysis. Clin Chem 1993;39:1960-1965. 4 Steinberg WM, Goldstein SS, Davies ND, et al. Diagnostic assays in acute pancreatitis [Review]. Ann Intern Med 1985;102:576-580. 5 Panteghini M, Pagani F, Bonora R, et al. Diagnostic value of four assays for lipase determination in serum: A comparative reevalution. Clin Biochem 1991;24:497-503. 6 Tietz NW, Shuey DF. Lipase in serum - the elusive enzyme: An overview. Clin Chem 1993;39(5):746-756. 7 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia PA: WB Saunders Company 1995;865. 8 Neumann U, Junius M, Batz HG, et al. New substrates for the optical determination of lipase. EP 207252 1987. 9 Borgström B. The action of bile salts and other detergents on pancreatic lipase and the interaction with colipase. Biochimica et Biophysica Acta 1977;488:381-391. 10 Gargouri Y, Julien R, Bois A, et al. Studies on the detergent inhibition of pancreatic lipase activity. J of Lipid Research 1983;24:1336-1342. 11 Leybold A, Junge W. Importance of colipase for the measurement of serum lipase activity. Adv Clin Enzymol 1986;4:60-67. 12 Guder W, Fonseca-Wollheim W, Heil O, et al. Maximum permissible transport and storage times for analysis of blood (serum, plasma), urine and cerebrospinal fluid. DG Klinische Chemische Mitteilungen 1995;26:207-224. 13 Kaiser H. Zum Problem der Nachweisgrenze. Fresenius Zeitschr Anal Chem 1965;209:1-18. 14 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32:470-475. 15 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243. 16 Junge W, Abicht K, Goldmann J, et al. Evaluation of the Colorimetric Liquid Assay for Pancreatic Lipase on Hitachi Analyzers in 7 Clinical Centers in Europe, Japan and USA. Clin Chem Lab Med 1999;37(Special Suppl):469. 17 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790. 2015-04, V 17.0 Česky
No.
Lipáza
1
Test Name
Lip
2
Assay Code (Mthd)
Rate A
3
Assay Code (2. Test)
0
4
Reaction Time
10
5
Assay Point 1
23
6
Assay Point 2
27
7
Assay Point 3
0
8
Assay Point 4
0
9
Wave Leng. (SUB)
700
10
Wave Leng. (MAIN)
570
11
Sample Volume
4.0
2.0
12
R1 Volume
250
290
13
R1 Pos.
.....
14
R1 Bottle Size
Large
15
R2 Volume
0
16
R2 Pos.
0
17
R2 Bottle Size
Small
18
R3 Volume
150
19
R3 Pos.
....
20
R3 Bottle Size
Large
21
Calib. Type (Type)
Linear
22
Calib. Type (Wght)
0
23
Calib. Conc. 1
0.0
24
Calib. Pos. 1
.....
25
Calib. Conc. 2
.....
26
Calib. Pos. 2
.....
27
Calib. Conc. 3
0
28
Calib. Pos. 3
0
29
Calib. Conc. 4
0
30
Calib. Pos. 4
0
31
Calib. Conc. 5
0
32
Calib. Pos. 5
0
33
Calib. Conc. 6
0
34
Calib. Pos. 6
0
35
S1 ABS
0
36
K Factor
10000
37
K2 Factor
10000
38
K3 Factor
10000
39
K4 Factor
10000
40
K5 Factor
10000
41
A Factor
0
42
B Factor
0
3/5
SMS
200
0
11865820001V17.0
LIP
Fotometrické stanovení lipázy 43
C Factor
0
30
Calib. Pos. 4
0
44
SD Limit
0.1
31
Calib. Conc. 5
0
45
Duplicate Limit
35
32000
32
Calib. Pos. 5
0
46
Sens. Limit
210
0
33
Calib. Conc. 6
0
47
S1 Abs. Limit (L)
-32000
34
Calib. Pos. 6
0
48
S1 Abs. Limit (H)
32000
35
S1 ABS
0
49
Abs. Limit
32000
36
K Factor
10000
50
Abs. Limit (D/I)
Increase
37
K2 Factor
10000
51
Prozone Limit
0
38
K3 Factor
10000
52
Proz. Limit (Upp/Low)
Lower
39
K4 Factor
10000
53
Prozone (Endpoint)
35
40
K5 Factor
10000
54
Expect. Value (L)
....
41
A Factor
0
55
Expect. Value (H)
....
42
B Factor
0
56
Instr. Fact. (a)
1
43
C Factor
0
57
Instr. Fact. (b)
0
44
SD Limit
0.1
58
Key setting
.....
45
Duplicate Limit
35
32000
..... Údaje zadávané obsluhou
46
Sens. Limit
210
0
SMS = Selective Mode Solution na R3
47
S1 Abs. Limit (L)
-32000
Analyzátor Roche/Hitachi 902 STAT aplikace
48
S1 Abs. Limit (H)
32000
No.
Lipáza
49
Abs. Limit
32000
1
Test Name
Lip
50
Abs. Limit (D/I)
Increase
Prozone Limit
0
SMS
2
Assay Code (Mthd)
Rate A
51
3
Assay Code (2. Test)
0
52
Proz. Limit (Upp/Low)
Lower
Prozone (Endpoint)
35
4
Reaction Time
5
53
5
Assay Point 1
11
54
Expect. Value (L)
....
Expect. Value (H)
....
6
Assay Point 2
15
55
7
Assay Point 3
0
56
Instr. Fact. (a)
1
Instr. Fact. (b)
0
Key setting
.....
8
Assay Point 4
0
57
9
Wave Leng. (SUB)
700
58
..... Údaje zadávané obsluhou
10
Wave Leng. (MAIN)
570
11
Sample Volume
4.0
2.0
12
R1 Volume
250
290
13
R1 Pos.
.....
14
R1 Bottle Size
Large
15
R2 Volume
150
16
R2 Pos.
....
17
R2 Bottle Size
Large
18
R3 Volume
0
19
R3 Pos.
0
Obsah soupravy
20
R3 Bottle Size
Small
Reagencie
21
Calib. Type (Type)
Linear
Kalibrátor
22
Calib. Type (Wght)
0
Objem po rekonstituci nebo promíchání
23
Calib. Conc. 1
0.0
24
Calib. Pos. 1
.....
25
Calib. Conc. 2
.....
26
Calib. Pos. 2
.....
27
Calib. Conc. 3
0
28
Calib. Pos. 3
0
29
Calib. Conc. 4
0
200
SMS = Selective Mode Solution na R2 Více informací je uvedeno v příslušném návodu k použití určeném pro analyzátor, v odpovídajících aplikačních letácích a metodických listech všech potřebných komponent. Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO 15223‑1.
0
GTIN
Globální číslo obchodní položky
Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. © 2015, Roche Diagnostics
4/5
2015-04, V 17.0 Česky
11865820001V17.0
LIP
Fotometrické stanovení lipázy
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com Distribuce v USA: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN Zákaznická podpora v 1-800-428-2336
2015-04, V 17.0 Česky
5/5
