Lampiran 1. Hasil Persetujuan Etik Penelitian

Lampiran 1. Hasil Persetujuan Etik Penelitian

49 Universitas sumatera utara

Lampiran 2. Hasil Identifikasi Tumbuhan


Lampiran 3. Karakteristik Tanaman Kelor (Moringa oleifera Lam. )

Tanaman kelor

Daun kelor


Lampiran 3. (Lanjutan)

Simplisia daun kelor

Simplisia serbuk daun kelor


Lampiran 4. Hasil Pemeriksaan Mikroskopik Daun Kelor Mikroskopik penampang melintang daun kelor Perbesaran 10 x 40

1 2 3 4 5

6 7 8 9 Keterangan : 1. Kutikula 2. Epidermis atas 3. Jaringan palisade 4. Jaringan bunga karang 5. Berkas pembuluh 6. Epidermis bawah 7. Stomata 8. Kristal oksalat bentuk druse 9. Rambut penutup


Lampiran 4. (Lanjutan) Mikroskopik serbuk simplisia daun kelor Perbesaran 10 x 40

1 2

3 4

5

Keterangan : 1. Stomata tipe anomositik pada epidermis bawah 2. Rambut penutup 3. Sel minyak 4. Berkas pembuluh 5. Kristal oksalat bentuk druse


Lampiran 5. Perhitungan Hasil Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia 1. Perhitungan Penetapan Kadar Air

x 100%

Kadar air =

No

Berat sampel (g)

Volume awal (ml)

Volume akhir (ml)

1

5,011

2,75

3,15

2

5,008

3,15

3,45

3

5,010

3,45

3,75

a. Berat sampel = 5,011 g Volume air

= 0,4 ml

Kadar air

=

= 7,98%

b. Berat sampel = 5,008 g Volume air

= 0,3 ml

Kadar air

=

= 5,99%

c. Berat sampel = 5,030 g Volume air

= 0,3 ml

Kadar air

=

Kadar air rata-rata

= 5,99%

=


Lampiran 5. (Lanjutan) 2. Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air Kadar sari =

x

x 100%

No

Berat sampel (g)

Berat cawan kosong (g)

Berat cawan sari (g)

1

5,004

47,880

48,140

2

5,006

45,132

45,448

3

5,006

46,200

46,513

a. Berat sampel = 5,004 g Berat sari

= 0,26 g

Kadar sari

=

100% = 25,97%

b. Berat sampel = 5,006 g Berat sari

= 0,316 g

Kadar sari

=

100% = 31,56

c. Berat sampel = 5,006 g Berat sari

= 0,313g

Kadar sari

=

Kadar sari rata-rata

100% = 31,26%

=

= 29,59%


Lampiran 5. (Lanjutan) 3. Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol Kadar sari =

x

x 100%

No

Berat sampel (g)

Berat cawan kosong (g)

Berat cawan sari (g)

1

5,014

44,250

44,376

2

5,003

43,440

43,568

3

5,006

44,224

44,350

a. Berat sampel = 5,014 g Berat sari

= 0,126 g

Kadar sari

=

100% = 12,56%

b. Berat sampel = 5,003 g Berat sari

= 0,128 g

Kadar sari

=

100% = 12,79%

c. Berat sampel = 5,006 g Berat sari

= 0,126 g

Kadar sari

=

Kadar sari rata-rata

100% = 12,58%

=

= 12,64%


Lampiran 5. (Lanjutan) 4. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total

Kadar abu total =

x 100%

a. Berat sampel = 2,015 g Berat abu

= 0,203 g

Kadar abu

=

x 100% = 10,07%

b. Berat sampel = 2,018 g Berat abu

= 0,191 g

Kadar abu

=

c. Berat sampel = 2,020 g Berat abu

= 0,193 g

Kadar abu

=

x 100% = 9,55%

= 9,69%

Kadar abu total rata-rata =


Lampiran 5. (Lanjutan) 5. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam Kadar abu tidak larut asam =

x 100%


= 0,022 g

Kadar abu

=

x


= 0,019 g

Kadar abu

=

x


= 0,018 g

Kadar abu

=



Lampiran 6. Perhitungan Hasil Pemeriksaan Karakterisasi Ekstrak 1. Perhitungan Penetapan Kadar Air Kadar air =

x 100%

No

Berat sampel (g)

Volume awal (ml)

Volume akhir (ml)

1

2,025

2,75

3,2

2

2,016

3,2

3,5

3

2,020

3,5

3,9

a. Berat sampel = 2,025 g Volume air

= 0,45 ml

Kadar air

=

b. Berat sampel = 2, 016 g Volume air

= 0,3 ml

Kadar air

=

c. Berat sampel = 2,020 g Volume air

= 0,4 ml

Kadar air

=

Kadar air rata-rata

=


Lampiran 6. (Lanjutan) 2. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total Kadar abu total =

x 100%


= 0,007 g

Kadar abu

=


= 0,009 g

Kadar abu

=


= 0,011 g

Kadar abu

=



Lampiran 6. (Lanjutan) 3. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam Kadar abu larut asam =

x 100%


= 0,004 g

Kadar abu

=


= 0,004 g

Kadar abu

=


= 0,005 g

Kadar abu

=



Lampiran 7. Bagan Kerja Penelitian Daun kelor Dipisahkan dari pengotornya Dicuci, ditiriskan Ditimbang Daun kelor 4,2 kg Dikeringkan pada suhu ± 40ºC Ditimbang Simplisia 948,1 g Diblender/dihaluskan Serbuk daun kelor Dimaserasi dengan etanol 96% Ekstrak cair Dipekatkan dengan rotary evaporator Ekstrak kental

Uji karakterisasi simplisia/ekstrak - Mikroskopik dan Makroskopik - Penetapan kadar: • air • sari yang larut dalam etanol • sari yang larut dalam air • abu total • abu yang tidak larut dalam asam

Skrining fitokimia - Alkaloid - Flavonoid - Saponin - Tanin - Glikosida - Steroid/Triterpenoida

Ekstrak etanol daun kelor Diuji terhadap mencit Hasil 63 Universitas sumatera utara

Lampiran 8. Bagan Pembuatan Ekstrak

500 g serbuk simplisia Dimasukkan ke dalam sebuah bejana Dituangi dengan pelarut etanol 96% dengan perbandingan 1 : 7,5 Ditutup Dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sesekali di aduk Diserkai, diperas

Maserat I

Ampas Diremaserasi dengan etanol secukupnya Dipindahkan ke dalam bejana tertutup

Maserat II

Ampas

Dibiarkan di tempat sejuk, terlindung dari cahaya selama 2 hari Dienap tuangkan dan disaring Digabung Dipekatkan dengan alat rotary evaporator pada temperature 40oC Ekstrak cair Dikeringkan dengan alat freeze dryer Ekstrak kental 52,48 g


Lampiran 9. Bagan Alur Perlakuan Terhadap Mencit

30 ekor mencit diaklitimatisasi selama 1 minggu Tahap Perlakuan

Normal/ Blanko

tidak diberi perlakuan apaapa

Suspensi CMC Na 0,5% bb

Metotreksat dosis 1,3 mg/kg bb

diberikan suspensi CMC Na 0,5% bb selama 10 hari secara per oral

Suspensi EEDK 100 mg/kg bb + metotreksat dosis 1,3 mg/kg bb

diberikan metotrek sat dosis 1,3 mg/kg bb pada hari ke-6 sampai hari ke10

Suspensi EEDK 200 mg/kg bb + metotreksat dosis 1,3 mg/kg bb

diberikan suspensi EEDK 100 mg/kg bb secara per oral selama 10 hari + hari ke-6 sampai hari ke-10 diberi-kan metotreksat dosis 1,3 mg/kg bb

diberikan suspensi EEDK 200 mg/kg bb secara per oral selama 10 hari + hari ke-6 sampai hari ke10 diberikan meto treksat dosis 1,3 mg/kg bb

diambil darah pada hari ke-11 dilakukan pemeriksaan jumlah trombosit Hasil Keterangan : EEDK (Ekstrak Etanol Daun Kelor).


Lampiran 10. Bagan Kerja Pengambilan Darah dan Pemeriksaan Jumlah Trombosit Mencit dibersihkan ekornya dengan alkohol 70% dilukai ekornya dihisap darahnya dengan hemositometer sampai batas 0,5 dihisap larutan pengencer (Larutan Rees Ecker) sampai angka 101 dikocok selama 3 menit

Kamar hitung

dibersihkan kamar hitung dan kaca penutup dipasang gelas penutup di atas kamar hitung dibuang tetesan pertama campuran darah dan Rees Ecker sebanyak 2 - 4 tetes diteteskan pada kamar hitung dan dibiarkan selama 2 menit

diamati dan dihitung jumlah trombosit pada perbesaran 40 kali

Mikroskop

Hasil


Lampiran 11. Alat, Bahan, dan Objek yang Digunakan

Oral Sonde + Spuit

Mikroskop



Pipet Thoma Eritrosit

Kamar Hitung Improved Neubauer



Mencit


Lampiran 12. Contoh Perhitungan Dosis Tabel. Konversi perhitungan dosis antar jenis hewan

Mencit 20 g Tikus 200 g Marmut 400 g Kelinci 1,5 g Kera 4g Anjing 12 kg Manusia 70 kg

a.

Mencit 20 g 1,0

Tikus 200 g 7,0

Marmut 400 g 12,25

Kelinci 1,5 kg 27,8

Kera 4 kg 64,1

Anjing 12 kg 124,3

Manusia 70 kg 387,9

0,14

1,0

1,74

3,0

9,2

17,8

56,0

0,008

0,57

1,0

2,25

5,2

10,2

31,5

0,04

0,25

0,44

1,0

2,4

4,5

14,2

0,016

0,11

0,19

0,42

1,0

1,9

6,1

0,008

0,06

0,10

0,22

0,52

1,0

3,1

0,0026

0,018

0,031

0,07

0,16

0,32

1,0

Contoh perhitungan dosis suspensi metotreksat 0,025% yang akan diberikan pada mencit secara per oral 1. Dosis manusia (berat 70 kg) = 10 mg Dosis mencit (berat 20 g)

= 0,0026 x 10 mg

= 0,026 mg

= 1000/20 x 0,026 mg = 1,3 mg/kg bb 2. Suspensi metotreksat 0,025% dibuat dengan cara melarutkan 1 tablet metotreksat (2,5 mg) ke dalam 10 ml suspensi CMC Na. 3. Berapa volume suspensi Metotreksat yang akan diberikan pada mencit ? (misal berat mencit 25 g) Jumlah Metotreksat dosis 1,3 mg/kg bb

=

x 1,3 mg = 0,0325 mg

Volume larutan yang diberi

=

= 0,13 ml


Lampiran 12. (Lanjutan) b. Contoh perhitungan dosis suspensi ekstrak etanol daun kelor 1% yang akan diberikan pada mencit secara per oral 1. Dosis suspensi ekstrak etanol daun kelor (EEDK) yang diberikan adalah 100 mg/kg bb dan 200 mg/kg bb 2. Cara pembuatan suspensi ekstrak etanol daun kelor Ditimbang 1 gram ekstrak etanol daun kelor, digerus dalam lumpang. Kemudian ditambahkan sedikit larutan CMC 0,5% digerus sampai homogen. Dituang ke dalam labu tentukur 100 ml, kemudian dicukupkan volumenya dengan larutan CMC 0,5% sampai garis tanda. 3. Berapa volume suspensi ekstrak etanol daun kelor 1% yang akan diberikan pada mencit? (misal berat mencit 25 g) Jumlah EEDK dosis 100 mg/kg bb

=

x 100 mg = 2,5 mg


=

= 0,25 ml

Jumlah EEDK dosis 200 mg/kg bb

=


=

x 200 mg = 5 mg = 0,5 ml


Lampiran 13. Contoh Gambar Trombosit Mencit Perbesaran 10 x 40

1

Keterangan: 1 : trombosit


Lampiran 14. Contoh Perhitungan Jumlah Trombosit Jumlah trombosit terhitung = 176 Pengenceran = 200 x Tinggi kamar hitung = 1/10 mm Jumlah kamar yang dihitung = 25/25 Rumus perhitungan =

=

= 352.000/mm3


Lampiran 15. Hasil Analisis ANAVA Jumlah Trombosit pada Mencit Descriptives Jumlah Trombosit N

Mean

Std.

Std. Error 95% Confidence Interval

Deviation

Blanko CMC Na 0.5% bb Metotreksat dosis 1.3

Minimum

Maximum

for Mean

6 216333 8801.515 3593.203

Lower

Upper

Bound

Bound

207096.71

225569.96

204000

226000

318649.71

379350.29

302000

382000

127366.68

153299.99

128000

162000

384031.21

493968.79

368000

510000

633148.10

791518.57

566000

780000

294186.95

448613.05

128000

780000

.33 6 349000 28920.58 11806.77 .00 6 140333 12355.83 5044.249 .33

mg/kg bb EEDK dosis 100 mg/kg bb

6 439000 52379.38 21383.79 .00

+ Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb EEDK dosis 200 mg/kg bb

6 712333 75455.06 30804.40 .33

+ Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb Total

30 371400 206780.3 37752.75 .00

43 ANAVA

Jumlah Trombosit Sum of Squares Between Groups Within Groups Total

Df

Mean Square

F 156.844

1192467200000.000

4

298116800000.000

47518000000.000

25

1900720000.000

1239985200000.000

29

Sig. .000


Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: Jumlah Trombosit Tukey HSD (I)

Kelompok

(J) Kelompok Uji

Mean

Std. Error

Sig.

Difference Uji

(I-J) CMC Na 0.5% bb Metotreksat dosis

95% Confidence Interval Lower

Upper

Bound

Bound

*

25170.883

.000

-206590.31

-58743.02

76000.000*

25170.883

.042

2076.36

149923.64

-222666.667*

25170.883

.000

-296590.31 -148743.02

-496000.000*

25170.883

.000

-569923.64 -422076.36

132666.667*

25170.883

.000

58743.02

206590.31

*

25170.883

.000

134743.02

282590.31

-90000.000*

25170.883

.012

-163923.64

-16076.36

-363333.333*

25170.883

.000

-437256.98 -289409.69

-76000.000*

25170.883

.042

-149923.64

-208666.667

*

25170.883

.000

-282590.31 -134743.02

-572000.000

*

25170.883

.000

-645923.64 -498076.36

-572000.000*

25170.883

.000

-645923.64 -498076.36

-132666.667

1.3 mg/kg bb EEDK dosis 100 mg/kg bb + Blanko

Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb EEDK dosis 200 mg/kg bb + Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb

Blanko Metotreksat dosis

208666.667

1.3 mg/kg bb EEDK dosis 100 mg/kg bb + CMC Na 0.5% bb

Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb EEDK dosis 200 mg/kg bb + Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb

Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb

Blanko CMC Na 0.5% bb EEDK dosis 200

-2076.36

mg/kg bb + Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb EEDK dosis 200 mg/kg bb + Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb


222666.667*

25170.883

.000

148743.02

296590.31

90000.000

*

25170.883

.012

16076.36

163923.64

298666.667

*

25170.883

.000

224743.02

372590.31

-273333.333*

25170.883

.000

Blanko

496000.000*

25170.883

.000

422076.36

569923.64

CMC Na 0.5% bb

363333.333*

25170.883

.000

289409.69

437256.98

EEDK dosis 200

Metotreksat dosis

*

25170.883

.000

498076.36

645923.64

mg/kg bb +

1.3 mg/kg bb

Metotreksat dosis

EEDK dosis 100

273333.333*

25170.883

.000

199409.69

347256.98

1.3 mg/kg bb

mg/kg bb +

EEDK dosis 100 mg/kg bb +

Blanko CMC Na 0.5% bb

Metotreksat dosis

Metotreksat dosis

1.3 mg/kg bb

1.3 mg/kg bb EEDK dosis 200

-347256.98 -199409.69

mg/kg bb + Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb

572000.000

Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb *. The mean difference is significant at the 0.05 level. Homogeneous Subsets Jumlah Trombosit Tukey HSDa Kelompok Uji

N

Subset for alpha = 0.05 1

Metotreksat dosis

6

2

3

4

5

140333.33

1.3 mg/kg bb Blanko

6

CMC Na 0.5% bb

6

EEDK dosis 100

6

216333.33 349000.00 439000.00

mg/kg bb + Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb EEDK dosis 200

6

712333.33

mg/kg bb + Metotreksat dosis 1.3 mg/kg bb Sig.

1.000

1.000

1.000

1.000

1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.


Lampiran 1. Hasil Persetujuan Etik Penelitian

Recommend Documents